Sciex X500R készülék bemutatása a SWATH alkalmazásai tükrében. Szabó Pál, MTA TTK

Méret: px

Mutatás kezdődik a ... oldaltól:

Download "Sciex X500R készülék bemutatása a SWATH alkalmazásai tükrében. Szabó Pál, MTA TTK"

Zsigmond Papp
7 évvel ezelőtt
Látták:

1 Sciex X500R készülék bemutatása a SWATH alkalmazásai tükrében Szabó Pál, MTA TTK

2 Hagyományos QTOF rendszer Aggályok: Termetes Bonyolultnak tűnő Nem rutin feladatokra való Következmény: Nem merjük megvenni AB Sciex

3 Curtain gas CAD gas for linac Concept of reflector biomolecule API interface 4-cem detector: better linearity linac Concept of orthogonal acceleration Tof section Concept of TDC AB Sciex nano spray Quad-Tof technology before AB-Sciex, as per view of BNC.

4 Q-TOF készülék (QSTAR) 770 L/s 250 L/s Modulator Focusing grid Accelerator column 4 anode detector Sample Ions Curtain Gas 2.5 Torr q Torr Q 1 q 2 10 mtorr 770 L/s Effective Flight Path = 2.5 m Field Free Drift region 7x10-7 Torr Conducting liner Ion Mirror (reflector) AB Sciex

5 Q-TOF Nagy érzékenység Nagy felbontás (>10.000) Nagy felbontás fragmensek esetében is Nagy tömegpontosság (<5ppm) Relatíve nagy tömegtartomány ( Q, TOF) Hagyományos tandem scanfunkciók AB Sciex

6 Van más helyette? SCIEX X500R QTOF System powered by SCIEX OS software SCIEX X500R QTOF System SCIEX ExionLC AC System SCIEX OS software AB Sciex

7 Mi is ez a csodabogár? Hardware SCIEX ExionLC rendszer SCIEX OS software által vezérelhető Megbízható kapcsolat az LC és az MS között SCIEX X500R QTOF rendszer N-alakú ionoptika Fűtött TOF cső Egyszerű asztali kivitel Software SCIEX OS software Teljesen új felhasználói felület Azonosítás és kvantitálás egy lépésben Automatikus ismeretlen azonosítás AB Sciex

8 Mitől olyan jó ez? SCIEX X500R QTOF Rendszer Az első nagy felbontású, nagy érzékenységű MS/MS rendszer, melyet RUTIN használatra terveztek Érzékenység: könnyen elérhető MRL értékek Felbontás: növeli a szelektivitást bonyolult mátrix esetén Lineáris tartomány: 4 nagyságrend Tömegpontosság: szerkezetazonosításnál elengedhetetlen MS/MS alapú azonosítási lehetőségek: IDA, SWATH MS/MS ALL, ionarányok és MS/MS spectrumok Robusztusság köszönhető: Turbo V forrás illetve Curtain Gas interface AB Sciex

9 Alkalmazási lehetőségek Célmolekulák keresése (targeted screening) TOF MS HR TOF MSMS (MRM) MRM HR Ismeretlen komponensek keresése (non targeted screening) TOF MS (ChemSpider) TOF MSMS SWATH AB Sciex

10 Információfüggő MS/MS (IDA) A Q1 egységnyi felbontásának köszönhetően nagy szelektivitású MS/MS spektrumokat szolgáltat AB Sciex

11 MRM HR Megnövelt szelektivitás MRM 209/192 and 209/166 TOF-MS XIC of ± 10 ppm MRM HR 209/ and 209/ AB Sciex

SWATH Sequential Windowed Acquisition of all Theoretical mass spectra lehetővé teszi MS/MS felvételek készítését általános és átfogó módon A Q1 kvadrupólt szélesre nyitjuk és léptetjük a teljes

12 SWATH Sequential Windowed Acquisition of all Theoretical mass spectra lehetővé teszi MS/MS felvételek készítését általános és átfogó módon A Q1 kvadrupólt szélesre nyitjuk és léptetjük a teljes tömegtartományban Data Independent Acquisition (DIA), információtól független mérés MS/MSALL Regular MS/MS SWATH MS/MS Q1 filter [0.7] CID TOF analyzer Q1 filter [25Da] CID TOF analyzer AB Sciex

13 MS/MS kvantitatív mérési módszerek anyaionok CID leányionok 0.7 amu 0.7 amu átmenet Hármas kvadrupól MRM/SRM m/z m/z 0.7 amu 0.01 amu 0.01 amu 0.01 amu QqTOF MRM HR X amu X milyen nagy lehet? QqTOF SWATH-MS AB Sciex

14 Szükséges készülék paraméterek Normal transmission Transmission in case SWATH Ion transmission Ion transmission m/z m/z AB Sciex

15 SWATH-MS Adatgyűjtés elmélete m/z Aebersold and coworkers, ETH Zurich AB Sciex min

16 SWATH-MS Adatgyűjtés elmélete m/z AB Sciex m/z tömegtartomány = [ ] 25Da swath ablak 32 swath-ra van szükség 100ms egy ablak 3.2s ciklusidő swath = A kromatográfiás futás során egy adott tömegablakkal kiválasztott anyaionok fragmenseinek összessége Ciklusidő: azonos tömegablakhoz való visszatéréshez szükséges idő Aebersold and coworkers, ETH Zurich min

17 SWATH-MS adatgyűjtés elmélete: adatgyűjtés és értékelés Aebersold and coworkers, ETH Zurich TIC MS1 map AB Sciex

Aebersold and and coworkers, coworkers, ETH ETH Zurich

18 SWATH-MS adatgyűjtés elmélete: Adatgyűjtés és értékelés < MS2/swath map [swath m/z] Keresett peptid Aebersold Aebersold and and coworkers, coworkers, ETH ETH Zurich Zurich < < < < < < MS1 map < < TIC < Kiválasztott ionkromatogramok: < < < < < AB Sciex

19 SWATH előnyei általános és nem célzott nincs módszerfejlesztés! Az adatok utólagosan visszanyerhetők (mind MS, MS/MS és XIC) A mérési idő nem növekszik a mérendő komponensek számával A szelektivitása hasonló MRM HR -hez (a háttér általában magasabb) AB Sciex

20 SCIEX X500R: Egyszerűen, Nagyszerű!

Hasonló dokumentumok

meghatároz lete és sa Szabó Pál MTA TTK

meghatároz lete és sa Szabó Pál MTA TTK 1 LC-MS/MS alapú mennyiségi meghatároz rozásokok elmélete lete és megvalósítása sa Szabó Pál MTA TTK Követelmények 2 Érzékenység Szelektivitás Gyorsaság Magas komponensszám/injektálás Mennyiségi meghatároz