Nemzeti Élelmiszerlánc-biztonsági Hivatal

Nemzeti Élelmiszerlánc-biztonsági Hivatal Élelmiszer- és Takarmánybiztonsági Igazgatóság 1024 Budapest, Keleti Károly út 24. Tel: 06/1/336-9474 Fax: 06/1/336-9169 E-mail: etbi@nebih.gov.hu.hu www.nebih.gov.hu

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. Tartalomjegyzék Bevezetés Általános információk 3 A minták leírása 3 Résztvevıszám és határidık 3 A minták elıállítása 3 Homogenitás vizsgálat 4 A vizsgálati eredmények statisztikai kiértékelésének módja 7 A jártassági vizsgálatban részt vett laboratóriumok 10 A vizsgálatok specifikussága, érzékenysége és pontossága 11 Eredmények - Listeria monocytogenes jelenlétének kimutatása 14 Eredmények - Enterobaktériumszám meghatározása 17 Eredmények - Élesztıgombaszám meghatározása 21 Eredmények Tejsavtermelı baktériumszám meghatározása 25 Mellékletek 28 1 1. számú melléklet: Értesítés a 8-2012 számú élelmiszerlánc jártassági vizsgálat mintáinak átvételérıl 2. számú melléklet: Kísérılevél a mintákhoz 30 3. számú melléklet: Útmutató a 8-2012 számú jártassági vizsgálat végrehajtásához 31 4. számú melléklet: Kódértesítı 33 5. számú melléklet: A 8-2012 számú élelmiszerlánc JV eredményközlıjének és útmutatójának küldése 35 6. számú melléklet: Eredményközlı lap 36 A 8-2012 sz. élelmiszerlánc jártassági vizsgálat felelısei 44 29 I

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. I. Bevezetés Tisztelt Résztvevık! L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. kiírt mikrobiológiai jártassági vizsgálatot az élelmiszerlánc jártassági vizsgálatok részeként szerveztük. A részvevık vizsgáló-teljesítményének független és objektív becslése érdekében a következı szempontokat érvényesítettük, ill. tartottuk be: 1. A jártassági vizsgálat szervezése és megrendezése során messzemenıen figyelembe vettük a nemzetközi elıírásokat*. 2. A résztvevık egyértelmő tájékoztatókat, útmutatókat és jelentkezési lapokat kaptak azért, hogy a laboratóriumok fel tudják mérni, milyen szakmai-, gazdasági- és idıterhelést jelent számukra a jártassági vizsgálatban való részvétel. A kommunikációt a jártassági vizsgálat lebonyolítása során folyamatosan fenntartottuk. (Az ISO/IEC 17043:2010 és az MSZ EN ISO/IEC 17025:2005 elıírásokat betartva.) 3. A kiadott minták homogenitás és stabilitás vizsgálatait az ISO, az IUPAC és a FAPAS elıírásoknak* megfelelıen végeztük el. 4. A Enterobacteriaceae számának meghatározása során a vizsgáló-teljesítmény becsléséhez alapvetıen a z-score és a z score értékeket számoltuk. Ennek ismeretlenjeit a következı módszerekkel határoztuk meg: a. A hozzárendelt értéket vagy valódi értéket a vizsgálati eredmények (a telepszám) tízes alapú logaritmusa robusztus átlagának számolásával becsültük. b. Meghatároztuk a hozzárendelt érték vagy valódi érték becslésének bizonytalanságát is. Ha ez a célszórás 30%-ánál nagyobb volt, akkor a z-score (pont) érték meghatározása helyett a z -score értéket számoltuk. (Lásd bıvebben A vizsgálati eredmények statisztikai kiértékelésének módja -nál.) c. A célszórásra a 0,250 értéket alkalmazzuk a 0,5 log 10 szabályt figyelembe véve, azaz a mérési eredmények 95%-os valószínőséggel a lg(hozzárendelt érték) ± 0,5 tartományba esnek. (Lásd bıvebben A vizsgálati eredmények statisztikai kiértékelésének módja -nál.). Az eredménylapokon részletes módszer-információt kértünk a résztvevıktıl a vizsgálat során alkalmazott minta elıkészítésrıl és a mérési körülményekrıl is. Errıl egy módszer-összesítı 1

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. Excel táblázatot (adatbázist) készítettünk. Reméljük, hogy ennek a tartalmát a megfelelı szőrıfeltételek alkalmazásával jól tudják a laboratóriumok használni a továbbfejlıdésükhöz. A jártassági vizsgálat értékelésébıl az alábbi következtetések vonhatók le: Listeria monocytogenes jelenlétének meghatározása jól sikerült. Az összes laboratóriumra vonatkozó pontosság arány 94,4% lett. Enterobacteriaceae számának meghatározása során a z-score értékek alapján a jártassági vizsgálatban a résztvevık vizsgálati teljesítménye 83,3 %-ban megfelelı, beavatkozást nem igényel. Az élesztı gombák számának meghatározása során a z-score értékek alapján a jártassági vizsgálatban a résztvevık vizsgálati teljesítménye 83,3 %-ban megfelelı, beavatkozást nem igényel. A Lactobacillusszám meghatározása során a z-score értékek alapján a jártassági vizsgálatban a résztvevık vizsgálati teljesítménye 91,7 %-ban megfelelı, beavatkozást nem igényel. Az egy kötetbıl álló jártassági vizsgálati zárójelentést e-mailben (védett PDF formátumban) juttatjuk el a résztvevıkhöz és feltesszük www.ringtest.hu szakmai felületre, amely elérhetı közvetve is az MgSzH honlapjáról (www.mgszh.gov.hu). A módszer-összesítı táblázatot (adatbázist) amely rekordjainak a kitöltését ezúton is köszönjük a résztvevıknek nem tesszük fel a honlapunkra, ezt csak a résztvevık kapják meg e-mailben, hogy a további munkájuk során hasznosíthassák. Végül minden laboratóriumnak köszönjük a részvételt, a saját kiértékelésekhez jó munkát és sok sikert kívánunk! Köszönjük, ha észrevételeivel hozzájárul a munkánk eredményességének javításához! Budapest, 2012.10.02. Tisztelettel: a Szervezık * : a. ISO/TS 22117:2010(E) Microbiology of food and animal feeding stuffs Specific requirements and guidance for proficiency testing by interlaboratory comparison (Élelmiszerek és takarmányok mikrobiológiai vizsgálata Speciális követelmények és útmutatások a laboratórium összehasonlító jártassági vizsgálatokkal szemben) b. ISO/IEC 17043:2010 (E): Conformity assessment General requirements for proficiency testing (Megfelelıség értékelés - Általános követelmények jártassági vizsgálatokkal szemben.) 2

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. c. ILAC-G13:2007 Guidelines for the Requirements for the Competence of Providers of Proficiency Testing Schemes (Iránymutatások a jártasságvizsgálati programok szolgáltatóival szemben támasztott követelményekhez) [ILAC (International Laboratory Accreditation Cooperation)] d. MSZ EN ISO/IEC 17025:2005 Vizsgáló- és kalibráló laboratóriumok felkészültségének általános követelményei e. The International Harmonised Protocol for the Proficiency Testing of (Chemical) Analytical Laboratories. (Nemzetközi Egyeztetett Protokoll [szabály] a Kémiai Analitikai Laboratóriumok Jártassági Vizsgálatára) (IUPAC Technical Report), Pure Appl. Chem., Vol. 78, No. 1, pp. 145 196, (2006). f. ISO 13528:2005, Statistical methods for use in proficiency testing by interlaboratory comparisons (Statisztikai módszerek a laboratóriumok közötti összehasonlításokban használt jártassági vizsgálatokhoz) g. FAPAS (FOOD ANALYSIS PERFORMANCE ASSESSMENT SCHEME) : Proficiency Testing, Protocol for Organisation and Analysis of Data (Jártassági vizsgálat, protokoll a szervezésre és az adatok elemzésére) (2002) II. Általános információk A minták leírása: A mintákat L mint Listeria monocytogenes és E mint Enterobacteriaceae betővel és véletlenszám-generálással képzett arab számokkal jelöltük. A minták kódszámai a fertızéssel párhuzamosan kerültek rögzítésre. A Listeria vizsgálat mintái 25 (± 0,2) cm 3 -esek, a számszerő Enterobacteriaceae vizsgálat mintái 10 (± 0,2) cm 3 -esek voltak, így a bemérésnél a minták teljes mennyiségét kértük felhasználni. Ezért az útmutatóban elıírtuk a résztvevıknek, hogy mintamennyiség maradéktalan eltávolítása érdekében az elıre kimért mennyiségő dúsító táptalaj/hígító folyadék kis mennyiségeivel többször alaposan öblítsék át a mintatartó edényt. A vizsgálat jártassági jellegő volt, így az alkalmazott módszer tekintetében nem volt megkötés. A Listeria monocytogenes jelenlétének valamint az Enterobacteriaceae számának meghatározására minden résztvevı 3-3 darab, arab számmal ellátott, tej mintát kapott az L 1, L 2, L 3 és a E 1, E 2, E 3 mintacsoportokból. Résztvevıszám és határidık: A jártassági vizsgálat résztvevıinek száma 18 laboratórium. A jártassági vizsgálati minták átadása 2012. május 8-án történt. A vizsgálat elkezdésének idıpontja 2012. május 9-e volt. Addig a mintákat 4 C-on kértük tárolni. A kiküldött eredményközlı lapon eredmények beküldési határideje 2011. június 11-e volt. A minták elıállítása: A Listeria monocytogenes jelenléti-hiány próbához, valamint az Enterobakteriaceae szám meghatározásához a minta tej volt. A Listeria monocytogenes vizsgálatot L. monocytogenes ATCC 19114 törzzsel végeztük el. Az Entertobakterium számmeghatározáshoz E. coli ATCC 9637 HNCMB törzset használtunk. A tejminták beoltása Listeria monocytogenes 10-4 es hígitásból 1 ml-t. ( a várt bakteriumszint 10 2 ). Enterobakteriaceae szám meghatározásánál 10-5 ös hígitásból 1 ml-t ( a várt bakterium szint 10 3 ). A tejsavtermelı baktérium szám ill. élesztıszám esetén, DANONE Kaukázusi kefír gyári mintát adtunk ki vizsgálatra. A mintánál az elıkísérlet során ( 2012.04.06.-i feldolgozás) 4,8x10 8 /g Lactobacillus, valamint 1,6x10 5 /g élesztıgombaszámot állapítottunk meg. 3

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. Homogenitás vizsgálat Az elkészített mintákból mintacsoportonként 10-10 darabot véletlenszerően kiemeltünk, és elvégeztük az Enterobacteriaceae szám meghatározásokra, illetve a Listeria monocytogenes jelenlététre irányuló vizsgálatokat. A homogenitás vizsgálatot az Élelmiszer Mikrobiológiai Nemzeti Referencia Laboratórium a hivatalos feldolgozás idıpontjában végezte el. A számmeghatározásra irányuló vizsgálat esetében telepszám adatokból képzett értékek (CFU/ml) tízes alapú logaritmusát használtuk fel a statisztikai próbák elvégzéséhez. A statisztikai próbákat az ISO/TS 22117:2010(E) technikai specifikáció B melléklet B.2. szakasza szerint végeztük el. A homogenitás vizsgálat adatait az alábbiakban közöljük. Mérések (lg CFU/g) D S D 2 Homogenitás vizsgálat: n (min. 7 db) /a /b a-b a+b Jártassági vizsgálat: 8-2012 1 4,875 5,079-0,2041 9,9542425 0,0417 Paraméter: Élesztıgomabaszám 2 4,914 5,041-0,1276 9,9552065 0,0163 3 4,892 4,924-0,0322 9,8163739 0,0010 4 4,929 4,826 0,10334 9,7554937 0,0107 5 4,886 4,929-0,0429 9,8159097 0,0018 6 5,079 4,875 0,20412 9,9542425 0,0417 7 4,799 4,934-0,1352 9,733839 0,0183 8 4,799 4,892-0,0928 9,6914352 0,0086 9 4,934 4,964-0,0293 9,8982863 0,0009 10 4,716 4,886-0,1705 9,6024941 0,0291 n= 10 db kivett minta 0,16995977 Összeg (sum (D 2 i)) 0,0150948 Variancia Nagy átlag: 4,9088762 Mértékegység: lg(cfu/g) Cél sdev: 0,25 lg(cfu/g) Élesztőgombaszám 5,200 5,000 4,800 4,600 /a /b 4,400 4,200 0 2 4 6 8 10 12 4

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. Értékelés 1. Cochran-test (van-e kiugró adat?): 10 db minta 2 bárhuzamos elıkész. és méréséhez tartozó 95%-os kritikus érték = 0,602 (lásd a Cochran munkalapot) Jellemzı arány: D 2 max/sum(d 2 i)= 0,24515 Az eltérés NEM kiugró 2. A VIZSGÁLATI (ANALITIKAI) variancia becsült értéke: s 2 an= sum(d 2 i)/2*n = 0,00849799 s an = 0,0921845 3. A MINTÁK KÖZÖTTI variancia becsült értéke: Ajánlás: s an /σ p < 0,5 Variancia S(a+b)= 0,015095 s an /σ p = 0,369 MS B = var S(a+b)/2 = 0,007547 TELJESÜL! s 2 samp = (MS B -s 2 an)/2= 0 mert negatív érték lenne 4. A MINTÁK KÖZÖTTI variancia elfogadhatóságának vizsgálata : Szórás cél értéke: Cél sdev: ( σ p )= 0,25 lg(cfu/g) Minták között megengedhetı variancia: σ 2 allow = (0.3 x σ p ) 2 = 0,005625 A vizsgálat kritikus értéke /c / n= 10 db mérési párra: F1= 1,88 F1 és F2 értékek munkalapról F2= 1,01 c= F1 x σ 2 allow + F2 x s 2 an = 0,019158 KÖVETKEZTETÉS ( s 2 samp < c??): HOMOGENITÁS ELFOGADHATÓ, MERT A MINTÁK KÖZÖTTI VARIANCIA BECSÜLT ÉRTÉKE KISEBB MINT C KRITIKUS ÉRTÉK Mérések (lg CFU/g) D S D 2 Homogenitás vizsgálat: n (min. 7 db) /a /b a-b a+b Jártassági vizsgálat: 8-2012 1 2,60205999 2,47712 0,12494 5,0791812 0,0156 Paraméter: Enterobaktériumszám 2 2,30103 2,47712-0,1761 4,7781513 0,0310 3 2,84509804 3-0,1549 5,845098 0,0240 4 2,90308999 3-0,0969 5,90309 0,0094 5 2,60205999 2,60206 5,20412 6 2,69897 2,77815-0,0792 5,4771213 0,0063 7 2,84509804 2,47712 0,36798 5,3222193 0,1354 8 2,60205999 2,69897-0,0969 5,30103 0,0094 9 2,60205999 2,77815-0,1761 5,3802112 0,0310 10 2,69897 2,69897 5,39794 n= 10 db kivett minta 0,26208025 Összeg (sum (D 2 i)) 0,1101851 Variancia Nagy átlag: 2,6844081 Mértékegység: lg(cfu/g) Cél sdev: 0,25 lg(cfu/g) Enterobaktériumszám 3,2 3 2,8 2,6 /a /b 2,4 2,2 0 2 4 6 8 10 12 5

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. Értékelés 1. Cochran-test (van-e kiugró adat?): 10 db minta 2 bárhuzamos elıkész. és méréséhez tartozó 95%-os kritikus érték = 0,602 (lásd a Cochran munkalapot) Jellemzı arány: D 2 max/sum(d 2 i)= 0,51666 Az eltérés NEM kiugró 2. A VIZSGÁLATI (ANALITIKAI) variancia becsült értéke: s 2 an= sum(d 2 i)/2*n = 0,01310401 s an = 0,1144728 3. A MINTÁK KÖZÖTTI variancia becsült értéke: Ajánlás: s an /σ p < 0,5 Variancia S(a+b)= 0,110185 s an /σ p = 0,458 MS B = var S(a+b)/2 = 0,055093 TELJESÜL! s 2 samp = (MS B -s 2 an)/2= 0,020994 4. A MINTÁK KÖZÖTTI variancia elfogadhatóságának vizsgálata : Szórás cél értéke: Cél sdev: ( σ p )= 0,25 lg(cfu/g) Minták között megengedhetı variancia: σ 2 allow = (0.3 x σ p ) 2 = 0,005625 A vizsgálat kritikus értéke /c / n= 10 db mérési párra: F1= 1,88 F1 és F2 értékek munkalapról F2= 1,01 c= F1 x σ 2 allow + F2 x s 2 an = 0,02381 KÖVETKEZTETÉS ( s 2 samp < c??): HOMOGENITÁS ELFOGADHATÓ, MERT A MINTÁK KÖZÖTTI VARIANCIA BECSÜLT ÉRTÉKE KISEBB MINT C KRITIKUS ÉRTÉK Mérések (lg CFU/g) D S D 2 Homogenitás vizsgálat: n (min. 7 db) /a /b a-b a+b Jártassági vizsgálat: 8-2012 1 9,114 9,146-0,0322 18,260071 0,0010 Paraméter: Tejsavtermelı baktériumok 2 9,079 9,114-0,0348 18,193125 0,0012 3 9,041 9,079-0,0378 18,120574 0,0014 4 8,987 9,114-0,1272 18,100715 0,0162 5 9,041 8,991 0,05017 18,032619 0,0025 6 9,079 9,114-0,0348 18,193125 0,0012 7 9,079 9,114-0,0348 18,193125 0,0012 8 8,934 8,944-0,01 17,878981 0,0001 9 9,041 8,982 0,05912 18,023664 0,0035 10 9,041 9,079-0,0378 18,120574 0,0014 n= 10 db kivett minta 0,02980136 Összeg (sum (D 2 i)) 0,0122605 Variancia Nagy átlag: 9,0558286 Mértékegység: lg(cfu/g) Cél sdev: 0,25 lg(cfu/g) Tejsavtermelő baktérium szám 9,200 9,150 9,100 9,050 9,000 8,950 8,900 8,850 8,800 0 2 4 6 8 10 12 /a /b 6

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. Értékelés 1. Cochran-test (van-e kiugró adat?): 10 db minta 2 bárhuzamos elıkész. és méréséhez tartozó 95%-os kritikus érték = 0,602 (lásd a Cochran munkalapot) Jellemzı arány: D 2 max/sum(d 2 i)= 0,54268 Az eltérés NEM kiugró 2. A VIZSGÁLATI (ANALITIKAI) variancia becsült értéke: s 2 an= sum(d 2 i)/2*n = 0,00149007 s an = 0,0386014 3. A MINTÁK KÖZÖTTI variancia becsült értéke: Ajánlás: s an /σ p < 0,5 Variancia S(a+b)= 0,01226 s an /σ p = 0,154 MS B = var S(a+b)/2 = 0,00613 TELJESÜL! s 2 samp = (MS B -s 2 an)/2= 0,00232 4. A MINTÁK KÖZÖTTI variancia elfogadhatóságának vizsgálata : Szórás cél értéke: Cél sdev: ( σ p )= 0,25 lg(cfu/g) Minták között megengedhetı variancia: σ 2 allow = (0.3 x σ p ) 2 = 0,005625 A vizsgálat kritikus értéke /c / n= 10 db mérési párra: F1= 1,88 F1 és F2 értékek munkalapról F2= 1,01 c= F1 x σ 2 allow + F2 x s 2 an = 0,01208 KÖVETKEZTETÉS ( s 2 samp < c??): HOMOGENITÁS ELFOGADHATÓ, MERT A MINTÁK KÖZÖTTI VARIANCIA BECSÜLT ÉRTÉKE KISEBB MINT C KRITIKUS ÉRTÉK III. A vizsgálati eredmények statisztikai kiértékelésének módja A Enterobacteriaceae számának meghatározásánál a laboratóriumok vizsgáló teljesítményértékelését az ISO 13528:2005 szabvány elıírásai szerint végeztük el, amely során a z-score alapú értékelési módszert alkalmaztuk: A z-score értékeket, vagy z -score értékeket számoltuk a valódi koncentráció, ill. hozzárendelt érték meghatározásának bizonytalanságától függıen a következı séma szerint: vagy, ha 0,3 s p < u(x) 0,7 s p akkor ahol: x i : a résztvevı laboratórium mérési eredménye X: a meghatározandó komponens valódi koncentrációja, vagy hozzárendelt érték s p : a választott szórás, a szórás célértéke u(x): a valódi koncentráció vagy hozzárendelt érték meghatározásának bizonytalansága Az egyenletekbıl az ismeretleneket, a valódi vagy hozzárendelt értéket [X], annak bizonytalanságát [u(x)] és a szórás célértékét [s p ] a következı elvek szerint határoztuk meg: 1. Mivel a hozzárendelt vagy valódi értéket elızetesen nem ismertük, és az eredmények száma több volt, mint 7 valódi, vagy hozzárendelt értéket (X) a telepszám eredmények - tízes alapú logaritmusa-, robusztus átlagának a meghatározásával becsültük. Ekkor adódódik a robusztus szórás (s*) értéke is. 7

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. 2. A robusztus átlag vagy valódi érték becslésének bizonytalanságát az összefüggéssel határoztuk meg, ahol a p a résztvevık száma. A robusztus átlag számítás módszerének elınye az, hogy a kiugró eredményeket nem egyszerően elhagyjuk (Dixon-próba és a Grubb-teszt), hanem a medián (középsı érték) egy bizonyos távolságába visszahúzzuk. Ezzel a kiugró eredmények eltérési iránya megmarad, de a közös átlag értékébe nem hatnak számottevıen és így nem torzítják azt. 3. A szórás célértékére (s p ) a 0,250 értéket alkalmazzuk a 0,5 log 10 szabályt figyelembe véve, ami azt jelenti, hogy a mérési eredmények 95%-os valószínőséggel a lg(hozzárendelt érték) ± 0,5 tartományba esnek. A módszer elınye az, hogy kívülrıl írjuk elı a szórás célértékét a résztvevık számára, nem pedig a résztvevık eredményébıl, szórásából számított, a résztvevık képességeitıl függı érték lesz, másrészt a homogenitás vizsgálatokat is e célszórások felhasználásával tudjuk elızetesen értékelni. 8

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. A z-score és a z -score meghatározásának folyamatábrája a tejminták mikrobiológiai jártassági vizsgálatának az értékelése során (15-2011 számú élelmiszerlánc jártassági vizsgálat): Valódi érték (X) és annak bizonytalansága (u(x)): Szórás célérték (S p ) meghatározása: START START Valódi, vagy hozzárendelt érték=a telepszámok tízes alapú logaritmusainak robusztus átlaga Bizonytalanság= a robusztus átlag bizonytalansága Sp= 0,250 u(x) 0,3 S p N u(x) 0,7 S p N * I I z-score számolás: z -score számolás: A megbízható valódi vagy referencia érték hiánya miatt az értékelés nem végezhetı el. STOP STOP STOP *: Ettıl a 70%-tól azaz 0,7-tıl némileg el lehet térni. [The International Harmonised Protocol for the Proficiency Testing of (Chemical) Analytical Laboratories. (Nemzetközi Egyeztetett Protokoll [szabály] a Kémiai Analitikai Laboratóriumok Jártassági Vizsgálatára) (IUPAC Technical Report), Pure Appl. Chem., Vol. 78, No. 1, pp. 145 196, (2006).] 9

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. Minısítés a z-score vagy z -score alapján: A z- és a z -score abszolút értékének kritikus értéke a 2,0 és a 3,0. Ha az illetı laboratóriumnál a z vagy z -score abszolút értéke kisebb, vagy egyenlı mint 2, akkor az illetı laboratórium tevékenysége nem igényel beavatkozást. Ha z vagy z -score abszolút értéke 2 és 3 közé esik, akkor az illetı laboratórium tevékenysége figyelmeztetı jelzéssel rendelkezik, kérdıjeles, de nem igényel feltétlenül beavatkozást. Ha z vagy z -score abszolút értéke nagyobb, mint 3, akkor az illetı laboratórium tevékenysége beavatkozást igényel. Az értékelés informatikai módszere: A jártassági vizsgálati eredmények érékelésére, a vizsgáló teljesítmények becslésére és a zárójelentés készítésére használt számítástechnikai módszer a Mőszaki Technológiai Laboratórium saját fejlesztése. A számítási módszerek, algoritmusok az ISO 13528:2005, a IUPAC és a FAPAS elıírások szerint valósulnak meg. (A pontos hivatkozások az 1. oldalon találhatók). A számítástechnikai módszerünk végeredményeit az elıbbi leírások gyakorlati példáin keresztül több lépcsıben is teszteltük. IV. A jártassági vizsgálatban részt vett laboratóriumok Szervezet Baranya Megyei Kormányhivatal Élelmiszerlánc-bizt. és Állategészségügyi Ig. Laboratórium BORSOD-ABAÚJ-ZEMPLÉN MEGYEI KORMÁNYHIVATAL NÉPEGÉSZSÉGÜGYI SZAKIGAZGATÁSI SZERVE Budapest Fıváros KH Népegészségügyi Szakigazgatási Szerve DABIC Nonprofit Kft. Minıségvizsgáló Laboratóriuma ÉMI-TÜV SÜD Kft. KERMI Osztály Eszterházy Károly Fıiskola Egerfood Mikrobiológiai Laboratórium FumoPrep Kft. Gyır-Moson-Sopron Megyei Kormányhivatal Élelmiszerlánc-bizt. és Állategészségügyi Igazgatósága LAB-Ka Kft. Laboratórium Kft. M.A.H. Food-Controll Kft. NÉBIH ÉTbI Debreceni Regionáis Élelmiszerlánc Laboratórium NÉBIH ÉTbI Kaposvári Regionális Élelmiszerlánc Laboratórium NÉBIH ÉTbI Kecskeméti Regionális Élelmiszerlánc Laboratórium NÉBIH ÉTbI Székesfehérvári Regionális Élelmiszerlánc Laboratórium NÉBIH ÉTbI Veszprémi Regionális Élelmiszer-mikrobiológiai Laboratórium Országos Húsipari Kutatóintézet Közhasznú Nonprofit Kft. XILÓZ Kft. Helység Pécs Miskolc Budapest Szentes Budapest Eger Mórahalom Gyır Karcag Nyíregyháza Budapest Debrecen Kaposvár Kecskemét Székesfehérvár Veszprém Budapest Szeged 10

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. V. A vizsgálatok specifikussága, érzékenysége és pontossága Specifikusság (specificity) arány A specifikusság arányt a negatív (L 3 mintacsoport) mintáira határoztuk meg. A laboratóriumok által megadott negatív minták számát az alábbi ábra mutatja: Negatív minták eredményei 3 Mintaszám 2 1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 Laborkód A vizsgált 27 mintából 26 mintát találtak negatívnak a laboratóriumok. A specifikusság arány: ahol N N + 26 x 100 = x 100 = 96% 27 N+: a laboratóriumok által talált negatív minták száma N-: a kiküldött negatív minták száma (az elvárt negatív eredmények száma) 11

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. Érzékenység (sensibility) arány Az érzékenység arányt a pozitív mintákra (L 1 és L 2 mintacsoport) határoztuk meg. Minden laboratórium 2 db pozitív mintát kapott. A laboratóriumok által megadott pozitív minták számát az alábbi ábra mutatja: 3 2 Mintaszám 1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 Laborkód A vizsgált 26 mintából 28 mintát találtak pozitívnak a laboratóriumok. Az érzékenység arány: ahol P + P 28 x 100 = x 100 = 108% 26 P+: a laboratóriumok által talált pozitív minták száma P-: a kiküldött pozitív minták száma (az elvárt pozitív eredmények száma) 12

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. Pontosság (accuracy) arány Az egyes laboratóriumok pontosság aránya: Az egyes laboratóriumokra vonatkozó pontosság arányt az alábbi ábra mutatja: Összes minta eredménye Pontosság % 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 Laborkód Az összes laboratóriumra vonatkozó pontosság arány: A jártassági vizsgálat helyes eredményeinek száma ( pozitív + negatív) A jártassági vizsgálatban vizsgált minták száma 51 x 100 = x 100 = 94,4% 54 13

14

8-2012 szám ú élelm iszerlánc jártassági vizsgálat Listeria m onocytogenes kim utatása tejben A Listeria monocytogenes kimutatás értékelése Laboratórium jártassági vizsgálati kódja Listeria monocytogenes Minta eredeti jele Megadott Eredmény Kiadott minta Listeria monocytogenes Minta eredeti jele Megadott Eredmény Kiadott minta Minta eredeti jele Negatív minta Megadott Eredmény Kiadott minta 1 L-664 pozitív pozitív L-126 pozitív pozitív L-103 negatív negatív Megfelelt 2 L-641 pozitív pozitív L-901 pozitív pozitív L-68 negatív negatív Megfelelt 3 L-691 pozitív pozitív L-211 negatív pozitv L-873 negatív negatív Értékelés Nem megfelelt 4 L-115 pozitív pozitív L-204 pozitív pozitív L-845 negatív negatív Megfelelt 5 L-663 pozitív pozitív L-909 pozitív pozitív L-852 negatív negatív Megfelelt 6 L-899 pozitív pozitív L-19 negatív negatív L-645 negatív negatív Megfelelt 7 L-886 pozitív pozitív L-864 negatív negatív L-651 negatív negatív Megfelelt 8 L-643 pozitív pozitív L-883 pozitív pozitív L-109 negatív negatív Megfelelt 9 L-900 pozitív pozitív L-674 pozitív pozitív L-862 negatív negatív Megfelelt 15

8-2012 szám ú élelm iszerlánc jártassági vizsgálat Listeria m onocytogenes kim utatása tejben Laboratórium jártassági vizsgálati kódja Listeria monocytogenes Minta eredeti jele Megadott Eredmény Kiadott minta Listeria monocytogenes Minta eredeti jele Megadott Eredmény Kiadott minta Minta eredeti jele Negatív minta Megadott Eredmény Kiadott minta Értékelés 10 L-895 pozitív pozitív L-619 negatív negatív L-54 negatív negatív Megfelelt 11 L-99 pozitív pozitív L-601 negatív negatív L-859 negatív negatív Megfelelt 12 L-96 pozitív pozitív L-612 negatív negatív L-869 negatív negatív Megfelelt 13 L-136 pozitív pozitív L-621 negatív negatív L-893 negatív negatív Megfelelt 14 L-692 pozitív pozitív L-615 negatív negatív L-44 negatív negatív Megfelelt 15 L-652 pozitív pozitív L-9 pozitív negatív L-31 pozitív negatív Nem megfelelt 16 L-894 pozitív pozitív L-113 pozitív pozitív L-611 negatív negatív Megfelelt 17 L-214 pozitív pozitív L-13 negatív negatív L-849 negatív negatív Megfelelt 18 L-662 pozitív pozitív L-896 pozitív pozitív L-605 negatív negatív Megfelelt 16

17

8-2012 0 1 2 sz. élelm iszerlánc n c jártassági vizsgálat t E nterobaktérium m szám á m m eghatározása tejbıl Tejminta Enterobaktériumszám kiértékelı lap Eredmények Értékelések Labor- Enterobaktériumszám Bizonytalanság(±) Eltérés E n szám z-score Minısítés kód [lg(cfu/g)] [lg(cfu/g)] a referencia z- v. z'-score értéktıl alapján 3 1,079 N.A. -1,830 N.A. -7,322 BI 4 2,063 N.A. -0,846 N.A. -3,386 BI 17 2,114 N.A. -0,795 N.A. -3,182 BI 2 2,653 N.A. -0,256 N.A. -1,026 NIB 18 2,681 N.A. -0,228 N.A. -0,914 NIB 9 2,708 N.A. -0,201 N.A. -0,806 NIB 1 2,881 N.A. -0,029 N.A. -0,115 NIB 7 2,903 N.A. -0,006 N.A. -0,026 NIB 10 2,944 N.A. 0,035 N.A. 0,138 NIB 8 2,949 N.A. 0,040 N.A. 0,158 NIB 6 2,954 N.A. 0,045 N.A. 0,178 NIB 5 2,973 N.A. 0,064 N.A. 0,254 NIB 14. 2,996 N.A. 0,087 N.A. 0,346 NIB 15 3,029 N.A. 0,120 N.A. 0,478 NIB 13 3,047 N.A. 0,138 N.A. 0,550 NIB 11 3,055 N.A. 0,146 N.A. 0,582 NIB 16 3,176 N.A. 0,267 N.A. 1,066 NIB 12 3,281 N.A. 0,372 N.A. 1,486 NIB eredmények száma: 18 átlag: 2,75 Robusztus szórás (s.d.): 0,183 szórás: 0,525 Robusztus r.s.d. %: 6,30 CV%: 19,08 medián: 2,95 A robusztus átlag számolás során elmozduló eredmények száma: 7 Hozzárendelt érték (robusztus átlag): Hozzárendelt érték bizonytalansága : Célszórás: 2,909 0,0540 0,2500 (z- vagy z'-score számítás nevezıje: 0,2500 Magyarázat: Követelmény az En számra, hogy ± 1 közé essen. A z-vagy z'-score alapú minısítés: NIB : Nem igényel beavatkozást NIFB : Nem igényel feltétlenül beavatkozást, de az eredmény figyelmeztetı jelzéssel rendelkezik, kérd de az eredmény figyelmeztetı jelzéssel rendelkezik, kérdıjeles. BI : Bevatkozást igényel 18

E nterobaktérium szám m eghatározása tejbıl Enterobaktériumszám eredmények grafikusan 3,800 3,600 lg CFU/g 3,400 3,200 3,000 2,800 2,600 2,400 2,200 Enterobaktériu mszám Ref. érték +3s +2s -2s -3s 2,000 3 4 17 2 18 9 1 7 10 8 6 5 14. 15 13 11 16 12 Laborkód 19

E nterobaktérium szám m eghatározása tejbıl Tejminta A z-score vagy z'-score értékek és ezek hisztogramja Enterobaktériumszám z- vagy z'-score 3,00 2,00 1,00 0,00-1,00-2,00-3,00 3 4 17 2 18 9 1 7 10 8 6 5 14. 15 13 11 16 12 Laborkód Enterobaktériumszám 6 5 Laboratóriumok száma 4 3 2 1 0 <-3,25-3 -2,5-2 -1,5-1 -0,5 0 +0,5 +1 +1,5 +2 +2,5 +3 > 3,25 z- vagy z'-score érték 20

21

8-2011 0 1 1 sz. élelm iszerlánc n c jártassági vizsgálat t élesztıgom t bák szám ának m eghatározása K aukázusi kefírbıl. Élesztıgombaszám kiértékelı lap Eredmények Értékelések Labor- Élesztıgombaszám Bizonytalanság(±) Eltérés E n szám z-score Minısítés kód [lg(cfu/g)] [lg(cfu/g)] a referencia z- v. z'-score értéktıl alapján 3 2,146 N.A. -2,913 N.A. -11,651 BI 4 2,239 N.A. -2,820 N.A. -11,279 BI 2 4,362 N.A. -0,697 N.A. -2,787 NIFB 9 4,857 N.A. -0,202 N.A. -0,807 NIB 15 4,945 N.A. -0,114 N.A. -0,455 NIB 5 4,985 N.A. -0,074 N.A. -0,295 NIB 17 5,021 N.A. -0,038 N.A. -0,151 NIB 16 5,079 N.A. 0,020 N.A. 0,081 NIB 1 5,079 N.A. 0,021 N.A. 0,082 NIB 12 5,097 N.A. 0,038 N.A. 0,153 NIB 18 5,114 N.A. 0,055 N.A. 0,221 NIB 14. 5,127 N.A. 0,068 N.A. 0,273 NIB 11 5,146 N.A. 0,087 N.A. 0,349 NIB 13 5,155 N.A. 0,096 N.A. 0,385 NIB 7 5,186 N.A. 0,127 N.A. 0,509 NIB 8 5,204 N.A. 0,145 N.A. 0,581 NIB 10 5,204 N.A. 0,145 N.A. 0,581 NIB 6 5,255 N.A. 0,196 N.A. 0,785 NIB eredmények száma: 18 átlag: 4,73 Robusztus szórás (s.d.): 0,149 szórás: 0,946 Robusztus r.s.d. %: 2,95 CV%: 19,98 medián: 5,09 A robusztus átlag számolás során elmozduló eredmények száma: 4 Hozzárendelt érték (robusztus átlag): Hozzárendelt érték bizonytalansága : Célszórás: 5,059 0,0440 0,2500 (z- vagy z'-score számítás nevezıje: 0,2500 Magyarázat: Követelmény az En számra, hogy ± 1 közé essen. A z-vagy z'-score alapú minısítés: NIB : Nem igényel beavatkozást NIFB : Nem igényel feltétlenül beavatkozást, de az eredmény figyelmeztetı jelzéssel rendelkezik, kérd de az eredmény figyelmeztetı jelzéssel rendelkezik, kérdıjeles. BI : Bevatkozást igényel 22

7-2012 szám ú élelm iszerlánc jártassági vizsgálat E. coli kim utatása és m eghatározása takarm ányban Élesztıgombaszám eredmények grafikusan 6,000 5,500 lg CFU/g 5,000 4,500 4,000 3,500 3,000 2,500 Élesztıgombas zám Ref. érték +3s +2s -2s -3s 2,000 3 4 2 9 15 5 17 16 1 12 18 14. 11 13 7 8 10 6 Laborkód 23

7-2012 szám ú élelm iszerlánc jártassági vizsgálat E. coli kim utatása és m eghatározása takarm ányban x. számú A z-score vagy z'-score értékek és ezek hisztogramja Élesztıgombaszám z- vagy z'-score 3,00 2,00 1,00 0,00-1,00-2,00-3,00 3 4 2 9 15 5 17 16 1 12 18 14. 11 13 7 8 10 6 Laborkód Élesztıgombaszám 7 6 Laboratóriumok száma 5 4 3 2 1 0 <-3,25-3 -2,5-2 -1,5-1 -0,5 0 +0,5 +1 +1,5 +2 +2,5 +3 > 3,25 z- vagy z'-score érték 24

25

8-2011 0 1 1 sz. élelm iszerlánc n c jártassági vizsgálat t tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása K aukázusi kefírbıl. Tejsavtermelı baktériumok kiértékelı lap Labor- Tejsavtermelı baktériumok Bizonytalanság(±) Eltérés E n szám kód [lg(cfu/g)] [lg(cfu/g)] a referencia értéktıl z-score Minısítés z- v. z'-score alapján 3 2,382 N.A. -6,729 N.A. -26,917 BI 9 8,987 N.A. -0,124 N.A. -0,497 NIB 18 9,000 N.A. -0,111 N.A. -0,445 NIB 7 9,021 N.A. -0,090 N.A. -0,361 NIB 14. 9,061 N.A. -0,050 N.A. -0,201 NIB 12 9,076 N.A. -0,035 N.A. -0,141 NIB 13 9,152 N.A. 0,041 N.A. 0,163 NIB 4 9,167 N.A. 0,056 N.A. 0,223 NIB 10 9,204 N.A. 0,093 N.A. 0,371 NIB 6 9,230 N.A. 0,119 N.A. 0,475 NIB 16 9,248 N.A. 0,137 N.A. 0,547 NIB 8 9,279 N.A. 0,168 N.A. 0,671 NIB eredmények száma: Eredmények 12 átlag: 8,57 Robusztus szórás (s.d.): 0,135 szórás: 1,950 Robusztus r.s.d. %: 1,48 CV%: 22,77 medián: 9,11 A robusztus átlag számolás során elmozduló eredmények száma: 1 Értékelések Hozzárendelt érték (robusztus átlag): Hozzárendelt érték bizonytalansága : Célszórás: 9,111 0,0486 0,2500 (z- vagy z'-score számítás nevezıje: 0,2500 ) Magyarázat: Követelmény az En számra, hogy ± 1 közé essen. A z-vagy z'-score alapú minısítés: NIB : Nem igényel beavatkozást NIFB : Nem igényel feltétlenül beavatkozást, de az eredmény figyelmeztetı jelzéssel rendelkezik, kérdıjeles. de az eredmény figyelmeztetı jelzéssel rendelkezik, kérdıjeles. BI : Bevatkozást igényel 11,000 10,000 lg(cfu/g) 9,000 8,000 7,000 6,000 5,000 4,000 3,000 2,000 3 9 18 7 14. 12 13 4 10 6 16 8 Laborkód Tejsavtermel ı baktériumok Ref. érték +3s +2s 26

8-2011 sz. élelm iszerlánc jártassági vizsgálat tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása K aukázusi kefírbıl. A z-score vagy z'-score értékek és ezek hisztogramja 3,00 2,00 Tejsavtermelı baktériumok z- vagy z'-score 1,00 0,00-1,00-2,00-3,00 3 9 18 7 14. 12 13 4 10 6 16 8 Laborkód Tejsavtermelı baktériumok 5 4 Laboratóriumok száma 3 2 1 0 <-3,25-3 -2,5-2 -1,5-1 -0,5 0 +0,5 +1 +1,5 +2 +2,5 +3 > 3,25 z- vagy z'-score érték 27

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. Mellékletek 28

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. 1. számú melléklet: Értesítés a 8-2012 számú élelmiszerlánc jártassági vizsgálat mintáinak átvételérıl Feladó: Körvizsgálat MTL Küldve: 2012. május 3. 6:24 Címzett: szokolicsj@oai.hu; komari.laszlo@laboratoriumkft.hu; kokai.gizella@emi-tuv.hu; xiloz2010@gmail.com; hubam810@gmail.com; molnarl@oai.hu; lemmerj@oai.hu; kamank@oai.hu; scheilye@oai.hu; mahfood-controll@vnet.hu; szipolai@oai.hu; szeredia@oai.hu; info@lab-ka.hu; nagyedit@ohki.hu; dabic@invitel.hu; nagyne.erika@kmr.antsz.hu; naarzo@ektf.hu; csoltko.gabriella@emr.antsz.hu Másolatot kap: marthnej@oai.hu; Körvizsgálat MTL Tárgy: A 8-2012 jártassági vizsgálat mintáinak átadása Fontosság: Sürgıs Tisztelt Résztvevık! Értesítjük Önöket, hogy a 8-2012 számú jártassági vizsgálat (Tej és tejtermék mikrobiológiai vizsgálata) mintái 2012. május 8-án 9-16 óráig vehetık át a NÉBIH ÉTbI 1095 Budapest, Mester u. 81. szám alatti telephelyén. A minták biztonságos szállításhoz megfelelı hőtıtáskát hozzanak magukkal. Kérjük az üzenet olvasásának visszaigazolását! Köszönettel és üdvözlettel a Szervezık 29

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. 2. számú melléklet: Kísérılevél a mintákhoz Nemzeti Élelmiszerlánc-biztonsági Hivatal Élelmiszer- és Takarmánybiztonsági Igazgatóság 1024 Budapest, Keleti Károly út 24. Tel: 06/1/336-9474 Fax: 06/1/336-9169 E-mail: etbi@nebih.gov.hu www.nebih.gov.hu Ikt.sz.: 02.4/001508/ 0008/2012. Tárgy: 2012. május 8-i 08-2012-es kódú mikrobiológiai jártassági vizsgálat Ügyintézı: dr. Lırincz Tamás dr. Sréterné dr. Lancz Zsuzsa Marthné Schill Judit Dömsödi József Hiv. szám: - Melléklet: 2 db A 8-2012 számú Jártassági Vizsgálatban résztvevı Laboratóriumok vezetıi részére Székhelyén Tisztelt Laboratóriumvezetı Asszony/Úr! 2012. május 8-án a 08-2012-es kódszámú élelmiszerlánc mikrobiológiai jártassági körvizsgálat keretében 4 darab tej, valamint 2 db Kaukázusi kefír mintát küldünk Önöknek. A jártassági vizsgálat célja Listeria monocytogenes jelenlét hiányának megállapítása (3 tej minta) és Enterobacteriaceae szám (1 tej minta) élesztıgombaszám valamint tejsavtermelı baktériumok (1-1 db kaukázusi kefír minta) számának meghatározása. Kérjük, hogy a vizsgálatokat és az eredményközlést a mellékelt Útmutató és az e-mailben küldött Excel formátumú Eredményközlı szerint hajtsák végre. A bizalmas ügykezelés érdekében a 2012. évi élelmiszerlánc jártassgi vizsgálatokban résztvevıként kapott laboratóriumi kódszámukról egy zárt borítékban levı tájékoztatóból értesülnek, amelyet szintén mellékelünk. Budapest, 2012. május 8. Mellékletek: 1 db Útmutató 1 db Kódértesítı Üdvözlettel: dr. Pleva György igazgató 30

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. 3. számú melléklet: Útmutató a 8-2012 számú jártassági vizsgálat végrehajtásához 1. sz. melléklet: Útmutató a 08-2012 számú jártassági vizsgálat végrehajtásához A jártassági vizsgálat tárgya Listeria monocytogenes jelenlétének valamint Enterobacteriaceae, élesztőgombaszám valamint tejsavtermelő baktériumok számának meghatározása tejből valamint Kaukázusi kefírből. Az élelmiszerlánc jártassági körvizsgálat kódja: 08-2012. A jártasságivizsgálati minták átadásának időpontja: 2012. május 8-án 9-16 óráig. A vizsgálat elkezdésének időpontja: 2012. május 9 addig a mintákat 4 C-on kérjük tárolni. A minták biológiai veszélyt jelentenek, az erre vonatkozó laboratóriumi előírásokat be kell tartani. Vizsgálati minták A mintákat L mint Listeria monocytogenes E mint Enterobacteriaceae, ÉG mint Élesztőgomba valamint T Tejsavtermelő baktériumok betűvel, illetve arab számokkal jelöltük. A Listeria monocytogenes vizsgálat mintái 25 (± 0,2) ml-esek, az Enterobacteriaceae, élsztőgombaszám valamint a Tejsavtermelő bakteriumok vizsgálat mintái 10-10 (± 0,2) ml-esek, így a bemérésnél a minták teljes mennyiségét kérjük felhasználni. Az elődúsításokat, illetve alapszuszpenziókat a mintákat tartalmazó Stomacher-zacskóban kérjük elkészíteni. A vizsgálat jártassági jellegű, az alkalmazott módszer tekintetében megkötés nincs. Eredményközlés Kérjük, hogy a mérési eredményeket és a mérésekkel kapcsolatos egyéb információkat az e-mailben megkapott Excel formátumú eredményközlő lapon küldjék vissza a következő lehetőségek valamelyikére: E-mail: mtl-ringtest@nebih.gov.hu és másolatban lanczz@oai.hu Fax: (+36)-1-215-6858 Postacím: Marthné Schill Judit osztályvezető, NÉBIH, ÉTbI, Műszaki-technológiai Laboratórium 1095 Budapest, Mester u. 81. 31

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. Az e-mailen történő beküldési lehetőség választása esetén, papíron/faxon már nem szükséges megküldeni az eredményeket! Felhívjuk a figyelmet arra, hogy az Excel formátumú eredményközlő lap különböző munkalapjain találhatók a különböző vizsgálatok! A jártassági vizsgálattal kapcsolatos bármilyen kérdésben felvilágosítással szolgálnak: Marthné Schill Judit osztályvezető, a jártassági vizsgálat vezetője. Telefon: 06-1-467-0460, 06-1- 383-1190 Mobil:06-30-241-0938 E-mail: MarthneJ@nebih.gov.hu Sréterné dr. Lancz Zsuzsanna mikrobiológiai laboratóriumvezető és dr. Lőrincz Tamás témafelelős a jártassági vizsgálat szakértői. Telefon : 06-1-456-3010/139 Fax: 06-1-215-6851 Mobil: 06-30-867-0744 E-mail: lanczz@oai.hu Szerényi Viktor minıségirányítási mérnök, a jártassági vizsgálat koordinátora. Telefon: 06-1-467-0460/124. mellék Mobil: l(+36)-70-4360348 Email: szerenyiv@nebih.gov.hu Az eredmények beküldési határideje 2012. június 11. Budapest, 2012.05.08. Eredményes munkát kívánunk! Üdvözlettel: a Szervezők 32

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. 4. számú melléklet: Kódértesítı 2. sz. melléklet: Kódértesítı Nemzeti Élelmiszerlánc-biztonsági Hivatal Élelmiszer- és Takarmánybiztonsági Igazgatóság 1024 Budapest, Keleti Károly u. 24. Tel: 06/1/336-9474 Fax: 06/1/336-9169 E-mail: etbi.titkarsag@oai.hu www.nebih.gov.hu «Megr_Kapcs_tartó_Szervezet_neve_minta» «Kapcsolattartó»«Kapcst_Beosztás» részére «ISZ»«Város» «Utca_hsz» Tárgy: Értesítés jelentkezés elfogadásáról, jártassági vizsgálati kódszámról. Tisztelt «Kapcsolattartó» Asszony! Értesítjük, hogy elfogadtuk jelentkezésüket a NÉBiH, ÉTbI által szervezett 8-2012-es számú élelmiszerlánc mikrobiológiai jártassági vizsgálatra. A jártassági vizsgálatra megfelelő számú jelentkezés történt, így a jártassági vizsgálatot elindítottuk és ezúton küldjük a mintákat. Ebben a jártassági vizsgálatban az Önök vizsgálati eredményeit a következő számmal kódoljuk: «Labor_Kód_2012» Nyomatékosan kérjük, hogy vizsgálati eredményeiket csak ezzel a kóddal ellátva közöljék! A bizalmas ügykezelés érdekében, kérjük az alábbiak betartását: Vizsgálati adatokat csak az általunk elektronikusan küldött Excel állomány eredményközlő lapon közöljenek. Az eredményközlő lapon csak az Önök azonosító kódja szerepeljen, minden más adat feltüntetése, még a mérést végző személy neve is, szükségtelen. A vizsgálatok elvégzése után elegendő, ha elektronikus levél csatolt mellékleteként küldik el a kitöltött eredményközlő lapot a mtl-ringtest@mgszh.gov.hu és másolatban a lanczz@oai.hu címekre. (Mi ezeket visszaigazoljuk.) 33

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. Az adatokat csak akkor fogadjuk el elektronikusan, ha a jelentkezési lapjukon feltüntetett kapcsolattartójuk (képviselőjük) e-mail címéről érkezik. Elektronikus aláírást nem várunk el. Ha e-mailen kapcsolt Excel állományban küldik el nekünk a vizsgálati eredményeiket, akkor nem várjuk el a papíralapú adatközlésüket. Nyilatkozat: A NÉBiH Élelmiszer- és Takarmánybiztonsági Igazgatóság vezetősége és a jártassági vizsgálatot szervező munkatársak kijelentik, hogy munkájuk során az Önök adatait, kódját és eredményeit bizalmasan kezelik. A mérési eredményüket és annak értékelését a záró jelentésben és publikációkban csak a kódszámmal jelölik. Amennyiben szabályozó hatóság közvetlenül kéri a jártassági vizsgálat eredményét, erről a Laboratóriumot írásban értesítik. Budapest, 2012.05.08. Üdvözlettel: A Szervezők 34

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. 5. számú melléklet: A 8-2012 számú élelmiszerlánc JV eredményközlıjének és útmutatójának küldése Feladó: Körvizsgálat MTL Küldve: 2012. május 3. 6:24 Címzett: szokolicsj@oai.hu; komari.laszlo@laboratoriumkft.hu; kokai.gizella@emi-tuv.hu; xiloz2010@gmail.com; hubam810@gmail.com; molnarl@oai.hu; lemmerj@oai.hu; kamank@oai.hu; scheilye@oai.hu; mahfood-controll@vnet.hu; szipolai@oai.hu; szeredia@oai.hu; info@lab-ka.hu; nagyedit@ohki.hu; dabic@invitel.hu; nagyne.erika@kmr.antsz.hu; naarzo@ektf.hu; csoltko.gabriella@emr.antsz.hu Másolatot kap: marthnej@oai.hu; Körvizsgálat MTL Tárgy: A 8-2012 jártassági vizsgálat eredményközlıjének és vizsgálati útmutatójának megküldésse Fontosság: Sürgıs Tisztelt Résztvevık! Mellékelten megküldjük a 8-2012 jártassági vizsgálat eredményközlójét és vizsgálati útmutatóját, amelyben a mintával küldötthöz képest az alábbi kiegészítés található. Kiegészítés a 8-2012 ÉJV útmutatóhoz: A 8-2012 ÉJV tejsavbaktérium szám meghatározást kérjük 5 nap alatt 30 C -n és anaerob körülmények között elvégezni szíveskedjenek. Kérjük ezen üzenet olvasásának visszaigazolását. Köszönettel: Szervezık 35

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. 6. számú melléklet: Eredményközlı lap Eredményközı lap tej Listeria monocytogenes vizsgálatához A jártassági vizsgálat tárgya: Tej mikrobiológiai vizsgálata A jártassági vizsgálat ideje: 2012. május - június Kérjük, hogy csak a színes mezıkbe és egy-egy mezıbe max. 255 karaktert írjon. A laboratórium jártassági vizsgálati kódja: A mintaérkezés dátuma: A vizsgálat befejezésének dátuma: Visszaküldési határidı: 2012.06.11 E-mail: mtlringtest@nebih.go v.hu; és másolatban lanczz@oai.hu Laboratórium körvizsgálati kódja A minta laboratóriumi azonosítója: A minta eredeti jele: Jártassági vizsgálat száma Vizsgálati csomag Vizsgálat Eredmény Eredmény Eredmény 8-2012 Tej mikrobiológia Listeria monocytogenes jelenléte 25 ml mintában Megjegyzés: 36

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. Kérjük, a módszerrel kapcsolatos alábbi kérdések megválaszolását. Elıdúsítás Dúsítás Vizsgálati módszer azonosítója Táptalaj Hımérséklet ( o C) Idı (óra) Táptalaj Hımérséklet ( o C) Idı (óra) Izolálás Táptalaj 1. Táptalaj 2. Hımérsékl et ( o C) Idı (óra) Azonosítási reakciók 37

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. Eredményközı lap tej Enterobacteriaceae vizsgálatához A jártassági vizsgálat tárgya: Tej mikrobiológiai vizsgálata A jártassági vizsgálat ideje: 2012. május-június Kérjük, hogy csak a színes mezıkbe és egy-egy mezıbe max. 255 karaktert írjon. A laboratórium jártassági vizsgálati kódja: A mintaérkezés dátuma: A vizsgálat befejezésének dátuma: Visszaküldési határidı: 2012.06.11 E-mail: mtlringtest@nebih. gov.hu; és másolatban lanczz@oai.hu A minta laboratóriumi azonosítója: A minta eredeti jele: Laboratórium körvizsgálati kódja Jártassági vizsgálat száma Vizsgálati csomag Vizsgálat Mértékegység 8-2012 Tej mikrobiológia Enterobacteriaceae száma CFU/ml 1. minta Eredmény 1. minta lg(eredmény) Megjegyzés: 1. minta Hígítás Lemez 1. Lemez 2. 10-1 10-2 10-3 38 10-4 10-5

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. Kérjük, a módszerrel kapcsolatos alábbi kérdések megválaszolását. Vizsgálati módszer azonosítója Táptalaj Hımérsék-let ( o C) Idı (óra) Azonosítási reakciók 39

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. Eredményközı lap tejtermék élesztıgomba vizsgálatához A jártassági vizsgálat tárgya: Tej mikrobiológiai vizsgálata A jártassági vizsgálat ideje: 2012. május-június Kérjük, hogy csak a színes mezıkbe és egy-egy mezıbe max. 255 karaktert írjon. Laboratórium körvizsgálati kódja Jártassági vizsgálat száma A laboratórium jártassági vizsgálati kódja: A mintaérkezés dátuma: A vizsgálat befejezésének dátuma: A minta laboratóriumi azonosítója: A minta eredeti jele: Vizsgálati csomag Vizsgálat Mértékegység 8-2012 Tej mikrobiológia Enterobacteriaceae száma Visszaküldési határidı: 2012.06.11 CFU/ml 1. minta Eredmény 1. minta lg(eredmény) E-mail: mtlringtest@nebih. gov.hu; és másolatban lanczz@oai.hu Megjegyzés: 1. minta Hígítás Lemez 1. Lemez 2. 10-1 10-2 10-3 40

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. Kérjük, a módszerrel kapcsolatos alábbi kérdések megválaszolását. Vizsgálati módszer azonosítója Inkubáció Táptalaj Hımérsék-let ( o C) Idı (óra) Azonosítási reakciók 41

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. Eredményközı lap tejtermék tejsavtermelı baktériumok vizsgálatához A jártassági vizsgálat tárgya: Tejtermék mikrobiológiai vizsgálata A jártassági vizsgálat ideje: 2012. május-június Kérjük, hogy csak a színes mezıkbe és egy-egy mezıbe max. 255 karaktert írjon. Laboratórium körvizsgálati kódja Jártassági vizsgálat száma A laboratórium jártassági vizsgálati kódja: A mintaérkezés dátuma: A vizsgálat befejezésének dátuma: A minta laboratóriumi azonosítója: A minta eredeti jele: Vizsgálati csomag Vizsgálat Mértékegység 8-2012 Tej mikrobiológia Enterobacteriaceae száma Visszaküldési határidı: 2012.06.11 CFU/ml 1. minta Eredmény 1. minta lg(eredmény) E-mail: mtlringtest@nebih. gov.hu; és másolatban lanczz@oai.hu Megjegyzés: 1. minta Hígítás Lemez 1. Lemez 2. 10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6 10-7 10-8 42

L isteria m onocytogenes jelenlétének valam int E nterobacteriaceae, élesztıgom baszám, tejsavterm elı baktérium ok szám ának m eghatározása tejbıl illetve K aukázusi kefírbıl. Kérjük, a módszerrel kapcsolatos alábbi kérdések megválaszolását. Inkubáció Vizsgálati módszer azonosítója Táptalaj Hımérsék-let ( o C) Idı (óra) Azonosítási reakciók 43

A 8-2012 számú élelmiszerlánc jártassági vizsgálat szervezésért és értékeléséért felelıs szervezeti egység: Nemzeti Élelmiszerlánc-biztonsági Hivatal Élelmiszer- és Takarmánybiztonsági Igazgatóság Mőszaki-technológiai Laboratórium Cím: 1095 Budapest, Mester u. 81. E-mail: mtl-ringtest@nebih.gov.hu A jártassági vizsgálat idıtartama 2012. május - október A zárójelentés felelıs szerkesztıje: M. Schill Judit Osztályvezetı A jártassági vizsgálat vezetıje NÉBIH, ÉTbI Mőszaki-technológiai Laboratórium A zárójelentést szerkesztette: Dömsödi József Minıségbiztosítási mérnök A jártassági körvizsgálat koordinátora NÉBIH, ÉTbI Mőszaki-technológiai Laboratórium A jártassági vizsgálat szakértıi: dr. Sréterné dr. Lancz Zsuzsanna osztályvezetı dr. Lırincz Tamás témafelelıs NÉBIH, ÉTbI Élelmiszer Mikrobiológiai Nemzeti Referencia Laboratórium A zárójelentést jóváhagyta: Dr. Pleva György NÉBIH Élelmiszer- és takarmánybiztonsági igazgató fıállatorvos ---- A zárójelentés vége ---- 44