Neuropeptidek funkcióinak vizsgálata

Hasonló dokumentumok
a. Nyugalmi potenciál b. Transzport proteinek c. Akciós potenciál. Nyugalmi potenciál. 3 tényező határozza meg:

Egy idegsejt működése. a. Nyugalmi potenciál b. Transzport proteinek c. Akciós potenciál

Egy idegsejt működése

Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetése az Európai Unió új társadalmi kihívásainak a Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni Egyetemen

SZOCIÁLIS VISELKEDÉSEK

Debreceni Egyetem Orvos- és Egészségtudományi Centrum Biofizikai és Sejtbiológiai Intézet

IONCSATORNÁK. I. Szelektivitás és kapuzás. III. Szabályozás enzimek és alegységek által. IV. Akciós potenciál és szinaptikus átvitel

Az ioncsatorna fehérjék szerkezete, működése és szabályozása. A patch-clamp technika

A T sejt receptor (TCR) heterodimer

(1) A T sejtek aktiválása (2) Az ön reaktív T sejtek toleranciája. α lánc. β lánc. V α. V β. C β. C α.

Antiszenz hatás és RNS interferencia (a génexpresszió befolyásolásának régi és legújabb lehetőségei)

a. Szinaptikus jelátvitel b. Receptorok c. Szignál transzdukció neuronokban d. Neuromoduláció. Szinaptikus jelátvitel.

Az idegsejtek kommunikációja. a. Szinaptikus jelátvitel b. Receptorok c. Szignál transzdukció neuronokban d. Neuromoduláció

Gyógyszerészeti neurobiológia. Idegélettan

SZOCIÁLIS VISELKEDÉSEK 2

9. előadás Sejtek közötti kommunikáció

Jelutak. Apoptózis. Apoptózis Bevezetés 2. Külső jelút 3. Belső jelút. apoptózis autofágia nekrózis. Sejtmag. Kondenzálódó sejtmag

NÖVÉNYGENETIKA. Az Agrármérnöki MSc szak tananyagfejlesztése TÁMOP /1/A

Asztroglia Ca 2+ szignál szerepe az Alzheimer kórban FAZEKAS CSILLA LEA NOVEMBER

Apoptózis. 1. Bevezetés 2. Külső jelút 3. Belső jelút

Membránpotenciál, akciós potenciál

Nemszinaptikus receptorok és szubmikronos Ca2+ válaszok: A két-foton lézermikroszkópia felhasználása a farmakológiai vizsgálatokra.

A membránpotenciál. A membránpotenciál mérése

Érzékszervi receptorok

Humán asztrociták. Nagyobb és komplexebb. idegrendszeri fejlődésben jelentős szerepű

Ca 2+ Transients in Astrocyte Fine Processes Occur Via Ca 2+ Influx in the Adult Mouse Hippocampus

A MOTIVÁCIÓ NEUROBIOLÓGIÁJA

Mit tud a genetika. Génterápiás lehetőségek MPS-ben. Dr. Varga Norbert

TÉMAKÖRÖK. Ősi RNS világ BEVEZETÉS. RNS-ek tradicionális szerepben

Fehérje expressziós rendszerek. Gyógyszerészi Biotechnológia

RNS-ek. 1. Az ősi RNS Világ: - az élet hajnalán. 2. Egy már ismert RNS Világ: - a fehérjeszintézis ben résztvevő RNS-ek

Receptorok és szignalizációs mechanizmusok

Hamar Péter. RNS világ. Lánczos Kornél Gimnázium, Székesfehérvár, október

A preventív vakcináció lényege :

A kémiai szinapszis (alapok)

KÉSZÍTETTE: BALOGH VERONIKA ELTE IDEGTUDOMÁNY ÉS HUMÁNBIOLÓGIA SZAKIRÁNY MSC 2015/16 II. FÉLÉV

SZAGLÁS 2

A somatomotoros rendszer

Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetése az Európai Unió új társadalmi kihívásainak a Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni Egyetemen

A LÁTÁS BIOFIZIKÁJA AZ EMBERI SZEM GEOMETRIAI OPTIKÁJA. A szem törőközegei. D szem = 63 dioptria, D kornea = 40, D lencse = 15+

Immunológia alapjai. 10. előadás. Komplement rendszer

Molekuláris terápiák

Az akciós potenciál (AP) 2.rész. Szentandrássy Norbert

V. Tanuláselméleti perspektíva. Behaviorizmus

Sejt - kölcsönhatások az idegrendszerben

transzláció DNS RNS Fehérje A fehérjék jelenléte nélkülözhetetlen minden sejt számára: enzimek, szerkezeti fehérjék, transzportfehérjék

Látás. Látás. A környezet érzékelése a látható fény segítségével. A szem a fényérzékelés speciális, páros szerve (érzékszerv).

A sejtmembrán szabályozó szerepe fiziológiás körülmények között és kóros állapotokban

In Situ Hibridizáció a pathologiai diagnosztikában és ami mögötte van.

Viselkedésélettan: tanulás és memória. Zachar Gergely Semmelweis Egyetem, Anatómiai Intézet

FUSARIUM TOXINOK IDEGRENDSZERI HATÁSÁNAK ELEMZÉSE

Az utóbbi két évben több olyan cikk is megjelent amelyben leírták, hogy állatokba juttatva a

-Két fő korlát: - asztrogliák rendkívüli morfológiája -Ca szignálok értelmezési nehézségei

Szívelektrofiziológiai alapjelenségek. Dr. Tóth András 2018

Biológiai módszerek alkalmazása környezeti hatások okozta terhelések kimutatására

Etológia Alap, BSc. A viselkedés mechanizmusa

Immunológia alapjai előadás. A humorális immunválasz formái és lefolyása: extrafollikuláris reakció és

Sejtek közötti kommunikáció:

Az Oxidatív stressz hatása a PIBF receptor alegységek összeszerelődésére.

A sejtek közöti kommunikáció formái. BsC II. Sejtélettani alapok Dr. Fodor János

Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetése az Európai Unió új társadalmi kihívásainak a Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni Egyetemen

Nyugalmi és akciós potenciál

2. A jelutak komponensei. 1. Egy tipikus jelösvény sémája 2. Ligandok 3. Receptorok 4. Intracelluláris jelfehérjék

Immunológia alapjai. 16. előadás. Komplement rendszer

Jelutak. 2. A jelutak komponensei Egy tipikus jelösvény sémája. 2. Ligandok 3. Receptorok 4. Intracelluláris jelfehérjék

A LÁTÁS BIOFIZIKÁJA AZ EMBERI SZEM GEOMETRIAI OPTIKÁJA FOTORECEPTOROK A LÁTÁS MOLEKULÁRIS MECHANIZMUSA A SZÍNLÁTÁS ELMÉLETE ELEKTRORETINOGRAM

Az anti-apoptózis mechanizmus vizsgálata agyi ischaemia/hypoxia modellekben

1b. Fehérje transzport

Limbikus rendszer Tanulás, memória

A kutyafélék összehasonlító neurobiológiája- Szenzoros képességek

Jegyzőkönyv. dr. Kozsurek Márk. A CART peptid a gerincvelői szintű nociceptív információfeldolgozásban szerepet játszó neuronális hálózatokban

DER (Felületén riboszómák találhatók) Feladata a biológiai fehérjeszintézis Riboszómák. Az endoplazmatikus membránrendszer. A kódszótár.

Az agy betegségeinek molekuláris biológiája. 1. Prion betegség 2. Trinukleotid ripít betegségek 3. ALS 4. Parkinson kór 5.

3. Sejtalkotó molekulák III. Fehérjék, enzimműködés, fehérjeszintézis (transzkripció, transzláció, poszt szintetikus módosítások)

IONCSATORNÁK. Osztályozás töltéshordozók szerint: pozitív töltésű ion: Na+, K+, Ca2+ negatív töltésű ion: Cl-, HCO3-

In vivo szövetanalízis. Különös tekintettel a biolumineszcens és fluoreszcens képalkotási eljárásokra

Dózis-válasz görbe A dózis válasz kapcsolat ábrázolása a legáltalánosabb módja annak, hogy bemutassunk eredményeket a tudományban vagy a klinikai

Természettudományi Kutatóközpont, Magyar Tudományos Akadémia (MTA-TTK) Agyi Képalkotó Központ (AKK)

ÖSSZ-TARTALOM 1. Az alapok - 1. előadás 2. A jelutak komponensei 1. előadás 3. Főbb jelutak 2. előadás

Immunológia alapjai előadás. Az immunológiai felismerés molekuláris összetevői.

OTKA ZÁRÓJELENTÉS

Jelutak ÖSSZ TARTALOM. Jelutak. 1. a sejtkommunikáció alapjai

A viselkedés mechanizmusa Probléma-megoldás és tanulási folyamatok. Miklósi Ádám Pongrácz Péter

3. Sejtalkotó molekulák III.

Dr. Péczely László Zoltán. A Grastyán örökség: A játék neurobiológiája

A génterápia genetikai anyag bejuttatatása diszfunkcionálisan működő sejtekbe abból a célból, hogy a hibát kijavítsuk.

Élettan. előadás tárgykód: bf1c1b10 ELTE TTK, fizika BSc félév: 2015/2016., I. időpont: csütörtök, 8:15 9:45

Sáry Gyula SZTE ÁOK Élettani Intézet

NÖVÉNYGENETIKA. Az Agrármérnöki MSc szak tananyagfejlesztése TÁMOP /1/A

Elektrofiziológiai alapjelenségek 1. Dr. Tóth András

Immunológia alapjai előadás MHC. szerkezete és genetikája, és az immunológiai felismerésben játszott szerepe. Antigén bemutatás.

Az agykéreg és az agykérgi aktivitás mérése

Neuronok előkészítése funkcionális vizsgálatokra. Az alkalmazható technikák előnyei és hátrányai. Neuronok izolálása I

Immunológia alapjai előadás. Az immunológiai felismerés molekuláris összetevői

Drogok és addikciók különböző kultúrákban

ÖSSZ-TARTALOM. 1. Az alapok - 1. előadás 2. A jelutak komponensei 1. előadás 3. Főbb jelutak 2. előadás 4. Idegi kommunikáció 3.

Az ember és a gerinces állatok jó része 5 érzékszervvel fogja fel a környező világ eseményeit. AZ EMBER ÉRZÉKSZERVEI

ZSÍRSAVAK OXIDÁCIÓJA. FRANZ KNOOP német biokémikus írta le először a mechanizmusát. R C ~S KoA. a, R-COOH + ATP + KoA R C ~S KoA + AMP + PP i

Membránpotenciál. Nyugalmi membránpotenciál. Akciós potenciál

Tanulás és memória. A tanulás és a memória formái, agyi lokalizációjuk és celluláris mechanizmusok. Pszichofiziológia ea.

Átírás:

Neuropeptidek funkcióinak vizsgálata

Transzgén modellek a neuropeptid funkciók vizsgálatára transzgén modellek nagyon alkalmasak a neuropeptidek tanulmányozására, mivel maga a peptid közvetlenül kódolt a genomban (ellentétben a klasszikus transzmitterekkel, amelyek enzimatikusan szintetizálódnak) neuropeptidet alul- vagy túlexpresszáló egértörzsekkel jól tanulmányozhatóak a neuropeptidek hatásai pl. NPY és CRF K.O. állatok: nincs durva elváltozás redundancia a peptiderg rendszerekben neuropeptid gén K.O. állatok problémásak lehetnek: a génkiütéssel a prekurzor peptidtől szabadulunk meg, amelyből a processzálással többféle aktív peptid is létrejöhet ha a prekurzorból csak egyféle aktív peptid lesz, akkor nincs probléma (csak ez a ritkább eset...) neuropeptid túlexpresszáltatás modellezheti valamely peptidreceptor specifikus farmakon (jövőbeli gyógyszermolekula) hatását neuropeptid recetorok deléciói értékes adatokat adnak

Optogenetika

Optogenetika Francis Crick (1979): a nagy kihívás a neurobiológiában az, hogy hogyan kontrolláljunk egy sejttípust az agyban anélkül, hogy más sejttípusokat befolyásolnánk. Elektróddal nehéz eltalálni a kívánt sejtet, a drogok pedig lassan hatnak. A megoldás a fény lehet. 2005: mikrobiális opszin gén beültetése emlős neuronba, neuron serkentése fénnyel Nat Methods. 2011 Jan;8(1):26-9. doi: 10.1038/nmeth.f.324.

NATURE vol.465 6 May 2010 Optogenetikai eszközök

Channelrhodopsin-2 Clamydomas reinhardtii maximális aktiváció: kék fény (470 nm) deaktivációs időállandó ~ 12 ms 30-50 Hz-el hajtható, de fast-spiking interneuronok akár 200 Hz-el is nem-szelektív kation csatorna (Na, K, Ca) elektrokémiai gradiens szabja meg, hogy mi megy át rajta konduktancia femtos nagyságrendű (30-300 fs), 10-100 ion megy át egy nyitásnál TM3 domén szabja meg a nyitási kinetikát illetve a nyitott állapot hosszát mutánsok: H134R pontmutáció: 2X konduktancia nátriumra, de a deaktivációs időállandó megnő (=csak kisebb frekvenciával hajtható ) ChR2-L132C (CatCH): 1,6X konduktancia kalciumra + csökkent deaktivációs időállandó 3X konduktancia kalciumra C128S, C128A, C128T: a nyitási idő 100-1000X egy pulzusra is hosszan nyitva marad (akár percekig tartó küszöb alatti aktiváció) zöld fénnyel (542 nm) kikapcsolható E123T, E123A ( ChETA mutáció ): nyitási idő rövid (kisebb az áram is), de akár 200 Hz-el is hajtható

Halorhodopsin Natronomonas pharaonis halorhodopsin (NpHR) aktiváció sárga fényre (589 nm) klorid pumpa (1 kloridion/ciklus; EC IC) hiperpolarizál megfelelő szintű expresszió lényeges (csak 1 klorid/ciklus) 30 Hz-el hajtható maximálisan vagy akár percekig tartó folyamatos gátlás váltható ki vele (deszenzitizációja viszonylag lassú) 5-10 mv mértékű hiperpolarizáció, ettől még nem feltétlenül hallgat el a sejt teljesen enphr3.0 verzió: távoli vörös tartományba eső fénnyel is bekapcsolható (680 nm)

Behav Brain Res. 2013 Oct 15;255:64-74. Archaerhodopsin-3 Halorubrum sodomense protonpumpa az általa kiváltott ph-változás azonban önszabályozó és nem nagyobb, mint amekkora pl. channelrhodopsin aktivációkor vagy normál ioncsatorna működéskor történik 900 pa-t is meghaladó hiperpolarizáló áram teljesen elhhalgató neuronok szabadon mozgó állatban is in vivo 520 560 nm (zöld-sárga) fénnyel aktiválható

Cre rekombináz I. P1 bakteriofág enzim, 38 kda két konszenzus szekvencia (loxp) közötti rekombinációt katalizálja bármilyen sejtes környezetben, kofaktorok nélkül lox P 34 bázispár 8 bp mag szekvencia középen (aszimmetrikus, orientációt ad) kétoldalt 13-13 bázispár palindrom szekvencia mindkét palindrom szekvenciához egy Cre rekombináz köt, tetramer formáció, ahol a két loxp egymás mellé kerül

Cre rekombináz II. előidézheti a két loxp szekvencia közti rész: kivágódását ( KO állat; cisz irányú loxp) inverzióját (cisz irányú loxp) egy szekvencia inszerciója egy másikba (transz loxp) transzlokáció két kromoszóma között (transz loxp)

Cre-loxP rendszer

Feltételes expresszió adott sejtpopulációban, adott helyen AAV DIO ChR2-mCherry (adeno-associated virus-double-floxed Inverted Open reading frame-chr2-mcherry) konstrukt kettő, egymással inkompatibilis loxp variáns határolja az antisense irányú Chr2-mCherry (fluoreszcens marker protein) fúziós szekvenciát Cre rekombináz jelenlétében sztochasztikus rekombináció ChR2-mCherry átfordul sense irányba erős promoter (EF1α-elongation factor 1α) AAV hátrány: a két ITR között csak max. 5 kb lehet, de ebben a konstruktban nem kell polia stop kazettával foglalni a kevés helyet az antisense irány miatt

Egy másik expressziós rendszer: tet-off Behav Brain Res. 2013 Oct 15;255:64-74.

A membránba való eljutás elősegítése kell egy adott szintű expresszió ahhoz, hogy a fénnyel serknetést/gátlást idézzünk elő a neuronon több rodopszin a membránban nagyobb (foto)áram halorhodopsin-nál volt sokáig probléma, hogy nem jutott el kellő mennyiségben a mebránba beépülés elősegítése után (membrán traffic szignál beépítése) akár 100 mv hiperpolarizáció is előidézhető (enphr3.0 )

Az optogenetikai eszközök expressziójának és membrán traffic-jának elősegítése

Transz-szinaptikus génaktiváció tracer-cre segítségével a mikrobiális opszinok kifejeződnek nem csak a dendritekben, hanem az axonokban is egy adott sejtcsoportot megcélozhatunk genetikai alapon: kell egy adott csoportra specifikusan működő gén (ez lehet promoter a különböző konstrukciókhoz) de!: a genetikailag egyező sejtek kapcsolataikban el fognak térni optogenetikailag kontrollálhatunk nem csak egy A B projekciót, hanem egy olyan sejttípust is, ami tényleg vetít A-ból B-be transzcelluláris traffic: A helyre injektálunk Cre-dependens vírust, itt feltételesen expresszálódhat az adott mikrobiális opszin B helyre olyan vírus, amelyben Cre rekombináz van fúzionáltatva valami tracer molekulával (WGA-wheat germ agglutinin vagy TTCtetanus toxin fragment C) a tracer-cre fehérje elmászik az A hely neuronjaihoz és ott kifejeződik az opszin anterográd (WGA) vagy retrográd (TTC) egyaránt lehet az irány

Transz-szinaptikus génaktiváció tracer-cre segítségével

Small interfering RNS (sirns) gén-expresszió gátlása emlős sejtekben, interferon válasz nélkül bármely gén célpont lehet, az mrns expressziója több, mint 90 %-al csökkenhet sirns-ek: plazmid-alapú vektorok, amelyek elősegítik az sirns transzkripcióját az U6 RNS polimeráz által 21-25 bázispár hosszúak RNS interferencia: evolúciósan konzervált antivirális mechanizmus akkor indul el, ha kívülről egy kétszálú RNS (dsrns) kerül be a szervezetbe DsRNS az RNáz III enzim (Dicer) hasítja sirns-ekké sirns aztán része lesz az RNS-indukált csendesítő komplexnek (RISC) RISC szétválasztja az sirns két szálát és a cél mrns hasad

sirns alkalmazása in vivo I.

sirns alkalmazása in vivo II.

Farmakológia, anyagbeadás vér-agy gáton való átjutás nehézségei centrális (agykamrai, icv) beadás kell vagy intranazális bevitel probléma: releváns, fiziológiás dózis, féleletidő (uptake mechanizmusok, peptidáz aktivitás, kémia szerkezet jelentősége) kevés adat van arra, hogy beadás után mennyi a peptid féléletideje, de valószínűleg rövid specifikus, neuropeptid-receptor specifikus, apró molekulájú, vér-agy gáton átjutó agonisták/antagonisták hiánya azért van kivétel: galanin 3-as típusú receptor (GAL3) antagonista, penetrál a vér-agy gáton, anxiolitikus és antidepresszáns hatású általános megfigyelés: a peptid receptor agonisták vagy maga a peptid beadva általában kivált valamilyen változást, míg az antagonista általában nem bazális peptid felszabadulás jellemzően alacsony, hiszen erősen aktivált neuronok szabadítanak fel jelentős mennyiségű peptidet, így alap aktivitású neuronok mellett az antagonisták nem hatásosak valószínű, hogy a neuropeptid hatások jobban megfoghatóak patológiás, illletve averzív állapotokban (pl. stressz) történő vizsgálatokkal

Intranazális neuropeptid bevitel I. a bevitt drog/peptid direkt kapcsolatba kerül a szaglóhámmal és egyben áthalad a légzőhámon is maximális hatékonyságú bejutás a központi idegrendszerbe rágcsálók: fiz. sóban oldják fel az anyagot és 3-10 μl-es cseppeket juttatnak az orrba, miközben az állat hanyatt fekszik non-invazív anyagbevitel, nem kell altatás problémák: az anyagnak először át kell mennie a légzőhámon, majd a vomeronazális szerven, mire odaér az orrüregben posterior helyzető szaglóhámhoz közben felszívódás lehet a vérbe, a tüdőbe és/vagy nyirokcsomókba vagy a vomeronazális szervbe az orrüregből az anyag az arcüregbe kerülhet illetve a nyelőcsőbe/gyomorba peptidázok jelenléte az orrnyálkahártyában EC és IC is az orrtól távoli agyterületekhez csak kisebb eséllyel jut el a peptid

Intranazális neuropeptid bevitel II.

Intranazális neuropeptid bevitel III. Oxitocin spray az új csodaszer férfiak hűségesebbek tőle kötődés nő a partner irányába kompetíció gyengül, együttműködés erősödik anxiolitikus hatás: könyebb beszélni nyilvánosság előtt altalában a szociális szorongás csökken egy kis probléma: az alanyok 10 %-a agresszívabb lett tőle

Mikrodialízis I. a perfúziós sebesség alacsony (<2 μl/perc), az időbeli felbontás kicsi (~ 10 perc) és függ a detektáló módszer felbontásától ( minimum mintamennyiség) gyors folyamatokat tehát nem lehet vele követni gyorsabb módszer, pl. voltammetria kell (anyag koncentrációja a dializátumban)/(anyag EC koncentrációja) /= ~ 0,4 (peptidekre jellemzően csak ~ 0,05)

Mikrodialízis II. dialízis membrán: féligáteresztő általában 20 kda alatt enged át, peptidek vizsgálatánál 100 kda alatt

Liposzómákba csomagolt neuropeptidek beadása

Szaporin-konjugátumok I. http://www.google.com/patents/us7097835 http://www.atsbio.com/catalog/toxins/toxins.html Saponaria officinalis (szappanfű) szaporin: riboszóma toxin hátrány: csak 10-14 nap alatt öli meg a sejtet

Szaporin-konjugátumok II.

Receptor-ligand rendszerek I. kémiai genetika optogenetika hátrányai: ált. invazív beavatkozást követel (pl. száloptika implantációja) nagy terület aktivitását nehéz befolyásolni hosszú időtartamú (pl. órák) serkentés/gátlás nehézkes kémiai genetika: valamilyen receptor/ioncsatorna van expresszáltatva a membránban, definiált neuronpopuláción szelektív ligand a receptor aktivációjához hosszan tartó hatások, ligand beadásának módjától függően akár nagy területen DREADDs: designer receptors exclusively activated by designer drugs az expresszáltatott receptor és a ligand is mesterséges RASSLs: receptors activated solely by synthetis ligands mutáció egy normál receptornál, ami így már nem köti az endogén ligandját, csak a mesterségest pl. KOR mutáció, ami után nem köti a dinorfint, csak a mesterséges ligandot

Receptor-ligand rendszerek II. kémiai genetika

Receptor-ligand rendszerek III. kémiai genetika

Viselkedési tesztek I. Üveggolyó-elásási teszt (Marble-burying test) http://www.har.mrc.ac.uk/services/phenotyping/behavioural-and-cognitive-platform/marble-burying-test-mbt szorongás mérése egérben 9-20 üveggolyó elhelyezése a ketrecben, több sorban, egymástól egyenlő távolságban 5 cm vastag alom a ketrecben, enyhén lenyomva, hogy sima legyen a felszíne egeret betesszük, 30-45 percig figyeljük, hogy mennyi golyót ás el benzodiazepinek és különböző antidepresszánsok beadása az elásást gátolja, de bizonyos antipszichotikumok is, amelyek pedig nem anxiolitikus hatásúk előbbiek alapján felmerült, hogy az üveggolyók nem jelentenek kellően averzív stimulust

Viselkedési tesztek II. Stressz-indukált hipertermia http://okat.web.fc2.com/page02_01_5.html együtt tartott egerek, egymás után megmérjük a rektális hőmérsékletet az utolsó egérnél nagyobb lesz, mint az elsőnél a hipertermia kiváltható valamilyen stresszt okozó beavatkozással, drog adásával stb. is standard teszt: injekció adása, aztán 60 perc múlva hőmérséklet mérése (T1), majd ez után 10-15 perccel ismét (T2) a stressz-indukált hipertermia a T2-T1 különbség hímekben és hőstényekben hasonló mértékű és hasonló a farmakológiai profilja is lokomóciót figyelembe kell venni (hőt termel)

Viselkedési tesztek III. Pavlovi félelmi kondícionálás érzelmi memória vizsgálata averzív inger (feltétlen inger; pl. rövid áramütés) asszociálva valamilyen semleges ingerrel (feltételes inger) egy adott időintervallumon belül a feltételes inger összekapcsolható valamilyen hangulattal (hangszín vagy fény) vagy valamilyen kontextusba helyezhető (adott környezeti inger szaglási, vizuális vagy taktilis) a társítás után a teszteléskor a feltételes ingert adják és a félelmi reakciót a lefagyás alapján számszerűsítik teszt ismétlése adott idő elteltével: memória-retenció mértékére következtethetünk a félelmi memórianyom létröjöttéhez GlUR1-tartalmú AMPA receptoroknak kell kihelyeződniük a neuronális membránokba, ha ez akadályozott, nincs tanulás a félelmi reakció fokozatosan kioltható, ha a feltételes ingert többször megismételjük, de a büntetés elmarad a félelmi reakciót kiváltó memórianyom nem egyszerűen kitörlődik, hanem új tanulási folyamat megy végbe és új memórianyom keletkezik a félelmi memórianyom később is spontán előjöhet illetve a hangulat -i inger újból előhívhatja ( PTSD: poszt-traumás stressz)

Viselkedési tesztek IV. Pavlovi félelmi kondícionálás Nature Neuroscience 8, 548-550 (2005) Pavlovian fear conditioning. In auditory fear conditioning, a tone (neutral stimulus) is paired with a foot shock (aversive stimulus). The rat learns that the tone predicts the shock and will show appropriate, biologically relevant fear responses when later presented with the tone, including freezing (the cessation of all movement except for respiration). (b) Fear memory related plasticity requires AMPA receptor insertion in a large proportion of the neuronal network. A 'plasticity tag' (green AMPA receptor) was used to show that GluR1- containing AMPA receptors are inserted at thalamo-amygdala synapses after auditory fear conditioning. A 'plasticity block' (red subunit of AMPA receptor) prevents insertion of GluR1-containing AMPA receptors after auditory fear conditioning and consequently prevents learning of the predictive association between the tone and the foot shock. Approximately 36% of infected neurons in the lateral amygdala showed learning-related plasticity, whereas blocking plasticity in only about 20% of neurons disrupted fear learning.

Viselkedési tesztek V. Morris-féle vízi labirintus (water maze) hippocampalis téri tanulás, memória vizsgálata hippocampus épségéhez kötött a jó teljesítmény a tesztben vízzel teli medence és 1-2 cm-el a vízszint alatt lévő láthatatlan platform (pl. tej a vízbe) a patkány a start platformról indul és a cél platformra kell átúsznia, az ehhez szükséges időt mérik a medence körül fix pozícióban különböző objektumok (tárgyak, a kísérletvezető stb.), amikhez viszonyítva az állat megtanulhatja az útvonalat

Viselkedési tesztek VI. Passzív elkerülési teszt memóriazavarok/csökkent memória mérése közp. idegrendszeri trauma vagy betegségek esetén Methods of Behavior Analysis in Neuroscience, Second Edition (Frontiers in Neuroscience) Ed.: Jerry J. Buccafusco 2009 hippocampus és amygdala egyaránt részt vesz benne feltétele, hogy az állat rendhagyó módon viselkedjen betanításkor az állatot megbüntetik, ha egy teljesen normális viselkedési elemet mutat, pl. átmegy a világos részről a sötétbe (ahol biztonságban érzi magát) ismétlés egy adott idő múlva (néhány perc-napok) memóriafolyamatokra abból következtetnek, hogy az állat mennyi ideig nem ismétli meg a büntetett viselkedést ( memória reteció )