Példány sorszáma: Készítette: Átvizsgálta: Jóváhagyta: sk. sk. sk. Dr. Tardos Károlyné Dr. Völgyi Antonia Dr. Tóth Zsuzsanna laboratóriumvezetıi feladatokkal megbízott igazságügyi vegyészszakértı minıségirányítási vezetı igazgató Kiadás dátuma: 2007.09.01. Kiadás száma: 1. Oldalszám: 1/14
1. Cél Az utasítás célja az ISZKI e véralkohol laboratóriumában alkalmazandó emberi eredető testnedvek alkohol koncentrációjának meghatározásához szükséges mérési eljárás leírása, szabályozása. 2. Alkalmazási terület Ezt az utasítást alkalmazzuk az ISZKI laboratóriumában, a vér,- vizelet,- és egyéb emberi testnedvek alkohol koncentrációjának meghatározására. Ez az utasítás vonatkozik az ISZKI véralkohol laboratóriumában dolgozó valamennyi munkatársra. 3. Hivatkozások Dr. Balla József: A gázkromatográfia analitikai alkalmazásai MSZ EN ISO/IEC 17025 szabvány Alkalmazási útmutató az MSZ EN ISO/IEC 17025 szabványhoz, NAR 20 Országos Igazságügyi Orvostani Intézet 13. számú módszertani levele az alkoholos állapot és alkoholos befolyásoltság orvosszakértıi vizsgálatáról és véleményezésérıl. Népjóléti Közlöny, 1994. nov.30. Laboratóriumok higiénés rendje címő fıigazgatói utasítás Validálás, mérési bizonytalanság címő igazgatói utasítás Pipetta kalibrálás címő fıigazgatói utasítás HS-GC-FID készülék kezelése címő igazgatói utasítás 4. Fogalommeghatározások MSZ EN ISO/IEC 17025: 2005 szabvány, valamint NAR 20 szerint meghatározva. HS Headspace, gıztér mintaadagoló GC Gázkromatográf FID A gázkromatográfhoz illesztett lángionizációs detektor. Alkohol Alkohol kifejezés jelen dokumentumban az etilakoholt/etanolt jelenti. Az megjelölés jelen dokumentumban az ún. vegyes ezrelék mértéket jelenti, amely valójában gramm/liter, illetve mg/ml koncentrációt jelöl. Vér,- A vér- és vizeletvételi egységdoboz az alkoholos befolyásoltság vizsgálatához vizeletvételi rendszeresített eszköz (ún. vérdoboz). A mőanyag doboz tartalmazza a vér,- egységdoboz illetve vizeletminta levételéhez szükséges vércsövet, a vérvételi jegyzıkönyvet, és az öntapadó címkét az azonosító számmal. A doboz az azonosító adatokkal kitöltött öntapadós címkével zárható. Vérvételi A vérdobozban elhelyezett nyomtatvány, melynek egyik oldalán a rendıri Kiadás dátuma: 2007.09.01. Kiadás száma: 1. Oldalszám: 2/14
jegyzıkönyv Liquor Csarnokvíz intézkedésre vonatkozó adatok, vérvételre kötelezett személy adatai, valamint a vérvételkor felvett orvosi lelet található. A jegyzıkönyv másik oldala az orvosszakértıi vélemény részben elıre nyomtatott szövegét tartalmazza. A vérvételi jegyzıkönyv egyúttal kirendelı határozatnak (megbízás) is minısül. Agy és- gerincvelıi folyadék Szemgolyóban levı folyadék 5. Leírás 5.1. A vizsgálat pontos megnevezése Etanol koncentráció meghatározása emberi eredető testnedvekbıl (vér,- vizelet,- és egyéb emberi testnedvek) HS-GC-FID módszerrel. 5.2. Módszer elve Az alkohol meghatározására olyan módszert választottunk, amely az alkohol illékonyságán alapul. Ez a módszer az ún. headspace-gázkromatográfia, azaz gıztér-analízises gázkromatográfia. A biológiai mintákban lévı vizsgálandó komponens, az etilalkohol, a folyadékfázisbeli koncentrációjával arányosan dúsul fel a minta gızterében, így lehetıvé válik a gıztérben lévı etanol koncentráció mérésével a folyadékfázisbeli koncentráció meghatározása. Az eljárás során a minta gızterében feldúsult etanolt nagyhatékonyságú gázkromatográfiás (HS-GC) elválasztást követıen lángionizációs módszerrel detektáljuk (FID). A mennyiségi elemzést, az etanol folyadékfázisbeli koncentrációjára kalibrált belsı standard módszerrel végezzük, így megbízható, érzékeny meghatározást érünk el. Belsı standardként a t-butanol került kiválasztásra. A t-butanol elıfordulási gyakorisága minimális a vizsgált mintamátrixban, a nemzetközi gyakorlatban is ezt alkalmazzák. 5.3. A vizsgálat tárgyának pontos meghatározása A vizsgálatokat a kirendelı/megkeresı (vevı) által a mintavételi egységdobozban beküldött vizeletvagy vérmintákon, valamint esetenként más biológiai,- mint például liquor és csarnokvíz - mintákon végezzük el. 5.4. Szükséges létszám 1 fı laboratóriumvezetıi feladatokkal megbízott igazságügyi vegyész szakértı, 1 fı technikus Kiadás dátuma: 2007.09.01. Kiadás száma: 1. Oldalszám: 3/14
5.5. A vizsgálat leírása 5.5.1. Szükséges anyagok, eszközök pontos leírása 5.5.1.1. Alkalmazott mőszerek gázkromatográf két kolonnával, két lángionizációs detektorral (FID), spit/splitless injektorral, automata HS-adagolóval (Perkin Elmer Clarus 500 GC gázkromatográf Turbomatrix Headspace Sampler 40 automatikus gıztér mintaadagolóval felszerelve), a mőszerhez tartozó számítógépes konfiguráció, telepített vezérlı és értékelı szoftverrel, külsı archiválást biztosító egységgel ellátva, a mőszer biztonságos üzemeltetéséhez szünetmentes tápegység, gáz-szabályzó rendszer, analitikai mérleg, 5.5.1.2. Alkalmazott eszközök mintaadagoláshoz használt 22 ml állandó térfogatú, légmentesen zárható, peremes üvegfiola, a 22 ml-es üvegfiolához tartozó/illeszkedı üreges dugasz és alumínium kupak, a fémkupakhoz és az üvegfiolához illeszkedı fiolazáró szerszám, kalibrált automata pipetták, 200 µl fix és100-1000 µl méréstartománnyal, hozzátartozó egyszer használatos pipetta hegyek, 500 ml és 1000 ml térfogatú, csiszolatos, A jelzéső sorozathitelesített normállombik, 50 ml-es A jelzéső sorozathitelesített kétjelő hasas pipetta 5.5.2. Alkalmazott referencia anyagok Anyagnév Koncentráció (g/l) Gyártó Tárolás 1. CER E-040 Ethanol-10 0,10 Cerrilliant 5±3 ºC 2. CER E-035 Ethanol-25 0,25 Cerrilliant 5±3 ºC 3. Medidrug Ethanol W 0,50 Medichem 5±3 ºC 4. Medidrug Ethanol W 1,00 Medichem 5±3 ºC 5. Medidrug Ethanol W 1,50 Medichem 5±3 ºC 6. Medidrug Ethanol W 2,00 Medichem 5±3 ºC 7. Medidrug Ethanol W 3,00 Medichem 5±3 ºC 8. Medidrug Ethanol W 4,00 Medichem 5±3 ºC 9. Medidrug Ethanol VB 1,10 Medichem 5±3 ºC 10. CER A-056 Multikomponent Alkohol Mix 1,00 Cerrilliant 5±3 ºC Kiadás dátuma: 2007.09.01. Kiadás száma: 1. Oldalszám: 4/14
5.5.3. Alkalmazott egyéb vegyszerek Anyag Minıség Gyártó 1. tercier-butanol a.r. ACS, Reag. Ph. Eur Merck 2. Desztillált víz Kromatográfiás minıség ISZKI BOI DNS Laboratórium 5.5.4. Alkalmazott oldatok 5.5.4.1.Belsı standard törzsoldat A laboratóriumban készített, 0,1 g/l koncentrációjú tercier-butanol (továbbiakban: t-butanol) vizes oldata. Két lépésben készítjük: elıször 1,00 g/l koncentrációjú oldatot készítünk, majd ebbıl 10-szeres hígítással készül a 0,10 g/l koncentrációjú oldat. 1,00 g/l-es törzsoldat készítése: 1000 ml-es mérılombikot kb. ½-ig töltünk desztillált vízzel, 1,0000 g szobahımérséklető t-butanolt csiszolatos bemérı edénybe analitikai mérlegen bemérünk, maradéktalanul átmossuk a mérılombikba, majd jelig töltjük. Alapos kézi rázás után készítési dátumát és készítıje nevét ráírjuk, hőtıszekrényben tároljuk. 0,10 g/l-es belsı standard oldat készítése: 500 ml-es mérılombikot ½-ig töltünk desztillált vízzel, hozzáadunk 1,00 g/l koncentrációjú t-butanol törzsoldatból 50,00 ml-t kétjelő pipettával kimérve, jelig töltjük a lombikot és alaposan összerázzuk. Készítési dátumát és készítıje nevét ráírjuk, hőtıszekrényben tároljuk. Felhasználás elıtt jól záró 100 ml-es folyadéküvegekbe töltjük, felcímkézzük. 5.5.5. Alkalmazott gázok Hidrogén 5.0 Nitrogén 4.5 Szintetikus levegı Kiadás dátuma: 2007.09.01. Kiadás száma: 1. Oldalszám: 5/14
5.5.6. Alkalmazott mérési körülmények HS Termosztálási hımérséklet Termosztálás ideje Injektáló tő hımérséklete Ciklusidı Értékek 70 o C 15,0 min 75 o C 3+1 min. GC Oszlop 1: Elite BAC 1 capillar Oszlop 2: Elite BAC 2 capillar Injektor hımérséklet 200 o C 200 o C Belépı gáznyomás 20,00 psi 20,00 psi Áramlási sebesség 20,0 ml/min. 20,0 ml/min Oszlophımérséklet 40 o C 40 o C Futási idı 3 min 3 min GC FID 1 FID 2 Hımérséklet 150 o C 150 o C Hidrogén áramlási sebesség 45 ml/min 45 ml/min Levegı áramlási sebesség 450 ml/min 450 ml/min Vivıgáz áramlási sebesség 20,0 ml/min 20 ml/min 5.5.7. A vizsgálat elvégzésének kritériumai A minta elıkészítése megkezdhetı, ha a minták és a jelen dokumentumban felsorolt, szükséges anyagok rendelkezésre állnak. ha a laboratórium személyzete és az elıírt védıfelszerelés, védıruha, gumikesztyő biztosítva van, ha a mérırendszer bekapcsolt állapotban van, a megfelelı (validált, jóváhagyott) módszer be van töltve és a szoftver READY jelzést ad. A mőszereket vezérlı szoftver (kétirányú kommunikációra képes: beállítja a vizsgálathoz szükséges értékeket és kijelzi aktuális állapotát) minden egyes mérés elıtt automatikusan ellenırzi a módszerben lévı paraméterek beállítását, ha a detektor jel stabil. 5.5.8 A vizsgálat menetének leírása Az alkohol meghatározását az Clarus 500 GC gázkromatográffal, Turbomatrix HS 40 mintaadagolóval és számítógépes vezérléssel ellátott analitikai mőszerrel végezzük. A mérésre elıkészített mintákat mintatartó tálcákba helyezzük, ettıl kezdve a mőszer programmal vezérelt analízist hajt végre. Kiadás dátuma: 2007.09.01. Kiadás száma: 1. Oldalszám: 6/14
Az analízis fıbb lépései: A mintatartó tálcából a minta a termosztáló egységbe kerül; az elıírt termosztálási idı leteltével az injektáló fecskendı a minta gızterébıl mintát vesz, és a gázkromatográf injektor terébe fecskendezi; az injektor térbıl a minta a gázáram segítségével végighalad a párhuzamosan csatolt kapilláris oszlopokon, ahol megtörténik a komponensek elválasztása; az oszlopokról egymást követıen kilépı komponenseket lángionizációs detektor érzékeli. A detektorjelet a számítógép a TC Workstation 6.2.1 szoftver segítségével győjti, értékeli és tárolja. 5.5.8.1 A kalibrációs görbe felvétele Új kalibrációs görbe felvétele szükséges: vizsgálati módszer elindításakor, új belsı standard oldat készítése és felhasználása estén, a standard mintára kapott visszanyerés és szórás megváltozásakor, vagy egyéb meghibásodáskor, A mérırendszer javítása után az új kalibráció felvételérıl a szakértı dönt: mérlegeli, hogy a meghibásodás és/vagy javítás, hatással volt-e az elválasztásra és a mennyiségi értékelésre. A kalibrációhoz minıségi bizonyítvánnyal ellátott vizes etanol standard oldatokat, valamint saját készítéső 0,1 g/l koncentrációjú t-butanol oldatot használunk. A kalibrációs görbét minimum 5 szinten és 5 párhuzamos minta mérésével készítjük. A kalibráló oldatok elıkészítése: a 22 ml térfogatú peremes fiolába 500 µl 0,1 g/l koncentrációjú t- butanol belsı standard oldatot mérünk, majd ehhez adunk 200 µl térfogatú, vizes etanol standard oldatot, ezt követıen az ampullát azonnal ledugaszoljuk és a alu zárókupakot az ampullazáró segítségével rászorítjuk. Az alkalmazott vizes etanol standardok koncentráció tartománya: 0,1-4,0 g/l. (Megjegyzés: A kalibrációhoz felhasználható olyan minıségi bizonyítvánnyal ellátott etanol standard is, amely vérben tartalmazza az ismert koncentrációjú etanolt.) A kalibráló minták mérésekor a gázkromatográfiás mérırendszer legyen mérésre kész állapotban, a mérımódszer legyen betöltve, a kezelési utasítás szerint. A kalibrációs mérési sorozathoz elkészítjük a kalibrációs mérıszekvenciát, majd elindítjuk a mérést. A gázkromatográfhoz kifejlesztett szoftver rendelkezik az adatanalízishez szükséges programokkal. A kezelı a kalibrációs programmal a kezelı által kijelölt mérési adatfájlokból elkészíti a kalibrációs táblázatot és a kalibrációs görbét. Lineáris kalibráció kijelölése esetén a program a legkisebb négyzetek módszerével egyenest illeszt a mérési pontokra és meghatározza a regresszió paramétereit. Ha a korrelációs együttható nagyobb, mint 0,99 egyenesnek fogadjuk el a kalibrációs görbét. 5.5.8.2 A minta érkeztetése A minta az Intézetbe vérvételi egységdobozban érkezik futár útján, postán vagy személyes kézbesítéssel. Kiadás dátuma: 2007.09.01. Kiadás száma: 1. Oldalszám: 7/14
A minta átvételét a laboratórium dolgozói végzik, iktatása a kezelıirodán történik. A futár útján, jegyzékkel ellátott minták esetében a jegyzéken az átvétel tényét dátummal ill. aláírással igazoljuk. A jegyzék a laboratóriumban kerül megırzésre a FUTÁRJEGYZÉK feliratú dossziéban. A postai kézbesítéssel érkezett minták esetében az átvétel a postakönyvben követhetı nyomon. Minták személyes kézbesítéssel többnyire egyéni, vagy szerzıdéses vizsgálati igény esetén érkeznek, így ebben az esetben a mintát megrendelı levél kíséri. 5.5.8.3. Minta elıkészítés A mintavételi egységdobozok felbontása a laboratóriumban történik, erre a célra kialakított munkaasztalon, védıruhában, és gumikesztyőben. Az egységdobozból kivesszük a Vérvételi jegyzıkönyvet és a mintát. A Vérvételi jegyzıkönyv -re a kezelıirodán rápecsételik az Érkeztetı Bélyegzıt és tollal értelemszerően kitöltik a rovatait (érkezési dátum, intézeti iktatószám - OSZ szám). A kibontott vérvételi egységdobozban lévı Vérvételi jegyzıkönyv alapján a szükséges adatokat rögzítjük a Labor Szakértıi Ügykönyv -ben: laboratóriumi sorszám (laborszám), érkezési dátum, kirendelı hatóság (vevı), intézkedés alá vont személy neve, a vérvételi jegyzıkönyv száma, minta típusa, megjegyzések. A laborszámot rávezetjük a Vérvételi Jegyzıkönyv -re. Ellenırizzük a mintavételi csövön és a Vérvételi Jegyzıkönyvön levı kódszám azonosságát. Ha bármilyen eltérést találunk, azt feljegyezzük a labornaplóban, és értesítjük a kezelıirodát a szükséges intézkedések megtétele érdekében. Az adatok egyeztetését követıen, ha nincs intézkedésre okot adó eltérés, a vérvételi csövet felcímkézzük a laboratóriumi sorszámmal. A vérvételi csıben lévı mintát (térfogatát, állagát) szemrevételezéssel ellenırizzük, és a labornaplóban dokumentáljuk. Amennyiben a minta a beérkezés napján nem kerül vizsgálatra, a vizsgálat megkezdéséig hőtıszekrényben (5±3ºC) tároljuk. A hőtıszekrények hımérsékletét naponta feljegyezzük a Hımérséklet ellenırzı lapon és a Laboratórium és hőtık hımérséklete címő naplóba betesszük. A hőtıszekrényben tárolt mintákat a vizsgálat megkezdése elıtt kb. 1 órával kivesszük a hőtıszekrénybıl, hogy szobahımérsékletre melegedjenek fel. A minta elıkészítésének során a kalibrációhoz, és méréshez is mindig ugyanolyan térfogatú mintatartó üveget, és a lezáráshoz azonos paraméterekkel rendelkezı dugót és kupakot alkalmazunk, illetve azonos térfogatú oldatokat mérünk be. A kontroll minták elıkészítése: 22 ml-es HS üvegbe automata pipettákkal 500 µl belsı standard oldatot, azaz 0,1 g/l koncentrációjú t-butanol oldatot és 200 µl etanol standard oldatot mérünk. Az üveget azonnal ledugaszoljuk és a fém zárókupakot a fiolazáró szerszám segítségével rászorítjuk. Spike-olt minta készítése: 22 ml-es HS üvegbe automata pipettákkal 500 µl belsı standard, azaz 0,1 g/l koncentrációjú t-butanol oldatot és (200-X) µl ismert koncentrációjú mintát és (X) µl etanol standard oldatot mérünk. Az üveget azonnal ledugaszoljuk és a fém zárókupakot a fiolazáró szerszám segítségével rászorítjuk. Kiadás dátuma: 2007.09.01. Kiadás száma: 1. Oldalszám: 8/14
Vakminta készítése: 22 ml-es HS üvegbe automata pipettákkal 700 µl desztillált vizet mérünk. Az üveget azonnal ledugaszoljuk és a fém zárókupakot a fiolazáró szerszám segítségével rászorítjuk. A vizsgálandó minták elıkészítése: a vizsgálandó mintát lezárt állapotban, lassan többszöri átforgatással homogenizáljuk. A homogenizálást lehetıség szerint úgy végezzük, hogy ne keletkezzen buborék. Amennyiben buborékossá vált a minta várunk a buborékosság megszőnéséig. A 22 ml-es HS üvegbe 500 µl t-butanol belsı standard oldatot és 200 µl mintát mérünk (az egyszer használatos pipetta hegyet a vizsgálati mintával elızetesen átöblítjük). Az üveget azonnal ledugaszoljuk és a fém zárókupakot a fiolazáró szerszám segítségével rászorítjuk. Minden vizsgálandó mintából két beméréssel párhuzamost készítünk elı, és a laborszámot ráírjuk a fiolákra. Minden nap kontrollként 3 különbözı koncentrációjú standardoldatot mérünk le. 5.5.8.4. Mőszeres analízis A HS-GC-FID készülék kezelését a HS-GC-FID készülék kezelése címő igazgatói utasítás szerint végezzük. A számítógépes mérési sorozat-táblázat (Sequence table) értelemszerő kitöltése után, az elıkészített kontrollokat és mintákat behelyezzük a mintaadagoló megfelelı számú rekeszeibe (vial). Ezt követıen a mérést elindítjuk. Mérési sorozat összeállítása: Row Number Inst Method Proc Method Calib Method Rpt Fmt File Data / Datb sorszá m vials szám készülékvezérlı utasításokat tart. módszer 1 001 c:\penexe\tcws\ \ver 6.2.1 2 002 3 003 adatfeldolgozási utasításokat tart. módszer kalibrációs adatokat tart. módszer kinyomtatandó jelentés formátumát rögzítı file adat file neve (tartalmazza a minta laborszámát) Megjegyzések: minden mérés azonos jóváhagyott módszerrel történik Egy mérési sorozat eredményeit (ééhhnn_x) néven elmentjük, ahol éé: év, hh: hónap, nn: nap, x: az adott napon 1, 2 stb. hányadik sorozat. 5.5.8.5. Értékelés A gázkromatográfiás mérımódszerben beállított paraméterek és a kalibrációs görbe alapján, a kromatogramok felvétele, kiértékelése (azonosítás, integrálás, mennyiségi meghatározás), elmentése és az eredmények kinyomtatása automatikusan történik. Kiadás dátuma: 2007.09.01. Kiadás száma: 1. Oldalszám: 9/14
A szoftver a belsı standard módszerrel, az alábbi összefüggések alapján számítja ki a minta koncentrációját: A kalibrációs görbe az etanolnak a t-butanolhoz, mint belsı standard anyag csúcsterületéhez, és koncentrációjához viszonyított, válaszarány vs. mennyiségarány függvénye. C E = A E /A tb * RF E * C tb * M * D (g/l) RF Ek = (C Ek /C tbk ) / ( A Ek /A tbk ), a kalibrációs görbe alapján számítja Ahol: C E : a mérendı etanol koncentráció (g/l) C tb : a bemért t-butanol koncentrációja (g/l) A E : az etanolra mért kromatográfiás csúcsterület (pa*s) A tb : a t-butanolra mért kromatográfiás csúcsterület (pa*s) RF Ek : a kalibrációs görbébıl meghatározott relatív válaszfaktor M: szorzófaktor, esetünkben =1 D: hígítási faktor, esetünkben = 1 A vizsgált minta alkohol tartalmát 2 párhuzamos vizsgálata során kapott 4 vizsgálati eredmény átlagaként adjuk meg (két tizedes jegy pontossággal). Ellenırizzük, hogy az egyes mérési eredmények az átlagérték 5%-án belül esnek-e. A kiszámított átlag koncentrációt átvezetjük a labornaplóba. Archiválás: a hivatkozott rendeleteknek, és ajánlásoknak megfelelıen az analízist követıen a mintákat fél évig hőtıszekrényben 5+3ºC hımérsékleten tároljuk. 5.5.8.6. Az eredmények napi validálása, érvényesítése vagy elutasítása A gázkromatográfiás mérés ellenırzésére minden mérési sorozatban kontrollként 3 standard mintát mérünk le, és eredményeit összevetjük a standard koncentrációjával. A Validálás, mérési bizonytalanság címő igazgatói utasítás szerint egy kiválasztott standard mintára kapott eredményt akkor tartunk megfelelınek, ha a visszanyerés (R) 0,95-1,05 közé esik. A kontroll minták szolgálnak a készülékek (HS-GC-FID), mérıeszközök (pipetta), módszer (összes paraméter) egy adott mérési sorozaton belüli közvetett ellenırzésére. A vizsgált minta alkohol tartalmát 2 párhuzamos vizsgálata során kapott 4 vizsgálati eredmény átlagaként adjuk meg (két tizedes jegy pontossággal), ha az eredmények ± 5 % -on belül térnek el az átlagértéktıl. Eltérı esetben újabb mérés végzése ajánlott. Az eredmény megadásánál mérlegelni kell, hogy az átlag számításánál kihagyható-e a kiugró érték. Amennyiben a vizsgált minta esetében a vizsgálat során bármilyen váratlan körülmény merül föl, a vegyészszakértı dönt a további vizsgálatokról. Amennyiben az ellenırzés eredményeként a vegyészszakértı megfelelınek találta az aznapi vizsgálati eredményeket, azt aláírásával igazolja a Napi összesített vizsgálati eredményközlı címő formanyomtatvány megfelelı rovatában. Kiadás dátuma: 2007.09.01. Kiadás száma: 1. Oldalszám: 10/14
5.5.8.7.Eljárás nem megfelelı eredmény esetén Ha a kontroll minta nem megfelelısége áll fenn, a mérést fel kell függeszteni és azt megfelelı eredményő kontroll vizsgálat után lehet csak folytatni. Ha a 2 bemérésbıl végzett 2-2 párhuzamos kromatográfiás mérési sorozat eredményei az átlagértéktıl 5%-al nagyobb mértékben térnek el, annak leggyakoribb okai: A két bemérésbıl kapott eredmények térnek el egymástól, de egy bemérésbıl kapott eredmény mindkét oszlopon közel azonosak. A lehetséges ok az, hogy a vérminta bemérése, a minta jellegzetességei miatt a szokásosnál nagyobb szórással történt. Megoldás: újabb bemérés(ek) készítése, és analízis a vizsgálandó mintából. Az egy bemérésbıl a két oszlopon kapott eredmények eltérése a szokásosnál nagyobb. Feltételezhetı, hogy az etanol és a t-butanol kromatográfiás csúcsa szennyezıdött, azaz más komponens is megjelent a kromatogramon. Megoldás: A kérdéses mintából belsı standard nélkül, és belsı standarddal is újabb 2 bemérést, és analízist végzünk. A minták mérése elıtt vakmintával ellenırizzük a kromatográfiás rendszer tisztaságát. A belsı standarddal és az anélkül készült komatogramok összehasonlításával eldöntjük, hogy megjelent-e a mintában olyan szennyezı komponens, amely a belsı standard csúcsot vagy az etanol csúcsot szennyezi. A korrekcióról a vegyészszakértı dönt. A szekvencia mérés során alkalmazott standard minta alkohol koncentrációjára a referencia értéktıl 5%-nál nagyobb eltérést kapunk. A hiba lehetséges okai: a rendszer szennyezettsége, dugulás, kupak helytelen zárása, bemérés pontatlansága, stb. Feltárásának legfontosabb lépései: mérırendszer beállított és aktuális paramétereinek ellenırzése, a mérı szekvencia táblázat adatainak ellenırzése, vakmintával a mérırendszer tisztaságának ellenırzése, a belsı standard csúcsterület nagyságának vizsgálata (dugulás keresése), újabb bemérésekkel standard-minta mérése, pipetta ellenırzése, vagy cseréje. A felsoroltakon kívül még más lehetséges hiba is elıfordulhat, a vegyészszakértı dönt esetleges meghibásodáskor a szerviz igénybevételének szükségességérıl. 5.5.8.8. Az eredmények megadása, feljegyzés A mérési eredményeket a Napi összesített vizsgálati eredményközlı címő formanyomtatványon adjuk meg és továbbítjuk azt a kezelıirodának a hozzá tartozó vérvételi jegyzıkönyvekkel együtt. 5.5.8.9. Dokumentálás, adatok tárolása A mérési eredményekrıl a mérı szekvencia lefutása után összesítı riportot készítünk, és nyomtatunk ki. A kinyomtatott dokumentumokat lefőzve, dátumozva irattárazzuk a Napi összesített vizsgálati eredményközlı címő formanyomtatvány másolatával együtt. A mérési adatokat a nap végén külsı adatarchiváló eszközön (2-Bay USB 2.0 MODEL:RSM2UF) is archiváljuk, félévente CD-re írjuk, és elkülönített helyen tároljuk. A beérkezı mintákról Labor Szakértıi Ügykönyvet, labornaplót vezetünk és ezt is irattárazzuk. Az alkalmazott pipetták, hımérık kalibrálási bizonyítványok másolatait kalibrálási naplóban győjtjük. Kiadás dátuma: 2007.09.01. Kiadás száma: 1. Oldalszám: 11/14
5.5.9. Hulladékkezelés A vizsgálat befejezése után a minta maradékát további ellenırzésre alkalmas (laborszám feltüntetése) módon 5+3 o C-on hőtıszekrényben tároljuk az elıírt 6 hónapos idıtartamig. A tárolási idıtartam lejárta után a mintákat veszélyes hulladékként kezeljük és a Laboratóriumok higiénés rendje címő fıigazgatói utasítás szerint megsemmisítjük. A minta mérése során keletkezı hulladék (pipettahegy, papírvatta, gumikesztyő, stb.) valamint a minta vizsgálata után a méréshez alkalmazott ampulla veszélyes hulladéknak minısül. Győjtése hőtıben, elkülönítetten, kizárólag erre a célra szolgáló hulladéktároló edényben történik. Megsemmisítésre történı elszállítása havi rendszerességgel történik. 5.6. A vizsgálati módszer validálása, mérési bizonytalanság becslése A vizsgálati módszert a Validálás és mérési bizonytalanság címő igazgatói utasításban foglaltak szerint hitelesítjük, ezek adatait a Validálási napló címő dokumentumban helyezzük el. 6. Mellékletek 1 sz. melléklet:vérvételi jegyzıkönyv 7. Hivatkozott feljegyzések Validálási napló Kalibrálási napló Pipetta kalibrálási bizonyítvány Hımérı kalibrálási bizonyítvány Hımérséklet ellenırzı lap Napi összesített vizsgálati eredményközlı címő formanyomtatvány Laboratórium és hőtık hımérséklete címő napló 8. Módosításokok nyilvántartása Módosítás Sorszám Dátum Kiadás száma Leírása, jellege 0 2007.09.01. 1. Elsı jóváhagyott kiadás Kiadás dátuma: 2007.09.01. Kiadás száma: 1. Oldalszám: 12/14
Vérvételi jegyzıkönyv 1. oldal 1. sz melléklet Kiadás dátuma: 2007.09.01. Kiadás száma: 1. Oldalszám: 13/14
Vérvételi jegyzıkönyv 2. oldal Kiadás dátuma: 2007.09.01. Kiadás száma: 1. Oldalszám: 14/14