Állatkísérletek elmélete és gyakorlata - B szint. Gyulladási és keringési shock modellek

Átírás

1 Állatkísérletek elmélete és gyakorlata - B szint Gyulladási és keringési shock modellek

2 A keringési shock A szervek adekvát véráramlásának/ oxigén transzportjának előfeltétele: szabad légutak és a vér megfelelő oxigén saturációja normál vér volumen kielégítő miokardiális pumpa funkció A keringési shock valamennyi típusában a fő pathogenetikai faktor: A sejtek számára elégtelen oxigén kínálat A sejtek oxigén felhasználása károsodott A sejtek oxigén szükséglete és az oxigén kínálata közötti egyensúly felborul

3 Shock - felosztás Haemodinamikai profil szerint: (Hinshaw, 1972): 1. Hipovolaemiás: keringő vér mennyiség csökken, töltőnyomás csökken Vérvesztés/Plazmavesztés/Extracellularis folyadékvesztés 2. Kardiogén: pumpafunkció elégtelen, töltő nyomás nő Obstruktív/Extracardiális (tamponád) 3. Disztributív: vasomotor kontroll károsodik, az SVR csökken (a CO nőhet!) A szimpatikus tónus hirtelen megszűnik (vazogén) Vazodilatátor anyagok a keringésben (anafilaxiás) Gyulladásos mediátorok a keringésben (szeptikus)

4 A keringési shock típusai I. Alacsony perctérfogattal jellemezhető állapotok II. Emelkedett perctérfogattal jellemezhető állapotok Hypovolémiás Disztributív Kardiogén Egyéb Dehidráció Anaphylaxiás Congenitális Hő shock Gastroenteritis Neurogén Ischaemiás Tüdő embolia Éhezés Szeptikus shock Anoxiás Pancreatitis Vérzéses Égési A shock felosztása Gyógyszer toxicitás Tamponád Cardiomyopáthia Gyógyszer túladagolás

5 I. Alacsony perctérfogattal jellemezhető állapotok 1. Vénás visszaáramlás csökkenése Csökken a keringő vértérfogat Csökken a vazomotor tónus 2. A szív pumpafunkció csökkenése II. Emelkedett perctérfogattal jellemezhető állapotok Szepszis: Infekcióval összefüggésben jelentkező általános tünetek sorozata olyan betegben/állapotban, ahol a fertőzés forrása valószínűleg jelen van; Systemic Infalmmatory Response Syndrome (SIRS): Kórfolyamatok alatt jelentkező élettani változások sorozata A KIVÁLTÓ OKTÓL FÜGGETLEN GYULLADÁSOS FOLYAMAT Tünetek: T >38 C vagy < 36 C HR > 90/min Légzésszám > 20/min PaCO 2 < 32 Hgmm WBC > 12000sejt /mm 3 vagy < 4000 sejt/ mm 3

6 II. Emelkedett perctérfogattal jellemezhető állapotok Súlyos szepszis: Szepszis+ szerv funkció zavarok hypoperfúzióval; Szepszis által kiváltott hypotenzió; RRsyst < 90 Hgmm; RRsyst csökkenés > 40 Hgmm Szeptikus shock: Szepszis által kiváltott hypotenzió adekvát terápia ellenére 1 órán át fennáll

7 Oxigén szükséglet és kínálat shockban I. DO 2 = SV x HR x (1,39xHbxSaO 2 +0,003xPaO 2 ) VO 2 = SV x HR x (1,39 x Hb ScvO 2 + 0,003 x PcvO 2 ) DO2 VO2 O 2 transzport: DO 2 = perctérfogat x CaO 2 (artériás oxigén tartalom) O 2 felhasználás: VO 2 = perctérfogat x (CaO 2 -CvO 2 ) (oxigén extrakció)

8 Oxigén szükséglet és kínálat shockban II. O 2 transzport: DO 2 = perctérfogat x CaO 2 (artériás oxigén tartalom) O 2 felhasználás: VO 2 = perctérfogat x (CaO 2 -CvO 2 ) (oxigén extrakció) O 2 transzport függő VO 2 O 2 transzport független VO 2 O 2 felhasználás Anaerob metabolizmus Aerob metabolizmus Kritikus O 2 transzport O 2 transzport

9 Oxigén szükséglet és kínálat shockban II. Oxigén extrakció: VO 2 /DO 2 VO 2 (ml/min) 250 sokk kritikus pont DO 2 (ml/min) Kritikus pont= anaerob anyagcsere folyamatok laktát acidózis, ScvO2, dco2 szervi diszfunkciók több szervi elégtelenség halál

10 Oxigén szükséglet és kínálat shockban III. O 2 felhasználás Hipovolémiás shock Kardiogén shock Szepszis Normál keringés Szeptikus shock O 2 transzport

11 A szív teljesítménye shockban I. A miokardiális teljesítményt meghatározó tényezők: Előterhelés (Preload); bal kamrai töltőnyomás; A szívizom végdiasztolés rosthosszúságát meghatározó tényezők összesége; Jellemzői: vénás viszaáramlás; venokonstrikció mértéke; Utóterhelés (Afterload): A kamrai kontrakció és ejekció ellen ható tényezők összessége; Jellemzői: Szisztémás vaszkuláris rezisztencia; kamrai falfeszülés Szívkontraktilitás: A szívizom elő- és utóterhelés független összehúzódó képessége; Szívfrekvencia; A szív teljesítményének eredménye: a perctérfogat

12 A perctérfogatból számolható további paraméterek Oxigén szállítás (DO 2 ) Oxigén fogyasztás (VO 2 ) Feltétel: Az artériás és vénás oxigén szaturáció meghatározása

13 Oxigénnel telített hemoglobin százalékos aránya a vérben % % Periféria

14 Oxigén szállítás = perctérfogat x artériás oxigén tartalom DO 2 [ml/min] = CO x [(1,38 x Hb x SaO 2 ) + (0,003 x PaO 2 )] Oxigén szállítás (delivery; DO 2 ) Oxigén fogyasztás (consumption; VO 2 ) Body/Organs Oxigén fogyasztás = perctérfogat x (artériás vénás oxigén tartalom)

15 A szív teljesítménye shockban II. I. Alacsony perctérfogatú állapotban Jelentős volumen vesztés hatására Hipotenzió Csökkenő előterhelés, vénás telődés Baroreceptor aktivitás változás Kompenzációs mechanizmusok aktiválódása Humorális vazokonstrikció α-β-adrenerg aktiváció Katekolaminok; Perifériás vazokonstrikció Renin-angiotenzin rsz. Tachikardia Vazopresszin Fokozott utóterhelés Kompenzált szívkontraktilitás II. Emelkedett perctérfogatú állapotban Szepszis -SIRS Gyulladásos mediátorok felszabadulása Növekvő/fenntartott előterhelés A szervezet kompenzációs válasza az adekvát perfúzió fenntartására Hiperdynámiás keringési válasz Tachikardia Csökkenő utóterhelés Szívkontraktilitás depresszió Keringés redisztribúció

16 Perifériás keringés shockban Hgmm x L -1 x perc -1 SzisztémásVaszkuláris Rezisztencia (SVR) változása Artériás vérnyomás Centrális vénás nyomás SVR = Perctérfogat Hipovolémiás shock Kardiogén shock Szepszis szeptikus shock Hiperdynámiás fázis Idő (óra) Hipodynámiás fázis

17 A bél mint shock-szerv A keringés redisztribúció biztosítja a preferált vérellátású területek (agy, szív) perfúziójának fenntartását, de ennek ára elsősorban a splanchnikus terület vérellátásának drámai csökkenése. Ezért a rövid távon kedvező folyamat a nem preferált szervek esetében hosszú távon súlyos károsodáshoz vezethet. A bél nyálkahártya sejteknek igen jelentős az oxigén igénye Extrém hypoxia érzékenység jellemzi őket A tartós hypoxiás állapot következménye: Nyálkahártya barrier károsodás Permeabilitás fokozódás Bakteriális transzlokáció Bakteriális endotoxin felszívódás

18 Lokális keringési zavar trombózis stranguláció obstruktív ileus sebészeti beavatkozás Generalizált keringési zavar Mesenteriális hypoperfúzió kialakulása és jelentősége pumpafunkció károsodása /kardiogén shock/ volumenvesztés /hypovolaemiás shock/ vasoreguláció zavara - Szepszis Mezenteriális ischaemia Vékonybél nyálkahártya károsodása Bakteriális transzlokáció

19 Mikrokeringési elégtelenség shockban 1. A perfúzió és a vazoaktivitás változása Vazokonstrikció Shunt-keringés Csökkenő kapilláris véráramlás 2. Celluláris reakciók Leukocyta-endothel sejt interakció Leukocyta-extravazáció Szabadgyökök képződése

20 Heterogenitás térben és időben

21 Hipovolémiás shock összefoglaló pathofiziológiája Vér volumen csökkenés KOMPENZÁCIÓ Szimpatikus aktiválódás Katekolamin felszabadulás Pozitiv inotrópia Tachikardia Növekvő miokardiális oxigén igény Perifériás vazokonstrikció A vénás visszaáramlás csökkenése Artériás hypotenzió Csökkenő szöveti perfúzió Anaerob metabolizmus Miokardiális elégtelenség Acidózis MOF (Sok szerv elégtelenség)

22 Perctérfogat mérés rágcsálókban V. jugularis katéter és hideg fiziológiás só injektálás (0,3-0,5 ml) Termoszenzor katéter a carotis artériában Femoralis artéria katéter Vérnyomás transducer Adat gyűjtő-monitorozó komputer rendszer

23 Perctérfogat monitorozás sertésen Mesterséges lélegeztetés CVP katéter PiCCO monitor Kilégzett CO 2 monitorozás kapnográffal Vérnyomás és termoszenzor katéter

24 A keringés farmakológiai befolyásolása

25 Kísérleti protokoll - II. 1. Kontroll: Fiziológiás sóoldat Thorakotómia NNA: 4 mg/kg N-nitro-L-arginin (NNA) n=7 150 (perc) Thorakotómia n= (perc) 3. ETR-P1/fl + NNA: 4 mg/kg NNA Thorakotómia n= (perc) 100 nmol/kg ETR-P1/fl peptid (ET-A receptor antagonista) Szívizom biopszia

26 Makrokeringési eredmények Artériás középnyomás (MAP) Teljes perifériás érellenállás (TPR)

27 Makrokeringési eredmények Perctérfogat (CI) Szívfrekvencia

28 Makrokeringési eredmények Balkamra átmérő változása Szívkontraktilitás

29 Biokémiai eredmények Plazma endothelin-1 szint Plazma nitrit/nitrát szint (NOx)

30 Akut keringési elégtelenség modellek I. Vérzéses shock

31 Vérnyomás vezérelt vérzéses shock Artériás középnyomás (Hgmm) A RESZUSZCITÁCIÓ LEHETŐSÉGEI: 1. Saját vér visszaadás 2. Volumen pótlás krisztalloid oldatokkal (legalább 3 szoros volumen) 3. Volumen pótlás krisztalloid és/vagy kolloid oldatokkal 40 SHOCK (HS) 4. Kontrollálatlan (reszuszcitáció nélküli) vérzés modellek KONTROLL Reszuszcitáció

32 Makrohemodinamikai eredmények

33 Folyadékterápia: kétélű fegyver Morbiditás, mortalitás Optimális folyadék töltöttség Folyadék töltöttség (Bundgaard-Nielsen M, et al. ACTA Anaesthesiol Scand 2009; 53: )

34 Hgmm Artériás Középnyomás zselatin hidroxietil-keményítő dextrán 30 Vérzéses shock Volumen resuscitatio Idő (perc) P<0.05 vs kontroll érték (0 perc) A volumen reszuszcitáció végpontja: a kontroll MAP 75%-ának elérése, max. 50 ml/kg kolloid infúzió;

35 Verőtérfogat (SVI) vezérelte vérzéses shock Véreztetés végpontok: CI, SVI MAP, SVV, PPV, DO 2, O 2 ER SVI bsl SVI bsl - 50% SVI bsl -62% SVI bsl -75% SVI bsl -88% SVI bsl -100% t bsl t 0 t 1 t 2 t 3 t 4 véreztetés folyadékpótlás

36 Módszerek kísérleti állatok n=12 Narkózis=propofol (50 µg /ttkg/ó) Intubált, kontrollált lélegeztetés (8ml/ttkg) PICCO-monitor Óra diurézis Artériás, centrál vénás vérgáz mérések

37 Módszerek II. Véreztetés: artéria carotis kanül SVI bsl -50%-ig Folyadékpótlás: Ri-Lac-infúzió 4 lépcsőben SVI bsl -ig Mérések: Invazív hemodinamikai mérés Artériás, centrális vénás vérgáz Óradiurézis SVI bsl SVI bsl - 50% SVI bsl -62% SVI bsl -75% SVI bsl -88% SVI bsl -100% t bsl t 0 t 1 t 2 t 3 t 4 véreztetés folyadékpótlás

38 ScvO 2 and dco 2 resuscitation endpoints Nemeth M, et al. Intensive Care Med 2012; 38(S1): S003 SVI drop by 50% Resusc - SVI bsl

39 ScvO 2 and dco 2 resuscitation endpoints Nemeth M, et al. Intensive Care Med 2012; 38(S1): S003 SVI drop by 50% Resusc - SVI bsl

40 ScvO 2 and dco 2 resuscitation endpoints Nemeth M, et al. Intensive Care Med 2012; 38(S1): S003 ΔScvO 2 ~5% SVI drop by 50% Resusc - SVI bsl

41 ScvO 2 and dco 2 resuscitation endpoints Nemeth M, et al. Intensive Care Med 2012; 38(S1): S003 ScvO 2 : good indicator of VO 2 /DO 2 dco 2 : good indicator of flow SVI drop by 50% Resusc - SVI bsl

42 Mérsékelt hipovolémia modellek: Volumen vesztés NEM vérvesztés útján

43 Mérsékelt hipovolémia Bolus: iv. 5 mg/ttkg furosemid Folyamatos: iv. 5 mg/ttkg/~100 perc furosemid T 0 T 1 T 2 T 3 T 4 T 5

44 A hypovolémia makrohemodinamikai hatásai GEDI --- CI VO 2 /DO 2 DO 2 I Az adatokat, mint median jelöltük és repeated measures ANOVA-val elemeztük. p<0,05 T 0 -hoz képest

45 Perctérfogat index l/perc/m 2 Furosemid kezelt Kontroll 3,0 2,5 2,0 1,5 x 1,0 x x x x 0, Idő (perc)

46 VVT áramlási sebesség a szublinguális régióban μm/sec 1000 Kontroll Furoszemid kezelt # 250 # Idő (perc)

47 A fast-truck surgery sarkallatos Műtét t előtt: pontjai Betegek felkészítése (nem előkészítés Műtét előtt CH és fehérjedús diéta (tápszer) Bélelőkészítés s mellőzése Műtét t előtt nincs éhezés Műtét t előtt 6 órával orális tápszert Műtét t előtt 2 órával folyadék megvonása EDA kanül műtét előtt ÁK a műtőben

48 Kísérleti protokoll Csoportok 1. FTS (n=8) 2. MBP+HES (n=5) 3. MBP+RL (n=5) Előkészítés 6 órás táplálék + 2 órás folyadék megvonás Laevolac 3x30 ml + 24 órás táplálék + 12 órás folyadék megvonás Idő (perc) Volumenterápia Volumenterápia Volumenterápia

49 Artériás középnyomás 130 FTS MBP+HES MBP+RL 120 Hgmm Volumenterápia Idő (perc)

50 # # Szívfrekvencia # # # FTS MBP+HES MBP+RL # 100 # 1/perc # Volumenterápia Idő (perc)

51 VVT áramlási sebesség FTS MBP+HES MBP+RL 1000 μm/sec # 250 # # Volumenterápia Idő (perc)

52 1,0 Perfúziós ráta FTS MBP+HES MBP+RL 0,8 0,6 0,4 # 0,2 # Volumenterápia Idő (perc)

53 Hipovolémia létrehozása alsó testfélre kifejtett negatív nyomás (vákuum) hatására Humán keringés vizsgálat

54 Módszerek - LBNP - egészséges önkénteseken biztonságosan alkalmazható a hipovolémia szimulálására - az alsó testfélre kifejtett negatív nyomás (vákuum) hatására az alsó testfél felé volumen átrendeződés jön létre, ami centrálisan hipovolémiát eredményez, tényleges volumen vesztés nélkül - korábbi vizsgálati eredmények alapján: - 20 Hgmm-es negatív nyomás kb ml vérvesztés - 40 Hgmm-es negatív nyomás kb ml vérvesztés Ward KR et al., Resuscitation 81: 987, 2010.

55 Módszerek - OPS - intravitalis videomikroszkópia ortogonalis polarizációs spektrális képalkotással nm-es hullámhosszúságú fény alkalmazása vvt-k láthatóvá válnak - nem-invazív monitorozás RBCV: vvt áramlási sebesség MPR: perfúziós ráta MPCL: perfundált kapilláris hossz

56 Módszerek monitorozott paraméterek Mikrokeringés - RBCV - %RBCV -MPR -MPCL EKG -RRI SaO 2 Centrális vénás kanül -vérgáz -MPO -cvp Vákuum kamra Finapres -SAP -MAP - PP/PPV -SV/SVV

57 Módszerek vizsgálati protokol OPS felvétel hemodinamika vérvétel 0 Hgmm -20 Hgmm -40 Hgmm 0 Hgmm 1. vákuum beállása: 3-4 perc 2. mikrokeringés felvétel 3. hemodinamikai mérések spontán, vezényelt légzés mellett 4. vérvétel

58 Eredmények vörösvértest áramlási sebesség RBCV ( μm/s ) Non -Responder Responder x x x Kontroll 1-20 Hgmm 2-40 Hgmm 3 Visszatérés 4

59 Akut keringési elégtelenség modellek II. Kardiogén shock

60 Pericardiális tamponád A pericardiumban felgyűlő folyadék komprimálja a szívet, ezáltal romlik a pumpafunkció, ami kardiogén sokkhoz vezet. Okai: Traumás Iatrogén Betegségek / tumoros, gyulladásos (vírusos, bakteriális vagy immun eredetű)/ MI utáni vagy aorta aneurizma ruptúra Pericardium Intrapericardiális folyadék Tünetei, jelei: Sápadt, hűvös, nyirkos bőr Nehézlégzés Tachycardia Beck triász: Centrális vénás nyomás emelkedés Hipotónia Halk szívhangok

61 Módszerek I. referencia termisztor PiCCO Szublinguális és gasztrikus tonométer nyomás szenzor Áramlásmérő: a.mesenterica szuperior Altatás: Indukció: Ketamin+Xylazin Fenntartás: Propofol 2% (50μl/ttkg/min) termisztor Lélegeztetés: V T =10ml/ttkg FiO 2 =0,21 EtCO2=35 Hgmm

62 Kísérleti protokoll 1.Álműtött hemodinamika vérgáz tonometria Szuperoxid meghatározás vérmintából Pericardiális tamponád Pericardiális tamponád Pericardiális tamponád + C5a antagonista Pericardiális tamponád C5a antagonista (Anablock; iv. 4mg/ttkg) 240 percnél szövettani mintavétel biokémiai meghatározáscéljából

63 Artériás középnyomás Hgmm 120 Tamponád Tamponád + C5a antagonista Álműtött 100 # # # # # x x x x TAMPONÁD x x x x x C5a antagonista Idő (min)

64 Artéria mesenterica superior áramlás ml/perc x x # # x # Tamponád Tamponád + C5a antagonista Álműtött TAMPONÁD C5a antagonista Idő (perc)

65 Akut keringési elégtelenség modellek III. Ischaemiás modellek Béltranszplantáció

66 Computer Mérőrendszer Arteria mesenterica superior Vena mesenterica superior Transzplantált vékonybél Módszerek Anaesthesia: Na-pentobarbitál, 30 mg/kg HEMODINAMIKAI MÉRÉSEK Véráramlás: Transsonic flow-meter Mesenteriális érellenállás: Számítás: (AMSP-MVP)/AMSF BIOKÉMIAI MÉRÉSEK Bélnyálkahártya MPO aktivitás: Kübler módszer Granulocyta szabadgyök termelés: Guarnieri módszer SZÖVETTAN H&E festés, 5 fokozatú Chiu-skála STATISZTIKA Csoportokon belül: Friedman és Dunn teszt Csoportok között: Kruskal-Wallis és Dunn teszt p<0.05 a csoportokon belül

67 Kísérleti protokoll IV. Biopszia Műtét Műtét Hideg ischaemia Reperfúzió Biopszia Műtét Hideg ischaemia ETR-p1/fl i.v. (0,1 mg/kg) Reperfúzió Biopszia Műtét Hideg ischaemia ETR-p1/fl i.g. (0,1 mg/kg) Reperfúzió Biopszia

68 Vazokonstriktor hatás elimináció: ET-A Receptor antagonizmus béltranszplantáció (SBTX) során Graft-microcirculation Leukocyte rolling (intravital fluorescence microscopy=ivm) Leukocyte adherence (IVM) Functional capillary density of the villi (orthogonal polarization spectral imaging=ops) Epithelial thickness (OPS) IVM OPS m. ETR-p1/fl Cold Ischemia Reperfusion Wolfárd et al, Dynamic in vivo observation of villius microcirculation during small bowel autotransplantation: effects of endothelin-a receptor inhibition. Transplantation 73: , 2002.

69 PERCTÉRFOGAT ART. MESENTERICA SUPERIOR VÉRÁRAMLÁS CObw (ml/min/kg) # # SMA blood flow (ml/min/kg) SBTX SBTX+IPC # # IPC SBTX SBTX+IPC Cold Ischemia Time (min) IPC Cold Ischemia Time (min) Wolfárd A, Kaszaki J, Varga S, Lázár G, Boros M. Early microcirculatory changes after ischemic preconditioning and small bowel autotransplantation. Eur Surg Res 39: , 2007.

70 LEUKOCITA ROLLING LEUKOCITA KITAPADÁS Rolling leukocytes (%) Adherent leukocytes (No/mm 2 ) # # SBTX SBTX+IPC # # SBTX SBTX+IPC # # # # Time (min) Time (min) Wolfárd A, Kaszaki J, Varga S, Lázár G, Boros M. Early microcirculatory changes after ischemic preconditioning and small bowel autotransplantation. Eur Surg Res 39: , 2007.

71 FUNKCIONÁLIS KAPILLÁRIS DENZITÁS EPITHEL VASTAGSÁG FCD (mm/mm 2 ) Epithelial thickness (μm) 400 SBTX SBTX+IPC # Cold ischemia # Time (min) # Cold ischemia SBTX SBTX+IPC # Time (min) # # # Wolfárd A, Kaszaki J, Varga S, Lázár G, Boros M. Early microcirculatory changes after ischemic preconditioning and small bowel autotransplantation. Eur Surg Res 39: , 2007.

72 Krónikus keringési elégtelenség modellek III Ischaemia hosszútávú következményei

73 Bevezetés A gastrointestinalis traktus különösen érzékeny az ischaemia-reperfusiós károsodásra Két módon jöhet létre: Occlusiv (SMA embolia, thrombosis, strangulatio) Non-occlusiv (szisztémás hypotensio pl: pericardialis tamponád, aorta dissectio, érsebészeti beavatkozások) Mesenterialis ischaemia hatására

74 C5a peptid kulcsszerepet játszik a folyamatban

75 Korábbi eredményeink Az AcPepA kezelés rövid távú hatékonysága keringési elégtelenségben, nagyállat modellben Érces et al., Crit Care Med, 2013.

76 Korábbi eredményeink Az AcPepA kezelés rövid távú hatékonysága keringési elégtelenségben, nagyállat modellben Hosszú távú hatás? Érces et al., Crit Care Med, 2013.

77 Kísérleti elrendezés 1. nap aorta abdominalis Vérnyomásmérés OPS vizsgálat a. femoralis Sprague-Dawley hím patkányok ( g) Na-pentobarbital altatás (50 mg/kg) 16 óra éheztetés

78 40 Hgmm

79 Kísérleti elrendezés 2. nap v. jugularis, infúzió trachea kanül a. carotis Vérnyomásmérés a. mesenterica superior Perctérfogatmérés AMS áramlásmérés OPS vizsgálat

80 Kísérleti protokoll 1. nap 2. nap Álműtött (n=6) Idő (óra) mérések PAO (n=6) Idő (óra) 0 MAP = 40 Hgmm mérések PAO+AcPepA (n=6) Idő (óra) 0 MAP = 40 Hgmm mérések Makrokeringési Mikrokeringési AcPepA 4 mg/kg iv - BP, HR - mikrokeringés (serosa) - BP, HR - BP, HR, AMSF, CO TPR, MVR - mikrokeringés (mucosa, serosa)

81 Artériás középnyomás Szívfrekvencia Hgmm x x x x 1/min x x PAO 200 PAO Álműtött PAO PAO+AcPepA perc: AcPepA Idő (h) Álműtött PAO PAO+AcPepA perc: AcPepA Idő (h)

82 Szívindex 300 x 270 ml/min/kg 240 # Álműtött PAO PAO+AcPepA Csoportok

83 Teljes perifériás ellenállás 1,8 # 1,5 Hgmm/ml/min 1,2 0,9 0,6 Álműtött PAO PAO+AcPepA Csoportok

84 Az arteria mesenterica superior vérátáramlása érellenállása 11 # 25 x 10 ml/min Hgmm/ml/min x Álműtött PAO PAO+AcPepA Csoportok Álműtött PAO PAO+AcPepA Csoportok

85 Átlagos vvt áramlási sebesség - serosa 1400 Álműtött PAO PAO+AcPepA # μm/s x nap 2. nap

86 Akut keringési elégtelenség modellek IV. Endotoxémia-szepszis

87 Kísérleti protokoll II. ETX-infúzió (5,3 μg/kg) 0. perc 120. perc 240. perc 480. perc MEG (2 mg/kg) ETX-infúzió (5,3 μg/kg) 0. perc 120. perc 240. perc 480. perc

88 Artériás riás s középnyomás Hgmm ETX ETX+MEG ETX infúzió MEG kezelés Idő (perc)

89 Balkamrai kontraktilitás Hgmm/mm 30 ETX ETX+MEG 25 # # # # MEG kezelés 10 ETX infúzió Idő (perc)

90 Akut keringési elégtelenség modellek V. Peritonitis-szepszis

91 Kísérleti protokoll (Barth et al., Crit Care Med 2008, módosítása) OPS OPS OPS Álműtött n= Instrumentálás Szeptikus n= Krisztalloid iv Instrumentálás Krisztalloid - kolloid iv. Indukció Invazív monitorozás nap 2. nap Lélegeztetés: V T =10ml/ttkg; FiO 2 =0,21; EtCO2=35 Hgmm Vérvétel Kilégzett metán mintavétel

92 Monitorozás Kilégzett metán mintavétel PiCCO perctérfogat CVP Katéter OPS mikrokeringés vizsgálat Intravitális videomikroszkóp: Ortogonális Polarizációs Spektrális (OPS) képalkotás Hemoglobin tartalmú képletekről kontrasztanyag nélkül 548 nm-es hullámhossz Altatás: Indukció: Ketamin+Xylazin Fenntartás: Propofol 2% (50 μl/ttkg/min) Vérnyomás szenzor Artériás és vénás vérgáz mintavétel Vérminta biokémiai meghatározásokra

93 O 2 extrakció (%) (DO 2 / VO 2 x 100) Az oxigénextrakci nextrakció változása 30 Súlyosabb szepszis Álműtött Kevésbé súlyos szepszis 20 x# Idő (óra)

94 DO 2 (ml/min) Az oxigén n száll llítás s változv ltozása 6000 Súlyosabb szepszis Álműtött Kevésbé súlyos szepszis x x x x Idő (óra)

95 Az oxigén felhasználás s változv ltozása VO 2 (ml/min) 1200 Súlyosabb szepszis Álműtött Kevésbé súlyos szepszis x # Idő (óra)

96 HMGB1 (pg/ml) 14 HMGB1 plazma koncentráció Súlyosabb szepszis Álműtött Kevésbé súlyos szepszis x # Idő (óra)

97 fmol/ml 3 2 Big - endothelin szint változv ltozása Súlyosabb szepszis Álműtött Kevésbé súlyos szepszis # # x# Idő (óra)

98 A vörösvv svértestek áramlási sebessége Microcirkuláció (vvt sebesség) RBCV (μm/s) r= -0,491 P=0, ,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 Big - endothelin (fmol/ml) Súlyosabb szepszis Álműtött Kevésbé súlyos szepszis x # Idő (óra)

99 Krónikus gyulladás modellek Colitis

100 Módszerek IBD modellezése TNBS modell (Morris 1989) : 2, 4, 6 trinitro benzol szulfon sav Egyszeri intracolonalis alkalmazás Vastagbélfekélyek több, mint 8 hétig Extenzív, transmuralis, granulomatózus gyulladás kifejezett súlyvesztés, morfológiai elváltozások, TNF α plazmaszint emelkedés és szöveti granulocita akkumuláció álműtött colitis

101 Módszerek sebészi beavatkozás a. carotis v. jugularis infúzió trachea kanül a. femoralis Termodilúciós perctérfogatmérés CLSEM Artériás vérnyomás katéter Vérnyomás jelátalakító (transzducer) Adatgyűjtő Computer Állatok: Wistar hím patkányok ( g) Napentobarbitál altatás (50 mg/kg) Hemodinamikai vizsgálatok: Artériás vérnyomás Perctérfogat (CO) mérés

102 Kísérleti protokoll: I. vizsgálat (PC kezelés) -6.nap Idő (óra) 1. Álműtötttt (n= ) Oldószer i.c. kezelés 0.nap 0 1.nap nap Colitis (n= (n=8+8) TNBS 40 mg/kg i.c. 3. Colitis+PC táp (n=8+8) TNBS 40 mg/kg i.c. TNBS = 2-, 4-, 6-trinitro-benzol-szulfonsav egyszeri intracolonalis alkalmazása Előkezelés: TNBS indukció előtt 6 napig PC-vel dúsított speciális táp = mintavétel

103 Eredmények I. Vizsgálat In vivo hisztológiai változások Kehelysejt szám változása