összes mikróba elölése/eltávolítása Sterilezés mikróbák nagy részének elölése Fertıtlenítés

Átírás

1 Sterilezés összes mikróba elölése/eltávolítása Fertıtlenítés mikróbák nagy részének elölése Antiszeptikum bır vagy nyálkahártya felszínen alkalmazható fertıtlenítıszer Antimikrobiális hatás kinetikája log of survivals 3,5 3 2,5 2 1,5 1 0, t S = S 0 x e -kt -k: pusztulási ráta S 0 : kiindulási sejtszám S: sejtszám a t idıpontban Hısterilezés Autokláv nedves hı hılégsterilizátor száraz hı 1

2 A telített gız hımérséklete az autoklávban hım. (C fok) nyomás (atm) Antimicrobial hıkezelési eljárások (hımérséklet & idı) Hısterilezés: autokláv: telített gız 1 bar túlnyomáson (121 C) & 30 min hılégsterilizátor: 160 C 30 min fordított arányban* Nem sterilezési eljárások: Pastuerizálás: tej, élelmiszer C & 30-1 perc Frakcionált sterilezés: 80 C & 30 min 3 egymást követı napon de hepatitis B vírus túlélhet égetés, izzítás (oltókacs) *cirkulációs: pl. 160 C 45 min, 180 C 30 min gravitációs: pl. 160 C 2 óra, 180 C 1,5 óra Elektromágneses sugárzás alkalmazása 254 nm hullámhossz károsítja a DNS-t de csak levegıben és felületeken hatásos nem megbízható sterilezésre megbízható sterlizezés 2

3 Az ionizáló sugárzás antimikrobiális hatása A víz radiolízise H 2 O H 2 O + + e - H 2 O + + H 2 O H 3 O + +. OH e- + H 2 O OH - + H. egyszer használatos eszközök sterilizálása: Fecskendık, tők, katéterek, stb. szabadgyökök károsítják a makromolekulákat SZŐRÉS Folyadékok és levegı sterilizálására Folyadékok Membrán filterek: nitrocellulóz, cellulóz acetát, stb. Állandó átmérıjő pórusok (0,22 µm, 0,45 µm) Hıérzékeny tápfolyadékok, infúziós oldatok Levegı HEPA filter (High efficiency particulate air) Steril fülkékben (laminar air flow cabinets) FERTİTLENÍTÉS Fertıtlenítıszerek hatékonyságát befolyásolja: Fertıtlenítıszer fajtája és koncentrációja Behatási idı Hımérséklet Kémhatás (ph) Mikroorganizmus fajtája (baktérium, spóra, gomba, vírus, parazita) Szennyezı anyagok jelenléte (vér, széklet, stb.) csoportosítás: kémiai szerkezet alapján! 3

4 1. Detergensek (tenzidek) Amfoter molekulák Sejtmembránt károsítják Anionaktív detergensek (pl. szappanok) Nemionos detergensek Kationaktív detergensek (ált. kvaterner ammónium bázisok) Hatásspektrum: baktériumok, gombák, (vírusok) Benzalkonium chloride Cetylpyridinium chloride 2. Fenol származékok Sejtmembrán károsítása, fehérjék denaturálása (Fenol), Krezol, hexaklorofén, klórhexidin Hatásspektrum: baktériumok, (gombák), (vírusok) Para-krezol Hexaklorofén 3. Alkoholok Sejtmembrán károsítása, fehérjék denaturálása Etanol, propanol, izo-propanol Hatásspektrum: baktériumok, (gombák), (vírusok) 4. Klór származékok Szabad SH csoportok oxidálása, enzimek inaktiválása Nátrium-hipoklorit (NaOCl) Klórmész (Ca(OCl) 2 Hatásspektrum: baktériumok, vírusok, (spórák), (paraziták) 5. Jód származékok Sejtmembrán károsítása, fehérjék denaturálása Jódtinktúra, jodofórok Hatásspektrum: baktériumok, gombák, (vírusok) 4

5 6. Aldehidek Alkiláló hatás: fehérjék és nukleinsavak inaktiválása Formaldehid, glutáraldehid Hatásspektrum: baktériumok, gombák, vírusok, spórák 7. Gázsterilezés Etilénoxid, b-propio-lakton Alkiláló hatás: fehérjék és nukleinsavak inaktiválása -CH 2 CH 2 OH Potencionális karcinogén hatás Szabályok betartása! O etilénoxid béta-propio-lakton antibiotikumok a gazdaszervezet és a mikróba közötti funkcionális és szerkezeti különbségeken alapul SZELEKTÍV TOXICITÁS használhatóság fertıtlenítı szerek antiszeptikumok hasonló hatással van a különbözı eredető élı sejtekre NEM SZELEKTÍV szisztémás alkalmazás lokális alkalmazás környezetben igen igen káros rezisztencia miatt! nem korlátozott igen Antimikrobiális kemoterápia követelmények: farmakológiai: megfelelı adagolással terápiás szintet elérni az infekció helyén mikrobiológiai: hatásos legyen a kórokozóval szemben 5

6 ANTIBAKTERIÁLIS HATÁSSPEKTRUM széles spektrumú szők spektrumú Patogén baktériumok fontosabb csoportjai a hatásspektrum megítélésehez nem-fermentáló Gram pálca pl. Pseudomonas fermentáló Gram bakt pl. E. coli Salmonella Gram+ bakt. pl. Staphylococcus obligát intracellularis & sejtfal defektív pl. Chlamydia Mycoplasma Mycobacteria e.g. M.tuberculosis ANTIBAKTERIÁLIS HATÁS baktericid bakteriosztatikus sejtfalszintézis gátló fehérjeszintézis gátló nukleinsavszintézis gátló sejtmembránra ható egyéb béta-laktámok, vancomycin, cycloserin, bacitracin makrolidek, clindamycin, aminoglikozidok, tetraciklinek, chloramphenicol, linezolid, streptograminok quinolonok, szulfonamidok, trimethoprim, rifampin polymyxinek metronidazol, isoniazid, ethambutol Beta-lactamok A peptidoglikán peptid keresztkötéseinek strukturális analógjai nem antibakteriális! ld késıbb -R Carbapenem 6

7 Béta-laktámok hatásmechanizmusa D-Ala-D-Ala analóg a peptid keresztkötésben transzpeptidációt gátol target molekulák: Penicillin binding proteins (PBP) sejtfalszintézis gátlása baktérium replikáció leáll bakteriális autolizinek indukálása baktériumsejtek ozmotikus lízise baktericid antibiotikumok ANTIBAKTERIÁLIS HATÁSSPEKTRUM nem fermentáló Gram pálca fermentáló Gram bakt Gram+ bakt. obligát intracellularis & sejtfal defektív Mycobacteria bakteriális béta-laktamázra érzékeny penicillinek: amoxicillin penicillin-g nem hat piperacillin bakteriális béta-laktamázra rezisztens penicillinek: amoxicillin+ clavulanic acid piperacillin+ tazobactam methicillin nafcillin nem hat nem fermentáló Gram pálca ANTIBAKTERIÁLIS HATÁSSPEKTRUM fermentáló Gram bakt Gram+ bakt. obligát intracellularis & sejtfal defektív Mycobacteria parenteral 3 rd gen 4 th generation 3 rd generation 1 st generation 2 nd generation nem hat nem hat Carbapenemek áltlában rezisztensek a béta-laktamázokra imipenem, meropenem nem hat 7

8 REZISZTENCIA A BÉTA-LAKTÁMOKKAL SZEMBEN 1. béta-laktamáz termelés: penicillineket, cephalosporinokat vagy mindkettıt hasíthat 2. penicillin-binding proteinek megváltozása 3. csökkent permeabilitás- a Gram-neg. külsı membránon keresztül 4. tolerancia - mutáns autolizinek nem aktiválódnak Példa a béta-laktám rezisztenciára: Staphylococcus aureus (Gram +) 1.béta-laktamáz penicillináz hatású REZISZTENS lesz pl.. pen-g, amox, pip ÉRZÉKENYmarad beta-laktamáz stabil penicillinek, 1 st gen. cephalosporinok, carbapenemek 2. megváltozott PBP pl. MRSA! minden béta-laktámra! 4. tolerancia a baktericid hatás csökken, inkább csak a replikáció áll le sejtfalszintézis gátló fehérjeszintézis gátló nukleinsavszintézis gátló sejtmembránra ható egyéb béta-laktámok, vancomycin, cycloserin, bacitracin makrolidek, clindamycin, aminoglikozidok, tetraciklinek, chloramphenicol, linezolid, streptograminok quinolonok, szulfonamidok, trimethoprim, rifampin polymyxinek metronidazol, isoniazid, ethambutol 8

9 ANTIBAKTERIÁLIS HATÁSSPEKTRUM nem fermentáló Gram pálca fermentáló Gram bakt Gram+ bakt. obligát intracellularis & sejtfal defektív Mycobacteria aminoglikozidok amikacin > gentamicin = tobramycin streptomycin ototoxikus! *ellenjavallt mert bakteriosztatikus tetracyclines erythromycin / macrolidek *csak egyes Gram-negativok szenzitívek * atípusos Mycobact Aminoglycosides 9

10 nem fermentáló Gram pálca ANTIBAKTERIÁLIS HATÁSSPEKTRUM fermentáló Gram bakt Gram+ bakt. obligát intracellularis & sejtfal defektív Mycobacteria Clindamycin +néhány Gr.-neg anaerob bakt. chloramphenicol ellenjavallt, toxikus! Streptograminokat és linezolidot jelenleg Gram pozitív coccusok ellen használják baktericid: aminoglikozidok, streptograminok bakteriosztatikus: tetracyclins, clindamycin, erythromycin, chloramphenicol, linezolid bizonyos baktériumokra baktericid hatású BAKTÉRIUMOK RESISZTENCIA MECHANIZMUSAI aminoglikozidok biokémiai conjugálás (foszforilálás, acetilálás, stb) célfehérje megváltozása mutációval (30 S alegységen) csökkent permeabilitás tetracyclinek macrolidek csökkent bejutás a sejtbe efflux mechanizmus 23 S RNA metilálása (50 S alegység) chloramphenicol biokémiai conjugálás (acetilálás) 10

11 sejtfalszintézis gátló fehérjeszintézis gátló nukleinsavszintézis gátló sejtmembránra ható egyéb béta-laktámok, vancomycin, cycloserin, bacitracin makrolidek, clindamycin, aminoglikozidok, tetraciklinek, chloramphenicol, linezolid, streptograminok quinolonok, szulfonamidok, trimethoprim, rifampin polymyxinek metronidazol, isoniazid, ethambutol szulfonamidok - - bakteriosztatikus trimethoprim - baktericid quinolonok - DNS-giráz gátló baktericid rifampin - mrna szintézis gátló - baktericid ANTIBAKTERIÁLIS HATÁSSPEKTRUM nemfermentáló Gram pálca fermentáló Gram bakt Gram+ bakt. obligát intracellularis & sejtfal defektív Mycobacteria szulfonamid + trimethoprim e.g. ciprofloxacin (3 rd gen) quinolonok 1 st generation 2 nd 4 th gen. fluoroquinolonok 3 rd 4 th gen. 2 nd 4 th gen. ofloxacin (2 nd g) ciprofloxacin (3 rd ) rifampin *v. polirezisztens baktériumokra rifampin 11

12 Antibakteriális terápia alapelvei 1. Nem komplikált fertızésben monoterápia ha van idı az antibiogram eredményét megvárni antibiogram alapján szőkspektrumú, baktericid th. ha nincs idı az antibiogram eredményét megvárni a lehetséges kórokozókat legjobban lefedı th. elsıként választandó szerek (szakmai ajánlások alapján) pl. légúti fertızések - macrolids Életveszélyes bakteriális fertızések: széles spektrumú, baktericid antibiotikum v. kombináció Krónikus bakteriális fertızések v. lassan szaporodó bakt. (pl. tbc) általában kombinált antibiotikus terápiát igényel ok: alacsony növekedési ráta mellett még a hatásos antibiotikum is kevésbé fejti ki a hatását megnı a rezisztencia kialakulásának esélye, ha csak egyféle antibakteriális szerrel történik a kezelés 12