Hisztopatológia Kft. Katalógus 2013

Átírás

1 Hisztopatológia Kft. Katalógus 2013 Primer antitestek HISTOLS Detektáló & Kromogén/Szubsztrát rendszerek Tissue MicroArray HISZTOPATOLÓGIA a diagnosztika szolgálatában

2 Katalógus# Oldal HCG ß 5H4E GCR 3D Insulin E2E TGFα P/T TNFα P/T AQP1 1/ AQP4 4/ Ki67 B mglur1 3/G Cytokeratin KL Ösztrogén receptor SP Progeszteron receptor SP cerbb2/her2 SP Wilm's Tumor Protein 6FH HISTOLS p504s/p63 13H4+Y4A MLH1 G MSH2 25D ECadherin ECH BetaCatenin Cyclin D1 SP COX2 SP p53 DO p63 Y4A Ki67 SP Podoplanin D Napsin A KCG Cytokeratin 5 XM Cytokeratin 18 DC CD34 QBEND CD Szöveti Mikrosorozat Készítő Készlet (TMA) DominoStainer HISTOLS Detektáló Rendszerek (PO) HISTOLS Detektáló Rendszerek (AP) 21

3 Katalógus# Oldal HISTOLS Kétlépcsős Detektáló Rendszer HISTOLS Jelölt Streptavidin Detektáló Rendszer K HISTOLS DAB Kromogén/Szubsztrát Rendszer KE HISTOLS DAB Kromogén/Szubsztrát Rendszer Jel Erősítővel HISTOLS Rezisztens AEC Kromogén/Szubsztrát Rendszer HISTOLS AP Red Kromogén/Szubsztrát Rendszer Emlőrák IHC Kit Vastagbélrák IHC Kit Tüdőrák IHC Kit K Prosztata IHC Kit APK AP Kit K HISTOLS Előkezelő IHC Kit HistoPen CD45 IBL5/ CD11a IBL6/ CD45RC IBL MHC II IBL5/ CD90 IBL6/ CD8alpha IBL3/25 30

4 Árajánlat kérés és megrendelés Megrendeléseiket fogadja a Hisztopatológia Kft. hivatalos magyarországi viszonteladója: Posta: IZINTA Kft., 1121 Budapest, Konkoly Thege M. út Czira Sándorné: czirae@izinta.hu Obritán Ildikó: iobritan@izinta.hu telefon: fax: A katalógusban szereplő egyes termékek in vitro diagnosztikai (IVD) célra is alkalmasak. Annak ellenére, hogy tisztított formában és steril csomagolásban kerülnek előállításra, nem alkalmazhatók in vivo klinikai diagnózis felállítására vagy gyógyszerként. Valamennyi, a katalógusban felsorolt termék iparjog és szellemi tulajdonjog védelmi helyzete rendezett, hasznosításuk nem sért létező oltalmakat. HISZTOPATOLÓGIA a diagnosztika szolgálatában 1

5 Elsődleges antitestek Humán Chorionic Gonadotropin ß (hcg ß) 5H4E2, 0.2 mg/ml Ez az egér monoklonális antitest a hcg ß termelő sejtek (trophoblastok) citoplazmáját jelöli, melyek a placentában, mola hydatidosában, choriocarcinomában vannak jelen, valamint néhány differenciálatlan tüdőtumor sejtjei is expresszálnak hcg ßt. Nem mutat reakciót normál endometrium, here, valamint tüdő szövetben. Seminoma, hcg ß Spitalieri, P., et al., Cloning Stem Cells (2009), 11(4), , PMID: Glucocorticoid Receptor (GCR) 3D5, 0.2 mg/ml Ez az egér monoklonális antitest a GCR molekula következő fragmentjeit ismeri fel: 7197, 7989 és 8997, valamint HEP/G2 in vitro sejtkultúrából izolált GCRt. Nem reagál TGB, BSA és KLH molekulákkal. Az antigén a csontvelőben, májban, egyéb szövetekben a GCRtermelő sejtek felszínén és citoplazmájában mutatható ki. Emlőrák, GCR Du, J., et al., Arthritis Res. Ther. (2009), 11(4), R108, PMID: Békási, S., et al., Pathol. Oncol. Res. (2009), 15(4), , PMID: Meindl, S., et al., J. Invest. Dermatol. (2009), 129(9), , PMID:

6 Insulin E2E3, 0.2 mg/ml Ez az egér monoklonális ellenanyag a hasnyálmirigy szigeteinek béta sejtjeit és az inzulinomákat jelöli. Az inzulin (humán, sertés, szarvasmarha) biológiailag legaktívabb formáját a Cterminális végen ismeri fel. Nem reagál proinzulinnal, Cpeptiddel, thyreoglobulinnal, albuminnal, valamint patkányból, nyúlból és tengerimalacból származó inzulinnal. Az antitest alkalmas a diabeteses betegek szérumvizsgálatára és inzulin termelő tumorok kimutatására. Pancreas, Insulin Ou, D., et al., Hum. Immunol. (2005), 66(7), , PMID: Nykiforuk, C. L., et al., Plant Biotechnol. J. (2006), 4(12), 7785., PMID: Noto, A., et al., Metabolism (2007), 56(1), , PMID: TGFα P/T1, 0.2 mg/ml Ez az egér monoklonális ellenanyag lehetőséget nyújt a humán tumorsejtek TGFα termelésének kimutatására, különböző humán eredetű tumorokban a terápia hatékonyságának vizsgálatára. Melanoma, TGFα Bebok, Z., et al. Orv. Hetilap (1993), 134(24), , PMID:

7 TNFα P/T2, 0.2 mg/ml Ez az egér monoklonális ellenanyag a TNFα (Tumor Nekrózis Faktorα) termelő sejtek (makrofágok) citoplazmáját jelöli. Histiocyta/macrophag, TNFα Ohri, C. M., et al., BMC Cancer (2010), 10, 323., PMID: Cui, X., et al., Cancer Prev. Res. (2010),3(4); , PMID: Emura, I., et al., Pathol. Int. (2010), 60(6), , PMID: Aquaporin1 (AQP1) 1/22, 0.2 mg/ml Ez az egér monoklonális ellenanyag az AQP1 epitópjának Cterminálisán reagál. Az aquaporinok (AQP) a MIP (Major Intrinsic Protein) fehérjék családjához tartoznak. Patkány agy, AQP1 Kim, J. H., et al., J.Cereb. Blood Flow Metab. (2010), 30(5), , PMID: Thoroddsen, A., et al. J. Clin. Endocrinol. Metab. (2011), 96(4), , PMID: Urity, V. B., et al., Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol (2012), 302:R7206., PMID:

8 Aquaporin4 (AQP4) 4/18, 0.2 mg/ml Ez az egér monoklonális ellenanyag az AQP4 epitópjának intracelluláris Cterminálisán reagál. Az aquaporinok (AQP) a MIP (Major Intrinsic Protein) fehérjék családjához tartoznak. Patkány agy, AQP4 Fazzina, G., et al., J Neurotrauma (2010),27:45361., PMID: Taya, K., et al., J Neurotrauma (2010), 27:22939., PMID: Glover, L. E., et al., PLoS One (2012) 7:e33646., PMID: B56, 0.2 mg/ml RTU 5 ml Ki Ez az egér monoklonális antitest a Ki67 sejtproliferációs antigénnel reagál, mely az osztódó sejtek magjában expresszálódik, kizárólag a sejtciklus G1, S, G2 és M fázisaiban mutatható ki, a G0 fázisban nem. Nyirokcsomó, Ki67 DolledFilhart, M., et al., Cancer Res. (2006), 66(10), , PMID: Mehandru, S., et al., J. Virol. (2007), 81(2), , PMID: Monti, P., et al., J. Clin. Invest. (2008), 118(5), , PMID:

9 mglur1 3/G11, 0.2 mg/ml Ez az egér monoklonális antitest az mglur1 fehérjét mutatja ki, mely az agyban, szívben és vesékben expresszálódik. Mutáns melanomás egerekben szintén kimutatható, de normál egér melanociták nem termelik. A glutamát receptorok alkotják a legfontosabb serkentő neurotranszmitter receptorokat az agyban. Két osztályuk ismert: ionotrop és metabotropreceptorok. A metabotrop glutamát receptorok, melyek közé az mglur1 is tartozik Gproteinnel kapcsolt receptorok, melyek képesek aktiválni a foszfolipázokat vagy adenillilciklázokat, idegsejttől függően. Patkány agy, mglur1 Kiss, J., et al., Acta Biologica Hungarica (1996), 47. (14): , PMID: Cytokeratins 1, 2, 5, 6, 7, 8, 10, 11, 14, 16, 17, 18, KL1, 0.2 mg/ml Ez az egér monoklonális ellenanyag a hám eredetű normál és daganatos sejteken reagál, míg az epidermális bazál sejtekkel nem. Tüdőrák, KL1 Nagle, R. B., et al., Mol. Biol. Rep. (1994), 19(1), 321., PMID: Schaafsma, H. E., et al., Pathol. Annu. (1994), 29(Part I), 2162., PMID: Miettinen, M., et al., Mol. Pathol. (1995), 8(4), , PMID:

10 Ösztrogén receptor SP Ez a nyúl monoklonális antitest az ösztrogén receptorként leírt 67 kdaos fehérjét ismeri fel. Az antitest emlőrákok epitheliális sejtjeinek sejtmagját jelöli. Az ER a növekedés és differenciálódás fontos szabályozója az emlő mirigy szövetekben. Jelenléte emlő tumorokban egy ösztrogén ellenes terápiára (pl: tamoxifen) való pozitív válaszreakciót jelzi. Emlőrák, ER Cheang, M. C., et al., Clin. Cancer Res. (2008), 14(5), , PMID: De Maeyer, L., et al., J. Clin. Oncol. (2008), 26(2), , PMID: Turbin, D. A., et al., Breast Cancer Res. Treat. (2008), 110(3), , PMID: Progeszteron receptor SP Ez a nyúl monoklonális antitest a progeszteron receptor tartalmú humán sejteken reagál. A progeszteron receptor (PgR) egy ösztrogén által szabályozott fehérje, expressziója válaszként elindít egy ER útvonalat, mely az endokrin terápia hatásosságára enged következtetni. Sok tanulmány igazolta, hogy a PgR meghatározása az ER mennyisége mellett kiegészítő információkat hordoz, mind az endokrin terápia hatásfokát, mind a túlélés becslését illetően. Néhány tanulmány szerint a PgR az ERral szemben magasabb szintű prognosztikus indikációs faktornak bizonyult. Emlőrák, PgR Huang, Z., et al., Appl Immunohistochem & Mol Morphol 2006;14(2): , PMID: Cano, G., et al., Diag Cytopathol (2003), 29(4): , PMID:

11 cerbb2/her2 SP Ez a nyúl monoklonális antitest a cerbb2 fehérjét ismeri fel, mely egy receptor tirozin kináz. Szerkezetében közeli kapcsolatot mutat az epidermális növekedési faktor receptorhoz. A cerbb2 onkoprotein emlőrákok, egyéb adenocarcinomák és átmeneti sejtes carcinomák egy részében mutatható ki. Emlőrák, cerbb2/her2 Ricardo, S., et al., J. Clin. Pathol. (2007), 60(9), , PMID: Wludarski, S. C., et al., Applied Immunohistochem Mol Morph (2008), 16(5), , PMID: Nassar, A., et al., Diagn. Cytopath. (2009), 37(12), , PMID: Wilm's Tumor Protein 6FH12 Ez az egér monoklonális antitest a WT1 fehérjével reagál, mely a 11p13 kromoszómán lokalizálódó szupresszor gén terméke. Proliferatív mesotheliális sejtekben, malignus mesotheliomában, ovarium cystadenocarcinomában, gonadoblastomában, nephroblastomában és desmoplasticus kis kereksejtes tumorokban került azonosításra. A WT1 gén normál esetben embrionális vesében és mesotheliumban expresszálódik. Kimutathatósága a Wilm's tumor és mesothelioma markere. Tüdő adenocarcinoma ritkán mutat poztitivitást. Vese, WT1 Roberts, F., et al., J Clin Pathol (2001), 54(10):76670., PMID: Jimenez, R. E., et al., Am J Surg Pathol (2002), 26(3):3207., PMID: Lucas, D. R., et al., Histopathology (2003), 42(3):2709., PMID:

12 HISTOLS p504s/p63 13H4+Y4A3 Ez a nyúl és egér monoklonális antitestek keverékéből készült antitest kombináció hasznos a prosztata eredetű tumorok diagnózisában. A p504s (AMCR, alphamethylacylcoaracemase) egy, az elágazó láncú zsírsavak bétaoxidációjában résztvevő enzim, detektálása segít a malignus és benignus sejtek elkülönítésében. A p504s antitest pozitív a malignus és pr gnus prosztata mirigy sejtek citoplazmájában, míg a p63 antitest a mirigyek benignus bazális rétegének sejtmagjaiban reagál. Prosztata, p504s/p MLH1 G Ez az egér monoklonális antitest az MLH1 molekulát mutatja ki humán sejtekben. A HNPCC (öröklődő nempolipózus vastagbélvégbélrák) felelős az örökletes vastagbéldaganatok legnagyobb részéért. Kialakulásáért a mismatchrepair rendszer hibái tehetők felelőssé. Az MLH1 gén hibásodása microsatellitinstabilitást okoz (MSIH). Az antimlh1 antitest jól használható családok és páciensek érintettségének követésére. A microsatellitinstabil vastagbélrák jobb prognózisú, mint a microsatellitstabil. Colon carcinoma, MLH1 Wright, C. L., et al., Am J Surg Pathol (2003), 27(11): , PMID: Brueckl, W. M., et al., Anticancer Research (2003), 23(2C): , PMID: Rigau, V., et al., Arch Pathol Lab Med (2003), 127(6): , PMID:

13 MSH2 25D Ez az egér monoklonális antitest az MSH2 fehérjét mutatja ki, melynek elsődleges feladata, hogy felismerje a hibás bázispárokat a replikáció utáni mismatch repair folyamatban. Ha az MSH2 funkciója sérül, a replikációs hibák felhalmozódása többszörös mutációhoz, és ennek eredményeként rákos elváltozásokhoz vezethet. Colon, MSH ECadherin ECH Ez az egér monoklonális antitest az ECadherin fehérjét jelöli, mely egy kalciumfüggő sejtadhéziós molekula, főként az epithel szövetekben expresszálódik. Az ECadherin fontos szerepet játszik a sejtek növekedésében és fejlődésében, azáltal hogy a szövet szerkezetét és integritásának fenntartását kontrollálja. Rákokban az ECadherin expresszió csökkenése vagy hiánya pozitív összefüggésként tekinthető a tumor invázió és metasztázis lehetőségével. Skin, ECadherin Baba, F., et al., Breast Cancer Res. Treat. (2006), 98(1), 9198., PMID: Choi, Y. J., et al., Mod. Pathol. (2008), 21(10), , PMID: IacobuzioDonahue, C. A., et al., J. Clin. Oncol. (2009), 27(11), , PMID:

14 ßCatenin Ez az egér monoklonális antitest a BetaCatenin fehérjét ismeri fel, mely normál esetben a sejt citoplazmájában a membrán alatt lokalizálódik. Az ECadherinnel együtt látja el funkcióját. Amennyiben mutáció lép fel a BetaCatenin génjében, a fehérje felhalmozódik a sejtmagban. Ez a fehérje felhalmozódás megfigyelhető az emlő és a has fibromatózus elhalásainál, így ezzel elkülöníthetővé válik az egyéb, ezeken a területeken található orsósejtes károsodásoktól. A BetaCatenin sejtmagban történő felhalmozódása megfigyelhető a bélrendszer rákjaiban is. Bőr, BetaCatenin Varallo, V. M., et al., Oncogene (2003), 22(24), , PMID: Montgomery, E., et al., Adv Anat. Pathol. (2005), 12(6) : , PMID: Burford, H., et al., Am. J. Clin. Pathol. (2009), 132(6), , PMID: Cyclin D1 SP Ez a nyúl monoklonális antitest a Cyclin D1 fehérjét, az egyik sejtciklust szabályozó kulcsmolekulát jelöli. A Cyclin D1 vélhetően protoonkogén szerepet tölt be, túlműködése a humán daganatok nagy részében kimutatható. A cyclinek a sejtciklust a cyclinfüggö kinázok aktivitásának szabályozásával irányítják. A Cyclin D1 legnagyobb mértékben a G1 fázis közepétől a végéig mutatható ki. Az antitest segítségével a köpenyzóna lymphoma elkülöníthető a kis lymphocytás lymphomától és a cleaved cell lymphomától. Köpenyzóna lymphoma, Cyclin D1 Pruneri, G., et al., Appl. Immunohistochem Mol. Morphol. (2005), 13(4), , PMID: Torlakovic, E., et al., Am. J. Clin. Pathol. (2005), 124(5), , PMID: Rossi, S., et al., Am. J. Clin. Pathol. (2005), 124(2), , PMID:

15 COX2 SP Ez a nyúl monoklonális antitest a COX2 fehérjét ismeri fel. A prosztaglandin, tromboxán és prosztaciklin bioszintézisének első lépésében a COX2 katalizálja az arachidonsav prosztaglandinh2vé való alakulását. Gátlása nem szteroid gyulladáscsökkentőkkel mérsékli a daganat növekedését, az angiogenezist és elősegíti az apoptózist. A COX2 fokozott expressziója rossz prognózist jelent, kapcsolatba hozható a daganat megnövekedett vaszkularizációjával, valamint a VEGF fehérje expresszióval, főként a fej és nyak régió daganataiban. Fokozott COX2 expresszió a vastagbél, emlő, hasnyálmirigy, valamint a tüdő adenocarcinomákban is rossz prognózist indikál. Colon carcinoma,cox2 Stoehlmacher, J., et al., Semin. Oncol. (2003), 3(6), 1016., PMID: Denkert, C., et al., Cancer (2003), 97(12), , PMID: Sheehan, KM., et al., Hum Pathol. (2003) 34: , PMID: p53 DO Ez az egér monoklonális antip53 antitest felismeri a p53 gén által termelt 53 kdaos foszfoproteint, vad típusú és mutáns változataival egyaránt reagál. Az antigén kimutathatósága negatív prognosztikus faktor az emlő, tüdő, bélrendszeriés a húgyivarszervi rákok esetében. Colon carcinoma TMA, p53 Bartek, J., et al., Oncogene (1991), 6(9): , PMID:

16 p63 Y4A Ez az egér monoklonális antitest egy 63 kda molekulatömegű fehérjét ismer fel. A p63 gén több eptheliális szövet bazális vagy progenitor sejtrétegeiben mutat erős expressziót, nagy strukturális hasonlóságot mutat a p53 génnel, azzal ellentétben viszont több izotípust kódol, melyek a p53 riporter gént különbözőképpen aktiválva apoptózist indukálnak. Bőr, p63 Yang, A., et al., Mol Cell (1998), 2(3): , PMID: Yang, A., et al., Nature (1999), 398(6729): 7148., PMID: Ki67 SP Ez a nyúl monoklonális antitest a Ki67 sejtproliferációs antigénnel reagál, mely az osztódó sejtek magjában expresszálódik, kizárólag a sejtciklus G1, S, G2 és M fázisaiban mutatható ki, a G0 fázisban nem. Nyirokcsomó, Ki67 Henken, F. E., et al., Mol. Cancer (2011), 10, 71., PMID: Silva, A., et al., Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver. Physiol. (2011), 300(6), G , PMID: Sharifpoor, S., et al., Biomaterials (2011), 32(21), , PMID:

17 Podoplanin D Ez a nyúl monoklonális antitest a podoplanint, egy transzmembrán mukoproteint ismer fel, mely szelektíven expresszálódik nyirokér endotheliumban, Kaposi's sarcomákban, lymphangiomákban, nyirokér eredetű angiosarcomák egy részében, valamint kimutatható epithelioid mesotheliomában, haemangioblastomában és seminomában is. Tonsilla, Podoplanin Galambos, C., et al., Pediatr Dev Pathol (2005), 8(2):1919., PMID: Niakosari, F., et al., Arch Dermatol (2005), 141(4):4404., PMID: Ordonez, N., et al., Adv Anat Pathol (2006),13(2):838., PMID: Napsin A KCG Ez az egér monoklonális antitest a Napsin A molekulát, egy 35 kda molekulatömegű fehérjét ismer fel. A Napsin fehérjének két izoformája létezik, a Napsin A és B, melyek nagy mértékben homológ génszekvenciák termékei. A Napsin A egy aszpartát proteináz, ami a tüdőben expresszálódik és a surfactant protein B képződésében játszik szerepet. Ezen kívül vesében is kifejeződik. Ez az antitest hasznos markere a primer tüdő adenocarcinomának. Napsin A, tüdő adenocarcinoma Hirano, T., et al., Lung Cancer (2003), 41(2): , PMID: Ueno, T., et al., Br. J. Cancer (2003), 88(8): , PMID: Dejmek, A., et al., Diag Cytoplathol (2007), 35(8): 493., PMID:

18 Cytokeratin 5 XM Ez az egér monoklonális ellenanyag a CK5 intermedier filamentum fehérjéhez kötődik. A humán epidermis basalsejtjei expresszálják a 14es cytokeratinnal együtt. A CK5 58 kda molekulatömegű protein, mely közeli rokonságban áll a CK6tal. Kifejeződik a basalsejtes epitheliomában, a prostata, az urothelium és a vagina basalsejtjeiben és a bőr, a nyelv, az epiglottis és a vastagbél squamosus sejtes carcinomájában. Az antick5 hasznos a mesothelioma elkülönítésére az adenocarcinomák többségétől. Cytokeratin 5, tüdő laphámrák Irvine, A. D., et al., J Invest Dermatol (1997), 108(5): , PMID: Whittock, N. V., et al., Biochem Biophys Res Commun (2000), 274: 149., PMID: Cytokeratin 18 DC Ez az egér monoklonális antitest a 45 kda molekulatömegű humán CK18ra specifikus, mely a CK8 proteinnel együtt a ductális és granduláris epitheliumban expresszzálódik. Az antick18 pozitív reakciót mutat benignus és malignus epitheliális lesiok, adenocarcinomák többsége, és basalsejtes carcinomák esetén, ellenben nem reagál a squamosus epitheliummal. Cytokeratin 18, tüdő adenocarcinoma Bartek, J., et al., J Pathol (1991), 164: 215., PMID:

19 CD34 QBEND/10 Ez az egér monoklonális antitest a hematopoietikus sejtek (pl.: lymphoid és myeloid progenitorok) felszínén található 110 kda molekulatömegű glikoproteinnel reagál. Pozitív reakciót ad a vasculáris endothel sejtjeivel is. CD34, placenta Bettencourt, MC., et al., J Urol (1998),160:45965., PMID: Simonavicius, N., et al., Mod Pathol (2008), 21:30815., PMID: Varoga, D., et al., Clin Orthop Relat Res (2009), 467: , PMID: CD117 PC Ez a nyúl poliklonális antitest a 145 kda molekulatömegű humán CD117 fehérjével reagál. A ckit fehérjék transzmembrán receptor tyrosin kinázok, többféle szövetben expresszálódnak. Nagyrészt őssejtek, csírasejtek, velősánc eredetű melanoma sejtek és hematopoietikus prekurzor sejtek fejlődésében játszanak szerepet. CD117, naevus Meyts, E. R., et al., J Pathol (1996), 178(2): 1669., PMID: Arber, D. A., et al., Human Pathol (1998), 29(5):498.,PMID:

20 Szöveti Mikrosorozat (TMA) Készítő Készlet , (.2,.3,.4 vagy.k) A készlet tartalma: Kiöntőforma alsó és felső részek, 11db, az alsó 70 (1 mm), 24 (2 mm), 12 (3 mm) vagy 8 (4 mm) tüskével Csavarok Mintavevő kiszúró tollak Az eszköz segítségével hagyományos módon metszhető paraffinos blokk készíthető, mely 70 (24, 12 vagy 8) vájatot tartalmaz. A blokk 7x10, 6x4, 4x3 vagy 4x2 oszlop/sor elrendezésben tartalmazza az 1.0, 2.0, 3.0, vagy 4.0 mm átmérőjű szövetmintákat. A megfelelő átmérőjű kiszúró toll segítségével a donor blokkból a vizsgálandó szövetek kiszúrhatók, a fogadó blokkba beilleszthetők, így az alkalmazott átmérőtől függően többféle szövet vizsgálható egy időben, azonos körülmények között. A TMA blokk elkészítése nem igényel egyéb speciális kiegészítő tartozékot. TMA blokk készítése 1. Az alsó és felső kiöntőforma pontos összeillesztése után győződjünk meg arról, hogy a csavarok kitekert állapotban vannak. Ellenkező esetben a paraffin elfolyhat az alsó és felső rész közötti résben. A kiöntőforma alsó elemén lévő két csap biztonságosan rögzíti a felső elemet. 2. A beágyazó kazettát a felső elemen kialakított vájatba helyezzük. 3. Az öntőformát a beágyazó kazettán át feltöltjük 5660 Cos, termosztátból kivett folyékony paraffinnal úgy, hogy a paraffin elfedje a kazettát is. 4. Szobahőmérsékleten hagyjuk megszilárdulni (2030 perc). Nem szabad mélyhűtőszekrénybe vagy egyéb erősen hűtött felületre tenni, mert a hirtelen lehűlés a blokk megrepedését okozhatja. Ha nem hagyunk elég időt a paraffin megszilárdulására, akkor nem megfelelő számú és/vagy deformált szövethengerbefogadó helyet tartalmazó blokkot kaphatunk. 5. Ha tökéletesen megszilárdult a paraffin, akkor a két csavar egyidejű, az óra járásával megegyező irányú tekerésével a két rész egymástól könnyen szétválasztható. Ezután a kész blokk könnyen kibillenthető a formából. Szövethengerek készítése és elhelyezése a TMA blokkban 1. Első lépésként a kiszúrandó szövetrészletet kell meghatározni egy festett metszet alapján. A szövetrészletet reprezentáló eredeti paraffinos blokkot néhány esetben (pl.: sok metszet készítése során elvékonyodott) praktikus újraágyazni. Ez extra paraffin mennyiséget eredményez a kiszúrt henger tetején, így elkerülhető a szövet elvesztése a blokk befaragásánál. 2. A kiválasztott vizsgálandó szövetrészlet elhelyezkedésének azonosítása után a blokk felszínére merőlegesen tartjuk a kiszúrót és könnyed csavaró mozdulattal kb. 4 mm mélyen a blokkba szúrjuk, majd szintén merőlegesen 17

21 tartva kihúzzuk a blokkból. A toll hegye tartalmazza a szövethengert. A kiszúró toll rugós, mely biztosítja a kiszúrt szövethenger kitolását. A kiszúrás során a tollat ne tartsuk benyomva. A hengerek kiszúrása kis gyakorlatot kíván, ajánlott olyan blokkokon gyakorolni, melyek nem diagnosztikus célra készültek. A megfelelő szövethenger nyerése függhet az eredeti szövet kezelésétől (fixálás, beágyazás), valamint a szövet struktúrájától (kemény, porcos, heges szövet esetében előfordulhat, hogy nehezen, vagy egyáltalán nem szúrja át a hegy a szövetet). A kiszúró hegy éles, bizonyos idejű használat után cserélni kell. 3. A kiszúró hegyét ezután merőlegesen a recipiens TMA blokk első oszlopának egyik üres helyének szájadékához illesztjük, a tetejét benyomva a kiszúrt szövethengert a lyukba toljuk. Ügyeljünk arra, hogy ez ne nagy erővel történjen, mert roncsolhatja mind a szövethengert, mind a lyukat. A szövethenger benyomása során ellenkező irányba tolja a kiszúrót, így a henger egy része a TMA blokkon kívül maradhat; ez ellentartással kivédhető, ami kis gyakorlattal elsajátítható. Ajánlott, hogy legalább két szövethenger reprezentáljon egy kiválasztott szövetrészletet. Fontos: a TMA blokkba került minták pontosan azonosíthatóak legyenek (pl. szövettani azonosító) 4. A paraffinos blokkot 1015 percre 5658ºC os termosztátba tesszük, ez alatt a paraffinrétegek összeolvadnak. A kész blokkot a már megszokott módon lehet metszeni. Tisztítás, karbantartás, tárolás Használat után a kiöntőformáról el kell távolítani az esetleges paraffin szennyeződést. Erre az eszköz felmelegítése és/vagy bármilyen puha törlőkendő alkalmas. A kiszúró esetében meg kell győződni arról, hogy a hegyében ne maradjon paraffinhenger vagy szövetminta. Ajánlatos ekkor a toll akadálymentes működését (dugattyú) is ellenőrizni. Az eszköz nem igényel speciális tárolási körülményeket, portól, magas hőtől, mechanikus ártalmaktól ajánlott megóvni. Egyéb megjegyzések, figyelmeztetések Gondos használat mellett az eszköz nem jelent veszélyforrást a felhasználó számára. A kiszúró toll hegye éles, nem megfelelő használata sérülést okozhat. Ne használjuk más célra. Ügyeljünk arra, hogy a termék tartozékait ne ejtsük le, mert sérülhetnek, deformálódhatnak. Rendelési Információ: Katalógus# TMA készlet, 1 mm (kiöntőforma alsó és felő rész, 2 db csavar és egy mintavevő kiszúró toll) TMA készlet, 2 mm (kiöntőforma alsó és felő rész, 2 db csavar és egy mintavevő kiszúró toll) TMA készlet, 3 mm (kiöntőforma alsó és felő rész, 2 db csavar és egy mintavevő kiszúró toll) TMA készlet, 4 mm (kiöntőforma alsó és felő rész, 2 db csavar és egy mintavevő kiszúró toll) K TMA készlet kombináció (1, 2 és 3 mmes TMA készítő eszköz és 3 db kiszúró toll) 18

22 DominoStainerTM A DominoStainerTM egy teljesen nyitott rendszerű immunhisztokémiai festőautomata. Előnye az ismert és dominálóan nagy teljesítőképességű, így kisebb vizsgálati minta processzálására nem gazdaságos eszközökkel szemben, hogy kisebb laboratóriumok alacsonyabb mennyiségi szintű igényeit elégíti ki. Mivel speciálisan szöveti mikrosorozat (tissue microarray, TMA) metszetek immunfestésére lett kifejlesztve, így a TMA metszeteket használva sorozatvizsgálatokra is jól és gazdaságosan működtethető, jelentős környezet kímélő hatásfokkal. A Hisztopatológia Kft. a készüléket saját fejlesztésű és kifejezetten az automata használatához szükséges formátumú reagensekkel látja el. A DominoStainerTM az elsődleges és másodlagos ellenanyagokkal, valamint a kromogén/szubsztrát rendszerrel és haematoxylinnal való inkubálást automatizálja. A szükséges deparaffinálást és a metszetek előkezelését a festés előtt el kell végezni, így a lehetőség biztosított, hogy a standardizált előkezelési lépések a szokásos módon használhatók, nincs szükség hosszadalmas előzetes programozásra. A készülék egy komplett egység, nem igényel további informatikai beruházást. Könnyű kezelése, kis mérete, standardizált és költséghatékony operációs rendszere ideális választás a kutatásfejlesztéssel foglalkozó laboratóriumok számára. Az automata 5 és 10 inkubációs kamrával, valamint fűthető kamrákkal rendelkezik in situ hybridizációs módszerek végzéséhez. A programok a felhasználó igénye szerint előre beállítottak. 19

23 Detektáló Rendszerek/Másodlagos Reagensek Peroxidázzal jelölt mikropolimerek Kat# HISTOLabeling System, egér & nyúl (peroxidázzal jelölt mikropolimer, univerzális) HISTOLS MR 50 ml RTU* M500 HISTOLabeling System, egér (peroxidázzal jelölt mikropolimer) HISTOLS M 50 ml RTU* R500 HISTOLabeling System, nyúl (peroxidázzal jelölt mikropolimer) HISTOLS R 50 ml RTU* Rat50 HISTOLabeling System, patkány (peroxidázzal jelölt mikropolimer) HISTOLS Rat * *"Ready to Use", előre hígított formátum. A HISTOLS másodlagos antiszérum reagensek enzimmel jelölt, polimer alapú előhívó rendszerek, melyek citológiai mintákban és szövettani metszetekben található antigénekhez kötődött egér vagy nyúl, (vagy mindkettő) eredetű immunglobulinokat detektálnak. A HISTOLS gyártása egy új mikropolimer technológián alapul, mely lehetővé teszi a magas enzim tartalmú, de mégis kisméretű másodlagos antitestkomplexek létrejöttét, intenzív, háttér nélküli immunfestést eredményezve. Bőr, BetaCatenin (klón:14), HISTOLS MR PODetektáló Rendszer használatával 20

24 Alkalikus foszfatázzal jelölt mikropolimerek Kat# A HISTOLabeling System, egér & nyúl HISTOLS APMR 50 ml RTU* (alkalikus foszfatázzal jelőlt mikropolimer, univerzális) M500A HISTOLabeling System, egér (alkalikus foszfatázzal jelőlt mikropolimer) HISTOLS APM 50 ml RTU* R500A HISTOLabeling System, nyúl (alkalikus foszfatázzal jelőlt mikropolimer) HISTOLS APR 50 ml RTU* *"Ready to Use", előre hígított formátum. A HISTOLS másodlagos antiszérum reagensek enzimmel jelölt, polimer alapú előhívó rendszerek, melyek citológiai mintákban és szövettani metszetekben található antigénekhez kötődött egér vagy nyúl, (vagy mindkettő) eredetű immunglobulinokat detektálnak. A HISTOLS gyártása egy új mikropolimer technológián alapul, mely lehetővé teszi a magas enzim tartalmú, de mégis kisméretű másodlagos antitestkomplexek létrejöttét, intenzív, háttér nélküli immunfestést eredményezve. Csontvelő, CD138, HISTOLS APM Detektáló Rendszer használatával 21

25 Peroxidázzal Jelölt Kétlépcsős Detektáló Rendszer Kat# T HISTOLabeling System, egér és nyúl (jel erősítő+peroxidázzal jelölt polimer, univerzális) HISTOLS MRT 2x50 ml RTU* *"Ready to Use", előre hígított formátum. Ez a kétlépcsős detektáló rendszer citológiai mintákban és szövettani metszetekben található antigénekhez kötődő egér és/vagy nyúl eredetű immunglobulinokhoz kötődik. A HISTOLS MRT a biotinmentes polimerek legújabb gyártási technológiájával készül, melynek köszönhetően egy különösen érzékeny peroxidázzal kapcsolt polimer rendszernek bizonyult. A nagy általánosságban használt jelölt streptavidinbiotin illetve avidinbiotin rendszerekhez képest a HISTOLS MRT kizárja a magas endogén biotintartalommal rendelkező szövetek nem specifikus festődését. Emlőrák, ER (klón:sp1), HISTOLS MRT Detektáló Rendszer használatával 22

26 HISTOLS Jelölt Streptavidin Detektáló Rendszer Kat# HISTOLS Jelölt Streptavidin Biotinált antiegér/nyúl másodlagos antitest + peroxidázzal jelölt streptavidin HISTOLS LS 2x50 ml RTU* *"Ready to Use", előre hígított formátum. A HISTOLS Jelölt Streptavidin Detektáló Rendszer citológiai mintákban és szövettani metszetekben található antigénekhez kötődő egér és/vagy nyúl eredetű immunglobulinokhoz kötődik. A detektálás alapját a jól ismert három lépéses hagyományos technológia képezi, melynek lényege a primer antitest biotinált másodlagos antitesttel, majd peroxidázzal jelölt streptavidinnel való kapcsolása. Ez a detektáló rendszer peroxidáz alapú immunhisztokémiai festések esetén alkalmazható. Köpenyzóna lymphoma, Cyclin D1 (klón:sp4), HISTOLS LS Detektáló Rendszer használatával 23

27 Kromogén/Szubsztrát Rendszerek HISTOLS DAB Kromogén/Szubsztrát Rendszer Reagensek: Kat# K 3,3 Diaminobenzidine DAB Kromogén 1 ml H2O2 DAB Szubsztrát 20 ml HISTOLS DAB Kromogén/Szubsztrát Rendszer Jel Erősítővel Reagensek: Kat# KE 3,3 Diaminobenzidine DAB Kromogén 1 ml H2O2 DAB Szubsztrát 20 ml Signal Enhancer DAB Jel erősítő 20 ml HISTOLS DAB Kromogén/Szubsztrát Rendszer immunhisztokémiai és in situhibridizácós festéshez, peroxidázzal jelölt (HRP) előhívó rendszer használata esetén alkalmazható. A DAB (3,3'Diaminobenzidin) a másodlagos antitest enzimkomplexével reagálva sötétbarna jelet ad. A csapadék nem oldódik vizes oldatban és szerves oldószerekben. HISTOLS Rezisztens AEC Kromogén/Szubsztrát Rendszer Reagensek: Cat# K Puffer koncentrátum Reagens 1 5,5 ml Stabilizáló reagens Reagens 2 3 ml Kromogén (AEC) Reagens 3 3 ml Szubsztrát (H2O2) Reagens 4 4,5 ml A HISTOLS RESISTANT AEC Kromogén/Szubsztrát Rendszer peroxidázzal jelölt (HRP) előhívó reagens használata esetén alkalmazható. Az AEC (3amino9etilkarbazol) a másodlagos antitest enzimkomplexével reagálva vörösesbarna jelet eredményez. Az így képződött csapadék nem oldódik vízben és szerves oldószerekben, így ez a kromogén/szubsztrát rendszer a vizes alapú és az általánosan használt permanens fedőanyagokkal egyaránt alkalmazható. 24

28 HISTOLS AP Red Kromogén/Szubsztrát Rendszer Reagensek: Kat# K APRed Erősítő Reagens 1 8ml (40x) APRed Koncentrátum Reagens 2 8 ml (40x) Szubsztrát Reagens 3 16 ml (20x) A HISTOLS APRed Kromogén/Szubsztrát Rendszer alkalikus foszfatázzal (AP) jelölt előhívó rendszer használata esetén alkalmazható. A másodlagos antitest enzimkomplexével reagálva élénk vörös jelet ad. 25

29 *"Ready to Use", előre hígított formátum. Immunhisztokémiai Kitek Emlőrák IHC Kit Reagensek: Ösztrogén receptor SP1 Nyúl monoklonális 5 ml, RTU* Progeszteron receptor SP2 Nyúl monoklonális 5 ml, RTU* cerbb2/her2/neu SP3 Nyúl monoklonális 5 ml, RTU* Ki67 SP6 Nyúl monoklonális 5 ml, RTU* R50 HISTOLS R Peroxidázzal jelölt antinyúl mikropolimer 4x5 ml, RTU* Vastagbélrák IHC Kit Reagensek: MLH1 G Egér monoklonális 5 ml, RTU* MSH2 25D12 Egér monoklonális 5 ml, RTU* ECadherin ECH6 Egér monoklonális 5 ml, RTU* BétaCatenin 14 Egér monoklonális 5 ml, RTU* M50 HISTOLS M p63 Y4A3 Egér monoklonális 5 ml, RTU* Napsin A KCG1.1 Egér monoklonális 5 ml, RTU* Cytokeratin 5 XM26 Egér monoklonális 5 ml, RTU* Cytokeratin 18 DC10 Egér monoklonális 5 ml, RTU* M50 HISTOLS M Peroxidázzal jelölt antiegér mikropolimer 4x5 ml, RTU* Tüdőrák IHC Kit Reagensek: Peroxidázzal jelölt antiegér mikropolimer 4x5 ml, RTU* 26

30 Prosztata IHC Kit Reagensek: HISTOLS p504s/p63 13H4+Y4A3 Nyúl monoklonális & Egér monoklonális 5 ml, RTU* Peroxidázzal jelölt HISTOLS MR antiegér és nyúl mikropolimer 5 ml, RTU* *"Ready to Use", előre hígított formátum. AP Kit HISTOLS Alkalikus foszfatázzal jelölt mikropolimer + HISTOLS APRed kromogén/szubsztrát rendszer Reagensek: Kat# HISTOLabeling System, egér & nyúl A HISTOLS APMR 50 ml, RTU* HISTOLS APM 50 ml, RTU* (alkalikus foszfatázzal jelölt mikropolimer) HISTOLS APR 50 ml, RTU* HISTOLS AP Red Erősítő Reagens 1 8ml (40x) HISTOLS AP Red Koncentrátum Reagens 2 8 ml (40x) HISTOLS AP Red Szubsztrát Reagens 3 16 ml (20x) (alkalikus foszfatázzal jelölt mikropolimer, univerzális) Vagy: HISTOLabeling System, egér M500A (alkalikus foszfatázzal jelölt mikropolimer) Vagy: HISTOLabeling System, nyúl R500A És: Kat# K *"Ready to Use", előre hígított formátum. 27

31 Kiegészítő Reagensek HISTOLS Előkezelő Kit Reagensek: Kat# K Citrát puffer, ph 6.0 Antigén feltáró oldat 500 ml (10x) H2O2 Peroxidáz gátló reagens 20 ml, RTU Protein oldat Háttér gátló reagens 20 ml, RTU *"Ready to Use", előre hígított formátum. Ez a készlet a formalinban fixált, paraffinba ágyazott szövetekből készült metszetek előkezeléséhez használható. Hővel történő epitóp feltárás (HIER): forró, 10mM citrát pufferben (ph 6.0) percig. Peroxidáz gátlás: A peroxidáz gátló oldat a szövetekben lévő endogén peroxidáz aktivitást gátolja. Használata ajánlott, amennyiben az alkalmazott előhívó rendszer peroxidázzal jelölt, valamint a szövet zavaróan magas koncentrációban tartalmaz endogén peroxidáz enzimet. Háttér gátlás: A BBPS háttér gátló oldat megakadályozza az elsődleges és másodlagos antitestek nem fajlagos kötődését azzal, hogy telíti a nemspecifikus kötőhelyeket. HistoPen Kat# HistoPen Tissue marker pen 1 piece A HistoPen használata megkönnyíti az alkalmazott immunhisztokémiai reagensek felvitelét. A tárgylemezen a metszetek körül a filmszerű víztaszító réteg segít a metszetek helyének megtalálásában, nem szükséges a metszetek többszöri körültörlése a festés során. Amennyiben a tárgylemezen két metszet található, úgy mindkettőt megjelölve lehetőség van egy időben két különböző ellenanyag alkalmazására. 28

32 K+F Elsődleges antitestek Patkány antiegér ellenanyagok Immunogén CD45 IBL5/25 Egér nyirokcsomó sejtek, 0.2 mg/ml A CD45 (LCA), egy transzmembrán foszfotirozin foszfatáz, egyike a leukociták által legnagyobb mennyiségben expresszált glikoproteineknek. Ez a monoklonális ellenanyag segít a limfociták (T és B sejtek) in vitro csoportosításában. Immunogén CD11a IBL6/2 EL4 egér thymoma sejtvonal, 0.2 mg/ml A CD11 (LFA1) a leukocitákon expresszálódik. A CD54 és az ICAM2 kötésével a sejtsejt kapcsolatok kialakításában játszik szerepet. Immunogén CD45RC IBL8 Egér lép sejtek, 0.2 mg/ml A CD45 (LCA), egy transzmembrán foszfotirozin foszfatáz, egyike a leukociták által legnagyobb mennyiségben expresszált glikoproteineknek. Ez a monoklonális antitest (exon Cdependent RC isoform) erősen jelöli a B sejteket, kevéssé intenzív reakciót ad a CD8+ Tsejtekkel, míg a CD4+ Tsejtekkel és myeloid sejtekkel nem reagál. Immunogén MHC II IBL5/22 Egér lép sejtek, 0.2 mg/ml Az MHC II osztályba tartozó antigének az antigén prezentáló sejtek felszínén expresszálódnak, tehát főként Bsejteken, makrofágokon, monocitákon és dendritikus sejteken, valamint kisebb számban más sejteken is (endothel és epithel sejtek). Szerepük az antigén prezentáció a CD4+ sejtek számára. Ez az antitest az egér IA alegység felismerésére készült, és in vitro jelöli a rágcsálók Bsejtjeit is. Immunogén CD90 IBL6/23 Egér lép sejtek, 0.2 mg/ml A Thy1 antigén (CD90) a GPIkötött glikoprotekhez tartozik. A rágcsálók T sejtjei, thymocytái, idegsejtjei, fibroblastjai és Kupffer sejtjei fejezik ki. Ez a monoklonális antitest in vivo Tsejt jelölésre alkalmas. 29

33 CD8 alpha IBL3/25 Immunogén Egér lép sejtek, 0.2 mg/ml A CD8at a legtöbb thymocita kifejezi, ezen felül a perifériás Tsejtek harmada is tartalmazza a CD8 heterodimerjeit (CD 8α és CD8β). Ez a monoklonális ellenanyag jelöli a CD8+ Tsejteket a perifériás nyirokszervekben, és akár in vivo követéshez is használható. 30