Haematológiai automatizáció: tapasztalataink az új Sysmex XT-2000 automatával az elmúlt 5 hónap során Nagy Nóra Gróf Esterházy Kórház Laboratórium
Az előadás felépítése a mérési elvekről röviden mért és számított paraméterek tapasztalataink az új haematológiai automatával
Automatizáció a haematológiában Alapja a Coulter által 1948 ban kifejlesztett elektromos impedancia (ún. Coulter-elv) volt. A legtöbb automata a vvt-k és thrombocyták analízisére ma is ezt a módszert használja. A 3 part diffes automaták így végezték az fvs analízist is.
Elektromos impedancia elv A mintát jól vezető oldattal hígítják. A sejtek rosszabb vezetők, mint a hígító oldat. Ha szűk kapilláris nyíláson, elektródok között sejt halad át, az ellenállás megnő, ez elektromos impulzust eredményez, amely nagysága a sejt térfogatával, száma az alkotók mennyiségével arányos.
Automata haemoglobin analízis A haemoglobint eleinte hemiglobin-cianid származékká alakították, amely 540 nm-en volt fotometrálható. A veszélyes hulladék képződésének elkerülése végett újabban nátrium-lauril-szulfát segítségével képeznek 555 nm-en mérhető haemiglobin származékot a vér haemoglobinból. A Sysmex XT-2000 automata a vörösvérsejteket és a thrombocytákat elektromos impedancia, a haemoglobint Na-lauril-szulfát módszerrel méri.
A fényszórás elve A minta fókuszált fényforrás előtt (ált. lézer) halad el, a sejtekről a fény különböző irányban szóródik. A szóródó fényt speciális szögben elhelyezett detektorok fogják be. Az előre vagy kis szögben szórt fény a sejt méretéről, az oldalra vagy nagy szögben szórt fény a sejt belső szerkezetéről ad felvilágosítást.
5 part diffes automaták A fényszórás elvén működnek. A vörösvérsejt és a thrombocytaszámot vagy a Coulter, vagy fényszórás elven határozzák meg. A fehérvérsejtek 5 populációját különítik el: granulocyták, lymphocyták, monocyták, eosinophilek és basophilek, ezeket ún. felhőképeken jelenítik meg.
6 part diffes automaták Fluoreszcens festék alkalmazásával, fluoreszcens jelet érzékelő detektor beépítésével a 6. frakció az ún. éretlen granulocyta (IG) frakció. A nagyobb nukleinsav (RNS, DNS) tartalmú sejtek jobban kötik a fluoreszcens festéket, tehát a blastok, éretlen sejtek nagyobb jelet adnak.
Fluoreszcens festés alkalmazása
Fluoreszcens festés alkalmazása
Mért paraméterek fehérvérsejt 109/l (G/l) vörösvérsejt 1012 /l (T/l) haemoglobin g/dl, g/l haematokrit % thrombocyta 109/l (G/l) granulocyták, lymphocyták, monocyták, eosinophilek, basophilek, éretlen granulocyták abszolút értékben 109/l (G/l)
Számított paraméterek MCV átlagos vvt térfogat (mean cell volume) haematokrit/vvt szám fl MCH átlagos haemoglobin tartalom (mean cell haemoglobin) haemoglobin/vvt szám pg MCHC átlagos sejthaemoglobin koncentráció (mean corpuscular hgb. concentration) haemoglobin/ haematokrit g/dl g/l
Számított paraméterek RDW vvt eloszlási görbe szélessége (red cell distribution width), az anisocytosis mérőszáma RDW-CV 1SD/MCV % RDW-SD térfogat eloszlási hisztogram a görbemagasság 20%-nál mért szélessége fl
Számított paraméterek MPV átlagos thrombocyta térfogat (mean platelet volume) fl PDW thrombocyta térfogat eloszlási görbe szélessége (platelet distribution width) fl P-LCR nagy thrombocyták aránya (platelet large cell ratio) % PCT thrombokrit (plateletkrit) %
A vérkép és kenet vizsgálat menete laboratóriumunkban Minden vérképet gondosan átnézünk az automata számítógépén, kiválogatjuk a vérképeket, amelyekből vérkenet vizsgálat szükséges. Második lépésben a beteg adataival, diagnózisával, előző eredményeivel összevetve születik meg a végleges döntés. Az automata nagy segítség a szűrésben, de természetesen nem helyettesíti a szakembert.
Tapasztalataink az új haematológiai automatával
Tapasztalataink az új haematológiai automatával
Tapasztalataink az új haematológiai automatával Az éretlen granulocyta frakció: stab, jugend, myelocyta, promyelocyta lehet. Atypusos lymphocyták, blastok közé sorolhatja a reakív lymphocytákat, atypusos lymhoid sejteket, blastokat. Ezekben az esetekben kenetet kell nézni.
Tapasztalataink az új haematológiai automatával
Tapasztalataink az új haematológiai automatával
Tapasztalataink az új haematológiai automatával
Tapasztalataink az új haematológiai automatával
A Sysmex XT-2000 automata előnyei A vérkép megtekintése alapján eldönthető, hogy az adott minmintából szükséges-e vérkenet vizsgálat. Korrekt módon kiszűri a negatív vérképeket. Kisebb az álpozitív minták aránya. Felhívja a figyelmet a kóros eltérésekre.
Zavaró tényezők alvadék (levett mintát azonnal többször átforgatni) EDTA indukálta thrombocytopaenia (citrátos cső!) hideg agglutininek RBC, MCV, MCHC (37 fokon inkubálni a vérképet) krioglobulinemia pseudoleukocytosist okoz (37 fokon inkubálni a vérképet) lipémia (triglicerid >10 mmol/l) HGB, MCH, MCHC (vérkép ismétlés norm. triglicerid szintnél.)
Zavaró tényezők fragmentocyta, extrém mikrocyta RBC, PLT (vérkenet vizsgálata) óriás thrombocyták, thrombocyta aggregátumok WBC, PLT (vérkenet vizsgálata) állott vérminta HTK, MCV, PLT, WBC granulocyta szám (vérképet 4 órán belül lemérni) vércukor >33 mmol/l HCT, MCV
Vérkép vizsgálat Lehetőség van kis és nagy vérkép kérésére. nagy vérkép: fehérvérsejt differenciálás (granulocyta, lymphocyta, monocyta, eosinophil, baso) kis vérkép: vörösvérsejt és thrombocyta összes paraméterei mellett csak fehérvérsejt számot ad. Ha betegüktől vérkenet vizsgálatot kérnek, a nagy vérképet kérjük bejelölni.
Köszönöm a figyelmet!