Esettanulmányok. Dr. Toldi József OVSZ Szegedi Regionális Vérellátó Központ

Átírás

1 Esettanulmányok Dr. Toldi József OVSZ Szegedi Regionális Vérellátó Központ

2 Esetismertetések: ABO vércsoport meghatározással kapcsolatos nehézségek és megoldások RhD bizonytalanság kivizsgálása Antitest-azonosítással kapcsolatos esetek elemzése Transzfúziós szövődmény kivizsgálása Transzfúziós Szabályzat

3 Az egyén savója normális körülmények között nem tartalmazhatja a saját vörösvérsejtjein található ABO antigén ellenes antitestet, de kötelezően tartalmazza a hiányzó antigén ellenes antitestet. Az ABO meghatározás alapja: a Landsteiner szabály vér csoport vörösvérsejt vizsgálata a savó vizsgálata anti-a anti-b anti-ab AK A1 A2 B O A 4+ n 4+ n n n 4+ n B n n n n O n n n n n AB n n n n n

4 ABO meghatározás hibaforrásainak osztályozása I. Pozitív autokontroll reakció II. Eltérés a Landsteiner szabálytól 1. Plusz reakció előfordulása a. baloldali vércsoport meghatározásban - ABO antigén kimutatás b. jobboldali vércsoport meghatározásban - ABO antitest kimutatás 2. Hiányzó reakció előfordulása a. baloldali vércsoport meghatározásban - ABO antigén kimutatás b. jobboldali vércsoport meghatározásban - ABO antitest kimutatás) III. Kevertmezős reakció

5 ABO vércsoport meghatározás nehézségei Eset (B.E.) öröklött gyenge A vércsoport tulajdonság 69 éves Dg: Tu transzfúziós anamnézis: negatív vörösvérsejt vizsgálata a savó vizsgálata A beküldő eredményei anti-a anti-b anti-ab AK A1 A2 B O n n n n n n 4+ n A vércsoport tisztázás menete Háromhőmérsékletes laboratóriumi vércsoport vizsgálat anti-a anti-b anti-ab AK A1 A2 B O Biotest ± / + n ± / + n n n 4+ n Human ± / + n ± / + n n n 4+ n Pasteur + n + n n n 4+ n technika megjegyzés: lemezes és csöves módszer - a reakciók 4ºC és 22ºC észlelhetők 37ºC-on negatív, - az anti-a és anti-ab reakciók erőssége közel azonos

6 1. Eset (B.E.) öröklött gyenge A vércsoport tulajdonság Hidegagglutinin vizsgálat negatív Direkt Coombs vizsgálat (DAT) negatív "A" alcsoport vizsgálat anti-a1 anti-h n 4+ Abszorbció - elúciós vizsgálat az ismeretlen vörösvérsejt anti-a antitestet köt az eluátum A1 vvs-t agglutinált A szekretor statusz vizsgálata a nyálból "A" és "H" vércsoport anyag mutatható ki. Vélemény: A vizsgált személy vércsoportja A alcsoport ( A m ) azonos erősségű reakciók az anti-a és anti-ab savókkal az irreguláris anti-a1 hiánya A és H vércsoportanyag a nyálban Transzfúziós javaslat: Transzfúzió esetén A vércsoport javasolt.

7 ABO vércsoport meghatározás nehézségei Eset (K.K.) szerzett gyenge A vércsoport tulajdonság 45 éves Dg: ITP transzfúziós anamnézis: pozitív vörösvérsejt vizsgálata a savó vizsgálata 1. anti-a anti-b anti-ab AK A1 A2 B O n ntd ntd n n n n n technika Mikroplate módszer reagens Biotest Erytype ABD ismételt vizsgálat - más módszerrel vörösvérsejt vizsgálata a savó vizsgálata 2. anti-a anti-b anti-ab AK A1 A2 B O n n 1+ n n n n n technika Oszlopagglutinációs módszer reagens Ortho BioVue ABD

8 2. Eset (K.K.) szerzett gyenge A vércsoport tulajdonság Háromhőmérsékletes laboratóriumi vércsoport A vércsoport tisztázás menete anti-a anti-b anti-ab AK A1 A2 B O Pasteur n 1+ 1+/ 2+ n n n n n SNBTS n 1+ n n n n n n DiaGast n ± / + n n n n n n technika lemezes és csöves módszer Hidegagglutinin vizsgálat Direkt Coombs vizsgálat (DAT) "A" alcsoport vizsgálat Abszorbció Elúció negatív negatív anti-a1 n anti-h 4+ sem "A" ; sem "B" titercsökkenés nem történt az eluátum anti-b antitestet tartalmaz A szekretor státusz (haemagglutináció gátlás) a nyálból "A" és "B" vércsoport anyag mutatható ki.

9 2. Eset (K.K.)* szerzett gyenge A vércsoport tulajdonság 45 éves Dg: ITP transzfúziós anamnézis: pozitív ITP-s betegnél AML-a alakult ki. Vélemény: A vizsgált személy vércsoportja AB nyál A és B vércsoportanyagot tartalmaz Transzfúziós javaslat:?( AB ; O ) * Vezendi K., Toldi J., Varga Gy., Lázár Gy. : Vércsoport-meghatározás nehézsége acut leukaemiában; Transzfúzió 32, (1999)

10 Plusz reakció a baloldalon szerzett B vércsoport vér csoport vörösvérsejt vizsgálata a savó vizsgálata anti-a anti-b anti-ab AK A1 A2 B O A poz poz neg neg neg poz neg Szerzett B tulajdonság jellemzői: o A vércsoport o idős kor nőkben gyakoribb o Malignus betegség a diagnózisban o Visszafordítható folyamat o csak bizonyos anti-b reagensek reagálnak A1 A2 B O P1 P2 Tisztázás Az anti-b savó megválasztása Génszintű vizsgálatok PCR - hiányzó B

11 Plusz reakció a jobboldalon - Bombay vércsoport vér csoport vörösvérsejt vizsgálata a savó vizsgálata anti-a anti-b anti-ab AK A1 A2 B O A neg neg neg neg poz poz poz poz A1 A2 B O O O Anti-H lektin - hiányzó H Csató E., Losonczy J., Friss A., Neuhauser J.: Első magyarországi Bombay-csoportú vér ismertetése (Előzetes közlemény) Orv. Hetil. 122(7):381-2(1981) PCR - jelenlévő B O 1 B genotípus

12 ABO tulajdonsága génszintű vizsgálata (PCR-SSP) Szerológia vizsgálat eredménye 1. Ael vércsoport (AO 1 genotípus ) A beküldő eredményei anti- A vörösvérsejt vizsgálata anti- B anti- AB a savó vizsgálata AK A1 A2 B O n n n n n n 4+ n Id: 12v010 - ABO Id: 12v010 ABO sub 1.Az eredmény kiértékelése: ABO-SSP: O 1 : pozitív; non O 1 : pozitív; non O 2 : pozitív; non B pozitív; non A2: pozitív (A O 1 genotípus) ABO subtype: Ael01: pozitív 1.Az eredmény leírása: A genetikai vizsgálat alapján a nevezett személy ABO genotípusa: AO 1 ; Vércsoportja: gyenge A (Ael01 pozitív) 1.Transzfúziós szempontból, mint donor és potenciális recipiens gyenge A vércsoportnak (Ael) tekinthető.

13 ABO tulajdonsága génszintű vizsgálata (PCR-SSP) 2. B vércsoport (BO 2 genotípus ) Id: 11v048 - ABO o Az eredmény kiértékelése: O 2 : pozitív; B: pozitív (O 2 B genotípus) o Az eredmény leírása: A genetikai vizsgálat alapján ABO vércsoportja B o Transzfúziós szempontból a PCR és szerológiai vizsgálatok alapján, mint donor és potenciális recipiens gyenge B vércsoportnak tekinthető.

14 1. Eset (xy) kérés: RhD tisztázás beküldő eredménye: nincs transzfúziós anamnézis: nincs RhD bizonytalanság kivizsgálása módszer inkubáció reagens Lemezes albumin technika lemezes papainos technika RhD tisztázás 37ºC Human ± / + 22ºC Human ± / + IDAT 37ºC Biotest 1+ Rh fenotípus ccee A kapott eredmények kiértékelése Rh fenotípus gyakoriság Rh fenotípus gyakoriság ccee 14,40% cde 13% ccdee 2,10% cde 3% Utólagos információ: a betegágy melletti RhD pozitív meghatározást követően a beteg 2E keresetlen A RhD pozitív vért kapott Vélemény az RhD meghatározás eredménye nem egyértelmű a beteg nagy valószínűséggel RhD negatív 12 hét múlva RhD ismétlés javasolt transzfúzió esetén RhD negatív vér adása javasolt anti-d védőoltás adása az Rh izoimmunizáció kivédésére nem javasolt

15 RhD tulajdonsága génszintű vizsgálata (PCR-SSP) 1. RhD negatív HYB pozitív Id 11v RhD pozitív Dd genotípus Id 11vF07 Dd contr. 1. Gél-kép Id: 11v Az eredmény kiértékelése: a. RHD gén: D pozitív b. RHCE gén: C pozitív, c pozitív, E pozitív, e pozitív

16 Antitest azonosítás vizsgálati eljárás inkubáció alacsony ionerősségű közeg (LISS) Enzimteszt OVK panel eredmény leolvasása Rh fenotípus direkt Indirekt - IDAT direkt Indirekt - IDAT 1. savó 2. savó 3. savó 1. savó 2. savó 3. savó 1. savó 2. savó 3. savó 1. savó 2. savó 3. savó 1. CCDee n +/- n 2+ n ccdee n + n Ccee n n n n n n n n n n n n 4. ccee n n n n n n n n n n n n 5. Ccee n n n n n n n n n n n n 6. ccdee n +/- n 2+ n +/ CCwDee n +/- n Ccee n n n n n n n n n n n n 9. CcDEe n +/- n 3+ n n n ccee n n n n n n n n n n n n

17 1. savó (A.E. terhes; 614/96) A Rh negatív, Rhf: ccee anti-d; 16 transzfúziós anamnézis 1993 műtét betegágy melletti vércsoport: A Rh+ 2E A Rh+ transzfúzió 7 napra: IDAT-, DAT- 2 hónapra IDAT-, DAT I. terhesség Anti-D max. titer 1/16384 újszülött A Rh+; Ccee DAT+ 2x EST 1997 II. terhesség anti-d+c; 1024, 2048 Vélemény szekunder immunizációra jellemző IgG típusú immunválasz Rh f liss IDAT pl plagt CCDee n ccdee n Ccee n n n n ccee n n n n Ccee n n n n ccdee n CC w Dee n Ccee n n n n CcDEe n ccee n n n n

18 2. savó (T.I.M. terhes; 617/96) A Rh negatív, Rhf: ccee Anti-D Transzfúziós anamnézis 1996 I. terhesség Újszülött vércsoport A Rh+ DAT negatív (G-, C3d-) Vélemény Friss immunizációra jellemző IgM típusú primer immunválasz Rh f liss IDAT pl plagt CCDee +/- n ccdee Ccee n n n n ccee n n n n Ccee n n n n ccdee +/- n CC w Dee +/ Ccee n n n n CcDEe +/- n n n ccee n n n n

19 3. savó (E.V. szülőnő; 428/96) O Rh negatív, Rhf: ccee anti-d transzfúziós anamnézis 1996 I. terhesség Újszülött vércsoport O Rh+ DAT negatív anti-d védőoltást kapott A vizsgálat ideje: Vélemény Passzívan bevitt anti-d antitest a savóban Rh f liss IDAT pl plagt CCDee n ccdee n Ccee n n n n ccee n n n n Ccee n n n n ccdee n +/ CC w Dee n Ccee n n n n CcDEe n ccee n n n n

20 Transzfúziós szövődmény kivizsgálása a beteg adatai a bejelentés ideje, módja a bejelentő orvos a szövődmény rövid leírása I. Az ABO tévesztés kizárása A szerológiai vizsgálat menete - beteg vércsoportjának ismétlése - a donor vércsoportjának ismétlése - a donor DAT (direkt Coombs) vizsgálata II. A klinikailag jelentős antitestekkel kiváltott szövődmény kizárása - a beteg savójának megismételt antitest vizsgálata - a laboratóriumi vérválasztás megismétlése III. A beteg DAT (direkt Coombs) vizsgálata

21 Transzfúziós szövődmény kivizsgálása - esetismertetés A szövődmény leírása: koraszülött, 3 alkalommal már transzfúziót kapott. Szövődménye nem volt. A transzfúziót követően 8 órára besárgult, egyéb tünetek nincsenek, labor folyamatban. Transzfúziót megelőző követő mintából I. Az ABO tévesztés kizárása - a beteg vércsoportjának ismétlése - a donor vércsoportjának ismétlése - a donor DAT (direkt Coombs) vizsgálata II. A klinikailag jelentős antitestek kizárása - a beteg megismételt antitest vizsgálata A RhD+ A RhD+ A Rh+ negatív negatív - a laboratóriumi vérválasztás megismétlése negatív Transzfúziót megelőző követő mintából III. A beteg DAT (direkt Coombs) vizsgálata negatív negatív

22 Transzfúziós szövődmény kivizsgálása - esetismertetés IV. Szerológiai szakvélemény ABO tévesztés nem történt a beteg savója antitestet nem tartalmaz a megismételt keresztpróba negatív a keringésében antigén-antitest fedettség nem mutatható ki (DAT negatív) A fenti eredmények alapján a transzfúziós szövődmény immunológiai eredete nagy valószínűséggel kizárható.

23 Válogatás a Transzfúziós Szabályzatból (2. kiadás, 2008)

35 Toldi J.: Esetbemutató (OT2007) Válogatás a Transzfúziós Szabályzatból (2. kiadás, 2008)