Her2 fehérje overexpresszió gyomorrákokban: Hazai tapasztalatok



Hasonló dokumentumok
meghatározásának jelentősége

E4 A Gyermekkori szervezett lakossági emlőszűrések hatása az emlőműtétek

Kvantitatív immunhisztokémia a patológiában

RÉSZLETES PROGRAM szeptember 26., csütörtök

Digitalizált immunhisztokémiai reakciók automatikus kiértékelése a Pannoramic TM Platform-mal

20 éves a Mamma Klinika

CONFIRM anti-estrogen Receptor (ER) (SP1) Rabbit Monoclonal Primary Antibody

II./3.3.2 fejezet:. A daganatok célzott kezelése

Primer emlőcarcinomák és metasztázisaik immunfenotípusának vizsgálata

A pre-analitika szerepe a patológiai minták. Dr. Lotz Gábor Semmelweis Egyetem, II. sz. Patológiai Intézet

Immunhisztokémiai vizsgálatok hematoxylinnal festett keneteken

A tüdő adenocarcinomák szubklasszifikációja. Dr. Szőke János Molekuláris Patológiai Osztály Budapest, 2008 december 5.

HER2 immunhisztokémiai vizsgálatok minôségellenôrzése

Platina bázisú kemoterápia hatása különböző biomarkerek expressziójára tüdőrákokban

Az emlőrák patológiai diagnosztikája, feldolgozása és kórszövettani leletezése. Szakmai útmutatás a III. emlőrák konszenzuskonferencia alapján.

Paradigmaváltás a daganatok patológiai diagnosztikájában: molekuláris alapú differenciáldiagnosztika, prognosztikus és prediktív patológia

Vakcinák / 9. Immunológiai és Biotechnológiai Intézet PTE KK

METODIKAI ÖSSZEHASONLÍTÓ ELEMZÉSEK AZ EMLİRÁK HER-2 ÉS İRSZEM NYIROKCSOMÓ DIAGNOSZTIKÁJÁBAN

Jelátviteli uatk és daganatképződés

Tumor immunológia

A proteomika új tudománya és alkalmazása a rákdiagnosztikában

Emlődaganatok gyógyszeres kezelés. Dr.Tóth Judit DE OEC Onkológiai Tanszék

A HER2-negatív emlőrák kezelési stratégiái

Füle Tibor. Humán papillómavírus a méhnyakrákokban és a környező szövetekben. Témavezető: Dr. Kovalszky Ilona

Tumorbiológia Dr. Tóvári József (Országos Onkológiai Intézet)

A gastrointestinalis malignus betegségek kockázata vénás thromboemboliat követően kórházunk beteganyagában

Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetése az Európai Unió új társadalmi kihívásainak a Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni Egyetemen

DIGITÁLIS MIKROSZKÓPIA AZ EMÉSZTŐRENDSZERI SZÖVETI

Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban

Az Oxidatív stressz hatása a PIBF receptor alegységek összeszerelődésére.

EGFR-tirozinkináz-inhibitorok alkalmazása tüdőrákban: szenzitivitás és rezisztencia

Az Egészségügyi Minisztérium módszertani levele Immunhisztokémiai és immuncitokémiai módszerek alkalmazása a patológiában

Szinoviális szarkómák patogenezisében szerepet játszó szignálutak jellemzése szöveti multiblokk technika alkalmazásával

Mit tud a tüdő-citológia nyújtani a klinikus igényeinek?

A Szerzői Jogi Szakértő Testület szakvéleményei

Engedélyszám: /2011-EAHUF Verziószám: Analitika követelménymodul szóbeli vizsgafeladatai

ONCOCYTÁS S PAJZSMIRIGY TUMOROK DIFFERENCIÁLDIAGNOSZTIK LDIAGNOSZTIKÁJA. Péter Ilona. ziuma Budapest 2008.

A 22C3 PD-L1 tesztek értékelése intézetünkben. Dr. László Terézia PTE ÁOK Patológiai Intézet, Pécs

Diagnosztikus problémák és prognosztikai faktorok prosztatarákban

MULTIDROG REZISZTENCIA IN VIVO KIMUTATÁSA PETEFÉSZEK TUMOROKBAN MOLEKULÁRIS LEKÉPEZÉSSEL

A vesebiopszia standard laboratóriumi vizsgálata. Daru Krisztián, Dr. Iványi Béla SZTE ÁOK Pathologiai Intézet Szeged

Lymphomák molekuláris patológiai diagnosztikája

Claudin 2, 3 és 4 expressziója a coeliakiás gyermekek proximalis és distalis duodenumában

67. Pathologus Kongresszus

Fejezetek a klinikai onkológiából

Carcinoma. Görög: karkinos - rák, az állat lábai a tumor infiltráló nyúlványaira utalnak

Emlődaganatok célzott kezelése

A tüdőcitológia jelentősége a tüdődaganatok neoadjuváns kezelésének tervezésében

Dr. Losonczy György egyetemi tanár Pulmonológiai Klinika Semmelweis Egyetem Klinikai onkológia speciális kurzus

Immunhisztokémia: Előhívó rendszerek, problémák és megoldások

III./5. GIST. Bevezetés. A fejezet felépítése. A.) Panaszok. B.) Anamnézis. Pápai Zsuzsanna

Az agyi áttétek ellátása

Diagnózis és prognózis

A világossejtes vesedaganatok diagnosztikájának és kezelésének finanszírozási protokollja

Minőségirányítás az orvosi laboratóriumi medicina területén hazánkban, tanúsítás vagy akkreditálás? Dr. Hetyésy Katalin Témakörök

GRADING. Az emlő invazív és in situ carcinomái. Kulka Janina Semmelweis Egyetem II. sz. Pathologiai Intézet

A fej-nyaki betegségek radiológiai diagnosztikája II. ( nyaki lágyrészek, garat, gége )

A transzgénikus (GM) fajták fogyasztásának élelmiszer-biztonsági kockázatai

Pajzsmirigy. Hatásmechanizmusok, melyeket felhasználunk a radiofarmakonokkal történı tumordiagnosztikában I.

Daganatos betegek között végzett felmérés az onkológiai ellátás helyzetéről, az ellátás kockázatának megismeréséről

Xenobiotikum transzporterek vizsgálata humán keratinocitákban és bőrben

SENTINEL NYIROKCSOMÓ SZCINTIGRÁFIA EMLŐRÁKBAN- MÓDSZERTANI ÚTMUTATÓ

Az allergiás reakció

Jegyzőkönyv. dr. Kozsurek Márk. A CART peptid a gerincvelői szintű nociceptív információfeldolgozásban szerepet játszó neuronális hálózatokban

Metasztatikus HER2+ emlőrák kezelése: pertuzumab-trasztuzumab és docetaxel kombinációval szerzett tapasztalataink esetismertetés kapcsán

GEK. heveny szakban fájdalomf. ACUT MASTITIS A bacterib. a ductusokon keresztül l jutnak az. acteriumok. secretum

Debreceni Egyetem Általános Orvostudományi Kar Patológiai Intézet


Daganatok sebészi szemmel

Fej-nyaki daganatok prognosztikai patológiai diagnosztikája

Allergiás reakciók molekuláris mechanizmusa

Mérési jegyzőkönyv. Coulter számláló és áramlási citometria. 1. mérés: Semmelweis Egyetem, Elméleti Orvostudományi Központ Biofizika laboratórium

Immunhisztokémiai módszerek

10. Genomika 2. Microarrayek és típusaik

Ababés afagyöngyszerepe atumorokmegelőzésében, gyógyításában. Pusztai Árpád, Stanley W B Ewen és Ian Pryme

Chapter 10 Hungarian Summary. Az onkológiai gyógyszerfejlesztés eredetileg DNS-károsodást indukáló vegyületekre

70. Patológus Kongresszus. a Magyar Patológusok Társasága és a Nemzetközi Pathologiai Akadémia (IAP) Magyar Divíziója rendezésében

Két kevéssé ismert humán ABCG fehérje expressziója és funkcionális vizsgálata: ABCG1 és ABCG4 jellemzése

HER2 ETŰD kérdőív kiértékelése, minőségbiztosítási tapasztalatok

Tumorprogresszió és előrejelzése. Statisztikák. Statisztika - USA Megbetegedés / 10 leggyakoribb (2012)

PLAZMASEJT OKOZTA BETEGSÉGEK, MYELOMA MULTIPLEX, LYMPHOMÁK

EGYETEMI DOKTORI (Ph.D) TÉZISEK

L 249/20 Az Európai Unió Hivatalos Lapja

A.) Biopsziás mintavétel lehetőségei és a biopsziás anyagok kezelésével kapcsolatos tudnivalók.

Immunmoduláns terápia az autoimmun betegségek kezelésében. Prof. Dr. Zeher Margit DE OEC Belgyógyászati Intézet III. sz. Belgyógyászati Klinika

Az ABCG2 multidrog transzporter fehérje szerkezetének és működésének vizsgálata

TUDOMÁNYOS ÉLETMÓDTANÁCSOK IV. ÉVFOLYAM 3. SZÁM

Glikohisztokémiai és mikrovaszkularizációs prognosztikai faktorok tüd rákban. Doktori (Ph.D) értekezés tézisei. Készítette:

(11) Lajstromszám: E (13) T2 EURÓPAI SZABADALOM SZÖVEGÉNEK FORDÍTÁSA

KÖZVETLEN BRÜSSZELI FORRÁS PÁLYÁZATI TÁJÉKOZTATÓ

ÁLTALÁNOS KÓRBONCTAN ÉS KÓRSZÖVETTAN SZAKMAKÓD: 5400 Patológia Szakma főcsoport 54 PATOLÓGIA

A nem világossejtes vesedaganatok diagnosztikájának és kezelésének finanszírozási protokollja

2014. május 23-án (PÉNTEK) 8:30-18:15-ig.

Kulka Janina: Prediktív és prognosztikai vizsgálatok emlőkarcinómában

A rectum daganatok diagnosztikájának és kezelésének finanszírozási protokollja

Betegtájékoztató AVASTIN 25 MG/ML KONCENTRÁTUM OLDATOS INFÚZIÓHOZ. Avastin 25 mg/ml koncentrátum oldatos infúzióhoz Bevacizumab

Ellenanyagok kimutatása diagnosztikai/prognosztikai célból

A csontvelői eredetű haem-és lymphangiogén endothel progenitor sejtek szerepe tüdőrákokban. Doktori tézisek. Dr. Bogos Krisztina

Vastagbéltükrözéskolonoszkópia

Genomiális eltérések és génexpressszió közötti kapcsolat vizsgálata, melanomák metasztázisképzésére jellemző genetikai markerek kutatása

Átírás:

Her2 fehérje overexpresszió gyomorrákokban: Hazai tapasztalatok Dr. Lotz Gábor, Dr. Szirtes Ildikó, Dr. Kiss András Prof. Tímár József, Prof. Kulka Janina Semmelweis Egyetem II. Pathologiai Intézet

- Exophyticus (kiemelkedő, polipoid) - Exulcerált (felhányt szélű fekély ) - Szövettanilag: intestinális (bél) típusú gyomor adenocarcinoma

Linitis plastica: diffúzan infiltráló szövettanilag: diffúz, pecsétgyűrűsejtes PAS

Carl-McGrath et al: Gastric adenocarcinoma: epidemiology, pathology and pathogenesis (Cancer Therapy Vol 5, 877-894, 2007 )

A Her2 státusz vizsgálatának jelentősége c-erbb2 vagy Her2/neu : gén: 17-es kromószómán, EGF-R család tagja fehérje: 185 kd, transzmembrán, tirozinkináz aktivitású növekedési faktor receptor szerepe: sejtproliferáció, migráció, metastasis a Her2 státusz tekintetében leginkább vizsgált invazív emlőrákok kb. 20%-ában mutatható ki overexpressziója, melynek hátterében többnyire a Her2 gén amplifikációja (felsokszorozódása) áll kimutatásának jelentősége: célzott, molekuláris biológiai alapokon nyugvó anti-her2 terápia (Herceptin ) emlő- és áttétes gyomorrák esetén

Efficacy: OS by HER2 status Subgroup N Median OS (months) Hazard ratio 95% CI All 584 11.1 vs 13.8 0.74 0.60, 0.91 Pre-planned analysis IHC0/FISH+ IHC1+/FISH+ IHC2+/FISH+ IHC3+/FISH+ IHC3+/FISH- 61 70 159 256 15 7.2 vs 10.2 vs 10.8 vs 12.3 vs 17.7 vs 10.6 8.7 12.3 17.9 17.5 0.92 1.24 0.75 0.58 0.83 0.48, 1.76 0.70, 2.20 0.51, 1.11 0.41, 0.81 0.20, 3.38 Exploratory analysis IHC0 or 1+/FISH+ 131 8.7 vs 10.0 1.07 0.70, 1.62 IHC2+/FISH+ or IHC3+ 446 11.8 vs 16.0 0.65 0.51, 0.83 0.2 0.4 0.6 1 2 3 4 5 Favors H Risk ratio Favors no H Rüschoff et al., 2010.

Ajánlott HER2 diagnosztikai algoritmus Szövetminta IHC 0 1+ 2+ 3+ FISH + Herceptin terápia Herceptin EU SmPC: http://www.ema.europa.eu/humandocs/pdfs/epar/herceptin/emea-combinedh278en.pdf.

Her2 értékelési kritériumok gyomorrákban Score Sebészi minta festődési mintázat Biopsziás minta festődési mintázat Fokozott Her2 expresszió értékelés 0 Nincs specifikus festődés vagy bármilyen membránfestődés a tumorsejtek kevesebb mint 10%-ában Nincs festődés illetve nincs membránfestődés egyetlen tumorsejtben sem Negatív 1+ Halvány alig észlelhető, vagy részleges membránfestődés a tumorsejtek legalább 10%-ában Tumorsejtcsoportok halvány alig észlelhető, vagy részleges membránfestődése, ezen sejtek százalékos arányától függetlenül Negatív 2+ Gyenge / közepes fokú komplett, basolateralis v. lateralis membránfestődés a tumorsejtek legalább 10%- ában Tumorsejtcsoportok gyenge közepes fokú, komplett, basolateralis v. lateralis membránfestődése, ezen sejtek százalékos arányától függetlenül Kérdéses 3+ Erős komplett, basolateralis v. lateralis membránfestődés a tumorsejtek legalább 10%- ában Tumorsejtcsoportok erős, komplett, basolateralis v. lateralis membránfestődése, ezen sejtek százalékos arányától függetlenül Pozitív Herceptin EU SmPC: http://www.ema.europa.eu/humandocs/pdfs/epar/ Herceptin/emea-combined-h278en.pdf. Images: http://www.herceptin.net/portal/eipf/pb/herceptin/trastuzumab/methodologies

A gyomorrákok Her2 diagnosztikájának egyedi jellemzői Mintagyűjtés Többszörös biopszia, legalább 5, de inkább 6 8 ajánlott (ld. tumor heterogenitás!) Rezekciós preparátum: intesztinális típusú ráknál negatív Her2 IHC esetén egy további blokkból is ajánlott a Her2 vizsgálat Szöveti jellemzők A tumoron belüli Her2 expressziós heterogenitás igen nagy (kis Her2 pozitív fókuszok) Az egész minta különösen gondos áttekintése szükséges IHC és FISH esetén Diagnosztikai algoritmus Hasonló az emlőrákhoz Elsődlegesen IHC Her2-pozitív: IHC 3+ vagy IHC 2+/FISH+ FISH+ de IHC 0/1+ tumor: negatív! Átfutási idő Rövidebb átfutási idő lehet szükséges (a gyomorrákok általában gyorsabban progrediálnak, mint az emlőcarcinomák) Értékelési kritériumok Erős bazolaterális, laterális vagy komplett membránfestődés a tumorsejtek 10%- ában: pozitív (IHC) Nincs százalékosan meghatározott alsó határértéke a pozitivitásnak biopsziákban

Jan Trost Jorgensen, Oncology 2010;78:26 33 A közölt tanulmányokban a Her2-t túlexpresszáló gyomorrákok aránya 8,2% és 53,4% között változik

Jan Trost Jorgensen, Oncology 2010;78:26 33 A közölt tanulmányokban a Her2-t túlexpresszáló gyomorrákok aránya 8,2% és 53,4% között változik Her2 amplifikáció a gyomorrákokban: 16% és 27,1% között változik a közölt adatok szerint

A Semmelweis Egyetem II. Pathologiai Intézetének összehasonlító antitestvizsgálata Anyag és módszer Esetszám: 77 beteg a) 20 gyomorbiopsziás minta, 57 gyomorrezekciós preparátum b) 50 intesztinalis típusú adenocarcinoma 17 pecsétgyűrűsejtes adenocarcinoma 3 kevert típusú (kétkomponensű: intesztinális+diffúz) 6 anaplasztikus carcinoma 1 sarcomatoid carcinoma Szöveti mikrosorozat (Tissue MicroArray; TMA) blokkok - 4 db, 3-5 µm vastag metszetek készítése

A Semmelweis Egyetem II. Pathologiai Intézetének összehasonlító antitestvizsgálata Anyag és módszer Her2 diagnosztikai eszközök: a) Her2 IHC primer antitestek: - Spring Bioscience anti-c-erbb-2/her-2 (antitest klón: SP3) Nyúl monoklonális antitest a receptor extracelluláris doménje ellen - Dako HercepTest Nyúl poliklonális antitest intracitoplazmatikus domén ellen - Ventana PATHWAY anti-her-2-neu (antitest klón: 4B5) Nyúl monoklonális antitest intracitoplazmatikus domén ellen b) Her2 FISH (referencia): ZytoLight HER2/CEN17 Dual Color Probe Kit (ZytoVision) Her2/neu gén: zöld fluoreszcencia 17-es kromoszóma centromer: narancs-vörös fluoreszcencia

A Semmelweis Egyetem II. Pathologiai Intézetének összehasonlító antitestvizsgálata Eredmények Mindhárom primer antitest értékelhető eredményeket adott a TMA metszeteken a HercepTest gyári protokollját módosítani kellett a megfelelő festődés érdekében SP3 HercepTest 4B5

A Semmelweis Egyetem II. Pathologiai Intézetének összehasonlító antitestvizsgálata Eredmények IHC score Összes eset Her2 IHC (77 / 100%) Intestinalis típusú adenocarcinoma (50 / 65%) Sigillocellularis adenocarcinoma (17 / 22%) Kétkomponensű: intestinalis + diffúz (3 / 4%) Anaplasticus cc, sarcomatoid cc (7 / 9%) SP3 H.T. 4B5 SP3 H.T. 4B5 SP3 H.T. 4B5 SP3 H.T. 4B5 SP3 H.T. 4B5 0 51% 66% 62% 26% 38% 36% 17% 21% 17% 1,3% - 2,6% 6,4% 7,8% 6,4% 1+ 27% 17% 22% 19% 13% 14% 5% 1,3% 5% - 2,6% - 2,6% - 2,6% 2+ 13% 6,5% 2,6% 12% 5% 2,6% - - - 1,3% - - - 1,3% 3+ 9% 10,5% 13% 8% 9% 12% - - - 1,3% 1,3% 1,3% - - 0/1+ 78% 83% 84% 45% 51% 50% 22% 22% 22% 1,3% 2,6% 2,6% 9% 7,8% 9% 2/3+ 22% 17% 16% 20% 14% 15% - - - 2,6% 1,3% 1,3% - 1,3% -

A Semmelweis Egyetem II. Pathologiai Intézetének összehasonlító antitestvizsgálata Eredmények IHC score Összes eset Her2 IHC (77 / 100%) Nem-amplifikált, nem-poliszómiás FISH (42 / 54,5%) Nem-amplifikált, poliszómiás FISH (25 / 32,5%) Amplifikált FISH (10 / 13%) SP3 H.T. 4B5 SP3 H.T. 4B5 SP3 H.T. 4B5 SP3 H.T. 4B5 0 39 51 48 26 32 30 12 19 18 1 - - 1+ 21 13 17 12 8 11 9 4 6-1 - 2+ 10 5 2 4 2 1 4 2 1 2 1-3+ 7 8 10 - - - - - - 7 8 10

IHC score Összes eset Her2 IHC (77 / 100%) SP3 H.T. 4B5 0 51% 66% 62% 1+ 27% 17% 22% 2+ 13% 6,5% 2,6% 3+ 9% 10,5% 13% 0/1+ 78% 83% 84% 2/3+ 22% 17% 16%

A Semmelweis Egyetem II. Pathologiai Intézetének összehasonlító antitestvizsgálata Eredmények Szenzitivitás és specificitás (a 2+ esetek pozitívnak vételével) - Spring SP3: Szenzitivitás: 90% ; Specificitás: 88% - HercepTest: Szenzitivitás: 90% ; Specificitás: 94% - Pathway 4B5: Szenzitivitás: 100% ; Specificitás: 97% Konkordancia (Minthogy a 4B5 bizonyult a legszenzitívebb és legspecifikusabb antitestnek, ezért a FISH, mint referenciamódszer mellett az SP3 és a HercepTest esetében a 4B5-höz viszonyított konkordanciát is kiszámoltuk) - SP3 κ= 0,60 (FISH-el) és κ= 0,53 (4B5-el) - HercepTest κ= 0,78 (FISH-el) és κ= 0,76 (4B5-el) - 4B5 κ= 0,89 (FISH-el) 1,00-0,81 kitűnő 0,80-0,61 jó 0,60-0,41 közepes 0,40-0,21 gyenge 0,20-0,00 rossz

4B5: 3+ 4B5: 3+ H.T.: 2+! H.T.: 2+! SP3: 3+ SP3: 3+ FISH: Ampl.

4B5: 3+ H.T.: 1+ SP3: 0+ FISH: fokális és alacsony szintű ampl.

4B5: 3+ H.T.: 3+ SP3: 3+ FISH: Ampl.

Következtetések Mindhárom antitest alkalmas a rutin diagnosztikai felhasználásra - Az SP3 használatával több eset kap 2+ besorolást, ami többlet FISH/SISH/CISH igényt és költséget jelent - a HercepTest érzékenyebb a minták preanalitikai eredetű (pl. fixálásbeli) eltéréseire, technikailag nehezebb megfelelően beállítani, de az általánosan elterjedt olcsóbb antitestekhez képest jelentős diagnosztikai előnyökkel bír. Sajnos költségeit tekintve nem várható hazai elterjedése -A Ventana PATHWAY 4B5 bizonyult összehasonlításunkban a legszenzitívebb és legspecifikusabb antitestnek. Emellett alkalmazásával drámaian lecsökken a kérdéses besorolású (2+ score) esetek száma, és így az ISH igény. Rutin diagnosztikai beállítása egyszerű. Automatizált felhasználáshoz ajánlott kiszerelésben forgalmazza a gyártó, de kézi alkalmazása is lehetséges.

A S.E. II. Pathologiai Intézet vezetőinek és munkatársainak, külön köszönettel: Prof. Schaff Zsuzsa Dr. Győrffy Hajnalka Pekár Zoltánné Magdi Somogyi Éva Samodai Erika Vörös Gyuláné Ilcsi Gregor Viktória részére Köszönetnyilvánítás TÁMOP-4.2.1/B-09/1 KMR 2010-0001 TÁMOP-4.2.2/B-10/1-2010-0013 Reagensellátás és a logisztikai háttér biztosításáért a Roche / Ventana munkatársainak, különösen: Dr. Pavuk Anita, Dr. Nagy András, Bíró Orsolya és Dr. Kollár György részére