Gradiens elúció tervezése RPLC-ben, RP-IPLC-ben és HILIC-ben
|
|
- Krisztián Sipos
- 7 évvel ezelőtt
- Látták:
Átírás
1 BUDAPESTI MŰSZAKI és KÖZGAZDASÁGTUDOMÁNYI EGYETEM Szervetlen és Analitikai Kémia Tanszék Gradiens elúció tervezése RPLC-ben, RP-IPLC-ben és HILIC-ben Dr. Fekete Jenő Tanár Úr részére Készítette: Tempfli Belinda Keresztfalvi Alex 2013
2 Tartalom 1. A gradiens elúció alapelve és problémái Alapelve Csúcsszélesedés zóna kompresszió Gradiens elúciós technikákban használt jellemzők Gradiens idő csökkentése és hatása az elválasztásra Gradiens elúció alapproblémái Egyensúlybeállás Mozgófázis tisztasága Retenciós sorrend, szelektivitásváltozás Izokratikus szakasz hatása Oldószer probléma Detektor Gradiens elúció HILIC-ben Oldószer gradiens tervezése HILIC módszerre... 9 Irodalomjegyzék
3 1. A gradiens elúció alapelve és problémái 1.1. Alapelve Ha a szétválasztandó vegyületek tulajdonságainak különbsége túl nagy, akkor egy adott izokratikus rendszerben a nagyobb megoszlási hányadossal jellemzett komponensek nagy retencióval eluálódnak, szélesednek, és szinte beleolvadnak az alapvonalba. Az eluenserősség növelésével viszont a kevésbé visszatartott komponensek interferálnak, romlik a felbontásuk (1. ábra). Ez a helyzet áll elő pl. az RP-HPLC esetén, ha lgp 2 és csak az apoláris kölcsönhatások dominálnak, illetve az NP-HPLC esetén, amikor eltérő polaritású csoportoknál, pl. több fenolos hidroxil tartalmú és csak ketocsoportot tartalmazó vegyületeknél. 1. ábra: Általános elúciós problémák izokratikus módszernél (felső kromatogram), megoldásuk gradiens elúcióval (alsó kromatogram) 2
4 Ezekre a problémákra megoldás lehet a gradiens elúció alkalmazása, amikor a nagyobb megoszlási hányadossal rendelkező komponensek visszatartásának mértékét csökkentjük többek között az erősebb oldószer koncentrációjának növelésével a mozgófázisban. A folyadékkromatográfiás gyakorlatban a gradiens elúció annyit jelent, hogy a retenciót csökkentő hatást növeljük az idő függvényében, ekkor oldószer gradiensről beszélünk. Megállapodás szerint, a gradiens szó előtt mindig megnevezzük azt a hatást, amely a visszatartást csökkenti. Attól függően, hogy milyen paraméter változásával csökkentjük a visszatartást, beszélhetünk: oldószer gradiensről legtöbbször ezt alkalmazzuk hőmérséklet-gradiensről ph-gradiensről (peptidek esetén jelentős) ionpár kromatográfiában ionpár (elvi) vagy só gradiensről szerves vegyület ioncserés elválasztásánál: oldószer-, só- vagy hőmérsékletgradiensről Időben eltérő módon változtathatjuk azt a paramétert, amely csökkenti a visszatartást. Azt a függvényt, amely szerint változtatjuk a paramétert, nevezzük gradiens alaknak, amely lehet: lineáris, lépcsős, egyéb függvény szerinti, illetve ezek kombinációja. A megadott gradiens alakok közül a legtöbbször a lineáris gradiens alakot használjuk. Ennek oka, hogy a visszatartást és a szelektivitást leíró törvényszerűségeket itt ismerjük a legjobban. A módszer átvitelnél egyik készülékről a másikra ebben az esetben tudjuk a legjobban figyelembe venni a műszerezettségnél meglévő különbségeket. A fordított fázisú folyadékkromatográfiában és a normál fázisúnál is exponenciálisan változik a visszatartás a nagyobb elúciós erősségű oldószer koncentrációjával és a lineárisan változó oldószer erősség eredményeképp a komponensek egyenlő távolságban helyezkednek el. Az angol-szász szakirodalomban ezt linear solvent strenth (LSS) gradiensnek nevezik. 3
5 A gradiens képzés során egy előre programozható mozgófázis keverő rendszer segítségével paraméterezzük az elválasztási módszert. A dinamikus keverőelemben egy kis mikro keverő biztosítja a mozgófázis keverék homogenitását Csúcsszélesedés zóna kompresszió A gradiens elúcióval elérhető, hogy a nagyon eltérő visszatartású komponensek azonos szélességűek legyenek. Az izokratikus módszernél a nagyobb visszatartású komponensek zónaszélesedése a retenciós idővel nő. Azt a hatást, amely az izokratikus módszerhez képest az azonos időben eluálódó komponensekre kisebb zónaszélesedést okoz, nevezzük csúcskompressziónak. Ahhoz, hogy a csúcskompresszió okozta zónaszűkülést teljes mértékben kihasználjuk, eleget kell tennünk bizonyos feltételeknek. Ilyen feltétel, hogy az induló A oldószernek a lehet leggyengébbnek kell lennie, hogy ne induljon meg az izokratikus elúció. Ez annyit jelent, hogy a legkevésbé visszatartott komponensre igaz kell legyen, hogy tiszta A -ban k 10 teljesüljön, így a minta adszorbeálódik a felületen, megáll a kolonna elején. Természetesen, ha a legkisebb retencójú megáll a kolonna elején, akkor az összes többi komponens is. Az erősebb oldószer koncentrációjának növelésével elérjük, hogy a legkevésbé kötődő komponens elúciója megindul. Ez akkor válik jelentőssé, ha az oldószer olyan összetételéhez érünk, ahol izokratikus körülmények között a k 10. A növekvő eluenserősség felgyorsítja a komponens vándorlási sebességét. A többi komponens mindaddig a kolonna elején marad (koncentrálódott zónában), amíg az előzőekben megadott k 10 kritérium a visszatartásra nem teljesül. Miután a vándorlási sebesség elérte a kritikus pontot, minden komponens gyorsuló mozgással halad végig a kolonnán. A vándorlási sebesség közel azonos exponenciális függvénnyel írható le. Ebből következik, hogy a vándorlás megindulása után közel azonos időt töltenek az állófázison. A van Deemter összefüggés értelmében az anyagátadási ellenállás minden egyes komponensre közel azonos. Mivel ez a tag szabja meg a gyakorlati működési tartományban a zónaszélesedést adott kolonnánál, így minden egyes komponensre közel azonos zónaszélesedés várható. A zónaszélesedés csökkenése magyarázható a szorpciós-deszorpciós sebesség változásával is. A dugó-(impulzus-)szerűen beadagolt minta a diffúziós hatások miatt szélesedik, és közel normális eloszlású lesz. 4
6 Izokratikus elúciónál a kolonnán töltött nagyobb idő miatt a diffúziós hatások nagyobb mértékűek, ehhez járulhat, hogy a deszorpció gátolt, s így sebessége eltér az adszorpcióétól, ezek együttesen, a kromatográfiás csúcsok kiszélesedését eredményezik. Gradiens elúciónál az erősebb B oldószernek a kolonna hosszának függvényében negatív a gradiense, amennyiben a kolonna hosszát a mozgófázis belépésének oldaláról vesszük. Ez annyit jelent, hogy a mozgófázisban a komponens eloszlás hátulján mindig erősebb az oldószer, minta a zóna elején. A nagyobb elúcióerősség megnöveli az állófázisban megkötött komponensek deszorpciós sebességét. Ezzel az anyagátmeneti ellenállás csökken, s így a zóna szűkül a gradiens elúciónál, az izokratikus elválasztással ellentétben, a csúcsszélesség t R -től függetlenül közel azonos. Ha a komponenseknek nem csak a csúcsszélessége, hanem az UV fényelnyelése is megegyezik, akkor az analitikai teljesítményjellemzőik is azonosak lesznek (kimutatási határ, mennyiségi meghatározás alsó határa, stb.). Ezért a gradiens elúció kis mennyiségek meghatározásához is alkalmazható, mert növeli az érzékenységet. A csúcskompresszió eredményeképp biológiai közegekből történő komponens meghatározásnál nő a jel/zaj viszony, ami a kimutatási határ csökkenését eredményezi Gradiens elúciós technikákban használt jellemzők A gradiens elúció általában - lineáris gradiens esetén - egy átlagos retenciós tényezővel, gradiens idővel, gradiens meredekséggel, kiindulási és végső oldószer koncentrációval jellemezhető: Retenciós tényező: logk = logk b t t k = 1 log(2,3k b + 1) b Gradiens retenciós idő: t = t (k + 1) Gradiens meredekség: b = V Ft log k k vagy Ahol k g gradiens retenciós tényező k 0 b t G k A b = B% t induló oldatban mért izokratikus retenciós tényező gradiens meredeksége gradiens ideje (min) A mozgófázisban mért izokratikus retenciós tényező 5
7 k B F B% V m B mozgófázisban mért izokratikus retenciós tényező áramlási sebesség (ml/min) gradiens tartomány (a végső és a kiindulási mozgófázis koncentráció különbsége) oszlop holttérfogata (ml) 1.4. Gradiens idő csökkentése és hatása az elválasztásra A t G csökkentésével a retenciós idő csökken, nő a csúcsmaximumban a koncentráció, ezért az érzékenység növelhető, de csökken a szelektivitás. Szűkülnek a zónák, nőnek a látszólagos elméleti tányérszámok. Mindez csak akkor igaz, ha közben a retenciós sorrend nem változik. Ha csak apoláris (diszperziós) kölcsönhatás van, akkor nincs retenciósorrend változás (reguláris viselkedés). A legkisebb t G -t kell használni R s figyelembe vételével. Minden esetben a legkritikusabb párra kell az R s 1,5 feltételnek teljesülnie Gradiens elúció alapproblémái Egyensúlybeállás A gradiens elúciónál a mozgófázis összetétele időben változik. A mérés során megváltozik az állófázis felületén az erősebben adszorbeálódó komponens mennyisége, az állófázis felületi összetétele. Amikor visszatérünk a gyengébb komponens összetételhez, hogy a következő mérést indítsuk, akkor a visszatartás csak akkor lesz ugyanolyan, ha az állófázis felületi összetétele is ugyanolyan lesz, mint az előző mérésnél. A következő mérés előtt vissza kell állítani a kezdeti körülményeket, a kérdés, hogy az egyensúly újbóli beállását jelenti-e, ha igen, akkor ez időigényes és csökken a mérések száma. Vizsgáljuk meg a továbbiakban, hogy milyen esetben térhetünk el ettől a feltételtől. Alaptétel, hogy a retenció ismételhetőségére akkor van lehetőségünk, ha egyrészt betartjuk, hogy az A mozgófázis összetétele olyan, hogy a legkisebb koncentrációjú komponensre is igaz, hogy ennél a mozgófázis összetételnél k 10, másrészt az állófázis felületi összetétele minden egyes mérésnél ugyanaz. Amennyiben az előzőleg megadott feltételek teljesülnek, akkor nem minden esetben követeljük meg a teljes egyensúlybeállást, csak azt, hogy mindig azonos 6
8 állapotból induljon a következő mérés. Ennek feltétele, hogy automata mintaadagoló alkalmazzunk. Ekkor az első mérésnél a visszatartások és a szelektivitások mások lesznek, mint az azt követő méréseknél. A gradiens elúciós méréseknél az oldószertisztaság ellenőrzése alapvető, ezért ennél a megközelítésnél az első mérést ennek ellenőrzésére használjuk, és 0 sorszámmal jelöljük. A továbbiakban minden egyes mérésnél az időnek szigorúan azonosnak kell lennie. Ezt csak automata mintaadagolóval lehet megvalósítani. Minden egyes méréssorozatnál a 0, 1, 2, n sorrendet kell követni. Kézi adagolásnál csak az egyensúly beállta után adagolhatjuk a következő mintát. Minden egyes szekvencia után az első mérésnél újból a 0 mérést el kell végeznünk Mozgófázis tisztasága Az oldószerek szennyező komponensei a gyengébb oldószernél adszorbeálódnak az állófázison. Amíg csak a gyengébb A oldószer áramlik, a kolonna on-line dúsítóként működik, injektálásra összegyűjti a szennyezőket. A B oldószerből is, amíg nagy a mozgófázis víztartalma a szennyezők adszorbeálódnak az állófázis felületén. Mikor növeljük az erősebb B oldószert, k 10-et elérve a többkomponensű szennyező front mozogni, majd szétválni kezd, végül elég nagy B %-nál elérik a detektort. Ekkor a kromatogramon műtermékek, szellemcsúcsok jelennek meg. Ezért elengedhetetlen minden egyes méréssorozatnál a 0 lépés, azaz az oldószertisztaság ellenőrzése. A víz nagy problémát jelent, mert mindig tartalmaz szerves anyagot, ahány fajta vízelőkészítés, annyi féle tisztaságú kromatográfiás víz van. A pufferek UV cut-off-ját is le kell ellenőrizni. A szerves pufferek szennyezettebbek, mint a szervetlenek. Tehát nagy érzékenységű méréseknél a fentebb említett anyagok tisztaságát ellenőrizni kell Retenciós sorrend, szelektivitásváltozás Kromatográfiásan rokon vegyületek elválasztásánál a gradiens elúció nem okoz retenciós sorrendváltozást, de a szelektivitás általában csökken, hiszen az állófázis hatásának nagy részét lecsökkentjük, csak a kezdeti kötődés mértéke a meghatározó. Nem rokon vegyületeknél attól függően, hogy hol eluálódnak, retenciós sorrendváltás történhet, a szelektivitás pedig csökkenhet is, nőhet is. 7
9 Izokratikus szakasz hatása Ha a mérés közbe vagy a végére beépítünk egy izokratikus szakaszt a szelektivitás növelése miatt, akkor már nem lesz igaz, hogy minden egyes kromatográfiás csúcsra azonos zónaszélesedést kapunk. Csak akkor érdemes izokratikus szakaszt iktatni a rendszerbe, ha szelektivitást akarunk növelni Oldószer probléma Alapkövetelmény, hogy az A oldószernek a lehető leggyengébbnek kell lennie. A legkevésbé visszatartott komponensre is teljesülnie kell, hogy k 10. Ha A a lehető leggyengébb, kérdéses, hogy feloldódik-e benne a minta. Ha nem, és nagyobb szerves tartalmú oldatban kell feloldani, a minta kicsapódhat, vagy legalábbis szélesedik a zóna. A jelentős zónaszélesedés ekkor kis térfogatú minta adagolásával kerülhető el Detektor Az alkalmazott detektálási módnak kompatibilisnek, összeférhetőnek kell lenni a változó mozgófázis tulajdonságokkal. Ezt figyelembe véve az RI-detektor gradiens módszernél nem használható. Vezetőképességi detektor alkalmazása az egykolonnás ionkromatográfiánál különleges technikával, a sógradiens megvalósításánál lehetséges. Az RP-IP-HPLC módszerhez történő gradiens elúció tervezése során szintén a fentebb említett problémakört kell szemügyre venni, figyelve arra, hogy a só koncentráció hatása nagyobb, mint RP-HPLC esetén, ezért az összes só (ionpár képző + puffer + esetlegesen hozzáadott semleges só) koncentrációját állandó értéken kell tartani. 8
10 2. Gradiens elúció HILIC-ben A hidrofil kölcsönhatási folyadék kromatográfia (Hydrophilic Interaction Liquid Chromatoraphy) cukrok, újabban nagy polaritású és ionos vegyületek elválasztására kifejlesztett kromatográfiás módszer, melynél több, egymás mellett lejátszódó folyamat szabhatja meg az elválasztás hatékonyságát. A módszer egy, a poláris vegyületek megkötésére alkalmas poláris állófázist alkalmaz, melyhez egy kevésbé poláris mozgófázist rendelnek. Ez biztosítja az eltérő vándorlási sebesség kialakítását a komponensek között, ugyanis azok az eltérő polaritás erősségüktől függően különbözőképpen fognak megoszlani a két fázis között. A visszatartást jelentősen befolyásolja a mozgófázis összetétele. A (pufferelt) víz szerves oldószer tartalmának változtatásával növelhető, vagy csökkenthető a komponensek retenciós ideje, ugyanis az határozza meg a poláris vegyületek oldhatóságát a mozgófázisban. A gradiens elúció egy gyűjtőfogalom. Ez általánosan olyan paraméter változtatásokat jelent a kromatográfiás rendszerben, melyek hatására csökken a vegyületek retenciója. Oldószer gradiensről beszélünk, ha mozgófázis elúciós erősségét növeljük, ezáltal lecsökkentve az állófázis visszatartását. Gyakorlatban főleg ezt alkalmazzák. Sógradiens a kettősionokat tartalmazó állófázisoknál puffer-koncentráció növelését jelenti, mellyel az ionogén anyag retencióját csökkentik. A hőmérséklet-gradiens az elválasztás hőmérsékletének növelését jelenti, amelynek eredményeképp nő a komponensek koncentrációja a mozgófázisban, míg a ph gradiens a ph változtatását jelenti az visszatartás csökkentésének függvényében Oldószer gradiens tervezése HILIC módszerre A módszerfejlesztések első lépése, így az oldószer gradiens megtervezése is az ismert lehetséges molekulaszerkezetek függvényében az állófázis kiválasztása, mely elsődlegesen szabja meg a komponensek visszatartását. Az állófázisoknak itt is meg kell felelniük az általános elvárásoknak, azaz mechanikailag stabilisnak, kis szemcseátmérőjűnek, mikropórusmentesnek, valamint többnyire homogén szorpciós erősségű felületűnek kell lennie, emellett a poláris vegyületek megkötésére alkalmas poláris felülettel kell rendelkeznie. Így többnyire bármely normálfázisú folyadékkromatográfiában használt állófázisok alkalmazhatók HILICben is. Az elválasztás, visszatartás szempontjából jelentős az állófázis csoportjainak a pk a 9
11 értékei, ugyanis ezek fogják az egyes komponensekkel való kölcsönhatásokat meghatározni. Ezen paraméterek és lehetőségek figyelembe vételével választandó ki az alkalmazott állófázis. Az állófázis meghatározását követően célszerű a lehető legjobb elválasztást biztosító eluenspárok kiválasztása. A HILIC mozgófázisainak, hasonlóan az állófázisokhoz, eleget kell tenniük az általános, egyéb kromatográfiás módszereknél alkalmazott feltételeknek, itt még plusz követelményként szerepel az, hogy az eluensnek az állófázis felületén kialakuló vízréteghez képest kevésbé polárosnak kell lennie. A HILIC módszer mozgófázisa minden esetben tartalmaz kis mennyiségű vizet, ezáltal az állófázis felületén létrejövő vízréteg és a kevésbé poláris mozgófázis közötti eltérő megoszlás eredményeként a komponensek különböző vándorlási sebességekkel jönnek le a kolonnáról. Minél polárosabb egy komponens, annál hosszabb ideig tartózkodik az állófázison. Növelve a mozgófázis víztartalmát (legerősebb összetevő), annak nő a polaritása, nő az elúciós erőssége, így a komponensek visszatartása lecsökken. Az eluenspár másik komponense egy vízzel elegyedő, lehetőleg kis viszkozitású szerves oldószer. A leggyakrabban alkalmazott oldószerek a metanol, acetonitril, etanol, izoporopanol, tetrahidrofurán. Ezek polaritása a megadott sorrendben csökken. Az acetonitlril előnyös tulajdonságai miatt az egyik leginkább használt szerves oldószer. Ez a vízzel alkotott tf%-os összetételnél jóval kisebb viszkozitást mutat, mint az egyéb oldószerek, így alkalmazása szűkebb kromatográfiás csúcsokat eredményez, emellett 3-6 ml/perces térfogatáramlási sebességek beállításának lehetősége csökkenti az elemzési időt. 2. ábra: A viszkozitás mértéke különböző szerves oldószerek eltérő koncentrációi esetén 10
12 Mivel az elválasztás alapja a határfelületen kialakuló vízréteg, ezért csak szerves oldószerrel nem indítható gradiens. A leggyengébbik oldószernek mindig kell tartalmaznia 2-3 tf% vizet (A tartály) ahhoz, hogy a legkevésbé visszatartott komponens koncentrálódjon a kolonna elején és ne legyen nagyobb a csúcsszélesedése a többi komponens csúcsához képest. 40 tf% víztartalomnál már a vegyületek visszatartása elhanyagolható, az eluens olyan erős, hogy nem kötődnek meg a komponensek az állófázison. Az erős oldószertartályban (B tartály) így tf% szerves oldószer tartalmú eluens lesz jelen. 3. ábra: Kromatográfiás rendszer általános felépítése Savas vagy bázikus csoportot tartalmazó vegyületek elválasztásánál puffer alkalmazása szüksége, ugyanis az ionos vegyületek bevitele a mozgófázisba általában csökkenti az állófázis stabilitását. A puffernek szilárd anyagtól mentesnek kell lennie, az UVcut-off hullámhosszának kisebbnek kell lennie a mérésnél alkalmazott hullámhossztól, valamint a lehető legtisztább anyagnak kell lennie, ami beszerezhető. HILIC-ben alkalmazott nagy szerves anyag tartalmú mozgófázisok miatt szerves alapú pufferekre korlátozódik a választás. Jelentős figyelmet kell fordítani arra, hogy nagy szerves oldószer koncentrációknál szilárd anyag kiválása lehetséges így gradiens elúciók végzése során a minimális víztartalom felé közeledve egyre csökken a megengedett puffer-koncentráció. Ennek alapján a mozgófázis szervesanyag-tartalma szabja meg az elválasztásban alkalmazható puffer-koncentrációt. Szervetlen pufferek kikristályosodnak a szerves oldószeráramban, így foszfát-pufferek alkalmazása nem megengedett. Helyette ammónium-acetát/ecetsavat, ammóniumformiát/hangyasavat használnak. Tompító hatású anyagok (puffer) alkalmazása esetén is tekintettel kell lennünk a szerves oldószer tartalomra, ugyanis annak nagy koncentrációja jelentősen eltolja a tompító oldószer pk a értékét a vízhez viszonyítva, ami rontja az elválasztást. Ugyancsak fontos pontja a gradiens elúció tervezésnek a ph kontroll szükségességének megállapítása. Folyadékkromatográfiában biztosítani kell, hogy a többféle formában jelenlévő komponensek aránya elválasztás során ne változzon. Ehhez ismernünk 11
13 kell a vegyületek molekuláris formáit, amelyek általában a pk a értékek (ph) függvényei. A vegyületek ionos formái nagy polaritásúak, HILIC elválasztáshoz alkalmasak. A vegyületek polaritásának ph függéseit az lgd-ph görbékkel lehet szemléltetni. 4. ábra: LogD ph diagram Ezen S-görbék inflexiós pontjai adják a pk a értékeket és határolják be azon phtartományokat, amelyekben erősen poláris, ionos formában, ill. kevésbé poláris formában szerepelnek a vegyületek. Ionos formák vízoldhatósága jelentősen nagyobb, mint a szerves oldószerben való oldhatósága, így a kolonnán kialakuló vízrétegben nagyobb lesz a koncentrációjuk, mint a mozgófázisban, a visszatartás nagyobb lesz, mint a kétszeres holtidő, azaz teljesül az elválaszthatóság egyik feltétele. A másik fontos szerepük, hogy a lgd értékek közötti különbség irányadóként használható a csúcsok átlapolásának a valószínűsítésére. Minél közelebb van 2 vegyület lgd értéke egymáshoz, annál nagyobb valószínűséggel fognak a csúcsai átlapolni elválasztáskor. Ugyancsak alkalmasak a görbék annak a szemléltetésére, hogyan változik a megoszlás a két fázis között a ph-változtatás hatására. Erre példa néhány nagy polaritású, protonfunkciós vegyület megoszlásának ábrázolása a ph függvényében n-oktanol-víz között: 12
14 5. ábra: LogD ph diagram A ph-kontroll meghatározásakor figyelembe kell vennünk azt a tényt is, hogy a phváltozás változtatja az állófázis felületét is, a csoportok protonált/deprotonált alakját. Például a szilkagél csoportjai a ph függvényében (6. ábra): 6. ábra: a szilkagél csoportjai a ph függvényében Mindezen hatások figyelembe vételével, majd az eredmények összevetésével kell beállítani, ill. változtatni az eluens ph értékét. A minta komponensekre bontása nem minden esetben igényel oldószer gradienst. Azt, hogy mikor eredményesebb ennek használata, egy általános gradiens elúció alkalmazásával dönthetjük el. Oldószer gradiens esetén, mint azt már korábban említettük, növeljük az elúciós erősséget, ami HILIC esetén a víz koncentrációjának növelését jelenti. Általános gradiens elúció végzése esetén a leggyengébb mozgófázis összetételből kiindulva, haladunk a legerősebbig. A mozgófázis összetételét behatárolja az a tény, hogy 40% víztartalom felett az 13
15 összes poláris komponens eluálódik, míg 2-4% alatt nem indul meg az elválasztás, mivel nem alakul ki vízréteg a határfelületi fázisban. Így a visszatartást jelentősen befolyásoló szerves oldószertartalmat ennek figyelembe vételével határozzák meg. A különböző oldószerek hatását az elválasztásra, a vízre, vagyis a legerősebb eluensre vonatkoztatva adjuk meg a következő összefüggésben: lgk = A B φ, ahol A és B a kolonnától és a vegyületektől függő állandók, míg a φ víz a víz térfogatszázalékát jelenti a mozgófázisban. Általános gradiens elúció alkalmazásakor lineáris gradiens profilt használnak, ennek ugyanis jobban ismert az elméleti háttere, mint az egyéb profiloknak. Így a kapott kromatogramokból több következtetés vonható le. Fontos ismernünk a t M holtidőt, a kétszeres holtidőt, melynél a visszatartási faktor ( lgk) értéke 1, valamint a tizenegyszeres holtidőt, melynél 10 a retenciós faktor (lgk). Ezek azok a legfontosabb paraméterek, melyek megadják egy mozgófázis összetétel alkalmazhatóságát a minta komponenseinek szétválasztására. Abban az esetben, ha az általános gradiens elúció kromatogramjában a leghamarabb és legkésőbb leváló komponenscsúcsok közötti távolság nagyobb, mint 2-3 lgk, azaz ha a legpolárisabb és a legkevésbé poláris komponens között túl nagy a polaritás különbség, ill. ha a legkésőbb leváló komponens lgk>2-3-nál válik le, akkor egy lépésben a feladat nem oldható meg izokratikusan, így a minta szétválasztása gradiens elúció alkalmazását igényli. A nagy retenciós idő különbség ugyanis azt jelenti, hogy a komponensek elúciója nagyon eltérő oldószer összetételnél következik be. Abban az esetben, ha nagyobb a komponens retenciós faktora, mint 10 (5.ábra, B), a mozgófázis víztartalmát kell növelni, vagyis erősebb grádienssel igényelt az elválasztás indítása, esetleg növelendő a grádiens sebessége, így egységnyi idő alatt nagyobb mértékben nő a mozgófázis elúciós erőssége. 14
16 7. ábra Ha kisebb a retenciós faktor 1-nél (7. ábra, A), túl erős eluenssel indítottuk az elválasztást, így legkevésbé poláros komponens túl hamar jött le a kolonnáról, ami zavarhatja a többi komponens csúcsot, és a mérési eredmények helyességét. Emiatt csökkentendő a mozgófázis víztartalma. Abban az esetben, ha az általános gradiens elúció kromatogramjainak kiértékeléséből arra a következtetésre jutottunk, hogy az elválasztás egy lépésben csak gradiens elúcióval végezhető el, akkor meg kell adnunk az mozgófázis induló és befejező összetételét. Erről az előzőek alapján tudjuk, hogy a gradienst nem indíthatjuk csak acetonitrilből (vagy egyéb szerves oldószerből), mert nem fog kialakulni az állófázis és mozgó fázis közötti vízréteg, ami a visszatartási faktort jóval 10 felé tolná. Nagy víztartalomból sem indulhatunk ki, mert ekkor a legkevésbé poláris komponens visszatartása nem lesz megfelelő és nem fog a kolonna elején koncentrálódni, ami csúcsszélesedést okoz. A jó gradiens elúció tervezése az eddig említett hatások tanulmányozásával és az elválasztandó komponensek molekulaszerkezeteire való visszavezetésével oldható meg. A megtervezett gradiens elúció ismételhetőségének megállapításához a gyakorlatban alkalmazott gradiens elúciós folyamatból indulunk ki. Ennek ábrája: 15
17 8. ábra Amint azt a 8. ábra is mutatja, minden ismétlésnél ugyanolyan helyzetből indulunk ki, így minden lépésben ugyanazt a visszatartást kapjuk. Az I. szakasz a mérési ciklus indítása előtti időt jelenti, a II. a mozgófázis elúciós erősségének növelését a leggyengébbtől a legerősebbig, a III. szakasz az eredeti gradiens helyzetbe való visszaállást, míg a IV. szakasz a határfelületi vízréteg kialakulását jelöli. Ahhoz, hogy a művelet megismételhető legyen, minden esetben ugyanabból a gradiens helyzetből kell elindítani a mérést, nem szükséges megvárni a határfelületen kialakuló vízréteg egyensúlyi állapotba kerülését (IV.szakaszon). 16
18 Irodalomjegyzék Dr. Fekete Jenő: Folyadékkromatográfia elmélete és gyakorlata Tankönyv (2006) A folyadékkromatográfia újabb fejlesztési irányai HILIC (2009) J. García-Lavandeira, J.A. Martínez-Pontevedra, M. Lores, R. Cela: Computer-assisted transfer of programmed elutions in reversed-phase high performance liquid chromatography (2006) 17
Nagyhatékonyságú folyadékkromatográfia (HPLC)
Nagyhatékonyságú folyadékkromatográfia (HPLC) Kromatográfiás módszerek osztályba sorolása 2 Elúciós technika A mintabevitel ún. dugószerűen történik A mozgófázis a kromatogram kifejlesztése alatt folyamatosan
RészletesebbenAz elválasztás elméleti alapjai
Az elválasztás elméleti alapjai Az elválasztás során, a kromatogram kialakulása közben végbemenő folyamatok matematikai leirása bonyolult, ezért azokat teljességgel nem tárgyaljuk. Cél: * megismerni az
RészletesebbenHagyományos HPLC. Powerpoint Templates Page 1
Hagyományos HPLC Page 1 Elválasztás sík és térbeli ábrázolása Page 2 Elválasztás elvi megoldásai 3 kromatográfiás technika: frontális kiszorításos elúciós Page 3 Kiszorításos technika minta diszkrét mennyisége
RészletesebbenMozgófázisok a HILIC-ban. Módszer specifikus feltétel: kevésbé poláris, mint az állófázis vagy a víz Miért a víz?
Dr Fekete Jenı: A folyadékkromatográfia újabb fejlesztési irányai - HILIC Mozgófázisok a HILIC-ban Módszer specifikus feltétel: kevésbé poláris, mint az állófázis vagy a víz Miért a víz? Mitıl l poláris
RészletesebbenKromatográfia Bevezetés. Anyagszerkezet vizsgálati módszerek
Kromatográfia Bevezetés Anyagszerkezet vizsgálati módszerek Pannon Egyetem Mérnöki Kar Anyagszerkezet vizsgálati módszerek Kromatográfia 1/ 37 Analitikai kémia kihívása Hagyományos módszerek Anyagszerkezet
RészletesebbenAdatgyőjtés, mérési alapok, a környezetgazdálkodás fontosabb mőszerei
GazdálkodásimodulGazdaságtudományismeretekI.Közgazdaságtan KÖRNYEZETGAZDÁLKODÁSIMÉRNÖKIMScTERMÉSZETVÉDELMIMÉRNÖKIMSc Tudományos kutatásmódszertani, elemzési és közlési ismeretek modul Adatgyőjtés, mérési
RészletesebbenFordított fázisú ionpár- kromatográfia ( Reversed Phase Ion-Pair Chromatography, RP-IP-HPLC )
Fordított fázisú ionpár- kromatográfia ( Reversed Phase Ion-Pair Chromatography, RP-IP-HPLC ) Az ionos vagy ionizálható vegyületek visszatartása az RP-HPLC-ben kicsi. A visszatartás növelésére és egyúttal
RészletesebbenKiegészítés Dr. Lázár István Nagynyomású folyadékkromatográfia (HPLC) című segédanyagához Készült a HPLC II. gyakorlathoz
Kiegészítés Dr. Lázár István Nagynyomású folyadékkromatográfia (HPLC) című segédanyagához Készült a HPLC II. gyakorlathoz Debreceni Egyetem Szervetlen és Analitikai Kémiai Tanszék 2017. A HPLC II. gyakorlaton
RészletesebbenKromatográfiás módszerek
Kromatográfiás módszerek Mi a kromatográfia? Kromatográfia ugyanazon az elven működik, mint az extrakció, csak az egyik fázis rögzített ( állófázis ) és a másik elhalad mellette ( mozgófázis ). Az elválasztást
RészletesebbenLABORLEIRAT A HPLC LABORATÓRIUMI GYAKORLATHOZ (ANALITIKAI KÉMIA 1.)
LABORLEIRAT A HPLC LABORATÓRIUMI GYAKORLATHOZ (ANALITIKAI KÉMIA 1.) TARTALOMJEGYZÉK: KÖVETELMÉNYEK... 2 A FOLYADÉKKROMATOGRÁFIA ALAPJAI... 2 Az elválasztás... 2 A készülék... 3 Folyadékkromatográfiás módszerek,
RészletesebbenMérési módszer szelektivitása, specifikus jellege
Dr. Abrankó László Elválasztástechnika az analitikai kémiában Mérési módszer szelektivitása, specifikus jellege Egy mérési módszernek, reagensnek (vagy általában kölcsönhatásnak) azt a jellemzőjét, hogy
RészletesebbenPer-Form Hungária Kft Budapest, Komócsy u. 52. Felnőttképz. nyilv. szám: Akkredit. lajstromszám: AL-1666/
XXV. Kromatográfiás iskola Azonosító szám: 5400, műszaki technikusi képesítések (szakmai tanfolyamok felnőttképzés keretében) Tájékoztató felnőttképzési programról A Budapesti Műszaki és Gazdaságtudományi
RészletesebbenSERTRALINI HYDROCHLORIDUM. Szertralin-hidroklorid
Sertralini hydrochloridum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.7.1-1 SERTRALINI HYDROCHLORIDUM Szertralin-hidroklorid 01/2011:1705 javított 7.1 C 17 H 18 Cl 3 N M r 342,7 [79559-97-0] DEFINÍCIÓ [(1S,4S)-4-(3,4-Diklórfenil)-N-metil-1,2,3,4-tetrahidronaftalin-1-amin]
RészletesebbenAMIKACINUM. Amikacin
07/2012:1289 AMIKACINUM Amikacin C 22 H 43 N 5 O 13 M r 585,6 [37517-28-5] DEFINÍCIÓ 6-O-(3-Amino-3-dezoxi-α-D-glükopiranozil)-4-O-(6-amino-6-dezoxi-α-D-glükopiranozil)-1-N-[(2S)-4- amino-2-hidroxibutanoil]-2-dezoxi-d-sztreptamin.
RészletesebbenTájékoztató képzési programról. XLIII. Kromatográfiás tanfolyam Csoportos képzés, amely nem a felnőttképzési törvény hatálya alá tartozó képzés.
Tájékoztató képzési programról XLIII. Kromatográfiás tanfolyam Csoportos képzés, amely nem a felnőttképzési törvény hatálya alá tartozó képzés. A Budapesti Műszaki és Gazdaságtudományi Egyetem, Vegyészmérnöki
RészletesebbenNAGYHATÉKONYSÁGÚ FOLYADÉKKROMA- TOGRÁFIA = NAGYNYOMÁSÚ = HPLC
NAGYHATÉKONYSÁGÚ FOLYADÉKKROMA- TOGRÁFIA = NAGYNYOMÁSÚ = HPLC Az alkalmazott nagy nyomás (100-1000 bar) lehetővé teszi nagyon finom szemcsézetű töltetek (2-10 μm) használatát, ami jelentősen megnöveli
RészletesebbenAlapösszef. és s azok lasztásrasra
Alapösszef sszefüggések és s azok hatása az elválaszt lasztásrasra (A kromatográfia felosztása. Retenciós idő, reletív retenciós idő,visszatartási tényező, szelektivitás, elválasztási tényező, csúcsszimmetria,
RészletesebbenXXXVI. Kromatográfiás iskola
XXXVI. Kromatográfiás iskola A Budapesti Műszaki és Gazdaságtudományi Egyetem, Vegyészmérnöki és Biomérnöki Kar Szervetlen és Analitikai Kémia Tanszéke és a Per Form Hungária Kft. ismét megrendezi kromatográfiás
RészletesebbenLACTULOSUM. Laktulóz
Lactulosum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.6.3-1 01/2009:1230 LACTULOSUM Laktulóz és C* epimere C 12 H 22 O 11 M r 342,3 [4618-18-2] DEFINÍCIÓ 4-O-(β-D-galaktopiranozil)-D-arabino-hex-2-ulofuranóz- Tartalom: 95,0 102,0
RészletesebbenCLAZURILUM AD USUM VETERINARIUM. Klazuril, állatgyógyászati célra
Clazurilum ad usum veterinarium Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.6.8-1 07/2010:1714 CLAZURILUM AD USUM VETERINARIUM Klazuril, állatgyógyászati célra C 17 H 10 Cl 2 N 4 O 2 M r 373,2 [101831-36-1] DEFINÍCIÓ (2RS)-[2-Klór-4-(3,5-dioxo-4,5-dihidro-1,2,4-triazin-2(3H)-il)fenil](4-
RészletesebbenGLUCAGONUM HUMANUM. Humán glükagon
01/2008:1635 GLUCAGONUM HUMANUM Humán glükagon C 153 H 225 N 43 O 49 S M r 3483 DEFINÍCIÓ A humán glükagon 29 aminosavból álló polipeptid; szerkezete megegyezik az emberi hasnyálmirígy α-sejtjei által
RészletesebbenXXXXI. Kromatográfiás iskola
XXXXI. Kromatográfiás iskola A Budapesti Műszaki és Gazdaságtudományi Egyetem, Vegyészmérnöki és Biomérnöki Kar Szervetlen és Analitikai Kémia Tanszéke és a Per-Form Hungária Kft. ismét megrendezi kromatográfiás
RészletesebbenTájékoztató képzési programról
Tájékoztató képzési programról XLVI. Kromatográfiás tanfolyam Csoportos képzés, amely nem a felnőttképzési törvény hatálya alá tartozó képzés. A Budapesti Műszaki és Gazdaságtudományi Egyetem, Vegyészmérnöki
Részletesebben89. A szorpciós folyamat szerint milyen kromatográfiás módszereket ismer? Abszorpciós, adszorpció, kemiszorpció, gél
86. Miért van szükség az elválasztó módszerek alkalmazására? a valós rendszerek mindig többkomponensűek és nincsen minden anyagra specifikus reagens/reagens sor, amely az egymás melletti kimutatást/meghatározást
RészletesebbenPREGABALINUM. Pregabalin
04/2016:2777 PREGABALINUM Pregabalin C8H17NO2 Mr 159,2 [148553-50-8] DEFINÍCIÓ (3S)-3-(Aminometil)-5-metilhexánsav. Tartalom: 98,0 102,0% (vízmentes anyagra). SAJÁTSÁGOK Küllem: fehér vagy csaknem fehér
RészletesebbenFekete Jenő. Ionkromatográfiaés ioncserés alapfogalmak
Fekete Jenő Ionkromatográfiaés ioncserés alapfogalmak Irodalmak Dr. Fekete Jenő: A folyadékkromatográfia elmélete és gyakorlata, 231-258. Műszer és Mérésügyi Közlemények, 37. évfolyam, 67. szám, 2001 FeketeJenő-HeteGabriella-Ritz
RészletesebbenSZABADALMI IGÉNYPONTOK. képlettel rendelkezik:
SZABADALMI IGÉNYPONTOK l. Izolált atorvasztatin epoxi dihidroxi (AED), amely az alábbi képlettel rendelkezik: 13 2. Az l. igénypont szerinti AED, amely az alábbiak közül választott adatokkal jellemezhető:
RészletesebbenTIZANIDINI HYDROCHLORIDUM. Tizanidin-hidroklorid
Tizanidini hydrochloridum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.8.4-1 04/2015:2578 TIZANIDINI HYDROCHLORIDUM Tizanidin-hidroklorid C 9H 9Cl 2N 5S M r 290,2 [64461-82-1] DEFINÍCIÓ [5-Klór-N-(4,5-dihidro-1H-imidazol-2-il)2,1,3-benzotiadiazol-4-amin]
RészletesebbenInverz módszerek kidolgozása a molekuláris kölcsönhatások vizsgálatára folyadékkromatográfiában. az OTKA számú kutatás szakmai zárójelentése
Inverz módszerek kidolgozása a molekuláris kölcsönhatások vizsgálatára folyadékkromatográfiában az OTKA 48887 számú kutatás szakmai zárójelentése A kromatográfiás elválasztások során lejátszódó folyamatok
RészletesebbenTájékoztató képzési programról XLV. Kromatográfiás tanfolyam. Csoportos képzés, amely nem a felnőttképzési törvény hatálya alá tartozó képzés.
Tájékoztató képzési programról XLV. Kromatográfiás tanfolyam Csoportos képzés, amely nem a felnőttképzési törvény hatálya alá tartozó képzés. A Budapesti Műszaki és Gazdaságtudományi Egyetem, Vegyészmérnöki
RészletesebbenSzénhidrátok elektrokémiai detektálása, fókuszban a laktóz
Szénhidrátok elektrokémiai detektálása, fókuszban a laktóz Stefán G 1., M. Eysberg 2 1 ABL&E-JASCO Magyarország Kft., Budapest 2 Antec Scientific, Zoeterwoude, Hollandia Szénhidtráttartalom meghatározás
Részletesebben10. (IPARI) KROMATOGRÁFIA
0. (IPARI) KROMATOGRÁFIA Dr. Pécs Miklós Budapesti Műszaki és Gazdaságtudományi Egyetem, Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszertudomány Tanszék MŰVELETI SORREND 3. Tisztítás a termék és a szennyező anyagok
RészletesebbenLACTULOSUM LIQUIDUM. Laktulóz-szirup
Lactulosum liquidum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.6.3-1 01/2009:0924 LACTULOSUM LIQUIDUM Laktulóz-szirup DEFINÍCIÓ A laktulóz-szirup a 4-O-(β-D-galaktopiranozil)-D-arabino-hex-2-ulofuranóz vizes oldata, amelyet általában
RészletesebbenFENOFIBRATUM. Fenofibrát
Fenofibratum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.6.0-1 01/2008:1322 FENOFIBRATUM Fenofibrát C 20 H 21 ClO 4 M r 360,8 [49562-28-9] DEFINÍCIÓ 1-metiletil-[2-[4-(4-klórbenzoil)fenoxi]-2-metilpropanoát]. Tartalom: 98,0102,0%
Részletesebbenaz LC/GC tanfolyam nevű gyakorlat orientált, elméleti kromatográfiás képzés.
Kedves Kollégák! A KromKorm Kft. és a Gen-Lab Kft. közös szervezésében első alkalommal kerül megrendezésre 2018. 04. 09. 18. között az LC/GC tanfolyam nevű gyakorlat orientált, elméleti kromatográfiás
RészletesebbenModellező szoftver szerepe a Quality by Design elv folyadékkromatográfiás alkalmazásában. Készítette: Kormány Róbert
BUDAPESTI MŰSZAKI ÉS GAZDASÁGTUDOMÁNYI EGYETEM SZERVETLEN ÉS ANALITIKAI KÉMIA TANSZÉK Modellező szoftver szerepe a Quality by Design elv folyadékkromatográfiás alkalmazásában Doktori (PhD) értekezés Készítette:
Részletesebben9. Hét. Műszeres analitika Folyadékkromatográfia Ionkromatográfia Gélkromatográfia Affinitás kromatográfia Gázkromatográfia. Dr.
Bioanalitika előadás 9. Hét Műszeres analitika Folyadékkromatográfia Ionkromatográfia Gélkromatográfia Affinitás kromatográfia Gázkromatográfia Dr. Andrási Melinda Kromatográfia Nagy hatékonyságú, dinamikus
RészletesebbenLEVONORGESTRELUM. Levonorgesztrel
Levonorgestrelum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur. 8.0-1 01/2014:0926 LEVONORGESTRELUM Levonorgesztrel C 21 H 28 O 2 M r 312,5 [797-63-7] DEFINÍCIÓ 13-etil-17-hidroxi-18,19-dinor-17α-pregn-4-én-20-in-3-on. Tartalom:
RészletesebbenTájékoztató képzési programról
Tájékoztató képzési programról XLIV. Kromatográfiás tanfolyam Csoportos képzés, amely nem a felnőttképzési törvény hatálya alá tartozó képzés. A Budapesti Műszaki és Gazdaságtudományi Egyetem, Vegyészmérnöki
RészletesebbenDR. FEKETE JENŐ. 1. ábra: Átviteli módok HPLC, GC ill. CE technikák esetén
KÖRNYEZETI ANALITIKA I. DR. FEKETE JENŐ JEGYZET A 2003/04 ES TANÉV ŐSZI FÉLÉVÉNEK 3. ELŐADÁSÁHOZ. (02. 24) 1. KAPILLÁRIS ELEKTROFORÉZIS (CE) KÉSZÍTETTE: KELEMEN PÉTER, KORDA ANDRÁS A korábbi előadások
RészletesebbenÚJ GENERÁCIÓS PREPARATÍV OSZLOPOK
GEN-LAB Kft. 2008, VIII. évfolyam 3. szám Választható töltetek ÚJ GENERÁCIÓS PREPARATÍV OSZLOPOK megnövelt oszlop élettartam nagyobb hatékonyság nagy áramlási sebesség tűrés megnövelt terhelhetőség élesebb
RészletesebbenMérési feladat: Illékony szerves komponensek meghatározása GC-MS módszerrel
Kromatográfia A műszeres analízis kromatográfiás módszereinek feladata, hogy a vizsgálandó minta komponenseit egymástól elválassza, és azok minőségét, valamint mennyiségi viszonyait megállapítsa. Az elválasztás
RészletesebbenMICONAZOLI NITRAS. Mikonazol-nitrát
Miconazoli nitras Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.7.3-1 01/2012:0513 MICONAZOLI NITRAS Mikonazol-nitrát, HNO 3 C 18 H 15 Cl 4 N 3 O 4 M r 479,1 [22832-87-7] DEFINÍCIÓ [1-[(2RS)-2-[(2,4-Diklórbenzil)oxi]-2-(2,4-diklórfenil)etil]-1H-imidazol-3-ium]-nitrát.
RészletesebbenNagyhatékonyságú Folyadékkromatográfia
Nagyhatékonyságú Folyadékkromatográfia A kromatográfia a többfokozatú, nagyhatékonyságú, dinamikus elválasztási módszerek gyűjtőneve: közös alapjuk az, hogy az elválasztandó komponensek egy állófázis és
RészletesebbenRAMIPRILUM. Ramipril
Ramiprilum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.6.2-1 07/2008:1368 RAMIPRILUM Ramipril C 23 H 32 N 2 O 5 M r 416,5 [87333-19-5] DEFINÍCIÓ (2S,3aS,6aS)-1-[(S)-2-[[(S)-1-(etoxikarbonil)-3-. Tartalom: 98,0101,0% (szárított
RészletesebbenNATRII AUROTHIOMALAS. Nátrium-aurotiomalát
Natrii aurothiomalas Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.5.8-1 07/2007:1994 NATRII AUROTHIOMALAS Nátrium-aurotiomalát DEFINÍCIÓ A (2RS)-2-(auroszulfanil)butándisav mononátrium és dinátrium sóinak keveréke. Tartalom: arany
RészletesebbenKROMATOGRÁFIÁS VIZSGÁLATI MÓDSZEREK
KROMATOGRÁFIÁS VIZSGÁLATI MÓDSZEREK KÖRNYEZETMÉRNÖK HAGYOMÁNYOS KÉPZÉS TANTÁRGYI KOMMUNIKÁCIÓS DOSSZIÉ MISKOLCI EGYETEM MŐSZAKI ANYAGTUDOMÁNYI KAR KÉMIAI TANSZÉK Miskolc, 2008. Tartalomjegyzék 1. Tantárgyleírás,
RészletesebbenIPRATROPII BROMIDUM. Ipratropium-bromid
Ipratropii bromidum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.6.2-1 IPRATROPII BROMIDUM Ipratropium-bromid 01/2008:0919 javított 6.2 C 20 H 30 BrNO 3.H 2 O M r 430,4 [66985-17-9] DEFINÍCIÓ [(1R,3r,5S,8r)-3-[[(2RS)-3-Hidroxi-2-fenilpropanoil]oxi]-8-metil-8-(1-metiletil)-8-
RészletesebbenZárójelentés. ICP-OES paraméterek
Zárójelentés Mivel az előző, 9. részfeladat teljesítésekor optimáltuk a mérőrendszer paramétereit, ezért most a korábbi optimált paraméterek mellett, a feladat teljesítéséhez el kellett végezni a módszer
RészletesebbenIgény a pontos minőségi és mennyiségi vizsgálatokra: LC-MS/MS módszerek gyakorlati alkalmazása az élelmiszer-analitikában
: LC-MS/MS módszerek gyakorlati alkalmazása az élelmiszer-analitikában Tölgyesi Ádám Hungalimentária, Budapest 2017. április 26-27. Folyadékkromatográfiás hármas kvadrupol rendszerű tandem tömegspektrometria
RészletesebbenSíkkromatográfia. Kapacitásaránynak (kapacitási tényezőnek): a mérendő komponens állófázisában (n S ) és mozgófázisában (n M ) lévő anyagmennyiségei.
Síkkromatográfia A kromatográfia a többfokozatú, nagyhatékonyságú, dinamikus elválasztási módszerek gyűjtőneve: közös alapjuk az, hogy az elválasztandó komponensek egy állófázis és egy azon, meghatározott
RészletesebbenAz ionkromatográfia retenciós elmélete és alkalmazásai a kémiai analízisben
Az ionkromatográfia retenciós elmélete és alkalmazásai a kémiai analízisben OTKA zárójelentés 1. Makrociklusos anioncserélők vizsgálata és folyadékkromatográfiás módszer fejlesztése oxoanionok, halogenidek
RészletesebbenDr. Fekete Jenõ A folyadékkromatográfia újabb fejlesztési irányai HILIC
Dr. Fekete Jenõ A folyadékkromatográfia újabb fejlesztési irányai HILIC 2009 LaChrom Ultra UHPLC Sebesség és hatékonyság a kromatorgráfiában ÚJ! Merck Kft. Magyarország 1113 Budapest, Bocskai út 134-146.
RészletesebbenSzilikagél szerkezete
FLYADÉKKRMATGRÁFIA P-KNTRLL Krusper László DEBRECENI EGYETEM Szilikagél szerkezete 2 Az ábrák több, részben szerzői jogokkal védett műből, oktatási célra lettek kivéve. Továbbmásolásuk, terjesztésük nem
Részletesebbenhttp://apps.usp.org/app/uspnf/columnsdb.html Miben segít a lgd ph diagram? Mi olvasható le a diagramról? Szükséges-e ph kontrol (ha igen milyen ph-n dolgozzunk)? Milyen kromatográfiás technikát alkalmazzunk
RészletesebbenKromatográfiás módszerek a környezetvédelmi analízisben. Juvancz Zoltán
Kromatográfiás módszerek a környezetvédelmi analízisben Juvancz Zoltán Kromatográfia elınyei a környezeti analízisekben Pontos meghatározás nyomnyi mennyiségekre Mátrixkomponensek zavaró hatása kiküszöbölhetı
RészletesebbenCiklodextrinek alkalmazása folyadékkromatográfiás módszerekben Dr. Szemán Julianna
Ciklodextrinek alkalmazása folyadékkromatográfiás módszerekben Dr. Szemán Julianna Cyclolab Ciklodextrin Kutató-Fejlesztő Laboratórium Kft. 197. Budapest, Illatos u. 7. cyclolab@cyclolab.hu www.cyclolab.hu
Részletesebben7. Festékelegyek elválasztása oszlopkromatográfiás módszerrel. Előkészítő előadás 2015.03.09.
7. Festékelegyek elválasztása oszlopkromatográfiás módszerrel Előkészítő előadás 2015.03.09. A kromatográfia A módszer során az elválasztandó anyagot áthajtjuk egy mozgó fázisban egy álló fázison keresztül
RészletesebbenAz elektromos kettősréteg. Az elektromos potenciálkülönbség eredete, értéke és az azt befolyásoló tényezők. Kolloidok stabilitása.
Az elektromos kettősréteg. Az elektromos potenciálkülönbség eredete, értéke és az azt befolyásoló tényezők. Kolloidok stabilitása. Adszorpció oldatból szilárd felületre Adszorpció oldatból Nem-elektrolitok
RészletesebbenAMPHOTERICINUM B. Amfotericin B
Amphotericinum B Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.6.6. - 1 AMPHOTERICINUM B Amfotericin B 01/2009:1292 javított 6.6 C 47 H 73 NO 17 M r 924 [1397-89-3] DEFINÍCIÓ Streptomyces nodosus meghatározott törzseinek tenyészeteiből
RészletesebbenSzakértesítő 1 Interkerám szakmai füzetek A folyósító szerek viselkedése a kerámia anyagokban
Szakértesítő 1 Interkerám szakmai füzetek A folyósító szerek viselkedése a kerámia anyagokban A folyósító szerek viselkedése a kerámia anyagokban Bevezetés A kerámia masszák folyósításkor fő cél az anyag
RészletesebbenCLOXACILLINUM NATRICUM. Kloxacillin-nátrium
Cloxacillinum natricum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.5.7-1 04/2007:0661 CLOXACILLINUM NATRICUM Kloxacillin-nátrium C 19 H 17 ClN 3 NaO 5 S.H 2 O M r 475,9 DEFINÍCIÓ Nátrium-[(2S,5R,6R)-6-[[[3-(2-klórfenil)-5-metilizoxazol-4-il]karbonil]amino]-
RészletesebbenSZERVETLEN ALAPANYAGOK ISMERETE, OLDATKÉSZÍTÉS
SZERVETLEN ALAPANYAGOK ISMERETE, OLDATKÉSZÍTÉS ESETFELVETÉS MUNKAHELYZET Az eredményes munka szempontjából szükség van arra, hogy a kozmetikus, a gyakorlatban használt alapanyagokat ismerje, felismerje
RészletesebbenTRIPSZIN TISZTÍTÁSA AFFINITÁS KROMATOGRÁFIA SEGÍTSÉGÉVEL
TRIPSZIN TISZTÍTÁSA AFFINITÁS KROMATOGRÁFIA SEGÍTSÉGÉVEL Az egyes biomolekulák izolálása kulcsfontosságú a biológiai szerepük tisztázásához. Az affinitás kromatográfia egyszerűsége, reprodukálhatósága
RészletesebbenTALAJVÉDELEM XI. A szennyezőanyagok terjedését, talaj/talajvízbeli viselkedését befolyásoló paraméterek
TALAJVÉDELEM XI. A szennyezőanyagok terjedését, talaj/talajvízbeli viselkedését befolyásoló paraméterek A talajszennyezés csökkenése/csökkentése bekövetkezhet Természetes úton Mesterséges úton (kármentesítés,
RészletesebbenÉlelmiszerek. mikroszennyezőinek. inek DR. EKE ZSUZSANNA. Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium. ALKÍMIA MA november 5.
Élelmiszerek mikroszennyezőinek inek nyomában DR. EKE ZSUZSANNA Elválasztástechnikai Kutató és ktató Laboratórium ALKÍMIA MA 2009. november 5. Kémiai veszélyt lytényezők Természetesen előforduló mérgek
RészletesebbenNagyhatékonyságú folyadékkromatográfia
Nagyhatékonyságú folyadékkromatográfia High Pressure Liquid Chromatography High Precision Liquid Chromatography High Performance Liquid Chromatography A kromatográfia hasonló kémiai szerkezetű vegyületek
RészletesebbenTOBRAMYCINUM. Tobramicin
Tobramycinum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.6.2-1 TOBRAMYCINUM Tobramicin 01/2008:0645 javított 6.2 C 18 H 37 N 5 O 9 M r 467,5 [32986-56-4] DEFINÍCIÓ 4-O-(3-Amino-3-dezoxi-α-D-glükopiranozil)-6-O-(2,6-diamino-2,3,6-tridezoxi-α-
RészletesebbenACIDUM FUSIDICUM. Fuzidinsav
1 01/2012:0798 ACIDUM FUSIDICUM Fuzidinsav C 31 H 48 O 6.½H 2 O M r 525,7 [6990-06-3] DEFINÍCIÓ ent-(17z)-16α-(acetiloxi)-3β,11β-dihidroxi-4β,8,14-trimetil-18-nor-5β,10α-koleszta-17(20),24-dién- 21-sav
RészletesebbenRIBOFLAVINUM. Riboflavin
Riboflavinum 1 01/2008:0292 RIBOFLAVINUM Riboflavin C 17 H 20 N 4 O 6 M r 376,4 [83-88-5] DEFINÍCIÓ 7,8-Dimetil-10-[(2S,3S,4R)-2,3,4,5-tetrahidroxipentil]benzo[g]pteridin- 2,4(3H,10H)-dion. E cikkely előírásait
RészletesebbenLABORATÓRIUMI PIROLÍZIS ÉS A PIROLÍZIS-TERMÉKEK NÉHÁNY JELLEMZŐJÉNEK VIZSGÁLATA
LABORATÓRIUMI PIROLÍZIS ÉS A PIROLÍZIS-TERMÉKEK NÉHÁNY JELLEMZŐJÉNEK VIZSGÁLATA TOLNERLászló -CZINKOTAImre -SIMÁNDIPéter RÁCZ Istvánné - SOMOGYI Ferenc Mit vizsgáltunk? TSZH - Települési szilárd hulladék,
RészletesebbenCICLOSPORINUM. Ciklosporin
Ciclosporinum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.5.0-1 CICLOSPORINUM 01/2005:0994 javított Ciklosporin C 62 H 111 N 11 O 12 M r 1203 DEFINÍCIÓ A ciklosporin szárított anyagra vonatkoztatott ciklo[[(2s,3r,4r,6e)-3-hidroxi-4-
Részletesebben3. A 2. igénypont szerinti készítmény, amely 0,03 törnego/o-nál kisebb. 4. A 3. igénypont szerinti készítmény, amely 0,02 tömeg 0 /o-nál kisebb
SZABADALMI IGÉNYPONTOK l. Pravasztatint és O, l tömeg%-nál kisebb rnennyiségü pravasztatin C-t tartalmazó készítmény. 2. Az l. igénypont szerinti készítmény, amely 0,04 törnego/o-nál kisebb rnennyiségü
RészletesebbenSörminták aminosavtartalmának meghatározása nagyhatékonyságú folyadékkromatográfiával (HPLC) Gyakorlat a Kémia BSc Elválasztástechnika tárgyához
Sörminták aminosavtartalmának meghatározása nagyhatékonyságú folyadékkromatográfiával (HPLC) Gyakorlat a Kémia BSc Elválasztástechnika tárgyához A gyakorlat célja: Kereskedelmi forgalomban kapható magyar
RészletesebbenDuna-víz extrahálható komponenseinek meghatározása GC-MSD rendszerrel. I. Elméleti áttekintés
Duna-víz extrahálható komponenseinek meghatározása GC-MSD rendszerrel A gyakorlat az előző évi kötelező műszeres analitika laborgyakorlat gázkromatográfiás laborjára épít. Az ott szerzett ismeretek a gyakorlat
RészletesebbenBerényi Vilmos. Kromatográfiás laboratóriumok min ségügyi felkészítésének és auditjának tapasztalatai
Berényi Vilmos vegyész, kromatográfiás szakmérnök akkreditált min ségügyi rendszermenedzser regisztrált vezet felülvizsgáló Telefon/fax: 33-319-117 E-mail: info@wil-zone.hu Mobil: 06-70-327-91-78 www.wil-zone.hu
RészletesebbenFöldgáz összetételének vizsgálata gázkromatográffal
MISKOLCI EGYETEM MŰSZAKI ANYAGTUDOMÁNYI KAR ENERGIA- ÉS MINŐSÉGÜGYI INTÉZET TÜZELÉSTANI ÉS HŐENERGIA INTÉZETI TANSZÉK Földgáz összetételének vizsgálata gázkromatográffal Felékszülési tananyag a Tüzeléstan
RészletesebbenTájékoztató képzési programról. XLII. Kromatográfiás tanfolyam Csoportos képzés, amely nem a felnőttképzési törvény hatálya alá tartozó képzés.
Tájékoztató képzési programról XLII. Kromatográfiás tanfolyam Csoportos képzés, amely nem a felnőttképzési törvény hatálya alá tartozó képzés. A Budapesti Műszaki és Gazdaságtudományi Egyetem, Vegyészmérnöki
RészletesebbenINSULINUM PORCINUM. Sertés inzulin
Insulinum porcinum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur. 8.6-1 INSULINUM PORCINUM Sertés inzulin 01/2008:1638 javított 8.6 C 256H 381N 65O 76S 6 M r 5778 DEFINÍCIÓ A sertés inzulin sertés hasnyálmirigyből kivont, tisztított,
RészletesebbenAnyagszerkezet vizsgálati módszerek
Kromatográfia Folyadékkromatográfia-tömegspektrometria Anyagszerkezet vizsgálati módszerek Pannon Egyetem Mérnöki Kar Anyagszerkezet vizsgálati módszerek Kromatográfia 1/ 25 Folyadékkromatográfia-tömegspektrometria
RészletesebbenRadioaktív nyomjelzés
Radioaktív nyomjelzés A radioaktív nyomjelzés alapelve Kémiai indikátorok: ugyanazoknak a követelményeknek kell eleget tenniük, mint az indikátoroknak általában: jelezniük kell valamely elemnek ill. vegyületnek
RészletesebbenSZILÁRD FÁZISÚ EXTRAKCIÓ MINDIG UGYANÚGY
SZILÁRD FÁZISÚ EXTRAKCIÓ MINDIG UGYANÚGY Szakács Tibor, Szepesi Ildikó ABL&E-JASCO Magyarország Kft. 1116 Budapest, Fehérvári út 130. ablehun@ablelab.com www.ablelab.com SZILÁRD FÁZISÚ EXTRAKCIÓ SOLID
RészletesebbenOMEGA-3 ACIDORUM ESTERI ETHYLICI 90. Omega-3-sav-etilészterek 90
1 01/2009:1250 OMEGA-3 ACIDORUM ESTERI ETHYLICI 90 Omega-3-sav-etilészterek 90 DEFINÍCIÓ Az alfa-linolénsav (C18:3 n-3), a moroktsav (sztearidonsav; C18:4 n-3), az ejkozatetraénsav (C20:4 n-3), a timnodonsav
RészletesebbenÉlelmiszer-készítmények kábítószer-tartalmának igazságügyi szakértői vizsgálata Veress Tibor NSZKK Kábítószervizsgáló Szakértői Intézet
Élelmiszer-készítmények kábítószer-tartalmának igazságügyi szakértői vizsgálata Veress Tibor NSZKK Kábítószervizsgáló Szakértői Intézet Bevezetés NSZKK tevékenysége: bizonyítékok szolgáltatása az igazságszolgáltatás
RészletesebbenKromatográfia HPLC rész Szervetlen és Analitikai Kémia Tanszék
Kromatográfia HPLC rész Szervetlen és Analitikai Kémia Tanszék 2017/2018. őszi félév 1 Nem-szelektív, elválasztáson alapuló mérési technikák vs. elválasztás nélküli, szelektív módszerek A C B D kötődés,
RészletesebbenMinta-előkészítési módszerek és hibák a szerves analitikában. Volk Gábor WESSLING Hungary Kft.
Minta-előkészítési módszerek és hibák a szerves analitikában Volk Gábor WESSLING Hungary Kft. Véletlen hiba, szisztematikus hiba Szisztematikus hiba: nehezen felderíthető, nagy eltérést is okozhat Véletlen
RészletesebbenA II. kategória Fizika OKTV mérési feladatainak megoldása
Nyomaték (x 0 Nm) O k t a t á si Hivatal A II. kategória Fizika OKTV mérési feladatainak megoldása./ A mágnes-gyűrűket a feladatban meghatározott sorrendbe és helyre rögzítve az alábbi táblázatban feltüntetett
RészletesebbenFehérjék elválasztására alkalmazható mikrofludikai rendszerek Bioanalyzer, LabChip rendszerek. A készülékek működési elve, felépítésük, alkalmazásuk.
Fehérjék elválasztására alkalmazható mikrofludikai rendszerek Bioanalyzer, LabChip rendszerek. A készülékek működési elve, felépítésük, alkalmazásuk. Kapilláris elektroforézis tömegspektrometriás detektálással
RészletesebbenTÖBBKOMPONENS RENDSZEREK FÁZISEGYENSÚLYAI IV.
TÖBBKOMPONENS RENDSZEREK FÁZISEGYENSÚLYAI IV. TÖBBFÁZISÚ, TÖBBKOMPONENS RENDSZEREK Kétkomponens szilárd-folyadék egyensúlyok Néhány fogalom: - olvadék - ötvözetek - amorf anyagok Állapotok feltüntetése:
RészletesebbenTömegspektrometria. Mintaelőkészítés, Kapcsolt technikák OKLA 2017
Tömegspektrometria Mintaelőkészítés, Kapcsolt technikák OKLA 2017 Mintabeviteli rendszer Működési elv Vákuumrendszer Ionforrás Tömeganalizátor Detektor Electron impact (EI) Chemical ionization (CI) Atmospheric
RészletesebbenTHEOPHYLLINUM. Teofillin
Theophyllinum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.5.0-1 04/2005:0299 THEOPHYLLINUM Teofillin C 7 H 8 N 4 O 2 M r 180,2 DEFINÍCIÓ 1,3-dimetil-3,7-dihidro-1H-purin-2,6-dion. Tartalom: 99,0 101,0% (szárított anyagra). SAJÁTSÁGOK
RészletesebbenA folyadékkromatográfiás laboratóriumi gyakorlatokhoz szükséges elméleti alapok
A folyadékkromatográfiás laboratóriumi gyakorlatokhoz szükséges elméleti alapok Tartalomjegyzék 1. BEVEZETÉS... 2 2. A FOLYADÉKKROMATOGRÁFIA ÁLLÓFÁZISAI... 2 2.1 SZILIKAGÉL ALAPÚ ÁLLÓFÁZISOK ÉS JELLEMZÉSÜK...
RészletesebbenNEHÉZFÉMEK ELTÁVOLÍTÁSA IPARI SZENNYVIZEKBŐL Modell kísérletek Cr(VI) alkalmazásával növényi hulladékokból nyert aktív szénen
NEHÉZFÉMEK ELTÁVOLÍTÁSA IPARI SZENNYVIZEKBŐL Modell kísérletek Cr(VI) alkalmazásával növényi hulladékokból nyert aktív szénen Készítette: Battistig Nóra Környezettudomány mesterszakos hallgató A DOLGOZAT
RészletesebbenTelítetlen oldat: még képes anyagot feloldani (befogadni), adott hőmérsékleten.
2. Oldatkészítés 2.1. Alapfogalmak Az oldat oldott anyagból és oldószerből áll. Az oldott anyag és az oldószer közül az a komponens az oldószer, amelyik nagyobb mennyiségben van jelen az oldatban. Az oldószer
Részletesebben5. Laboratóriumi gyakorlat
5. Laboratóriumi gyakorlat HETEROGÉN KÉMIAI REAKCIÓ SEBESSÉGÉNEK VIZSGÁLATA A CO 2 -nak vízben történő oldódása és az azt követő egyensúlyra vezető kémiai reakció az alábbi reakcióegyenlettel írható le:
RészletesebbenMódszerfejlesztés antibiotikumok meghatározására tejmintákból on-line szilárd fázisú
Módszerfejlesztés antibiotikumok meghatározására tejmintákból on-line szilárd fázisú extrakciós UHPLC-MS/MS módszerrel Susán Judit Élelmiszer Toxikológiai Nemzeti Referencia Laboratórium 2015. Április
RészletesebbenOMEGA-3 ACIDORUM ESTERI ETHYLICI 60. Omega-3-sav-etilészterek 60
1 OMEGA-3 ACIDORUM ESTERI ETHYLICI 60 Omega-3-sav-etilészterek 60 01/2009:2063 DEFINÍCIÓ Az alfa-linolénsav (C18:3 n-3), a moroktsav (sztearidonsav; C18:4 n-3), az ejkozatetraénsav (C20:4 n-3), a timnodonsav
RészletesebbenOMEGA-3 ACIDORUM ESTERI ETHYLICI 90. Omega-3-sav-etilészterek 90
Omega-3 acidorum esterici ethylici 90 Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.7.5-1 07/2012:1250 OMEGA-3 ACIDORUM ESTERI ETHYLICI 90 Omega-3-sav-etilészterek 90 DEFINÍCIÓ Az alfa-linolénsav (C18:3 n-3), a moroktsav (sztearidonsav;
RészletesebbenMűvelettan 3 fejezete
Művelettan 3 fejezete Impulzusátadás Hőátszármaztatás mechanikai műveletek áramlástani műveletek termikus műveletek aprítás, osztályozás ülepítés, szűrés hűtés, sterilizálás, hőcsere Komponensátadás anyagátadási
RészletesebbenAz anyagi rendszer fogalma, csoportosítása
Az anyagi rendszer fogalma, csoportosítása A bemutatót összeállította: Fogarasi József, Petrik Lajos SZKI, 2011 1 1 A rendszer fogalma A körülöttünk levő anyagi világot atomok, ionok, molekulák építik
Részletesebben