Kémiai technológia laboratóriumi gyakorlatok M É R É S I J E G Y Z Ő K Ö N Y V a A KEMÉNYÍTŐ IZOLÁLÁSA ÉS ENZIMATIKUS HIDROLÍZISÉNEK VIZSGÁLATA I-II. című gyakorlathoz Nevek: Mérés helye: Mérés ideje Gyakorlatvezető: Zárthelyi: Gyakorlati munka: Jegyzőkönyv: Megjegyzések: 1
Feladatcsoport: A hallgató Mérés lényege, mérés menete: Burgonyakeményítő kinyerése: A cukrosításhoz felhasznált keményítő nedvességtartalmának meghatározása: Redukálócukor-tartalom meghatározása Bertrand szerint: 2
Feladatcsoport: A hallgató Cukrosításhoz felhasznált keményítő nedvességtartalma: MÉRÉS SZÁMOLÁS Edény tömege Edény + keményítő Szárítás után edény + keményítő Szárítás tömeg előtti Szárítás tömeg utáni Nedvességtartalom 1 2 3 nedvességtartalom%: Kinyert keményítő tömege A burgonya pontos tömege: A kinyert vízmentes keményítő tömege: A kinyert légszáraz keményítő tömege: A burgonya %-os keményítőtartalma: Redukálócukor tartalom meghatározása 100%-os hidrolízisnek megfelelő maltózmennyiség: (C 12 H 20 O 10 ) n n C 12 H 22 O 11 (324 g/) (342 g/). g cukrosításhoz felhasznált vízmentes keményítő.. g maltóz Térfogat (1. cukrosítási lépés után):... Térfogat (2. cukrosítási lépés után):... f(0.1n KMnO 4 )= Fogyás (cm 3 ) Redukálócuko r-tartalom (1 cm 3 -ben) (mg) Össztérfogat (cm 3 ) Hidrolizátum összes redukálócukor -tartalma (g) Hidrolizátum maltóztartalma a malátakivonat nélkül (g) A hidrolízis mértéke (%) 70ºC/15 70ºC/45 60ºC/15 60ºC/45 malátakivonat 1.lépés: 2.lépés: 3
Feladatcsoport: B hallgató Mérés lényege, mérés menete: Foszfátpuffer készítése, ph-mérő kalibrálása: Malátakivonat készítése: A cukrosított cefre erjesztése: A vízoldható keményítő nedvességének meghatározása: Az abszorbancia - D-glükóz koncentráció kalibrációs görbe felvétele Az amiloglükozidáz enzim katalizáló hatásának vizsgálata különböző ph értékeken: a keletkezett D-glükóz koncentrációjának meghatározása spektrofotometriásan 4
Feladatcsoport: B hallgató Mérési eredmények: A vízoldható keményítő nedvességtartalmának meghatározása: 1 2 3 Edény tömege(g) MÉRÉS Edény + keményítő (g) Szárítás után edény + keményítő (g) Szárítás előtti tömeg (g) SZÁMOLÁS Szárítás utáni tömeg (g) Nedvességtartalom (%) D-glükóz koncentráció 1,00 g/dm 3 0,75 g/dm 3 0,50 g/dm 3 0,25 g/dm 3 abszorbancia 600 nm abszorbancia koncentráció g/dm 3 ph=5,0 ph=5,5 ph=6,0 absz. koncentráció (g/dm 3 ) koncentráció (m/dm 3 ) enzimaktivitás (m/dm 3 ) 5
Feladatcsoport: C hallgató Foszfátpuffer készítése, ph-mérő kalibrálása: A keményítő cukrosítása: A vízoldható keményítő enzimes hidrolízise amiloglükozidáz enzimmel ph=5,0, ph=5,5 és ph=6,0 értékeken, majd a keletkezett D-glükóz meghatározása jodometriásan. 6
Feladatcsoport: C hallgató Az amiloglükozidáz enzimaktivitásának vizsgálata bemért vízoldható keményítő tömege: g ph =5,0 Konc.: 0,05 M Jód Tioszulfát Higítások: Konc.: 0,1 M 5 cm 3 Fogyások 1. 2. 3. /2 cm 3 50 cm 3 keményítő oldat 0,5 cm 3 enzim... cm 3 NaOH Összesen:... cm 3 : Minta térfogata: 5cm 3 Koncentráció m/dm 3 Glükózkonc. hígítás nélkül m/dm 3 Enzimaktivitás m/dm 3 a vízoldható keményítő nedvességtartalma: % a vízoldható keményítő szabad-glükóz tartalma: % a vízoldható keményítő nettó keményítőtartalma: % Hidrolízis mértéke: (C 6 H 10 O 5 ) n + nh 2 O = nc 6 H 12 O 6 nettó keményítő koncentráció:... g/100 cm 3 100% -os hidrolízis esetén a D-glükóz koncentrációja:..... g/100 cm 3.... /100 cm 3 =...m/dm 3 ph Enzimaktivitás Hidrolízis mértéke %-ban 5,0 7
Feladatcsoport: C hallgató Az amiloglükozidáz enzimaktivitásának vizsgálata bemért vízoldható keményítő tömege: g ph =5,5 Konc.: 0,05 M Jód Tioszulfát Higítások: Konc.: 0,1 M 5 cm 3 Fogyások 1. 2. 3. /2 cm 3 50 cm 3 keményítő oldat 0,5 cm 3 enzim... cm 3 NaOH Összesen:... cm 3 : Minta térfogata: 5cm 3 Koncentráció m/dm 3 Glükózkonc. hígítás nélkül m/dm 3 Enzimaktivitás m/dm 3 a vízoldható keményítő nedvességtartalma: % a vízoldható keményítő szabad-glükóz tartalma: % a vízoldható keményítő nettó keményítőtartalma: % Hidrolízis mértéke: (C 6 H 10 O 5 ) n + nh 2 O = nc 6 H 12 O 6 nettó keményítő koncentráció:... g/100 cm 3 100% -os hidrolízis esetén a D-glükóz koncentrációja:..... g/100 cm 3.... /100 cm 3 =...m/dm 3 ph Enzimaktivitás Hidrolízis mértéke %-ban 5,5 8
Feladatcsoport: C hallgató Az amiloglükozidáz enzimaktivitásának vizsgálata bemért vízoldható keményítő tömege: g ph =6,0 Konc.: 0,05 M Jód Tioszulfát Higítások: Konc.: 0,1 M 5 cm 3 Fogyások 1. 2. 3. /2 cm 3 50 cm 3 keményítő oldat 0,5 cm 3 enzim... cm 3 NaOH Összesen:... cm 3 : Minta térfogata: 5cm 3 Koncentráció m/dm 3 Glükózkonc. hígítás nélkül m/dm 3 Enzimaktivitás m/dm 3 a vízoldható keményítő nedvességtartalma: % a vízoldható keményítő szabad-glükóz tartalma: % a vízoldható keményítő nettó keményítőtartalma: % Hidrolízis mértéke: (C 6 H 10 O 5 ) n + nh 2 O = nc 6 H 12 O 6 nettó keményítő koncentráció:... g/100 cm 3 100% -os hidrolízis esetén a D-glükóz koncentrációja:..... g/100 cm 3.... /100 cm 3 =...m/dm 3 ph Enzimaktivitás Hidrolízis mértéke %-ban 6,0 9
Feladatcsoport: D hallgató Mérés lényege, mérés menete: A vízoldható keményítő nedvességének meghatározása: Az abszorbancia - D-glükóz koncentráció kalibrációs görbe felvétele Az amiloglükozidáz enzim katalizáló hatásának vizsgálata különböző ph értékeken: a keletkezett D-glükóz koncentrációjának meghatározása spektrofotometriásan Az előállított malátakivonat vizsgálata: 10
Feladatcsoport: D hallgató A vízoldható keményítő nedvességtartalmának meghatározása: 1 2 3 Edény tömege (g) MÉRÉS Edény + keményítő (g) Szárítás után edény + keményítő (g) Szárítás előtti tömeg (g) SZÁMOLÁS Szárítás utáni tömeg (g) Nedvességtartalom (%) D-glükóz koncentráció 1,00 g/dm 3 0,75 g/dm 3 0,50 g/dm 3 0,25 g/dm 3 abszorbancia 600 nm abszorbancia koncentráció g/dm 3 absz. koncentráció (g/dm 3 ) koncentráció (m/dm 3 ) enzimaktivitás (m/dm 3 ) szabad D-glükóz --------------------------------- ph=4,0 ph=4,5 11
Feladatcsoport: D hallgató Malátakivonat szárazanyag-tartalma: MÉRÉS SZÁMOLÁS Edény tömege (g) Edény + malátakivonat (g) Szárítás után edény + malátakivonat (g) Szárítás tömeg (g) előtti Szárítás tömeg (g) utáni Szárazanyag tartalom (%) 1 2 3 Malátakivonat aktivitásának jellemzése Körülmények: Hőmérséklet:... Indítás:... Leállítás:... keményítő-oldat maláta-kivonat puffer abszorbancia (cm3) (cm3) (cm3) szín 600 nm 650 nm 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Magyarázat: 12
Feladatcsoport: D hallgató A ph enzimaktivitás görbe: 50 ph - enzimaktivitás görbe 40 Enzimaktivitás (m/dm 3 ) 30 20 10 0 0 1 2 3 4 5 6 ph A mérési eredmények értékelése 13
Feladatcsoport: E hallgató Mérés lényege, mérés menete: A vízoldható keményítő szabad glükóz-tartalmának meghatározása: Az amiloglükozidáz enzimaktivitásának vizsgálata két adott ph értéken: A kinyert keményítő nedvességtartalmának meghatározása: Az erjedt cefre feldolgozása: 14
Feladatcsoport: E hallgató A vízoldható keményítő szabad-glükóz tartalma: bemért vízoldható keményítő tömege: g Jód Konc.: 0,05 M 5 cm 3 Tioszulfát Koncentráció: 0,1 M F*c= Fogyások 1. 2. 3. /2: Minta térfogata: 5 cm 3 Koncentráció 0,5000g/50cm 3 oldatra száva: m/dm 3 15
Feladatcsoport: E hallgató Az amiloglükozidáz enzimaktivitásának vizsgálata bemért vízoldható keményítő tömege: g ph =4,0 Konc.: 0,05 M Jód Tioszulfát Higítások: Konc.: 0,1 M 5 cm 3 Fogyások 1. 2. 3. /2 cm 3 50 cm 3 keményítő oldat 0,5 cm 3 enzim... cm 3 NaOH Összesen:... cm 3 : Minta térfogata: 5cm 3 Koncentráció m/dm 3 Glükózkonc. hígítás nélkül m/dm 3 Enzimaktivitás m/dm 3 a vízoldható keményítő nedvességtartalma: % a vízoldható keményítő szabad-glükóz tartalma: % a vízoldható keményítő nettó keményítőtartalma: % Hidrolízis mértéke: (C 6 H 10 O 5 ) n + nh 2 O = nc 6 H 12 O 6 nettó keményítő koncentráció:... g/100 cm 3 100% -os hidrolízis esetén a D-glükóz koncentrációja:..... g/100 cm 3.... /100 cm 3 =...m/dm 3 ph Enzimaktivitás Hidrolízis mértéke %-ban 6,0 16
Feladatcsoport: E hallgató Az amiloglükozidáz enzimaktivitásának vizsgálata bemért vízoldható keményítő tömege: g ph =4,5 Konc.: 0,05 M Jód Tioszulfát Higítások: Konc.: 0,1 M 5 cm 3 Fogyások 1. 2. 3. /2 cm 3 50 cm 3 keményítő oldat 0,5 cm 3 enzim... cm 3 NaOH Összesen:... cm 3 : Minta térfogata: 5cm 3 Koncentráció m/dm 3 Glükózkonc. hígítás nélkül m/dm 3 Enzimaktivitás m/dm 3 a vízoldható keményítő nedvességtartalma: % a vízoldható keményítő szabad-glükóz tartalma: % a vízoldható keményítő nettó keményítőtartalma: % Hidrolízis mértéke: (C 6 H 10 O 5 ) n + nh 2 O = nc 6 H 12 O 6 nettó keményítő koncentráció:... g/100 cm 3 100% -os hidrolízis esetén a D-glükóz koncentrációja:..... g/100 cm 3.... /100 cm 3 =...m/dm 3 ph Enzimaktivitás Hidrolízis mértéke %-ban 6,0 17
Feladatcsoport: E hallgató Kinyert keményítő nedvességtartalma: MÉRÉS SZÁMOLÁS Edény tömege (g) Edény + keményítő (g) Szárítás után edény + keményítő (g) Szárítás tömeg (g) előtti Szárítás tömeg (g) utáni Nedvességtartalom (%) 1 2 3 Alkohol sűrűségének meghatározása: Desztillátum térfogata:..cm 3 Mérőlombik tömege:... Víz + mérőlombik tömege:... Desztillátum + mérőlombik:... Víz tömege:... Desztillátum tömege:... m deszt /m víz =.... Alkohol tömeg%-os összetétele:..% (ρ víz(25 C o) =0,997044 g/cm 3 ) Alkohol sűrűsége: ρ deszt = m deszt /m víz * ρ víz = tömege: m=ρv=.. 18