Gyors vizsgálati módszerek a víz mikrobiológiai ellenőrzésében Reskóné Dr. Nagy Mária WESSLING Hungary Kft. Dömötör Szilveszter Agro-Legato Kft.
IDEXX Laboratories, Inc. Központ: Westbrook, Maine, USA 17 országban működtet irodákat, amelyek 175 ország ügyfeleit szolgálják ki, 5600 munkatársat foglalkoztat világszerte. Világviszonylatban piacvezető a víz mikrobiológiában. legnépszerűbb vezető terméke: Colilert-18 Distributor Support Manager (Europe, Middle East & North Africa ): Dr Mike Cresswell MSB Cbiol.
Cégalapítás: 1984. Globális vezető a technológia-alapú diagnosztikai termékek, szolgáltatások terén : Víz minőség Állategészségügy Tej minőségbiztosítás Haszonállat, baromfi (PAS) Üzletági bevételek Házi kedvencek csoport Haszonállat szolgáltatások Víz Tejipar Egyéb Az IDEXX stratégiája: a fejlesztés, gyártás, marketing és értékesítés legmagasabb szintű végrehajtása, egyedülálló ügyfélszolgálat, támogatás és technikai segítésnyújtás.
Elfogadás/jóváhagyás /validálás IDEXX vízvizsgálati termékekre Colilert-18 ISO 9308-2:2012 MSZ EN ISO 9308-2:2014 Ivóvizek: Coliform/E. coli vizsgálatára a 98/83 / EK irányelv alternatív módszerként jelöli. Ivóvizek: Coliform/E. coli AFNOR val. 2009. Szennyezett vizek: Faecal coliforms - Journal of AOAC InternatIonal, Vol. 94, no. 5, 2011. Ivóvizek, természetes fürdővizek: Coliform/E. coli AFNOR val. 2012. Enterolert-DW Ivóvíz: Enterococcusok AFNOR val. 2013. Enterolert E Fürdővíz, szennyezett víz: Enterococcusok AFNOR val. 2015.
Termékek Coliform and E. coli Enterococci P. aeruginosa Minőségbiztosítás Colilert Enterolert Pseudalert Quanti-Cult Colilert -18 Enterolert -E Pseudalert 250 Water QC Colisure Enterolert -DW Colilert 250 Enterolert 250 Cryptosporidium/ Giardia Összcsíraszám meghatározás Mennyiségi meghatározás Kellékek Filta-Max Filta-Max xpress Invitrogen Dynabeads for IMS SimPlate for HPC HPC for Quanti-tray Quanti-Tray Quanti-Tray /2000 Mintagyűjtő edények Inkubátorok
Magyarországi ismertség, használat 2002. augusztus 8. A Colilert-Quanti Tray az OTH által elismert alternatív módszer ivóvíz és fürdővíz vizsgálatra, elsőként a Bakonykarszt ZRt. alkalmazza ivóvízre. 2005 Colilert akkreditált egyedi mószer, ivóvízhez: Bakonykarszt ZRt., DRV vízvizsgáló laboratóriuma. Később követi a DRV, majd több vízvizsgáló laboratórium. 2012 Áttörés A Colilert ISO szabványos módszer ISO 9308-2:2012 Egyre több labor használja az IDEXX módszert országszerte, köztük hatósági partnerek, valamint magáncégek is. 2014 Az év során több tízezer tesztet használtak fel Magyarországon főleg ivóvízvizsgálati célra, 70% E.coli, Coliform, 15% Enterococcus, 15% egyéb teszt (Pesudomonas, HPC) Kihirdetésre kerül a Magyar Szabvány az IDEXX Colilert/Quanti Tray módszerre MSZ EN ISO 9308-2:2014
IDEXX víz üzletág a nagyvilágban A Világ 115 országában évente több mint 20 millió víztesztet használnak fel 7 kontinensen 2 milliárd ember ivóvizének vizsgálata történik folyamatosan IDEXX gyorstesztekkel Gógyszeripari szintű létesítmények, gyártás tiszta térben Gyártás Franciaország, Svájc, USA, Egyesült Királyság, Kína Elosztás USA, Kanada, Hollandia, Ausztrália, Japán, Kína
Leggyakrabban használt tesztek típusai Megbízható eszközök steril edényzet, dehidratált tápközeg, Gyors, egyszerű mintakezelés, Rövid inkubálás 1 nap, Gyors, megbízható értékelés. 1. Higiénés indikátorok jelenléte /hiánya Ásványvizek, palackozott vizek (250 ml) Coliform/ Enterococcusok Pseudomonas E. coli aeruginosa Colilert 250 Enterolert 250 Pseudalert 250 Értékelés Inkubálás
Leggyakrabban használt tesztek típusai 2.) Legvalószínűbb szám (MPN 100 ml-ben) meghatározása Quanti-Tray módszerrel További eszközök: Quanti-Tray tálca 51 résszel tiszta vizek Quanti-Tray /2000 tálca 97 résszel szennyezettebb vizek Automatikus, Quanti-Tray lezáró készülék UV lámpa a kiértékeléshez
A módszer alkalmazása a mennyiségi tesztek esetében ugyanaz, az értékelés módja különbözik Lépések: Reagens betöltése a mintába Coliform/ E. coli Enterococcusok Pseudomonas aeruginosa Feloldódást követően a Qanti-Tray tálca megtöltése Colilert Enterolert Pseudalert Colilert 250 Enterolert 250 Pseudalert 250 Colilert 18 Colisure Enterolert-DW Enterolert-E A mintával telt tálca zárása Inkubálás után a vizsgálat módszerének megfelelő értékelés
Coliform és E. coli kimutatása, számlálása Colilert Inkubálás: 36 ± 0.2 C / 24-28 óra Colilert 18 Inkubálás: 36 ± 0.2 C / 18-22 óra Coliform pozitív: sárga cellák száma E. coli pozitív: UV fényben (650 nm) fluoreszkáló cellák száma Tiszta vizek: Quanty-Tray 51, MPN 100 ml-ben: 0-200 Szennyezett vizek: Quanty-Tray/2000 (97) MPN 100 ml-ben: 0-2419
Colilert, Colilert 18 működése Az orto-nitrofenil-β-d-galaktopiranosid (ONPG) ß-galaktozidázzal történő enzimatikus bontásán alapszik. Az emzimaktivitás eredményeként a minta színtelenről sárgára változik. Az eljárás UV megvilágítást nem igényel. A 4-metil-umbelliferil-β-D-glükuronid (MUG) ß-glükuronidázzal történő enzimatikus bontásán alapszik. Az emzimaktivitás eredményeként a minta coliform pozitív, sárga buborékjai közül az E. coli pozitívok UV megvilágítás alatt kéken fluoreszkálnak.
Enterococcusok kimutatása, számlálása Enterolert-DW Klórral, vagy egyéb kezelt ivóvíz Inkubálás: 41 ± 0.5 C/ 24 óra Enterococcusok Természetes megvilágításban a zöld szín pozitív eredményt jelent Enterolert-E Szennyezett vizek, természetes fürdővizek Inkubálás: 41 ± 0.5 C/ 24 óra Enterococcusok UV fényben (650 nm) fluoreszkáló cellák száma
Enterolert-DW, Enterolert-E működése Enterolert-DW: az orto-nitrofenil-β-d-glükozid (ONPG) glükozidázzal való enzimatikus bontásán alapszik. Az emzimaktivitás eredményeként a pozitív minta színe kékről zöldre változik. Az eljárás UV megvilágítást nem igényel. Enterolert-E: a 4-metil-umbelliferyl ß-D-glucosid ß-glükozidázzal való enzimatikus bontásán alapszik. Az emzimaktivitás eredményeként a pozitív minta színe UV megvilágításban fluoreszkál.
Más higiénés szennyezést jelző mikrobák kimutatása, számlálása Hasonló elven működik a többi teszt is, ahol a pozitív buborékok számát vagy az egyszerűen leolvasható elszíneződés, vagy UV fény hatására történő fluoreszkálás adja. Pseudalert Pseudomonas aeruginosa 24 óra 38 ± 0.5 C-on SimPlate Telepszám/Mikrobaszám
Szabványosítás, validálás Coliform és E. coli számlálása Colilert18 98/83 / EK irányelv alternatív módszerként jelöli MSZ ISO 9308-2:1993 MSZ EN ISO 9308-2:2012 a Colilert18 módszert tartalmazza A fáradságos többcsöves módszer helyett a Quanti-Tray/2000 szennyezettebb vizek esetében jól alkalmazható. Megfelel a minta korábbi 3x5 ismétlésű, 1:1, 1:10, 1:100 arányú hígításainak eredményével.
Szabványosítás, validálás Coliform és E. coli, fekál coliform számlálása Colilert 18 MSZ EN ISO 9308-2:2012 Quanti-Tray/2000 Ivóvizek, természetes fürdővizek: Coliform/E. coli vizsgálatán felül, Colilert18 eredménye megfeleltethető az MSZ EN ISO 9308-3:2000 mikrotiter módszernek. Ld. AFNOR val. 2012. A Colilert18 módszer 44.5 C ±0.2 C, 18-22 óra inkubálás mellett alkalmas a Fekál coliformok MPN számának megadására szennyezett vizekből. A módszert az AOAC validálta (Journal of AOAC. InternatIonal Vol. 94,no.5. 2011)
Szabványosítás, validálás Enterococcusok számlálása MSZ EN ISO 7899-2:2000 Enterolert-DW: Ivóvizek esetében megfeleltethető. Ld. AFNOR val. 2013. Enterolert-E: szennyezettebb vizek, pl. természetes fürdővizek esetében eredménye az MSZ EN ISO 7899-1:2000 módszerének megfeleltethető. Ld. AFNOR val. 2015. IDEXX 2015. áprilisától ISO 17025 szerinti QC bizonyítvánnyal látja el a Coliform / Escherichia coli, Enterococcusok, Pseudomonas aeruginosa és heterotróf telepszám vizsgálatára gyártott termékeit: Colilert, Colilert-18, Enterolert, Enterolert-DW, Enterolert-E, Pseudalert és HPC SimPlate.
% Market Shares Módszerváltások Többcsöves módszer Membránszűrés 100 80 60 40 20 0 1900 1950 2000 Years Irányított szubsztrát technologia
Köszönetnyilvánítás Dr Mike Cresswell MSB Cbiol. Distributor Support Manager
Köszönjük a figyelmet!