[ ] [ ] [ ] [ ] [ ] [ ] [ ] v( t) = k A B. Gyors kinetikai módszerek. Stopped flow. = k. Dr. Kengyel András. v = k A B. ( t) [ ] ( t ) ( t)

Méret: px

Mutatás kezdődik a ... oldaltól:

Download "[ ] [ ] [ ] [ ] [ ] [ ] [ ] v( t) = k A B. Gyors kinetikai módszerek. Stopped flow. = k. Dr. Kengyel András. v = k A B. ( t) [ ] ( t ) ( t)"

Jakab Székely
5 évvel ezelőtt
Látták:

1 Modern iofiziki kuási módszerek 011 Okóer 0. Rekciókineik Gyors kineiki módszerek Dr. Kengyel ndrás PTE ÁOK iofiziki Inéze REKIÓSEESSÉG: rekció jellemzésére szolgáló prméer Rekcióseesség függ: részeı nygok minısége koncenrációk hımérsékle klizáor / inhiior idıeli koncenráció álozás + + DD : szöchiomerii együhók! ( ) = k, : rekciórendek (Nem szöchiomerii együhók!) MOLEKULRITÁS: k: seességi állndó (s -1 ) Unimolekuláris rekció: egyelen molekul álkulás imolekuláris rekció: ké molekul álkulás zok üközése úján Trimolekuláris rekció: rik, mer ö molekulánk kell üköznie ELEMI REKIÓK: nem onhók egyszerő lépésekre Elemi rekciók rendőségé rekció molekulriás hározz meg. [] [] 1. 1/ Nulldrendő rekció Kiindulási nyg. 1/ 3. 1/ + 0 Termékek komponensek koncenrációj lineárisn álozik z idı függényéen Rekcióseesség függelen rekánsok koncenrációjáól (=0) Pszeudozérus-rend: rekáns koncenrációj ngy [] = [] 0 pl. enzimklízis (h z enzim koncenrációj kicsi) - NEM elemi rekció! ( ) ( ) = k = k [] [] 1. 1/. 1/ Elsırendő rekció 3. 1/ + komponensek koncenrációj exponenciálisn álozik z idı függényéen. rekcióseesség egyelen nyg koncenrációjáól függ felezési idı állndó, nem függ koncenrációól Pszeudó-elsırendő rekció: egyik rekáns ngy feleslegen = = k ( ) [ ] ( ) - [ ] = [ ] e [ ] [ ] 0 ( ) = k ln = -k 0 k Elsırendő rekció Másodrendő rekció Rekcióseesség koncenráció-függése Péld: Miozin foszforiláció (pszeudo-elsırendő: TP ngy feleslegen) Miozin + TP Miozin-P + DP enzim 0,4 [] [] 1. 1/ 0 + = k ( ) [ ] ( ) = k ( ) [ ] ( ) [ ] ( ) Kezdei seesség 0,3 0, mx 0,1 K m 0 Koncenráció (kiindulási). 1/ 3. 1/ ( ) dc = = kc d komponensek koncenrációj hiperol függény szerin álozik z idı függényéen. 1

2 Összee rekciók Gyors kineiki módszerek idıskáláj Sorozos kémii rekciók: Lomik rekció Quench flow s ms µs ns ps seességmeghározó lépés: seességmeghározó lépés: Párhuzmos kémii rekciók: Egyensúlyi kémii rekciók: Egyensúlyi állndó: Villnófény foolizis Felülei plzmon rezonnci Egyfoon-számlálás Gyors kineiki módszerek jelenısége iológii mechnizmusok megérése 1. Folydékok ármolás MEGHJTÓ iológii folymok idıskáláj millisecundum skálán örénı mérések 0 µl köıdési- és disszociációs kineik izsgál fehérje-fehérje, illee fehérjeligndum kölcsönhás eseén K D : disszociációs állndó ELL polimerizáció, depolimerizáció köeése 1. Folydékok ármolás 1. Folydékok ármolás MEGHJTÓ MEGHJTÓ ELL ELL ELL

3 1. Folydékok ármolás 1. Folydékok ármolás MEGHJTÓ MEGHJTÓ ELL ELL. Ármlás megálliás 3. Kineiki mérés! MEGHJTÓ! MEGHJTÓ = o szorpció fluoreszcenci. szórás Fényforrás mérés feléele Holidı spekroszkópii jel álozzon rekció során fluoreszcenci inenziás (. nizorópi) fényszórás szorpció merıleges deekálás párhuzmos deekálás folydékok összekeerése és hsznos mérés kezdee közö elel idı Tipikusn: 0,5 1 ms fényforrás: hlogén, lézer monokromáor deekor: PMT ermoszá 3

4 Villnófény foolizis Röid élermú részecskék rekcióink nyomon köeésére. ged molekul: kerece zár, kémii köéssel inkiál Ngy fényinenziás hásár kiszdul (z inkiáló kémii köés felomlik) ekkor indul folym. sk kkor indul folym, mikor meglıjük fénnyel. Elınye: és molekul már egymás melle n (keerés nem esz el idı). Deekál fény, megmondhó spekroszkópiás mérés null idıponjá. Villnófény foolizis Felülei plzmon rezonnci cged-tp. ko-miozin disszociáció (K 1 k + ) 3. TP urnoer prner kin miozin újrköés (k TPse ) fémlemez (pl. rny. ezüs) prner üeg 3. polrizál fény isszer fény fényforrás deekor Felülei plzmonok: Fémek felüleén egy speciális fénysugárrl hullámszerő mozgásr kényszeríe elekronok. Rezonnci feléele: gerjeszés fény egy do eesési szögénél örénik meg és ilyenkor fém felülerıl isszer fény inenziásán egy minimum észlelheı (szorpció!). Felülei plzmon rezonnci Felülei plzmon rezonnci Összee folymok izsgál fémlemez (pl. rny. ezüs) üeg polrizál fény köés megálozj isszerıdés szögé. isszer fény I. II. Szenzogrm eköıdés megálozj felüleel érinkezı réeg örésmuójá rezonnci szög elolódás érzékeny deekálás. 4

5 Quench flow Nincs spekroszkópii jel Ké lépéses keerés 1. +: keerendı oldok összekeerednek egy késleleı hurokn (cellán), rekció indul. (+) + Q: quenching old megállíj rekció, izonyos idı uán Rekció ermékek mérése (pl. rdiokiiás) Idıeli érzékenység: ms 5

Hasonló dokumentumok

Gyors kinetikai módszerek

Gyors kinetikai módszerek Dr. Kengyel ndrás Enzim-szubszrá Gyors folyamaok Recepor-ligand Gyors kineikai módszerek Lizozim - poliszacharid hp://pixshark.com/enzyme-acive-sie.hm Fehérje-gyógyszer Inzulin - recepor hp://www.riniy.edu/lespey/biol3449/lecures/lec10/lec10.hm