A 22C3 PD-L1 tesztek értékelése intézetünkben. Dr. László Terézia PTE ÁOK Patológiai Intézet, Pécs

Átírás

1 A 22C3 PD-L1 tesztek értékelése intézetünkben Dr. László Terézia PTE ÁOK Patológiai Intézet, Pécs

2 NSCLC NSCLC SCLC Előrehaladott tüdőrák kezelésének eredményessége az 1990-es évekig a kimenetel független az alkalmazott hatóanyagtól

3 A TÜDŐRÁK HETEROGÉN BETEGSÉG NSCLC nem egy betegség molekuláris osztályozása NSCLC EGFR mutáció meghatározás EGFR mutáns nstüdőrák EGFR inhibitorkezelés EGFR

4 Adenocarcinoma molecularis pathologia EGFRvIII 5% squamous cancer ligand Her2 EGFR EGFR mutations 10% non-asian(50% Asian) mostly non-smokers PTEN PI3K/AKT mutations 3-4% squamous cancer Her2 mutations 2% PI3K AKT KD KRAS EML4-ALK EML4-ALK fusion 5%; STAT3/5 non-smokers MEK KRAS mutations 25-30% mostly smokers BRAF BRAF mutations 2% 60% of patients have driver mutation mtor MAPK Survival Proliferation

5 A NSCLC nem egy betegség NSCLC EGFR EML4/ALK PD-L1 EGFR inhibitor(erlotinib erlotinib, gefitinib) ALK átrendeződés pozitív esetek Metinhibitor (Crizotinib Crizotinib) Új biomarkerek PD-1/PDL 1/PDL-1 1 (Programmed Death Ligand) immune checkponts inhibitors(pembrolizumab pembrolizumab)

6 A PD-1 út szerepe tumorokban A PD-1 út az aktivált T sejtek felszínén expresszált immune checkpoint Az egyik liganda PD-L1, mely nagy mennyiségben expresszálta tumor sejtek felszínén A PD-1 /PD-L1 kapcsolódás gátolja a T sejt aktivációt ez immunszuppressziótés tumor növekedést eredményez Pardoll DM. The blockade of immune checkpoints in cancer immunotherapy. Nat Rev Cancer. 2012;12:

7 Immune chekponts 1. A Tu. korai stádiumában NK sejtek a tumor klónt felismerik, destruálják tumor Ag felszabadulás 2. Tumor Ag-makrofág, dendritikus sejt, drenáló limfociták aktivációja 3. Az MHC molekulákhoz kötötten számos ligandreceptorpár képes a T sejtekkel interakcióba lépni 1. Agspecifikus T és B sejtek -adaptív immunitás 2. Citokin felszabadulás hatására az innate (nem-specifikus) immunitásis aktiválódik 3. A malignus klón eliminálódik 4. Szubklinikus malignusklón növekedését/progresszót okozhatja: - Immunrendszer károsodása - A tumor antigenitásának változása

8 Immunecheckpoints adaptáció A primer tüdőrák sejtjei génmutációk eredményeként különböző, az immunrendszer számára idegen antigéneket hordoznak, mely az immunitás számára felismerhetővé teszi őket Léteznek azonban olyan tumor által kifejlesztett mechanizmusok IMMUNE CHCKPOINTS ADAPATION melyekkel a daganat sejtek képesek az immunsejteket hatástalanítani és a betegség progresszióját előidézni Az immunecheckpontinhibitor kezelés egy újabb, bíztató eredményekkel kecsegtető eszköz előrehaladott NSCLC ban

9 Immune chekponts inhibitors

10 A PD-1 út szerepe tumorokban

11 PD-L1 22C3 pharmdx kit Programmed Death Ligand1 (PD-L1) Clone22C3 IHC monoklonális egér anti-pd-l1 antitest klón 22C3 NSCLC tumor mintákra specifikus biomarker lokálisan előrehaladott vagy metasztatikusnsclc esetek MSD/Merck által forgalmazott (KEYTRUDA / pembrolizumab)kezelésre várhatóan jól reagáló betegek kiválasztására alkalmasa

12 PD-L1 IHC értékelés minimum 100 viabilistumor sejt Valóban apd-l1 pozitívdaganat sejteket és ne a tumor asszociált sejteket Szuboptimális preanalitikai tényezők kizárása Rosszul fixált szövet Vastag metszet Hosszú ideig tárolt metszet és blokk A szövet kiszáradása Dako

13 PD-L1 IHC értékelés Pozit itív jelölődés Bármilyen érzékelhető linearissejt membrán jelölődés (részleges vagy teljes) Csak viabilis tumorsejtet értékelünk Intenzitás mellett a pozitívjelölődést mutató sejtek arányát is figyelembe kell venn Negatív Nincs membán jelölődés Az osztályozásból kizárjuk továbbá: tumor asszociált immun sejteket Tumorszövet körüli normál sejteket PD-L1+ nekroti rotikus sejteket

14 PD-L1 IHC osztályozás A jelölődés intenzitásának osztályozása (0, 1+,2+,3+) A pontosan megbecsült + jelölődést mutató tumorsejtarány (tumor proportion score(tps %-ban ) A gyulladásos sejtek, stróma sejtek jelőlődése nem számít

15 A PD-L1 TPS számítása PD-L1expresszáló tumoros terület kijelölése Negatíve PD-L1 Pozitíve 10 % PD-L1 pozitív 90 % PD-L1 negatív A jelölt terület 50%-a PD-L1 pozitív Összpozitivitás = 5% Dako

16 A PD-L1 TPS számítása Inhomogén, foltos jelölődés esetén : 1. Látótér felosztása Kb100 sejt /quadr quadráns Dako

17 A PD-L1 TPS számítása 2. Az egyes szektorok pozitivitásának %-os meghatározás 25% 80% 50% 100% (80% + 25% + 50% + 100%)/4 = ~64% Pozitív Dako

18 A PD-L1 pozitív jelölődés intenzitása 0: Negatív 20x 1+: gyenge 20x 2+: közepes 20x 3+: erős 20x Dako

19 PD-L1 j TPS > 50% Kontr.

20 PD-L1 TPS < 50% 4x

21 PD-L1 TPS < 1% /negatív

22 Sejtblokk erős pozitív jelölődés

23 PD-L1 vizsgálataink eredménye 60 eset kapcsán 18% ÉRTÉKELT ESETSZÁM 60 DB NEGATÍV 35 DB 23% 59% >50 % POZITÍV 14 DB 1-49 % jelölődés 11 DB negatív >50% 1-49%

24 PD-L1 jelölődés intenzitásának változása metasztatikus adenokarcinómában/saját eset 65 éves ffi. Dohányzás : 25 év hó. Bal oldali féltekei metasztázisnak imponáló tumor eltávolítás Dg: Adenocarcinomaagyi áttéte, tüdő eredet alapos valószínűsége (TTF1+, CK7+ ) Th: 21 Gya residuumra, 18 Gya residuumot magába foglaló hegre TTF1 KRAS: WT EGFR: WT ALK ÁTRENDEZŐDÉS NEGATÍV

25 PD-L1 jelölődés intenzitásának változása metasztatikus adenokarcinómában /saját eset hó VATS: alsó lebeny és nycs. eltávolítás Dg: szolid predomináns adenokarcinóma (TTF1-, NAPSIN A-, CK7+, CK20-, Ber-Ep4+) KRAS: WT EGFR: WT ALK NEGATÍV MR 3 db új keletű agyi elváltozás miatt újabb agyi sugárkezelés TTF1

26 Agyi metasztázis PD-L1 TPS 8% Primer AC PD-L1 L1: : TPS %> 50%+

27 PD-L1 IHC 22C3 PharmDxtesztelés jelentősége a gyakorlatban

28 Köszönöm a figyelmet

29 Immune chekponts inhibitors KEYTRUDA első vonalban - Magas PD-L1 expresszió[tumor proportion score (TPS) 50%] (PD-L1 IHC 22C3 teszt alapján) - előzetesen nem kezelt, metasztatikusnsclc - EGFR vagy ALK genomikus tumor aberrációval nem rendelkeznek KEYTRUDA másod vonalban - Alacsony tumor PD-L1 expresszió: (TPS 1%) (PD-L1 IHC 22C3 teszt alapján) - metasztatikusnsclc - platinum-tartalmú kemoterápiát követő tumor progresszó esetén - EGFR vagyalk genomikustumor aberrációvalrendelkező betegek tumor progresszója esetén