QMS Lamotrigine (LTG) Kizárólag in vitro diagnosztikai felhasználásra 373795 11725 Használat előtt figyelmesen el kell olvasni ezt a kvantitatív mikroszférikus rendszerhez (Quantitative Microsphere System QMS) mellékelt tájékoztatót. Követni kell a tájékoztató utasításait. Ha nem tartják be a tájékoztatóban megfogalmazott utasításokat, nem garantálható a vizsgálati eredmények megbízhatósága. Rendeltetés A QMS Lamotrigin vizsgálat a lamotrigin kvantitatív meghatározására szolgál a humán szérumban vagy plazmában, automatikus klinikai kémiai analizátorokban. A lamotriginkoncentrációk a lamotriginnel kezelt betegek kezeléséhez nyújtanak segítséget. A vizsgálat összefoglalása és magyarázata A lamotrigin [3,5-diamino-6-(2,3-dichlorophenyl)-1,2,4-triazine] olyan anticonvulsans gyógyszer, amelyet epilepsziás kezelésben történő felhasználásra hagytak jóvá, és amelyet gyakran monoterápiásan és több epilepszia elleni gyógyszerből álló terápia egyik alkotórészeként egyaránt felírnak. 1 3 Az eljárás elvi alapjai A QMS Lamotrigin vizsgálat egy homogén részecskenövelt turbidimetriás immunvizsgálat. A vizsgálat alapja a mintabeli gyógyszer és a lamotrigin antitestreagens antitestmegkötő helyeinek microparticulumát bevonó gyógyszer hatásának versengése. A lamotriginnel bevont microparticularis reagens gyorsan agglutinál az anti-lamotrigin antitestreagens jelenlétében, ha a mintában nincs vele versengő gyógyszer. Az abszorbancia változásának sebességét fotometrikusan mérjük. Ha lamotrigint tartalmazó mintát adunk hozzá, az agglutinálási reakció részben gátlódik, így lelassul az abszorbancia változási sebessége. A koncentrációfüggő klasszikus agglutinációgátlási görbe a legkisebb lamotriginkoncentráció esetén tapasztalható legnagyobb agglutinálási sebesség és a legnagyobb lamotriginkoncentráció esetén tapasztalható legkisebb agglutinálási sebesség segítségével kapható meg. Reagensek Reagenskészlet A QMS Lamotrigin, 373795, 11725 felhasználásra kész folyadék kiszerelésben kapható, amely a következő két reagensből álló készletet tartalmazza: 1. reagens 1 x 19 ml 2. reagens 1 x 19 ml Reaktív összetevők Összetevő Koncentráció Anti-lamotrigin poliklonális antitest (juh) <5,% Nátrium-azid,9% Lamotriginnel bevont microparticulumok <1,% Nátrium-azid,9% Reagensek kezelése és tárolása és Felhasználásra kész. Használat előtt néhányszor fel kell fordítani, ügyelve arra, hogy ne keletkezzenek buborékok. Ha a reagenspatronban buborékok találhatók, azokat egy új applikátorpálcikával távolítsa el. Azt is megteheti, hogy a reagenst megfelelő tárolási hőmérsékleten addig pihenteti, amíg el nem oszlanak benne a buborékok. A térfogatvesztés minimalizálása érdekében ne használjon transzferpipettát a buborékok eltávolításához. Ha az vagy az esetén kiürül a reagenspatron, mindkét patront cserélje ki, és legalább két kontrollszinttel ellenőrizze a kalibrálást a laboratóriumában érvényes minőség-ellenőrzési követelményeknek megfelelően. Ha a kontrolleredmények az elfogadható tartományon kívül esnek, újrakalibrálásra lehet szükség. Véletlen kiömlés esetén az illető anyagot tisztítsa fel és távolítsa el hulladékként a laboratóriuma normál üzemeltetési eljárásainak és az országos és a helyi előírásoknak megfelelően, figyelembe véve, hogy potenciálisan fertőző anyagot tartalmaz. Ha egy szállított anyag megérkezésekor sérült a csomagolása, vegye fel a kapcsolatot a műszaki támogatási képviselőjével (az elérhetőségek a tájékoztató végén találhatók). VIGYÁZAT! A reagensbuborékok zavarhatják a patronban lévő reagens szintjének helyes érzékelését, és így az eredményeket befolyásoló elégtelen reagensleszívást okozhatnak. A 2 és 8 C közötti hőmérsékleten tárolt felbontatlan reagensek a lejárati idejükig stabilak maradnak. A reagenseket ne fagyassza le, és óvja őket a 32 C feletti hőmérséklettől. Figyelmeztetések és óvintézkedések A felhasználók által betartandó óvintézkedések In vitro diagnosztikai felhasználásra. Ne keverje össze a különböző készlet-tételszámú (sarzsszámú) anyagokat. VESZÉLY: A QMS Lamotrigine (LTG) vizsgálat 5,% gyógyszerre jellemző antitestet és 2,% humán szérum-albumint (HSA) tartalmaz. H317 - Allergiás bőrreakciót válthat ki. H334 - Belélegezve allergiás vagy asztmás tüneteket, és nehéz légzést okozhat. Kerülje a köd vagy gőzök belélegzését. Szennyezett munkaruhát tilos kivinni a munkahely területéről. Védőkesztyű/ szemvédő/arcvédő használata kötelező. Nem megfelelő szellőzés esetén légzésvédelem kötelező. Ha bőrre kerül: Bő szappanos vízzel le kell mosni. BELÉLEGZÉS ESETÉN: Ha a sérült légzési nehézséget mutat, az érintett személyt friss levegőre kell vinni és olyan nyugalmi testhelyzetbe kell helyezni, hogy könnyen tudjon lélegezni. Bőrirritáció vagy kiütések megjelenése esetén: orvosi ellátást kell kérni. Légzési problémák esetén: forduljon TOXIKOLÓGIAI KÖZPONTHOZ vagy orvoshoz. A szennyezett ruhát újbóli használat előtt ki kell mosni. A tartalom/edény elhelyezésének helye hulladékként: a helyi, regionális, országos és nemzetközi szabályok betartásával. VIGYÁZAT! Ez a termék humán eredetű és/vagy potenciálisan fertőző összetevőket tartalmaz. A humán vérből származó összetevők tesztjei szerint ezek nem reaktívak HBsAg, anti-hiv 1/2 és anti-hcv esetén. Egyetlen ismert tesztelési eljárás sem garantálhatja, hogy a humán eredetű termékek, illetve az inaktivált mikroorganizmusok nem terjesztenek fertőzést. Ezért minden humán eredetű anyagot ajánlott potenciálisan fertőző anyagnak tekinteni és a biológiailag veszélyes anyagok kezelésére kialakított megfelelő gyakorlat szerint kezelni. Minták gyűjtése és kezelése A QMS Lamotrigin vizsgálathoz a következő mintagyűjtő kémcsövek használhatók: Üveg Műanyag Szérum Nincs adalékanyag Szilikonos Szérumszeparátor kémcső (gél) Alvadás-elősegítő Plazma EDTA (K 3 ) EDTA (K 2 ) Lítium-heparin Nátrium-heparin Plazmaszeparátor kémcső lítiumheparinnal (gél) Más mintagyűjtő kémcső használata nincs jóváhagyva a QMS Lamotrigin vizsgálathoz. Szérum-, illetve plazmamintagyűjtő kémcső esetén kövesse a gyártó útmutatását. A minta nem megfelelő centrifugálása hibás eredményre vezethet. Ügyeljen arra, hogy a mintában ne legyen fibrin, vörösvérsejt és egyéb részecske. Mintavétel után a lehető leghamarabb válassza el a plazmát, illetve a szérumot a sejtektől, az alvadéktól, illetve a géltől. Előfordulhat, hogy egyes szérum- vagy plazmakémcsövek nem használhatók klinikai gyógyszermonitorozó vizsgálatokhoz; lásd a kémcső gyártója által adott információkat. 4 A sejtektől, alvadéktól, illetve géltől elválasztott minta legfeljebb egy hétig tárolható 2 és 8 C közötti hőmérsékleten. Ha a vizsgálatra csak egynél több hét múlva kerül sor, akkor a mintát addig fagyasztva kell tárolni ( 1 C hőmérsékleten). A legfeljebb egy hétig 2 8 C közötti hőmérsékleten, illetve a legfeljebb négy hétig fagyasztva tárolt minták ugyanolyan eredményt adtak (±1%-os nulla időpontbeli lamotriginkoncentrációval), mint a friss minták. Ügyelni kell arra, hogy ne legyen túl sok fagyasztás-felolvasztás ciklus. A QMS Lamotrigin vizsgálathoz a mintákat ajánlott közvetlenül a következő dózis beadása előtt (tehát a legalacsonyabb gyógyszer-koncentráció alkalmával) levenni. A lamotrigin terápiás szintjét legpontosabban a legalacsonyabb koncentráció jellemzi. 5,6 Eljárás A csomagban található anyagok QMS Lamotrigin reagensek, 373795, 11725 Szükséges, de a csomagban benne nem lévő anyagok QMS Lamotrigin kalibrátorok, 373787 CAL A F: A (1 x 2, ml); B F (mindegyik 1 1, ml) QMS Lamotrigin kontrollok, 3749 1 3. szint: mindegyik 1 x 2,5 ml Vizsgálati eljárás A vizsgálat végrehajtásának és kalibrálásának részletes ismertetése a berendezésspecifikus használati útmutatóban található. Mintahígítási eljárások A QMS Lamotrigin CAL A (, µg/ml) kalibrátorral kézzel hígítsa fel a mintát a vizsgálat szóródási tartományán kívülre. Kézi hígítási protokoll A betegtől származó minták 4, µg/ml-nél nagyobb mért lamotriginkoncentrációra történő kézi hígításához a mintákat a mintatároló edénybe történő pipettázásuk előtt hígítsa QMS Lamotrigin CAL A (, µg/ml) kalibrátorral. Úgy kell hígítani, hogy a hígított teszteredmények nagyobbak legyenek a vizsgálat 2, µg/ml-es érzékenységénél. A mért koncentrációt meg kell szorozni a kézi hígítási tényezővel, hogy megkapjuk a minta végső koncentrációját. A minta végső koncentrációja = Mért koncentráció x Kézi hígítási tényező Kézi hígítási tényező = (Minta térfogata + CAL A térfogata) Minta térfogata Kalibrálás A QMS Lamotrigin vizsgálatot (6 pontos) teljes kalibrálási eljárással kell kalibrálni. A teljes kalibráláshoz duplán tesztelje az A, B, C, D, E és F QMS Lamotrigin kalibrátorokat. Minden új tételszám (sarzsszám) esetén kalibrálni kell. Legalább két kontrollszinttel ellenőrizze a kalibrálási görbét a laboratóriumában érvényes minőség-ellenőrzési követelményeknek megfelelően. Ha a kontrolleredmények az elfogadható tartományon kívül esnek, újrakalibrálásra lehet szükség. Megjegyzés: Ehhez a vizsgálathoz a Lamotrigin CAL A adja az üres kalibrálást. Minőség-ellenőrzés Laboratóriumának normál üzemeltetési eljárása(i) és/vagy minőségbiztosítási terve tartalmazza a további minőségellenőrzési követelményeket és a potenciális korrekciós intézkedéseket. Minden minőség-ellenőrzési követelményt a helyi, állami és/vagy szövetségi útmutatásoknak, illetve akkreditációs előírásoknak megfelelően kell teljesíteni.
A QMS Lamotrigin vizsgálat ajánlott ellenőrzési követelményei: Legalább két, az orvosi döntéshozási tartományt átfogó ellenőrzési szintet kell alkalmazni 24 óránként. Ha gyakoribb ellenőrzéssel kell figyelni a minőséget, kövesse a laboratóriumában alkalmazott minőség-ellenőrzési eljárásokat. Ha a minőség-ellenőrzési eredmények nem a laboratóriuma által meghatározott elfogadható tartományba esnek, akkor gyanúsak lehetnek a beteg értékei, és az eljárást korrigálni kell. Eredmények A QMS Lamotrigin vizsgálat mérési eredményeinek mértékegysége µg/ml vagy µmol/l lehet. A µg/ml-ben mért érték úgy számítható át µmol/l-ben mértre, hogy a µg/ml-ben mért értéket megszorozzuk 3,9-dal. 7 Mint minden más elemzési eredményt, a lamotriginértéket is a klinikai értékelésekből és egyéb diagnosztikai eljárásokból származó rendelkezésre álló információkkal együtt kell felhasználni. Hibakódok az eredményben Egyes eredmények hibakódokat tartalmazhatnak. A hibakódok leírása a berendezésspecifikus használati útmutatóban található. Az eljárás korlátai Az általános populációban kis gyakorisággal fordulnak elő interferáló heterophil antitestek. Ezek az antitestek a microparticularis reagens auto-agglutinációját okozhatják, ami ki nem mutatott, hibásan alacsony értékeket eredményez. Diagnosztikai célra a teszteredményeket mindig a beteg kórtörténetével, a klinikai vizsgálatokkal és egyéb leletekkel együtt kell vizsgálni. Lásd e tájékoztató MINTÁK GYŰJTÉSE ÉS KEZELÉSE és SPECIFIKUS TELJESÍTMÉNYJELLEMZŐK című fejezetét. Várható értékek Szérum/plazma A lamotrigin terápiás tartománya még nincs jól meghatározva. A szakirodalom egyes tanulmányai 3 15 µg/ml-es cél tartományt javasolnak az egyensúlyi állapot koncentrációja számára. 7,8 De nincs világos összefüggés a lamotrigin szérumbeli koncentrációja és klinikai hatása között. 7,8 A betegek egyedi eltérései és az egyidejűleg adott más gyógyszerek miatt jelentős átfedést figyeltek meg a lamotriginkoncentrációban a szérumresponderek és nem-responderek, továbbá a rohamkontrollt biztosító és a káros mellékhatásokat kiváltó szérumszintek között. 1 3,6 8,1 15 Az egyik tanulmányban a mért legmagasabb átlagos szérumbeli szint (legkisebb koncentráció) 8,8 µg/ml volt, és a betegek kevesebb mint 15%-ánál volt tapasztalható káros mellékhatás 1 µg/ml-nél kisebb szérumbeli koncentráció esetén. 9 Enye-közepes mellékhatásokat gyakrabban figyeltek meg olyan betegek esetén, akiknél a lamotrigin koncentrációja meghaladta a 15 µg/ml-t. 8,15 A stabil dózis elérése után akár hét napra is szükség lehet az egyensúlyi állapotot biztosító koncentráció eléréséhez. 1 A lamotrigin gyógyszer koncentrációja nem lehet a terápiás gyógyszeres kezelés egyedüli eszköze. Ezt a vizsgálatot a klinikai értékelésekből és egyéb diagnosztikai eljárásokból származó rendelkezésre álló információkkal együtt kell felhasználni. Az orvosoknak alaposan meg kell figyelniük a betegeket a terápia kezdetén és a dózisbeállítás során. Előfordulhat, hogy több mintát is meg kell vizsgálni, hogy meg lehessen határozni az optimális (egyensúlyi) koncentrációk várható variációit az egyes betegek esetén. Specifikus teljesítményjellemzők Az alábbi szakaszok turbidimetriás kvantitatív analízist használó, kereskedelmi forgalomban kapható automatikus klinikai kémiai analizátorral kapott reprezentatív teljesítményadatokat sorolnak fel. Érzékenység A mennyiségi meghatározás határértéke (limit of quantitation LOQ) A QMS Lamotrigin vizsgálat esetén a mennyiségi meghatározás határértéke (LOQ) a gyógyszernek az a legkisebb koncentrációja, amelynél elfogadható vizsgálaton belüli precizitás és visszanyerés tapasztalható (ez gyakran <2% CV ±15% visszanyeréssel). Lamotrigintartalmú betegszérumminta-csoportokat és lamotriginnel dúsított plazmamintákat hígítottunk fel, és mindegyik mintát naponta kétszer két-két mintán vizsgáltuk meg öt napon át. A következő elméleti lamotriginkoncentrációkat elemeztük: Lamotrigintartalmú betegszérumminta-csoportok A teszt célértéke (µg/ml) 1,74 2,75 3,78 4,88 Átlag 1,82 2,68 3,64 4,88 SD,9,15,16,3 Százalékos CV 4,74 5,69 4,3 6,25 Százalékos visszanyerés 14,48 97,27 96,24 1, Lamotriginnel dúsított plazmaminták A teszt célértéke (µg/ml) 2, 2,74 3,54 Átlag 2,21 2,38 3,54 SD,7,1,1 Százalékos CV 3,21 3,38 2,89 Százalékos visszanyerés 11,69 13,27 1, Az LOQ megállapított értéke 2, µg/ml. Vizsgálati tartomány A vizsgálat tartománya 2, 4, µg/ml. Az e tartomány alatti mérési eredmények egységesen: <2, µg/ml. Pontosság A visszanyerés alapján úgy határoztuk meg a pontosságot, hogy gyógyszerészeti minőségű lamotrigin gyógyszert adtunk lamotriginre negatív humán szérumhoz. Kezdetben gravimetrikusan hozzávetőleg 4 µg/ml-nyi lamotrigint tartalmazó szérumtörzset készítettünk humán szérumhoz lamotrigint adva. Aztán a törzskoncentrációt gravimetrikusan hozzáadtuk lamotriginre negatív humán szérumhoz úgy, hogy a vizsgálati tartományt lefedő koncentrációkat kapjunk. A mintákat automatikus klinikai kémiai analizátorral teszteltük két különböző kalibrálási görbén, minden vizsgálatot háromszor ismételve. Az eredményeket átlagoltuk és összehasonlítottuk a cél koncentrációval, továbbá kiszámítottuk a százalékos visszanyerést. Az eredményeket az alábbi táblázat foglalja össze. Elméleti Átlagos százalékos visszanyerés: 14 %-os visszanyerés = Átlagos visszanyert koncentráció x 1 Elméleti koncentráció Átlagos visszanyert %-os visszanyerés 4,2 38,61 96 3,2 32,74 19 2,3 19,7 95 15, 16,5 17 9, 9,37 14 5,2 5,33 16 3,75 3,94 15 2,5 2,49 1 1,52 1,75 115 Linearitás A végrehajtott linearitási vizsgálatoknál a nagy mennyiségű betegmintát a vizsgálati tartomány különböző koncentrációira hígítottuk fel. A betegminta-csoportot az EP6-A NCCLS-protokoll 16 ajánlásainak megfelelően úgy alakítottuk ki, hogy a várt szóródási tartomány feletti 2 3%-os értéket kapjunk. A hígítást QMS Lamotrigin CAL A kalibrátorral (üres kalibrátorral) végeztük. Az egyes hígításoknál a linearitást akkor tekintettük elfogadhatónak, ha az első- és másodrendű várható regressziós értékek százalékos szóródása ±1% volt. Az eredményeket az alábbi táblázat foglalja össze. Elméleti Átlagos százalékos visszanyerés: 13 Átlagos visszanyert %-os visszanyerés 42,5 43,25 12 37,38 37,67 11 32,26 31,82 99 26,62 27,34 13 21,5 22,26 14 15,87 16,15 12 1,75 1,78 1 5,12 5,19 11 2,56 2,56 1 1,2 1,23 121 Módszerek összehasonlítása Korrelációs vizsgálatokat végeztünk az NCCLS EP9-A2 protokollja 17 szerint. A QMS Lamotrigin vizsgálatot házon belül (1. vizsgálat) és két külső helyszínen (2. vizsgálat és 3. vizsgálat) végeztük el. A QMS Lamotrigin vizsgálat eredményeit összehasonlítottuk a hitelesített nagyteljesítményű folyadékkromatográfiás (HPLC) referenciamódszer eredményeivel. 18 1. vizsgálat Az első vizsgálat során a QMS Lamotrigin vizsgálatban a lamotrigin koncentrációja 2,2 µg/ml és 43,13 µg/ml közötti volt, 15,98 µg/ml-es átlagos koncentrációval. A HPLC módszer esetén a lamotrigin koncentrációja 1,6 µg/ml és 4,3 µg/ml közötti volt, 15,3 µg/ml-es átlagos koncentrációval. A vizsgálat Passing-Bablok 19 regresszióanalízisének eredménye alább látható. Meredekség (95%-os konfidenciaintervallum) 1,3 Y tengely metszéspontja (95%-os konfidenciaintervallum),11 Korrelációs együttható (R 2 ),96 A becslés normál hibája 1,98 Minták száma 166 2
5 QMS (µg/ml) 4 3 2 Precizitás A precizitást az EP5-A2 NCCLS-protokollnak 2 megfelelően határoztuk meg. Mindegyik vizsgálatban háromszintű, humánszérum-alapú, a kereskedelmi forgalomban beszerezhető, lamotrigint tartalmazó kontrollt és alacsony, közepes és magas terápiás értéket képviselő betegminta-csoportokat használtunk. Minden egyes kontrollszintet és betegminta-csoportot naponta kétszer két-két mintán vizsgáltuk meg, 2 nem egymást követő napon át. Egy-egy nap a vizsgálatok között legalább két óra telt el. Kiszámítottuk az átlag, valamint az egyik napról a másikra változó, vizsgálaton belüli és a teljes szórás (SD) és százalékos CV értékét. Az redményeket az alábbi táblázat foglalja össze. 1 Vizsgálaton belül Egyik napról a másikra Teljes 1 2 3 4 5 Minta N Átlag (μg/ml) SD CV (%) SD CV (%) SD CV (%) 2. vizsgálat A második vizsgálat során a QMS Lamotrigin vizsgálatban a lamotrigin koncentrációja 2,11 µg/ml és 41,19 µg/ml közötti volt, 16,11 µg/ml-es átlagos koncentrációval. A HPLC módszer esetén a lamotrigin koncentrációja 1,6 µg/ml és 4,3 µg/ml közötti volt, 15,3 µg/ml-es átlagos koncentrációval. A vizsgálat Passing-Bablok 19 regresszióanalízisének eredménye alább látható. Meredekség (95%-os konfidenciaintervallum) 1,3 Y tengely metszéspontja (95%-os konfidenciaintervallum),36 Korrelációs együttható (R 2 ),96 A becslés normál hibája 1,92 Minták száma 166 5 QMS (µg/ml) 4 Alacsony kontroll 8 2,17,4 1,6,4 1,2,6 2,9 Közepes kontroll 8 15,51,18 1,1,18,9,29 1,9 Magas kontroll 8 25,57,39 1,5,26,9,52 2, Alacsony Közepes Magas Elfogadhatóság feltétele: <1%-os teljes CV 8 2,81,5 1,6,2,7,8 2,8 8 1,79,1,9,12 1,1,21 2, 8 23,93,4 1,7,16,7,58 2,4 Interferáló anyagok A következő potenciális interferensek klinikailag magas koncentrációit adtuk ismert lamotriginszinttel (kb. 3 és 16 µg/ml) rendelkező normál humán szérumhoz. Mindegyik mintát a QMS Lamotrigin vizsgálattal teszteltük, a lamotrigin szérumkontrollja mellett. Az összes anyag <1%-os hibával mutatta ki a lamotrigint. 3 2 1 1 2 3 4 5 3. vizsgálat A harmadik vizsgálat során a QMS Lamotrigin vizsgálatban a lamotrigin koncentrációja 2,1 µg/ml és 47,31 µg/ml közötti volt, 15,95 µg/ml-es átlagos koncentrációval. A HPLC módszer esetén a lamotrigin koncentrációja 1,6 µg/ml és 4,3 µg/ml közötti volt, 15,3 µg/ml-es átlagos koncentrációval. A vizsgálat Passing-Bablok 19 regresszióanalízisének eredménye alább látható. Meredekség (95%-os konfidenciaintervallum) 1,6 Y tengely metszéspontja (95%-os konfidenciaintervallum) -,14 Korrelációs együttható (R 2 ),94 A becslés normál hibája 2,44 Minták száma 167 Interferáló anyag Albumin Bilirubin Cholesterin Haemoglobin Gamma globulin Reumafaktor* Trigliceridek* Húgysav* Interferáló koncentráció 12 g/dl 6 mg/dl 5 mg/dl 15 mg/dl 1 g/dl 5 NE/ml 15 mg/dl 2 mg/dl *Természetes betegminta lamotrigint tartalmazó humán szérumcsoportokkal történő hígításával készült Specificitás Interferenciavizsgálatokat végeztünk az EP7-A2 NCCLS-protokoll 21 útmutatásai szerint. Kölcsönhatás szempontjából megvizsgáltuk a lamotrigin ismert metabolitjait. A QMS Lamotrigin vizsgálattal a lamotriginnel együtt rutinszerűen alkalmazott más gyógyszereket és endogén anyagokat is teszteltük, hogy megállapítsuk, hogy ezek a vegyületek hatással vannak-e a lamotriginkoncentráció kvantitatív értékére. Sok ilyen vegyületet és endogén anyagot adtunk az alacsony és a magas terápiás szintű lamotrigint tartalmazó szérumcsoportokhoz (kontroll). Ezeket a mintákat megvizsgáltuk, és az interfernst tartalmazó minták lamotriginkoncentrációját összehasonlítottuk a kontrollszérummal. 5 QMS (µg/ml) 4 3 2 1 1 2 3 4 5 3
Metabolitok A lamotrigin elsődlegesen UDP-glucuronyltransferázon át metabolizálódiik, pharmacologiailag inaktív metabolitot, N-2 glucuronid-t létrehozva. 22,23 A szakirodalom megemlít még három kisebb metabolitot is, ezek a N-5 glucuronid, a N-2 oxid és a N-2 methyl. 22,24 A kiválasztott dózisban (amely jellemzően az vizeletben fordult elő) a lamotrigin szülő gyógyszer hozzávetőleg 1%-ban változatlan formában volt megtalálható. A metabolitok hozzávetőleg a következő koncentrációkban fordultak elő: N-2 glucuronid (71%), N-5 glucuronid* (9%), N-2 methyl ( 5%) és N-2 oxid ( 5%). 24,25 Ezeket a metabolitokat két különböző, 3 µg/ml-es, illetve 16 µg/ml-es alacsony, illetve magas lamotriginkoncentrációjú mintához adtuk. Kölcsönhatás szempontjából a következő metabolitokat vizsgáltuk meg. *A javasolt N-5 glucuronid metabolit nem állt rendelkezésre a teszteléshez. Gyógyszerek kölcsönhatása QMS Lamotrigin vizsgálatokat végeztünk annak megállapítására, hogy a gyakran alkalmazott vegyületek hatással vannak-e a kinyerhető lamotrigin koncentrációjára. Mindegyik vegyületet nagy koncentrációban adtuk ismert lamotriginszinttel (kb. 3 és 16 µg/ml) rendelkező normál humán szérumhoz, és a lamotrigin szérumkontrollja mellett vizsgáltuk. Az összes vegyület <1%-os hibával mutatta ki a lamotrigint. A vizsgált vegyületeket és azok koncentrációját az alábbi táblázat foglalja össze. koncentrációja* koncentrációja* Metabolit N-2 glucuronid N-2 methyl N-2 oxid NK = Nem kimutatható Metabolitkoncentráció (µg/ml) Alacsony lamotriginkoncentráció Százalékos kölcsönhatás Magas lamotriginkoncentráció 4,6,3 8,8 1,6 4,23 1,3 2 NK 6,4 1,4 11,9 5-7,9 NK 4,1,2 8 NK,5 4 -,1 2,1 2 -,4 1,3 1-2, 2,6 5-4,7 NK 4 2,2 4,2 8 4,6 1,7 4 6, 15,1 2 9,6 25,1 1 13, 36,5 5 19,7 92,5 Acetaminophen 2 Lidocain 1 Acetazolamid 1 Lincomycin 2 Acetilszalicil-sav 5 Mephenytoin 1 Amikacin 2 Mesoridazin 5 Amitriptylin 1 Methicillin 2 Amoxapin 1 Methylprednisolon 2 Amphotericin B 1 N-acetylprocainamid 12 Ampicillin 5 Nefazodon 3 Ascorbinsav 3 Neomycin 1 Buproprion 3 Niacin 12 Koffein 1 Nirvanol 1 Carbamazepin 12 Nitrazepam 1,8 Carbamazepin-1, 11-epoxid 12 Nordoxepin 1 Carbenicillin 25 Nortriptylin 1 Chloramphenicol 25 Olanzapin,3 Chlorpromazin 2 Oxcarbazepin 5 Citalopram,8 Paroxetin 1 Clobazam 1 Penicillin V 1 Clonazepam,7 Perphenazin 9 Cyclosporin A 1 Phenytoin 1 Desipramin 1 Phenobarbital 15 Diazepam 2 Primidon 1 Digitoxin,25 Procainamid 25 Digoxin,2 Prochlorperazin 1 Doxepin 1 Ranitidin 2 Ephedrin-szulfát 1 Rifampin 5 Erythromycin 2 Risperidon,6 Etanol 35 Sertralin,6 Ethosuximid 1 Spectinomycin 1 Felbamat 1 Sulfamethoxazol 4 Fluoxetin 3,75 Theophyllin 25 Furosemid 1 Thioridazin 5 Gabapentin 2 Tobramycin 2 Gentamicin 1 Topiramat 25 Haloperidol 1 Trazodon 5 Heparin 8 NE/l Trimethoprim 2 Ibuprofen 4 Valproinsav 1 Imipramin,72 Vancomycin 63 Kanamycin A 4 Vigabatrin 1 Kanamycin B 4 Zonisamid 4 Levetiracetam 4 *µg/ml, ha másként nincs jelezve 4
Szakirodalom 1. FDA approved labeling text for NDA 2-764S-5 and NDA 2-241S-11 dated 5/25/1 for Glaxo Wellcome Inc. 2. Matsuo F. Lamotrigine. Epilepsia 1999;4(Suppl 5):S3-6. 3. Hachad H, Ragueneau-Majlessi I, Levy RH. New antiepileptic drugs: review on drug interactions. Ther Drug Monit 22;24(1):91-13. 4. Dasgupta A, Dean R, Saldana S, et al. Absorption of therapeutic drugs by barrier gels in serum separator blood collection tubes. Am J Clin Pathol 1994;11(4):456-61. 5. Moyer TP, Pippenger CE. Therapeutic Drug Monitoring. In: Burtis AC, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, Second Edition. Philadelphia, PA. WB Saunders, 1994;194-11. 6. Patsalos PN, Fröscher W, Pisani F, van Rijn CM. The importance of drug interactions in epilepsy therapy. Epilepsia 22;43(4):365-85. 7. Johannessen SI, Battino D, Berry DJ, et al. Therapeutic drug monitoring of the newer antiepileptic drugs. Ther Drug Monit 23;25(3):347-63. 8. Johannessen SI, Tomson T. Pharmacokinetic Variability of Newer Antiepileptic Drugs: When is Monitoring Needed? Clin Pharmacokinet 26;45(11):161-75. 9. Hirsch LJ, Weintraub D, Du Y. Correlating lamotrigine serum concentrations with tolerability in patients with epilepsy. Neurology 24;63:122-26. 1. Besag FMC, Berry DJ, Pool F, et al. Carbamazepine toxicity with lamotrigine: pharmacokinetic or pharmacodynamic interaction? Epilepsia 1998;39(2):183-7. 11. Eriksson A-S, Hoppu K, Nergårdh A, Boreus L. Pharmacokinetic interactions between lamotrigine and other antiepileptic drugs in children with intractable epilepsy. Epilepsia 1996;37(8):769-73. 12. May TW, Rambeck B, Jürgens U. Serum concentrations of lamotrigine in epileptic patients: the influence of dose and comedication. Ther Drug Monit 1996;18(5):523-31. 13. Yau MK, Wargin WA, Wolf KB, et al. Effect of valproate on the pharmacokinetics of lamotrigine (Lamictal) at steady state. Epilepsia 1992;33 (Suppl 3):82. 14. Besag FMC, Berry DJ, Pool F. Methsuximide lowers lamotrigine blood levels: a pharmacokinetic antiepileptic drug interaction. Epilepsia 2;41(5):624-7. 15. Besag, FM, Craven P, Berry DJ. The Role of Blood Level Monitoring in Assessing Lamotrigine Toxicity. Epilepsia 1998;36(s6):131. 16. Tholen DW, Kroll M, Astles JR, et al. Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures: A Statistical Approach; Approved Guideline (EP6-A). Wayne, PA: The National Committee for Clinical Laboratory Standards, 23. 17. Krouwer JS, Tholen DW, Garber CC, et al. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples; Approved Guideline-Second Edition (EP9-A2). Wayne, PA: The National Committee for Clinical Laboratory Standards, 22. 18. Berry DJ, Wicks JFC, Clarke LA. Determination of Lamotrigine 3,5-diamino-6- (2,3-dichlorophenyl)-1,2,4-triazine at therapeutic concentrations in plasma by reversed phase HPLC. HPLC 92 (abstract no. 183). 19. Bablok W, Passing H, Bender R, Schneider B. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry. Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988;26(11):783-9. 2. Tholen DW, Kallner A, Kennedy JW, et al. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline-Second Edition (EP5-A2). Wayne, PA: The National Committee for Clinical Laboratory Standards, 24. 21. McEnroe RJ, Burritt MF, Powers DM, et al. Interference Testing in Clinical Chemistry: Approved Guideline-Second Edition (EP7-A2). Wayne, PA: The National Committee for Clinical Laboratory Standards, 25. 22. Green MD, Bishop WP, Tephly TR. Expressed human UGT1.4 protein catalyzes the formation of quaternary ammonium-linked glucuronides. Drug Metab Dispos 1995;23(3):299-32. 23. Sandson NB, Armstrong SC, Cozza KL. An overview of psychotropic drug-drug interactions. Psychosomatics 25;46(5):464-85. 24. Doig MV, Clare RA. Use of thermospray liquid chromatography-mass spectrometry to aid in the identification of urinary metabolites of a novel antiepileptic drug, lamotrigine. J Chromatogr 1991;554:181 9. 25. Dickins M, Chen C. Lamotrigine: chemistry, biotransformation, and pharmacokinetics. In: Levy RH, Mattson RH, Meldrum BS, Perucca E, eds. Antiepileptic drugs, 5th ed. New York: Raven Press, 22:37-9. Microgenics Corporation 465 Kato Road Fremont, CA 94538 USA Ügyfélszolgálat és terméktámogatás az USA-ban: 1-8-232-3342 Microgenics GmbH Spitalhofstrasse 94 D-9432 Passau, Germany Tel.: +49 () 851 886 89 Fax: +49 () 851 886 89 1 A tájékoztató frissítése itt található: www.thermoscientific.com/diagnostics Más országokban: Vegye fel a kapcsolatot a Thermo Fisher Scientific helyi képviseletével. 215 Thermo Fisher Scientific Inc. Minden jog fenntartva. Minden más védjegy a Thermo Fisher Scientific és leányvállalatainak tulajdona. 155192-H-HU 215 9 5