Claudin 2, 3 és 4 expressziója a coeliakiás gyermekek proximalis és distalis duodenumában

Méret: px

Mutatás kezdődik a ... oldaltól:

Download "Claudin 2, 3 és 4 expressziója a coeliakiás gyermekek proximalis és distalis duodenumában"

Diána Fehérné
9 évvel ezelőtt
Látták:

1 Claudin 2, 3 és 4 expressziója a coeliakiás gyermekek proximalis és distalis duodenumában Győrffy Hajnalka dr, Nagy Szakál Dorottya*, Dr. Tőkés Anna-Mária, Arató András dr*, Dezsőfi Antal dr* és Veres Gábor dr* II. sz. Pathológiai Intézet és *I. sz. Gyermekgyógyászati Klinika, Semmelweis Egyetem, Budapest

Tőkés Anna-Mária, Arató András dr*, Dezsőfi Antal dr* és Veres Gábor dr* II.

2 Coeliakia Gluténszenzitív enteropathia koiliakoz (Kappadokiai Aeretheus A.D. 2.sz.) Újkori első leírás: Samuel Gee (1887) Változó prevanlencia (Mo. 0:85) - emelkedő tendencia Glutén a-gliadin (PROLAMIN) Genetikai konstelláció (HLA-DQ2, DQ8 CELAC1) Szöveti transglutamináz Boholyatrophia Malabsorptio Egyéb tünetek, betegségek

) Újkori első leírás: Samuel Gee (1887) Változó prevanlencia (Mo.

3 Coeliakia CLAUDIN-ok (CLDN), mint tight junction (TJ) molekulák szerepe coeliakiában még kevéssé vizsgált Fasano et al (2000): zonulin h Sander et al (2005): gliadin occludin, CLDN3 és 4 és E-cadherin h Drago et al (2006): ZO-1 és occludin down-regulatioja 3 as -nál nagyobb molekulák juthatnak a keringésbe, amelyek két szinten is stimulálják az immunrendszert, ami a TJ súlyos károsodására utal. a2-gliadin (33 as fragmentum) TG által átalakítva T-sejt kötő epitoppal mutat átfedést (főleg DQ2 isoforma esetén). Ez erősíti a helyi gyulladásos reakciót. hordein (árpa), secalin (rozs), avenin (zab) ~ Diagnosis: Biopsia + serologia

E-cadherin h Drago et al (2006): ZO-1 és occludin down-regulatioja 3 as -nál nagyobb molekulák juthatnak a keringésbe, amelyek két szinten is stimulálják az immunrendszert, ami a TJ súlyos

4 Célkitűzés Boholyatrophia mértékének meghatározása (Marsh módszere) A CLDN 2, 3 és 4 expresszió vizsgálata Intraepithelialis CD3+ lymphocyták Összehasonlító elemzés a duodenum proximalis és distalis régiójában

vizsgálata Intraepithelialis CD3+ lymphocyták

5 Betegek, vizsgálati anyagok 33 új coeliakiás gyermek: 20 lány, 13 fiú életkor: 2-17 év, átlag: 6,4 év Endoscopia - biopsia a duodenum bulbusából, ill. a duodeno-jejunalis átmenetből Kontroll: 14 gyermek duodenum mintái

6 Módszer 1. HE festett metszetek Az atrophia súlyosságát a Marsh-féle módszerrel határoztuk meg: GRADE Boholy/Crypta arány 1 2,5-2,0 2 1,0-2,0 3 1,0-0,5 4 < 0,5

7 Módszer 2. Immunhisztokémiai vizsgálat monoclonalis CD3 ellenes antitest: intraepithelialis lymphocyták (IEL) 100 hámsejtre jutó IEL (%) monoclonalis CLDN 2, ill. 4, valamint polyclonalis CLDN3 ellenes antitestekkel: Pontrendszer: 5=81-100%; 4=61-80%; 3=41-60%; 2=21-40%; 1=5-20%; 0=5%> Statisztika Shapiro-Wilk W-teszt Mann-Witney U-teszt

lymphocyták (IEL) 100 hámsejtre jutó IEL (%) monoclonalis CLDN 2, ill.

8 Eredmények 1. CD3+ IEL vizsgálata a. b. CD3 pozitív intraepithelialis lymphocyták: a. coeliakia; b. kontroll (immunhisztokémiai reakció, x100 imm.)

9 Eredmények 1. CD3+ IEL vizsgálata % 70 p=0.026 p= Coeliakia 0 Bulbus Distalis Kontroll

10 Eredmények 2. CLAUDINOK a c e Kontroll b d f Coeliakia CLDN2 CLDN3 CLDN4

11 Eredmények 2. CLAUDINOK 5,00 4,50 4,00 3,50 3,00 2,50 Grade ,00 1,50 1,00 0,50 Grade 4 0,00 Bulbus CLDN 2 Distalis CLDN 2 Bulbus CLDN 3 Distalis CLDN 3 Bulbus CLDN 4 Distalis CLDN 4 Coeliakia Kontroll

2,00 1,50 1,00 0,50 Grade 4 0,00 Bulbus CLDN 2

12 Eredmények 2. CLAUDINOK súlyosság szerint *p=0,02 **p=0,001 ***p=0,001 #p=0,04 ##p=0, $p=0,01 $$p=0,001 &p=0,008 &&p=0, I: Grade1+2+3 II: Grade 4 K: kontroll I. II. K. Prox. duod. CLDN2 I. II. K. Dist. duod. CLDN2 I. II. K. Prox. duod. CLDN3 I. II. K. Dist. duod. CLDN3

##p=0,03 3 2 $p=0,01 $$p=0,001 &p=0,008 &&p=0,004 1 0 I: Grade1+2+3 II:

13 Eredmények összefoglalása A CD3+ IEL száma szignifikánsan emelkedett a CD-s esetekben mindkét topográfiában a kontrollhoz képest. A CLDN2 és 3 expressziója is emelkedett mindkét helyen, sőt a distalis duodenumban fokozottabb fehérje-expressziót találtunk. Marsh szerint: az enyhébb (Grade1+2+3) esetekben CLDN2-nél a distalis duodenumban; súlyosabb (Grade4) atrophiában mindkét helyen statisztikai különbséget kaptunk. A súlyosabb eseteink fokozottabb fehérje-expressziót mutattak, mint az enyhébb formák. CLDN3: hasonló összefüggéseket mutatott. CLDN4: nincs szignifikáns különbség a beteg és egészséges csoport között.

Marsh szerint: az enyhébb (Grade1+2+3) esetekben CLDN2-nél a distalis duodenumban; súlyosabb (Grade4) atrophiában mindkét helyen statisztikai különbséget

14 Megbeszélés A CLDN2 és 3 fokozott expressziója a coeliakiás betegek duodenum mintáiban a TJ súlyos strukturális változásaira utal, amely miatt maga a betegség és annak szöveti jellemzői kialkulnak. Eredményeink az irodalmi adatok egy részével korrelálnak. ÚJDONSÁG: CLDN2-expressziós vizsgálata.

miatt maga a betegség és annak szöveti jellemzői kialkulnak.

15 Megbeszélés A TJ szerkezeti változása a fokozott permeabilitás mellett a sejt-sejt kapcsolatban, ill. a proliferációban is zavarokat idézhet elő. Számos összefüggést tártak/nak fel a sejtkapcsoló-struktúrák és a daganatképződés között, s nem kizárt, hogy a carcinogenesis egy lépcsőjével állunk szemben

Számos összefüggést tártak/nak fel a sejtkapcsoló-struktúrák és a

16 Take home message A mod. Marsh beosztás (CD3+ IEL) reprodukálható. A CLDN2 és 3 expressziója jó mutatónak tűnik a coeliakia vizsgálatában. A mintavétel helye megbízhatóan a distalis duodenum-szakaszon jelölhető ki.

17 Hogyan tovább? Glutén-mentes étrendet követően vizsgálni szeretnénk a claudinok expreszsziójának változását, reverzibilitását.

18 Köszönöm a figyelmet! Külön köszönet illeti: Prof. Dr. Schaff Zsuzsa Szabó Erzsébet Azumah Francisné Dr. Sklánitzné Samodai Erika

Hasonló dokumentumok

Gluténszenzitív enteropátia

Gluténszenzitív enteropátia Dr. Győrffy Hajnalka Semmelweis Egyetem II. Pathológiai Intézet 2010. Siófok Gluténszenzitív enteropátia = coeliakia (CD) κοιλιακος Kappadókiai Aretaeus (I.sz. 2. sz.) Élethosszan