INNOVATÍV TUDOMÁNY A Vajdasági Magyar Akadémiai Tanács tudományos tanácskozása nemzetközi részvétellel Színhely: Magyar Tannyelvű Tanítóképző Kar, I. emeleti díszterem, Szabadka, Strossmayer u. 11. Időpont: 2009. december 12. (szombat) Bálint Béla: Őssejtek biológiai alaptulajdonságok és terápiai alkalmazás
BÁLINT BÉLAB ŐSSEJTEK BIOLÓGIAI ALAPTULAJDONSÁGOK ÉS TERÁPIAI ALKALMAZÁS TRANSZPLANTÁCI CIÓ vs. REGENERATÍV V GYÓGYKEZEL GYKEZELÉS
ŐSSEJTEK a toti-,, multi és s pluripotens őssejtek ek alaptulajdonságai gai: ÖNNFENTARTÁSI POTENCIÁL PROLIFERÁCI DIFERENCIÁCI CIÓ (szaporodás) s) CIÓ (érett/funkcionális) vérsejtképzés a csontvelőben "TRANS-DIFERENCIÁCIÓ" INTERPLASZTIKUSSÁG az emberi szervezet egyéb b szöveteiben veteiben.
ŐSSEJTEK - GYÓGYKEZELÉS GYKEZELÉS TOTI/PLURI/MULTIPOTENS ADULT ŐSSEJTEK LEHETŐVÉ TESZIK A HEMATOPOÉZIS KOMPLETT ÉS TARTÓS REKONSTITUCIÓJÁT TRANSPLANTÁCI CIÓ KIVITELEZÉSÉVEL VEL.
ALAP TULAJDONSÁGAIKNAK KÖSZÖNVE, AZ ŐSSEJTEK IMMÁR FÉL ÉVSZÁZADA ALKALMAZZÁST NYERNEK A KÜLÖNFÉLE BETEGSÉGEK ÉS EGYÉB KÓROS ELVÁLTOZÁSOK ORVOSI KEZELÉSÉBEN - CSONTVELŐ ÁTÜLTETÉS (TRANSZPLANTÁCIÓ).
AZ ŐSSEJTEK EREDETE ÉS A BETEG KÖZÖTTI KAPCSOLATTÓL FÜGGŐEN, MEGKÜLÖNBÖZTETÜNK: ALLOGÉN (két szövettanilag kompatibilis személy), AUTOLÓGUS (önnön őssejtjek alkalmazása) SZINGÉN (egypetéjű ikrek) TRANSZPLANTÁCIÓT.
ŐSSEJTEK - GYÓGYKEZELÉS GYKEZELÉS A TOTI/PLURI/MULTIPOTENS ADULT ŐSSEJTEK ALKALMAZHAT HATÓK A SEJT TERÁPIA ILLETVE REGENERATÍV ORVOSTUDOMÁNY TERÉN megfelelő külső stimulatív v tényezt nyezők k hatására 1."HOMING" 2."TRANS "TRANSZ-DIFERENCIÁCIÓ
STUDY DESIGN Balint B. Bol Soc Bras Hematol Hemot 1998; 20: 35. Balint B. Vox Sang 2009; 97: 77 90.
SEJT OPTIMIZÁCIÓ: ALAP CÉLOK SEJT EREDET BEGYŰJTÉSI IDŐPONT ("timing") VÉRMENNYISÉG ("processing") (LVL vs. CONVENTIONAL) KUTATÁS-FELTÁRÁS CD34+ SEJT TIPUSOK KONVENCIONÁLIS IS TRIPÁN KÉK vs. 7 AAD 7 FLOW-CITOMETRIA Balint B. Vojnosanit Preg 2008; 65(7): 545 51.
CD34+ SEJT-ALTIPUSOK PRIMITIV SEJTEK ALAP CÉLOK CD34+/CD33 CD34+/CD 38 CD34+/HLA DR CD34+/ CD90+ ÉRETT SEJTEK CD34+/CD33+ CD34+/CD 38+ CD34+/HLA DR+ CD34+/ CD90- flow-citometria itometria: 7 aminoactino- micin D (AAD) Balint B. Maked Med Pregl 2009; 63: 12 7.
CD34+ SEJT-ALTIPUSOK ALAP CÉLOK
CSONTVELŐ ÁTŰLTETÉS MÁJ J SEJTKEZELÉS METODUSOK (kemoterápia) rhug-csf: 5-10 μg/kgts 10-16 16 μg/kgts vérmennyiség = 12.8-38 38.4 L
MIOKARD SEJTKEZELÉS METÓDUSOK
SEJT KIVIZSGÁLÁS METÓDUSOK SEJTSZÁM MEGHATÁROZ ROZÁS (KVANTIFIKÁCIÓ) - TNC - MNC - CD34 + sejtszám - CD34 + altip tipusok - CD133 + Balint B. Vojnosanit Preg 2008; 65(7): 545 51. Balint B. Vox Sang 2009; 97: 77 90.
KRIOBIOLÓGIA METÓDUSOK ( C) temperature 20 I 10 II time (min) 0 0 10-10 III 20 30 40 50-20 -30 IV -40-50 -60 V -70 Five-step controlled-rate freezing procedure. Note step III, corresponding to release of the fusion heat (arrow). Balint B. et al. Bone Marrow Transpl 1999; 23: 613-9. Balint B. et al. Transf Medicine 2007; 17: 107 13.
KRIOBIOLÓGIA METÓDUSOK 10% vs. 5% DMSO (MM = 78 kd) Balint B. et al. Transfusion 2006; 46(2): 230 5.
TNC NC SEJTHOZAM ÉS S VIALIBITÁS (FAGYASZTÁS S UTÁN) protocols Nc recovery [%] NC VB [%] 1 80,7±16,1 x 94,4±5,9 x 2 86,3±9,3 x 93,9±5,5 x 3 76,4±4,8 x 94,7±2,4 x 4 87,9±6,6 y 96,5±7,7 y 5 70,3±17,1 y 87,6±10,8 y x 10% DMSO; y 5% DMSO. Balint B. et al. Bone Marrow Transpl 1999; 23: 613-9.
CFU-GM GM SEJTHOZAM ÉS S VIALIBITÁS (FAGYASZTÁS S UTÁN) Total number of CFU-GM in samples input autput CFU-GM recovery [%] 12106+2560.4 3369+1006.1 27.5+3.6 x 12106+2560.4 4168+1829.7 33.3+9.9 x 12106+2560.4 5013+2715.4 39.6+16.9 x 18729+5335 13676+4544 73.0+8.8 y 18729+5335.2 7914+3250.6 57.4+24.4 y x 10% DMSO; y 5% DMSO. Balint B. et al. Bone Marrow Transpl 1999; 23: 613-9.
CFU-Sd12 Sd12 SEJTHOZAM ÉS S VIALIBITÁS (FAGYASZTÁS S UTÁN) Total number of CFU-Sd12 in samples input autput CFU-Sd12 recovery [%] 1120.6+367.7 717.47+406.8 a 61.0+16.9 x 1120.6+367.7 609.3+392.3 a 52.1+29.6 x 1120.6+367.7 475.9+419.8 a 37.8+23.0 x 1577.7+282 1421.1+342 90.0+15.9 y 1577.7+281.9 838.4+336.5 a 55.4+25.3 y x 10% DMSO; y 5% % DMSO. a significant difference cryopreserved cells vs. control (p<0.001). Balint B. et al. Bone Marrow Transpl 1999; 23: 613-9.
MRA CFU-GM GM SEJTHOZAM ÉS S VIALIBITÁS (FAGYASZTÁS S UTÁN) Total number of MRA CFU-GM in samples input autput MRA CFU-GM recovery [%] 628330+178414 501443+46827 79.8+13.5 x 628330+178414 172139+46826 a 27.4+14.3 x 628330+178414 219924+52685 a 35.0+8.4 x 515596+162181 184083+50547 a 35.7+9.8 y 515596+162181 99926+31328 a 19.3+6.1 y x 10% % DMSO; y 5% DMSO % DMSO. a significant difference cryopreserved cells vs. control (p<0.001). Balint B. et al. Bone Marrow Transpl 1999; 23: 613-9.
ŐSSEJT TRANSZPLANTÁCI CIÓ SEJT HOZAMOK 20 16,5 15 10 10,1 8,1 6,9 5 0 1 2 3 4 MNCs (1 and 2) x 10 8 /kgbm CD34 + cells (3 and 4) x 10 6 /kgbm allogeneic 1 and 3 autologous 2 and 4 Balint B. et al. Vox Sang 2002; 83 (Suppl 2): 93.
HEMATOPOÉZIS - REKONSTIT ONSTITÚCIÓ 20 15,9 17,5 15 10 5 9,4 13,1 0 1 2 3 4 PB-HSC (1 and 3) 3 vs. BM-HSC (2 and 4) 4 LEUKOCYTES (1 and 2) 2 and PLATELETS (3 and 4) 4 Balint B. Vojnosanit Preg 2008; 65(7): 545 51.
ŐSSEJT TRANSZPLANTÁCIÓ/REGEN REGEN ORVOSTUDOMÁNY CSONTVELŐ vs. PERIFÉRIÁS RIÁS S VÉRV PB SCs 1 PB SCs 2 BM SCs CD34 pe / CD90 fitc 1,72±1,47 1,25±0,82 2,72±2,06 CD34 pe / CD38 fitc 2,02±1,18 2,02±1,18 2,3±1,16 CD34 pe / HLA-DR fitc 2,01±0,92 2,0±0,92 2,0±0,88 CD34 pe / CD33 fitc 1,90±1,23 1,9±1,23 2,75±1,12 kétszeres flow-citometria 7-AAD pozitiv SEJTEK fagyasztás előtt és után: 2,58±1,23% i 4,58±2,97%. Balint B, et al. Stem cells in the arrangement of regenerative medicine. SANU 2009.
ŐSSEJT TERÁPIA csontvelő vs. periferiás s vérv 2.49 M VMA CD45/CD34 + sejtarány Balint B, et al. Stem cells in the arrangement of regenerative medicine. SANU 2009.
ŐSSEJT TERÁPIA csontvelő vs. periferiás s vérv 2.8 M VMA CD34/CD133 + sejtarány Balint B, et al. Stem cells in the arrangement of regenerative medicine. SANU 2009.
ŐSSEJTTERÁPIA csontvelő vs. periferiás s vérv 6 rhug-csf 5 4 percentage (%) 3 2 1 0 CD34pe CD34fitc CD133 7-AAD Monoclonal antibodies - single stain 7-AAD ( CD34+ [100-x x = 96.48%] vijabilitás s )
SZÍVIZOM KEZELÉSE ŐSSEJTEKKEL 1. KARDIOLÓGIAIA
SZÍVIZOM KEZELÉSE ŐSSEJTEKKEL 1. KARDIOLÓGIAIA
SZÍVIZOM KEZELÉSE ŐSSEJTEKKEL INTRA- KORONÁRIS RIS BEFECSKENDEZÉS 1. KARDIOLÓGIAIA
SZÍVIZOM KEZELÉSE ŐSSEJTEKKEL rhuscf rhuil-3 rhugm-csf rhug-csf 2. SZÍVSEB VSEBÉSZETSZET
SZÍVIZOM KEZELÉSE ŐSSEJTEKKEL 2. SZÍVSEB VSEBÉSZETSZET
SZÍVIZOM KEZELÉSE ŐSSEJTEKKEL 2. SZÍVSEB VSEBÉSZETSZET
SZÍVIZOM KEZELÉSE ŐSSEJTEKKEL 2. SZÍVSEB VSEBÉSZETSZET
SZÍVIZOM KEZELÉSE ŐSSEJTEKKEL SZÍVBETEGEK (49) SZÁMA MNC HOZAM MNC MNC VIJABILITÁS ITÁS = =96±1.2% 7-AAD = 97.16% MNC HOZAM = 93.6% (M MMA MA + HES) 7-AAD =97.16% ALKALMAZOTT SEJT SZÁM: MNC = 8.4x10 9 ±6.1X10 9 CD45/CD34 + = 10.4±7.54x10 6 CD34/CD133 + = 7.16±4.6X10 6 Balint B, et al. Stem cells in the arrangement of regenerative medicine. SANU 2009.
MÁJ ŐSSEJT TERÁPIA 2006. A májbetegeink (6) kezelésése folyamán PERIRÉRI RIÁS S VÉRBV RBŐL L NYERT ŐSSEJTEKET alkalmaztunk pozitiv immunomagnetikus szelekció, ex vivo expansió és transz-diferenci diferenciáció után, szignifikáns klinikai és paraklinikai jobbulást elérve. Balint B. Vojnosanit Preg 2008; 65(7): 545 51.
MÁJ ŐSSEJT TERÁPIA IN THE TREATMENT OF PATIENTS MNC VIABILITY = 98±1.2%; MNC VIABILITY VIABILITY = 98 7-AAD = 96.48±2.8%; APPLIED CELL COUNTS: MNCs = 6.4x10 9 ±3.1X10 9 CD45/CD34 + = 16±8.5x10 6 CD34/CD133 + = 17.9±10.6 10.6X10 6 Balint B, et al. Maked Med Pregl 2009; 63: 5-12.
AZ ŐSSEJTEK ALAPTULAJDONSÁGAI LEHETŐVÉ TESZIK MIND GYAKORIBB ÉS SZELESKÖRŰBB ALKALMAZÁSUKAT A SEJTTRANSZPLANTÁCIÓ ÉS REGENERATÍV ORVOSTUDOMÁNY TERÉN. A CSONTVELŐ EREDETŰ ŐSSEJT SZÁRMAZ RMAZÉKOK JELLEMZŐJE A MAGAS CD34 + /CD90 + SEJTARÁNY NY.
DILEMMÁK ÉS JŐVŐ AZ ŐSSEJTEK TERÁPI PIÁS S ALKALMAZÁSA IMPERATÍV!
DILEMMÁK ÉS JŐVŐ AZONBAN, A POTEN POTENCIÁLIS KÉRDK RDÉSEK SZÁMA MINDMÁIG IG MAGASABB A RENDELKEZÉSÜNKRE NKRE ÁLLÓ VÁLASZOK SZÁMÁTÓL.