Rubella-IgG-ELISA PKS medac. Magyar 136-PKS-VPU/010512



Hasonló dokumentumok
CMV-IgM-ELA Test PKS medac. Magyar 110-PKS-VPU/010512

Rubella-IgM-ELA Test PKS medac. Magyar 135-PKS-VPU/010708

CMV-IgA-ELA Test PKS medac. Magyar 112-PKS-VPU/010708

VZV-IgG-ELISA PKS medac. Magyar 103-PKS-VPU/070910

VZV-IgM-ELA Test PKS medac. Magyar 101-PKS-VPU/010708

EBV VCA-IgM-ELA PKS medac. Magyar 127-PKS-VPU/010512

EBV VCA-IgG-ELISA PKS medac. Magyar 128-PKS-VPU/010708

Hantavírus (Puumala) IgG/IgM-ELISA. 4. Szükséges anyagok és reagensek, amelyeket a teszt nem tartalmaz. Használati Utasítás /Instruction Sheet/

VZV-IgA-ELISA PKS medac. Magyar 102-PKS-VPU/010512

CMV-IgG-ELA Test PKS medac. Magyar 115-PKS-VPU/140904

Chlamydia pneumoniae-igm-selisa medac. Magyar 432-TMB-VPU/011007

QUANTA Lite TM ssdna In Vitro diagnosztikai alkalmazásra CLIA Bonyolultság: magas

PLATELIA VZV IgG TESZT

Biztonsági adatlap EGK

QUANTA Lite dsdna SC ELISA In vitro diagnosztikai alkalmazásra CLIA komplexitás: Magas

CMV IgG Avidity. Cytomegalovírus elleni IgG antitestek. Elecsys 2010 MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 602

QUANTA Lite TM OMP Plus ELISA In Vitro diagnosztikai alkalmazásra CLIA Bonyolultság: magas

A vizsgálat kivitelezése. A kit összetevői

Szent-Györgyi Albert Orvostudományi Egyetem Regionális Humán Orvosbiológiai Kutatásetikai Bizottsága

Molekuláris biológiai diagnosztika alkalmazása

Az ESAT-6, CFP-10 és TB7.7(p.4) peptid antigének kiváltotta IFN-gamma termelés vizsgálata teljes vérben

Trypsinum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur TRYPSINUM. Tripszin

cobas TaqScreen MPX Test for use on the cobas s 201 system

2 HASZNÁLATI ÚTMUTATÓ

Diagnosztikumok bősége. Mikor, milyen teszttel mit lehet kimutatni?

Mycoplasma pneumoniae-igm-elisa medac. Magyar 362-VPU/010512

IMMUNOGLOBULINUM HUMANUM NORMALE AD USUM INTRAVENOSUM. Humán normál immunglobulin intravénás alkalmazásra

A BIZOTTSÁG HATÁROZATA

IgE mediált allergiák diagnosztikája - áttekintés

Fotometriás mérések. Minőségbiztosítás Hibalehetőségek A hibák megelőzése. Előadó: Nagy László, Aktivit Kft. A K T I V I T Kft.

CANDIDAtest 21. Kódszám:

Ellenanyagok kimutatása diagnosztikai/prognosztikai célból

INTERFERONI GAMMA-1B SOLUTIO CONCENTRATA. Tömény gamma-1b-interferon-oldat

1. SZAKASZ: AZ ANYAG/KEVERÉK ÉS A VÁLLALAT/VÁLLALKOZÁS AZONOSÍTÁSA 1.1 Termékazonosító Gépjármő akkumulátor A termék keverék.

Az Egészségügyi Minisztérium módszertani levele Immunhisztokémiai és immuncitokémiai módszerek alkalmazása a patológiában

Minőségbiztosítás, validálás

Chlamydia pneumoniae-igg-selisa medac. Magyar 430-TMB-VPU/010708

Cillit Bang Power Cleaner Felület- és WC tisztító

96/2009. (IX. 24.) számú hat. A SEMMELWEIS EGYETEM BIOBANK HÁLÓZATÁNAK MŐKÖDÉSI RENDJE IDEIGLENES SZABÁLYOZÁS

cobas TaqScreen MPX Test, version 2.0 for use on the cobas s 201 system

HU-Budapest: Vérvizsgálati reagensek 2012/S Tájékoztató az eljárás eredményéről. Árubeszerzés

Betegtájékoztató STREPTASE NE LIOFILIZÁTUM OLDATOS INJEKCIÓHOZ/INFÚZIÓHOZ

Biztonsági adatlap Azonosító: 1776 az 1907/2006/EK rendelet szerint

BIZTONSÁGI ADATLAP az 1907/2006/EK rendelet II. Melléklet szerint. olajos, zsíros, mőgyantával erısen szennyezett kézfelület tisztítása

COBAS TaqMan HBV Test HBV HPS

M E G O L D Ó L A P. Egészségügyi Minisztérium

EURÓPAI UNIÓ Az Európai Unió Hivatalos Lapjának Kiegészítő Kiadványa 2, rue Mercier, 2985 Luxembourg, LUXEMBOURG Fax

Biztonsági adatlap 1907/2006/EK, 31. cikk szerint

Az oldat tartalma milliliterenként: humán plazmaprotein mg (legalább 98%-os tisztaságú IgG)

Poli-Farbe Corso Folyékony Fólia Változat: 1 Felülvizsgálat: - Kiadás kelte: Oldal: 1/9

Biztonsági adatlap. Penta Intensiv Star. 1. Az anyag/keverék és a vállalat/vállalkozás azonosítása. 2. Veszélyesség szerinti besorolás

SANO BRUNO Hungary Kft. 1 / 8. oldal SANO DRAIN LIQUID / LEFOLYÓ TISZTÍTÓ (1 L)

Chlamydia pneumoniae-igg-selisa medac. Magyar 430-TMB-VPU/010512

QUANTA Flash Jo In Vitro diagnosztikai alkalmazásra KIZÁRÓLAG EXPORT CÉLJÁRA. AZ EGYESÜLT ÁLLAMOKBAN NEM FORGALMAZHATÓ.

BBL Sabouraud Dextrose Agar BBL Sabouraud Dextrose Agar with Chloramphenicol

cobas TaqScreen MPX Test, version 2.0 for use on the cobas s 201 system

HU-Budapest: Vérvizsgálati reagensek 2012/S Ajánlati/részvételi felhívás. Árubeszerzés

I. Szennyvizekben, szennyezett talajokban a biológiai oxigénigény mérése

cobas TaqScreen West Nile Virus Test a cobas s 201 rendszeren történő használatra

2. fejezet - Kémiai alkotóelemek. Tömeg % Poliuretán prepolimer - Nem meghatározott Nem meghatározott Diciklohexilmetán-4, 4 -diizocianát

1/2007 kiadás, amely leváltja az 1/2006 kiadást

APROTININUM. Aprotinin

Kazetta. Férfi Termékenységi Sperma Teszt házi használatra Használati utasítás

BIZTONSÁGI ADATLAP. Nincs veszélyesként besorolva. Nem valószínő hogy káros a vízi élıszervezetekre.

Mycoplasma pneumoniae-igg-elisa medac. Magyar 360-VPU/170105

s z o l g á l t a t á s i i r o d a

I. MELLÉKLET ALKALMAZÁSI ELŐÍRÁS

I. MELLÉKLET ALKALMAZÁSI ELŐÍRÁS

BIZTONSÁGI ADATLAP (1907/2006/EK és a 44/2000. (XII.27.) EüM rendelet szerint)

Vízesés friss illata. A készítmény felhasználása: Konnektorba csatlakoztatható elektromos légfrissítı utántöltı

HCV Ab PLUS x 50. HCV Ab PLUS CALIBRATORS HCV Ab PLUS QC 34339

BIZTONSÁGI ADATLAP az 1907/2006/EK rendelet II. Melléklet szerint. uszodák, hőtıvizek algásodásának meggátlására

Kleen Flo Tumbler Industries Ltd

CINtec PLUS Cytology Kit

Biztonsági adatlap 1907/2006/EK, 31. cikk szerint

Immunhisztokémia: Előhívó rendszerek, problémák és megoldások

Biztonsági adatlap Azonosító: 2016 az 1907/2006/EK rendelet szerint. Kiadás: Oldalszám: 1/7

MYCOBACTERIUM GORDONAE CULTURE IDENTIFICATION TEST KIZÁRÓLAG EXPORTRA (biomérieux ref / Gen-Probe Cat. No. 2850)

Syphilis. Treponema pallidum (T. pallidum, TP) elleni összes antitest. Elecsys 2010 MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 602

Biztonsági adatlap Azonosító: 1089 az 1907/2006/EK rendelet szerint

Biztonsági adatlap CMA. kalcium- magnézium- acetát. oldat. Kiadás dátuma: június Budapest, Szent István krt. 2. fax:

Brait légfrissítı aeroszol

Fehér kapszula, felső részén fekete OGT 918, alsó részén fekete 100 jelzéssel.

VÍZMINİSÉGI TÁJÉKOZTATÓ

az 1907/2006/EK (REACH)rendelet szerinti BIZTONSÁGI ADATLAP

Reagens vízvizsgálatra. AMMÓNIA tabletta reagens (CombiPack ) Ammónia No.1 reagens ( )

MESTER Erőmester Szerelési Ragasztó

PLASMA HUMANUM COAGMENTATUM CONDITUMQUE AD EXSTIGUENDUM VIRUM. Humán plazma, kevert, vírus-inaktiválás céljából kezelt

Biztonsági adatlap Azonosító: 0657 az 1907/2006/EK rendelet szerint

Betegtájékoztató PAMITOR 15 MG/ML KONCENTRÁTUM OLDATOS INFÚZIÓHOZ. Pamitor 15 mg / ml koncentrátum oldatos infúzióhoz dinátrium-pamidronát

Felületfizikai és felületkémiai labor M épület földszint

Biztonsági adatlap. Clever White Attack. 4. SZAKASZ: Elsısegélynyújtási intézkedések. 5. SZAKASZ: Tőzvédelmi intézkedések

ph mérés indikátorokkal

1/12 oldal Készült a 453/2010/EK irányelvei alapján Felülvizsgálva: Kiadva: A KEVERÉK ÉS A VÁLLALKOZÁS AZONOSÍTÁSA:

Epidemiológia II. Epidemiológiai vizsgálatok

TÁJÉKOZTATÓ ÜZEMI MÉRÉSTECHNIKA NITRÁT NISE SC / NITRATAX SC ÚJ! Tökéletesen pontos. Nitrát érzékelők UV és ISE technológiával

Minıségellenırzés a laboratóriumi akkreditáció szemszögébıl

DULCOMETER DMT Mérési adat: ph / redoxpotenciál / hőmérséklet

1/2009 kiadás TOP KLÓR OX

TERMÉKBIZTONSÁGI ADATLAP A 453/2010/EK rendelettel módosított 1907/2006/EK rendelettel összhangban

Átírás:

RubellaIgGELISA PKS medac Magyar 0123 136PKSVPU/010512

GYÁRTÓ medac Gesellschaft für klinische Spezialpräparate mbh Fehlandtstraße 3 D20354 Hamburg FORGALMAZÓ medac Gesellschaft für klinische Spezialpräparate mbh Geschäftseinheit Diagnostika Theaterstraße 6 D22880 Wedel Tel.: ++49/ 4103/ 8006351 Fax: ++49/ 4103/ 8006359 RENDELÉSI CÍM Tel.: ++49/ 4103/ 8006111 Fax: ++49/ 4103/ 8006113 136PKSVPU/010512

RubellaIgGELISA PKS medac Enzim immunoassay Pipettázási Kontroll Rendszerrel, rubeola vírus elleni IgG antitestek kvantitatív kimutatására szérumból és liquorból (CSF) Katalógusszám: 136PKS KIZÁRÓLAG IN VITRO DIAGNOSZTIKAI HASZNÁLATRA BEVEZETÉS A rubeolát okozó patogén a rubeola vírus (németül measles), mely a Togaviridae családba és a Rubivirus nemzetségbe tartozik. A rubeola vírusnak egyszeres szálú RNS genomja van és egyetlen szerotípusa létezik. A rubeola leggyakrabban gyerekkorban jelentkezik és rendszerint enyhe lefolyású. A betegséget apró pontos exanthema jellemzi és lymphadenosis kíséri. A terhesség elsı trimeszterében a rubeola fetális fertızést okozhat, mely irreverzibilis embryofoetalis károsodást eredményezhet. Megfelelı vakcinával a rubeola vírus ellen megfelelı immunitás érhetı el. Immunizálással a beoltottak 95 %ában megfelelı védı immunitás érhetı el. Különbözı módszerek állnak rendelkezésre a vakcinálás sikerének, illetve az immunitás állapotának mérésére. A RubellaIgGELISA PKS medac kvantitatív teszttel a rubeola vírusspecifikus IgG antitestek gyorsan és könnyen kimutathatóak. A WHO standardokkal szemben kalibrált teszt kontrollokkal meghatározható a specifikus antirubeola vírus IgG titer. A hemagglutináció gátlással (HAI) kapott alacsony titerek ellenırizhetıek a specifikus IgG antitestek kvantitatív kimutatásával. A teszt szintén alkalmas a patogénspecifikus intrathecal antitest szintézis kimutatására a specifikus antitest index szérumcsf párra történı kiszámolásával. 136PKSVPU/010512 1

A TESZT ELVE A lemezt rubeola vírus antigénnel vonták be. A mintában levı rubeola vírusspecifikus antitestek szelektíven kötıdnek az antigénhez. A peroxidázzal konjugált antihumán IgG antitestek kötıdnek a rubeola virus specifikus antitestekhez (P = peroxidáz). Inkubáció a TMBszubsztráttal (*). A reakciót kénsavval állítjuk le. Az abszorbanciát fotométerrel olvassuk le. A teszt elınyei A Pipettázási Kontroll Rendszer színváltozással lehetıvé teszi az összes pipettázási lépés vizuális monitorozását. A törhetı csíkok lehetıvé teszik a teszt gazdaságos felhasználását. Alkalmas az automatizálásra nyílt rendszerő ELISA készülékeken. Egy pontos kvantifikáció, kalibrációs görbe nem szükséges. A liquor vizsgálathoz nem kell további kalibrációs görbe. Alkalmas az immun státusz és a patogénspecifikus antitest index párhuzamos kimutatására. 136PKSVPU/010512 2

A KIT TARTALMA Katalógusszám: 136PKS 1. MTP Mikrotiterlemez: 12 x 8 lyuk (jelölés: RUG, kerettel és szárítószerrel, vákuum zárású alumínium zacskóban), törhetı, U alakú, rubeola vírus antigénnel bevont, BSA és ph indikátor, felhasználásra kész. 2. CONTROL Negatív kontroll: 1 fiola, 1,5 ml, humán szérum, felhasználásra kész, BSAt, fenolt, ProClin TM 300at és gentamycin szulfátot tartalmaz. 3. CONTROL + Pozitív kontroll: 1 fiola, 1,5 ml, humán szérum, felhasználásra kész, BSAt, fenolt, ProClin TM 300at és gentamycin szulfátot tartalmaz. 4. CAL Kalibrátor: 1 fiola, 1,5 ml, humán szérum, felhasználásra kész, FCSt, BSAt, fenolt, ProClin TM 300at és gentamycin szulfátot tartalmaz. 5. WB Mosó puffer: 1 flakon, 100 ml, PBS/Tween (10x), ph 7,2 7,4, ProClin TM 300 tartalmú. 6. VIRDIL Mintahígító: 1 flakon, 110 ml, PBS/Tween/BSA, ph 7,2 7,4, felhasználásra kész, ProClin TM 300 tartalmú. 7. CON Konjugátum: 3 fiola, mindegyik 4,5 ml, kecske antihumán IgG, HRPvel konjugált, felhasználásra kész, zöld színő, BSAt, fenolt, ProClin TM 300at és gentamycin szulfátot tartalmaz. 8. TMB TMBszubsztrát: 1 flakon, 10 ml, felhasználásra kész. 9. STOP Leállító oldat: 2 flakon, mindegyik 11 ml, 0,5 M kénsav (H 2 SO 4 ), felhasználásra kész. 136PKSVPU/010512 3

1. TÁROLÁS ÉS STABILITÁS Anyag/Reagens Állapot Tárolás Stabilitás Teszt kit bontatlan 2...8 C lejárati idı végéig Mikrotiterlemez bontott 2...8 C zacskóban 6 hét szárítószerrel Kontrollok/ bontott 2...8 C 6 hét kalibrátor Mosó puffer hígított 2...8 C 6 hét Minta hígító bontott 2...8 C 6 hét Konjugátum bontott 2...8 C 6 hét TMBszubsztrát bontott 2...8 C 6 hét Leállító oldat bontott 2...8 C lejárati idı végéig Ne használjuk a reagenseket a lejárati idın túl. 2. SZÜKSÉGES DE A KITBEN NEM SZÁLLÍTOTT REAGENSEK ÉS ANYAGOK 2.1. Víz injekcióhoz (H 2 O újradesztillált). Ioncserélt víz zavarhatja a mérési eljárást. 2.2. Állítható mikropipetták. 2.3. Tiszta üveg, vagy mőanyag edények a mosópuffer és a minták hígításához. 2.4. Mikrotiterlemezek mosására alkalmas készülék (pl. többcsatornás pipetta, vagy ELISA mosó). 2.5. Inkubátor, 37 C. 2.6. Mikrotiterlemez leolvasó 450 nm és 620 650 nm szőrıkkel. 3. A REAGENSEK ELİKÉSZÍTÉSE A mérés megkezdése elıtt az összes komponenst szobahımérsékletőre kell hozni. Határozzuk meg a felhasználandó lyukak számát. 3.1. Mikrotiterlemez Az alumínium tasakot mindig szorosan zárjuk vissza a szárítószerrel együtt. A tárolási körülmények és a stabilitási adatok az 1. pont alatt találhatóak. 136PKSVPU/010512 4

Megjegyzés: A mikrotiter lemez lyukai halvány zöld színőek. A lyukakban idınként elıforduló zöldesbarna elszínezıdést a gyártási eljárás okozza, a teszt teljesítıképességét nem befolyásolja. 3.2. Mosó puffer Keverjünk össze egy térfogategység mosó puffert (10x) kilenc egység injekció minıségő vízzel (pl. 50 ml mosó puffert (10x) 450 ml vízzel). 10 ml hígított mosó puffer szükséges nyolc lyukhoz. A mosó pufferben (10x) elıforduló kristályokat fel kell oldani melegítéssel (max. 37 C) és/vagy szobahımérsékleten keveréssel. Soha ne keverjük a specifikus reagenseket (mikrotiterlemez, kontrollok, konjugátum, kalibrátor) a különbözı gyártási számú kitekben. Ezzel szemben a minta hígító, a mosó puffer, a TMBszubsztrát és a leállító oldat általában cserélhetı az összes medac virológiai ELISA kitben. Más gyártó reagensei nem használhatóak. Érvényes és reprodukálható eredmények csak a használati utasítás pontos betartása esetén nyerhetık. 4. MINTÁK 4.1. A teszt szérum és CSF minták vizsgálatára alkalmas (a CSF kimutatáshoz ld. a 8. pontot). A beteg minták 7 napig tárolhatóak 28 ºCon. Hosszabb tárolás 20 C alatt. Kerüljük az ismételt felolvasztást és fagyasztást. 4.2. A szérumok elıkezelése pl. inaktiválás, nem szükséges. A szérumok nem lehetnek mikroorganizmusokkal szennyezettek, illetve nem tartalmazhatnak vörös vérsejteket. 4.3. A szérum mintákat 1:200szorosra kell hígítani mintahígítóval. Kezdeti hígításnak 1:50 hígítást javaslunk (pl. 10 µl szérum + 490 µl mintahígító). A további 1:4 hígításokhoz készítsük elı a szükséges térfogatokat. A mérési tartományon kívül esı minták késıbb tovább hígíthatóak. 4.4. A szérumcsf pár diagnosztikai vizsgálata részletesen 8. pontban van leírva. 136PKSVPU/010512 5

5.A. AZ ELJÁRÁS MENETE 5.1. Vágjuk el az alumínium tasakot a simítózár felett és vegyük ki a szükséges számú lyukakat (ld. 3.1.). A lyukak felhasználásra készek, elımosás nem szükséges. 5.2. Az A1 lyukat hagyjuk üresen a háttérnek (ld. 6.A.). Adjunk 50 µl negatív, pozitív kontrollt, illetve hígított mintát egyegy lyukba és 50 µl kalibrátort két lyukba. A minták pipettázása után (semleges, vagy lúgos folyadék) a lyukak színe kékre változik. A színváltozás hiánya egy lyukban jelzi, hogy a minta, illetve kontroll hozzáadása nem történt meg. Ha szükséges, a mikrotiter lemezt nedves kamrában 60 percig 2 8 Con tarthatjuk felhasználás elıtt. 5.3. Inkubáljuk a lemezt 60 percig (± 5 perc) 37 o Con (± 1 C) nedves kamrában, vagy fóliával lezárva. 5.4. Az inkubáció után mossuk a lemezt háromszor 200 µl mosópufferrel lyukanként. Ügyeljünk, hogy minden lyuk töltve legyen. A mosás után csapkodjuk a lemezt szőrıpapírra. Ne engedjük a lyukakat kiszáradni! Azonnal használjuk fel! 5.5. Adjuk a konjugátumot (zöld színő) minden lyukba (kivétel A1). 50 µl konjugátumot pipettázzunk a lyukakba, ha manuálisan dolgozzuk fel. Kérjük figyeljen: Ha automata készülékkel dolgozunk, 60 µl konjugátumot pipettázzunk minden lyukba, a készülék inkubációs kamrájában elıforduló nagyobb párolgás miatt. A teszt automatán való alkalmazhatóságát a kiértékelés során megerısítették. Mindazonáltal javasoljuk, hogy a laborban mőködı automatával való kompatibilitást ellenırizzük. 5.6. Inkubáljuk újra 60 percig (± 5 perc) 37 o Con (± 1 C) nedves kamrában, vagy fóliával lezárva. 5.7. Az inkubáció után mossuk a lemezt újra (ld. 5.4.). 5.8. Adjunk 50 µl TMBszubsztrát oldatot minden lyukba (A1be is) és inkubáljuk 30 percig (± 2 perc) 37 o Con (± 1 C) nedves kamrában, vagy fóliával lezárva, sötétben. A pozitív minták színe kékre változik. 5.9. Állítsuk le a reakciót 100 µl leállító oldattal minden lyukba (A1be is). A pozitív minták színe sárgára változik. 136PKSVPU/010512 6

A fotometrikus leolvasás elıtt tisztítsuk meg a mikrotiter lemez alját és ügyeljünk arra, hogy ne legyenek levegıbuborékok a lyukakban. A leolvasást a leállító reagens hozzáadása után 15 percen belül el kell végezni. 5.B. AZ ELJÁRÁS MENETE TÁBLÁZATOSAN Neg. kontroll Poz. kontroll Kalibrátor Minta Háttér (A1) Negatív kontroll 50 µl Pozitív kontroll 50 µl Kalibrátor 50 µl Minta 50 µl Inkubáljuk 60 percig 37 Con, majd mossuk 3 x 200 µl mosóoldattal Konjugátum 50/60 µl*) 50/60 µl*) 50/60 µl*) 50/60 µl*) Inkubáljuk 60 percig 37 Con, majd mossuk 3 x 200 µl mosóoldattal TMBszubsztrát 50 µl 50 µl 50 µl 50 µl 50 µl Inkubáljuk 30 percig 37 Con sötétben Leállító oldat 100 µl 100 µl 100 µl 100 µl 100 µl Fotometrikus leolvasás 450 nmen (ref. 620 650 nm) *) manuális/automatikus eljárás (ld. 5.5.) 6.A. AZ EREDMÉNYEK SZÁMOLÁSA (VALIDITÁS) Olvassuk le az OD értékeket 450 nmen (referencia hullámhossz 620 650 nm). Vonjuk ki a háttér OD értékét (A1 lyuk) az összes OD értékbıl. Gyártási tétel specifikus adatok A kitben szállított gyártási tétel specifikus adatokat tartalmazó lap az alábbi információkat tartalmazza: gyártási tétel specifikus kalibrációs görbe a görbe a, b és c paraméterei a kalibrátor névleges OD értéke a kalibrátor alacsony OD értéke a pozitív kontroll névleges koncentráció tartománya (IU/ml) 136PKSVPU/010512 7

Érvényességi kritériumok A negatív kontroll átlagos OD értéke < 0.150 legyen. A pozitív kontroll egységértékének a gyártási tétel specifikus lapon feltüntetett névleges tartományon belül kell lennie. A kalibrátor átlagos OD értékének a gyártási tétel specifikus lapon feltüntetett alacsony OD limit felett kell lennie. A szérumcsf párra vonatkozó további érvényességi kritériumok a 8. pontban találhatóak. Ismételje meg a futtatást, ha az eredmények nem felelnek meg a specifikációnak. Az eredmények korrigálása A pozitív kontroll és a minták mért OD értékeit korrigálni kell ez alábbiak szerint: Kalibrátor névleges OD értéke OD korr = x OD mért Kalibrátor mért OD értéke Az eredmények mennyiségi értékelése A korrigált OD értéknek megfelelı koncentrációk IU/mlben leolvashatóak a gyártási tétel specifikus kalibrációs görbérıl (ld. gyártási tétel specifikus lap). Alternatívaként, a koncentráció az alábbi képlettel számolható: a Koncentráció[IU/ml] = b/ 1 OD corrected C A legtöbb új ELISA leolvasónál lehetséges a képlet programozása, így lehetıvé válik az automatikus adatfeldolgozás. A mérési tartomány 5 200 IU/mlig terjed. A tartomány alá esı mintákat < 5 IU/mlnek, a felettieket > 200 IU/mlnak értelmezzük. Ezeket az értékeket nem szabad extrapolálni. Az immunitás cutoff értéke 15 IU/ml. Szürke zóna = cutoff ± 20 % (= 12 18 IU/ml) 136PKSVPU/010512 8

6.B. AZ EREDMÉNYEK ÉRTELMEZÉSE/A MÓDSZER KORLÁTAI A szürke zóna alá esı egységértékő mintákat NEGATÍVnak tekintjük immunitásra vonatkozóan. A szürke zónába esı egységértékő minták KÉTESnek tekintendık. Mivel a védı immunitás nem adható meg kétesnek, ezeket a mintákat újra kell vizsgálni 14 nappal késıbb friss mintával együtt, a titer változás meghatározása érdekében. A szürke zóna fölé esı egységértékő mintákat POZITÍVnak tekintjük immunitásra vonatkozóan. Az eredményeket mindig a klinikai adatokkal és további diagnosztikus paraméterekkel összhangban kell értelmezni. Nagyon nagy koncentrációjú lipidek a pozitív mintákban befolyásolhatják a mért antitest koncentrációkat. A hemoglobin, vagy bilirubin nagy koncentrációja nem befolyásolja az eredményeket. 7. TELJESÍTİKÉPESSÉG Az alábbi teljesítıképességi adatokat határoztuk meg a diagnosztikus kiértékelés során. 7.A. ÉRZÉKENYSÉG ÉS FAJLAGOSSÁG 350 szérumot vizsgáltak a RubellaIgGELISA PKS medac kittel, ebbıl 100 negatív volt rubeola hemagglutináció gátlás vizsgálattal és 250 pozitív volt a referencia ELISAval. Az eredményeket az alábbi táblázatban mutatjuk be. Referencia teszt negatív pozitív RubellaIgGELISA PKS negatív 99 0 medac pozitív 1* 250 * A minta kétesnek adódott. Érzékenység = 100 % Fajlagosság = 99,00 % Pozitív prediktív érték: 99,60 % Negatív prediktív érték: 100 % 136PKSVPU/010512 9

7.B. PONTOSSÁG Minta Teszten belüli szórás Minta Tesztek közötti szórás átlag SD CV (%) n átlag SD CV (%) n OD IU NC 0,029 0,002 7 22 PC 13,6 0,8 6 13 PC 0,338 0,014 4 22 N 2 17,9 1,5 8 13 Cal 0,952 0,046 5 22 N 3 90,4 11,3 13 13 N 1 1,764 0,070 4 22 N 4 145,5 18,7 13 13 NC = negatív kontroll; PC = pozitív kontroll; Cal = kalibrátor 8. CSF DIAGNOSZTIKAI VIZSGÁLATA A rubeolaspecifikus antitest szintézis kimutatása a központi idegrendszerben (CNS) a CSF diagnosztikai vizsgálata során az akut fertızés differenciál diagnosztikájának alapvetı része, úgymint a CNSt is magában foglaló krónikus körülmények során. A gombákon és baktériumokon kívül számos vírus felelıs a CNSt is magában foglaló fertızésekért. Továbbá, krónikus betegségekben, mint például szklerózis multiplexben a kanyaró, a rubeola és/vagy a varicellazoster antitestek nagy valószínőséggel fordultak elı az esetek 95 %ában. A rubeolaspecifikus intrathecal antitest szintézis meghatározása az antitest index (AI) számolásával történik, Reiber szerint (Reiber 1987, 1999). Az AI számolásához az alábbi feltételeknek kell teljesülniük: az albumin kvociens (Q alb ) becslése a véragy gát mőködésének megállapításához és a határérték számításához magas IgG arányú betegekben (Q tot > Q lim ) a totál IgG kvociens becslése (Q tot ) 8.1. MINTÁK 8.1.1. A teszt alkalmas szérumcsf pár vizsgálatára. 8.1.2. A szérum és CSF minták elıkezelése pl. inaktiválás, nem szükséges. A minták nem lehetnek mikroorganizmusokkal szennyezettek, illetve nem tartalmazhatnak vörös vérsejteket. 8.1.3. Szérum A szerostátusz meghatározásához szükséges 1:200 hígításon felül a szérumot 1:1500ra hígítjuk mintahígítóval. Az AI kiszámolásához olyan hígítást kell választani, hogy az IU értéke a mérési tartomaányon belülre essen (ld. 6.A. és 8.2.). Ha mindkét hígítás IU értéke az 5 200 IU mérési tartományba esik, az 1500as hígítás IU értékét válasszuk az AI számoláshoz. Ha mindkét hígítás IU értéke 200 felett van, a mintát tovább kell hígítani. 136PKSVPU/010512 10

8.1.4. CSF A CSF mintát standard hígításúra, 1:5 arányban hígítjuk mintahígítóval. Ha a mért antitest koncentráció kívül esik a mérési tartományon, a mintát tovább kell hígítani, illetve újravizsgálni kisebb hígításban (pl. 1:2). A szérum és CSF mintákat mindig párhuzamosan kell vizsgálni ugyanabban a teszt futamban (ugyanez érvényes az ismételt vizsgálatokra is)! 8.2. AZ ELJÁRÁS MENETE A rubeola IgG meghatározás szérumcsf párban az 5A pontban leírtak szerint történik. 8.3. A TOTÁL IgG ÉS AZ ALBUMIN KONCENTRÁCIÓ MEGHATÁROZÁSA A rubeolaspecifikus IgG meghatározáson felül minden minta párban a totál IgG és az albumin koncentrációt is meg kell határozni a szérumban és a CSFben. 8.4. AZ EREDMÉNYEK SZÁMOLÁSA (VALIDITÁS) Validitás A 6.A. pontban specifikált érvényességi kritériumokat kell alkalmazni. Ismételje meg a vizsgálatot, ha az eredmények nem felelnek meg a specifikációnak. Az alábbi pontok szintén alkalmazandóak CSF vizsgálathoz: Az 1:200as hígítású szérumban mért 5nél kisebb IU érték szeronegativitásnak tekintendı. Ezekben az esetekben az AI nem határozható meg. Nagyon ritka esetekben szeronegatív betegeknek lehetnek kimutatható intrathecal antitestjei, a rubeolával összefüggı encephalopathie miatt. A mérési tartomány CSFre 2 200 IU. az olyan 1:5 hígítású CSF mintákat, melyek pozitív szerostástuszú betegekbıl származnak és a mérési tartomány alá esnek, újra kell vizsgálni kisebb hígításban (maximum 1:2). 136PKSVPU/010512 11

Kiértékelés Az IU értékek számolását ld. a 6.A. pontban. A patogénspecifikus IgG kvociens számolása (Q spec ). Q spec = IU CSF x CSF hígítása IU szérum x szérum hígítása Az antitest index számolása: A patogénspecifikus indexet az alábbi képlettel számoljuk: 1. AI = Q spec /Q tot (Q tot < Q lim esetén) 2. AI = Q spec /Q lim (Q tot > Q lim esetén) 2 6 3. Q = 0,93 Q + 6 10 1,7 10 lim alb 3 8.5. AZ EREDMÉNYEK ÉRTELMEZÉSE A 0,6 1,3 közé esı AI értékek a normál tartományban vannak.. Az AI > 1,3 és 1,5 értékek határértékek. A patológikus tartomány: AI > 1,5. Az AI < 0,6 értékek analitikai hibák és nem értelmezhetıek. A CSF diagnosztikus kritériumai akut aktív CNS betegségre vonatkozóan: emelkedett sejtszám és emelkedett albumin kvociens. Ezek a CSF áramlás akadályoztatására utalnak valamilyen gyulladás következtében. Az emelkedett antitest index nem megbízható bizonyítéka a fertızı CNS betegség akut fázisának, mert az antitestek, még az intratecálisak is, hosszú ideig perzisztálhatnak és mert polispecifikus CNSintrinsic antitest szintézis is elıfordulhat. Bizonyos esetekben javasolt, hogy az AI értékben szignifikáns változást keressünk egy második szérumcsf mintapár vizsgálatával. Ebbıl a célból további mintavétel szükséges a klinikai körülményeknek megfelelı idı után. 136PKSVPU/010512 12

ÁLTALÁNOS KEZELÉSI TANÁCSOK A keresztszennyezés elkerülése érdekében ne cseréljük fel a fiolákat és kupakjaikat. A reagenseket használat után azonnal zárjuk le a párolgás és a mikrobiológiai szennyezés elkerülése érdekében. Használat után a reagenseket az elıírt körülmények között kell tárolni az eltarthatóság garantálása érdekében. Használat után az összes komponenst az eredeti csomagolásban tároljuk a más kitekbıl, illetve gyártásból származó reagensekkel történı felcserélés elkerülése érdekében (ld. 3. pont alatt is). EGÉSZSÉGÜGYI ÉS BIZTONSÁGI INFORMÁCIÓK A helyi biztonsági és egészségügyi szabályokat be kell tartani. Az emberi eredető reagenseket megvizsgálták és negatívnak találták HBsAgra, HIV1/2 és HCV elleni antitestekre. Mindazonáltal erısen ajánlott, hogy ezeket, illetve az állati eredető reagenseket (ld. a kit tartalmánál) potenciálisan fertızıként kezeljük és az összes szükséges elıvigyázatossággal használjuk. MEGSEMMISÍTÉSI SZEMPONTOK A vegyi anyagok és preparátumok maradékai általánosságban veszélyes hulladéknak tekintendık. Az ilyen hulladékok megsemmisítése a nemzetközi és a helyi törvények és elıírások szerint szabályozottak. Vegyük fel a kapcsolatot a helyi hatóságokkal, illetve hulladékkezelı cégekkel, melyek segítséget tudnak nyújtani a veszélyes hulladékok megsemmisítésében. A kibocsátás dátuma: 01.05.2012 136PKSVPU/010512 13

IRODALOM Enders, G.: Röteln. Fortschr. Klin. Virol. München, 157 177 (1986). Hermann, K.L.: Available Rubella serological tests. Rev. Infect. Dis. 7, 108112 (1985). Reiber, H. and Felgenhauer, K.: Protein transfer at the blood cerebrospinal fluid barrier and the quantitation of the humoral immune response within the central nervous system., Clin Chim Acta, 319 328 (1987). Reiber, H.: Liquordiagnostik, in: Klinische Neurologie, Berlit, P. (HRSG), Springer Verlag, Heidelberg, 148 177 (1999). Pustowoit, B., Hofmann, J. und Trauer, H.: Rötelnvirus, in: Diagnostische Bibliothek, Bd. 1, Virusdiagnostik, Porstmann, T. (Hrsg.), Blackwell WissenschaftsVerlag, 499515 (1996). Selb, B.: Rötelnvirus, in: Medizinische Virusdiagnostik, Selb, B. (Hrsg.), Umschau Verlag, 198202 (1992). Wolinsky, J.: Rubella, in: Virology, 2. Edition, Field, B. N., Kipe, D. M. et al. (Eds.), Raven Press, Ltd., New York (1990). 136PKSVPU/010512 14