SZABÁLYOZOTT SEJTELHALÁS: APOPTÓZIS ÉS NEKROPTÓZIS U937 SEJTEKBEN. Dunai Zsuzsanna Ágnes
|
|
- Barnabás Faragó
- 8 évvel ezelőtt
- Látták:
Átírás
1 SZABÁLYOZOTT SEJTELHALÁS: APOPTÓZIS ÉS NEKROPTÓZIS U937 SEJTEKBEN Doktori tézisek Dunai Zsuzsanna Ágnes Patológiai Tudományok Doktori Iskola Semmelweis Egyetem Témavezető: Dr. Mihalik Rudolf, tudományos főmunkatárs, Ph.D. Hivatalos bírálók: Dr. Vántus Tibor, tudományos főmunkatárs, Ph.D. Dr. Koncz Gábor, tudományos munkatárs, Ph.D. Szigorlati bizottság elnöke: Dr. Bánhegyi Gábor, egyetemi tanár, M.D., D.Sc. Szigorlati bizottság tagjai: Dr. Kiss András, egyetemi docens M.D., Ph.D. Dr. Réz Gábor, egyetemi docens Ph.D. Budapest, 2012
2 1. Bevezetés Kerr, Wyllie and Currie nevéhez fűződik az apoptózis elnevezése, mely javaslatuk szerint egy aktív, programozott folyamat, amit egyaránt aktiválhatnak fiziológiás és patológiás stimulusok is. Az apoptózis egy szabályozott sejteliminációs folyamat (sejtelhalás és eltakarítás), mely kiegészítve a sejtosztódással fenntartja a szöveti homeosztázist. Később Horvitz és munkatársai határozták meg az apoptózisban résztvevő géneket, amelyek felelősek a programozott sejteliminációért a modell állat C. elegans egyedfejlődése során. Az apoptózis kifejezést azóta széles körben alkalmazzák és gyakran a programozott sejtelhalás szinonímájaként használják. Ezzel szemben a nekrózist egy olyan mérgezési folyamatnak tekintették, ahol leáll az ATP termelés és a sejt aktívan fenntartott struktúrája szétesik. Kevesen tulajdonítottak fiziológiás szerepet ennek a folyamatnak. Az elmúlt évtizedek során publikált számos megfigyelés azonban arra utal, hogy a nekrotikus sejthalál is lehet genetikailag meghatározott és az apoptózishoz hasonlóan, programozott sejtpusztulási formának nevezhető. Ellentétben a meglehetősen jól karakterizált apoptotikus jelúttal, a nekrózis szignálkaszkádjának tagjairól egyelőre keveset tudunk. Apoptózis, másodlagos nekrózis és nekroptózis Hagyományosan az apoptózist kaszpáz-függő, programozott, nem immunogén folyamatnak tekintjük, melyre a sejt zsugorodása, kromatin kondenzáció és DNS fragmentálódás jellemző. Apoptózis során a pusztuló sejt elveszti a kapcsolatát a szomszédos sejtekkel és végül plazmamembrán határolt apoptotikus testekre esik szét. Fiziológiás körülmények között az apoptotikus testeket makrofágok és más immunsejtek kebelezik be, eltávolítják a szövet közötti térből anélkül, hogy immunválasz aktiválódna. Jellemző, de nem szükségszerű, hogy az apoptózis során kaszpázok aktiválódnak, melynek köszönhetően számos szubsztrát fehérje hasítódik, foszfatidilszerin jelenik meg a sejtmembrán külső felszínén, a sejt zsugorodik és korai oligonukleoszómális DNS fragmentálódás következik be. Abban az esetben, ha az immunsejtek nem fagocitálják az apoptotikus testeket, azok sejtmembránja később felszakad és a sejttartalom a környező sejtek közötti térbe űrül. Ezt a jelenséget Wyllie és munkatársai másodlagos nekrózisnak nevezték el, megkülönböztetve az elsődlegesen nekrózistól, mely előtt apoptózis nem játszódik le. Eredetileg a nekrózis szó patológiás kifejezés volt, amely leírja a pusztult sejtek morfológiáját számos humán betegségben, pl. neurodegeneratív kórképekben, hasnyálmirigy zsírnekrózisban, trauma, szívinfarktus és stroke, bakteriális fertőzések és tumoros megbetegedés esetén. 2
3 Megjelenését tekintve a nekrózis során a sejt megduzzad majd a sejtmembránok felszakadnak, a sejt elveszti integritását. Számos tanulmány igazolta, hogy a nekrotikus sejtelhalás is lehet szabályozott folyamat, így az apoptózishoz hasonlóan nevezhetjük programozott sejthalálnak. Nekroptózis A közelmúltban egy új, nekroptózis elnevezésű, nekrotikus morfológiával jellemezhető, kaszpázfüggetlen sejtelhalási formát írtak le. Kimutatták, hogy tumor necrosis factor-alpha (TNFα) vagy Fas ligand (FASL) aktiválta külső apoptotikus jelút során, kaszpázgátolt körülmények között az apoptózis helyett nekrózis-szerű folyamat zajlik le. A folyamat felfüggeszthető a necrostatin (Nec) nevű, kis molekulatömegű inhibitorral, mely gátolja a receptor interacting protein kinase-1 (RIPK1) aktivitását. A necrostatin mellett a folyamat gátlószere a necrosulfonamide (NSA), mely a RIPK3 szubsztrátjának, az úgynevezett mixed lineage kinase domain-like fehérjnek (MLKL) inhibitora. Egyes vizsgálatok szerint a RIPK-mediált nekrózis során a poly(adp-ribose) polimerase (PARP) enzim is aktívan hozzájárul a folyamathoz. További publikációk szerint pedig a nekroptózis mellett autofágia is aktiválódik. A nekroptózist RIPK1 és RIPK3 függő, szabályozott nekrózisnak tekintjük, mely kaszpázgátolt körülmények között valósul meg. Korábbi eredményeink A staurosporin (STS) széles spektrumú proteinkináz-gátlószer, általánosan elfogadott belső apoptotikus jelútvonal aktiváló, mely a mitokondrium membrán áteresztőképességének növelésével indukál apoptózist, amely másodlagos nekrózisban folytatódik. Korábban vizsgáltuk a STS-indukálta belső apoptotikus jelútvonalban résztvevő molekulákat, valamint az apoptózis és nekrózis közötti átkapcsolási pontokat U937 sejtvonalon. Azt találtuk, hogy a STS nekrózist indukál kaszpázgátolt körülmények között. Kíváncsiak voltunk, hogy a STS által indukált folyamat átfed-e a nekroptózissal, annak ellenére, hogy a nekroptózis halálreceptorokon keresztül aktiválódó folyamatként ismert. 2. Célkitűzés Célul tűztük ki a STS-indukálta nekrotikus jelútvonal karakterizálását a humán U937 sejtvonalon. Kíváncsiak voltunk, hogy a folyamatban a RIPK1, MLKL, PARP-1 fehérjék részt vesznek-e, hosszabb távon is (24 óra) felfüggeszthető-e a folyamat CA-074-OMe lizoszómális gátlószerrel, és hogy a STS által kiváltott nekrózis különbözik-e a nekroptózistól. Ehhez létrehoztunk egy halálreceptor-mediálta nekroptózis modellt a TRAIL (tumor necrosis factor-related apoptosisinducing ligand) citokin alkalmazásával. Majd farmakológiai gátlószereket alkalmazva 3
4 összehasonlítottuk a két indukálószer (STS és TRAIL) kiváltotta sejtelhalási mechanizmusokat (kaszpázgátló: z-val-dl-asp-fluoromethylketone (zvd), PARPgátló: PJ-34, HSP90gátló: geldanamycin (GA), PI3K(III-as típus)gátló: 3-methyladenine (MA), cisztein katepszininhibitor: CA-074-OMe (CA), RIP1Kgátló: necrostatin-1 (Nec) és MLKLinhibitor: necrosulfonamide (NSA)). 3. Módszerek Sejttenyésztés U937 monocita eredetű sejteket RPMI 1640 médiumban tenyésztettünk, melyet 10% hőinaktivált szérummal, 2 mm L-glutaminnal valamint 100 μg/ml penicillin és 100 egység/ml sztreptomicinnel egészítettünk ki, és 37 o C, 5% CO 2 körülmények között tartottunk fenn. A sejteket 48-as szuszpenziós tálcára szélesztettük 3x10 5 sejt/ml vagy 5x10 5 sejt/ml koncentrációban 60 perccel a kezelés előtt. Majd zvd (10 µm) jelenlétében vagy hiányában kezeltük a sejteket a gátlószerekkel 1 órával (Nec, CA, NSA és PJ) vagy 4 órával (GA) megelőzve a sejtelhalást indukáló STS (1 µm) vagy TRAIL (50 ng/ml) alkalmazását Sejtelhalással összefüggő paraméterek detektálása áramlási citometriai módszerekkel Az adatgyűjtéshez FACScan vagy FACScalibur típusú áramlási citométereket használtunk, az adatok kiértékelését pedig WINLIST szoftverrel végeztük Plazmamembrán sérülés detektálása PI festéssel A kezelt sejteket közvetlenül a tálcán festettük propídium-jodiddal (PI) 10 μg/ml koncentrációban 5 mm glükóz tartalmú PBS-sel. A sejtek fluoreszcencia intenzitását FL2H hisztogrammon logaritmikus skálán detektáltuk A plazmamembránt alkotó foszfatidilszerin eloszlás megváltozásának mérése Annexin V-FITC és PI kettős jelölt sejteken A kezelt sejteket PI-dal festettük 10 µg/ml koncentrációban 10 percig 37 o C-os körülmények között. Centrifugálást követően a sejteket Annexin tartalmú pufferben festettük. Majd, közvetlenül a mérést megelőzően 1 µg/ml PI-ot tartalmazó 400 µl pufferrel egészítettük ki a sejteket, melyeket azonnal mértünk A mitokondrium transzmembrán potenciál változásának mérése DiOC 6 (3) festéssel A kezelt sejteket 10 nm koncentrációjú DiOC 6 (3)-mal és 10 µg/ml koncentrációjú PI-dal festettük 5 mm glukóz tartalmú PBS-ben 15 percig 37 o C-on, majd azonnal mértük. 4
5 A sejtben lévő savas sejtalkotók térfogatának mérése AO festéssel A kezelt sejteket 5 mm glukóz tartalmú, PBS-ben higított 5 µg/ml koncentrációjú akridin naranccsal (AO-val) festettünk 15 percig 37 o C-on, majd azonnal mértük Az oligonukleoszómális DNS fragmentáció mérése sub-g1 populáció detektálásával A kezelt sejteket 70%-os etanolban fixáltuk, majd foszfát tartalmú extrakciós pufferben vettük fel, mely a kisméretű DNS fragmentumok kioldódását tette lehetővé. A sejtekben maradt nagyméretű DNS molekulák mennyiséget PI festéssel detektáltuk Fényszórás változás és DNS fragmentáció mérése A minta előkészítés fixálási és festési lépései megegyeznek a alfejezetben leírtakkal. A törmeléktől elválasztott sejtméretű populációt az SSC-FL2H diagrammon analizáltuk Agaróz gélelektroforézis A minták DNS-ét fenol-kloroformos módszerrel nyertük ki, majd TE pufferben vettük fel. Az elektroforézist 1,5%-os, etídium-bromid tartalmú agaróz gélben végeztük TBA pufferrel, majd UV alatt detektáltuk Fénymikroszkópos vizsgálatok A citospin preparátumokat metanolban fixáltuk, hematoxilin-eozinnal festettük, majd etanollal, acetonnal és xilollal dehidráltuk. A morfológiai változásokat 400x-os nagyítás mellett fénymikroszkóppal vizsgáltuk Fluoreszcens mikroszkópos vizsgálatok A kezelt sejteket Hoechst-tel és PI-dal festettünk hogy elkülöníthessük az apoptotikus és nekrotikus sejteket. A festett mintákat 400x-os nagyítás mellett vizsgáltuk PARP-1 és RIPK1 hasításának detektálása Western blot technikával Az inkubációs idő lejárta után a sejteket mostuk és Laemmli pufferben vettük fel. Forralás után az elektroforézist 10% poliakrilamid gélen végeztük, majd a fehérjéket nitrocellulózra blottoltuk. A membrán blokkolását követően PARP-1, RIPK1 vagy GAPDH ellenanyagokat, majd HPR jelölt másodlagos ellenanyagokat alkalmaztunk. A fehérjék jelenlétét ECL technikával detektáltuk Kaszpáz aktivitás mérés A sejteket PBS-sel mostuk, majd kaszpáz pufferben vettük fel, 96 lukú tálcára pipettáztuk és Triton X-100-zal lizáltuk. A mintákhoz kaszpáz szubsztrátot (z-devd) adtunk és a szubsztrát hasítása során felszabaduló amc fluoreszcenciáját 445 nm-en detektáltuk fluoreszcens tálca leolvasóval, 380 nm-es gerjesztés mellett. 5
6 3. 8. Statisztika Az eredmények statisztikai analízisét kétszélű, két mintás nem egyenlő varianciájú Student t- próbával végeztük. 4. Eredmények A TRAIL nekroptózist indukál U937 sejtvonalon kaszpázgátló jelenlétében Az U937 sejtek érzékenynek bizonyultak 20 órás TRAIL citokin kezelésre. A TRAIL alkalmazása nukleoszómális DNS fragmentációt okozott, valamint a kaszpáz-3 aktiváció következtében PARP-1 hasítást detektáltunk. Végül a sejtek PI-dal festődtek, mely a másodlagos nekrózis jele. Ha a sejteket kaszpázgátlóval előkezeltük, akkor a kaszpáz aktiváció és a PARP-1 hasítás elmaradt. Oligonukleoszómális DNS fragmentáció helyett, nagy molekulatömegű DNS fragmentumok keletkeztek. Az apoptotikus morfológia helyett a pusztuló sejtek megduzzadtak és elvesztették hematoxilin-eozin festődésüket, mely jelenségek a nekrózisra jellemzőek. A sejtek sejthártyája felszakadt és a PI festés igazolta, hogy kaszpázgátolt TRAIL kezelt sejtek nagyobb arányban PI pozitívak, mint a csak TRAIL kezelt sejtek. A RIPK1gátlószer (Nec) jelenlétében és kaszpázgátló hiányában a membránkárosodott populáció megjelenése nem csökkent, míg kaszpázgátló jelenlétében a PI pozitív populáció megjelenése teljes mértékben elmaradt. Tovább vizsgálva a RIPK1 fehérje szerepét a TRAIL indukálta nekroptotikus és másodlagos nekrotikus jelútvonalban HSP90gátlószert, geldanamycint (GA) alkalmaztunk. A GA a HSP90-et gátolva, csökkenti a RIPK1 szintjét a sejtben, így várhatóan gátolja a nekroptózist. Valóban, eredményeink szerint a GA szignifikánsan csökkentette a TRAIL indukálta nekroptózis következtében megjelenő membránkárosodott populáció mértékét. Ezek az eredmények azt mutatják, hogy kaszpázgátló jelenlétében a TRAIL citokin az U937 sejtek esetén nekroptózist és nem pedig apoptózist indukál. Továbbá, a TRAIL okozta nekroptotikus jelútvonal lefutása Nec és GA alkalmazásával felfüggeszthető A STS nekrózist indukál kaszpázgátló jelenlétében Eredményeink szerint a kaszpázgátló zvd jelenlétében a DEVD-áz aktivitás teljes mértékben elmaradt STS kezelt sejtekben. Kaszpázgátolt körülmények között a STS membránkárosodást okozott rövid (8-12 órás) kezelés esetén, míg hosszabb kezelés esetén (20 óra) DNS fragmentációt is tudtunk detektálni. A STS+zVD kezelt sejtekben azonban nem apoptotikus, 6
7 hanem nekrotikus jellegű, nagy molekula tömegű DNS fragmentumok megjelenését detektáltuk, melyet agaróz gélelektroforézissel igazoltunk. Ezzel szemben a STS kezelt mintákban nukleoszómális DNS fragmentációt tapasztaltunk, melynek megjelenése DNase aktivitásra utal. Ezek után a RIPK1 fehérje szerepét vizsgáltuk meg kaszpázgátolt körülmények között. A Nec koncentráció-függően gátolta a STS indukálta nekrózist, melyet a csökkent PI pozitív populáció megjelenésével igazoltunk. Mind a Nec, mind a GA felfüggesztette a nekrotikus populáció megjelenését rövid távú (8, 12 órás) kezelés esetén, amit áramlási citometriás méréssel és Hoechst, PI festett mintákon fluoreszcens mikroszkóppal is megerősítettünk. Hosszabb inkubációs idő mellett (20 óra) a STS+zVD kiváltotta plazmamembrán károsodás gátlása Nec-kel csak részleges volt (~50%). Ezzel szemben a Nec nem befolyásolta a kaszpázfüggő DNS kondenzációt és fragmentációt sem rövidebb, sem hosszabb STS kezelési esetén. Hasonlóképpen a STS indukálta másodlagos nekrózist sem a Nec, sem a GA kezelés nem befolyásolta. Ezek az eredmények azt mutatják, hogy a STS indukálta apoptózist U937 sejtekben másodlagos nekrózis követi. Kaszpázgátolt körülmények között azonban, a STS elsődleges nekrózist indukál, mely részlegesen gátolható a két RIPK1gátlószerrel: Nec-kel és GA-val A STS és TRAIL RIPK1- és MLKL-függő nekroptózist indukál A továbbiakban Western blot technikával is vizsgáltuk a RIPK1 szerepét a STS kiváltotta nekrózisban. A STS indukálta kaszpáz aktiváció következtében a RIPK1 proteolítikusan hasítódott. Míg kaszpázgátló jelenlétében ez a hasítás elmaradt. Ezt követően tovább vizsgáltuk a STS indukálta nekroptotikus jelútvonal molekuláris elemeit, többek között az MLKL-t. A sejteket az MLKL gátlószerével, NSA-val előkezelve azt találtuk, hogy az NSA koncentráció-függően csökkentette a PI pozitív populáció megjelenését kaszpázgátolt körülmények között mind STS, mind TRAIL indukció esetén. Az NSA gátolta mind a TRAIL, mind a STS okozta nekrózist, melyet PI pozitivitás méréssel és Hoechst/PI festéssel igazoltunk. Ezzel szemben az NSA nem befolyásolta sem a TRAIL, sem a STS indukálta DNS fragmentálódást és a másodlagos nekrózis lefutását. Ezek az eredmények igazolják a RIPK1 és az MLKL központi szerepét a STS és TRAIL indukálta nekrózisban kaszpázgátolt körülmények között. Tehát a TRAIL és STS kiváltotta kaszpáz-független nekrózist nekroptózisnak tekinthetjük U937 sejtekben. 7
8 4. 4. MA csökkenti a STS indukálta nekroptózist Az autofágia szerepének vizsgálatához 3-methyladenine-t (MA) alkalmaztuk. Az MA ismert autofágiagátlószer, mely a III-as típusú phosphatidylinositol 3-kinázt (PI3K) gátolva, megakadályozza az autofagoszóma megjelenését. Eredményeink szerint az MA csak részlegesen gátolta a STS+zVD okozta nekroptotikus sejtpopuláció megjelenését, míg a STS kiváltotta apoptózist egyáltalán nem befolyásolta. Érdekes, hogy a RIPK1gátló is hasonló mértékű, részleges gátlást okozott STS+zVD kezelés esetén, mint az MA. A Nec és az MA együttes alkalmazása additívnak bizonyult, de nem szinergikusnak, tehát a két jelútvonal független, a nekroptózis mellett autofágia is aktiválódik U937 sejtekben STS+zVD kezelésre CA gátolja mind a TRAIL, mind a STS indukálta nekroptózist kaszpázgátló jelenlétében Korábbi vizsgálataink szerint a CA, melyet katepszin B gátlószernek tekintenek, kivédte a kaszpáz-független nekrotikus sejtpopuláció megjelenését promielocitás sejtvonalon STS+zVAD kezelés mellett. Így megvizsgáltuk, hogy a CA kezelés fokozza-e a túlélést U937 sejtvonal esetén is nekroptotikus körülmények között. Érdekes módon a CA szinte teljesen felfüggesztette a TRAIL indukálta nekroptotikus membránkárosodás megjelenését. Hasonlóképpen, a CA a STS okozta nekroptózist is gátolta. Tovább vizsgálva a jelenséget, összevetve az eredményeket a Nec és GA hatásával, további sejtelhalással kapcsolatos paramétereket vizsgáltunk. A mitokondrium membrán depolarizációra vonatkozó méréseink szerint folyamatos, idő-függő transzmembrán potenciál csökkenés detektálható DiOC 6 (3) festett STS+zVD kezelt U937 sejtekben. A Nec ezt a folyamatot részlegesen, míg a CA teljes mértékben gátolta. Emellett a CA teljes mértékben gátolta a mind a foszfatidilszerin kihelyeződést, mind a sejtmembrán károsodást is TRAIL vagy STS kezelés estén kaszpázgátolt körülmények között. Továbbá, a lizoszómális savas térfogatvesztés, mely TRAIL és STS kezelés hatására következett be a nekroptózis során, CA előkezelést alkalmazva teljes mértékben kivédhetőnek bizonyult. A vizsgált paramétereken túl a RIPK1 hasítás elmaradása is igazolta, hogy kaszpáz-független sejtpusztulás zajlik. Az apoptotikus paramétereket tekintve, sem a sub-g1 populáció megjelenését és mértékét, sem a létra típusú DNS fragmentációt nem befolyásolta a CA. Ezeken túl a másodlagos nekrotikus jelútvonal lefutása sem volt befolyásolható CA kezeléssel TRAIL vagy STS kezelt sejteknél. Ezek az eredmények igazolják, hogy a CA, hasonlóképpen az NSA-hoz, hatásos gátlószere a STS és TRAIL indukálta kaszpáz-független nekroptózisnak, míg a Nec és a GA csak részlegesen tudja felfüggeszteni a nekroptózist a STS kezelt U937 sejtekben. 8
9 4. 6. A PARP-1gátlószer (PJ-34) nem befolyásolja a TRAIL vagy STS indukálta nekroptózist kaszpázgátló jelenlétében A PARP-1 enzim funkciója bizonyított bizonyos sejtpusztulási formákban. A PARP-1 gátlásával lassítható a NAD és ATP készlet kimerülése, melynek következtében a másodlagos nekrózis megjelenése kitolódik. Mi a kísérleti modellrendszerünkben a PJ-34gátlószer hatását vizsgáltuk a nekroptotikus jelútvonalra. Jelentős különbség a gátlószer jelenlétében nem volt detektálható. Sem a TRAIL, sem a STS kezelt, kaszpázgátolt U937 sejtekben a PJ-34 alkalmazása nem befolyásolta a mitokondrium transzmembrán potenciált, a lizoszómális savas térfogat vesztést, a foszfatidilszerin kihelyeződést és a sejtmembrán károsodást. Sőt, sem a kaszpáz-függő, sem a kaszpáz-független STS vagy TRAIL indukálta DNS fragmentáció sem változott a PJ-34 alkalmazásával. Ugyanakkor a másodlagos nekrózis megjelenését a PJ-34 koncentráció-függően gátolta, melyet a sejtmembrán károsodásának vizsgálatával igazoltunk. Továbbá a lizoszómális savas térfogat csökkenést is gátolta a PJ-34 STS kezelés esetén. Hasonló eredményeket kaptunk TRAIL esetén is, bár ott a savas térfogat vesztés TRAIL hatására csupán kismértékű volt. Ezzel szemben az apoptotikus paraméterek, így a foszfatidilszerin kihelyeződés, a mitokondriális transzmembrán potenciál csökkenése és a DNS fragmentáció megjelenése STS vagy TRAIL kezelés hatására nem változott PJ-34 alkalmazásával. Ezek az eredmények azt mutatják, hogy a PJ-34 késlelteti a másodlagos nekrózis megjelenését, de nem védi ki a kaszpáz-függő apoptózist. Eredményeink szerint a PARP1 enzimatikus aktivitása közvetlenül és közvetetten befolyásolja a másodlagos nekrózis megjelenését, de aktivitása szükségtelen a STS vagy TRAIL indukálta nekroptózisban U937 sejtek esetén. 5. Következtetések 1.) Kimutattuk, hogy a TRAIL citokin, mely az apoptózis külső jelútvonalát aktiválja, kaszpázgátolt körülmények között nekroptózist indukál U937 sejtekben, melynek lefutása RIPK1 és MLKL gátlásával felfüggeszthető. 2.) Igazoltuk, hogy a kinázgátló staurosporin, mely az apoptózis belső jelútjának aktivátora, szintén nekroptózist indukál kaszpázgátolt körülmények között, melynek lefutása RIPK1 és MLKL gátlásával részben vagy teljesen felfüggeszthető. 3.) Bizonyítottuk, hogy a staurosporin indukálta RIPK1-mediálta nekroptózis mellett autofágiaszerű folyamat is aktiválódik, mely gátolható a (III-as típusú) PI3K gátlásával. A RIPK1 és a 9
10 PI3K együttes gátlása additívan de nem szinergikusan csökkentette a sejtpusztulást, tehát az autofágia és a nekroptózis párhuzamosan zajlik U937 sejtekben. 5.) Kimutattuk, hogy a CA-074-OMe teljes mértékben gátolja a staurosporin és TRAIL indukálta nekroptózist U937 sejtekben, míg a staurosporin esetén a RIPK1 inhibitora csak részlegesen gátolja a folyamatot. (Ezek az eredmények rámutatnak arra, hogy a CA-074-OMe target molekulája kulcsfontosságú szerepet tölt be a nekroptózis jelútvonalában.) 6.) Igazoltuk, hogy U937 sejtekben sem az apoptózis, sem a nekroptózis nem befolyásolható PARP-1gátlószerek alkalmazásával. Ellenben bizonyítottuk, hogy a másodlagos nekrózis megjelenését a PJ-34 késlelteti, míg a necrostatin-1, a geldanamycin, a necrosulfonamide és a CA-074-OMe nem. (Ezek az eredmények felhívják a figyelmet a PARPgátlószerek alkalmazásának esetleges lehetőségére pl. tumor lízis szindróma esetén, ha más daganatsejteken is igazolódik az eredményünk.) A folyamatábrán összefoglaltuk a gátlószerek hatásának pozícióját staurosporin és TRAIL indukálta sejtelhalási jelútvonalak esetén U937 sejtvonalon. Reméljük, hogy a bemutatott eredmények hozzájárulnak a nekroptózis molekuláris hátterének mélyebb megértéséhez. Vázlatos ábra a TRAIL és staurosporin indukálta jelútvonalakról és résztvevőikről U937 sejtvonal esetén. 10
11 6. Saját publikációk A disszertációhoz kapcsolódó publikációk 1. Dunai ZA, Imre G, Barna G, Korcsmaros T, Petak I, Bauer PI, Mihalik R Staurosporine induces necroptotic cell death under caspase-compromised conditions in U937 cells. PLoS One 2012;7(7):e Epub 2012 Jul 31. IF: 4, Dunai ZA, Bauer PI, Mihalik R Necroptosis: Biochemical, physiological and pathological aspects. Pathol Oncol Res Dec;17(4): IF: 1, Imre G, Dunai ZA, Petak I, Mihalik R Cystein cathepsin and Hsp90 activities determine the balance between apoptotic and necrotic cell death pathways in caspase-compromised U937 cells. Biochim Biophys Acta Oct;1773(10): IF: A disszertációhoz nem kapcsolódó publikációk 4. Stemmer U, Dunai ZA, Koller D, Purstinger G, Zenzmaier E, Deigner HP, Aflaki E, Kratky D, Hermetter A. Toxicity of oxidized phospholipids in cultured macrophages. Lipids Health Dis Sep 7;11(1):110. IF: 2,17 5. Barna G, Sebestyen A, Dunai ZA, Csernus B, Mihalik R Heparin can liberate high molecular weight DNA from secondary necrotic cells. Cell Biol Int. 2012;36(12): IF: 1, Fekete A, Kenesi E, Hunyadi-Gulyas E, Durgo H, Berko B, Dunai ZA, Bauer PI. The guaninequadruplex structure in the human c-myc gene's promoter is converted into B-DNA form by the human poly(adp-ribose)polymerase-1. PLoS One. 2012;7(8):e IF: 4, Kun E, Mendeleyev J, Kirsten E, Hakam A, Kun AM, Fekete A, Bauer PI, Dunai ZA, Mihalik R. Regulation of malignant phenotype and bioenergetics by a π-electron donor-inducible mitochondrial MgATPase. Int J Mol Med Feb;27(2): IF: 1,573 11
Apoptózis. 1. Bevezetés 2. Külső jelút 3. Belső jelút
Jelutak Apoptózis 1. Bevezetés 2. Külső jelút 3. Belső jelút Apoptózis Sejtmag 1. Kondenzálódó sejtmag apoptózis autofágia nekrózis Lefűződések Összezsugorodás Fragmentálódó sejtmag Apoptotikus test Fagocita
Jelutak. Apoptózis. Apoptózis Bevezetés 2. Külső jelút 3. Belső jelút. apoptózis autofágia nekrózis. Sejtmag. Kondenzálódó sejtmag
Jelutak Apoptózis 1. Bevezetés 2. Külső jelút 3. Belső jelút Apoptózis Sejtmag Kondenzálódó sejtmag 1. autofágia nekrózis Lefűződések Összezsugorodás Fragmentálódó sejtmag Apoptotikus test Fagocita bekebelezi
A herpes simplex vírus és a rubeolavírus autofágiára gyakorolt in vitro hatásának vizsgálata
A herpes simplex vírus és a rubeolavírus autofágiára gyakorolt in vitro hatásának vizsgálata Dr. Pásztor Kata Ph.D. Tézis Szegedi Tudományegyetem, Általános Orvostudományi Kar Orvosi Mikrobiológiai és
OTKA ZÁRÓJELENTÉS
NF-κB aktiváció % Annexin pozitív sejtek, 24h kezelés OTKA 613 ZÁRÓJELENTÉS A nitrogén monoxid (NO) egy rövid féléletidejű, számos szabályozó szabályozó funkciót betöltő molekula, immunmoduláns hatása
A lézer-szkenning citometria lehetőségei. Laser-scanning cytometer (LSC) Pásztázó citométer. Az áramlási citometria fő korlátai
Az áramlási citométer bevezetésének fontosabb állomásai A lézer-szkenning citometria lehetőségei Bacsó Zsolt Coulter, 1949 Coulter számláló szabadalmaztatása Crosland-Taylor, 1953 sejtek hidrodinamikai
Programozott sejthalál formák és kulcsfehérjéinek kapcsolata - fókuszban a ferroptózis és az autofágia. V. MedInProt Konferencia November 19.
Programozott sejthalál formák és kulcsfehérjéinek kapcsolata - fókuszban a ferroptózis és az autofágia Dr. Szarka András Dr. Kapuy Orsolya V. MedInProt Konferencia 2016. November 19. Bevezetés Bevezetés
A sejtfelszíni FasL és szolubilis vezikulakötött FasL által indukált sejthalál gátlása és jellemzése
A sejtfelszíni FasL és szolubilis vezikulakötött FasL által indukált sejthalál gátlása és jellemzése Doktori értekezés tézisei Hancz Anikó Témavezetők: Prof. Dr. Sármay Gabriella Dr. Koncz Gábor Biológia
Új, sejthalált befolyásoló tumor-asszociált fehérjék azonosítása. Dr. Szigeti András. PhD tézis. Programvezető: Dr. Balázs Sümegi, egyetemi tanár
Új, sejthalált befolyásoló tumor-asszociált fehérjék azonosítása Dr. Szigeti András PhD tézis Programvezető: Dr. Balázs Sümegi, egyetemi tanár Pécsi Tudományegyetem, Biokémiai és Orvosi Kémiai Intézet
Biológiai módszerek alkalmazása környezeti hatások okozta terhelések kimutatására
Szalma Katalin Biológiai módszerek alkalmazása környezeti hatások okozta terhelések kimutatására Témavezető: Dr. Turai István, OSSKI Budapest, 2010. október 4. Az ionizáló sugárzás sejt kölcsönhatása Antone
A plazma membrán mikrodomének szabályzó szerepe a sejtek növekedési és stressz érzékelési folyamataiban. Csoboz Bálint
A PhD értekezés összefoglalása A plazma membrán mikrodomének szabályzó szerepe a sejtek növekedési és stressz érzékelési folyamataiban Csoboz Bálint Témavezető: Prof. László Vígh Biológia Doktori Iskola
Fehérjeglikoziláció az endoplazmás retikulumban mint lehetséges daganatellenes támadáspont
Fehérjeglikoziláció az endoplazmás retikulumban mint lehetséges daganatellenes támadáspont Doktori tézisek Dr. Konta Laura Éva Semmelweis Egyetem Molekuláris Orvostudományok Tudományági Doktori Iskola
Áramlási citometria 2011. / 4. Immunológiai és Biotechnológiai Intézet PTE KK
Áramlási citometria 2011. / 4 Immunológiai és Biotechnológiai Intézet PTE KK Az áramlási citometria elve Az áramlási citometria ( Flow cytometria ) sejtek gyors, multiparaméteres vizsgálatára alkalmas
Kutatási beszámoló ( )
Kutatási beszámoló (2008-2012) A thrombocyták aktivációja alapvető jelentőségű a thrombotikus betegségek kialakulása szempontjából. A pályázat során ezen aktivációs folyamatok mechanizmusait vizsgáltuk.
Szőlőmag extraktum hatása makrofág immunsejtek által indukált gyulladásos folyamatokra Radnai Balázs, Antus Csenge, Sümegi Balázs
Szőlőmag extraktum hatása makrofág immunsejtek által indukált gyulladásos folyamatokra Radnai Balázs, Antus Csenge, Sümegi Balázs Pécsi Tudományegytem Általános Orvostudományi Kar Biokémiai és Orvosi Kémiai
Doktori értekezés tézisei
Doktori értekezés tézisei A komplement- és a Toll-szerű receptorok kifejeződése és szerepe emberi B-sejteken fiziológiás és autoimmun körülmények között - az adaptív és a természetes immunválasz kapcsolata
Az áramlási citometria gyakorlati alkalmazása az ondó rutin analízisben. Hajnal Ágnes, Dr Mikus Endre, Dr Venekeiné Losonczi Olga
Az áramlási citometria gyakorlati alkalmazása az ondó rutin analízisben Hajnal Ágnes, Dr Mikus Endre, Dr Venekeiné Losonczi Olga Labmagister Kft aktivitásai HumanCell SynLab Diagnosztika MensMentis LabMagister
A tumorsejtek által kiválasztott galektin-1 T-sejtekre kifejtett apoptotikus hatásának mechanizmusa
Doktori (Ph.D.) értekezés tézisei A tumorsejtek által kiválasztott galektin-1 T-sejtekre kifejtett apoptotikus hatásának mechanizmusa Kovács-Sólyom Ferenc témavezető: Monostori Éva, Ph.D., D.Sc. MTA Szegedi
Immunológia alapjai. 10. előadás. Komplement rendszer
Immunológia alapjai 10. előadás Komplement rendszer A gyulladás molekuláris mediátorai: Miért fontos a komplement rendszer? A veleszületett (nem-specifikus) immunválasz része Azonnali válaszreakció A veleszületett
Az áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése, diagnosztikai alkalmazásai
Az áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése, diagnosztikai alkalmazásai Az áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése Kereskedelmi forgalomban kapható készülékek 1 Fogalmak
Dr. Komáry Zsófia MITOKONDRIUMOK REAKTÍV OXIGÉNSZÁRMAZÉK SZENTÁGOTHAI JÁNOS IDEGTUDOMÁNYI DOKTORI A KÁLCIUM HATÁSA AZ IZOLÁLT SEMMELWEIS EGYETEM
A KÁLCIUM HATÁSA AZ IZOLÁLT MITOKONDRIUMOK REAKTÍV OXIGÉNSZÁRMAZÉK KÉPZÉSÉRE DOKTORI TÉZISEK Dr. Komáry Zsófia SEMMELWEIS EGYETEM SZENTÁGOTHAI JÁNOS IDEGTUDOMÁNYI DOKTORI ISKOLA Dr. Ádám Veronika egyetemi
A TERMÉSZETES SEJTHALÁL LEGGYAKORIBB FORMÁJA AZ APOPTÓZIS Fésüs László
A TERMÉSZETES SEJTHALÁL LEGGYAKORIBB FORMÁJA AZ APOPTÓZIS Fésüs László Összefoglaló Az emberi szervezet sejtjeinek nagy többsége meghatározott idő után természetes módon elhal, helyette új sejtek képződnek.
ZÁRÓJELENTÉS OTKA T037956
ZÁRÓJELENTÉS OTKA T037956 A központi idegrendszer működése számára elengedhetetlen állandó belső környezet fenntartásában a vér-agy gátnak döntő jelentősége van. A vér-agy gát barrier funkciójának ellátásában
Genetikai panel kialakítása a hazai tejhasznú szarvasmarha állományok hasznos élettartamának növelésére
Genetikai panel kialakítása a hazai tejhasznú szarvasmarha állományok hasznos élettartamának növelésére Dr. Czeglédi Levente Dr. Béri Béla Kutatás-fejlesztés támogatása a megújuló energiaforrások és agrár
Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetése az Európai Unió új társadalmi kihívásainak a Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni Egyetemen
Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetése az Európai Unió új társadalmi kihívásainak a Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni Egyetemen Azonosító szám: TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011 Az orvosi
Asztroglia Ca 2+ szignál szerepe az Alzheimer kórban FAZEKAS CSILLA LEA NOVEMBER
Asztroglia Ca 2+ szignál szerepe az Alzheimer kórban FAZEKAS CSILLA LEA 2017. NOVEMBER Az Alzheimer kór Neurodegeneratív betegség Gyógyíthatatlan 65 év felettiek Kezelés: vakcinákkal inhibitor molekulákkal
A Telomerase-specific Doxorubicin-releasing Molecular Beacon for Cancer Theranostics
A Telomerase-specific Doxorubicin-releasing Molecular Beacon for Cancer Theranostics Yi Ma, Zhaohui Wang, Min Zhang, Zhihao Han, Dan Chen, Qiuyun Zhu, Weidong Gao, Zhiyu Qian, and Yueqing Gu Angew. Chem.
Doktori értekezés tézisei
Doktori értekezés tézisei A proteaszóma-ubikvitin rendszer szerepe kemoterápiás szerek és TRAIL által indukált apoptózis szabályozásában promielocitás leukémia és vastagbélrák sejtekben Nagy Katalin Témavezető:
Immunológia I. 4. előadás. Kacskovics Imre
Immunológia I. 4. előadás Kacskovics Imre (imre.kacskovics@ttk.elte.hu) 3.1. ábra A vérsejtek képződésének helyszínei az élet folyamán 3.2. ábra A hemopoetikus őssejt aszimmetrikus osztódása 3.3. ábra
A citoszol szolubilis fehérjéi. A citoplazma matrix (citoszol) Caspase /Kaszpáz/ 1. Enzimek. - Organellumok nélküli citoplazma
A citoplazma matrix (citoszol) A citoszol szolubilis fehérjéi 1. Enzimek - Organellumok nélküli citoplazma -A sejt fejlődéstani szempontból legősibb része (a sejthártyával együtt) Glikolízis teljes enzimrendszere
~ 1 ~ Ezek alapján a következő célokat valósítottuk meg a Ph.D. munkám során:
~ 1 ~ Bevezetés és célkitűzések A sejtekben egy adott időpillanatban expresszált fehérjék összessége a proteom. A kvantitatív proteomika célja a proteom, egy adott kezelés vagy stimulus hatására bekövetkező
Az AT 1A -angiotenzinreceptor G-fehérjétől független jelátvitelének vizsgálata C9 sejtekben. Doktori tézisek. Dr. Szidonya László
Az AT 1A -angiotenzinreceptor G-fehérjétől független jelátvitelének vizsgálata C9 sejtekben Doktori tézisek Dr. Szidonya László Semmelweis Egyetem Molekuláris Orvostudományok Doktori Iskola Témavezető:
Immunológia I. 2. előadás. Kacskovics Imre (imre.kacskovics@ttk.elte.hu)
Immunológia I. 2. előadás Kacskovics Imre (imre.kacskovics@ttk.elte.hu) Az immunválasz kialakulása A veleszületett és az adaptív immunválasz összefonódása A veleszületett immunválasz mechanizmusai A veleszületett
ANTICANCER RESEARCH [Rákkutatás]
ANTICANCER RESEARCH [Rákkutatás] Nemzetközi rákkutatási és rákgyógyászati folyóirat Az MGN-3/Biobran rizskorpából kivont módosított arabinoxilán in vitro növeli a metasztatikus emlőráksejtek érzékenységét
Gyógyszerrezisztenciát okozó fehérjék vizsgálata
Gyógyszerrezisztenciát okozó fehérjék vizsgálata AKI kíváncsi kémikus kutatótábor 2017.06.25-07.01. Témavezetők : Telbisz Ágnes, Horváth Tamás Kutatók : Dobolyi Zsófia, Bereczki Kristóf, Horváth Ákos Gyógyszerrezisztencia
Áramlási citométerek klinikai alkalmazása
Vásárhelyi Barna Semmelweis Egyetem Laboratóriumi Medicina Intézet Áramlási citométerek klinikai alkalmazása Előadás tartalma Áramlási citométer részei, működési elve Vizsgálható paraméterek Technikai
Receptorok és szignalizációs mechanizmusok
Molekuláris sejtbiológia: Receptorok és szignalizációs mechanizmusok Dr. habil Kőhidai László Semmelweis Egyetem Genetikai, Sejt- és Immunbiológiai Intézet Sejtek szignalizációs kapcsolatai Sejtek szignalizációs
Proteázok szerepe a sejtelhalás szabályozásában staurosporin kezelt kaszpáz-gátolt leukémia sejteken
Proteázok szerepe a sejtelhalás szabályozásában staurosporin kezelt kaszpáz-gátolt leukémia sejteken Doktori értekezés Semmelweis Egyetem Patológiai Tudományok Doktori Iskola, Onkológia program I.sz. Patológiai
2011.11.25. Modern Biofizikai Kutatási Módszerek 2011.11.03. Kereskedelmi forgalomban kapható készülékek. Áramlási citometria (flow cytometry)
Modern Biofizikai Kutatási Módszerek 2011.11.03. Kereskedelmi forgalomban kapható készülékek Áramlási citometria (flow cytometry) Eljárás vagy mérési módszer, amellyel folyadékáramban lévő önálló részecskék,
2. A jelutak komponensei. 1. Egy tipikus jelösvény sémája 2. Ligandok 3. Receptorok 4. Intracelluláris jelfehérjék
Jelutak 2. A jelutak komponensei 1. Egy tipikus jelösvény sémája 2. Ligandok 3. Receptorok 4. Intracelluláris jelfehérjék Egy tipikus jelösvény sémája 1. Receptor fehérje Jel molekula (ligand; elsődleges
Az Oxidatív stressz hatása a PIBF receptor alegységek összeszerelődésére.
Újabban világossá vált, hogy a Progesterone-induced blocking factor (PIBF) amely a progesteron számos immunológiai hatását közvetíti, nem csupán a lymphocytákban és terhességgel asszociált szövetekben,
Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetése az Európai Unió új társadalmi kihívásainak a Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni Egyetemen
Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetése az Európai Unió új társadalmi kihívásainak a Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni Egyetemen Azonosító szám: Az orvosi biotechnológiai mesterképzés
Áramlási citometria, sejtszeparációs technikák. Immunológiai és Biotechnológiai Intézet ÁOK, PTE
Áramlási citometria, sejtszeparációs technikák Immunológiai és Biotechnológiai Intézet ÁOK, PTE Az áramlási citometria elve Az áramlási citometria ( Flow cytometria ) sejtek gyors, multiparaméteres vizsgálatára
Apoptózis Bevezetés Apoptózis jelutak (1) belső jelút (1a) (1b) (2) külső jelút Programozott sejthalál ( apoptózis és autofágia
Apoptózis Bevezetés (DIA 1) A többsejtű szervezetek testének kialakulását egy jól meghatározott genetikai/epigenetikai program irányítja. Ez a folyamat nem csupán új sejtek előállításából áll, hanem a
Immunológia alapjai. 16. előadás. Komplement rendszer
Immunológia alapjai 16. előadás Komplement rendszer A gyulladás molekuláris mediátorai: Plazma enzim mediátorok: - Kinin rendszer - Véralvadási rendszer Lipid mediátorok Kemoattraktánsok: - Chemokinek:
Preeclampsia-asszociált extracelluláris vezikulák
Preeclampsia-asszociált extracelluláris vezikulák hatása(i) a monocita sejt működésére Kovács Árpád Ferenc 1, Láng Orsolya 1, Kőhidai László 1, Rigó János 2, Turiák Lilla 3, Fekete Nóra 1, Buzás Edit 1,
Szignalizáció - jelátvitel
Jelátvitel autokrin Szignalizáció - jelátvitel Összegezve: - a sejt a,,külvilággal"- távolabbi szövetekkel ill. önmagával állandó anyag-, információ-, energia áramlásban áll, mely autokrin, parakrin,
Jelutak. 2. A jelutak komponensei Egy tipikus jelösvény sémája. 2. Ligandok 3. Receptorok 4. Intracelluláris jelfehérjék
Jelutak 2. A jelutak komponensei 1. Egy tipikus jelösvény sémája 2. Ligandok 3. Receptorok 4. Intracelluláris jelfehérjék Egy tipikus jelösvény sémája Receptor fehérje Jel molekula (ligand; elsődleges
Lipotoxicitás ellen védő hatóanyagok vizsgálata inzulinóma sejteken
Lipotoxicitás ellen védő hatóanyagok vizsgálata inzulinóma sejteken Doktori tézisek Simon-Szabó Laura Semmelweis Egyetem Gyógyszertudományok Doktori Iskola Témavezetők: prof. Kéri György, DSc., kutatóprofesszor
KERINGŐ EXTRACELLULÁRIS VEZIKULÁK ÁLTAL INDUKÁLT GÉNEXPRESSZIÓS MINTÁZAT VIZSGÁLATA TROPHOBLAST SEJTVONALBAN
2016. 10. 14. KERINGŐ EXTRACELLULÁRIS VEZIKULÁK ÁLTAL INDUKÁLT GÉNEXPRESSZIÓS MINTÁZAT VIZSGÁLATA TROPHOBLAST SEJTVONALBAN Kovács Árpád Ferenc 1, Pap Erna 1, Fekete Nóra 1, Rigó János 2, Buzás Edit 1,
Egyetemi doktori (Ph.D.) értekezés tézisei
Egyetemi doktori (Ph.D.) értekezés tézisei Oxidatív stressz hatása a poli(adp-ribóz) metabolizmusra és a kalcium homeosztázisra humán keratinocita és egér makrofág sejtvonalakban Bakondi Edina Témavezet
-Két fő korlát: - asztrogliák rendkívüli morfológiája -Ca szignálok értelmezési nehézségei
Nature reviewes 2015 - ellentmondás: az asztrociták relatív lassú és térben elkent Ca 2+ hullámokkal kommunikálnak a gyors és pontos neuronális körökkel - minőségi ugrás kell a kísérleti és analitikai
Jelátviteli útvonalak kapcsolata és azok gátlása egészséges és RA-s B sejtekben
Doktori értekezés tézisei Jelátviteli útvonalak kapcsolata és azok gátlása egészséges és RA-s B sejtekben Szili Dániel Témavezető: Prof. Sármay Gabriella Biológiai Doktori Iskola Immunológia doktori program
KÉSZÍTETTE: BALOGH VERONIKA ELTE IDEGTUDOMÁNY ÉS HUMÁNBIOLÓGIA SZAKIRÁNY MSC 2015/16 II. FÉLÉV
KÉSZÍTETTE: BALOGH VERONIKA ELTE IDEGTUDOMÁNY ÉS HUMÁNBIOLÓGIA SZAKIRÁNY MSC 2015/16 II. FÉLÉV TÉNYEK, CÉLOK, KÉRDÉSEK Kísérlet központja Neuronok és réskapcsolatokkal összekötött asztrocita hálózatok
Részletes szakmai beszámoló Az erbb proteinek asszociációjának kvantitatív jellemzése című OTKA pályázatról (F049025)
Részletes szakmai beszámoló Az erbb proteinek asszociációjának kvantitatív jellemzése című OTKA pályázatról (F049025) A pályázat megvalósítása során célunk volt egyrészt a molekulák asszociációjának tanulmányozására
A Tks5 állványfehérje szerepe az EGF jelpályában
A Tks5 állványfehérje szerepe az EGF jelpályában Doktori (Ph.D.) értekezés tézisei Fekete Anna Eötvös Loránd Tudományegyetem, Természettudományi Kar, Biológia Doktori Iskola Doktori iskola vezetője: Dr.
INTRACELLULÁRIS PATOGÉNEK
INTRACELLULÁRIS PATOGÉNEK Bácsi Attila, PhD, DSc etele@med.unideb.hu Debreceni Egyetem, ÁOK Immunológiai Intézet INTRACELLULÁRIS BAKTÉRIUMOK ELLENI IMMUNVÁLASZ Példák intracelluláris baktériumokra Intracelluláris
Két kevéssé ismert humán ABCG fehérje expressziója és funkcionális vizsgálata: ABCG1 és ABCG4 jellemzése
Két kevéssé ismert humán ABCG fehérje expressziója és funkcionális vizsgálata: ABCG1 és ABCG4 jellemzése Doktori tézisek Dr. Cserepes Judit Semmelweis Egyetem Molekuláris Orvostudományok Doktori Iskola
Az ellenanyagok orvosbiológiai. PhD kurzus 2011/2012 II. félév
Az ellenanyagok orvosbiológiai alkalmazása PhD kurzus 2011/2012 II. félév Ellenanyaggal működő módszerek Analitikai felhasználás Analitikai felhasználás Ellenanyag / antigén kapcsolódás Az Ab/Ag kapcsolat
Sejtek öregedése és apoptózis
Sejtek öregedése és apoptózis Láng Orsolya Semmelweis Egyetem, Genetikai, Sejt- és Immunbiológiai Intézet Külső hatások Belső hatások A sejt válasza Szignál molekulák Szignál molekulák hiány hiánya vagy
A PROGRAMOZOTT SEJTHALÁL
A PROGRAMOZOTT SEJTHALÁL A programozott sejthalál (programmed cell death; PCD) alapvetően intracelluláris (endogén) program által szabályozott folyamat, ami a sejtproliferáció antagonistájaként a szervezet
1. Bevezetés. Integrinek, Fc-receptorok és G-fehérje-kapcsolt receptorok jelátvitelének mechanizmusa neutrofil granulocitákban
Integrinek, Fc-receptorok és G-fehérje-kapcsolt receptorok jelátvitelének mechanizmusa neutrofil granulocitákban Doktori tézisek Dr. Jakus Zoltán Semmelweis Egyetem Molekuláris Orvostudományok Doktori
MAP kinázok és a PI-3-kináz/Akt útvonal szerepe a retinadegeneráció szabályozásában. Ph.D. TÉZISEK DR. MESTER LÁSZLÓ
MAP kinázok és a PI-3-kináz/Akt útvonal szerepe a retinadegeneráció szabályozásában Ph.D. TÉZISEK DR. MESTER LÁSZLÓ Pécsi Tudományegyetem, Általános Orvostudományi kar, Biokémiai és Orvosi Kémiai Intézet
DOKTORI ÉRTEKEZÉS TÉZISEI AZ OPPORTUNISTA HUMÁNPATOGÉN CANDIDA PARAPSILOSIS ÉLESZTŐGOMBA ELLENI TERMÉSZETES ÉS ADAPTÍV IMMUNVÁLASZ VIZSGÁLATA
DOKTORI ÉRTEKEZÉS TÉZISEI AZ OPPORTUNISTA HUMÁNPATOGÉN CANDIDA PARAPSILOSIS ÉLESZTŐGOMBA ELLENI TERMÉSZETES ÉS ADAPTÍV IMMUNVÁLASZ VIZSGÁLATA TÓTH ADÉL TÉMAVEZETŐ: DR. GÁCSER ATTILA TUDOMÁNYOS FŐMUNKATÁRS
Az endomembránrendszer részei.
Az endomembránrendszer Szerkesztette: Vizkievicz András Az eukarióta sejtek prokarióta sejtektől megkülönböztető egyik alapvető sajátságuk a belső membránrendszerük. A belső membránrendszer szerkezete
1. Előadás Membránok felépítése, mebrán raftok
1. Előadás Membránok felépítése, mebrán raftok Plazmamembrán Membrán funkciói: sejt integritásának fenntartása állandó hő, energia, és információcsere biztosítása homeosztázis biztosítása Klasszikus folyadékmozaik
A T sejt receptor (TCR) heterodimer
Immunbiológia - II A T sejt receptor (TCR) heterodimer 1 kötőhely lánc lánc 14. kromoszóma 7. kromoszóma V V C C EXTRACELLULÁRIS TÉR SEJTMEMBRÁN CITOSZÓL lánc: VJ régió lánc: VDJ régió Nincs szomatikus
A juxtaglomeruláris apparátus jelátviteli mechanizmusai a macula densán keresztül és azon túl
A juxtaglomeruláris apparátus jelátviteli mechanizmusai a macula densán keresztül és azon túl A PhD értekezés tézisei Dr. Komlósi Péter Témavezető: Dr. Rosivall László Programvezető: Dr. Rosivall László
AZ APOPTÓZIS SZABÁLYOZÁSA TERMÉSZETES ÉS MESTERSÉGES ANYAGOKKAL
AZ APOPTÓZIS SZABÁLYOZÁSA TERMÉSZETES ÉS MESTERSÉGES ANYAGOKKAL Barna Gábor Témavezető: Dr. Kopper László egyetemi tanár Konzulens: Dr. Sebestyén Anna tudományos munkatárs Programvezető: Dr. Kopper László
A programozott sejthalál mint életfolyamat
APOPTOSIS Réz Gábor A programozott sejthalál mint életfolyamat A sejteknek, legyenek bár prokarióták vagy eukarióták, öröklött képességük van arra, hogy belső vagy külső jelek hatására beindítsák a programozott
AZ ADENOZIN HATÁSA A PERIFÉRIÁS CD4 + T-LIMFOCITÁK AKTIVÁCIÓJÁRA. Balicza-Himer Leonóra. Doktori értekezés tézisei
AZ ADENOZIN HATÁSA A PERIFÉRIÁS CD4 + T-LIMFOCITÁK AKTIVÁCIÓJÁRA Doktori értekezés tézisei Balicza-Himer Leonóra Eötvös Loránd Tudományegyetem Természettudományi Kar Biológia Doktori Iskola / Immunológia
A PROTEIN KINÁZ C IZOENZIMEK SZEREPE HUMÁN HaCaT KERATINOCYTÁK SEJTM KÖDÉSEINEK SZABÁLYOZÁSÁBAN
EGYETEMI DOKTORI (Ph.D.) ÉRTEKEZÉS TÉZISEI A PROTEIN KINÁZ C IZOENZIMEK SZEREPE HUMÁN HaCaT KERATINOCYTÁK SEJTM KÖDÉSEINEK SZABÁLYOZÁSÁBAN Papp Helga DEBRECENI EGYETEM ORVOS-ÉS EGÉSZSÉGTUDOMÁNYI CENTRUM
A plazminogén metilglioxál módosítása csökkenti a fibrinolízis hatékonyságát. Léránt István, Kolev Kraszimir, Gombás Judit és Machovich Raymund
A plazminogén metilglioxál módosítása csökkenti a fibrinolízis hatékonyságát Léránt István, Kolev Kraszimir, Gombás Judit és Machovich Raymund Semmelweis Egyetem Orvosi Biokémia Intézet, Budapest Fehérjék
1. ábra: Geldanamycin gátolja az ERK-foszforilációt PC12 sejtekben (24 h geldanamycin előkezelés, 10 perc NGF kezelés).
A pályázati munkatervnek megfelelően a támogatott kutatás a PC12 phaeochromocytoma sejtek differenciációs, stressz és apoptotikus jelátvitelének különböző vonatkozásaival foglalkozott. A munka egyes elemei
Egyetemi doktori (PhD) értekezés tézisei. PARP gátlószerek PARilációtól független hatásai az UVB és az UVA sugárzás által kiváltott sejthalál során
Egyetemi doktori (PhD) értekezés tézisei PARP gátlószerek PARilációtól független hatásai az UVB és az UVA sugárzás által kiváltott sejthalál során Lakatos Petra DEBRECENI EGYETEM Molekuláris Orvostudomány
Intelligens molekulákkal a rák ellen
Intelligens molekulákkal a rák ellen Kotschy András Servier Kutatóintézet Rákkutatási kémiai osztály A rákos sejt Miben más Hogyan él túl Áttekintés Rákos sejtek célzott támadása sejtmérgekkel Fehérjék
VIZSGÁLATA FLOWCYTOMETRIA
TERÁPIAREZISZTENCIA FEHÉRJ RJÉK K MŐKÖDÉSÉNEK M VIZSGÁLATA FLOWCYTOMETRIA ALKALMAZÁSÁVAL Szendi Eszter V. évfolyam Témavezetı: Dr. Vajdovich Péter TDK konferencia, 2008.11.26. Terápiarezisztencia alapvetı
szekrécióra kifejtett hatásukat vizsgáltuk. I. Epesavak hatásának karakterizálása a pankreász duktális sejtek működésére
A pankreász duktális sejtek fő funkciója egy HCO 3 ban gazdag, izotónikus folyadék szekréciója, amely alapvető szerepet játszik az acinusok által termelt emésztőenzimek kimosásában illetve a gyomor felől
2012.11.27. Neuronok előkészítése funkcionális vizsgálatokra. Az alkalmazható technikák előnyei és hátrányai. Neuronok izolálása I
Neuronok előkészítése funkcionális vizsgálatokra. Az alkalmazható technikák előnyei és hátrányai Sejtszintű elektrofiziológia 1.: csatornák funkcionális Sejtszintű elektrofiziológia 2.: izolált/sejtkultúrában
Korai eritroid sejtek osztódásának, túlélésének és differenciációjának vizsgálata: Az ERK1/2 mitogén aktivált protein kináz szerepe
Korai eritroid sejtek osztódásának, túlélésének és differenciációjának vizsgálata: Az ERK1/2 mitogén aktivált protein kináz szerepe Doktori (Ph.D.) értekezés Apáti Ágota Témavezetők: Dr. Magócsi Mária
[S] v' [I] [1] Kompetitív gátlás
8. Szeminárium Enzimkinetika II. Jelen szeminárium során az enzimaktivitás szabályozásával foglalkozunk. Mivel a klinikai gyakorlatban használt gyógyszerhatóanyagok jelentős része enzimgátló hatással bír
A sejthalál és különböző formái
Biológus BSc. Sejtélettan I. A sejthalál és különböző formái Gönczi Mónika DE ÁOK Élettani Intézet 2018 A sejtek lehetséges sorsa in vivo és in vitro Osztódás (utódsejtek létrehozása, regeneráció) Differenciálódás
mtorc1 and C2 komplexhez köthető aktivitás különbségek és ennek jelentősége humán lymphomákbanés leukémiákban
mtorc1 and C2 komplexhez köthető aktivitás különbségek és ennek jelentősége humán lymphomákbanés leukémiákban Sebestyén A, Márk Á, Nagy N, Hajdu M, Csóka M*, SticzT, Barna G, Nemes K*, Váradi Zs*, KopperL
TUMORSEJTEK FENOTÍPUS-VÁLTOZÁSA TUMOR-SZTRÓMA SEJTFÚZIÓ HATÁSÁRA. Dr. Kurgyis Zsuzsanna
TUMORSEJTEK FENOTÍPUS-VÁLTOZÁSA TUMOR-SZTRÓMA SEJTFÚZIÓ HATÁSÁRA PhD tézis Dr. Kurgyis Zsuzsanna Bőrgyógyászati és Allergológiai Klinika Szegedi Tudományegyetem Szeged 2017 2 TUMORSEJTEK FENOTÍPUS-VÁLTOZÁSA
a. Szinaptikus jelátvitel b. Receptorok c. Szignál transzdukció neuronokban d. Neuromoduláció. Szinaptikus jelátvitel.
Az idegsejtek kommunikációja a. Szinaptikus jelátvitel b. eceptorok c. Szignál transzdukció neuronokban d. Neuromoduláció Szinaptikus jelátvitel Terjedő szignál 35. Stimulus eceptor végződések Érző neuron
Tüdő adenocarcinomásbetegek agyi áttéteiben jelenlévő immunsejtek, valamint a PD-L1 és PD-1 fehérjék túlélésre gyakorolt hatása
Tüdő adenocarcinomásbetegek agyi áttéteiben jelenlévő immunsejtek, valamint a és PD-1 fehérjék túlélésre gyakorolt hatása Téglási Vanda, MoldvayJudit, Fábián Katalin, Csala Irén, PipekOrsolya, Bagó Attila,
Immunológia alapjai. Az immunválasz szupressziója Előadás. A szupresszióban részt vevő sejtes és molekuláris elemek
Immunológia alapjai 19 20. Előadás Az immunválasz szupressziója A szupresszióban részt vevő sejtes és molekuláris elemek Mi a szupresszió? Általános biológiai szabályzó funkció. Az immunszupresszió az
Lymphoma sejtvonalak és gyerekkori leukémia (ALL) sejtek mikro RNS (mir) profiljának vizsgálata
Lymphoma sejtvonalak és gyerekkori leukémia (ALL) sejtek mikro RNS (mir) profiljának vizsgálata Dr. Nemes Karolina, Márk Ágnes, Dr. Hajdu Melinda, Csorba Gézáné, Dr. Kopper László, Dr. Csóka Monika, Dr.
Glikolízis. emberi szervezet napi glukózigénye: kb. 160 g
Glikolízis Minden emberi sejt képes glikolízisre. A glukóz a metabolizmus központi tápanyaga, minden sejt képes hasznosítani. glykys = édes, lysis = hasítás emberi szervezet napi glukózigénye: kb. 160
Az immunológia alapjai
Az immunológia alapjai 8. előadás A gyulladásos reakció kialakulása: lokális és szisztémás gyulladás, leukocita migráció Berki Timea Lokális akut gyulladás kialakulása A veleszületeh és szerzeh immunitás
ÖSSZ-TARTALOM 1. Az alapok - 1. előadás 2. A jelutak komponensei 1. előadás 3. Főbb jelutak 2. előadás
Jelutak ÖSSZ-TARTALOM 1. Az alapok - 1. előadás 2. A jelutak komponensei 1. előadás 3. Főbb jelutak 2. előadás 4. Idegi- és hormonális kommunikáció 3. előadás Jelutak 1. a sejtkommunikáció alapjai 1. Bevezetés
TDK lehetőségek az MTA TTK Enzimológiai Intézetben
TDK lehetőségek az MTA TTK Enzimológiai Intézetben Vértessy G. Beáta egyetemi tanár TDK mind 1-3 helyezettek OTDK Pro Scientia különdíj 1 második díj Diákjaink Eredményei Zsűri különdíj 2 első díj OTDK
Szakmai zárójelentés az F-67996 témaszámú OTKA pályázathoz
Szakmai zárójelentés az F-67996 témaszámú OTKA pályázathoz témavezető: Debreceni Balázs 2011. július Bevezetés Kísérleteinkben oxidatív stressznek, illetve magas homocisztein koncentrációnak kitett, kultúrában
Jelutak ÖSSZ TARTALOM. Jelutak. 1. a sejtkommunikáció alapjai
Jelutak ÖSSZ TARTALOM 1. Az alapok 1. előadás 2. A jelutak komponensei 1. előadás 3. Főbb jelutak 2. előadás 4. Idegi és hormonális kommunikáció 3. előadás Jelutak 1. a sejtkommunikáció alapjai 1. Bevezetés
Az idegsejtek kommunikációja. a. Szinaptikus jelátvitel b. Receptorok c. Szignál transzdukció neuronokban d. Neuromoduláció
Az idegsejtek kommunikációja a. Szinaptikus jelátvitel b. Receptorok c. Szignál transzdukció neuronokban d. Neuromoduláció Szinaptikus jelátvitel Terjedő szignál 35. Stimulus PERIFÉRIÁS IDEGRENDSZER Receptor
Algaközösségek ökológiai, morfológiai és genetikai diverzitásának összehasonlítása szentély jellegű és emberi használatnak kitett élőhelykomplexekben
Algaközösségek ökológiai, morfológiai és genetikai diverzitásának összehasonlítása szentély jellegű és emberi használatnak kitett élőhelykomplexekben Duleba Mónika Környezettudományi Doktori Iskola I.
TRIPSZIN TISZTÍTÁSA AFFINITÁS KROMATOGRÁFIA SEGÍTSÉGÉVEL
TRIPSZIN TISZTÍTÁSA AFFINITÁS KROMATOGRÁFIA SEGÍTSÉGÉVEL Az egyes biomolekulák izolálása kulcsfontosságú a biológiai szerepük tisztázásához. Az affinitás kromatográfia egyszerűsége, reprodukálhatósága
Immunológia alapjai előadás. A humorális immunválasz formái és lefolyása: extrafollikuláris reakció és
Immunológia alapjai 15-16. előadás A humorális immunválasz formái és lefolyása: extrafollikuláris reakció és csíracentrum reakció, affinitás-érés és izotípusváltás. A B-sejt fejlődés szakaszai HSC Primer
Xenobiotikum transzporterek vizsgálata humán keratinocitákban és bőrben
DOKTORI (PHD) ÉRTEKEZÉS TÉZISEI Xenobiotikum transzporterek vizsgálata humán keratinocitákban és bőrben Bebes Attila Témavezető: Dr. Széll Márta tudományos tanácsadó Szegedi Tudományegyetem Bőrgyógyászati
Az anti-apoptózis mechanizmus vizsgálata agyi ischaemia/hypoxia modellekben
OTKA T-037887 zárójelentés Az anti-apoptózis mechanizmus vizsgálata agyi ischaemia/hypoxia modellekben Az ischaemias stroke-ot követően az elzáródott ér ellátási területének centrumában percek, órák alatt