Enziinetia Az enzie reació ebeégéne leíráa, jellező paraétere azonoítáa. Ha: E + E + P A ztöchioetriához indegyiet ól-ban vagy graban ellene ifejezni. De: az enzipreparátu ohae tizta. Ezért az enzie ennyiégét a hatáu alapján adju eg: Enziinetia Egy egyég (Unit) az az enzi ennyiég, aely µol zubztrátot alaít át vagy µol teréet épez perc alatt adott reació örülénye özött. I rendzerben: atal: ol zubztrátot alaít át alatt. Ez hatala egyég, pratiuabb a nanoatal 0-9 at Fajlago ativitá: E/g, E/l Michaeli-Menten inetia E + E E + P - iindulái feltételezée: - 0 (a áodi lépé irreverzibili) az elő lépé gyoran egyenúlyra jut RAPID EILIBRIUM: E - (E) - Egyenúlyi állandója:.e (E) az E oplex tabil, az EP oplex elhanyagolható 3 BME Alalazott Biotechnológia é Élelizertudoány Tanzé
Michaeli-Menten inetia E + E E + P - - egy atív centru, egy zubztrát ativitá helyett oncentráció haználható ()» (E 0 ) vagyi E 0 / «a inet érdelő reacióebeég: dp (E) anyagérleg az enzire: E + ( E ) E o 4 Michaeli-Menten inetia Ozu el a ét egyenletet: (E) E E + (E) o Helyetteítü be: Rendezzü át: E o E o + ert.e (E) + dp (E) E E o E + E volt 5 Michaeli-Menten inetia Ebből az ebeégi egyenlet: + avagy + 6 BME Alalazott Biotechnológia é Élelizertudoány Tanzé
M é M Maud Menten 879-960 Leonor Michaeli 875-949 Michaeli, L., Menten, M. (93) Die ineti der invertinwirung, Biocheiche Zeitung 49, 333-369 7 Brigg-Haldane inetia E + E E + P - Ugyanazo a diffegyenlete, de a feltételezé: (vázi) állandóult állapot teady tate d E + ( E) d(e)/ 0 - ( ) d E ( ) ( ) E E E ()» (E 0 ) vagyi E 0 / «E > - (E) ill. E > (E) dp ( E) 8 Brigg-Haldane inetia Egy rövid áteneti zaaz (pre-teady tate) után ca nagyon laú a változá (vázi teady tate). 0 pre-t.t. (E) vázi t.t. P E 0 Brigg, G. E., and Haldane, J. B. (95) A Note on the inetic of Enzye Action, Bioche J 9, 338-339. 0 E idõ 9 BME Alalazott Biotechnológia é Élelizertudoány Tanzé 3
Brigg-Haldane inetia ( E) d ( E) ( E) 0 E E ( + )( E) ( E) ( + ) E E + (E) E o Eo + + ( - + ) / Michaeli állandó 0 Dizuzió Michaeli -Menten + Brigg-Haldane + + + ha ( )» ( ) aor a ét ontan azono! Dizuzió derézögű hiperbola: + E 0 >> << ( / ) E0 E0 atalitiu effetivitá pecfi(ci)tái állandó BME Alalazott Biotechnológia é Élelizertudoány Tanzé 4
Reacióebeég A M-M é B-H egyenleteben a indig a ezdeti reacióebeéget ( 0 t0-ra extrapolált ebeég) jelenti. 3 Linearizáláo Linearizált ábrázolát haználun, ert: Hiperboliu regreziót záolni gép nélül unaigénye Az enziinhibíciónál + inforációt ad.. Lineweaver-Bur linearizálá /v / + 4 Linearizáláo. Hane-Languir linearizálá /v + 3. Eady-Hoftee linearizálá v/ v 5 BME Alalazott Biotechnológia é Élelizertudoány Tanzé 5
Az enzioncentráció hatáa Ha v.e 0, aor: tg α 6 A inetiai paraétere : ne iu, hane liit határebeég Ne enzitulajdonág, ert függ E 0 -tól:. E 0 ATIITÁ A enzitulajdonág turnover nuber, váltázá [ - ] az enzioleula átalaítái frevenciája iterjezté inden enzire é inden inetiára: cat [ - ]: egy enzioleula átalaítái frevenciája -telíté eetén: egy enzioleula cat. E 0 időegyég alatt hány oleula zubztrátot alaít át. 7 A inetiai paraétere:, az enzi affinitáa a zubztráthoz az élő ejtben özelítőleg ennyi az oncentráció, ert így jól zabályozza a ebeéget áltozott a Inhibitor? Ativátor? Enzianalitia: ha ativitát ére: >> vv érzéetlen ha zubztrátoncentrációt ére: << lineári tartoány Túl érzéeny 8 BME Alalazott Biotechnológia é Élelizertudoány Tanzé 6
A inetiai paraétere 0 7-0 0 d 3 ol - in - [. érté (0 ) a i oleulá diffúzióebeége] - 0-0 6 in - 50-0 7 in - 0-6 - 0 - ol/d 3 9 cat értée cat cat aló határa etaboliu enzienél 7 7 0 0 M Legtöbb enzi e ét zélő 7 M 0 M eet özött Terézete enzienél: >0 5 Meterége E-nél (DNA-zye, abzye:<0 3) 0 Reverzibili reació o enzi atalizálta reació - főént a biopolier hidrolízie - nagyértében a jobboldali irányba eltolt egyenúllyal rendelezne gyaorlatilag a - valóban elhanyagolható. De például a glüóz frutóz (glüóz izoeráz reació) a gyaorlatban i egyenúlyi reacióént vieledi. BME Alalazott Biotechnológia é Élelizertudoány Tanzé 7
Reverzibili reació Mivel a odellben - 0, a reverzibili reaciót ét ellentéte egyirányú folyaat leíráából állítju öze. p + + E + E E + P - - E o p E o eq(uilibri u) / P Reverzibili reació égezzü el a övetező oztáoat: E + o é p p E + o p p p p Egyenúlyi állandóra ugyanazt aptu - HALDANE özefüggé eq 3 E P MI TÖRTÉNI? P vagy P? netto előre - viza (E) - - (EP) netto Reverzibili reació MITŐL FÜGG? P eq P + p + P P P + + eq,, P értée P P Reverzibili M-M egyenlet 4 BME Alalazott Biotechnológia é Élelizertudoány Tanzé 8