EZ-FPC mikroorganizmusok

Átírás

1 EZ-FPC mikroorganizmusok Az EZ-FPC mikroorganizmus preparátumok segítségével kihívás elé állíthatóak az ételbiztonsági és ételminőségi minőségi és mennyiségi tesztmódszerek. RENDELTETÉS Az EZ-FPC (Food Process Control, élelmiszervizsgálati módszer kontroll) mikroorganizmusok ipari laboratóriumokban történő használatra szánt, ismert koncentrációjú, liofilizált mikroorganizmus-preparátumok. Ezen mikroorganizmus-preparátumok többek között minőségkontroll-ellenőrzésre használatosak. A komoly kihívást jelentő preparátumok segítségével mérhető és dokumentálható, hogy a mennyiségi és/vagy minőségi tesztmódszerek eredményei az elfogadott toleranciahatárokon belül esnek. Ezek a mikroorganizmus-készítmények visszakövethetőek az Amerikai Típuskultúra-gyűjteményhez (American Type Culture Collection, ATCC ), vagy más hiteles referenciakultúra gyűjteményekhez. ÖSSZEFOGLALÁS ÉS ELŐZMÉNYEK A mikroorganizmusok komoly élelmiszerrel terjedő fertőzésveszélyt jelenthetnek, illetve az élelmiszerminőség egyik jellemzői. A mikroorganizmusok kimutatásában és mennyiségi meghatározásában használt módszereknek képesnek kell lenniük reprodukálhatóan kimutatni a cél mikroorganizmusok kis mennyiségét, illetve mennyiségi meghatározást nyújtani a cél mikroorganizmus-populációkról. Az ezekkel a liofilizált mikroorganizmus preparátumokkal végzett tesztek eredményeivel jól dokumentálható a tesztmódszerek működése. Az EZ-FPC mikroorganizmusok használatával feleslegessé válik az alacsony koncentrációjú kimutatási próbák vagy a mennyiségi meghatározások során szükséges hígítási sorozatok fáradságos elkészítése. Ezzel a technológiával a tesztet végző laboratóriumban egyszerűen a dúsító tápoldatba vagy az elsődleges hígítóoldatba kell helyezni egy pelletet, és már tovább is lehet lépni az eljárás következő pontjára. ALAPELV Az EZ-FPC mikroorganizmusok az Obara és munkatársai által ismertetett, zselatinból, sovány tejből, aszkorbinsavból, dextrózból és aktív szénből álló szuszpendáló közeget használó liofilizálási eljárást foglalják magukban. A zselatin szolgál a mikroorganizmus hordozójaként. A sovány tej, aszkorbinsav és dextróz védik a mikroorganizmust azáltal, hogy megőrzik a sejtfal integritását a fagyasztva szárítás és a tárolás alatt. Az aktív szén szerepe a liofilizálási eljárás során keletkezett esetleges mérgező anyagok semlegesítése. Egy szabadalmaztatott technológia révén előre meghatározott koncentrációjú liofilizált mikroorganizmus-populáció állítható elő. AZ ANYAG ÖSSZETÉTELE A liofilizált készítmények az alábbiakból állnak: Vizsgált mikroorganizmus-populáció Zselatin Sovány tej Aszkorbinsav Dextróz Aktív szén SPECIFIKÁCIÓ ÉS MŰKÖDÉSI JELLEMZŐK Az EZ-FPC mikroorganizmus készítmény készletben kiszerelve kapható. Az egyes készletek tartalma: Egy (1) cső, melyben tíz (10) liofilizált, egyetlen mikroorganizmus-törzset tartalmazó pellet található Részletes utasítások Hitelesítő tanúsítvány AZ EZ-FPC mikroorganizmus preparátumok vagy mennyiségi vagy minőségi tesztre szolgálnak. A Qualitative Process Control preparátumok a jelen van/nincs jelen típusú tesztekhez szolgálnak, és pelletenként 100 CFU és 999 közötti CFU (colony forming unit, kolóniaképző egység) mikroorganizmust tartalmaznak REVISION 2007.OCT.01 Magyar Hungarian 1/6. oldal

2 A Quantitative Process Control preparátumok a mennyiségi meghatározásokat igénylő eljárások tesztelésére szolgálnak, és pelletenként CFU és közötti CFU (colony forming unit, kolóniaképző egység) mikroorganizmust tartalmaznak A minőségkontroll dokumentációban többek között egy, az alábbiakat tartalmazó hitelesítő tanúsítvány található: A mikroorganizmus azonosítása A mikroorganizmus és visszakövethetősége referenciakultúrára Hogy a mikroorganizmus-készítmény és a referenciakultúra között 4 (négy) passzálás történt A mikroorganizmus preparátum teszteredményének átlaga ÓVINTÉZKEDÉSEK ÉS KORLÁTOZÁSOK Ezek a termékek csak in-vitro használatra alkalmasak. Ezek az eszközök, illetve a táptalajon továbbtenyésztett mikroorganizmusok biológiailag veszélyes anyagoknak számítanak. Ezek az eszközök életképes mikroorganizmusokat tartalmaznak, amelyek bizonyos körülmények között betegséget okozhatnak. Megfelelő technikákat kell alkalmazni abból a célból, hogy a kezelő ne legyen kitéve a tenyésztett mikroorganizmusoknak, illetve ne érintkezzen velük. A mikrobiológiai laboratórium fel kell, hogy legyen szerelve a biológiailag veszélyes anyagok fogadásához, feldolgozásához, tárolásához és a hulladékok elhelyezéséhez szükséges létesítményekkel, illetve rendelkeznie kell ezekkel a berendezésekkel. A mikrobiológiai laboratórium ezen eszközöket használó személyzete ki kell, hogy legyen képezve a biológiailag veszélyes anyagok feldolgozására, tárolására és hulladékként való elhelyezésére, illetve ezekre vonatkozóan megfelelő tapasztalattal és szaktudással kell, hogy rendelkezzen. Ügynökségek és jogszabályok rendelkeznek a biológiailag veszélyes anyagok hulladékként való elhelyezéséről. Minden laboratórium tisztában kell. hogy legyen a biológiailag veszélyes anyagok hulladékként való megfelelő elhelyezésére vonatkozó szabályokkal, illetve be kell, hogy tartsa azokat. TÁROLÁS ÉS SZAVATOSSÁGI IDŐ Az EZ-FPC mikroorganizmusokat 2 C és 8 C között, az eredeti, lezárt csőben tárolja. A fenti előírás szerint tárolt, liofilizált mikroorganizmus-készítmények az eszköz címkéjén feltüntetett szavatossági idő lejártáig megtartják specifikációjukat és teljesítőképességüket, a megadott határokon belül. Nem szabad felhasználni a EZ-FPC mikroorganizmusokat, ha: Tárolásuk nem megfelelő módon történt Bizonyíték van arra, hogy túlzott hőnek vagy nedvességnek lettek kitéve Lejárt a szavatossági idő lejárt SZÜKSÉGES, DE NEM BIZTOSÍTOTT ANYAGOK Steril csipeszek az egyes pelletek kivételéhez és a dúsító tápoldatba vagy az elsődleges hígítóoldatba helyezéséhez. Az egyes laboratóriumok szabvány műveleti eljárásainak (SOP, Standard Operation Procedure) megfelelő dúsító tápoldatok, hígítóoldatok, és a minőségi és/vagy mennyiségi tesztmódszerekhez szükséges tesztanyagok. TERMÉKGARANCIA E termékek garantáltan megfelelnek a termékkel kapott szórólapokon, az utasításokban, illetve a vonatkozó irodalomban kinyomtatott és illusztrált specifikációknak és teljesítménynek. A kifejezett vagy beleértett garancia korlátozott, ha: - a laboratóriumban alkalmazott eljárások ellentétben állnak a nyomtatott és illusztrált útmutatóknak és utasításoknak, illetve - a termékeket a termékkel kapott szórólapokon, az utasításokban, valamint a vonatkozó irodalomban felsorolt rendeltetésszerű használattól eltérő célokra használják. HASZNÁLATI UTASÍTÁS Az EZ-FPC mikroorganizmusokat javasolt rendszeresen alkalmazni. Ezzel mérhető és dokumentálható, hogy egy módszer és/vagy készülék eredményei folyamatosan az elfogadott toleranciahatárokon belül esnek. Ebben az elrendezésben a teszt az élelmiszermátrix HIÁNYÁBAN zajlik. (Az ellenőrzési és hitelesítési protokollok tekintetében lásd a Technikai megjegyzések -et). 1. Vegye ki a fiolát a hűtött (2 C és 8 C közötti hőmérsékletű) tárolási helyről, és hagyja a zárt fiolát szobahőmérsékletre melegedni. 2. Steril csipesszel vegyen ki egy (1) pelletet és helyezze a laboratóriumi SOP szerinti térfogatú dúsító tápoldatba vagy hígítóoldatba. Kulcsfontosságú, hogy a dúsító tápoldatot vagy hígítóoldatot előzetesen 34 C és 38 C közötti hőmérsékletre melegítse. 3. Azonnal zárja vissza a fiolát és tegye vissza a megmaradt liofilizált pelleteket a hűtőbe (2 C és 8 C közötti hőmérsékletre). REVISION 2007.OCT.01 Magyar Hungarian 2/6. oldal

3 4. Hidratáció és inkubáció Minőségi módszer kontroll Inkubálja a beoltott dúsító tápoldatot a laboratóriumi SOP szerint. A dúsító tápoldatban történő inkubáció során legalább egy alkalommal (pl. 30 perc inkubáció után) keverje meg az üveget, biztosítva ezzel a rehidratált mikroorganizmus-populáció egyenletes eloszlását. Mennyiségi módszer kontroll Inkubálja harminc (30) percig 34 C és 38 C között a beoltott hígítóoldatot. Az inkubációt követően keverje össze alaposan a beoltott hígítóoldatot. 5. Végezze el a teljes minőségi vagy mennyiségi tesztet a laboratóriumi SOP szerint. 6. Az eljárás befejeztével jegyezze fel az eredményeket, és őrizze meg a módszer működésének dokumentálására. TECHNIKAI MEGJEGYZÉSEK A. Tesztérték Minden egyes liofilizált preparátum tesztértéke ismert, érvekkel védhető mennyiség és minőség. Ezeknek a preparátumoknak a feldolgozása után a tesztértéket számos dolog befolyásolhatja, így a teszt módszere, a preparátum kezelése, hígításai, transzfere, dúsítása, a szelektív táptalajok, az inkubáció, az analízist végző szakértelme, a kolóniaszám és az MPN (most probable number, legvalószínűbb sejtszám) közötti különbség, az interpretáció, a számítások, a CFU/gramm és a CFU/mL közötti eltérés, stb. A laboratóriumoknak tisztában kell lenniük ezekkel a befolyásoló tényezőkkel. Ha a tesztmódszer vagy az analízist végző befolyással van a teszteredményre, nem a liofilizált preparátumot kell ellenőrizni. Ebben az esetben a liofilizált preparátum pontosan azt a célt teljesíti, melyre szánták, és a tesztmódszert vagy az analízist végző gyakorlatát kell felülvizsgálni és szükség esetén korrigálni. B. Minősítő vizsgálatok Az EZ-FPC mikroorganizmusok előminősítő és újraminősítő vizsgálatok során is használhatóak annak meghatározására, hogy egy adott élelmiszermátrixnak van-e gátló hatása a potenciális élelmiszerrel terjedő patogének visszanyerésére. 1. Előminősítés a) Az EZ-FPC mikroorganizmus egyetlen pelletjével oltsa be az élelmiszermintát és azonnal folytassa a dúsítási lépéssel. b) Ugyanazon EZ-FPC mikroorganizmus egy második pelletjével oltson be egy élelmiszermintát NEM TARTALMAZÓ dúsító tápoldatot. c) Megfelelő időközönként végzett táptalajra szélesztéssel és a kapott kolóniaszám meghatározásával mérhető, hogy a különböző élelmiszerminták vannak-e, és ha igen, milyen mértékű gátló hatással a cél mikroorganizmus visszanyerésére és kimutatására. 2. Újraminősítés Kedvező előminősítési eredmények esetén, megfelelő időközönként, az EZ-FPC mikroorganizmus egy-egy pelletjével beoltva a meghatározott élelmiszermintát, dokumentálhatóak a következetes és reprodukálható teszteredmények. C. Ellenőrzés és hitelesítés 1. Minőségi analízis Az automata jelen van/nincs jelen típusú eszközök és készülékek általában több nagyságrendnyi sejtszaporulatot igényelnek ahhoz, hogy pozitív teszteredményt adjanak. A Minősítő vizsgálatok pontban leírthoz hasonló protokoll szerint ellenőrizhető vagy hitelesíthető az eszköz vagy készülék alkalmassága a cél mikroorganizmusok alacsony koncentrációban történő kimutatására. A pozitív és negatív teszteredmények mellett az élelmiszerminta JELENLÉTÉBEN és az élelmiszerminta HIÁNYÁBAN inkubált, beoltott dúsító tápoldatból végzett kimutatásokhoz szükséges idők összehasonlítása értékes hitelesítő információt szolgáltat a minta mátrixról. 2. Mennyiségi analízis Az automatizált mennyiségi meghatározásra alkalmas berendezések általában valamely anyagcseretermék, a vezetőképesség vagy az impedancia kimutatását végzik az idő függvényében, és ebből számítanak mennyiségi meghatározást. A Minősítő vizsgálatok pontban leírthoz hasonló protokoll szerint ellenőrizhető vagy hitelesíthető az automatizált berendezés alkalmassága a cél mikroorganizmusok populációjának mennyiségi meghatározására. A beoltott hígítóoldatból élelmiszerminta JELENLÉTÉBEN és az élelmiszerminta HIÁNYÁBAN végzett mennyiségi meghatározások eredményeinek összehasonlítása értékes hitelesítő információt szolgáltat a minta mátrixról. REVISION 2007.OCT.01 Magyar Hungarian 3/6. oldal

4 HIBAELHÁRÍTÁSI ÚTMUTATÓ Az EZ-FPC mikroorganizmus preparátumokat a minőségkontrollon történő átbocsátás előtt egy hitelesített mérési eljárásban ellenőrzi, annak biztosítására, hogy minden egyes gyártási tétel megfelel a termékspecifikációknak. Az EZ- FPC mikroorganizmus preparátumoknak két típusa van, a minőségi és a mennyiségi meghatározásra szolgáló típus. A minőségi meghatározásra szolgáló mikroorganizmus preparátumok koncentrációja 10 2, vagyis 100 és 999 közötti CFU sejtet tartalmaznak pelletenként. A mennyiségi meghatározásra szolgáló mikroorganizmus preparátumok koncentrációja 10 3, vagyis és közötti CFU sejtet tartalmaznak pelletenként. Ha a termékhez meghatározott értéktartományon kívül eső eredményeket kap, az alábbiakat vegye fontolóra, mint az eltérés lehetséges okait. Az alábbiakban hivatkozott szakirodalom elérhető weboldalunkon a címen, valamint Műszaki kézikönyvünkben. A BUGS(2847) telefonszámon vagy az info@mbl2000.com -címen igényelhető a Műszaki kézikönyv. PROBLÉMA LEHETSÉGES OK JAVASLATOK ALACSONY VISSZANYERÉS vagy NINCS VISSZANYERÉS 1) Nem megfelelő vagy szelektív táptalaj használata. Nem minden táptalajt teszi lehetővé minden mikroorganizmus növekedését. Kérjük, ellenőrizze a táptalaj gyártójával, ha nem biztos benne, hogy a használt táptalaj alkalmas a cél mikroorganizmus növekedésére. Szelektív tápoldat használata gátolhatja a mikroorganizmus visszanyerését. A szelektív táptalajokkal kapcsolatos további információt a TIB.134 tartalmaz. 2) Helytelen inkubációs idő, hőmérséklet, vagy gáztér Nem minden mikroorganizmus estén azonos a szükséges inkubációs idő, hőmérséklet és a gáztér összetétele. Az egyes mikroorganizmusok által igényelt növekedési feltételekkel kapcsolatos további információt a TIB.081 tartalmaz. Ellenőrizze azt is, hogy az inkubátor hőmérők helyes értéket mutatnak-e. 3) A fiola helytelen tárolása Az EZ-FPC mikroorganizmusokat 2 C és 8 C között, az eredeti csőben kell tárolni. A párafelszívó tasakot nem szabad eltávolítani. A fiolát felnyitás előtt engedni kell szobahőmérsékletre felmelegedni. Ha hideg állapotban nyitják ki, pára csapódhat le a fiola belsejében. A nedvesség és oxigén kombinációja mérgező szabadgyökök képződéséhez vezethet, és csökkentheti a liofilizált mikroorganizmusok visszanyerését. 4) Az élelmiszermátrix által kifejtett gátló hatás A különböző élelmiszermátrixok használata gátló vagy toxikus hatással járhat. A témával kapcsolatos további információt a TIB.172 tartalmaz. Ha a fentiek egyike sem áll fenn az adott helyzetben, és a visszanyerés továbbra is a termékhez meghatározott értékeken kívül esik, kérjük vegye fel a kapcsolatot műszaki ügyfélszolgálati osztályunkkal BUGS(2847) telefonszámon vagy a indprdts@mbl2000.com -címen. REVISION 2007.OCT.01 Magyar Hungarian 4/6. oldal

5 BIOLÓGIAI VESZÉLYEK FELSZÁMOLÁSA Ha az eszközből, vagy pedig a mikroorganizmus későbbi, agar táptalajon való növekedése közben véletlen szivárgás vagy kiömlés történik, az alábbi információ körvonalazza azokat az anyagokat és eljárásokat, amelyek biztonságosan lehetővé teszik a biológiailag veszélyes anyag felszámolását. 1. Anyagbiztonsági adatlapok (Material Safety Data Sheet, MSDS) Iratgyűjtőt kell fenntartani, amely tartalmazza a biológiailag veszélyes anyagokra vonatkozó összes MSDS dokumentumot. Az MSDS iratgyűjtő az összes dolgozó rendelkezésére kell álljon. Minden dolgozónak tudnia kell, hogy hol vannak az MSDS fájlok. 2. Biológiailag veszélyes anyagok kiömlésekor alkalmazható készlet A biológiailag veszélyes anyagok kiömlésekor alkalmazható készletek beszerezhetők a kereskedelemből, vagy el is készíthetők az alábbi anyagok használatával: 1 db. literes palack fertőtlenítő vizes oldatával töltve Egy pár eldobható, latexből vagy latexmentes anyagból készült kesztyű 1 db. csipesz 1 db. biológiailag veszélyes anyagok számára készült zacskó, zárral Egy köteg vagy tekercs papírtörölköző 3. Eljárás A környező területen dolgozó ÖSSZES személyt értesítse az incidensről. NE hagyja a térséget felügyelet nélkül (kivéve, ha Ön az egyetlen személy a térségben) Jelöljön ki egy másik dolgozót, hogy figyelje az incidens térségét, és minden forgalmat eltereljen az incidens térségéből. Miután a közvetlen környező térségben minden dolgozót értesített, keresse meg a biológiailag veszélyes anyagok kiömlésekor alkalmazható készletet, majd AZONNAL térjen vissza a térségbe. Húzzon eldobható kesztyűt. A csipesszel szedjen fel annyi anyagot, amennyit csak lehet, majd gondosan helyezze az anyagokat a biológiailag veszélyes anyagok számára készült zacskóba. Telítse a kiömlés területét fertőtlenítő oldattal. Tartsa a kiömlési területet a fertőtlenítő oldattal megnedvesítve annyi ideig, amennyi a használt fertőtlenítő oldat esetén ajánlott. Törölje szárazra a térséget papírtörülközőkkel. Helyezze az összes használt papírtörülközött a biológiailag veszélyes anyagok számára készült zacskóba. A feltakarítást követően óvatosan vegye le a kesztyűt, majd helyezze a biológiailag veszélyes anyagok számára készült zacskóba. Zárja le a biológiailag veszélyes anyagok számára készült zacskót. A hatósági követelményeknek megfelelően helyezze el hulladékként a biológiailag veszélyes anyagok számára készült zacskót. JELÖLÉSEK MAGYARÁZATA Gyártási tétel kód Biológiai veszély Biológiai veszély Katalógusszám Figyelem! Olvassa el a mellékelt dokumentumokat. Figyelem! Olvassa el a használati utasítást. Gyártó Hőmérsékleti korlátozás Felhasználható: REVISION 2007.OCT.01 Magyar Hungarian 5/6. oldal

6 MINŐSÉG-ELLENŐRZÉS Ezen termék kifejlesztése, gyártása és forgalmazása: az FDA alábbi rendelkezéseivel összhangban történt: minőségi rendszerre vonatkozó szabályzat (Quality System Regulation, QSR); 21CFR, 820 rész, az ISO 9001:2000 elemeinek megfelelően. A minőségellenőrző funkciók többek között az alábbiakat foglalják magukban: tisztaság és növekedési jellemzők morfológiai jellemzők biokémiai aktivitás átlagos tesztérték a mikroorganizmus-készítmény azonosítása és visszakövethetősége referenciakultúrára a mikroorganizmus-készítmény és a referenciakultúra közötti passzálások száma Minden laboratórium dönthet úgy egyénileg, hogy saját felelősségére további minőségellenőrzést is végrehajt. IRODALOMJEGYZÉK Az ezen mikroorganizmus-preparátumok készítése során használt liofilizációs módszer alapjait az alábbi irodalmi hivatkozás írja le: 1. Y. Obara, S. Yamai, T. Nikkawa, Y. Shimoda, and Y. Miyamoto J. Clin. Microbiol. 14: A kontroll mikroorganizmus preparátumok kiválasztása a QC (minőségellenőrzés) feladatának és technikájának csak egyik alapvető része. Alapvető fontosságú az egyes laboratóriumi alkalmazások útmutatóinak áttekintentése. A példák magukban foglalhatják az alábbiakat: 1. FDA Bacteriological Analytical Manual Online 2. Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Food, 4 th Edition Standard Methods for the Examination of Dairy Products, 16 th Edition. WEBOLDAL A legfrissebb műszaki információt és a termékek kaphatóságát nézze meg weboldalunkokn. KÖSZÖNETNYILVÁNÍTÁS MicroBioLogics, Inc 217 Osseo Avenue North St. Cloud, MN USA Tel: Fax: info@mbl2000.com * Az ATCC Licensed Derivative embléma, az ATCC Licensed Derivative szó és az ATCC katalógus jel az ATCC védjegyei. A MicroBioLogics, Inc. licencszerződés alapján jogosult ezen védjegyek használatára és az ATCC kultúrákból származó termékek forgalmazására. REVISION 2007.OCT.01 Magyar Hungarian 6/6. oldal