RÉSZLETES SZAKMAI ZÁRÓJELENTÉS



Hasonló dokumentumok
1. A savasság változása a vegetációs időszak alatt és a száradás során

Nyugat-magyarországi Egyetem. Doktori (Ph. D.) értekezés tézisei. Bükk (Fagus sylvatica L.) extraktanyagok képződése, akkumulációja és megoszlása

Nyugat-magyarországi Egyetem. Doktori (Ph. D.) értekezés tézisei

RÉSZLETES PUBLIKÁCIÓS LISTA

Növekvı arzén adagokkal kezelt öntözıvíz hatása a paradicsom és a saláta növényi részenkénti arzén tartalmára és eloszlására

A fotodegradációs folyamat színváltoztató hatása a bútoriparban felhasználható faanyagoknál

LOMBOS FAFAJOK GİZÖLÉSSEL TÖRTÉNİ FAANYAGNEMESÍTÉSE ÉS A FAANYAGOK FOTODEGRADÁCIÓJÁNAK VIZSGÁLATA

Fenyő faanyagok színének homogenizálása gőzöléssel. Colour homogenisation of conifers by steam treatment. woodscience.

Idegen nyelvű folyóiratcikk, monográfia F. Szokoli, Zs. Németh, J. Inczédy (1990): Selection of optimal ph and solvent composition for the separation

A VISONKA Takarmánykeverı és Szolgáltató Nyilvánosan Mőködı Részvénytársaság idıközi vezetıségi beszámolója november

Szteroid gyógyszeranyagok tisztaságvizsgálata kromatográfiás technikákkal

Technológiai módszeregyüttes, az optimális biotechnológiához tartozó paraméterek: KABA, Kutricamajor

Újabb eredmények a borok nyomelemtartalmáról Doktori (PhD) értekezés tézisei. Murányi Zoltán

Fejér megye Integrált Területi Programja 2.0

Prof. Dr. Molnár Sándor NYME, FMK, Faanyagtudományi Intézet. Átdolgozta: Dr. habil Németh Róbert. Fahasznosítás

Fót Város Önkormányzat Szociális Szolgáltatástervezési Koncepciója

Az allergén növények elterjedése és pollenallergia-veszélyeztetettség Debrecenben

Globális környezeti problémák és fenntartható fejlıdés modul

Csupor Károly. Vízben oldható faanyagvédıszer kioldódási tulajdonságai. Doktori (Ph.D.) értekezés. Nyugat-Magyarországi Egyetem

A MAGYAR KÖZTÁRSASÁG NEVÉBEN!

LOVASKOCSIVAL AZ INFORMÁCIÓS SZUPERSZTRÁDÁN. információtartalma /1

Divatos termék-e a kondenzációs kazán?

A TERMİHELYI TÉNYEZİK ÉS A KÖLTSÉG-HOZAM ADATOK KÖZÖTTI ÖSSZEFÜGGÉSEK

A hőkezelés hatása a faanyagok tulajdonságaira I. rész: A hőkezelt bükk és csertölgy gombaállósága

KISTELEPÜLÉSEK TÉRBEN ÉS IDİBEN 1

Doktori értekezés tézisei

Elıterjesztés Békés Város Képviselı-testülete szeptember 30-i ülésére

Tanácsadás az ápolásban: Ápolóhallgatók tanácsadói kompetenciájának vizsgálata. Doktori tézisek. Papp László

Petrás Ede A felsıfokú szakképzések települési beágyazottsága

ÉS ÁGAZATI EREDMÉNY DIFFERENCIÁLTSÁGA UDOVECZ GÁBOR dr. KERTÉSZ RÓBERT BÉLÁDI KATALIN dr.

Fehérnyárak vizsgálata Tompa város központi közparkjában

B E S Z Á M O L Ó Körösladány Város 2010 évi közbiztonsági helyzetérıl

Munkavédelmi helyzet a Vegyipari Ágazati Párbeszéd Bizottság területén

TIOP 2.6. Egyeztetési változat! október 16.

A tölgyek nagy értékű hasznosítását befolyásoló tényezők vizsgálata és összehasonlító elemzése c.

A faanyag kémiai átalakulása / átalakítása

Kongresszusi részvétel (előadás vagy poszter) Magyar nyelvű, hazai rendezvényeken

A Kisteleki Kistérség munkaerı-piaci helyzete. (pályakezdı és tartós munkanélküliek helyzetelemzése)

T Á J É K O Z T A T Ó

B o r d á n y K ö z s é g i Ö n k o r m á n y z a t

MDOSZ. Dietetikai kisokos. Az antioxidánsok. Készítette: a Magyar Dietetikusok Országos Szövetsége 2013

HATÁROZAT-TERVEZET. Mór Város Önkormányzatának /2009.(IV.29.) Kt. határozata szociális szolgálattervezési koncepciójának felülvizsgálatáról

Fafizika 7. elıad. Akusztikai és s optikai tulajdonságok NYME, FMK,

1. A dolgozat tárgya és célkitőzései

Tájékoztató a Komárom-Esztergom Megyei Önkormányzat I. félévi gazdálkodásáról

A JÖVİ NEMZEDÉKEK ORSZÁGGYŐLÉSI BIZTOSÁNAK ÁLLÁSFOGLALÁSA a lápok védelmének egyes jogi és ökológiai kérdéseirıl

SZOLGÁLTATÁSTERVEZÉSI KONCEPCIÓJA

Vizsgálati módszerek. A vizsgálatok eredményei W 80 C W 90 W 98 C W 110 C R 80 C R 90 R 98 C R 110 C

A Nemzeti Éghajlatváltozási Stratégia Környezeti Vizsgálata (NÉS SKV)

Befektetés a jövıbe program. Babusik Ferenc: A évben belépettek, illetve a programot 2007 ben befejezık interjúinak

Berényi Lajos elnök Közbeszerzések Tanácsa. Tisztelt Elnök Úr!

Vállalati és lakossági lekérdezés. Szécsény Város Polgármesteri Hivatala számára

PÉCSI TUDOMÁNYEGYETEM KÖZGAZDASÁGTUDOMÁNYI KAR REGIONÁLIS POLITIKA ÉS GAZDASÁGTAN DOKTORI ISKOLA

Szabályozási irányok 2. változat a szélsıséges idıjárás hatásának kezelésére a Garantált szolgáltatás keretében

Doktori tézisek. Sedlák Éva. Semmelweis Egyetem Gyógyszertudományok Doktori Iskola

V E R S E N Y T A N Á C S

Bács-Kiskun Megyei Földhivatal évi szöveges beszámolója

Koppány-völgye kistérség szociális felzárkóztató programja

Kenesei Zsófia - Gyulavári Tamás. A marketingeszközök alkalmazásának hatása a versenyképességre 1

V E R S E N Y T A N Á C S

A felnıttképzés hasznosulása a foglalkoztatásban

A MEGALAPOZÓ VIZSGÁLAT 1. HELYZETFELTÁRÓ MUNKARÉSZ

Hajdúnánás Városi Önkormányzat. szociális szolgáltatástervezési koncepciójának felülvizsgálata

TÉZISEK. Közszolgáltatások térbeli elhelyezkedésének hatékonyságvizsgálata a földhivatalok példáján

NANOTECHNOLÓGIA - KÖZÉPISKOLÁSOKNAK NAOTECHNOLOGY FOR STUDENTS

Standard laktációk száma. Tejzsír %

A M A G Y A R K Ö Z T Á R S A S Á G N E V É B E N! í t é l e t e t : I n d o k o l á s :

A Földmővelésügyi és Vidékfejlesztési Minisztérium. Pályázati felhívása

A. AZ ÉGHAJLATI RENDSZER ÉS AZ ÉGHAJLATI VÁLTOZÉKONYSÁG

Faanyagok modifikációja_04

T Á J É K O Z T A T Ó

A megváltozott munkaképességő munkavállalókkal való együttmőködés évi tapasztalatai a Dél-dunántúli régióban

Koreografált gimnasztikai mozgássorok elsajátításának és reprodukálásának vizsgálata

Az NFSZ ismer tségének, a felhasználói csopor tok elégedettségének vizsgálata

e-közigazgatás fejlesztési koncepció

106/2009. (XII. 21.) OGY határozat. a kábítószer-probléma kezelése érdekében készített nemzeti stratégiai programról

Rezisztens keményítők minősítése és termékekben (kenyér, száraztészta) való alkalmazhatóságának vizsgálata

V E R S E N Y T A N Á C S

ELİTERJESZTÉS A Komárom-Esztergom Megyei Közgyőlés október 27.-i ülésére

A PÉTÁV PÉCSI TÁVFŐTİ KFT.

Gyermekek a hatósági eljárásokban Elemzés az országgyőlési biztos vizsgálatai tükrében

A fehérje triptofán enantiomereinek meghatározása

Lignocellulóz bontó enzimek előállítása és felhasználása

JÖVİ NEMZEDÉKEK ORSZÁGGYŐLÉSI BIZTOSA 1051 Budapest, Nádor u Budapest, Pf. 40.Telefon: Fax:

Tájékoztató. a Salgótarjáni Városi Gyámhivatal évi hatósági tevékenységérıl

Andrológiai jellemzık szezonális változásának összefüggése a sperma mélyhőthetıségével és in vitro fertilizációs képességével fekete racka kosoknál

Gulyás Emese. Nem látják át, és nem veszik igénybe a fogyasztóvédelmi intézményrendszert a magyarok május

VÍZMINİSÉGI TÁJÉKOZTATÓ

Talaj - talajvédelem

Összefoglaló. A világgazdaság

Dél-dunántúli Regionális Munkaügyi Központ. Készítette: Takács Szilvia Mátyás Tibor Attila

kopint-tarki.hu Az Agrárrendtartási és a Kereskedelmi Törvény egyes beszállító-védelmi szabályai érvényesülésének tapasztalata

14-469/2/2006. elıterjesztés 1. sz. melléklete. KOMPETENCIAMÉRÉS a fıvárosban

Komárom-Esztergom megye lakosságának egészségi állapota ÁNTSZ Közép-Dunántúli Regionális Intézete Veszprém

PANNON EGYETEM GEORGIKON KAR

Број: СТРАНА 489. OLDAL szám

1. A kereskedelmi szálláshelyek vendégforgalmának alakulása 1

MTA DOKTORI ÉRTEKEZÉS

S Á R V Á R V Á R O S I N T E G R Á L T V Á R O S F E J L E S Z T É S I S T R A T É G I Á J A m á j u s

MEGALAPOZÓ VIZSGÁLAT

Átírás:

RÉSZLETES SZAKMAI ZÁRÓJELENTÉS A KOCSÁNYOS TÖLGY (QUERCUS ROBUR L.) GESZTESEDÉSÉNEK ÉS GESZTHIBÁINAK KÉMIAI VIZSGÁLATA OTKA T 0495756 / 2005-2008 A kocsányos tölgy (Quercus robur L.) hazánkban ıshonos, kemény, lombos, igen széles körben felhasznált, értékes fafaj. Magyarország erdıterületeibıl 8,7 %-al (144 980,6 ha) részesedik. Kötelezı színes gesztképzı. Szíjácsa nagyon vékony, egységesen színes gesztje követi az évgyőrők határait. Az üvegházhatás, a kedvezıtlenül alakuló mikroklíma, a szélsıségesen változó csapadékmennyiség és más elınytelen hatások szinergikus eredményeként egyre gyakoribbak az ismert erdık- és faárok, mellettük azonban újak is megjelennek. A kocsányos tölgy esetében is egyre számosabbak a geszthibás törzsek. A tölgy gesztjének nemzetközi szinten is jelentıs, nagy gazdasági veszteségeket okozó fahibája az ún. győrős elszínezıdés. Bár nem mindig jár együtt a faanyag szerkezeti, strukturális romlásával, olyan esztétikai problémát jelent, ami a fa alkalmazhatóságát és ezáltal az erdıállományok értékét jelentıs mértékben csökkenti. 1. ábra A kocsányos tölgy gesztjének győrős elszínezıdése KÖTELEZİ SZÍNES GESZTESEDÉS, ÁLGESZTESEDÉS A gesztképzıdés az érett szijácsban található sejtek programozott halálának eredménye, életük utolsó szakasza, amelyet belsı tényezık váltanak ki (MAGEL és mtsai., 2001). Szoros kapcsolatban áll a fa évente, periódikusan megismétlıdı életciklusával, kezdete korfüggı, elırehaladását a fa kora és növekedési üteme befolyásolja. A gesztesedés kapcsolatba hozható a szijácsszövet mennyiségének szabályozásával is. A gesztesedés során az elhaló faparenchima és bélsugársejtek különbözı gesztesítı anyagokat választanak ki, amelyek berakódnak a sejtfalakba, a sejtüregekbe, néha a szomszédos sejtekbe is. A komplex, ún. másodlagos metabolitok lerakódása kedvezıen befolyásolják a fa élettartamát, mivel bioaktív kopmonensekben gazdag, így védelmet biztosít a patogének ellen (BOSSHARD, 1974). A határzóna. A határzóna, átmeneti zóna, vagy tranzicionális zóna vékony, néhány évgyőrő szélességő faszövet a szíjács-geszt határon. A legtöbb fafaj bütümetszetén jól lokalizálható, nedvességtartalma lényegesen alacsonyabb mint a szíjácsé és a geszté.

A határzóna kitüntetett élettani szereppel rendelkezik, a gesztesedés szempontjából nagy jelentıségő. ZIEGLER (1968) több fafaj esetében kimutatta számos vitamin (tiamin, riboflavin, nikotinsavamid, piridoxin és biotin) koncentrációjának jelentıs emelkedését a szíjács-színes geszt határon. Ugyancsak fokozott fiziológiai aktivitásra utal számos enzim, pl. peroxidázok (LAJRAND, 1963), polifenol-oxidázok (HILLIS, 1965), invertázok (KONDO, 1964; HAUCH és MAGEL, 1998), aktivitásának fokozódása is. Az akác (Robinia pseudoacacia L.) esetében HÖLL (1967) beszámolt az aldoláz enzimaktivitás és a fehérjekoncentráció emelkedésérıl is a határzónában. Az enzimek szerepét a gesztesedésben késıbbi mérések is megerısítették (HÖLL és LENDZIAN, 1973; MAGEL és mtsai., 1997; MAGEL és mtsai., 2001). LAJRAND (1963) valamint HIGUCHI és mtsai. (1964) szerint a határzónában a sejtmagok DNS tartalma is jellegzetesen megváltozik. Az álgesztesedés. A bükk legfontosabb szerkezeti és szín anomáliája, amely jelentıs értékvesztést okoz. A bükk faszöveteit elszínezı anyagok képzıdése több tényezı együttes hatásának az eredménye. Központi szerepet játszik a megemelkedett szöveti ph, a színes, a faszöveteket megfestı polimér prekurzorjainak, a fenoloidoknak a minısége és mennyisége, valamint az oxidoreduktáz enzimek aktivitása [ALBERT és mtsai., 2002, 2003; HOFMANN és mtsai., 2004; RÉTFALVI és mtsai., 2004; ALBERT, 2005]. A színhatáron az oxidoreduktáz enzimek aktivitása ugrásszerően megemelkedik és az álgeszt belsejében is jelentıs marad. A bükk álgeszt ph értékein (ph=6.1-6.8) a polifenol-oxidáz (PPO) enzim fajlagosan aktívabb, mint a peroxidáz (POD). Az álgesztesedésben jelentısebb szerepet játszó fenoloidok (flavan- 3-olok) mennyisége a szíjácstól a színhatárig folyamatos akkumulációt mutat. Elızı kutatásaink során öt fenoloid-glikozidot és négy fenoloidot választottunk el. Ezek közül azonosítottuk a (+)-katechint, az (-)-epikatechint, a kvercetint és a taxifolint. Hidrolízis után a glikozidok aglikonjaiként kvercetint és taxifolint találtunk. A színanyagok a katechin epimérekbıl keletkeznek, ezek koncentrációja a színhatár elıtt magas, utána pedig nagymértékben csökken. A színes faanyag belsejében a szabad taxifolin és kvercetin akkumulálódik, szerepük az álgeszt színanyagainak képzıdésében csekély. A színhatár elıtt, a határzónában nem, vagy csak elenyészı mértékben játszódik le a gesztesítı fenolok in situ szintézise. A szacharóz akkumulációja és hidrolízise a határzónában kis mértékő. KUTATÁSI CÉLOK 1. A gesztesedés és a geszthiba kialakulásának kémiai szereplıi. Az erdei fák kötelezı színes gesztesedésében a kioldható szénhidrátok, a növényi savak, a növényi fenoloidok (flavonoidok, antocianidinek) és néhány speciális enzim játszik döntı szerepet. A gesztesedésben résztvevı kémiai komponensek minısége fafaj függı. A pályázati idıszakban a járulékos (extrakt) anyagoknak és a kémiai paramétereknek a kocsányos tölgy kötelezı színes gesztesedésében és a geszthibák képzıdésében játszott szerepét tanulmányoztuk. 2. A kötelezı gesztesedés és a bükk álgesztesedése kémiai folyamatainak összehasonlítása. A bükk (Fagus sylvatica L.) álgesztesedésének kémiai vizsgálata (OTKA T 043038; 2003-2004) témájú kutatásaink során felderítettük az álgesztesedés kémiai szereplıit, a lejátszódó kémiai reakciókat és tisztáztuk a kémiai paraméterek szerepét. In vitro elıállítottuk az álgeszt színanyagait is. A két OTKA által támogatott - kutatás eredményeinek összevetésével lehetıségünk nyílt az élettanilag normális és az anomáliás gesztesedés közötti (kémiai) különbségek felderítésére. 2

3. A színes geszthiba kémiai kimutatása a szín elhalványodása után. A kocsányos tölgy gesztjének színes győrője a levegı oxigénjével érintkezve a vágási felületen rövid idı alatt kifakul. A fakereskedık így csak a faanyag feldolgozása során észlelhetik a hibát, az értékvesztést. Frissen vágott felület Száradt, kifakult felület. 2. ábra A győrős színesedés fakulása a faanyag száradása során Célunk volt olyan járulékos anyagok felderítése, amelyek minısége vagy mennyisége eltérı az ép és a színhibás gesztben. Ezek kémiai jelzımolekulái lehetnek a győrős fahibának és egy színreakción keresztül lehetıvé teszik a fahiba kimutatását kifakult fafelületen is. KÍSÉRLETI RÉSZ Mintavételi helyek: Somogyhárságy, 3G2 erdırészlet; TAEG, Soproni Hegyvidéki Erdészete; Sopron, Lenti Erdészet. A mintákat célirányosan, tervezetten vettük. Egy részüket októberben, a gesztesedési idıszakban, más részüket májusban, amikor nem zajlik gesztesedés. 2007-ben fiatal törzseket vizsgáltunk, 2008-ban idıs tölgyekre terjesztjük ki a méréseket. A méréseket az egymást követı években megismételtük. A mintakorongokat megszámoztuk. SZ SZH GH G B 3. ábra Mintavétel sugárirányban. SZ (szijács), SZH (szijács határ), GH (geszt határ), G (geszt), B (bél). Mintavétel a győrősen elszínezıdött faszövetekbıl, az ép gesztbıl és a tranzicionális zónából. Minden korong gesztjébıl vettünk kontroll mintát is (kontroll), amely nem tartalmazott elszínezıdött szöveteket. Külön vizsgáltuk a tranzicionális zóna szöveteit. Mintaszám: statisztikai feldolgozásra alkalmas. A méréseket többször megismételtük különbözı termıhelyekrıl és klimatikus viszonyok közül kikerülı mintákkal. Szárazanyag tartalom. A minták szárazanyag tartalmának tekintetében nem tapasztaltunk jelentıs eltéréseket. 3

KÉMIAI KOMPONENSEK, KÉMIAI PARAMÉTEREK ph. A kocsányos tölgy szöveti ph-ja 3,74-4,34 között változik. Jelentıs sugár irányú ph csökkenést mértünk. A színhatáron mért csökkenés arra utal, hogy a kocsányos tölgy gesztesedése alacsonyabb ph értékeknél, savasabb közegben zajlik. Megjegyzendı, hogy a bükk álgesztesedésénél ellentétes a tendencia, ott a ph a színhatáron megemelkedik. Pufferkapacitás. A ph-t befolyásolja a szövetek pufferkapacitása, amely 1,0-1,3 (mmol NaOH/ kg fa) közötti értékeket mutat. Savasság. A faszövetek savassága különbözı paraméterek (savtartalom, ph-érték, pufferkapacitás) meghatározásával számszerően is kifejezhetı és erısen fafaj specifikus. A savasság jelentısen befolyásolja, szabályozza az élı fában végbemenı biokémiai - elsısorban enzimatikus - folyamatokat. A kocsányos tölgy szövetekben az összsav- tartalom a szijácstól a bélig nı.. Totálfenol tartalom (Folin-Ciocâltău módszer). A totál fenol tartalom a szijácstól a bél irányába folyamatosan nı, a színhatár belsı oldalán jelentısen megemelkedik, majd a bél irányába állandósul. A szijácsban vízben oldható (ezért szállítható) fenoloid-glikozidokat találtunk, ezek akkumulálódnak a határzónában. Hidrolízis után egy részük a gesztképzıdés folyamatában kémiailag átalakul, vízben nem oldódó színképzı anyag keletkezik belıle, a többi zömmel fenolkarbonsavak a gesztben marad és a fa védelmi képességeit növeli. A színhatáron akkumulálódott színképzı elıanyagok (prekurzorok) oxidációs és polimerizációs folyamatokban alakulnak színhordozó, nagy molekulájú anyagokká. A fenoloidok koncentrációját a határzónában az is növelheti, hogy a normális anyagcsere folyamatok a gesztesítı anyagok (polifenolok, fenolkarbonsavak) szintézisének irányába tolódnak el. A kialakult gesztben a flavonoid-glikozidok szinte teljesen hiányoznak. Totálfenol tartalom mmol kvercetin/100g sz. fa 30 25 20 15 10 5 1. korong 2. korong 3. korong 0 SZ SZH GH G B 4. ábra A totálfenol tartalom sugárirányú változása. SZ (szijács), SZH (szijács határ), GH (geszt határ), G (geszt), B (bél). Szignifikáns különbségeket mértünk az elszínezıdött, fahibás kontroll minták és az ép gesztbıl vett minták totálfenol tartalma között. A geszthibás, elszínezıdött minták totálfenol tartalma kisebb, ezekben a fenoloidok átalakultak. 4

A fenoloidok elválasztása és azonosítása. Vizsgáltuk a fenoloidok elválasztásának, valamint minıségi és mennyiségi analízisének lehetıségeit nagyteljesítményő rétegkromatográfiás (HPTLC) és túlnyomásos rétegkromatográfiás (OPLC) módszerekkel. Külön mértük a flavonoidokat és külön a fenolkarbonsavakat. A fenolkarbonsavakat két elıhívási módszerrel is vizsgáltuk, mert szerkezeti sokféleségük miatt az összes ilyen jellegő komponens vizualizációja nem valósítható meg egyetlen módon. Összehasonlítottuk a kontroll és az elszínezıdött minták minıségi spektrumát és az egyes komponenesek mennyiségei közötti eltéréseket is. Fenolkarbonsavak I. Az 5. és 6. ábrák a kocsányos tölgy gesztjében igen magas koncentrációban jelen lévı fenolkarbonsavak ujjlenyomat -át mutatják be. Az elıhívás NR reagenssel valamint polietilénglikol 4000 oldattal történt. A fenolkarbonsavak jelentıs része világoskék fluoreszcencia-színnel jelenik meg az elıhívást követıen ultraibolya fénnyel (366 nm) történı megvilágítás esetén. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 st 26 27 28 29 30 31 32 5. ábra Fenolkarbonsavak elválasztása az 1. és 3. korong extraktumaiból. Állófázis: szilikagél, mozgófázis: 87:3:10 etilacetát:hangyasav:víz, elıhívás: NR reagens + PEG 4000 oldat, megvilágítás: 366 nm. St: standard sáv. Standard vegyületek (növekvı Rf szerint): rutin (narancssárga), klorogénsav (kék), kvercetin (sárga), felvitt mennyiség: 200 ng. 1.korong: 1-10 sz. minták, 3. korong: 26-32 sz. minták. 11 12 13 14 15 16 17 18 19 st 20 21 22 23 24 25 6. ábra Fenolkarbonsavak elválasztása a 2. korong extraktumaiból. Állófázis: szilikagél, mozgófázis: 87:3:10 etilacetát:hangyasav:víz, elıhívás: NR reagens + PEG 4000 oldat, megvilágítás: 366 nm. St: standard sáv. Standard vegyületek (növekvı Rf szerint): rutin (narancssárga), klorogénsav (kék), kvercetin (sárga), felvitt mennyiség: 200 ng. 3. sz korong: 11-25 sz. minták. 5

Az 1-es korongban nem figyelhetık meg egyértelmő különbségek a kontroll és a színes minták között az egyes komponensek minıségét, illetve mennyiségét illetıen. A 2-es korongban a kontroll minták esetén több komponens hiányzik, illetve mennyiségük lecsökken az elszínezıdött faanyag mintáihoz képest. A 3-as korongból vett elszínezıdött minták egy részében szinte alig találhatók meg a fluoreszcenciát mutató fenolkarbonsavak (11-13), másokban igen sok található (14, 15, 22). A 6. ábra szerint az NR reagenssel világoskék fluoreszcenciát mutató fenolkarbonsavak a 24 és 25-ös kontrol mintákban találhatók meg a legnagyobb mennyiségben. Ez ellentmond az 1. korong esetében tapasztaltakkal (2. ábra). Az alkalmazott mérési technika és a mérési eredmények alapján kijelenthetı, hogy ezen típusú fenolkarbonsavak nem jellemzik egyértelmően a tölgy győrős gesztesedésének jelenségét. A szóban forgó komponensek nagy száma és magas koncentrációja miatt nagyobb felbontású elválasztási technikára van szükség ezen vegyületek elválasztására és szerepük azonosítására az elszínezıdési folyamataiban. Fenolkarbonsavak II. A galluszsav ugyancsak fenolkarbonsav, külön tárgyalását az indokolja, hogy az NR reagenssel nem képez fluoreszkáló származékot, ezért az 5. és 6. ábrákon bemutatott kromatogramokon nem válik láthatóvá. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 st 26 27 28 29 30 31 32 G 7. ábra Fenolkarbonsavak elválasztása az 1. és 3. korong extraktumaiból. Állófázis: szilikagél, mozgófázis: 87:3:10 etilacetát:hangyasav:víz, megvilágítás: látható fény. St: standard sáv. Standard vegyület (G): galluszsav, felvitt mennyiség: 1000 ng. 1.korong: 1-10 sz. minták, 3. korong: 26-32 sz. minták. 11 12 13 14 15 16 17 18 19 st 20 21 22 23 24 25 G 6

8. ábra Fenolkarbonsavak elválasztása a 2. korong extraktumaiból. Állófázis: szilikagél, mozgófázis: 87:3:10 etilacetát:hangyasav:víz, megvilágítás: látható fény. St: standard sáv. Standard vegyület (G): galluszsav, felvitt mennyiség: 1000 ng. 3. sz korong: 11-25 sz. minták. A 7 és 8. ábrák a vizsgált tölgy minták elválasztásáról készült kromatogramok láthatók. Az ábrák igazolják, hogy a galluszsav jelentıs mennyiségben fordul elı a tölgy gesztjében. Egyértelmően megfigyelhetı, hogy a galluszsav a győrősen elszínezıdött geszt kivonatában vagy csak nyomokban jelenik meg (1-5, 10, 11, 12, 17-19 minták), vagy a kontrollnál kisebb mennyiségben. Mind a három vizsgált korongban a kontroll minták esetében tapasztalható a legmagasabb galluszsav koncentráció. Figyelemre méltó, hogy a geszthatárt is rendkívül alacsony galluszsav koncentráció jellemzi (1, 2, 10, 17-19). A galluszsav a győrősen elszínezıdött geszt kivonatában csak nyomokban jelenik meg, hiánya kémiailag jelzi a színesedést. A geszthatáron tapasztalható galluszsav-koncentáció csökkenésnek számos oka lehet (szíjács-geszt átalakulás következtében végbemenı hidrolízis, enzimtevékenységek, in situ fenolszintézis- és bontás, stb.) melyek további vizsgálatokat igényelnek. Flavonoidok. A 9. és 10. ábrák a flavonoid típusú vegyületek elválasztását és azonosítását szemléltetik. Szakirodalmi adatok alapján a tölgy gesztjének járulékos anyagai között legnagyobb mennyiségben fenolkarbonsavak találhatók (ld. világoskék sávok), flavonoidok (pl. kvercetin) csak kisebb mennyiségben. Ezt igazolják a mi mérési eredményeink is: a fenolkarbonsavakhoz képest csak lényegesen kisebb mennyiségben mutathatók ki ezek a komponensek. Tendenciaszerő változás a kontroll mintákkal összevetve nem figyelhetı meg. Valószínősíthetı hogy ezen komponensek szerepe - kis koncentrációjuk miatt- elenyészı a tölgy győrős gesztesedésében. Egyértelmő következtetések levonásához további vizsgálatokra van szükség. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 st 26 27 28 29 30 31 32 9. ábra Flavonoidok elválasztása az 1. és a 3. korong extraktumaiból. Állófázis: szilikagél, mozgófázis: 6:3:1 toluol:etilacetát:hangyasav, elıhívás: NR reagens + PEG 4000 oldat, megvilágítás: 366 nm. St: standard sáv. Standard vegyületek (növekvı Rf szerint): taxifolin (narancssárga), kvercetin (narancssárga), dihidrobenzoesav (kék), felvitt mennyiség: 200 ng. 1.korong: 1-10 sz. minták, 3. korong: 26-32 sz. minták. 7

11 12 13 14 15 16 17 18 19 st 20 21 22 23 24 25 10. ábra Flavonoidok elválasztása a 2. korong extraktumaiból. Állófázis: szilikagél, mozgófázis: 6:3:1 toluol:etilacetát:hangyasav, elıhívás: NR reagens + PEG 4000 oldat, megvilágítás: 366 nm. St: standard sáv. Standard vegyületek (növekvı Rf szerint): taxifolin (narancssárga), kvercetin (narancssárga), dihidrobenzoesav (kék), felvitt mennyiség: 200 ng. 3. sz korong: 11-25 sz. minták. A galluszsav mennyiségi meghatározása A galluszsav mennyiségének meghatározását a denzitometriás kiértékelés során kapott csúcsterület (é: folt nagysága és optikai sőrőségének mérése) segítségével végeztük. A denzitometriás meghatározást Camag TLC Scanner 3 denzitométerrel kiviteleztük. A denzitometriás kiértékelés 700 nm-en történt reflexiós üzemmódban. A 8. ábrán bemutatott kromatogramhoz tartozó denzitogramot a 11. ábra mutatja. A csúcsterület mérése és kiértékelése a 12. ábrának megfelelıen történt. galluszsav 11. ábra A kromatogramról felvett denzitogram 700 nm-en 12. ábra A galluszsav csúcsterületének megállapítása Összehasonlítottuk a fahibás gesztminták (kontroll) és az ép gesztbıl vett minták galluszsav tartalmát. Az eredmények alapján kijelenthetı, hogy a galluszsav mennyisége a győrősen elszínezıdött szövetekben szignifikánsan alacsonyabb mint az ép geszt szöveteiben. A galluszsav koncentráció csökkenése a vizsgált korongok gesztszöveteiben szignifikánsan jelzi a kocsányos tölgy győrős elszínezıdésének jelenlétét. 8

Összukor tartalom (Dubois-módszer) A különbözı vízoldható mono- és oligoszacharidok a másodlagos metabolizmus folyamataiban alakulnak át járulékos anyagokká, így a gesztesedésben aktívan részt vesznek. A kioldható szénhidrátok szerepet játszanak mind a fenoloidok, mind a fenoloid-glikozidok szintézisében is. Méréseink célja az volt, hogy eldöntsük: keletkeznek-e in situ, a színhatáron a gesztképzéshez szükséges fenoloidok, vagy csak a külsı szövetekben képzıdött fenolok lassú akkumulációja miatt nı meg a fenoloid koncentráció színhatár közeli szövetekben. Elsı esetben a színhatár két oldalán jelentıs összcukor tartalom változásnak kell bekövetkeznie, a második esetben ez nem jellemzı. 40 35 30 Összcukor tartalom 1. korong 2. korong 3. korong mg/g sz.fa 25 20 15 10 5 0 SZ SZH GH G B 13. ábra A kioldható összes szénhidrát-tartalom sugár irányú változása Szignifikáns különbség mutatható ki a győrősen elszínezıdött minták és a kontroll minták összcukor tartalma között. Az elszínezıdött minták összcukor tartalma kisebb. Oxidoreduktáz enzimek aktivitása és fehérjetartalom a szíjácsban és a gesztben. Mértük a polifenol-oxidáz (PPO) és peroxidáz (POD) enzimek aktivitását és az enzimek mennyiségére is utaló fehérje koncentrációt. A fehérje tartalom a színes geszt két oldalán (határzóna) lévı faszövetekben a legnagyobb, ez a két vizsgált enzim szerepére utalhat a fenol szubsztrátumok oxidációjában. A geszt belsejébıl valamint a bél körüli geszt-szövetekbıl nem mutatható ki sem POD sem PPO aktivitás, fehérjetartalom viszont mérhetı. Az eredmények összhangban vannak a magas összfenol koncentrációval. Az enzimek aktivitása a szijácsban a legmagasabb, de itt kisebb a fehérje koncentráció. Összefoglalás 1. A tölgy gesztjében lényegesen nagyobb mennyiségben fordulnak elı fenoloidok, mint a szíjácsban. 2. A tölgy szíjácsának és gesztjének fenoljai fıleg fenolkarbonsav típusúak. 3. A kocsányos tölgy győrősen elszínezıdött illetve ép gesztszöveteinek egyes kémiai paraméterei között szignifikáns különbségek vannak. 4. A kocsányos tölgy győrős színesedést egyértelmően jelzi a kioldható szénhidráttartalom, a totálfenol-tartalom, valamint a galluszsav koncentrációjának csökkenése. 5. A tölgy gesztjében nagy mennyiségben jelen lévı egyéb fenolkarbonsav komponens tekintetében nem mutatható ki egyértelmő eltérés a kontroll és a minták között az alkalmazott analitikai technika segítségével. Ezen vegyületek azonosítására és nagy felbontású elválasztására, ill. a további aktív komponensek azonosítása szükség van. 9

6. A tölgy geszt belsejébıl nem mutatható ki oxidoreduktáz enzimek jelenléte sem az ép sem az elszínezıdött gesztszövetekbıl. 7. A geszthatáron rendkívül alacsony galluszsav koncentrációk mérhetık. Ennek lehetséges okai a szíjács-geszt átalakulás molekuláris, illetve enzim folyamatai, a hidrolízis, illetve az in situ polifenol-szintézis lehet. 8. A galluszsav koncentrációjának csökkenése kapcsolatba hozható a tölgy győrős gesztesedésének kémiai folyamataival is. A galluszsav faanyagon történı szelektív kimutatásával (színreagens) a tölgy győrős gesztesedése indikálható. A kémiai komponensek és paraméterek felderítése lehetıvé teszi a normális és attól eltérı élettani folyamatok (gesztesedés, álgesztesedés) jobb megértését, a stresszhatásokra adott válaszreakciók tanulmányozását, a stressz-tőrıképesség minısítését és ezzel a fa vitalitásának jellemzését. Ezek ismeretében közelebb kerülhetünk a geszthibákat kiváltó okokhoz, a megelızéshez és a védekezéshez is. A járulékos anyagok ismeretében lehetıvé válik a magyar tölgy-faanyag egzaktabb minısítése, a tudatos és célirányos anyagfelhasználás. Az élı fára irányuló kémiai kutatások elısegíhetik a fakárok csökkentését. SZAKIRODALOM Albert, L. (2005): A bükk (Fagus sylvatica L.) álgesztesedésének kémiai vizsgálata. OTKA T 043038 (2003-2004 Albert, L. Hofmann, T., Németh, ZS. I., Rétfalvi, T., Koloszár, J., Varga, SZ., CSepregi, I. (2003): Radial variation of total phenol content in Beech (Fagus sylvatica L.) wood with and without red heartwood, Holz als Roh- und Werkstoff 61: 227-230. Albert, L., Hofmann, T., Visi-Rajczi, E., Rétfalvi, T., Németh, ZS. I., Koloszár, J., Varga, SZ., CSepregi, I. (2002): Relationships Among Total Phenol and Soluble Carbohydrate Contents And Activities of Peroxidase and Polyphenol Oxidase in Red-Heartwooded Beech (Fagus sylvatica L.), 7 th European Workshop on Lignocellulosics and Pulp - Towards molecular-level understanding of wood, pulp and paper, 2002 augusztus 26-29, Turku/Abo, Finnország, pp. 253-256. Higuchi, T., Fukazawa, K., NAKASHIMA, S. (1964): Study on the mechanism of heartwood formation. I. Histochemistry of the wood tissue, J. Jap. Wood Res. Soc 10: 235-241. Bosshard, H. H. (1974): Splintholz-Kernholz-Umwandlung, In: Holzkunde, 2. kötet: Biologie, Physik und Chemie des Holzes, Birkäuser Verlag, Basel. Hauch, S., Magel, E. (1998): Extractable activities and protein content of sucrose phosphate synthase, sucrose synthase and neutral invertase in trunk tissues of Robinia pseudoacacia L. are related to cambial wood production and heartwood formation, Planta 191: 394-401. Higuchi, T., Fukazawa, K., Nakashima, S. (1964): Study on the mechanism of heartwood formation. I. Histochemistry of the wood tissue, J. Jap. Wood Res. Soc 10: 235-241. Hillis, W. E. (1965): Biological aspects of heartwood formation, Proc. Meeting Section 41, IUFRO, Melbourne, Vol 1. Hofmann, T., Albert, L., Rétfalvi, T. (2004): Quantitative TLC Analysis of (+)-Catechin and ( )-Epicatechin from Fagus sylvatica L. with and without Red Heartwood, Journal of Planar Chromatography 17: 350-354. Höll, W. (1967): Physiologische und biochemische Gradienten in den Jahrringen von Stämmen, államvizsgadolgozat, Darmstadt. 10

Höll, W., Lendzian, K. (1973): Respiration in the sapwood and heartwood of Robinia pseudoacaia, Can. J. Bot. 52: 727-734. Keller R, (1987). Différentes variétés de chêne et leur répartition dans le monde. Conn Vigne et Vins, 21 : 191-229. Kondo, T. (1964): On the wood enzyme, J. Jap. wood Res. Soc. 10: 43-48. Lajrand, D. B. (1963): On cytochemistry of wood elements, Drev. Vyskum 1: 1-11. Magel, E. A., Hillinger, C., Höll, W., Ziegler, H. (1997): Biochemistry and physiology of heartwood formation: Role of reserve substances. In: Trees Contribution to modern tree physiology, Eds.: H. Rennenberg, W. Eschrich és H. Ziegler, SFB Academic Publisher. The Hague. pp. 477-506. Magel, E. A., Hillinger, C., Wagner, T., Höll, W. (2001): Oxidative pentose phosphate pathway and pyridine nucleotides in relation to heartwood formation in Robinia pseudoacaia L., Phytochemistry 57 (7): 1061-1068. Mosedale J-R, Savill P, (1996). Variation of heartwood phenolics and oak lactones between the species and phenological types of Quercus petraea and Q. robur. Forestry, 69 : 47-54. Masson G, Puech J-L, Moutounet M, (1996). Composition chimique du bois de chêne de tonnellerie. Bull OIV, 69 : 634 657. Rétfalvi, T., Hofmann, T., Visi-Rajczi, E., Takács, P., Albert, L., Markó, G. (2004): The acidity of red-hertwooded beech and its effects on the mechanical features of the chipboard, 7 th European Workshop on Lignocellulosics and Pulp, 2004 Augusztus 23-25, Riga, Lettország, pp. 547-550. Vancsura R. (1992): Quercus Tölgy. In: Gencsi L. Vancsura R. (1992): Dendrológia. Mezıgazda Kiadó, Budapest, p. 226 273. Ziegler, H. (1968) Biologische Aspekte der Kernholzbildung, Holz als Roh- und Werkstoff 26: 61-68. A PÁLYÁZAT KERETÉBEN MEGJELENT KÖZLEMÉNYEK Albert L., Hofmann T., Rajczi E., Csepregi I., Makk Á. (2007): Polifenolok kinyerése magyarországi fafajok szöveteibıl. Extrakciós eljárások hatékonyságának vizsgálata. NymE EMK Tudományos Ülésszaka, 2007. december 11. Rétfalvi T., Hofmann T., Albert L., (2007). A GC-MS alkalmazása fakémiai kutatásokban. Shimadzu/Simkon szakmai nap, Budapest, 2007. november 14. T. Hofmann, L. Albert, S. Fehér, and T. Rétfalvi (2008): HPTLC analysis of wood discolorations comparative investigation of the red heartwood of beech (Fagus sylvatica L.) and the ring-like discoloration of pendunculate oak (Quercus robur L.), ISC 2008 27 th International Symposium on Chromatography, September 21-25, 2008, Münster, Németország. T. Hofmann, L. Albert, T. Rétfalvi, S. Fehér (2009): The molecular characteristics of typical colored wood defects in beech and pedunculate oak, International Scientific Conference on Forest, Wildlife and Wood Sciences for Society Development, Április 16-18, 2008, Prága, Cseh Köztársaság. 11