A KAQUN-víz hatása onkológiai kezelés alatt álló betegeken. Randomizált vizsgálat. Vizsgálati Protokoll Készítették: Dr. Liszkay Gabriella PhD. Klinikai onkológus-bőrgyógyász Dr. Robert Lyons KAQUN Hungária Kft. Budapest 2011 A KAQUN-víz hatása onkológiai kezelés alatt álló betegeken. Randomizált vizsgálat.
Vizsgálók: Dr. Liszkay Gabriella PhD. Klinikai onkológus-bőrgyógyász (Vizsgálatvezető) Dr. Borbola Kinga Klinikai onkológus-bőrgyógyász (Vizsgáló) Dr. Takácsi-Nagy Zoltán PhD. Onkoradiológus (Vizsgáló) Dr. Balatoni Tímea Bőrgyógyász (Vizsgáló) Dr. Vízkeleti Júlia Onkoradiológus (Vizsgáló) Dr. Fábry László Onkoradiológus (Vizsgáló) Kovács Péter Pszichológus (Vizsgáló) Dr. Nagy Péter biokémikus (vizsgáló) Résztvevők Országos Onkológiai Intézet KAQUN HUNGÁRIA KFT. Vizsgálatkérő Országos Onkológiai Intézet Budapest
Bevezetés A KAQUN speciális, magas oxigén tartalmú víz, amely ivó- és/vagy fürdőkúra formájában hasznosítható. A KAQUN víz stabil, oldott formában tartalmaz nagy mennyiségű oxigént, mely a bőrön és az emésztőrendszeren keresztül a szervezetbe jutva megszünteti a szöveti és sejtszintű acidózist és hipoxiát. Az egészségi állapottól függően a szervezet változó mennyiségű oxigén felvételre képes az oldott oxigénből. A KAQUN fürdő- és ivókúra hatásait onkológiai kezelés alatt álló betegeken randomizált vizsgálattal végezzük. Előzetes megfigyelések és eredmények A hypoxia daganatos megbetegedésekben kedvez a tumor progressziójának, intoxikációkban, anyagcsere- és szív-érrendszeri betegségekben a sejtek oxigén felhasználási képessége csökken. A KAQUN HUNGÁRIA KFT 2001. óta alkalmaz elektrolízises eljárással előállított magas oxigéntartalmú vizet közérzetjavítóként fürdő- és ivókúra formájában. Dr. Robert Lyons, a KFT tulajdonosa kezdettől fogva jól dokumentáltan megfigyelte, hogy amellett, hogy az oxigéndús vízkúra alatt álló páciensek erőnléte javult, a KAQUIN víz eredményes volt a legkülönfélébb eredetű ulkuszok és sebek feltisztításában, behámosításában, bőrbetegségek kezelésében, csökkentette a sugárterápia által kiváltott dermatitisek intenzitását, illetve esetenként fékezte előrehaladott daganatos betegeknél a progressziót komplex onkoterápia mellett, mellékhatások nélkül. Mindezen kedvező hatások tudományos igazolására az OKBI Citogenetikai és Immunológiai Osztályán 30 egészséges önkéntesen 21 napos fürdő- és ivókúra során a KAQUN HUNGÁRIA KFT kezdeményezésére immunológiai vizsgálatokat végeztek TUKEB engedély alapján (42/2009). A vizsgált végpontok: kvalitatív és kvantitatív vérkép, a limfocita populációk aránya, a limfociták aktiváltsága és a neutrofil granulociták reaktív oxigén intermedier termelése voltak. A paraméterek elemzése a négy random csoportra osztott betegek adatainak összehasonlításával történt.
Előzetes vizsgálatok eredményei: 1. A kvalitatív és kvantitatív vérkép sem egyéni, sem csoportszinten nem változott. 2. Az NK-sejtek százalékos aránya csoportszinten statisztikailag szignifikánsan emelkedett. 3. A CD25 sejtfelszíni molekula expressziója megnövekedett. 4. A 2. hétre szignifikánsan megnövekedett értékű paraméterek a további 1 hétben már nem változtak. 5. A reaktív oxigén intermedier termelés növekedése a neutrofil granulociták ölőképességének fokozódását eredményezte. További vizsgálatok igazolták a KAQUN víz kedvező hatását a fizikai teljesítőképességre. Dr Bretz Károly D.Sc. 7 nő, 4 férfi és egy gyermek bevonásával 0,75-1,25 l víz egy óra alatti elfogyasztása után speciális mérőberendezésekkel a vér oxigéntelítettségének növekedését, a reakcióidő csökkenését, a kéz erőkifejtésének javulását állapította meg. (2. Melléklet) A Semmelweis Egyetem Testnevelési és Sporttudományi Karán 6 nőn és 4 férfin elvégzett tanulmányban fürdő- és ivókúra után oxigén szaturációt, reakcióidőt, erőkifejtést, vérnyomást, EKG adatokat, stressz indexet és állás stabilitást vizsgáltak. A bevont személyek többségénél kedvező hatásokat tapasztaltak. (2. Melléklet) Más résztvevőkkel (4 nő, 6 férfi) ugyanezen paramétereket ugyanazon intézményben mérve az eredmények a korábbi vizsgálatokat megerősítették.(2. Melléklet) Cél A KAQUN-víz hatása onkológiai kezelés alatt álló betegeken. Randomizált vizsgálat a Kaqun víz közérzetjavító hatására. Elsődleges végpont: a terápiás mellékhatások csökkentésében,a sugár- és gyógyszer okozta dermatitis mérséklésében, az általános erőnlét és pszihés státusz javításában, daganatos exulcerált bőrfolyamatok feltisztításában, hámosításában kifejtett hatás értékelése. Másodlagos végpont: melanoma malignum cután manifesztumainak fürdővel és ivókúrával való
kiegészítő terápiájával a tumorválasz felmérése. IV-es stádiumú, mérhető daganattal rendelkező, melanoma malignumban szenvedő betegeknél komplex onkoterápia melletti tumorválasz felmérése. A vízzel összefüggésbe hozható esetleges mellékhatások monitorizálására laborvizsgálatok, fizikális- és képalkotó vizsgálatok alapján, amit az onkoterápiás protokoll előír. A fehérvérsejtek többségét kitevő neutrofil granulociták szabad gyökök és oxidálószerek széles skáláját termelik a patogén mikroorganizmusok pusztítása céljából. Az oxidálószerek és szabad gyökök prekurzora (első intermediere) a szuperoxid molekula. Ezen szuperoxidot a neutrofilok membránjában található NADPH oxidáz enzim complex termeli oxigén redukciójával. In vitro vizsgálatokat fogunk végezni arra vonatkozóan, hogy a Kaqun oxigéndús víz jelenléte hogyan befolyásolja az egészséges emberek véréből izolált neutrofil granulociták stimulus hatására történő szuperoxid termelését. Ezen túlmenően vizsgálni fogjuk a Kaqun víz terápiában részesülő páciensek véréből izolált neutrofil granulociták szuperoxid termelő képességét a terápia előtti és a terápiát követő héten. Anyag és módszer A fürdőkúra a KAQUN egészségprogram szolgáltatási standardjaiban rögzítettek szerint folyik. A vizsgálatban résztvevőknél szükséges előzetes állapotfelmérés, melyet a KAQUN rendszerben használt előzetes teszt és az orvosi dokumentációk (korábbi leletek, zárójelentések, más orvosi dokumentációk) alapján végeznek el. A betegek kiválasztását az Országos Onkológiai Intézet által megbízott szakorvosok randomizáltan végzik.10 egészséges önkéntes szolgál konroll csoportként a neutrofil granulociták szuperoxid termelésének vizsgálatához. Minden személyről külön dokumentáció készül, melyet egyéni azonosítóval látnak el és egy helyen tárolnak. Minden adott információt szigorúan bizalmas, személyes egészségügyi adatként kezelnek, a dokumentumok és elektronikus változatainak megfelelő védelméről gondoskodnak. Ennek érdekében a vizsgálatot végzők titoktartási nyilatkozatot írnak alá. A vizsgált személy teljes körű felvilágosítást kap a KAQUN kezelésről. A tájékoztatás megtörténtét a beválasztott beteg ( valamint a 10 egészséges önkéntes ) Beleegyező Nyilatkozat
aláírásával igazolja. Az adatok tudományos felhasználására vonatkozó beleegyező nyilatkozatot is aláírnak a résztvevők. A betegek kiválasztása randomizációval történik. Páros napon születettek kapják, páratlan napon születettek nem kapják a KAQUN kezelést. KAQUN fürdő- és ivókúra A KAQUN fürdő-, illetve párhuzamosan ivókúra, napi egyszeri 50 perces KAQUN vizes fürdő kiegészítve KAQUN ivókúrával. A fürdés 37 C stabilis oxigént tartalmazó vízzel teli egyedi fürdőkádban történik, alkalmanként maximum 50 percig. A kúra időtartama 14 nap, 10 nap szünettel, háromszor megismételve. Az ivókúra ugyanilyen periodicitással történik, napi 1,5 l Kaqun ivóvíz egyenletesen elosztott elfogyasztásával Neutrofil granulociták hyperoxid termelésének vizsgálata A vizsgálat helyszíne az Országos Onkológiai Intézet Molekuláris Immunológiai és Toxikológiai Osztálya. A meghatározásért felelős személy: Dr. Nagy Péter osztályvezető, vizsgáló. A kísérleteket a paciensek, illetve 10 egészséges önkéntes vénáiból vett vérből izolált neutrofil granulocitákon végezzük, ehhez 10 ml vér szükséges.a vizsgálat a kúrák megkezdése előtt és azok befejeztekor történik. A véralvadást heparin segítségével gátoljuk. A neutrofil granulociták izolációja Ficoll-Hypaque centrifugálást követően dextránnal való ülepítéssel és végül a vörösvérsejtek hipotoniás lizisével történik. A neutrofil granulociták szuperoxid termelő képességét phorbol myristate acetate (PMA)-al való stimuláció következtében vizsgáljuk. A neutrofil granulociták szuperoxid termelésének sebességét (kinetikáját) a cytokrom c fehérje redukciója eredményeképp lejátszódó színreakció segítségével detektáljuk spektrofotometriás módszerrel (550 nm hullámhosszon) az idő függvényében. Katalaz enzim hozzáadásával fogjuk a keletkező hidrogén peroxidot (H 2 O 2 ) elroncsolni. Ezen túlmenően nátrium azidot fogunk alkalmazni a neutrofilok által nagy mennyiségben termelt myeloperoxidáz enzim szuperoxiddal való reakciójának a blokkolására. A termelt szuperoxid mennyiségét a hidroethidin-nel való reakciójában keletkező 2- hydroxyethidium nagy nyomású folyadékkromatográfiás elválasztását követő tömegspektrometriás módszerrel mérjük.
A szuperoxid molekula dizmutációjának következtében keletkező H 2 O 2 oxidálószer mennyiségét a Fox-assay segítségével mérjük szintén nátrium azid jelenlétében. A módszer lényege, hogy a Fe 2+ ionok H 2 O 2 -al való oxidációjakor képződő Fe 3+ a hozzáadott xylenol-naranccsal színes komplexet képez, amit kalibrációs görbe segítségével spektrofotometriásan fogunk kvantitative analizalni. A betegbevonás időtartama meghosszabítva: 2015 Február. Betegcsoportok: 1. csoport: 10 véletlenszerűen kiválasztott célzott terápia által kiváltott bőrtünetekkel (bármely grade) egyéb bőrgyógyászati terápiában részesülő beteg; kontroll:10 hasonló fokú (grade) bőrtünettel kezelésre szoruló beteg, aki csak a protokoll által előírt kezelést kapja. A KAQUN terápia a bőrtünetek megjelenését követő két héten belül kezdődik. 2. csoport: 10 random beválasztott sugárterápiában (bármely sugárforrás) részesülő daganatos (szolid tumor) beteg; kontroll csoport: ugyanazon lokalizációban, ugyanazon sugárforrással irradiált, ugyanazon bőrtípusú 10 beteg. A KAQUN terápiás csoportban a kezelés a sugárterápia befejeztét követő napon kezdődik. 3. csoport: 5 melanoma malignum cutan metasztázisai (intranzit) miatt nem sugárterápiában részesülő beteg; kontroll csoport: ugyanaz. Az oxigéndús vízkúra a kemoterápiát követő egy héten belül kezdődik. 4. csoport: 10 melanoma malignum IV-es stádiumában komplex onkoterápia alatt álló beteg; kontroll: ugyanazon daganattípus közel azonos szervi lokalizációjú és kiterjedtségű manifesztumai miatt ugyanazon onkoterápiában részesülő 10 beteg. Bármikor megkezdhető a KAQUN kezelés. 5. csoport: 10 egészséges önkéntes vesz részt a fürdő- és ivókúrában (daganatos betegségben nem szenvednek, krónikus betegségük nincs, laboratóriumi leleteik normál tartományban) a neutrophyl granulocyták superoxid termelő képességének vizsgálatára. Beválasztási kritériumok Beteg-beleegyező nyilatkozat.
Szövettanilag igazolt szolid tumor Onkoterápiás protokoll által előírt aktív vagy palliatív kezelés Betöltött 18. életév. ECOG 0-3 erőnlét. Kizárási kritériumok Nem daganatos beteg. 18 év alatti életkor. ECOG 4-es erőnléti stádium. Kezelésre refrakter hypertonia, Pace-maker, Thromboemboliás szövődményre magas rizikójú betegek thrombózis profilaxis nélkül.