Peszticidek vizsgálata gyümölcs és zöldség mintákban standard QuEChERSmódszerrel és módosított módszerrel a Geno/Grinder alkalmazásával



Hasonló dokumentumok
Szilárd gyógyszerformák hatóanyagának kioldódási vizsgálata

LACTULOSUM LIQUIDUM. Laktulóz-szirup

ACIDUM ASCORBICUM. Aszkorbinsav

Duna-víz extrahálható komponenseinek meghatározása GC- MSD rendszerrel. Elméleti bevezető

HYPROMELLOSUM. Hipromellóz

Fludezoxiglükóz( 18 F) injekció

ZINCI ACEXAMAS. Cink-acexamát

PHENOXYMETHYLPENICILLINUM KALICUM. Fenoximetilpenicillin-kálium

HEPARINA MASSAE MOLECULARIS MINORIS. Kis molekulatömegű heparinok

Trypsinum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur TRYPSINUM. Tripszin

Duna-víz extrahálható komponenseinek meghatározása GC-MSD rendszerrel. I. Elméleti áttekintés

CARBOMERA. Karbomerek

XII. Reakciók mikrohullámú térben

XANTHANI GUMMI. Xantán gumi

INTERFERONI GAMMA-1B SOLUTIO CONCENTRATA. Tömény gamma-1b-interferon-oldat

01/2008: MÉRŐOLDATOK

O k t a t á si Hivatal

NADROPARINUM CALCICUM. Nadroparin-kalcium

I. melléklet. Felsorolás: megnevezés, gyógyszerformá(k), gyógyszerkészítménydózis(ok), alkalmazási mód(ok), kérelmező(k) a tagállamokban

Curcumae longae rhizoma

HASZNÁLATI UTASÍTÁS. TIF 8800 éghető gáz detektor

Elektromos szeletelő Használati útmutató

Vízből extrahálható ásványolaj-eredetű szénhidrogének meghatározása membrán segített oldószeres extrakcióval

MULTIKOMPONENSES NÖVÉNYVÉDŐSZER-MARADÉK MEGHATÁROZÁS LEHETŐSÉGEI ÉLELMISZEREKBŐL TÖMEGSPEKTROMETRIÁS MÓDSZEREKKEL

Környezetvédelmi mérések fotoakusztikus FTIR műszerrel

Motion binax Motion SX binax, Motion SA binax, Motion PX binax Használati útmutató. Life sounds brilliant.

AQUA PURIFICATA. Tisztított víz. Letöltetlen, tisztított víz

DÖRZSÖLT SZILIKONOS VAKOLAT 2.0 és 2.5

LACTOSUM ANHYDRICUM. Laktóz, vízmentes

ETHANOLUM (96 PER CENTUM) (1) 96 %-os Etanol

Új mérték a C H N O S analízisben

Kiegészítők. 1. fejezet: Általános leírás / jellemzők

MAGYAR ÉLELMISZERKÖNYV Hivatalos Élelmiszervizsgálati Módszergyűjtemény. Codex Alimentarius Hungaricus

APROTININUM. Aprotinin

ROXELL FLEX AUGER TM. kezelési és karbantartási útmutató. Forgalmazza és szereli: GALEX HUNGÁRIA KFT.

Modern műszeres analitika számolási gyakorlat Galbács Gábor

MAGYAR ÉLELMISZERKÖNYV (Codex Alimentarius Hungaricus)

Tárgyszavak: laktóz-túlérzékenység; laktázhiány; laktózkimuatás; indikátorpapír.

KEZELÉSI UTASÍTÁS. 3 W-650 Benzinmotoros háti permetező Az eredeti kezelési utasítás fordítása 3W-650

Témavezető neve Földiné dr. Polyák lára.. A téma címe Komplex vízkezelés természetbarát anyagokkal A kutatás időtartama:

SUCRALFATUM. Szukralfát

Thermo Orion 925. VILLÁM-titráló. Semlegesítési zóna. a) 1,0 másodperc b) 2,0 másodperc c) 3,0 másodperc d) 4,0 másodperc

BIZTONSÁGI TUDNIVALÓK

OPIUM CRUDUM. Nyers ópium

(11) Lajstromszám: E (13) T2 EURÓPAI SZABADALOM SZÖVEGÉNEK FORDÍTÁSA

Kémiai analitika GÁZKROMATOGRÁF. Bodáné Kendrovics Rita főiskolai adjunktus

Zöld Kémiai Laboratóriumi Gyakorlatok. A ciklohexén előállítása

AMOXICILLINUM TRIHYDRICUM. Amoxicillin-trihidrát

AQUA AD INIECTABILIA. Injekcióhoz való víz. Letöltetlen, injekcióhoz való víz

LEVEGÕTISZTASÁG-VÉDELEM

Az orvosi kamilla (Matricaria recutita L.) nemesítését megalapozó vizsgálatok

Kenőanyagcsere és gépkarbantartás szervezés olajanalízis alapján

MUNKAANYAG. Orosz Tibor. Sűrített levesek. A követelménymodul megnevezése: Ételkészítés

4. SZÉRUMFEHÉRJÉK MENNYISÉGI MEGHATÁROZÁSA ÉS FRAKCIONÁLÁSA (BGY:15-18 old.)

ADEPS LANAE. Gyapjúviasz

Yale CORNI Szerelési útmutató az 570-es elektromos zárhoz

9. Hét. Műszeres analitika Folyadékkromatográfia Ionkromatográfia Gélkromatográfia Affinitás kromatográfia Gázkromatográfia. Dr.

Méréstechnika. Vízben zavarosság, vezetőképesség és oldott oxigéntartalom mérése

( -Mitteilungen, 2008/2)

Gyógyszermaradványok eltávolításának vizsgálata egy mobil szennyvíztisztítóban. Miskolci Egyetem Kémiai Intézet, 2

Kapuvári szennyvíztelep intenzifikálása (példa egy rendszer minőségi és mennyiségi hatékonyságának növelésére kis ráfordítással)

ÁLLATI EREDETŰ, EMBERGYÓGYÁSZATI IMMUNSZÉRUMOK. Immunosera ex animale ad usum humanum

poliklórozott dioxinok és furánok fotolízise

AQUA VALDE PURIFICATA. Nagytisztaságú víz

Vállalkozás alapítás és vállalkozóvá válás kutatás zárójelentés

ph mérés indikátorokkal

VIZES INFÚZIÓS OLDATOK TARTÁLYAINAK ELŐÁLLÍTÁSÁHOZ HASZNÁLT LÁGYÍTOTT POLI(VINIL- KLORID)-ALAPÚ ANYAGOK

Pilot smart.nc. itnc 530. NC szoftver xx xx xx xx xx. Magyar (hu) 6/2006

Minőségbiztosítás, validálás

Mosogatógépek Használati utasítás

A év agrometeorológiai sajátosságai

GINSENG RADIX. Ginzenggyökér

SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGALATI TALÁLMÁNY

Diplomás pályakezdők várható foglalkoztatása és bérezése a versenyszektorban magyarországi cég körében végzett felmérés elemzése gyorsjelentés

EURÓPAI BIZOTTSÁG EGÉSZSÉG- ÉS FOGYASZTÓÜGYI FŐIGAZGATÓSÁG

A KÉSZÜLÉK MŰKÖDÉSE. További információk (beleértve a hibaelhárítást és a szervizet) a használati utasítás megfelelő fejezeteiben találhatók.

DEMONSTRÁCIÓS- ÉS TANULÓKÍSÉRLETI ESZKÖZÖK KÉSZÍTÉSE

Küldetésünk nagyon egyszerű. Olyan probélmákat oldunk meg, amelyek fölött mások elsiklanának.

A családi háttér és az iskolai utak eltérései

A fehérje triptofán enantiomereinek meghatározása

Mikrohullámú sütő. Tisztelt Vásárlónk. Használati utasítás

Fel a csúcsra a magasépítésben.

A proteomika új tudománya és alkalmazása a rákdiagnosztikában

oldalon.

FLUDARABINI PHOSPHAS. Fludarabin-foszfát

A DSG-váltó LUK kéttárcsás száraz tengelykapcsolójának cseréje

MP Rotator A vízkijuttatás hatékonyságának új etalonja

Természetközeli erdőnevelési eljárások faterméstani alapjainak kidolgozása

HYDROXYPROPYLBETADEXUM. Hidroxipropilbetadex

Használati utasítás DOSATRON D25 RE2 gyógyszeradagolóhoz

HASZNÁLATI ÚTMUTATÓ A TEKA TMW 22 BI-S ÉS A TMW 22 BI-T TÍPUSÚ MIKROHULLÁMÚ SÜTŐKHÖZ

A GC speciális kiadványa

Adatgyőjtés, mérési alapok, a környezetgazdálkodás fontosabb mőszerei

LACTULOSUM. Laktulóz

Tárgyszavak: autógyártás; műszaki követelmények; permeáció; üzemanyag-emisszió; mérési módszer; áteresztés csökkentése.

Type HD8750 HASZNÁLATI UTASÍTÁS

Minisztérium vagy egyéb nemzeti vagy szövetségi hatóság, valamint regionális vagy helyi részlegeik Ajánlatkérő fő tevényeségi köre:

JDJ Halogén detektor. felhasználói útmutató

A Lipton Teaintézetről. A Lipton Teaintézet küldetése a tudatos teafogyasztás folyamatos népszerűsítése, és a

FELHASZNÁLÓI KÉZIKÖNYV

Átírás:

Peszticidek vizsgálata gyümölcs és zöldség mintákban standard QuEChERSmódszerrel és módosított módszerrel a Geno/Grinder alkalmazásával Bevezetés A 2003 ban Anastassiades és Lehotay által kifejlesztett QuEChERS ( quick, easy, cheap, effective, rugged and safe azaz gyors, egyszerű, olcsó, hatékony, robusztus és biztonságos) bizonyítottan megfelelő és eredményes módszer a peszticidek mérésére különböző mezőgazdasági termékekben. A zöldségekben és gyümölcsökben felhalmozódó peszticidek egészségkárosító hatása miatti félelmek növekedése következtében egyre nagyobb szükség van a termékek peszticid tartalmának meghatározására mielőtt a piacra kerülnének. A QuEChERS módszer a hagyományos minta előkészítési módszerekhez képest sokkal több minta elemzését teszi lehetővé rövidebb idő alatt. Ebben a tanulmányban a Geno/Grinder készüléket használtuk a zöldség/gyümölcs minták homogenizálására és a sókkal és oldószerrel történő gyors és alapos összekeverésére. A tanulmány célja, hogy meghatározza, hogy a Geno/Grinder használata az extrakció során növeli e a peszticidek visszanyerésének hatékonyságát a hagyományos, kézi QuEChERS módszerhez viszonyítva. A helyi szupermarketben vásárolt friss eper, alma és zeller mintákat 5 10 centiméteres darabokra vágtuk, majd 15,1 grammonként 50 ml es LDPE centrifuga csövekbe mértünk. Minden mintához 250 µl 40 µg/ml es oldatot adtunk (spike olás), mely a 13 leggyakoribb peszticidet tartalmazta (SPEX CertiPrep diklór metánban, 10 ppm mintánként). A peszticid mixet pipettával adagoltuk a csövekbe. A csöveket lefedve kézzel 15 másodpercig óvatosan ráztuk, hogy a peszticid oldat egyenletesen bevonja a zöldség/gyümölcs mintákat. A mintákat hűtőszekrénybe tettük, és 4 C on egy éjszakán keresztül tároltuk. Hagyományos QuEChERS módszer 4 darab csőből a spike olt eper mintát (mindegyik 15,1 g ot tartalmaz) együtt turmixgéppel simára keverjük. Ezután a mintákat 15,1 grammonként újra bemérjük centrifuga csövekbe. Az alma és a zeller mintákat az eper mintákhoz hasonlóan spike oltuk és homogenizáltuk. Az összes homogenizált mintát tartalmazó csőbe 6,0 g vízmentes magnézium szulfátot, 1,5 g vízmentes nátrium acetátot, és 15 ml acetonitrilt (mely 1% vízmentes ecetsavat tartalmaz) adagoltunk. A csöveket lezártuk és kézzel összeráztuk egy percen keresztül. Ezután az összes csövet 3500 as fordulaton 3 percig centrifugáltuk. A felülúszó folyadékot eltávolítottuk, két egyenlő részre osztottuk 15 ml es centrifuga csövekbe (ezt követően 5 ppm a maximum peszticid koncetráció). A csövekbe PSA adszorbenst (25 mg x felülúszó folyadék térf. (ml)) és GCB adszorbenst (5 mg x felülúszó folyadék térf. (ml)) adtunk. Ezt követően a csöveket lezártuk, majd kézzel összeráztuk (30 mp) és 3200 as fordulaton 1 percig centrifugáltuk.

Módosított QuEChERS módszer a Geno/Grinder alkalmazásával A spike olt mintákat tartalmazó csövekbe 3 kerámia őrlő hengert tettük, és 5 ml acetonitrilt (mely 1% vízmentes ecetsavat tartalmaz) adtunk minden mintához. A csöveket lezártuk, és a Geno/Grinder mintatartójába helyeztük, majd 1500 as percenkénti fordulaton őröltük. 2 perc őrlés után az eper minták pépes, folyékony állagúvá váltak. Mivel az alma és a zeller rostosabb, ezért 6 perc és 1500 1/min fordulat szükséges a pépszerű állag eléréséhez. Előzetes tesztek során arra a következtetésre jutottunk, hogy egy kevés oldószer (5 ml) hozzáadása elősegíti a minták őrlését. Oldószer nélkül a keményebb, rostosabb gyümölcsök és zöldségek leülepszenek a cső aljára és nehéz hatékony őrlést elérni. 15 ml oldószer hozzáadása túl soknak bizonyult, az őrlés a sok folyadék következtében nem volt megfelelő. A kísérletezés eredményeképpen megállapítottuk, hogy 5 ml oldószer hozzáadása 15 g mintához vezet optimális őrlési eredményre. Az összes csőbe ezután 6,0 g vízmentes magnézium szulfátot, 1,5 g vízmentes nátriumacetátot, és 10 ml acetonitrilt (mely 1% vízmentes ecetsavat tartalmaz) adagoltunk. A csöveket lezártuk, visszahelyeztük a Geno/Grinder be és 1 percen keresztül 1500 as fordulaton rázattuk. A mintákat ezután 3500 1/min fordulattal 3 percig centrifugáltuk. A felülúszó folyadékot minden csőből eltávolítottuk, megmértük, majd két egyenlő részre osztottuk 15 ml es centrifuga csövekbe (ezt követően 5 ppm a maximum peszticid koncetráció). A csövekbe PSA adszorbenst (25 mg x felülúszó folyadék térf. (ml)) és GCB adszorbenst (5 mg x felülúszó folyadék térf. (ml)) adtunk. Ezt követően a csöveket lezártuk és a Geno/Grinder ben és 30 másodpercen keresztül 1500 as fordulaton rázattuk, majd 3200 1/min fordulattal 1 percig centrifugáltuk. Módosított QuEChERS módszer a Geno/Grinder alkalmazásával All In One További spike olt eper mintákat készítettünk elő egy másik eljárás segítségével. Azt próbáltuk kideríteni, hogy az elő homogenizálás kihagyható e puha gyümölcsök esetében. 6,0 g vízmentes magnézium szulfátot, 1,5 g vízmentes nátrium acetátot, és 15 ml acetonitrilt (mely 1% vízmentes ecetsavat tartalmaz) adagoltunk a 15,1 g darabolt epret tartalmazó csövekbe. A mintákat tartalmazó csöveket ezután behelyeztük a Geno/Grinder be. 2 perc őrlés után az eperben néhány látható darab egyben maradt, ezért a mintákat további 2 percen keresztül őröltük (összesen 4 percig). Ekkor az eper teljesen elkeveredett a sókkal és az oldószerrel. A mintákat centrifugáltuk, a felülúszó folyadékot eltávolítottuk, és az előbbi módszeren belül részletezett módon kezeltük. Mintaelőkészítés A tisztítás és centrifugálás után a felülúszó folyadékot eltávolítottuk az egyes minták esetében, és 15 ml es csövekbe helyeztük (az összes módszernél). Majd a csöveket óvatosan melegítve nitrogén áramban majdnem teljesen szárazra párologtattuk a mintákat (körülbelül 100 µl). Ezután toluollal 1 ml re egészítjük ki a minták térfogatát.

Mintamérés A mintákat HP 5890 GC készülékkel elemeztük, CV 5 kapilláris kolonna és 5972 MSD detektor segítségével. A szkennelés tartománya 35 450 m/z, a jel:zaj arány 3:1. Az injektált minta mennyisége 1 µl volt. Eredmények és kiértékelés Az eper minták eredményeit az 1. ábra mutatja. A kék szín jelöli a sókkal és acetonitrillel hagyományosan kézi rázással előkészített mintákat. A piros mutatja a sók hozzáadása előtt a Geno/Grinder rel homogenizált mintákat, végül a zöld szín (All In One) az előzetes homogenizálás nélküli mintákat, ahol minta a sókkal és az acetonitrillel egyidejűleg lett örölve illetve összekeverve. Az összes kimutatható peszticidre magasabb visszanyerés érhető el azon minták esetében, melyek előkészítéséhez a Geno/Grinder t használtuk, szemben a kézzel készített mintákkal. Érdekességképpen, abban az esetben, mikor a mintákat a sókkal és az oldószerrel együtt őröltük (All In One) hasonlóan jó, vagy egyes esetekben még jobb eredményt értünk el, mint amikor az előzőleg Geno/Grinder rel homogenizált mintákhoz adtuk a sókat. Ez azt jelenti, hogy ez a módszer használható puha gyümölcs mátrixoknál. A leggyengébb eredmény a Dichloran és Chlorothalonil visszanyerésénél figyelhető meg. Ez az összes vizsgált mátrix esetére igaz. Valójában a zellerben Chlorothalonil nem mutatható ki, még a Geno/Grinder használatával sem. Mivel az itt használt módszert nem optimalizáltuk egyetlen bizonyos peszticidre sem, nem meglepő, hogy néhány peszticid nem stabil az alkalmazott körülmények között. A 2. ábra mutatja a visszanyerést az alma esetében. Itt a Geno/Grinder módszer eredményei szintén felülmúlják a hagyományos kézi módszert. Az összes kimutatható peszticid esetében nagyobb visszanyerést tapasztaltunk, mikor a Geno/Grinder t használtuk az alma pépesítésére és a sókkal illetve az oldószerrel történő összekeverésére.

Az egyedüli kivételt az Azinphos Methyl jelenti, ahol a visszanyerés a két módszer esetében megegyezett. A legtöbb peszticidre a visszanyerés hatékonysága hasonló volt az eper mintáknál tapasztaltakhoz. Azonban a Diphenylamin eredmény a Geno/Grinder módszer esetében 6,2 ppm volt, ami több mint az 5 ppm, amit a mintákhoz adtunk. Ezekben a mintákban a manuális módszer eredménye (3,8 ppm) szintén magasabb volt, mint a többi peszticid visszanyerési értéke. A Diphenylamint gyakran használják az alma héjának védelmére, a mért magas koncentráció valószínűleg ennek következménye. Mindazonáltal a Geno/Grinder minták eredményei lényegesen magasabbak, mint a standard QuEChERS módszer minták esetében. A zeller minták eredményei a 3. ábrán láthatók. Ugyanúgy mint az eper és az alma minták esetében, a visszanyerési értékek itt is sokkal magasabban a kézi módszerhez viszonyítva. Mindhárom mátrix esetén a Geno/Grinder rel extrahált minták esetén kimutathatók olyan peszticidek, melyek a hagyományos kézi módszer esetén nem jelentkeztek. Különösképpen figyelemre méltó a Vinclozolin esetében a zeller mintákban.

A Carbofuran és a Diphenylamin egyáltalán nem mutatható ki a kézzel készített QuEChERS mintákból, szemben a Geno/Grinder használata esetén. Az előző ábrákból világosan látszik, hogy a Geno/Grinder használata jelentősen növeli a peszticidek visszanyerési arányát. Mivel a Geno/Grinder sokkal erőteljesebben és gyorsabban rázza a mintákat, mint azt kézzel lehetne megvalósítani, így nem meglepő, hogy az extrakció sokkal hatékonyabb. 1 perc alatt 1500 as percenkénti beállításnál a Geno/Grinder 1500 szor mozgatja a csöveket a teljes fel le ciklusban, míg egy ember 1 perc alatt körülbelül 200 szor képes a csövet megrázni. Továbbá a Geno/Grinder ben nemcsak a sókkal és az oldószerrel keveredik el alaposan a minta, hanem a minta őrlése és homogenizálása következtében a peszticidek extrakciója is tökéletes lesz. Ennek következtében a puha mátrixú minták esetében az elő homogenizálás el is hagyható, ezáltal tovább csökkentve a mintaelőkészítés idejét. A megnövelt visszanyerési hatékonyságon kívül a Geno/Grinder használatával egyidejűleg több minta homogenizálható és extrahálható. Ebben a tanulmányban 12 darab 50 ml es cső volt egyidejűleg a Geno/Grinder ben, míg kézzel maximum 4 csövet lehet egyszerre rázni. Az extrakciós lépésnél, a Geno/Grinder be 12 mintát helyeztünk be, míg kézzel maximum 6 minta kezelhető. Következtetés Különböző sűrűségű és keménységű terményminták esetén a Geno/Grinder használatával előkészített mintáknál jelentősen nagyobb peszticid visszanyerést tapasztaltunk a hagyományos kézi mintaelőkészítéssel összehasonlítva. Továbbá, mivel a készülék működési ideje és a frekvencia automatikusan szabályozott, minden minta rázása egyenletesen és ugyanolyan módon történik. A Geno/Grinder maximum 16 darab 50 ml es centrifuga csövet tud egyszerre rázni, amivel jelentősen csökkenthető a minta előkészítésének ideje. A mintaelőkészítési idő csökkentése mellett, a laboratóriumban dolgozók elfáradását is megelőzhetjük a készülék használatával. Végül a terménymintákat a Geno/Grinder rel 50 ml es centrifuga csövekben őrölhetjük, jó eséllyel az elő homogenizálás elhagyásával. Puha gyümölcsök, mint például az eper, őrölhetők a QuEChERS módszernél alkalmazott sók és oldószer jelenlétében, a peszticid visszanyerés csökkenése nélkül. Az 1954 ben alapított amerikai SPEX SamplePrep cég által gyártott Geno/Grinder egyéb mintavelőkészítéshez használható termékekkel kapcsolatban érdeklődjön a NANOTEST Hungary Kft. nél.