A sejtek szilárd környezete A sejtadhézió és sejt-vándorlás alapjelenségei

Méret: px

Mutatás kezdődik a ... oldaltól:

Download "A sejtek szilárd környezete A sejtadhézió és sejt-vándorlás alapjelenségei"

Nikolett Balla
5 évvel ezelőtt
Látták:

vesznek fel; sejttípustól függetlenül 10 µm Szöveti sejtek

anoikis 10 µm Megfelelı szilárd aljzaton, a sejt-felszín /

1 A sejtek szilárd környezete A sejtadhézió és sejt-vándorlás alapjelenségei Szuszpenzióban a sejtek gömbszerő alakot vesznek fel; sejttípustól függetlenül 10 µm Szöveti sejtek 6-8 óránál hosszabb idıt letapadás nélkül nem élnek túl: anoikis 10 µm Megfelelı szilárd aljzaton, a sejt-felszín / sejttömeg arány nı; A sejtalak az aljzat és sejt sajátságaitól függ

2 Felszíni membrán A sejtfelszín kiterjedését a aktin miozin cytoskeletalis aktivitás és a külsı letapadási pontok szabályozzák sejtmag Felszínt csökkentı húzó erı Aktin kötı fehérjék filopódiumok

Mesterséges sík aljzaton vándorló sejt Felszakadó farok sejtmag Aktin-kötı komplexum Vezetı él (lamellipódium) A vándorlás lehetséges irányai

3 Mesterséges sík aljzaton vándorló sejt Felszakadó farok sejtmag Aktin-kötı komplexum Vezetı él (lamellipódium) A vándorlás lehetséges irányai Differenciális adhézió: a sejt arra vándorol, amerre a letapadási pontok denzitása / aviditása nagyobb; Ha nincs adhéziós gradiens: izometrikusan kiterül

5 Környei Zsuzsanna (MTA KOKI), felvétele

6 Molecular interactions between cell surface molecules and components of the environment In case of molecular matching Signalling processes Initial contact: Cytoskeletal activation; cell contraction Collapse of the leading edge; repulsion or Recruitment of further adhesion molecules; cell attachment Force generation Actin binding complexes Attachment points Attachment foci Cell membrane Extracellular adhesion molecules Solid carrier Cell surface adhesion molecules

7 d= 1 µm d= 5 µm d= 10 µm Grinnel 1983 Phagocytosis Spreading

Cell adhesion Cell to cell-surface Ligand-receptor pairs Cadherin - CAM -

Carbohydrate chains Adhesion regularory ligand-receptor pairs Slit Robo

matrix Ligand-receptor pairs Integrins Fibronectin, Laminin, Collagen

chains basement membrane Germinative zone in the developing forebrain (

8 Cell adhesion Cell to cell-surface Ligand-receptor pairs Cadherin - CAM - Integrin Selectins - Cadherin CAM (Ig-Superfamily) Fibronectin, CAM, Carbohydrate chains Adhesion regularory ligand-receptor pairs Slit Robo Ephrin Ephrin receptor Semaphorins - Neuropilins Cell to extracellular matrix Ligand-receptor pairs Integrins Fibronectin, Laminin, Collagen Fibrin, Willebrand factor, etc Laminin Rs - Laminins Lectins - Carbohydrate chains basement membrane Germinative zone in the developing forebrain ( brain ventricle) Colognato and Yurchenco Neuropil in the adult forebrain Nishida et al., 1988

9 Name Synonyms Distribution Ligands α 1 β 1 Many Collagens, laminins. [5] α 2 β 1 Many Collagens, laminins [5] α 4 β 1 VLA-4 [5] Hematopoietic cells Fibronectin, VCAM-1 [5] α 5 β 1 fibronectin receptor widespread fibronectin [5] and proteinases α 6 β 1 laminin receptor widespread matrix macromolecules laminins α L β 2 LFA-1 [5] T-lymphocytes ICAM-1, ICAM-2 [5] α M β 2 Mac-1, CR3 [5] Neutrophils and monocytes Serum proteins, ICAM-1 [5] α IIb β 3 Platelets [5] fibrinogen, fibronectin [5] α V β 3 vitronectin receptor [6] activated endothelial cells, melanoma, glioblastoma vitronectin [6], fibronectin, fibrinogen, osteopontin, Cyr61 α V β 5 widespread, esp. fibroblasts, epithelial cells vitronectin and adenovirus α V β 6 proliferating epithelia, esp. lung and liver fibronectin; TGFβ1+3 Α 6 β 4 Epithelial cells [5] Laminin [5]

10 CDH1 - E-cadherin (epithelial) CDH2 - N-cadherin (neural) CDH12 - cadherin 12, type 2 (N-cadherin 2) CDH3 - P-cadherin (placental) CDH4 - R-cadherin (retinal) CDH5 - VE-cadherin (vascular endothelial) CDH6 - K-cadherin (kidney) CDH7 - cadherin 7, type 2 CDH8 - cadherin 8, type 2 CDH9 - cadherin 9, type 2 (T1-cadherin) CDH10 - cadherin 10, type 2 (T2-cadherin) CDH11 - OB-cadherin (osteoblast) CDH13 - T-cadherin - H-cadherin (heart) CDH15 - M-cadherin (myotubule) CDH16 - KSP-cadherin CDH17 - LI cadherin (liver-intestine) CDH18 - cadherin 18, type 2 CDH19 - cadherin 19, type 2 CDH20 - cadherin 20, type 2 CDH23 - cadherin 23, (neurosensory epithelium)

11 c(rgdfv) E-CAD 10 µm

12 pan-cadherin β-catenin pan-cadherin β-catenin c(rgdfv) 4h c(rgdfv) 4h c(rgdfv) 4h pan-cadherin c(rgdfv) 24h c(rgdfv) 24h c(rgdfv) 24h β-catenin pan-cadherin β-catenin

Ig Szupercsaládba (IgSF)tartozó sejtadhéziós molekulák CD2 CD48 The SIGLEC family (e.g. CD22, CD83) Intercellular adhesion molecules (ICAMs) Vascular cell adhesion molecules (e.

13 Ig Szupercsaládba (IgSF)tartozó sejtadhéziós molekulák CD2 CD48 The SIGLEC family (e.g. CD22, CD83) Intercellular adhesion molecules (ICAMs) Vascular cell adhesion molecules (e.g. VCAM-1) Neural Cell Adhesion Molecule (NCAM)

Adhéziós szignál (guidance) molekulák Receptor DCC/Unc5 Robo Neuropilin Eph (Trk receptors) NogoR Ligand Netrin Slit Semaphorin Ephrin MAG,Omgp, Nogo66 Letapadási jel repulzív/attraktív Wadsworth,

14 Adhéziós szignál (guidance) molekulák Receptor DCC/Unc5 Robo Neuropilin Eph (Trk receptors) NogoR Ligand Netrin Slit Semaphorin Ephrin MAG,Omgp, Nogo66 Letapadási jel repulzív/attraktív Wadsworth, Hedgecock 1996 repulzív Wong et al., 2002 repulzív/attraktív Chen et al., 1998 repulzív/attraktív Himanen, Nikolov 2003 repulzív McGee, Strittmatter, 2003 SEMA I, II, VIII: gerinctelen; receptor: plexinek SEMA III-VII : gerinces; receptor: neuropilin 1 és 2

15 Expression of various laminin α-chains Expression of fibronectin days Lama Lama1 Lama2 Lama4 Lama5 Lamb1 Lamb2 0,8 0,6 0,4 0,2 0,0-0,2-0,4-0,6 Lamc1 p< 0,5 p< 0,05 re l.e x p re s s io n [lo g ra tio ] 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0 p< 0,05 p< 0,05 p>0, days of induction log ratio 1,5 1,3 1,1 Expression of integrin α-chains 0,9 0,7 0,5 0,3 0,1-0,1-0,3 7 3 days 1-0,5 p< 0,5 p<0,05

100 90 protein content in the fluid environment of suspended NE-4C cells Protein

ACSF 25 µg 12,5 µg 6,25 µg BSA Living cells in fluid contact with the blot-membrane 0

cells 0 10 60 min 40 min 10 min 20 40 60 120 180 48h NE-4C 2x10 5 cells/200 µl

16 protein content in the fluid environment of suspended NE-4C cells Protein secretion by cells 80 p ro tein [u g /m l/10 ^ 6 ce lls] PBS-EDTA ACSF 25 µg 12,5 µg 6,25 µg BSA Living cells in fluid contact with the blot-membrane time [min] NE-4C 10 5 cells antilaminin antitenascinc MDCK 10 5 cells min 40 min 10 min h NE-4C 2x10 5 cells/200 µl Traditional cell-blotting Extracellular matrix molecules Adhesion molecules Growth factors Hormones etc

Hasonló dokumentumok

Asztroglia. Lokális köz7 neuron. Kis ve.tő neuron. Ve.tő neuron. Radiális glia SVZ VZ. ependyma Primér germina+v réteg. Másodlagos germina+v réteg

Asztroglia. Lokális köz7 neuron. Kis ve.tő neuron. Ve.tő neuron. Radiális glia SVZ VZ. ependyma Primér germina+v réteg. Másodlagos germina+v réteg Asztroglia Lokális köz7 neuron Kis ve.tő neuron Ve.tő neuron Radiális glia SVZ VZ ependyma Primér germina+v réteg prenatális Másodlagos germina+v réteg posztnatális A másodlagos germinatív zóna a primér