Biológiailag aktív konjugátumok szintézise módosított ösztrán vázon

Biológiailag aktív konjugátumok szintézise módosított ösztrán vázon Doktori (Ph.D.) értekezés Zóka Johanna Témavezetők: Prof. Dr. Wölfling János tanszékvezető egyetemi tanár Dr. Mernyák Erzsébet egyetemi adjunktus Kémia Doktori Iskola Szerves Kémiai Tanszék SZTE TTIK 2017 Szeged

TARTALOMJEGYZÉK 1. Bevezetés... 1 2. Irodalmi előzmények... 3 2.1. Vázmódosított ösztron származékok és azok biológiai aktivitása... 3 2.2. Azid-alkin click reakció szterán vázon... 13 2.2.1. Cu(I)-ion katalizált azid-alkin click -reakció... 13 2.2.2. Click -reakció szterán vázon... 15 2.3. Sonogashira keresztkapcsolás szteroid modellen... 21 2.3.1. A Sonogashira kapcsolás... 21 2.3.2. Biológiailag aktív ösztron származékok előállítása Sonogashira-kapcsolással... 24 2.3.3. Az ösztron aromás gyűrűjének jódozási reakciói... 28 2.4. Átmenetifém-katalizált reakciók aktiválása mikrohulámmal... 32 2.5. Heterociklus kialakítása átmenetifém-katalizált one-pot reakcióval... 36 3. Célkitűzés... 39 4. Kísérleti eredmények tárgyalása... 40 4.1. Kiindulási D-szeko vegyületek előállítása a 13 - és 13 -ösztron sorban... 40 4.2. Ösztron-alkinek előállítása... 44 4.3. Az újonnan előállított szteroid alkinek (90 94, 102, 103) CuAAC reakciói... 50 4.4. Palládium-katalizálta keresztkapcsolások D-szekoösztrán alapvázakon... 59 4.4.1. A D-szekoösztronok aromás A-gyűrűjének jódozási reakciói... 59 4.4.2. Jódszteroidok Sonogashira keresztkapcsolási reakciói... 65 4.5. One-pot Sonogashira- click reakció... 72 5. Az előállított vegyületek biológiai eredményei... 78 5.1. A triazol konjugátumok és előanyagaik gyógyszer hatástani eredményei... 78 5.2. A vegyületek 17 -HSD1 enzimgátlási eredményei... 84 6. Általános kísérleti rész... 89 7. Részletes kísérleti rész... 90 8. Összefoglalás... 100 9. Summary... 105 10. Irodalomjegyzék... 110 11. Köszönetnyilvánítás... 119 12. Mellékletek... 120

RÖVIDÍTÉSEK JEGYZÉKE ER 17 -HSD1 CuAAC DIPEA PPh 3 TFA NIS MW TMSA DCC HBTU HOBt COSY NOESY HSQC HMBC NEt 3 NH(iPr) 2 TBAF DABCO ösztrogén receptor 17 -hidroxiszteroid-dehidrogenáz 1 enzim réz-katalizált azid-alkin cikloaddíció N,N-diizopropil-etilamin trifenilfoszfán trifluorecetsav N-jódszukcinimid microwave (mikrohullám) trimetilszilil-acetilén N,N-diciklohexil-karbodiimid O-benzotriazol-N,N-tetrametil-urónium hexafluorofoszfát 1-hidroxi-benzotriazol Correlated Spectroscopy, kétdimenziós korrelációs NMR spektroszkópiai technika Nuclear Overhauser Effect Spectroscopy, olyan kétdimenziós NMR spektroszkópiai technika, amely a magok téren keresztüli hatásán alapul Heteronuclear Single Quantum Coherence, olyan kétdimenziós NMR spektroszkópiai technika, amely két közvetlenül kötésben különböző magok közötti kölcsönhatást mutatja Heteronuclear Multiple Bond Correlation, olyan kétdimenziós NMR spektroszkópiai technika, amely két nem közvetlenül kötésben lévő különböző magok közötti kölcsönhatást mutatja trietilamin N,N-diizopropil-amin tetrabutilammónium-fluorid 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktán

1. Bevezetés Az ösztron és származékai a szteránvázas vegyületek csoportjába tartozó természetes, illetve szintetikus vegyületek. Hormonhatásuk mellett sokrétű biológiai funkció kifejtésére képesek. A farmakológiai sajátságokat a szteroid vázának szerkezete és a különböző helyzetben lévő funkciós csoportok minősége, térállása határozza meg. Így az ösztrán váz módosításával befolyásolhatjuk a molekula magreceptoraihoz, ill. szteroidogén enzimekhez való kötődését. Ennek köszönhetően alkalmas kiindulási pontjai lehetnek a gyógyszertervezésnek. A modern gyógyszerkutatás egyik fő iránya a szelektív hatású antitumor hatóanyagok kifejlesztése. A hormonális aktivitás visszaszorítása azonban nem könnyű feladat, ehhez az ösztrán váz szerkezetének célzott megváltoztatására van szükség. A 13-as szénatom epimerizálása, a D- gyűrű felnyitása vagy D-homologonokká alakítása megváltoztatja a vegyület konformációs viszonyait, ezzel a magreceptoraihoz való kötődését is. Az ösztrogén hatás visszaszorítása mellett azonban egyéb, kedvező biológiai aktivitások jelenhetnek meg. A természetes ösztron 13-as helyzetben történő epimerizálása ma már egy egyszerű, egylépéses folyamatban megvalósítható. Több 13-epimerről is bebizonyosodott, hogy ösztrogén aktivitás helyett egyéb kedvező biológiai funkcióval rendelkeznek. 1,2 Egyes 13 -ösztron származékok sejtosztódást gátló hatást fejtenek ki különböző sejtvonalakon, mások az ösztradiol bioszintézisében résztvevő enzimek gátlásán keresztül befolyásolják az ösztrogénfüggő elváltozásokat. A vázmódosított származékok egy további csoportját a nyitott B-, C- vagy D-gyűrűs szeko-vegyületek alkotják. A szeko-ösztronok biológiai hatásáról kevés adat áll rendelkezésre az irodalomban, néhány képviselőjükről azonban ismert, hogy nem mutat affinitást magreceptoraihoz. 3 A 13 - vagy a D-szeko-ösztron, mint hormonálisan inaktív módosított vázak megfelelő alapot biztosítanak olyan hatóanyagok tervezéséhez, amelyek szelektív hatásúak lehetnek. A szteroidok antitumor hatása megfelelő heterociklusok beépítésével fokozható. 4 A heterociklusos szteroid konjugátum alkotórészeinek biológiai hatása lehet hasonló vagy különböző, de mindenkori cél a kívánt aktivitás fokozása. A hidrofób, viszonylag merev ösztránváz nemcsak a biológiai hatásért felelhet, hanem a sejtmembránon való átjutásért is. Míg a heterociklus és a hozzá kapcsolódó egyéb molekularészlet általában a targethez való kötődésért felel, de önálló biológiai funkcióval is rendelkezhet. Heterociklusos ösztron konjugátumok előállítására többféle szintetikus stratégia is rendelkezésünkre áll. Az 1

átmenetifém-katalizált reakciók az utóbbi időben rendkívül nagy népszerűségre tettek szert, széleskörű alkalmazhatóságuknak köszönhetően. A megfelelő reakciópartnerek kialakítását követően a két egység összekapcsolása egyszerűen, rövid reakcióidők alatt, szelektíven valósítható meg. A zöld kémia elveinek figyelembe vétele a preparatív szerves kémiának is fontos szempontja. A mikrohullámú technika bevezetésével a szteroidkémiában is új irányvonal nyílhat meg. Olyan átalakítások kivitelezése is lehetővé válik, amelyek hagyományos körülmények között csak nagyon nehezen valósíthatók meg. Jelen munkában ezen szintetikus és farmokológiai célokat igyekeztünk ötvözni. 2

2. Irodalmi előzmények 2.1. Vázmódosított ösztron származékok és azok biológiai hatása A szteránvázas vegyületek a természetes szénvegyületek családjába tartozó, az élővilágban meghatározó szerepet betöltő, rendkívül változatos szerkezetű szerves molekulák. Az emberi szervezetben megtalálható női nemi hormonok között három ösztrogén hatású vegyület fordul elő: az ösztron (1a), a 17β-ösztradiol (2a) és a 16α,17β-ösztriol (3a, 1. ábra). Az ösztrogének közös szerkezeti elemei az aromás A-gyűrű és a transz-gyűrűanellációk. A B-gyűrű általában félszék, míg a C-gyűrű szék konformációjú. A természetes ösztron (1a) két oxigénatomja egymástól meghatározott távolságban helyezkedik el, amely fontos szerepet játszik hormonhatásának kifejtésében. 1. ábra: Az ösztrogének (1a 3a) és 3-védett származékaik szerkezete (1b, c 3b, c) Ezen megállapítás óta számos kutatás foglalkozott a természetes ösztron (1a) szerkezetének arra irányuló célzott kémiai megváltoztatásával, amely hormonálisan inaktív, biológiailag kedvező hatású szintetikus származékokat eredményezhet. 5 Számtalan különbözőképpen módosított citosztatikus ösztron származék ismert, 6 11 amelyek többféle mechanizmus révén fejtik ki hatásukat. Támadáspontjaik lehetnek az ösztron bioszintézisében részt vevő enzimek, vagy saját magreceptoraikon keresztül hatva, antiösztrogénként gátolhatják a tumorsejtek osztódását. Az irodalomban ismert, hogy a 2- és/vagy 17- szubsztituált ösztron-3-szulfamátok a szteroid-szulfatáz (STS) enzim inhibitorai 12 14, a 2- haloösztronok aromatáz-gátlók, 15 míg az ösztron számos szubsztituált, homológ vagy konjugátum származéka a 17β-hidroxiszteroid-dehidrogenáz 1-es típusú izozim (17 -HSD1) inhibitoraként viselkedik. 16 25 Ezen szteroidogén enzimek gátlásával új lehetőséget 3

teremthetünk a hormon függő tumoros megbetegedések kezelésében. 26 A 17 -ösztradiol (2a) a sejtosztódást serkentő növekedési faktorok aktiválásán keresztül fokozza az ösztrogén-függő tumorok növekedését. Ennek visszaszorítására célszerű az ösztradiol (2a, E2) bioszintézisébe beavatkoznunk, amelynek utolsó, kulcslépését a 17 -HSD1 enzim katalizálja (2. ábra). A 17 -HSD1 enzim szelektív gátlásával az ösztradiol (E2) bioszintézist az utolsó pontján állíthatjuk le. Ilyen szelektíven ható enzimgátlók alkalmazásával a mellékhatások csökkenését és a hatás szelektivitásának növekedését érhetjük el. 2. ábra A 17 -HSD1 enzim szerepe az ösztrogén hatás kialakulásában Számos szteroid- és nem szteroid-jellegű 17 -HSD1 inhibitort fejlesztettek már ki, azonban egy sem jutott el a klinikai alkalmazásig. Ennek oka, hogy a leghatékonyabb vegyületek szinte mindegyike az ösztrogének magreceptoraihoz is affinitást mutat, azaz az enzimgátlással egyidejűleg hormonális hatást is kifejtenek. Mindezek alapján elmondható, hogy a hormonálisan inaktív ösztron-alapú antiproliferatív hatóanyagok kifejlesztéséhez nem elegendő csupán az ösztránváz szubsztituálása. A hormonális aktivitás megszüntetéséhez 4

magát a vázat célszerű módosítani. Ennek egyik lehetősége a 13-as szénatom konfigurációjának megváltoztatása, ami a konformáció megváltozását vonja maga után. A 13α-ösztront (4) elsőként Butenandt és munkatársai állították elő, fotokémiai izomerizációval. 27 Munkájuk során 2 g ösztronból kiindulva, mindössze 700 mg, úgynevezett lumi-ösztront (4) nyertek. 1994-ben Yaremenko és Khvat igen hatékony, egylépéses izomerizációs módszert fejlesztett ki androsztánvázas vegyületekre. Az epimerizációt o-feniléndiaminnal, jégecetben végezték, amely 56 58%-os hozammal szolgáltatta a várt terméket. 28 A fenti eljárást Schönecker és munkatársai kiterjesztették ösztránvázas vegyületekre, és a hozamot 78%-ra növelték (3. ábra). 29 Tanszékünk Szteroidkémiai Kutatócsoportja az epimerizálást követő oszlopkromatográfiás tisztítást Girard-reagenssel való elválasztással is összekötötte. Ez azért kulcsfontosságú, mert a reakció körülményei között az említett reagenssel csak a kiindulási anyag (1) reagál, így annak kis mennyiségű maradékától is hatékonyan megtisztítható a termék 13-epi-származék (4). Az ösztron 3-benzil-éterét (1c) hasonló körülmények között reagáltatva, 98 %-os hozammal állították elő annak 13α-megfelelőjét (4c). 3. ábra Egylépéses epimerizáció az ösztránváz 13-as szénatomján A közelmúltban kanadai kutatók elvégezték a két 13-epimer négy lehetséges 17-hidroxi származékának (2a, 5 7, 4. ábra) gyógyszerhatástani tesztelését. 30 Az in vitro és in vivo vizsgálatok eredményei azt mutatták, hogy a 6-os jelű vegyület mutatja a legkisebb affinitást az ösztrogén receptorokhoz, legalacsonyabb az ösztrogén hatása az ösztrogénfüggő sejtvonalakon, és in vivo nincs hormonhatása. Az izomerek egymáshoz képest mutatott ösztrogén aktivitása a következő tendenciát mutatta: 6 < 7 < 5 << 2a. Ezek az eredmények arra utalnak, hogy az anguláris metilcsoport inverziójával az ösztrogén hatás jelentősen csökkenthető. Az ösztradiolokat (2a, 5 7) nagyobb koncentrációban (>5μM) alkalmazva, sejtosztódás gátló hatást figyeltek meg MCF-7 (ER-t kifejező) és T47D (ER-t, progeszteron és 5

HER2 receptort kifejező, ösztrogénfüggő) emlő karcinóma sejtvonalakon. A leghatékonyabb antiproliferatív vegyületnek a 7-es jelű, 17-13-epi-ösztradiol bizonyult. Poirier és munkatársai munkája alapján tehát a 13 -ösztrán váz megfelelő modellként szolgálhat potenciálisan antitumor hatással rendelkező, hormonálisan inaktív konjugátumok képzéséhez. 4. ábra A négy ösztradiol-izomer (2a, 5 7) szerkezeti képlete A 2000-es évek eleje óta kutatócsoportunk is sokat foglalkozott 13-epi-ösztron származékok vizsgálatával, mind szintetikus, mind farmakológiai szempontból. Egy, a közelmúltban a 13αösztron 16-oximjából (8, 5. ábra) előállított vegyület, jelentős sejtosztódás gátlást mutatott HeLa (méhnyakrák), MCF-7 és A2780 (petefészek karcinóma) sejtvonalakon. Az irodalomban ez volt az első antiproliferatív 13 -ösztron származék, amely a referenciavegyületnél (ciszplatin) alacsonyabb IC 50 értékeket (3,5 4,5 M) adott. 31 5. ábra A 13 -ösztron-3-benzil-éter 16-oxim-származékának (8) szerkezete 6

A vegyület (8) hatásmechanizmusa még nem tisztázott, de az eddigi irodalmi és a Kutatócsoportunk saját eredményei alapján feltételezhetően nem receptoriális úton fejti ki antitumor hatását. Áramlási citometriás mérésekkel sikerült igazolni, hogy a 16-oxim (8) a sejtek osztódási ciklusát a G1/S kontrollponton állíta meg. A sejtciklus G1/S ellenőrző pontja a G1 fázisból a szintézis fázisba történő eljutásért felelős, amelynek blokádja apoptózishoz (programozott sejthalál) vezet. Az epimerizáláson kívül vagy azzal egyidejűleg egy másik vázmódosítási lehetőség az ösztron D-gyűrűjének felnyitása. 3 Tanszékünk Szteroidkémiai Kutatócsoportjában korábban már vizsgálták ösztránvázas 16-hidroximetilidén származékok (9, 10) bázikus közegű szolvolitikus reakcióit, és hatékony eljárást dolgoztak ki a D-gyűrű felnyitására. 32 Az ösztron védett származékaiból (1b, c) kiindulva, formilezési reakcióval 16-hidroximetilidénvegyületeket (9b, c) állítottak elő, majd azokat redukálva nyerték a lehetséges cisz- és transzszerkezetű 1,3-diolok keverékét (11ba 11bd, 11ca 11cd 6. ábra). 33 35 A 13-epi-ösztron sorban az anguláris metilcsoport sztérikus gátlása miatt, hasonló reakciókörülmények között, csak a két transz diol 12bb, 12cb : 12ba, 12ca képződött, 6 : 1 arányban (6. ábra). 36 6. ábra Az 1,3-diolok (11, 12) előállítása a 13β- és 13 -ösztron sorban A D-gyűrű fragmentálódásának a feltétele, hogy a nukleofug csoport térben távol helyezkedjen el a lúgos körülmények között kialakuló alkoholát csoporttól. 37,38 Ennek teljesítéséhez a transz-vegyületek (11ba, 11bb, 11ca, 11cb, 12ba, 12bb, 12ca, 12cb) primer hidroxilcsoportját a 13 -ösztron sorban tozilezték (13ba, 13bb, 13ca, 13cb), míg a 13 ösztron származékoknál Appel-féle jódozásnak 39 vetették alá (14ba, 14bb, 14ca, 14cb, 7. ábra). Ezt követően a jól távozó funkciós csoportot és az alkoholos OH-t 1,3-helyzetben tartalmazó 13-epimereken (13ba, 13bb, 13ca, 13cb, 14ba, 14bb, 14ca, 14cb) Grob- 7

fragmentációt hajtottak végre, amely mindkét epimer sorban egy D-szekoaldehid (15b, c; 16b, c) képződését eredményezte (7. ábra). 7. ábra Grob-fragmentáció a 13β- és a 13 -ösztron sorban Ezek a D-szeko-származékok (15b, c; 16b, c) azért hasznos intermedierek, mert propenil oldalláncot és formil-funkciót tartalmaznak, amelyek számos átalakítási lehetőséget nyújtanak. A 3-metiléter sorban korábban már végrehajtották az aldehid-funkció Jonesoxidációját és redukcióját (8. ábra). A Jones-oxidáció mindkét epimer (15b, 16b) esetében hasonlóan játszódott le, főtermékként D-szekokarbonsav (17, 18), melléktermékként pedig egy áthidalt gyűrűs lakton (19, 20) képződött. 40 Az oxocsoport (15b, 16b) fémhidrides redukciójával pedig 13-epimer D-szekoalkoholokhoz (21, 22) jutottak. 8

8. ábra D-Szekokarbonsavak (17, 18) és -alkoholok (21, 22) előállítása a 3-metiléter sorban A D-szekoaldehid aldehidcsoportját egyéb nukleofil reagensekkel is átalakították. Hidroxilamin-hidroklorid alkalmazásával, nátrium-hidroxid jelenlétében, kondenzációs reakcióban nyerték a 13 -D-szekooxim 3-metiléterét (23, 9. ábra). 41 A reakcióban melléktermékként dimetil-acetál (24) képződött. Ez utóbbi elkerülésére a későbbiekben a szervetlen bázist nátrium-acetátra cserélték. Így jutottak a D-szekooxim 3-metiléterének 13- epimereihez (23, 25, 9. ábra). 42 9. ábra A D-szekooxim 3-metilétereinek (23, 25) előállítása Az előállított nyitott D-gyűrűs, heteroatomot tartalmazó vegyületeket kiindulási anyagként szintetizálták különböző gyűrűzárási reakciókhoz. A D-szekoaldehidekből (15b, c; 16b, c), -karbonsavakból (17, 18) és -alkoholokból (21, 22) elektrofil reagensekkel D-homoösztron 9

származékokat állítottak elő (10. ábra). A hatástani vizsgálatok során kiderült, hogy a 26-os vegyület 5,5 M-os IC 50 értékkel, szelektíven gátolja a HeLa sejtek osztódását. Továbbá a radioligand receptorkötődéses vizsgálatok és a patkány uterus mérések eredményeiből arra a következtetésre jutottak, hogy a D-homoösztron (26) sem in vitro, sem in vivo nem rendelkezik ösztrogén hatással. 2,43 A D-szekooximokat (23) nitron dipólusokká alakítva 1,3- dipoláris cikloaddíciókat végeztek. Fenilizocianát dipolarofilek hatására olyan D- homoösztronokat nyertek, amelyek közül a feltüntetett 27-es vegyület, 2,2 M-os IC 50 értékkel, szelektíven gátolta az A2780 sejtek osztódását (10. ábra). 44 10. ábra Antiproliferatív hatású D-homoösztronok (26, 27) A D-homoösztronok előanyagait, a D-szekoösztronokat gyógyszerhatástani szempontból nem vizsgálták. Az irodalomban csupán elvétve található példa ilyen típusú vegyületek biológiai vonatkozásait illetően. Az Újvidéki Egyetem kutatócsoportja Beckmann-fragmentációval állított elő D-szekoösztron származékokat és vizsgálta azok citotoxicitását, ill. affinitását az ösztrogén receptorokhoz. 45 49 A dokkolási kísérletek arra utaltak, hogy a vizsgált D- szekoösztronok sem in vitro, sem in vivo nem rendelkeznek ösztrogén hatással. Az in vivo uterotróp és antiuterotróp módszerekkel 50 kísérletesen is megállapították, hogy a 14- hidroxietilén oldalláncot tartalmazó D-szekoalkohol (28, 11. ábra) nem rendelkezik ösztrogén aktivitással. Továbbá a bisz-nitril (29) 3,9 és 7,3 M-os IC 50 értékkel gátolja a HeLa és az MDA-MB-231 (emlő karcinóma, amely ösztrogén és progeszteron receptorokat nem fejez ki) sejtvonalak osztódását. 51,52 Ezen eredmények gyógyszerkémiai szempontból ígéretessé teszik a D-szekoösztronok csoportját, ugyanis ez a kiaknázatlan terület még számos hatóanyagfejlesztési lehetőséget nyújt. 10

11. ábra Az Újvidéki Egyetemen előállított D-szekoösztron származékok (28, 29) A vegyületek magreceptoraikhoz való affinitását nemcsak az ösztrán váz módosításával és szubsztituálásával lehet csökkenteni, hanem különböző hibridek vagy konjugátumok képzésével is. Egy kanadai kutatócsoport olyan 17 -ösztradiol homodimereket állított elő, amelyekben a két szteroid egység egy alkil vagy polietilénglikol (PEG) láncon keresztül, észter vagy éter kötéssel van összekapcsolva a 17-es szénatomon (12. ábra). 8 12. ábra 17 -ösztradiol homodimerek (30, 31) A két monomert összekötő molekularész, a linker hossza jelentősen befolyásolhatja a vegyületek biológiai aktivitását. A Bérubé és csoportja által végzett in vitro sejtosztódás gátlási vizsgálataiból kiderült, hogy a 30a és a 30d jelű dimerek 5 M körüli IC 50 értékkel gátolják a B16-F10 bőr karcinóma sejtek osztódását. Továbbá a fluoreszcens módszerrel meghatározott receptorkötődés 53 alapján csekély affinitást mutatnak az ER -hoz. Ezzel szemben a 2 vagy 3 db (-CH 2 -O-CH 2 -)-egységet tartalmazó (30b, 30c), ill. 4 db (-CH 2 -)- egységet tartalmazó (31) dimerek a melanóma sejtvonalon kevésbé jó, míg az MCF-7 sejtvonalon hatékonyabb inhibitornak bizonyult. Az összekötő rész hossza és minősége tehát meghatározó szerepű a molekula szerkezetére és ezáltal biológiai hatására nézve. A linker és a beépítendő egység kiválasztásánál ezért a szintetikus kémiai mellett farmakológiai szempontokat is figyelembe kell venni. Megfelelő szerkezeti elemek beépítésével ugyanis 11

növelhető a származékok biológiai aktivitása, stabilitása, oldhatósága és biohozzáférhetősége. A szintézis oldaláról megközelítve pedig olyan reakciópartnerekre és kapcsolási módszerekre van szükség, amelyek gyorsan, szelektíven és az egyéb funkciós csoportok mellékreakciói nélkül szolgáltatják a kívánt konjugátumokat. 12

2.2. Azid-alkin click reakció szterán vázon A 2000-es évek elején jelentős áttörés következett be a nitrogéntartalmú konjugátumok szintézisében, amikor először került bevezetésre a click reakció fogalma. 54 A szintetikus elgondolás lényege, hogy a kívánt termékek kisebb szerkezeti egységek összekapcsolásával, enyhe reakciókörülmények között, kemo- és regioszelektíven, magas hozammal, melléktermék-képződés nélkül legyenek előállíthatóak. Ezen követelményeknek többek között megfelel a terminális alkinek és azidok [3+2] cikloaddíciója, amely már a 60-as évek óta ismert 55, azonban népszerűségét és széles körű alkalmazását Cu(I)-katalizálta változatának köszönheti. A katalitikus módszert, amellyel 1,4-diszubsztituált triazolok regioszelektíven állíthatóak elő, Sharpless és Meldal kutatócsoportja egymástól független dolgozta ki. 56,57 2.2.1. Cu(I)-ion katalizált azid-alkin click -reakció 2002 óta több, mint 1000 közlemény jelent meg a Cu(I)-katalizált azid-alkin cikloaddíció (CuAAC) reakció vonatkozásában. A katalitikus körfolyamat mechanizmusának alapját DFT számítások adják, az egyes lépések kísérletesen még nem igazoltak (13. ábra). 58 Elsőként a komplexált réz(i)-ion (i) és a terminális acetilén között alakul ki egy π-komplex, majd egy ligandum kilépése mellett képződik a réz(i)-acetilid (iii). A π-komplex esetében a terminális alkin protonja elég savassá válik (~10 egység pk a csökkenés) ahhoz, hogy akár vizes közegben is disszociáljon, és σ-komplex képződjön. Elképzelhető lenne a csak π-koordinációt feltételező reakcióút is, de a modellszámítások szerint ez még a termikus reakcióutat is meghaladó aktiválási energiát igényelne. Az azid (iv) belépése a réz-acetilidre (iii) újabb ligandum távozásával jár, és a 13. ábrán negatív töltést hordozó nitrogén kapcsolódik a Cu(I)- ionhoz (v). Az azid terminális nitrogénje ezt követően nukleofil támadást hajt végre az alkin C-2 szénatomjára. A kialakuló hattagú Cu(III)-metallaciklus (vi) egy szokatlan szerkezetű intermedier, képződése endoterm folyamat, azonban az aktiválási energia jelentősen kisebb, mint a katalizálatlan reakció esetében. Gyűrűszűküléssel alakul ki a Cu(III)-metallaciklusból (vi) a Cu(I)-triazolil komplex (vii), amelyből a ciklus utolsó lépésében protonálódás útján létrejön a kívánt triazol (viii), és visszakaalakul a katalizátor aktív formája. 13

13. ábra A CuAAC reakció katalitikus ciklusának feltételezett mechanizmusa 58 A folyamat megfelelő lejátszódásához elengedhetetlenül szükséges a Cu(I)-ionok nagy koncentrációja. Ez három különböző eljárással érhető el. 54 Az egyik lehetőség a prokatalizátor alkalmazása, amikor pl. CuSO 4 5H 2 O-ból kiindulva, redukálószer (nátrium-aszkorbát) segítségével in situ állítják elő a Cu(I)-ionokat. A másik módszer a CuI, CuBr vagy CuOAc és bázis vagy amin ligandum alkalmazása redukálószerrel egyidejűleg. Ez utóbbi vegyület a Cu(I)-ionoknak Cu(II)-ionokká történő aerob-oxidációját akadályozza meg, az amin bázis pedig segíti a réz(i)-acetilid komplex képződését (a Cu(I)-sók ugyanis kezdetben stabilis klasztereket képeznek). Továbbá rézdrót, -huzal, -por vagy -nanorészecskék is felhasználhatók, amelyek felületén Cu(II)-sóval történő oxidációval alakul ki a Cu(I)- katalizátor. A reagensek és körülmények megválasztásakor, pl. biokonjugációknál, fontos szempont, hogy a reakciók enyhébb körülmények között, akár szobahőmérsékleten vagy vízben is lejátszódjanak. A cikloaddíciókhoz használhatunk pl. poliligandumokat, ami nem szükségszerű, de mégis jelentősen növelheti a reakciósebességet. Szobahőmérsékleten a CuAAC lassú, amennyiben nincs jelen nagy koncentrációban a Cu(I)-katalizátor, ez azonban biokonjugációknál nem megengedett. Ilyenkor többfogú N-donor segédanyagokat 14

alkalmaznak (ismeretes, hogy az aminok pl. nagyobb mértékben növelik a reakciósebességet, mint a piridinek). Gyakran használt gyorsítók továbbá a trifenilfoszfán vagy az egyes karboxilátok. Előbbinek az alkalmazhatóságát azonban korlátozza a Staudinger-reakció, mint kísérő folyamat, amely során az azid aminná redukálódik, így az egyik reakciópartner elfogy a reakcióelegyből. Ennek kiküszöbölésére a trifenilfoszfánt nem sztöchiometrikus, csupán katalitikus mennyiségben alkalmazzák. A CuAAC reakció szubsztrátjaként azidok és alkinek széles skálája alkalmazható, a kapcsolás különböző funkciós csoportok mellett is elvégezhető. 59 A felhasználható oldószerek köre az apoláristól a vízig terjed. Meldal és Tornøe a különböző oldószerek és oldószerelegyek hatását vizsgálták a reakcióra. 60 Az oldószer kulcsszerepet játszik a szubsztrátok és a Cu(I)-katalizátor szolvatálásában. A poláris oldószer alkalmazása kedvez a heterociklus képződésének, azonban egy erősen koordinálódó oldószer lassíthatja vagy gátolhatja a fémszubsztrát koordinációt. 2.2.2. Click -reakció alkalmazása szterán vázon A Fokin és Sharpless által kifejlesztett módszer a szteránvázas vegyületek átalakításában is alkalmazásra talált. Az azid vagy a terminális alkin funkció kialakítása különböző szteroidokon a származékok nagyfokú változatosságát teszi lehetővé, amely mind kémiai mind farmakológiai szempontból érdekes lehet. Számításos vizsgálatok arra utalnak, hogy a triazol-gyűrű nagyfokú hasonlóságot mutat a peptidkötéssel (H-híd kialakítása révén), azonban attól eltérően kémiailag és metabolikusan is stabil. Ezek alapján ezt a szerkezeti egységet a szteránvázas vegyületekre építve növelhető azok vízoldékonysága, biológiai hozzáférhetősége és metabolikus stabilitása. 61,62 A Szerves Kémiai Tanszék Szteroidkémiai Kutatócsoportja számos alapvázra, különböző helyzetbe építette be a triazolil-egységet. A kolesztán váz 2α-, az androsztán váz 15β- és 1α-, valamint az ösztrán váz 16-os és 17-es helyzetében azid funkciót kialakítva vizsgálták azok nem-szteroid-típusú terminális alkinekkel való click -reakcióit (14. ábra). 63 71 A cél a CuAAC reakciók optimalizálása, a reakcióidők csökkentése, a magas hozamok elérése és a régiószelektív szintézisek kidolgozása volt. A Pannon Egyetem kutatócsoportja a 2-es, 6-os és 16-os helyzetben -térállású azidocsoportot tartalmazó androsztán származékok reaktivitását vizsgálta. 72 15

14. ábra Triazolil egység beépítése szterán vázra, szteroid azidból (kék) vagy alkinből (rózsaszín) kiindulva Ösztrán vázon a cikloaddíciók CuI katalizátor alkalmazásával, DIPEA és PPh 3 jelenlétében, a diklórmetán vagy a toluol forráspontján játszódtak le. A 3-metoxiösztron 17 - és 17 azidjainak CuAAC reakcióinál, amennyiben a PPh 3 gyorsító ligandum helyett trietilamint adnak a rendszerhez, kétféle termék keletkezését tapasztalták. 70 A várt 1,4-diszubsztituált triazolok mellett, kis mennyiségben a triazol gyűrűn jóddal szubsztituált származék is megjelent. Az ösztron sorban előállított egyes célvegyületek mérsékelt in vitro antiproliferatív hatást mutattak több humán adherens tumorsejtvonalon. 64,70 Továbbá azt is megállapították, hogy ezt a hatást jelentősen befolyásolja az azid és az alkin reakciópartner szerkezete is. A 17-epimer konjugátumok közül a heteroaromás csoportot -térállásban tartalmazó vegyületek a HeLa, míg -megfelelőik az MDA-MB-231 és -365 (emlő karcinómák) sejtek osztódását gátolták. A legpotensebbek a triazol gyűrűn cikloalkil-csoporttal szubsztituált, nem jódozott származékok voltak. Az ösztron-triazoloknak a sejtosztódás gátlás mellett, szteroidogén enzimekre gyakorolt hatását is vizsgálták. Egyes 15-szubsztituált származékok (32, 33), a linker hosszától és térállásától függetlenül hatékony 17β-HSD1 inhibitornak bizonyultak. 73,74 16

15. ábra 17β-HSD1 inhibitor hatású 15-szubsztituált triazolil-ösztron származékok (32, 33) Kutatócsoportunk a közelmúltban 13α-ösztron modellvegyületen célozta meg a triazolil-funkció kiépítését. Az azid funkciót a 16-os helyzetben kívánták kialakítani, ahol korábban az oxim funkció beépítése előnyös volt (lsd. 8). 31 A 13-epimer 3-benziléteréből (4c) kiindulva, a Schönecker és munkatársai által kidolgozott módszerrel, 75 először egy 16-olefint (34) állítottak elő, majd a vegyületet szerves persavval epoxidálták (16. ábra). A β- és az α- epoxid 3:1 arányú keverékének (35 és 36) kromatográfiás szétválasztása után, az epoxidnyitást azid nukleofillel végezték. A reakció regioszelektíven eredményezte a transz 16-azido-17-alkoholokat (37a, b), amelyeket terminális etinilcsoportot tartalmazó kismolekulákkal konjugáltak. 69 17

16. ábra Azidoalkoholok (37a, b) és konjugátumaik (38a, b) előállítása A triazolok (38) hatástani tesztelése során fontos szerkezet-hatás összefüggést állapítottak meg: a konjugátumok közül csak azok az izomerek voltak hatásos apoptózis indukáló szerek (sejtciklus G2/M blokádja), amelyek a 16β-azido-17α-alkoholokból (37b) képződtek. Ezen eredmények összhangban vannak a 7-es jelű vegyülettel kapcsolatban korábban említettekkel, 30 ugyanis Poirier és munkatársai is megállapították, hogy a 13 -sorba tartozó 3,17-diolok közül a 17 -izomer (7) rendelkezik a legerősebb citosztatikus hatással. A 38-as jelű vegyületek hatásának erősségét az újonnan beépített feniltriazolil-egység szubsztituense is befolyásolta, ugyanis a p-helyzetben alkilcsoporttal rendelkező származékok (38bd, 38be) voltak a legpotensebbek. Az irodalomban csupán elvétve található példa olyan szteroid-triazolok szintézisére, amelyeket szteroid-alkinből kiindulva állítottak elő. Lipschutz és Alonso csoportjai alkin modellvegyületként a 17α-etinilösztradiolt választották. Olyan CuAAC reakciókat hajtottak végre, amelyekhez Cu/C, 76 illetve nanoszemcsés réz 77 katalizátort alkalmaztak. Montenegro és munkatársai az ösztradiol (2a) 17-etinil és -azidometil származékából, illetve a mestranol 18

17-etinil származékából állítottak elő hibrideket. 78 A szteroid egységek közé különböző linkereket építettek, reakciópartnerként benzolt, heteroaromás és heterociklusos származékokat, ill. ferrocént alkalmazva. Az ösztron fenolos OH-jának éteresítésével is előállíthatók terminális alkinek. Az aromás A-gyűrű 3- -alkinilétereinek előállítását már a 60-as években közölték. 79,80 A szteroidot fém nátriummal etanolban forralva nyerték a kívánt vegyületeket. Később új módszereket dolgoztak ki az ösztron 3-propargil-éterének előállítására, bázisként káliumkarbonátot alkalmazva. A vegyületet többek között "click"-reakcióban alakították tovább, különböző célokkal: ösztron-alapú makrociklusok, 81 gélek, 82 vagy biológiailag aktív származékok 83,84 előállítása. Jurasek és munkatársai propargil-kloriddal hajtotta végre az éteresítést toluol és dimetil-formamid elegyében (17. ábra). 84 Az előállított szteroid alkint (39) bisz-azidometil-piridinnel CuAAC-reakcióban reagáltatva ösztron-homodimert (40) képeztek, majd MTT-módszerrel vizsgálták annak citotoxicitását. A korábbi tapasztalatoknak megfelelően, ez a triazol-származék is hatékony antiproliferatív hatású vegyületnek bizonyult, különböző leukémia sejtvonalakon. 19

17. ábra Ösztron homodimer (40) előállítása A terminális alkin funkciót tartalmazó ösztron származékok számos továbbalakítási lehetőséget nyújtanak. A CuAAC reakciókon túlmenően, palládium-katalizált C-C keresztkapcsolási folyamatok kiindulási anyagaként is szolgálhatnak. 20

2.3. Sonogashira keresztkapcsolás szteroid modellen 2.3.1. A Sonogashira kapcsolás A 2000-es években az átmenetifém-katalizált keresztkapcsolási reakciók forradalmasították a szintetikus kémiát. Olyan funkcionalizálási lehetőségeket nyitottak meg, amelyek a klasszikus módszerekkel nem, vagy csak nehézkesen voltak megvalósíthatók. A szén-szén kötés kialakulásával járó keresztkapcsolások közül kiemelkedő jelentőségűek a palládiumkatalizálta reakciók, amelyek a transzmetallálási lépés nukleofil reagensében (fémorganikus reagens) különböznek egymástól. Az egyik legelterjedtebben alkalmazott típus a Sonogashirakapcsolás, ahol a nukleofil szerepét rézorganikus vegyület tölti be. 85 Az eljárással terminális acetilének és aril- vagy vinil-halogenidek közötti C(sp 2 )-C(sp) kötés alakul ki egy katalitikus körfolyamatban (18. ábra). A katalitikus ciklus első lépése a szerves elektrofil reagens (Ar 1 -X, leggyakrabban aril-halogenid, ii) oxidatív addíciója a nulla oxidációs számú palládiumra (i). A palládium formálisan beékelődik a szén-halogén kötés közé (iii), ami egyfajta aromás nukleofil szubsztitúciónak is tekinthető. Ennek megfelelően a reaktivitás a távozó csoport minősége szerint a I OTf(trifluormetán-szulfonát) > Br > Cl sorban csökken. 86 A jó távozó csoport mellett az átalakulást tovább gyorsítják az aril-vegyület elektronszívó szubsztituensei. 87 92 A körfolyamat következő lépése a transzmetallálás, ami azt jelenti, hogy az acetilén reakciópartner rézorganikus nukleofilként kerül a palládium-komplexre. A folyamatot a rendszerben jelen levő bázis és az oldószer nagymértékben befolyásolhatja. A réz-acetilid (v) in situ keletkezik egy független katalitikus ciklusban, a jelenlévő bázis hatására. Ennek fontos szerepe van a ciklusban, mivel az acetilének (iv) pk a értéke 26 körüli, ami a réz koordinálódásának köszönhetően 10 egységgel csökken. A transzmetallálás hajtóereje a két fém elektronegativitása közötti különbség (EN Cu > EN Pd ), ezért a fémhez koordinálódni képes arilcsoportok gyorsítani tudják a folyamatot. 93,94 Ezt követően a kialakult transz-komplex (vi) izomerizáció révén cisz-komplexszé (vii) alakul, amit a poláris oldószerek segítenek. Végül a termék (viii) reduktív eliminációval hasad le a palládiumról és visszaalakul a palládium aktív formája (i). A lépést nagymértékben befolyásolja a fémhez kapcsolódó ligandum szerkezete, sztérikus és elektronikus sajátsága. 95,96 Az 1. lépéssel ellentétben, az elektronhiányos, nagy térkitöltésű ligandumok gyorsítják a folyamatot, miközben a komplex stabilizálása révén megakadályozzák annak dezaktiválódását. Továbbá a 21

cisz-helyzetben lévő reakciópartnerek aril-, alkil- és alkinilcsoportjainak elektronküldő szubsztituensei is kedvezően hatnak a reduktív eliminációra. 97 99 18. ábra A Sonogashira-kapcsolás általános mechanizmusa A szerves kémiai átalakításokban leggyakrabban a 0-s oxidációs állapotú Pd(PPh 3 ) 4 komplexet vagy a palládium 2-es oxidációs állapotú sóit (PdCl 2, Pd(OAc) 2, PdCl 2 (PPh 3 ) 2 ) használják, mivel ezek levegőre és nedvességre kevésbé érzékenyek. A Pd(II) katalizátorok esetén a katalitikus körfolyamat beindítása a palládium redukciójával történik, ami foszfán ligandumok, valamint bázis együttes hatására könnyen végbemegy a reakcióelegyben. 100 A fém katalitikus aktivitása és oldhatósága szerves oldószerekben befolyásolható az alkalmazott ligandumokkal. A nagyobb térkitöltésű ligandumok kedvezően hatnak az oxidatív addíciós és reduktív eliminációs lépésekre. Általában foszfán ligandumokat választanak, amelyekkel gyorsabban, enyhébb körülmények között mennek végbe a kapcsolási reakciók. Továbbá a foszfor elektronküldő szubsztituensei tovább növelik az átmenetifém elektronsűrűségét, ezáltal stabilizálják a kialakuló komplexet és elősegítik a folyamatot. 101 Számos kísérleti bizonyíték van arra, hogy a reakciósebesség szempontjából a ligandum térkitöltésének is fontos szerepe van. 102 Az ezredforduló környékén számos új típusú foszfán ligandumot állítottak elő, amelyek nagy térkitöltésű csoportokat és elektronban gazdag foszfor atomot 22

tartalmaznak. A belőlük képződő komplexek sztérikus zsúfoltsága megkönnyíti a ligandum disszociációját, ezáltal kedvez az oxidatív addíció lejátszódásának a koordinatíve telítetlen fém centrumon. A legújabb eredmények alapján a ligandumok ezen tulajdonsága a létrejött Pd(II)-komplex szerkezetére is hatással van. A sztérikusan kevésbé zsúfolt trifenilfoszfán (PPh 3 ) jelenlétében a komplex [L 2 Pd(Ar)X] képlettel leírható formában van jelen, míg a nagyobb térkitöltésű terc-butil-csoporttal szubsztituált P t Bu 3 esetében a [LPd(Ar)X] formában létezik. 103 Ennek eredményeként bifenil, 104 106 terc-butil, 107 binaftil és adamantilszubsztituált 108 foszfánok nyertek alkalmazást keresztkapcsolási reakciókban (19. ábra). 19. ábra Különböző szerkezetű foszfán ligandumok A Sonogashira-kapcsolásoknál nemcsak a reagensek stabilitása és levegőre való érzékenysége okozhat problémát. A réz(i)-só az acetilidek transzmetallálása mellett azok dimerizációját, vagyis homokapcsolását is elősegíti. 109 Ennek az ún. Glaser-típusú kapcsolásnak a visszaszorítása érdekében került kidolgozásra a rézmentes Sonogashira kapcsolás. Mivel ebben az esetben a katalitikus körfolyamatból kimarad a transzmetallálás lépése, a bázisnak kulcsfontosságú szerepe van az acetilén aktív formába hozatalában. Ehhez szerves amin bázisok jelenléte szükséges. 110 112 Az irodalomban kevés példa található rézmentes körülmények között végrehajtott kapcsolásra. A reakciók erősen bázikus közegben (nagy mennyiségű NEt 3 ) vagy piperidin alkalmazásával, több órás reakcióidő alatt, ill. sokszor nagyon magas hőmérsékleten játszódnak le. 112 115 A rézmentes kapcsolásnak két feltételezett mechanizmusa létezik (20. ábra). Az első katalitikus lépés (iii komplex kialakulása) mindkét mechanizmus szerint a rézzel történő kapcsolásnak megfelelően történik. A következő lépésben viszont az acetilén (iv) fém-centrumhoz való koordinálódása (v) valósul meg, amely kétféleképpen alakulhat tovább. Az I mechanizmus szerint 116 a bázis deprotonálja az acetilént és kialakul a Pd-acetilid komplex (vi), melynek reduktív eliminációjával kapjuk a kapcsolt terméket (vii). A II mechanizmus alapján 117 az acetilén 23

koordinációja után beékelődéssel alakul ki a Pd-(aril-alkenil)-komplex (vi), amelyből β- hidrogén eliminációval keletkezik a termék (vii). A Pd-(arilalkenil)-komplex (vi) jelenlétének feltételezése és annak továbbalakulása β-hidrogén eliminációval, analóg a Mizoroki-Heck reakció feltételezett mechanizmusával. 118 121 A ciklus végén mindkét esetben visszaalakul a katalizátor aktív formája (i). 20. ábra A rézmentes Sonogashira kapcsolás feltételezett mechanizmusai A mechanizmus vizsgálata során megállapították, hogy poláris oldószer választása és annak hidrogénkötések kialakítására való képessége stabilizálja a körfolyamat ionos intermediereit, ezáltal kedvező hatással van kapcsolási reakció lejátszódására. 117,122,123 A Cu(I)-sóval elősegített Sonogashira kapcsolásokkal megegyezően, a rézmentes változat is megvalósítható szilárd hordozóra választott palládiummal 124 és ionos folyadékokban 115 is. 2.3.2. Biológiailag aktív ösztron származékok előállítása Sonogashira-kapcsolással A C-C kötés kialakítására alkalmas kapcsolási módszer előnyeit hamar felismerték a szteroidkémiában is. A 2000-es évek eleje óta több kutatócsoport is foglalkozott ösztron származékok Sonogashira-kapcsolással történő előállításával, 17-etinil-ösztradiolból kiindulva. A szteroid (alifás) alkint változatos szerkezetű halogenidekkel vitték kapcsolási reakcióba különböző célokból. A mestranolt a Sonogashira-kapcsolás körülményei között 24

[ 11 C]metil-jodiddal reagáltatva, olyan radioaktívan jelzett ösztron konjugátumokat nyertek, amelyek a PET (positron emission tomography) képalkotó technikánál nyomjelzőként alkalmazhatóak. 125 A 17 -alkin (41) reakcióit különböző fémkomplexekkel is vizsgálták (21. ábra). Egyes származékok (42) az ösztrogén receptor kötődési vizsgálatokban bizonyultak értékesnek, más vegyületeknek (43) pedig az antitumor hatásáról számoltak be. 126 128 21. ábra 17 -Etinil-ösztradiol származékok szintézise Sonogashira-kapcsolással Egy orosz kutatócsoport az ösztron 3-propargil-éteréből (39) nukleozidokkal képzett konjugátumokat és vizsgálták azok antivirális hatását HSV-1 (herpes simplex virus type 1) ellen. 129,130 Azt tapasztalták, hogy egy flexibilis linker, a nukleobázis (uracil) és az aromás alkin partner között növeli a vegyületek citotoxicitását, miközben csökkenti azok antivirális aktivitását. Bérubé és Poirier az ösztron 16-os szénatomján alakított ki terminális alkin funkciót (45), amelyet Sonogashira-keresztkapcsolással alakítottak tovább (22. ábra). 131,132 Az előállított ösztron-adenozin hibrid hatékony 17 -HSD1 enzimgátlónak bizonyult, azonban a szerkezetet egyszerűsíteni kellett (47) a vegyület biohozzáférhetőségének javítása miatt. Az 22-es ábrán feltüntetett IC 50 értékekből látható, hogy a linkerben lévő CH 2 -egységek 25

számának növelése (m) kedvezőtlenül hat a konjugátumok 17 -HSD1 enzimgátló képességére. 22. ábra 17 -HSD1 enzimgátló ösztron konjugátumok (47) A 17β-HSD1 izozim kristályszerkezete már 1995 óta ismert, 133 amely lehetőséget nyújt inhibitorok célzott tervezésére. Az enzim egy merev kofaktor- és egy keskeny, lipofil szubsztrátkötő régióból áll, amelyek együttesen alkotják a szubsztrát felismerő domént (23. ábra). 74 Az enzimreakció során hidrid anion addícionálódik a szubsztrát ösztron 17-es szénatomjára, amely az irodalom szerint többféle mechanizmussal is végbemehet. A redukciót a 142-es szerin (S142), a 155-ös tirozin (Y155) és a 159-es lizin (L159) által alkotott katalitikus triád végzi egy vízmolekula jelenlétében. 26

23. ábra A 17β-HSD1 izozim másodlagos szerkezete (bal) és a szubsztrátkötő domént alkotó aminosavak az ösztronnal (jobb) 134 A szteroid-alapú inhibitorok között számos szubsztituált és heterociklusos ösztron-származék ismert. 135,136 A vegyületek többségénél megtartották az ösztránvázra jellemző fenolos OH- és 17-oxocsoportot, amelyek jelenléte az irodalom szerint szükséges a vegyületnek az enzim szubsztrátkötő helyéhez való bekötődéséhez. A röntgendiffrakciós és számításos vizsgálatokból továbbá az is kitűnt, hogy a szubsztrátkötő csatorna lipofil ürege alkalmas olyan ösztron származékok megkötésére, amelyek a 2-es pozícióban lipofil szubsztituenst tartalmaznak. Ez alapján a 2-es helyzetbe többek között különböző halogéneket, aralkil- vagy aralkinil-csoportokat építettek be potenciális inhibitorok előállítása céljából. 23,137 Möller és kutatócsoportja ösztron-3-acetát modellen, 2-jódvegyületből (48) kiindulva végeztek Sonogashira-kapcsolást. Így jutottak a természetes ösztron 2-feniletinil származékaihoz (49, 50, 24. ábra). A 2-es helyzetben halogénnel, alkilcsoportottal vagy fenilalkinil-csoporttal szubsztituált vegyületek 17β-HSD1 enzimgátló hatását vizsgálva kiderült, hogy a szabad fenolos OH-s 50-es vegyület az egyik legjobb inhibitor, 56 nm-os IC 50 értékkel. A fenolos hidroxilcsoport észteresítése és/vagy acetilén helyett alkilcsoport beépítése a 2-es helyzetbe, kevésbé előnyös az inhibitor hatás szempontjából. 27

24. ábra 2-Fenilalkinil-ösztron származékok (49, 50) előállítása Tudomásunk szerint, az irodalomban eddig ez az egyetlen példa Sonogashira-kapcsolás megvalósítására az ösztron 2-jódvegyületéből kiindulva. 2.3.3. Az ösztron aromás gyűrűjének jódozási reakciói Szteroidok halogénezésére több példa is található az irodalomban biológiailag aktív származékok szintézise kapcsán. 138 140 Az ösztron aromás A-gyűrűjének halogénezésével olyan származékok nyerhetők, amelyek változatos átalakítási lehetőségeket biztosítanak. Kiindulási anyagként szolgálhatnak többek között a 2.3.2. fejezetben bemutatott Sonogashira keresztkapcsolási reakciókban. Továbbá egyes képviselőik az ösztradiol bioszintézisében szerepet játszó enzimek gátlásán keresztül antitumor hatást fejtenek ki. 15,141 144 A halogenidek közül a jodid a legjobb távozó csoport és egyben legreaktívabb, ezért csak az aril-jodidok előállítását mutatom be. Az ösztron aromás A-gyűrűjének jódozása már az 1950-es évek óta ismert. Hillmann- Elies és munkatársai az ösztron jódozását higany(ii)-jodiddal valósították meg ecetsavban (25. ábra). Regioszelektíven nyerték a 2-jód-ösztront (51), 96%-os hozammal. 145 28

25. ábra Hillmann-Elies és kutatócsoportja által kidolgozott jódozási eljárás Azóta több kutatócsoport, más-más reakciókörülmények között, különböző arányban állította elő a 2- és 4-jód regioizomerek keverékét. 2003-ban szabadalmaztattak is egy eljárást, amelyben higany(ii)-acetát és elemi jód segítségével szintetizáltak 2-jód-ösztront (51). 146 A szerves higanyvegyületek alkalmazását toxicitásuk miatt később teljes mértékben kiszorította az elemi jód egyéb reagensekkel történő kombinálása. Horiuchi és kutatócsoportja közleményében réz(ii)-acetát, ecetsav és elemi jód jelenlétében előállított 2-jódszármazékról számol be. 147 Később ammónium-hidroxid és elemi jód metanolban vagy metanol/víz elegyben végrehajtott reakciójával kapták a 2-jódizomert. 148,149 A napjainkban legszélesebb körben alkalmazott tallium(iii)-trifluoracetát (TTFA) reagenst elsőként kanadai kutatók használták 1987-ben. 150 Ösztron-3-acetátot (52) és ösztradiol-3,17-diacetátot reagáltattak szobahőmérsékleten, TFA (trifluorecetsav) oldószerben 1 2 mol ekvivalens Tl(III)- reagenssel, elemi jód jelenlétében, és szelektíven nyerték a 2-jódizomert (48, ~95%). Ösztradiolból kiindulva, a már említett higany(ii)-acetátos módszerrel ugyan nagyobb hozammal kapták a jódszármazékokat, viszont a reakció szelektivitása csökkent: 60 %-ban a 2-, 30 %-ban a 4-, és 10 %-ban a 2,4-bisz-jódszármazékhoz jutottak. Megfigyelték továbbá azt is, hogy a szabad hidroxilcsoportok jelenléte oxidációs mellékreakciókhoz vezethet, míg a 3- metiléter védőcsoport megakadályozza a reakció lejátszódását. A 90-es években Bulman és munkatársai megismételték a tallium(iii)-trifluoracetátos jódozást, 2 mol ekvivalens reagenssel, 0 C-on, N 2 atmoszféra alatt, így 84 %-os hozammal jutottak a 3-acetoxi-2-jódösztronhoz (48). 151 A közelmúltban Lawrence Woo és kutatócsoportja is megvalósította ez utóbbi szintézist, 142 amelynek lépéseit és körülményeit a 26. ábra mutatja be. 29

26. ábra Jódszteroid regioszelektív szintézise tallium(iii)-komplexszel A nagyfokú regioszelektivitásra magyarázatot adhat egy hattagú kelátgyűrű (53) képződésének a feltételezése, amely térigénye miatt főként a 3-as helyzetű acetát karbonil oxigénje és a 2-es helyzetű tallium között alakulhat ki. Azonban a módszer gyógyszeripari felhasználásának gátat szab a tallium vegyületek mérgező hatása és magas ára. Egy alternatív eljárás kidolgozásához kutatócsoportunk a tallium-komplexeknél jóval olcsóbb N-jódszukcinimidet (NIS) kívánta felhasználni. Az irodalomban az ösztron A-gyűrűjének jódozása ilyen körülmények között korábban nem volt ismert, azonban aromás gyűrűs alkaloidok jódszármazékait sikerrel állították elő ezzel a reagenssel. 152 Kutatócsoportunk a 13-epiösztron 3-as helyzetben hidroxil- vagy metoxicsoportot tartalmazó származékainak (4a, 4b) jódozását valósította meg 1 mol ekvivalens NIS-del, trifluorecetsavat (TFA) alkalmazva oldószerként (27. ábra). 153 A 4a-ból és annak 3-metil-éteréből (4b) kiindulva, 1 ekvivalens NIS-del a 2- és 4-jód izomerek (54a:54b, 55a:55b) 1:1 arányú keverékéhez jutottak. A reagens mennyiségét a duplájára emelve a 3-hidroxi sorban főtermékként megjelent a kétszeresen szubsztituált szteroid (54c), ill. a monojód izomerek aránya eltolódott 54a:54b = 1:4. Az előállított vegyületeknek (54, 55) vizsgálták a 17 -HSD1 enzimre gyakorolt gátló hatását és azt tapasztalták, hogy az inhibitor jelleget nagymértékben befolyásolja a 3-as helyzetben lévő csoport minősége és a jód helyzete. A fenolos OH éteresítése kedvezőtlennek bizonyult a biológiai aktivitás szempontjából, a leghatékonyabb származék a 3-hidroxi-13 ösztron 2,4-bisz-jód izomere (54c) volt. 30

27. ábra A 13 -ösztron (4a, b) aromás A-gyűrűjének jódozása NIS-del 31

2.4. Átmenetifém-katalizált reakciók aktiválása mikrohullámmal A bemutatott átmenetifém-katalizált kapcsolási reakciók kézenfekvő eszközei a hetrociklusos vegyületek célzott szintézisének, valamint a természetes eredetű vegyületek és analogonjaik előállításának. A módszerek alkalmazhatóságát tovább növelte a mikrohullámú technika bevezetése a szintetikus szerves kémiába. 154 158 Mikrohullámú besugárzással történő aktiváláskor hatékonyabb energiaközlés érhető el, így olyan kémiai átalakítások is megvalósíthatók, amelyek hagyományos úton nehezen. A MAOS (microwave-assisted organic synthesis) legfontosabb jellemzői a nagyobb szelektivitás és a lényegesen rövidebb reakcióidő. Lehetőség nyílik továbbá enyhébb reakciókörülmények alkalmazására, mint pl. az alacsonyabb hőmérséklet, kevesebb sav/bázis/katalizátor. A reakciók heterogén fázisban vagy akár oldószermentesen is lejátszódhatnak. Ennek felismerése óta számos közlemény és több kutatócsoport is foglalkozott a Sonogashira-kapcsolás mikrohulámmal való hatékonyabbá tételével. A hatékonyabb energiaközlésnek köszönhetően lehetőség nyílik a réz, amin, vagy akár ligandum mentes körülmények között végrehajtható reakciók kidolgozására. Ez a mikrohullámú technika bevezetése előtt nem volt kivitelezhető, mivel ahogy azt a 2.3.1. fejezetben tárgyaltam ezekre a reagensekre az acetilén reaktivitásának növeléséhez van szükség a katalitikus körfolyamatban. A mikrohullámú besugárzással nemcsak az acetilént tudjuk reaktívabbá tenni, hanem az elektronszegény halogenid partnert is. Liu és munkatársai sztérikusan gátolt, elektronszegény aril-kloridokat vittek Sonogashira kapcsolási reakcióba mikrohullámú reaktorban. 159 A Pd(II)/P( t Bu) katalitikus rendszer alkalmazásával változatos szerkezetű klórvegyületek (56) és különböző terminális alkinek (57) között alakítottak ki C-C kötést. A mikrohullámú reaktorban a reakciók rövid idő alatt, jó-kiváló hozammal szolgáltatták a kívánt acetilén termékeket (28. ábra). 28. ábra Aril-kloridok (56) Sonogashira-kapcsolása mikrohullámú reaktorban 32

Nehézséget jelent továbbá a katalizátorok és a ligandumok magas ára, hogy nem újrahasznosíthatók, ill. a homogén fázisú reakciókból adódóan, a katalizátorok nehézkes elválaszthatósága a reakcióelegytől. Az utóbbi években ezért előtérbe került a heterogén rendszerek kidolgozása. A palládium katalizátort szilárd hordozóra választva (heterogén katalizátor), az könnyen újrahasznosíthatóvá válik. Ley és kutatócsoportja közleményében heterogén Pd-EnCat TM TPP30 katalizátor segítségével kivitelezett keresztkapcsolási reakciókról számolnak be. 160 A különböző aromás brómvegyületek és vinil-kloridok mikrohullámú körülmények között, rövid idő alatt szolgáltatták a céltermékeket. Az eljárás további előnye, hogy a katalizátor szűréssel visszanyerhető a reakcióelegyből. A technika beépíthető különféle új farmakofórok szintézisének eljárásaiba. Luthman és munkatársai a kromán-váz szubsztituálását, 161 míg Stevens és kutatócsoportja indol származékok (62) előállítását valósította meg mikrohullámmal aktivált Sonogashira kapcsolással. 162 A több reakcióból álló szintézis egyik kulcslépése a kinon vázas terminális acetilén (60) Pd-katalizált keresztkapcsolása az o-amino-jódbenzolhoz (59). A kinol szerkezeti egységet tartalmazó célvegyületek (29. ábra) in vitro szelektív gátlást fejtettek ki vese és vastagbél tumorsejtek osztódására. 29. ábra Indol származékok (62) Sonogashira kapcsoláson alapuló szintézise A C-C kötés kialakítására alkalmas reakciók mellett a különböző cikloaddíciók mikrohullámú reaktorban történő kivitelezésére is számos összefoglaló közleményt találtunk az irodalomban. Elsőként van der Eycken és csoportja vizsgálta a mikrohullámú besugárzás hatását a Cu(I)-katalizált Huisgen-féle dipoláris cikloaddícióra (30. ábra). 163 A szerves azid a 33

reakció körülményei között in situ képződött nátrium-azidból (NaN 3 ) és szerves halogenidből (61). Azt tapasztalták, hogy a reakcióidő nagyságrendekkel (órákról percekre) csökkent, miközben az 1,4-regioszelektivitás nem változott, és a termékek (63) kristályosítással kinyerhetők voltak a reakcióelegyből. 30. ábra Az első mikrohullámú click -reakció Ezen megállapítás óta több száz publikáció jelent meg a mikrohullámmal aktivált click - reakcióval kapcsolatban. A módszer alkalmas különböző biokonjugátumok: nukleozidok, szénhidrátok, peptidek, oligonukleotidok és analogonjaik előállítására, 164 167 dendrimerek 168 170 és polimerek szintézisére is akár szilárd hordozóhoz rögzítve 171 is. Napjainkban a dendrimerek mellett fullerének 172 és nanocsövek funkcionalizására 173,174 is használnak mikrohullámú cikoaddíciókat. A Sonogashira keresztkapcsolás és különböző cikloaddíciós reakciók kombinálására is találunk példát az irodalomban. Egy belga kutatócsoport nukleozid analogonok szintézisét valósította meg 2-klórfuropirazinokból (64) kiindulva, mikrohullámú besugárzással (31. ábra). 175 A reakciósor első lépése a trimetilszilil-acetilén (TMSA) Sonogashira kapcsolása volt, amelyet a termék oszlopkromatográfiás tisztítása és a szilil-védőcsoport eltávolítása követett. A terminális acetilén (65) izolálása után a szénhidrát részt click -reakcióval, triazol linkeren keresztül kötötték a furopirazin egységhez (66, 31. ábra). 34

31. ábra Nukleozid analogon (66) szintézise átmenetifém-katalizált reakciók segítségével 35

2.5. Heterociklus kialakítása átmenetifém-katalizált one-pot reakcióval Napjainkban az átmenetifém-katalizálta reakciók rendkívüli jelentőségét tovább növeli, hogy többlépéses kémiai átalakítások, egy vagy több katalizátor alkalmazásával, egyetlen reakcióedényben (one-pot) is megvalósíthatók. Az ily módon kivitelezett szintézisek hatékonyabbak, a kevesebb tisztítási lépésnek köszönhetően időtakarékosabbak, olcsóbbak és minimális környezetkárosító hatással járnak. 176 Tietze és Beifuss a one-pot reakciókat két csoportra osztotta: domino és egymást követő (consecutive) reakciókra. 177 A domino reakciók alatt tandem vagy kaszkád reakciósorokat értünk, amelyekben az egyes reakciók az előző lépésben kialakult funkciós csoport eredményeként követik egymást. Az egymást követő (consecutive) típusú reakciókról pedig akkor beszélünk, amikor az első átalakulást követően újabb reagenst vagy katalizátort adnak a rendszerhez, a köztes lépések termékeinek izolálása nélkül. Később Fogg és dos Santos egy újabb, specifikusabb terminológiát állított fel, elkülönítve a tandem és a nem tandem one-pot katalitikus eljárásokat (31. ábra). 178 A nem tandem eljárások közé tartoznak: azok a one-pot átalakítások, amelyeknél a katalitikus lépések egymástól elkülöníthetőek, és a katalizátorok az egyes lépések lejátszódása után egyesével kerülnek ugyanabba a reakcióelegybe. azok a domino reakciók, amelyek egyetlen katalitikus és egy azt követő sztöchiometrikus átalakításból állnak, az összes reagens egyszerre van jelen a reakcióelegyben. Tandem katalízisről akkor beszélünk, amikor a szubsztrát egymást követő átalakításai kettő vagy több elkülöníthető mechanizmuson keresztül mennek végbe. A katalizátor(ok)tól és a kémiai változástól függően megkülönböztethetünk ortogonális, auto-tandem és hozzáadott reagenssel (nem katalizátor) segített tandem katalízist. 36

31. ábra A one-pot eljárások osztályozásának folyamatábrája A one-pot reakció kiválóan alkalmas heterociklusos gyűrűk kialakítására. A biológiailag aktív konjugátumok szintézisénél népszerű triazol-linker is felépíthető one-pot reakciósorban is: a terminális alkin/azid kialakítása és a cikloaddíció külön reakciólépésekben, de a köztitermékek izolálása nélkül, ugyanabban a reakcióedényben megy végbe. Az irodalomban alig néhány példa található ilyen eljárás kidolgozására. 2010-ben Friscourt és Boons szubsztituált aril-jodidok (67) és benzilazidok között alakított ki triazolgyűrűt (70), egy háromlépéses, one-pot reakciósorban (32. ábra). 179 A mikrohullámmal aktivált reakciósor első lépése a TMSA Sonogashira kapcsolása az aromás jódvegyülethez (67). A reakcióelegyhez fluorid-tartalmú reagenst adva eltávolították a 68-as vegyület trimetilszilil-csoportját és az így nyert terminális alkint (69) benzilaziddal vitték click - reakcióba. A módszerrel egyszerűen, rövid idő alatt és hatékonyan kapcsolhatók össze a kívánt szerkezeti egységek, a terminális acetilén előzetes előállítása és tisztítása nélkül. 37

32. ábra One-pot háromlépéses triazol (70) szintézis 38

3. Célkitűzés Munkánk célja olyan új, potenciálisan antitumor hatású ösztron származékok szintézise volt, amelyek hormonális aktivitással nem rendelkeznek. Mindezek eléréséhez a 13-epimer és/vagy D-szeko-alapvegyületekből kiindulva különböző konjugátumok előállítását terveztük, átmenetifém-katalizált reakciókkal: 1. A szteroidokból terminális alkineket előállítva, azok CuAAC reakcióit kívántuk megvalósítani kismolekula vagy szteroid azidokkal. 2. A D-szekoösztronok aromás A-gyűrűjét jódozva, szteroid-halogenidek és fenilacetilének Sonogashira kapcsolására mikrohullámú módszert terveztünk kidolgozni. 3. Továbbá a két reakció egymást követő, one-pot kivitelezését terveztük ösztrán vázas vegyületeken, mikrohullámú reaktorban. Az új vegyületek szerkezetének nagyműszeres analitikai módszerekkel (NMR, MS) történő igazolása mellett célunk volt a folyamatok sztereo-, kemo- és regioszelektivitásának vizsgálata. Az előállított céltermékek és előanyagaik in vitro sejtosztódásgátló (humán adherens tumorsejtvonalakon) és 17 -HSD1 enzimgátló hatását együttműködés keretében terveztük vizsgálni. 39

4. Kísérleti eredmények tárgyalása 4.1. Kiindulási D-szeko vegyületek előállítása a 13 - és 13 -ösztron sorban Kísérleti munkánk első lépéseként olyan D-szeko-származékok előállítása volt a célunk a 13 - és a 13 -ösztron sorban, amelyek hormonális inaktivitásuknak köszönhetően potenciális antitumor hatóanyagok alapjai lehetnek. Kiindulási anyagként a D-szekoaldehid 3-benzil-éterének 13-epimereit (15c, 16c) választottuk, miután 17-oxocsoportjuk számos továbbalakítási lehetőséget biztosít. A kutatócsoportunk által 3-metil-éterekre (15b, 16b) kidolgozott eljárásokat követve, 40,42 olyan intermedier D-szekoösztronok előállítását valósítottuk meg, amelyek számos átalakítás hasznos alapanyagai lehetnek. A kiindulási származékok (15c, 16c) további előnye, hogy a benzilcsoport egy könnyen, semleges körülmények között eltávolítható védőcsoport. Így a vegyületek több ponton történő módosításával 3-as és 17-es funkciók, ill. 14-(prop-2-enil) oldallánc egyszerűen nyerhetünk olyan származékokat, amelyek nagyban hozzájárulnak a hatás-szerkezet összefüggések felállításához. Ezen túlmenően lehetőségünk van az anguláris metilcsoport térállásának hatását vizsgálni mind kémiai, mind gyógyszerhatástani szempontból. A 13 - és a 13 -D-szekoaldehid 3-benzil-éterét (15c, 16c) kálium-tetrahidridoboráttal, metanolban reagáltatva kaptuk a megfelelő D-szekoalkoholokat (71, 72, 33. ábra). Ezt követően hidrogenolízissel, palládium-csontszén katalizátor segítségével hasítottuk le a 3- as helyzetben lévő benzilcsoportot, amellyel egyidejűleg a propenil oldallánc is telítődött (73, 74, 33. ábra). 40

33. ábra A 13-epimer D-szekoalkoholok (71 74) előállítása Ezzel párhuzamosan a nyitott D-gyűrű oxocsoportját (15c, 16c) kondenzációs reakcióban is átalakítottuk. Nukleofil reagensként hidroxilamin-hidrokloridot, bázisként vízmentes nátriumacetátot alkalmazva szelektíven nyertük a D-szekooximokat (75, 76, 34. ábra). A 75-ös és a 76-os jelű vegyületek 3-benzil-védőcsoportját utólag szintén eltávolítottuk (77, 78, 34. ábra). 34. ábra Oxim funkció kialakítása a nyitott D-gyűrűn 41

A karbonilcsoportot (15c, 16c) Jones-oxidációval karboxilcsoporttá alakítottuk (79, 80, 35. ábra). Az így nyert karbonsavak alapanyagként szolgálhatnak többek között savamidok képzéséhez. A hatás-szerkezet összefüggések értelmezéséhez a karbonsavak szabad fenolos hidroxilcsoportot tartalmazó származékait (81, 82) is előállítottuk. 35. ábra D-szekokarbonsavak (79 82) előállítása a 13 - és 13 -ösztron sorban A fenti átalakításokkal olyan vázmódosított származékokhoz jutottunk, amelyek a 3-as és a 17-es helyzetben könnyen továbbalakítható csoportokat tartalmaznak. I, II A 3-benziléterek (71, 75, 76), ill. az oxim 3-metil-étereinek (23, 25) hidroxil-funkcióit ecetsavanhidriddel észteresítettük (36. ábra). Továbbá a 13 -sorbeli szabad fenolos OH-csoportot tartalmazó szekoalkohol és -oxim (73, 77) észteresítését is elvégeztük. Ennek eredményeként olyan telített oldalláncú diacetátokat (88, 89) nyertünk, amelyek acetilcsoportja utólag könnyen eltávolítható. 42

36. ábra A D-szekoalkohol (71, 73) és -oxim (23, 25, 75 77) funkcionalizálása Ezen egyszerű átalakítások mellett, az így nyert D-szekoösztronok alkalmas kiindulási anyagai lehetnek pl. szteroid-alkinek előállításának is. A vegyületek (83 89) a 3-as helyzetű csoport minőségében, a nyitott D-gyűrű oldalláncaiban és az anguláris metilcsoport térállásában különböznek egymástól. 43

4.2. Ösztron-alkinek előállítása Kísérleti munkánk során elsőként az aromás A-gyűrűn (3-OH) alakítottunk ki terminális alkin funkciót. Az A- és D-gyűrűn szabad OH csoportot tartalmazó vegyületeket (73, 74, 77, 78) a Drašar és csoportja által kidolgozott módszerhez 84 hasonló körülmények között reagáltattuk. A megfelelő szteroid acetonos oldatához, kálium-karbonát bázis jelenlétében a propargilkloridnál reaktívabb propargil-bromidot adtuk. A reakciók minden esetben regioszelektíven, II, III jó hozammal szolgáltatták a kívánt acetiléneket (90 93, A-alkin, 37. ábra). 37. ábra D-szekoösztron 3-propargil-éterek (90 93) előállítása A D-szekoalkinek (90 93) előállítását követően a 13 -ösztron alapvegyületen (4) is végeztünk hasonló átalakításokat. A 13 -ösztron 3-benziléteréből (4c) ugyanezen a szintézisúton jutottunk az intakt D-gyűrűs 3-propargil-éterhez (94, 38. ábra). IV 44

38. ábra A 13-epi-ösztron-3-propargil-éter (94) előállítása A későbbi hasznos hatás-szerkezet összefüggések feltárásához nemcsak a vázat, hanem az alkin funkció helyét is változtatni kívántuk. A D-szekokarbonsavakból (17, 18, 79, 80) kiindulva propargil-aminnal olyan karbonsav származékokat képeztünk, amelyekben a nyitott D-gyűrűhöz amid kötésen keresztül kapcsolódik az alkin funkció. V Savamidok karbonsavakból történő előállítására számos, a peptidszintézisben alkalmazott eljárás ismert az irodalomban. 180 187 Első lépésként a karboxilcsoportot aktiválják, majd kapcsolási reakciót végeznek az aminocsoportot tartalmazó reakciópartnerrel. A karboxilcsoport aktiválásához először az irodalomban sok helyen sikerrel alkalmazott DCC kapcsolószert (95) használtuk. 180,188 A 39. ábra ezt a reakciót mutatja be egy kiválasztott D-szekokarbonsavon (17). A karbodiimid-típusú kapcsolószerek, mint a DCC hátránya, hogy az aktivált karbonsav O-acil-izokarbamid származék (96) hajlamos az O-N acilvándorlásra. Az acilvándorlási folyamat következtében olyan stabil intermedierhez (97) jutottunk, amely az alkalmazott körülmények között nem alakult tovább a várt savamiddá (98, 39. ábra). 45

39. ábra Savamid funkció kialakítása DCC (95) kapcsolószerrel Munkánk folytatásában ezért DCC helyett az 1-hidroxi-benzotriazol (HOBt) és O- benzotriazol-n,n-tetrametil-urónium hexafluorofoszfát (HBTU, 99) 1:1 arányú keverékét használtuk (40. ábra). A HOBt segédreagens az O-acil-izokarbamid (96) intermediert protonálva megakadályozza az intramolekuláris acilvándorlást, 189 a HBTU pedig könnyebben kezelhető, mint a DCC: nem higroszkópos és jobb a sztereoszelektivitása. 184 Így a két reagens (HBTU és HOBt) együttes akalmazásával teljesen kiküszöbölhető a racemizáció, és a kapcsolás rövid idő alatt megvalósítható. A kapcsolás feltételezett mechanizmusa szerint, a deprotonált karbonsav reagál a HBTU-val (99) és adja a 100-as jelű köztiterméket (40. ábra). A köztitermék (100) átrendeződéssel aktív észterré (101) alakul, amely a kapcsolni kívánt aminosavval reagálva szolgáltatja a megfelelő savamidot (102, 103). 46

40. ábra Savamid funkció kialakítása HBTU (99) kapcsolószerrel A kiindulási karbonsavakat (17, 18, 79, 80) a kapcsolószerekkel és a bázissal dimetilformamidban 15 percig előkevertük, majd hozzáadtuk az elegyhez a propargil-amint. Két órás reakcióidő után, melléktermék képződése nélkül, jó hozammal nyertük a kívánt savamidokat (102, 103, 41. ábra). A reakciók szelektivitását és hatékonyságát az anguláris metilcsoport térállása nem befolyásolta. 47

Az új vegyületek szerkezetét minden esetben NMR-spektroszkópiai módszerekkel igazoltuk. A 41. ábrán a 3-hidroxi D-szekoalkoholból (73) képződő 3-propargil-éter (90) 1 H spektruma látható. A 2,5 és 4,7 ppm-nél megjelenő egyszeres, illetve kétszeres intenzitású szingulettek propargil-éter CH és OCH 2 bizonyítják, hogy a reakció sikeresen és regioszelektíven játszódott le. 90 OCH 2 17-H 2 C CH ppm 7.0 6.0 5.0 4.0 3.0 2.0 1.0 41. ábra A D-szekoalkohol 3-propargil-éterének (90) 1 H-NMR spektruma (CDCl 3 ) A 42. ábra a 13 -epimer 3-benzil-éter karbonsav (80) és savamid-alkin származékának (103b) 1 H-NMR spektrumrészletét mutatja. Jól láthatók az újonnan megjelenő a 3 ppm körüli szingulett és a 3,6 és 4 ppm között, illetve a 8 ppm körüli multiplettek, amelyek rendre a propargil-amin CH- és CH 2 -csoportjának, ill. amid nitrogénjének protonjaihoz tartoznak. Az NCH 2 -protonok multiplettjének jelalakját nagymértékben befolyásolja az anguláris metilcsoport térállása, amely szintén a szerkezetbizonyítást segítette. 48

80 OCH 2 és 16a-H 2 16-H ppm 7.0 6.0 5.0 4.0 3.0 103b OCH 2 és 16a-H 2 C CH NH 16-H NHCH 2 ppm 7.0 6.0 5.0 4.0 3.0 42. ábra A 80-as jelű karbonsav és a belőle képződő savamid (103b) 1 H-NMR spektrumának részletei (DMSO-d 6 ) 49

4.3. Az újonnan előállított szteroid alkinek (90 94, 102, 103) CuAAC reakciói Az előállított szteroid alkineket (90 94, A-alkinek és 102, 103, D-alkinek ) Cu(I)- katalizált click reakciókkal alakítottuk ösztron-triazolokká. Reakciópartnerként szubsztituálatlan vagy p-helyzetben különbözőképpen szubsztituált benzil-azidokat, illetve szteroid-azidokat választottunk. A benzil-azidokat (104a e) a megfelelő benzil-bromidokból állítottuk elő, aceton:víz 3:1 arányú elegyében, nátrium-aziddal. 190 193 A különböző alkineket (90 94, 102, 103) a megfelelő benzil-aziddal 1:1 arányban, toluolos közegben, katalitikus mennyiségű CuI és trifenilfoszfán jelenlétében, bázisként DIPEA-t alkalmazva reagáltattuk. Ez az eljárás a kutatócsoportban korábban került kidolgozásra, szteroid-azidok és kismolekula alkinek reakciói során. 67 A reakcióelegyet fél órán át forraltuk, amely alatt a kiindulási anyag teljesen átalakult. Vizsgálni kívántuk az alkin funkció helyzetének, az anguláris metilcsoport térállásának, illetve a szubsztituensek minőségének befolyását a cikloaddíciók lejátszódására. További célunk volt annak megfigyelése is, hogy a reagensek szerkezetének változtatása módosítja-e a vegyületek biológiai hatását. A reakciók minden esetben melléktermék képződése nélkül, magas hozammal, regioszelektíven szolgáltatták a kívánt triazolokat. A 3- propargil-éter származékok (90 94) esetében olyan konjugátumokat nyertünk, amelyeknél a D-szekoösztron vagy a 13 -ösztron aromás A-gyűrűjéhez kapcsolódik az N-benziltriazolilmetil egység (105 109, 43. ábra). II, III A benzilazid szubsztituensének elektronküldő vagy elektronszívó sajátsága nem befolyásolta a reakciók szelektivitását és hatékonyságát. 50

43. ábra Módosított ösztrán vázas N-benziltriazolilmetil-származékok (105 109) előállítása A D-szekokarboxamid alkinek (102, 103) CuAAC reakcióival pedig olyan vegyületeket nyertünk, amelyeknek a nyitott D-gyűrűjéhez kapcsolódik a heteroaromás csoport (110, 111, 44. ábra). V 44. ábra Triazolil funkció kialakítása savamid linkeren keresztül 51

Az előállított ösztron-triazolok szerkezetvizsgálatánál az egydimenziós 1 H és 13 C- NMR spektroszkópia mellett kétdimenziós NMR technikákat is alkalmaztunk. A 45. ábrán a 111bb jelű vegyület 1 H-NMR spektruma, alatta pedig a J-mod technikával készült 13 C-NMR spektruma látható deuterált benzol oldószerben. A 2 ppm-nél megjelenő háromszoros intenzitású és a 4 és 5 ppm között megjelenő kétszeres intenzitású szingulettek, ill. az aromás tartományban mutatkozó újabb benzil-protonjelek az N-(4-metil)benzil-triazolil egység beépülését bizonyítják. Ezenkívül megfigyelhető az alkin C CH jelének eltűnése, és a triazol gyűrű C=CH szingulettjének megjelenése 6,9 ppm-nél. A 13 C-NMR spektrumon (45. ábra), a J-mod-technikának köszönhetően, a vegyület két metilcsoportjának jele 20 és 30 ppm között pozitív, míg a N és O melletti CH 2 -csoportok jelei 35, illetve 50 és 70 ppm körül negatívak. A szénjeleknek ez a fajta, a szénatomok rendűsége alapján történő megkülönböztetése nagyban megkönnyíti a 13 C spektrumok kiértékelését. 111bb 4 -CH 3 NCH 2 és OCH 2 C=CH NHCH 2 ppm 7.0 6.0 5.0 4.0 3.0 2.0 2,3,4,5,6 CH-k és 2,3,5,6 CH-k 4 -CH 3 OCH 2 18-CH 3 NCH 2 NHCH 2 ppm 150 100 50 45. ábra A 111bb jelű vegyület 1 H és 13 C-NMR spektruma (C 6 D 6 ) 52

A két benzilcsoport aromás, illetve kvaterner szénatomjainak (45. ábra, zöld) azonosítása azonban nem lehetséges az egydimenziós spektrumok alapján. Ebben a kiválasztott 111bbjelű vegyületről készült COSY, NOESY, HSQC és HMBC spektrumok voltak segítségünkre. A 46. ábrán a vegyületnek a HMBC spektruma, illetve annak egy kinagyított részlete látható. Az OCH 2 protonok jele keresztcsúcsot ad a C-2 és a C-6 szénatomok jelével (a két szénatom azonos kémiai eltolódású jelet ad 128 ppm körül), a C-1 -vel (138 ppm körül), illetve a 3-as szénatom 157 ppm-nél mutatkozó jelével. Az NCH 2 protonok szingulettje pedig a C-2 és a C-6 szénatomok jelével (128,6 ppm) és a C-1 szénatoméval (132,5 ppm). Tehát az OCH 2 és NCH 2 protonok jelei alapján, a hozzájuk kapcsolódó benzilcsoportok szeneihez tartozó jelek megkülönböztethetők és azonosíthatók. 50 100 150 OCH 2 NCH 2 ppm ppm 7.0 6.0 5.0 4.0 3.0 2.0 1.0 C-2 és C-6 C-2 és C-6 C-1 C-1 C-3 46. ábra A 111bb jelű vegyület HMBC spektruma és annak egy kiemelt részlete (C 6 D 6 ) 53

A 13 -ösztron sorban további szerkezetmódosításokat hajtottunk végre annak érdekében, hogy később megállapíthassuk, a 17-es helyzetű funkciós csoport jelenléte szükséges-e az általunk tanulmányozott biológiai hatás kifejtéséhez. Ehhez a kiválasztott triazolok (109a, e) 17-ketocsoportját alkoholos hidroxilcsoporttá alakítottuk fémhidrides redukcióval (47. ábra), vagy kerülő úton eltávolítottuk azt, dezoxi-származékot kialakítva. IV Az oxovegyület redukciója nem játszódott le sztereoszelektíven, a két lehetséges diasztereomer 112:113=1:1 arányú keverékét kaptuk. 47. ábra A 109a, e vegyületek 17-oxocsoportjának komplex fémhidrides redukciója A későbbi hatástani vizsgálatok értelmezhetősége érdekében az alapvegyület hidrides redukcióját is elvégeztük: a 13α-ösztron 3-benzil-éterét (4c) és -metiléterét (4b) 29 redukálva szintén 1:1 arányú termékelegyeket (114 és 115) nyertünk (48. ábra). 48. ábra A 13α-ösztron 3-benzil-éterének (4c) és metil-éterének (4b) redukciója A 17-dezoxi-3-hidroxi származék szintézisét egy 16,17 -olefin prekurzorból (34) valósítottuk meg, amelynek előállítására kutatócsoportunk már korábban kidolgozott egy többlépéses eljárást, a 13-epi-ösztron 3-benzil-éteréből (4c) kiindulva (49. ábra). 75 A D-gyűrűs alkén (34) 54

hidrogenolízisével egyidőben lehasad a benzilcsoport, illetve telítődik a D-gyűrű, így propargilezéshez alkalmas származékhoz (116) jutottunk. 49. ábra 17-Dezoxi származék (116) előállítása a 13 -ösztron sorban Az alkilezést a korábban már ismertetett módon, propargil-bromiddal végeztük, majd az alkint (117) szubsztituálatlan benzil-aziddal (104a) vittük cikloaddíciós reakcióba (50. ábra). Így olyan 17-es helyzetben oxigén funkciót nem tartalmazó triazolt (118) nyertünk, amely nagymértékben hozzájárulhat a szerkezet-hatás összefüggések felállításához. 50. ábra A 17-dezoxi konjugátum (118) előállítása 55

Kísérleteink folytatásaként szteroid-azidként a csoportban korábban már előállított 13- epi-ösztron transz-azidoalkoholjait (37a, b) alkalmaztuk. 69 A két típusú szteroid-alkin közül először a nyitott D-gyűrűn terminális alkin-funkciót tartalmazó D-alkinekkel (110, 111) reagáltattuk a transz-azidoalkoholokat (37a, b, 51. ábra). A két szteroid egység összekapcsolását a már ismertetett Cu(I)-katalizált click -reakcióval végeztük. Az azidokat (37a, b) a kiválasztott alkinekkel (110a, b; 111b) 1:1 arányban, toluolos közeget alkalmazva, katalitikus mennyiségű CuI és trifenilfoszfán jelenlétében, bázisként DIPEA-t alkalmazva reagáltattuk. Így olyan heterodimerekhez (119 124) jutottunk, amelyekben a két szteroid intakt vagy nyitott D-gyűrűje triazol-heterocikluson keresztül kapcsolódik egymáshoz. A vegyületek négy ponton térnek el egymástól: a 16-os és a 17-es szénatom konfigurációjában, a 13-as metilcsoport térállásában és a fenolos OH védőcsoportjának minőségében. 51. ábra D+D típusú szteroid dimerek (119 124) előállítása Ezzel párhuzamosan a kiválasztott A-gyűrűn propargilezett A-alkineket (90, 92, 94) is cikloaddíciós reakciókba vittük (52. ábra). Az előállított heterodimerek (125 130) ebben az 56

esetben is négy ponton térnek el egymástól: a 16-os és a 17-es szénatom konfigurációjában, az anguláris metilcsoport térállásában és a D-gyűrű minőségében. 52. ábra D+A típusú szteroid dimerek (125 130) előállítása A click -reakciók mindegyike magas hozammal, regioszelektíven szolgáltatta a kívánt célkonjugátumokat (119 130). A reakcióidőkben és szelektivitásban sem tapasztaltunk különbséget a benzil-aziddal végrehajtott kapcsolásokhoz képest. A termékek szerkezetét a dimerek esetében is NMR-spektroszkópiával igazoltuk. A 125-ös jelű dimerről készült 1 H, illetve 13 C-NMR spektrumban a vázszerkezethez tartozó jelek duplán jelennek meg, utalva a dimerképződés sikeres lejátszódására (53. ábra). A két anguláris metilcsoport (18-H 3 és 18 - H 3 ) szingulettje között egy hármas intenzitású triplett látható, amely a 16a -metilcsoporthoz tartozik. 3 és 4 ppm között egy másik jellegzetes multiplett (17 -H 2 ) található, amely az 5,2 57

ppm körül megjelenő kétszeres intenzitású szingulettel (3 -OCH 2 ) együtt szintén a D- szekoalkohol monomer (90) beépülésére utalnak. A 3 -OCH 2 és a 16 -H jelek a monomerek spektrumaiban tapasztaltakhoz képest magasabb kémiai eltolódásnál jelentkeznek, továbbá 7,6 ppm föllött megjelenik a triazol-ch szingulettje. Mindezek igazolják a 125-ös dimernek a triazol-linkeren keresztül történő kialakulását. 125 18-H 3 18 -H 3 és 16a -H 3 3-OCH 2 C=CH 3 -OCH 2 16 -H és 17 -H 17 -H 2 ppm 7.0 6.0 5.0 4.0 3.0 2.0 1.0 C-17 C-16 C-18 C-18 és C-16a C-17 3- és 3 -OCH 2 150 ppm 100 50 53. ábra A 125-ös jelű vegyület 1 H-NMR és 13 C-NMR spektruma (CDCl 3 ) 58

4.4. Palládium-katalizálta keresztkapcsolások D-szekoösztrán alapvázakon 4.4.1. A D-szekoösztronok aromás A-gyűrűjének jódozási reakciói Kutatómunkám folytatásában újszerű, D-szekoösztron-alapú 17β-HSD1 enzim inhibitorok kifejlesztése volt a célunk. Kiindulási vegyületekként olyan származékokat választottunk, amelyek az in vitro vizsgálatok alapján önmagukban is hordozzák a gátló hatást (5.5. fejezet). A 13β-ösztron sorba tartozó D-szekooxim (77) és annak 3-metil-étere (23), továbbá a D- szekoalkohol (73) nanomólos vagy alacsony mikromólos IC 50 -értékei alapján ezen vegyületeket választottuk a származékképzés alapjául (54. ábra). 54. ábra A tervezett átalakítások D-szekoösztron alapanyagai Olyan átalakításokat terveztünk, amelyek irodalmi ismereteink alapján jelentősen fokozhatják az alapvegyületek inhibitor hatását. Möller és munkatársai sikeres fejlesztéseire alapozva, 23 az aromás A-gyűrű szubsztituálását terveztük, fenilalkinil-funkciók beépítésével, de az előzményektől eltérően nemcsak a 2-es, hanem a 4-es helyzetbe is, és szubsztituált fenilcsoport beépítésével kiegészítve. Elsőként az aromás gyűrű jódozását valósítottuk meg. A szteroid A-gyűrűjének halogénezéséhez a jódot választottuk, mert jó távozó csoportként gyorsítja a későbbi Sonogashira kapcsolás katalitikus ciklusának oxidatív addíciós lépését. Első lépésként minden esetben hidrogénezést hajtottunk végre, Pd/C katalizátor jelenlétében. Ilyen körülmények között csak a benzil védőcsoport hasítható, illetve telítődik a 14-propenil oldallánc is (131, 55. ábra). Erre azért volt szükség, mert így kiküszöböltük a korábban már tapasztalt, de számunkra hátrányos, elektrofil-indukálta gyűrűs nitronképzési reakciókat (132, 55. ábra). 44 59

55. ábra A gyűrűs nitronképzési mellékreakció kiküszöbölése a D-szekooxim 3-metil-étere (23) példáján Egy másik nem kívánt reakció az oxim funkció átalakulása nitrillé, amit OH-csoportjának észteresítésével próbáltunk kizárni. A védőcsoportok kialakítására minden esetben a halogénezési reakció előtt került sor, így tanulmányozhattuk a 3-as helyzetben lévő csoport hatását a regioszelektivitásra. Az acetil-védőcsoport beépítésére a korábban tárgyalt reakciósort alkalmaztuk. A megfelelő diacetátokat (88, 89) hidrogenolízist követően ecetsavanhidriddel, piridines közegben nyertük (36. ábra). Ezt követően az acetilezett származékokat (88, 89) 1 mol ekvivalens N-jódszukcinimiddel (NIS), trifluorecetsav (TFA) oldószerben reagáltattuk (56. ábra). 56. ábra A D-szekoösztron-diacetátok (88, 89) jódozása A reakciók a 2- és 4-jód regioizomerek keverékét eredményezték, főtermékként a 2- jódvegyület (134a, 135a) keletkezett. Az izomerek (134a, b; 135a, b) eloszlását az I. Táblázat tartalmazza. 60

I. Táblázat: Az A-gyűrűben jódozott D-szekoösztronok (134 138) izomereinek aránya Kiindulási vegyület Termékek Termékarány (%) 88 134a + 134b 77 + 23 89 135a + 135b 75 + 25 131 136a + 136b 75 + 25 73 137a + 137c 45 + 55 77 138a + 138b + 138c 55 + 25 + 20 Az izomerek elválasztását flash kromatográfiásan végeztük, 10% etil-acetát/hexán 15% etilacetát/hexán eluenssel, majd szerkezetüket 1 H- és 13 C-NMR spektroszkópiai módszerekkel igazoltuk. A 57. ábrán látható az 134a-jelű vegyület 1 H-NMR spektruma és 134b-jelű izomerének 1 H-NMR spektrum részlete. Habár a két vegyület aromás gyűrűn lévő protonjainak jelei (pirossal és kékkel keretezve) közel azonos kémiai eltolódásnál találhatók, a finomszerkezet alapján egyértelműen azonosíthatók a protonok. A 2-jód származék (134a) esetében az aromás gyűrű protonjai egymástól távol helyezkednek el (1,4-helyzet), ezért szingulett jeleket eredményeznek (piros keret). A 4-jód izomernél (134b) azonban jól megfigyelhető az 1- és a 2-es szénen lévő protonok spin-spin csatolása által okozott jelfelhasadás. Így az utóbbi esetben 2 db szingulett helyett 2 db dublettet (kék keret) láthatunk. A 2,0 és 2,4 ppm között 2 db hármas intenzitású Ac-CH 3 szingulett található, amelyek az acetilcsoportok jelenlétét igazolják. 1-H 2-H 8.0 ppm 7.0 6.0 134b 5.0 4.0 134a 1-H 4-H ppm 7.0 6.0 5.0 4.0 3.0 2.0 1.0 57. ábra A 2-jód-D-szekoalkohol diacetátjának (134a) 1 H-NMR spektruma és 4-jód izomerének (134b) 1 H-NMR spektrum részlete (CDCl 3 ) 61

Ezt követően a D-szekooxim 3-metiléterének (131) jódozását valósítottuk meg. A telített oldalláncú származékot (131) N-jódszukcinimiddel reagáltatva szintén a 2- és 4-jód izomerek keverékéhez jutottunk (136a, b, 58. ábra). A termékek aránya a diacetátoknál tapasztaltakkal megegyezik (I. Táblázat), a főtermék ebben az esetben is a 2-jódvegyület (136a) volt. 58. ábra Az oxim 3-metil-éterének (131) jódozása Végül a szabad hidroxilcsoportokat tartalmazó D-szekooximot (77) és -alkoholt (73) is halogéneztük (59. ábra). A fenolos A-gyűrű jódozásakor a főtermékek szintén a 2-jód szteroidok (137a, 138a) voltak, azonban a 3-védett származékoktól eltérően, 2,4-bisz-jód vegyületek (137c, 138c) keletkezése is megfigyelhető volt (I. Táblázat). A D-szekoösztron- 3,17-diol (73) 4-jód izomerének előállítása sikertelen volt. 59. ábra A szabad hidroxil funkciókat tartalmazó vegyületek (73, 77) jódozása A 138a, b, c termékek flash kromatográfiás elválasztása után felvett 1 H-NMR spektrumok részleteit a 60. ábra mutatja, amely alapján az egyes izomereket azonosítottuk. A 62

138c jelű vegyület 1 H spektrum részletén a többitől eltérően csak 2 db egységnyi intenzitású szingulett látható 6,5 és 8 ppm között. Ez azt bizonyítja, hogy az oxim CH mellett (~7,15 ppm, kék keret) csak egyetlen aromás proton van (piros keret), amely a szteroid fenolos A- gyűrűjéhez tartozik, tehát ez az izomer kétszeresen jód-szubsztituált. A 138a és 138b vegyületekhez tartozó 1 H-NMR spektrum részleten három-három jel látható a 6,5 és 8 ppm közötti tartományban. A jelalakoknak a szomszédos szénatomokon lévő protonok számától való függése (n+1 szabály) segítette a szerkezetigazolást. Így a két szingulett (piros keret) jelenléte a 2-jód izomer (138a), míg a két dublett (piros keret) jelenléte a 4-jód izomer (138b) kialakulását támasztja alá. 3-OH 138c 1-H 17-H 10.50 ppm 10.00 9.50 9.00 8.50 8.00 7.50 7.00 3-OH 1-H 17-H 4-H 138a 10.50 ppm 10.00 9.50 9.00 8.50 8.00 7.50 7.00 6.50 3-OH 138b 17-H 1-H 2-H 10.50 ppm 10.00 9.50 9.00 8.50 8.00 7.50 7.00 6.50 60. ábra A 3-hidroxi-D-szekooxim jódszármazékainak (138a, b, c) 1 H-NMR spektrum részletei (DMSO-d 6 ) 63

Mindezek alapján kijelenthetjük, hogy az eddig csak alkaloidoknál használt eljárást 152 sikeresen adaptáltuk különböző ösztron származékok aromás A-gyűrűjének jódozására. A 3- as helyzetben lévő csoport minősége nagymértékben befolyásolta a keletkező regioizomerek arányát (I. Táblázat). Minden esetben a 2-jódvegyület (134a 138a) képződött főtermékként, ami a 3-védett származékok (134a 136a) esetében volt a legkifejezettebb. A jód 4-es helyzetbe történő beépülése a B-gyűrű jelenléte miatt sztérikusan gátolt, ezért a 134b 138b izomerek jóval kisebb mennyiségben (vagy egyáltalán nem) képződtek. A szabad fenolos hidroxil funkció viszont nagymértékben aktiválja az aromás gyűrűt, így az aromás elektrofil szubsztitúció kétszeresen szubsztituált bisz-származékot (137c, 138c) is eredményez. 64

4.4.2. Jódszteroidok Sonogashira keresztkapcsolási reakciói Munkánk folytatásában a kiválasztott jódvegyületek palládium katalizálta keresztkapcsolását valósítottuk meg. Mivel az irodalomban ismert a 2-feniletinil-ösztron (50) 17 -HSD1 enzim inhibitor hatása, 23 mi is a fenilacetilént és annak különböző p-szubsztituált származékait kívántuk használni. A fenilacetilének szubsztituenseit úgy választottuk meg, hogy azok eltérő elektroneloszlást eredményezzenek az aromás gyűrűn. A lehetőleg rézmentes Sonogashira kapcsolások kivitelezését mikrohullámú eljárás kidolgozásával terveztük. Először az acetilezett származékokat (134, 135) vittük kapcsolási reakcióba. A megfelelő reakciókörülmények kidolgozását, optimalizálását az oxim-diacetáttal (135a) és a szubsztituálatlan fenilacetilénnel (139a) kezdtük (II. Táblázat). Elsőként az irodalomban egyik legelterjedtebb katalizátort, a tetrakisz(trifenilfoszfán)palládium(0)-t (Pd(PPh 3 ) 4 ) és réz(i)-jodidot (CuI) alkalmaztuk. 194,195 Oldószerként dimetil-formamidot (DMF), bázisként trietilamint (NEt 3 ) választottunk. A reakcióelegyet több órán keresztül, 100 C-on kevertetve sem tapasztaltuk a kapcsolt termék képződését. A tercier amint szekunder aminra (NH(iPr) 2 ) cserélve, bázisként, ill. bázis és oldószerként alkalmazva sem volt megfigyelhető átalakulás. Ezt követően palládium(0)- helyett, palládium(ii)-katalizátor és foszfán ligandum hozzáadásával próbáltuk megvalósítani a Sonogashira kapcsolást. Az elegyhez minden esetben az erélyes palládium(ii)-acetátot (Pd(OAc) 2 ) és egy nagy térkitöltésű, elektronban gazdag foszfán ligandumot (catacxium A) adtunk. A foszfán feladata egyrészt a fém elektronsűrűségének növelése, másrészt az izomerizáció előkészítése volt. Előbbinek az oxidatív addíciós, utóbbinak a reduktív eliminációs lépésnél van fontos szerepe. Az irodalom szerint az ilyen rézmentes kapcsolásoknál a szekunder aminok a leghatékonyabbak. A reakcióelegyeket 30 percig, 100 C-on reagáltatva mikrohullámú reaktorban, 2-feniletinilösztron származék (140) csak NEt 3 bázis jelenlétében képződött (61. ábra). 65

II. Táblázat: A Sonogashira kapcsolás reakciókörülményeinek optimalizálása a 135a-ös diacetát származékra Katalizátor Ligandum Oldószer Bázis Termék Hozam(%) Pd(PPh 3 ) 4 /CuI - DMF NEt 3 - - Pd(PPh 3 ) 4 /CuI - DMF NH(iPr) 2 - - Pd(PPh 3 ) 4 /CuI - NH(iPr) 2 NH(iPr) 2 - - Pd(OAc) 2 catacxium A THF NH(iPr) 2 - - Pd(OAc) 2 catacxium A DMF NEt 3 140 60 Az oxim 4-jódszármazékából (135b) kiindulva, a C-2-izomerével (135a) megegyező körülmények között jutottunk a Sonogashira-termékhez (141, 61. ábra). 61. ábra Acetilezett jódszármazékok (135a, b) reakciója fenilacetilénnel A reakció körülményei között azonban a kapcsolással egyidejűleg az oxim-acetát (135) dezacetileződött (142), majd vízelimináció révén nitrillé alakult (143, 62. ábra). 62. ábra A nitril funkció (143) kialakulásának feltételezett mechanizmusa 66

Kutatócsoportunk korábbi eredményei alapján tudjuk, hogy a 17-nitril funkció kialakulása általában az antitumor hatás csökkenését vonja maga után, 196 ezért az oxim-acetátok Sonogashira-reakcióitól a későbbiekben eltekintettünk. A jódozott D-szekoalkohol diacetátjának (134a) kapcsolását a szubsztituálatlan fenilacetilénnel (139a), az oxim-diacetátoknál (135) alkalmazott körülmények között hajtottuk végre (63. ábra). Az alkohol származék (134a) reakciójánál nem tapasztaltunk dezacetileződést, sem egyéb szteroid jellegű melléktermék keletkezését. Ezért ezt követően a szubsztituált fenilacetilénekkel (139b d) is elvégeztük a keresztkapcsolást. A felhasznált fenilacetilének (139b d) p-helyzetű szubsztituensei eltérő elektronikus sajátságokkal rendelkeztek: elektronküldő (-CH 3, -OCH 3 ) és elektronszívó (-F, -CF 3 ) hatással. Az elért hozamokat a Mellékletek VII. Táblázata tartalmazza, melyből látható, hogy a szubsztituálatlan (144a), illetve elektronküldő csoportot tartalmazó fenilacetilénekkel (144c,d) jobb konverziókat sikerült elérni, mint az elektronszívó p-fluor csoport (144b) esetén. A reakcióelegyeket minden esetben 30 percig, 100 C-on reagáltattuk mikrohullámú reaktorban. A feltüntetett hozamokon a mikrohullámú melegítés időtartamának növelésével nem tudtunk javítani. A termékek (144a d) tisztítását a reakcióelegy feldolgozása nélkül, flash kromatográfiával végeztük 15% etil-acetát/hexán eluenssel. 63. ábra A jódozott D-szekoalkohol diacetátjának (134a) fenilacetilénekkel (139a d) való keresztkapcsolása A keresztkapcsolási reakciókat a 3-metil-éter sorban folytattuk. Az 5.1-es és 5.2-es fejezetben tárgyaltak és kutatócsoportunk eredményei 197 alapján ugyanis a 3-metil-éter védett oxim (23) is ígéretes modellvegyület lehet antitumor hatóanyagok kifejlesztéséhez. A 3- metiléter sorban a jód helyzete döntően befolyásolta a kapcsolási reakció körülményeit. A 2-67

es és a 4-es regioizomerek (136a és b) esetén különböző reakciókörülmények kidolgozására volt szükség (64. ábra). A 3-metil-éter-D-szekooxim 2-jód izomere (136a) a diacetátjánál (135a) alkalmazott katalizátor és oldószer mellett nem reagált a fenilacetilénnel (139a, III. Táblázat). A Pd(OAc) 2 -ot először a szintén második oxidációs állapotú palládiumot tartalmazó, bisz(trifenilfoszfin)palládium(ii)-kloridra (Pd(PPh 3 ) 2 Cl 2 ) cseréltük. A szteroidot (135a) és a katalizátort THF-ben oldva, sem DIPEA, sem NEt 3 jelenlétében nem volt átalakulás 100 C-on. Katalizátorként Pd(PPh 3 ) 4 -t alkalmazva sem tapasztaltunk termékképződést, azonban a CuI segédkatalizátor hozzáadása a várt terméket (145a) szolgáltatta (64. ábra). Továbbá a reakciókörülmények optimalizálása során azt is megállapítottuk, hogy a hőmérséklet 60 C-ra csökkentésével teljes mértékben kiküszöbölhető az oxim funkció nitrillé alakulása. III. Táblázat: A reakciókörülményeinek optimalizálása 3-metil-éter jódvegyületre (136a) Katalizátor Ligandum Oldószer Bázis Termék Hozam(%) Pd(OAc) 2 catacxium A DMF NEt 3 - - Pd(PPh 3 ) 2 Cl 2 - THF DIPEA - - Pd(PPh 3 ) 2 Cl 2 - THF NEt 3 - - Pd(PPh 3 ) 4 - THF NEt 3 - - Pd(PPh 3 ) 4 /CuI - THF NEt 3 145a 68 A sztérikusan gátoltabb 4-jód izomer (136b), akárcsak a diacetátja (135b), az erélyesebb Pd(OAc) 2 katalizátor jelenlétében, rézmentes körülmények között alakult a megfelelő fenilalkinil származékká (146a, 64. ábra). Így a továbbiakban a p-helyzetben szubsztituált fenilacetilénekkel (139b e) is végrehajtottuk a Sonogashira kapcsolási reakciókat. 68

64. ábra A 2- és 4-jód regioizomerek (136a, b) Sonogashira keresztkapcsolása az oxim 3-metil-éter sorban A reakciók sikerességét 1 H és 13 C-NMR spektroszkópiával igazoltuk. A 145c jelű vegyület 1 H és 13 C-NMR spektrumának részletein is jól láthatók az újonnan beépülő csoporthoz és az oxim funkcióhoz tartozó protonok és szénatomok jelei (65. ábra). A 1 H- NMR spektrumon 3,8 és 4 ppm között 2 db háromszoros intenzitású szingulett látható, amely a p-metoxi-fenilacetilén beépülésére utal. 6,8 és 7,5 ppm körül megfigyelhető egy-egy kétszeres intenzitású dublett, amelyek az 1,4-diszubsztituált fenilcsoport protonjaihoz rendelhetők. A megfelelő aromás CH jelek a 13 C-NMR spektrumon 110 és 130 ppm fölött mutatkoznak, az acetilén kvaterner szenei pedig 85 és 95 ppm között. 69

3-OCH 3 és 4 -OCH 3 2,3,5,6 CH-k 145c 7.50 ppm 7.00 6.50 6.00 5.50 5.00 4.50 4.00 2,3,5,6 CH-k C-1 C-4 3-OCH 3 és 4 -OCH 3 -C C- ppm 150 100 65. ábra A 145c jelű vegyület 1 H- és 13 C-NMR spektrumának részletei (CDCl 3 ) A következő célunk az volt, hogy a 3-metil-éterekre kidolgozott mikrohullámú Sonogashira kapcsolásokat kiterjesszük a 3-hidroxi-vegyületekre is. A szabad fenolos hidroxilcsoport jelenléte az irodalmi előzmények alapján szükséges a 17 -HSD1 inhibitor hatás kialakulásához. A 3-hidroxi származékok 2-jódvegyületeit (137a, 138a) azzal az eljárással alakítottuk tovább, amelyet a 3-metil-éter sor 2-jódvegyületeinél (136a) dolgoztunk ki. A D-szekoalkohol és -oxim jodidja (137a, 138a) azonos körülmények között, palládiumtetrakisz-trifenilfoszfán (Pd(PPh 3 ) 4 ) katalizátor, réz(i)-jodid kokatalizátor és trietilamin bázis jelenlétében, tetrahidrofurán oldószerben szolgáltatta a várt ösztron-acetiléneket (147, 148, 66. ábra). A kapcsolási reakciók itt is a szubsztituálatlan (139a), illetve elektronküldő csoportot tartalmazó fenilacetilén (139c,e) alkalmazása esetén játszódtak le a legnagyobb konverzióval (Mellékletek VII. Táblázat). Ugyanekkora hozam eléréséhez a dezaktiváló 70

p-fluor- (139b) és p-trifluormetil-csoport (139d) esetén növelni kellett a mikrohullámú besugárzás időtartamát 40 percre. 66. ábra 3-Hidroxi-D-szekoösztronok 2-jód vegyületeinek (137a, 138a) Sonogashirakapcsolása A Mellékletek VII. Táblázatában szereplő hozamokat minden esetben a flash kromatográfiás tisztítást követően határoztuk meg. A szteroid 3-as és 17-es szénatomján lévő csoport nem, de a fenilacetilén p-helyzetű szubsztituense nagymértékben befolyásolta azt. A katalitikus ciklus sebességmeghatározó lépése az oxidatív addíció, amelynek sebességét a szerves halogénvegyület szubsztituensei, ill. térkitöltése befolyásolja. 87 91,102,103 Mivel minden esetben a legjobb távozó csoportot tartalmazó jódszármazékokból (134 138) indultunk ki, a szteroid szerkezete nem befolyásolta jelentősen az átalakulás mértékét. Az acetilén partner (139) szubsztituensének elektronikus és sztérikus tulajdonságai azonban a reduktív eliminációs lépésre vannak hatással. 97 99 Azok a szubsztituensek, amelyek elektronküldők: - CH 3, -OCH 3, kedveznek a redukciós elimináció lejátszódásának. Így azoknál a reakcióknál, ahol p-helyzetben ilyen csoporttal szubsztituált fenilacetilént (139c, e) alkalmaztunk, nagyobb konverziót értünk el azonos reakciókörülmények között. Az irodalomban elsőként valósítottunk meg mikrohullám-melegítéses Sonogashira-reakciót ösztrán vázas jódvegyületekből kiindulva. 71

4.5. One-pot Sonogashira- click -reakció Kutatómunkám első részében a D-szekooxim és a 13 -ösztron fenolos hidroxilcsoportjára N- benziltriazolilmetil-egységet beépítve olyan származékokat nyertünk (107, 109), amelyek hatékonyan gátolták több humán tumoros sejtvonal osztódását. Ez alapján indokolt lehet ugyanezen molekularészletnek a D-szekooxim, ill. a 13 -ösztron alapvegyület más pozíciójába történő beépítése is. Mivel az irodalomban ismertek 2-es helyzetben szubsztituált antitumor hatású ösztron származékok, 23 célunk volt a D-szekooxim és a 13 -ösztron 2-es szénatomján a triazol heterociklust tartalmazó egység kialakítása. Az így képződő származékok 17 -HSD1 enzimgátlás szempontjából is ígéretesek lehetnek. A Möller és munkatársai által szintetizált, 2-es szénatomon apoláris csoportot (fenilalkinil vagy fenilalkil) tartalmazó vegyületkhez képest az általunk tervezett vegyületek egy poláris, H-kötések kialakítására alkalmas triazol linkeren keresztül tartalmazzák az apoláris benzilcsoportot. Olyan származékok in vitro vizsgálata, amelyek a 2-es szénatomon közvetlenül nagy poláris triazol linkeren keresztül tartalmazzák a lipofil csoportot, fontos szerkezet-hatás összefüggéseket szolgáltathatnak. A triazol linkert egy kismolekulákra már alkalmazott onepot eljárás 179 (ld. 2.5. fejezet, 32. ábra) szteroidokra történő kiterjesztésével kívántuk kialakítani, mikrohullámú reaktorban. A tervezett one-pot reakciósor megvalósításához acetilén reakciópartnerként az irodalmi előzmények alapján a trimetilszilil-acetilént (TMSA) választottuk. A szintézis három lépésben történik: 1. az acetilén Sonogashira kapcsolása, 2. deszililezés, 3. click -reakció. Az első és a harmadik reakciólépés mikrohullámú besugárzással történik. A TMSA keresztkapcsolására a különböző alapvázak esetében különböző mikrohullámú módszer kidolgozása volt szükséges. A katalizátor megválasztásában segítségünkre voltak a fenilacetilénekkel megvalósított Sonogashirakapcsolások közben szerzett tapasztalatok. Az oldószer kiválasztásánál az elsődleges szempont az volt, hogy mindhárom reakciólépés számára megfelelő legyen, és minden lépés jó hozammal játszódjon le benne. Az oxim (136a) esetében a TMSA kapcsolása a fenilacetiléneknél alkalmazott körülmények között kvantitatívan lejátszódott (67. ábra). A köztitermék alkinil származékot (149) izolálás nélkül alakíottuk tovább a következő két lépésben. A szilil védőcsoport eltávolításához tetrabutil-ammónium-fluoridot (TBAF) adtunk a reakcióelegyhez (150), majd rövid, szobahőmérsékleten történő kevertetés után, hozzáadtuk a click -reakcióhoz szükséges réz(i)-jodid katalizátort és a p-szubsztituált benzilazidot (104). 72

A várt 2-(N-benziltriazolil)-származékokat (151) újabb mikrohullámú besugárzás után nyertük. A cikloaddíciók a korábban tárgyalt hagyományos melegítéssel kivitelezett click - reakciók során tapasztaltakkal megegyezően a p-helyzetű szubsztituens minőségétől függetlenül regioszelektíven és jó hozammal szolgáltatták a céltermékeket (151). 67. ábra A D-szekooxim 2-triazolil-származékának (151) one-pot szintézise A 13 -ösztron (55a) Sonogashira kapcsolásához a kutatócsoportunkban korábban alkalmazott körülmények Pd(PPh 3 ) 4 /CuI katalizátorok és diizopropil-amin dimetilformamidos elegye 201 nem bizonyult hatékonynak (IV. Táblázat). A reakcióelegyeket minden esetben 100 C-on, 10 percig reagáltattuk mikrohullámú reaktorban. A reakció lejátszódását vékonyréteg-kromatográfiásan követtük és szükség esetén növeltük a reakcióidőt. A tesztreakciókat a korábban jól bevált NEt 3 -nal, illetve DIPEA-val és DMF helyett THF oldószerrel folytattuk. Mivel továbbra sem tapasztaltunk átalakulást, a következőkben a 0-s oxidációs állapotú palládium katalizátort palládium(ii)-sókra cseréltük. Az irodalom szerint a Pd(OAc) 2, DABCO (1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktán) rendszer kevésbé érzékeny levegőre és vízre. 198 A szteroid (55a), a katalizátor és a bázis keverékét acetonitrilben oldva, a várt 2-alkinil termék képződése azonban nem volt megfigyelhető. A palládium acetát sóját bisz(trifenilfoszfin)palládium(0)-biszklórra (Pd(PPh 3 ) 2 Cl 2 ) változtatva, THF és NEt 3 jelenlétében 199 nem játszódott le a kapcsolási reakció. Azonban a THF-nél jóval 73

nagyobb dipólusmomentummal rendelkező acetonitril és DABCO alkalmazásával, 200 réz- és aminmentes körülmények között kaptuk a várt 2-(trimetilszilil)acetilén származékot (153, 68. ábra). IV. Táblázat: Az 1. lépés körülményeinek optimalizálása a 13 -ösztronon (55a) Katalizátor Ligandum Oldószer Bázis Termék Hozam(%) Pd(PPh 3 ) 4 /CuI - DMF NH(iPr) 2 - - Pd(PPh 3 ) 4 /CuI - DMF NEt 3 - - Pd(PPh 3 ) 4 /CuI THF DIPEA - - Pd(OAc) 2 - ACN DABCO - - Pd(PPh 3 ) 2 Cl 2 - THF NEt 3 - - Pd(PPh 3 ) 2 Cl 2 - ACN NEt 3 - - Pd(PPh 3 ) 2 Cl 2 - ACN DABCO 153 68 Az intakt D-gyűrűnek köszönhetően nem kellett tartani mellélreakcióktól, ezért erélyesebb körülmények (magasabb hőmérséklet és nagyobb mennyiségű bázis) alkalmazására volt lehetőségünk. Így a 13-epi-ösztron 3-metil-éterének keresztkapcsolását nemcsak 2-jód (55a), hanem 2-brómszármazékából is megkíséreltük. A brómszteroidot N- brómszukcinimiddel, diklórmetánban állították elő csoportunkban (68. ábra). 153 68. ábra A 13a-ösztron 3-metil-éterének (4b) brómozása A 152a jelű vegyület Sonogashira kapcsolásához a korábban is jól működő, Pd(OAc) 2 /catacxium A katalizátor/ligandum páros bizonyult hatékonynak, ill. a hosszabb reakcióidő (153, 69. ábra). Brómszteroidok és fenilacetilének mikrohullámú Sonogashira kapcsolására az irodalomban nem található példa. 74

69. ábra A 13 -ösztron 2-triazolil származékainak (154) előállítása 2-halogenidek (55a, 152a) one-pot reakciójával A reakciók sikerességét 1 H- és 13 C-NMR spektroszkópiai módszerekkel igazoltuk. A köztitermék trimetilszilil-kapcsolt vegyületet (153) egy esetben, a 13-epi-ösztron 3-metiléteréből előállítva izoláltuk és jellemeztük. A 70. ábra a kiindulási 2-jódvegyület (55a), a 2- (trimetilszilil)acetilén (153) és a 2-(N-benziltriazolil)-származék (154a) 1 H-NMR spektrumait mutatja. Az 1. lépés sikerességét a szilil-védett alkin (153) 1 H spektrumán 0,2 ppm-nél megjelenő kilencszeres intenzitású szingulett bizonyítja, amely a védőcsoport három metilcsoportjának protonjaihoz tartozik. A 2-es helyzetben lévő jód alkinilcsoportra cserélése az aromás A-gyűrű protonjeleinek (1-H és 4-H) kémiai eltolódását csak minimálisan befolyásolta. A következő két lépés lejátszódását a 154a jelű vegyület NCH 2 - és benzilcsoportjának protonjaihoz tartozó multiplettek igazolják, 5,5 és 7,3 ppm körül. Jól megfigyelhető továbbá az 1-es szénen lévő proton jelének magasabb kémiai eltolódása (8,2 ppm), amely szintén a szomszédos triazol-gyűrű jelenlétére utal. 75

3-OCH 3 1-H 4-H 55a ppm 7.0 6.0 5.0 4.0 3.0 2.0 1.0 TMS 3-OCH 3 1-H 4-H 153 7.0 ppm 6.0 5.0 4.0 3.0 2.0 1.0 3-OCH 3 1-H C=CH 2,3,4,5,6 CH-k 4-H NCH 2 154a ppm 8.0 7.0 6.0 5.0 4.0 3.0 2.0 1.0 70. ábra A 13-epi-ösztron 2-szubsztituált származékainak (55a, 153, 154a) 1 H-NMR spektrumai (CDCl 3 ) Hatás-szerkezet összefüggések felállítása céljából a megfelelő 3-hidroxi jódvegyületekből (54a, 138a) kiindulva is megkíséreltük a 2-triazolil-ösztronok előállítását. Reakciópartnerként a szubsztituálatlan (104a) és a p-nitro-benzilazidot (104e) választottuk. Választásunkat az indokolta, hogy a 3-propargil-éterek esetében az előbbivel képzett konjugátumok (107a, 109a) voltak a legjobb sejtosztódás gátlók, míg az utóbbival (107e, 109e) a legkevésbé antiproliferatívak. Továbbá a savamid származékok közül a p-nitro szubsztituált (110ae) és a szubsztituálatlan (110aa, 111ba) benzilcsoportot tartalmazó 76

triazolok a legjobb 17 -HSD1 enzimgátlók, 1 5 M IC 50 értékekkel (X. Melléklet). Az oxim vázat (138a) az eddig alkalmazott reakciókörülmények megváltoztatása nélkül sikeresen alakítottuk át (155, 70. ábra). A 13-epi-ösztron 3-hidroxi jódvegyületét (54a) azonban nem sikerült a 3-metil-éterén (55a) optimalizált körülmények között reagáltatni. A következőkben ezért a 3-hidroxi-D-szekoösztron jódvegyületeknél (137a, 138a) bevált katalizátor-bázisoldószer kombinációt használtuk a TMSA kapcsolásához (71. ábra). Így a korábban alkalmazott 100 C-os hőmérsékletet (55a, 68. ábra) 60 C-ra csökkentve jutottunk a kívánt 2- triazolil-származékhoz (156). 71. ábra A one-pot reakciósor alkalmazása fenolos A-gyűrűn 77

5. Az előállított vegyületek biológiai hatása 5.1. A triazol konjugátumok és előanyagaik gyógyszer hatástani eredményei Az előállított anyagok sejtosztódás gátló hatását az SZTE GYTK Gyógyszerhatástani és Biofarmáciai Intézetében vizsgálták több humán adherens (HeLa méhnyak, A2780 petefészek, MCF-7 emlő, A431 bőrlaphám) tumorsejtvonalon, in vitro MTTmódszerrel. 201, I V Az eljárás azon alapul, hogy a metabolikusan aktív sejtek a 3-(4,5- dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium-bromid (MTT) festékanyagot redukálják és lila színű formazán kristályokká alakítják. Így az inkubációs idő letelte után kolorimetriás méréssel meghatározható a tesztanyaggal történő kezelést követően az élő sejtek mennyisége. Azokban az esetekben, amelyeknél már 10 M-os koncentrációban is legalább 50 %-os sejtosztódás gátlást fejtett ki a tesztanyag, meghatározták annak IC 50 értékét is. Az IC 50 érték azt a koncentrációt jelenti, amelynél a tesztanyag 50 %-os gátlást fejt ki. A legjobb sejtosztódást gátló vegyületeket az V. Táblázatban tüntettem fel. A D-szeko-alapvegyületek és különböző származékainak in vitro sejtosztódás gátlási tesztelését az indokolta, hogy korábban a szakirodalomban nem volt ismeretes antiproliferatív hatású D-szekoösztron. A tesztvegyületek a 3-as és a 13-as szénen levő funkciós csoport kémiai minőségében (3-OH, -OMe, -OBn, -O-propargil és 13-hidroximetil, -karboxim, -karboxamid), ill. az anguláris metilcsoport térállásában (13, 13 ) tértek el egymástól. Az eredményekből a következő hatás-szerkezet összefüggéseket állapítottuk meg. A sejtosztódást gátló hatást mindhárom szerkezeti elem minősége befolyásolja. Általánosságban kijelenthetjük, hogy a 13β-szekoszteroidok hatékonyabban gátolják a vizsgált tumorsejtek osztódását, mint a 13α-megfelelőik. A 3-as helyzetben levő funkciós csoport minősége és mérete egyaránt mérvadó: a hidroxilcsoport jelenléte (73, 74, 77, 78) előnytelen, míg a nagyméretű lipofil benzilcsoport (71, 72, 75, 76) jelenléte előnyös a vizsgált hatás szempontjából. A 13-as helyzetű funkciós csoportok közül a karboxim funkciót tartalmazó vegyületek (23, 75) voltak a legpotensebbek, majd a hidroximetil oldalláncot tartalmazó (71, V. Táblázat). Következésképpen a 13β-D-szekooxim vagy a -D-szekoalkohol alapvázakon (I) célszerű a további módosításokat végezni. Az alapvegyületekre kapott ígéretes eredmények alapján triazolil-molekularészletet építettünk be a szekovegyületek 3-as (I) vagy 17-es pozíciójába (III) linkeren keresztül (72. ábra). A 3-O-benzilcsoport és a szteroid közé beépített triazol-molekularészlet (105, 107, I) 78

lényegesen növelte az antiproliferatív hatást, szubmikromólos IC 50 -értékekig (V. Táblázat). A hatás mértékét befolyásolta az alkalmazott benzil-azid p-helyzetű szubsztituensének minősége. Mivel a triazol-molekularészlet beépítése jelentősen növelte az alapvegyületek citosztatikus hatását, a D-szekoalkohol és -oxim 13α-epimerére (II) is beépíttettük azt (106, 108, II). Így a 13α-D-szekoalkohol sorban (106, II) sikerült a szakirodalom első antiproliferatív hatású 13α-D-szekoösztrán vázas vegyületét (106a, II) előállítanunk (V. Táblázat). A heterociklus kialakítását nemcsak az A-gyűrűn (105 108, I, II), hanem a D- szekokarboxamidokon (110, 111, III) is megvalósítottuk, a nyitott D-gyűrűn. Az eredmények alapján a savamid származékok közül (110a, b; 111a, b) a 3-benzil-éter funkciót tartalmazó karboxamid-triazolok (110ba, 110bb, III) szelektíven gátolták az A2780 (petefészek karcinóma) sejtek osztódását szubmikromólos IC 50 -értékkel (V. Táblázat). 72. ábra A D-szekoösztron sorban végrehajtott átalakítások Antiproliferatív hatásukat illetően az intakt D-gyűrűs 13-epi-ösztron alapvegyületek (4a, b, c, IV) a nyitott D-gyűrűsektől (I III) eltérően viselkednek. A 17-es helyzetben oxocsoportot tartalmazó származékok (4) közül sem a fenolos A-gyűrűvel rendelkező (4a), sem a fenoléterek (4b, c) nem fejtenek ki citotosztatikus hatást. Azonban a 13-epi-ösztronból (4a) képzett 17-hidroxi szteroidok (6, 7) 10 M alatti IC 50 értékkel gátolják szelektívean a HeLa sejtek osztódását. Általánosságban kijelenthetjük, hogy a 17-hidroxi epimerek (6, 7, 114, 115) közül a 17 -térállásúak (6, 115) potensebbek 17 -megfelelőiknél (7, 114), ami összhangban áll a Poirier és csoportja által megállapítottakkal. 30 Az alapvegyületek hatékonyságának növelése céljából itt is kialakítottuk a triazolil-molekularészletet a 3-as helyzetben linkeren keresztül (73. ábra). A triazolil-konjugátumok (109, IV) a nyitott D- gyűrűs vegyületekhez (I III) hasonlóan jó antiproliferatív hatással rendelkeznek. A legaktívabb click -termék a p-helyzetben nem szubsztituált 109a jelű vegyület, amely szubmikromólos IC 50 értékeket mutat minden vizsgált sejtvonalon (V. Táblázat). A 109a és 79

109e jelű vegyületek redukálásával nyert 17-hidroxi származékok (112a, e; 113a, e) szintén aktívnak bizonyultak. A szubsztituálatlan benzil gyűrűs adduktumok (112a, 113a) a kiindulási anyagukkal (109a) összemérhető hatással rendelkeznek. A p-nitro-szubsztituált click - termék 17-ketocsoportjának redukálásával (112e, 113e) jelentősen javult az antiproliferatív hatás, a 17 -hidroxi izomer (113e) javára. A 17-dezoxi vegyület (118) azonban teljesen inaktívnak bizonyult, amiből azt a következtetést vonhatjuk le, hogy a 17-es helyzetben oxigén tartalmú funkció jelenléte szükséges az antiproliferatív hatás kifejtéséhez. 73. ábra A 13 -ösztrán vázon végrehajtott átalakítások A dimerek (119 130) közül csak a 16 -azido-17 -hidroxi epimerből (37a) képzett dimerek (119 121, 125 127, V) gátolják a tumorsejtek osztódását. Ez összhangban áll a fenilacetilénnel clickelt származékoknál (38ab), 69 ill. a 17-hidroxi-13-epi-ösztron alapvegyületeknél (6) tapasztaltakkal. A biológiai hatás erősségét nagymértékben befolyásolja az alkin monomer (90, 92, 94, 110, 111) minősége is. Az A- és D-gyűrűkön keresztül összekapcsolt heterodimerek (119 121, 125 127) közül, a D+A típusúak (125 127) hatékonyabbak a D+D típusúaknál (119 121). A 37a-jelű vegyületnek a D-szekoalkohol (92) vagy -oxim (94) 3-propargil-éterével konjugált származékai ( D+A, 125, 126, 74. ábra) már 10 M-os koncentrációban is jelentős citotosztatikus hatást fejtenek ki (V. Táblázat). A D+D típusú hibridek (119 121) közül azonban csak a két 13-epi-ösztron 3-benzil-éter egységből álló 121-es jelű vegyület (74. ábra) gátolja 50%-nál nagyobb mértékben a HeLa és A431 tumorsejtek osztódását. 80

74. ábra Antiproliferatív hatású ösztron heterodimerek Ezek alapján kijelenthetjük, hogy a tervezett átalakítások minden váztípusnál (I, III, IV) javítottak az alapvegyületek antiproliferatív hatásán. A triazol-szerkezeti elem beépítése előnyösnek bizonyult a módosított ösztrán váz 3-as, 16-os és 17-es helyzetében is. 81

V. Táblázat: A leghatékonyabb sejtosztódást gátló származékok Szám Alapváz Szubsztituens R 1 R 2 IC 50 # 6 IV H - HeLa: ** 7 IV H - HeLa: * 23 I Me CH=N-OH - 71 I Bn CH 2 -OH - 75 I Bn CH=N-OH - 105a I CH 2 -OH - A2780, A431: *** HeLa, MCF-7: ** A431: ** MCF-7: * A431: *** A2780: ** HeLa: * A2780: *** HeLa, MCF-7: ** 105b I CH 2 -OH - A2780, MCF-7: ** 105c I CH 2 -OH - A2780: ** 105e I CH 2 -OH - A2780: ** MCF-7: * 106a II CH 2 -OH - HeLa, A2780: ** 106b II CH 2 -OH - A2780: * 107a I CH=N-OH - HeLa, A2780, A431, MCF-7: ** 82

107c I CH=N-OH - 107e I CH=N-OH - MCF-7: ** A431: * MCF-7, A431: ** HeLa, A2780: * 108a II CH=N-OH - HeLa, A2780: ** 109a IV - C=O 109b IV - C=O HeLa, A2780, A431, MCF-7: *** HeLa, A2780, A431, MCF-7: * 109c IV - C=O A2780, A431: ** HeLa, MCF-7: * 110ba III - - A2780: ** 110bb III - - A2780: *** 112a IV - A431, MCF-7: *** HeLa, A2780: ** 112e IV A2780: * 113a IV - 113e IV 125 V+I CH 2 -OH - A2780, A431, MCF-7: *** HeLa: ** A2780: ** HeLa, A431, MCF-7: * HeLa, A2780, A431, MCF-7: ** 126 V+I CH=N-OH - HeLa, A431: ** # 100 1000 nm = *** 1 5 M = ** 5 10 M = * 83

5.2. Az A-gyűrűn szubsztituált vegyületek és előanyagaik 17 -HSD1 enzimgátlási eredményei Az előállított anyagok 17 -HSD1 enzimre gyakorolt hatását az SZTE ÁOK I. sz. Belgyógyászati Klinika, Endokrinológiai Laboratóriumában vizsgálták. V, VI A méréseket in vitro radioszubsztrát inkubációs módszerrel végezték, az általános protokol szerint HEPES puffer közegben (ph=7,3), NADPH kofaktor feleslegének jelenlétében. 202 204 Az eljárás lényege, hogy az enzimreakció leállítása után, a termék ösztradiol radioaktivitását folyadék szcintillációs készülékkel megmérve, meghatározható a relatív konverzió. Azaz az inhibitorral gátolt átalakulás mértéke, a gátlás nélküli kontrollhoz (100%) viszonyítva. A 10 M-os koncentrációban legalább 50%-os gátlást elérő tesztvegyületeknek az IC 50 értékét is meghatározták. Az IC 50 érték az az inhibitor koncentráció, amely az enzim aktivitását 50%-ra csökkenti az adott körülmények között. A leghatékonyabb enzimgátló vegyületeket a VI. és a VII. Táblázatban tüntettem fel. A 13α-ösztron (4a) potens inhibitornak bizonyult, az enzim természetes szubsztrátjával, a 13β-ösztronnal hasonló IC 50 -értéket adva. A molekulamechanikai és szemiempirikus energiaminimalizálással kapott szerkezeteket (75. ábra) összehasonlítva jól látható, hogy a 13-epimer ösztronok (4a, 74, 78) konformációja jelentősen eltér, az oxigénfunkciók közötti távolság is különböző. Mindezek ellenére a két vegyület (1a és 4a) 17β-HSD1 enzimhez mutatott affinitása hasonló. Kiemelkedő jelentőségűnek tartjuk ezt az eredményt, ugyanis ennek tudatában a közeljövőben az ösztron-alapú inhibitor fejlesztést a 13α-ösztron-alapú válthatja fel, amely szelektív, ösztrogén hatástól mentes enzimgátlókhoz vezethet. További előny, hogy az epimerizáció egy lépésben, kiváló hozammal megvalósítható, tehát az így nyerhető alapanyag még előállítás szempontjából is kedvező alapot ad gyógyszerkémiai fejlesztésekhez. Az irodalomban korábban nem végezték el az ösztron 3-as helyzetben éter funkciót tartalmazó származékainak (1b, c; 4b, c; 21 23, 25, 71, 72, 75, 76) összehasonlító 17β-HSD1 enzimgátlási vizsgálatát. A 3-as helyzetű funkciós csoport minőségét változtatva, és a kapott származékok gátló hatását összehasonlítva arra jutottunk, hogy a 13β- és a 13α-ösztron sorban egyaránt a fenolos hidroxilcsoport jelenléte (73, 77 és 4a, 74) a legkedvezőbb, annak éteresítése pedig csökkent gátló hatáshoz vezet. A kisebb éter (OMe) viszonylag jó gátlónak bizonyult (21, 23, 4b), a 3-benziloxicsoport (4c, 71, 72, 75, 76) azonban teljesen visszaszorította az enzimgátlást. Ezt a szerkezet-hatás 84

összefüggést nemcsak az intakt D-gyűrűs (4b és 4c), hanem a D-szekovegyületeknél (21, 23 és 71, 72, 75, 76) is tapasztaltuk. A korábbi szakirodalom jelentős hányada szerint a fenolos hidroxilcsoport jelenléte szükséges feltétele a gátló hatásnak, mi igazoltuk, hogy a 3- metiléterek is lehetnek hatékony gátlók. A szakirodalomban nem találtunk arra utalást, hogy korábban D-szekoösztronokat vizsgáltak volna 17β-HSD1 gátlás szempotjából. Ez valószínűleg azzal magyarázható, hogy a kutatók többsége az ösztron merev alapváza és a két oxigéntartalmú funkciós csoport meglétét elengedhetetlennek tartja az inhibitor hatás szempontjából. Ismeretesek egyéb, pl. 3-brómetiloldalláncot tartalmazó ösztron-alapú inhibitorok is 205, de csak elvétve. Miután jelen kutatásban a megváltozott gyűrűkonformációjú vázmódosított 13α-ösztronra (4a,b) jelentős gátlási értékeket kaptunk, ígéretesnek tűnt a D-szekooximok (23, 25, 75 78) mint gyűrűnyitással vázmódosított vegyületek vizsgálata is. A D-szekooximok 17β-HSD1 gátlási eredményeit összehasonlítva fontos szerkezet-hatás összefüggéseket állapítottunk meg. A 13β-származékok (23, 75, 77) általában potensebbek a 13α-megfelelőiknél (25, 76, 78). A 75. ábra jól mutatja a 13-epimer szekoösztronok (73, 77 és 74, 78) szerkezeti különbségeit. Míg a 13β-származékok (73, 77) 13-oldallánca ekvatoriális helyzetű funkciós csoportot, és axiális térállású 13-metilcsoportot tartalmaznak, addig a 13α-epimerek (74, 78) anguláris metilcsoportja ekvatoriális állású. A másik lényeges szerkezetbeli eltérés a szekovegyületek között, hogy az alkoholok (73, 74) szabad rotációra képes funkciót, míg az oximok (77, 78) egy E/Z geometriai izomériát mutató kettős kötést tartalmaznak. Mindkét funkciós csoport hidrogénkötések kialakítására képes, de az oximnál ez kifejezettebb lehet. Ez magyarázhatja a 13β-oxim (77) kiemelkedő, nanomólos tartományba eső inhibitor hatását. Ez a vegyület az eddig publikált egyik leghatékonyabb 17β-HSD1 inhibitor az irodalomban. Mindezek alapján kijelenthetjük, hogy a különbözőképpen vázmódosított ösztron származékok (13-epimer, D-szeko) új kutatási irányvonalat adhatnak az enzim inhibitorok tervezésében. 85

1a 4a 73 74 77 78 75. ábra A 13-epimer, vázmódosított ösztronok térszerkezete VI. Táblázat: A leghatékonyabb 17 -HSD1 enzimgátló vegyületek # 100 1000 nm = *** 1 5 M = ** 5 10 M = * Szám Alapváz R 1 R 2 # IC 50 4a IV - H ** 4b IV - Me * 21 II CH 2 -OH - * 23 II CH=N-OH - ** 73 I CH 2 -OH H ** 74 III CH 2 -OH - ** 77 I CH=N-OH H *** 88 I CH 2 -OAc Ac ** 86

Az alapvegyületekre kapott ígéretes eredmények arra ösztönöztek bennünket, hogy további új vázmódosított származékokat állítsunk elő, és együttműködésben vizsgáljuk azok 17β-HSD1 enzimre gyakorolt gátló hatását. A Möller és munkatársai eredményei 23 alapján előállított, 2-es és/vagy 4-es helyzetben jódot (134 138) vagy fenialkinil-funkciót tartalmazó (144 148) D-szekoösztronokra kapott gátlásokat összevetettük egymással (VII. Táblázat). A jódozott szekooximok (138a,b, VII. Táblázat) magasabb IC 50 -értékkel gátolták az enzim működését, mint maga az oxim (77, VI. Táblázat), de a 2-jód-szekoalkohol (137a, VII. Táblázat) potensebbnek bizonyult a jódozatlan alapvegyületénél (73, VI. Táblázat). A 2- fenetinil-származékok (144, 145, 147, 148) eredményeit összevetve megállapítható, hogy kizárólag az oxim 3-hidroxi 2-es regioizomerei (148a,d,e) rendelkeznek jelentős, szubmikromólos gátló hatással (VII. Táblázat), azonban ezek is elmaradnak az alapvegyületétől (77 VI. Táblázat). Möller és munkatársai az intakt ösztrán váz esetében jelentős hatásnövekedést értek el azzal, hogy a 2-es pozícióba nagyméretű, apoláris csoportot építettek be (50). 23 A D-szekooxim vázán ugyanez az átalakítás nem bizonyult előnyösnek. Erre az adhat magyarázatot, hogy a két alapváz szerkezete jelentősen eltér egymástól. Egyik négy, a másik három gyűrűből áll, és az intakt vagy nyitott D-gyűrűben keto vagy oxim funkciót tartalmaznak. Az oxim a fehérje bizonyos aminosav oldalláncaival hidrogénkötéseket kialakítva az intakt alapvázhoz képest eltérő orientációban illeszkedhet a szubsztrátkötő helyre, és a lipofil üreg, amelybe az ösztrán váz 2-es helyzetű apoláris csoportja jól illeszkedik, a szekovegyületnél nem ugyanott helyezkedik el. A célból, hogy további hasznos szerkezet-hatás összefüggéseket nyerjünk, olyan származékokat is előállítottunk, amelyek egy poláris, hidrogénkötések kialakítására képes triazolmolekularészletet tartalmaznak a 2-es helyzetben (151, 154 156). A triazol-gyűrűt a benzilcsoport és a 2-es szénatom közé építettük be. Az eredmények arra utalnak, hogy a triazolil-származékok (155a,e, VII. Táblázat) is képesek az enzim működését gátolni, alacsony mikromólos tartományban. Ezek alapján kijelenthetjük, hogy a D-szekooxim származékait illetően a 2-es szénatomra beépített csoport lipofil jellege vagy mérete nem befolyásolja döntően az enzimgátló hatást. 87

VII. Táblázat: A leghatékonyabb 17 -HSD1 inhibitorok Szám Alapváz A-gyűrű szerkezete R IC 50 # 137a I - *** 138a II *** 138b II *** - 148a H *** 148c Me * 148e II OMe ** 148b F ** 148d CF 3 ** 155a H ** II 155e NO 2 ** # 100 1000 nm = *** 1 5 M = ** 5 10 M = * 88

6. Általános kísérleti rész Az olvadáspontokat Kofler-blokkon mértük, korrekció nélkül. A mikrohullámú reakciókat egy CEM, Discover SP készülékben hajtottuk végre, a hőmérséklet állandó értéken tartásával. A 1 H- és 13 C-NMR spektrumok felvétele Bruker DRX 500 készülékkel történt, belső standardként TMS-t, oldószerként CDCl 3 -ot használva (az egyéb oldószereket a megfelelő adatoknál jelöltük). A tömegspektrumok Agilent 500MS ioncsapdás spektrométerrel, elektrospray ionizációs forrással, pozitív ion módban, 50-800 m/z tartományban készültek. A reakciók lefutását vékonyréteg-kromatográfiával követtük. Kieselgel 60 (MERCK), 0,2 mm vastagságú lapokat használtunk. A kromatogramokat a következő összetételű reagenssel való lefúvással és azt követő 10 perces 100 120 ºC-on történő melegítéssel hívtuk elő: 2,5 g P 2 O 5.24MoO 3.H 2 O, 25 ml 85%-os H 3 PO 4, 25 ml víz. Az R f -értékek megállapítása 254 vagy 365 nm hullámhosszúságú UV-fényben észlelt foltok alapján történt. Az R f - értékeket a következő oldószer-rendszerekben határoztuk meg: (a) CH 2 Cl 2, (b) 2% EtOAc/CH 2 Cl 2, (c) 10% EtOAc/CH 2 Cl 2, (d) 10% CH 2 Cl 2 /hexán, (e) 5% EtOAc/CH 2 Cl 2, (f) 50% EtOAc/CH 2 Cl 2, (g) 30% EtOAc/CH 2 Cl 2, (h) 70% EtOAc/hexán, (i) 30% EtOAc/hexán, (j) 15% EtOAc/hexán. A reakciótermékek elválasztása, illetve tisztítása 40 63 m szemcseméretű Kieselgel 60 (MERCK) álló fázissal töltött oszlopon történt. A vegyületek szén- és hidrogén analízis adatainak számított és mért értékei a hibahatárokon belül megegyeznek egymással. 89

7. Részletes kísérleti rész 7.1. A nyitott D-gyűrűs alapvegyületek és származékaik előállítása 7.1.1. A 3-benziloxi- és 3-metoxi-13 -hidroximetil-14 -(prop-2-enil)-des-d-ösztra-1,3,5(10)- trién (21, 71) és 13-epimereik (22, 72) előállítása 375 mg (1,00 mmol) 3-benziloxi-D-szekoaldehidet (15c, 16c) vagy 299 mg (1,00 mmol) 3-metoxi-D-szekoaldehidet (15b, 16b) feloldunk 5 ml diklórmetán és metilalkohol 1:1 keverékében, majd 5 ekvivalens kálium-tetrahidridoborátot adunk hozzá. A reakció előrehaladását vékonyréteg-kromatográfiával követjük. A reakcióelegyet vízre öntjük, éterrel extraháljuk, a szerves fázist nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. 7.1.2. A 3-benziloxi- és 3-metoxi-14 -(prop-2-enil)-des-d-ösztra-1,3,5(10)-trién-13 karbaldehid oxim (23, 75) és 13-epimereik (25, 76) előállítása 375 mg (1,00 mmol) 3-benziloxi-D-szekoaldehidet (15c, 16c) vagy 299 mg (1,00 mmol) 3-metoxi-D-szekoaldehidet (15b, 16b) feloldunk 10 ml acetonitril és 4 ml víz keverékében, majd hidroxilamin-hidrokloridot (85 mg, 1,20 mmol) és vízmentes nátrium-acetátot (125 mg, 1,50 mmol) adunk hozzá. A reakció előrehaladását vékonyréteg-kromatográfiával követjük. A reakcióelegyet vízre öntjük, éterrel extraháljuk, a szerves fázist nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. A nyerstermékeket (23, 25, 75, 76) 2% EtOAc/98% CH 2 Cl 2 eluenssel tisztítotjuk oszlopkromatográfiásan. 7.1.3. A 3-benziloxi- és 3-metoxi-14 -(prop-2-enil)-des-d-ösztra-1,3,5(10)-trién-13 karbonsav (17, 79) és 13-epimereik (18, 80) előállítása A 3-metoxi-D-szekoaldehidet (15b, 16b, 299 mg, 1,00 mmol) vagy a 3-benziloxi-Dszekoaldehidet (15c, 16c, 375 mg, 1,00 mmol) 4 ml acetonban oldjuk, majd jéghűtés közben 0,04 ml (8 N) Jones-reagenst adagolunk az oldathoz. A reakció lejátszódását vékonyréteg- 90

kromatográfiával követjük. 1 órás kevertetés után a reakcióelegyet vízre öntjük, diklórmetánnal extraháljuk, a szerves fázist izzított nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. A nyersterméket (17, 18, 79, 80) oszlopkromatográfiásan tisztítjuk, diklórmetán eluens alkalmazásával. 7.1.4. A 3-benziléter védőcsoport eltávolítása és a 14-(prop-2-enil)-oldallánc telítése A 3-benziloxi-D-szekoalkoholt (71, 72, 377 mg, 1,00 mmol) vagy 3-benziloxi-D-szekooximot (75, 76, 390 mg, 1,00 mmol) vagy a 3-benziloxi-D-szekokarbonsavat (79, 80, 391 mg, 1,00 mmol) vagy 3-benziloxi-13 -ösztra-1,3,5(10),15-tetraént (34, 344 mg, 1,00 mmol) vagy a 3-metoxi-D-szekooximot (23, 313 mg, 1,00 mmol) oldunk 30 ml etil-acetátban, 0,60 g palládium/csontszén (10%) katalizátort adunk hozzá, majd a reakcióelegyet 20 bar hidrogénnyomás alatt 2 3 órán át keverjük. A katalizátort szűréssel eltávolítjuk, majd az oldatot bepároljuk. 7.1.5. A D-szekoalkohol (71, 73) és -oxim (23, 25, 75 77) származékainak acetilezése A D-szekoalkohol származékokat (71, 376 mg, 1,00 mmol vagy 73, 288 mg, 1,00 mmol) vagy D-szekooxim származékokat (23, 25, 313 mg, 1,00 mmol vagy 75, 76, 389 mg, 1,00 mmol vagy 77, 301 mg, 1,00 mmol) ecetsav-anhidriddel (2 ml) piridinben (5 ml) reagáltatjuk. A reakcióelegyet 2 órán át kevertetjük, majd vízre öntjük. Diklórmetános extrakció után az egyesített szerves fázisokat híg sósavoldattal semlegesítjük, izzított nátrium-szulfáton szárítjuk, az oldószert bepárlással eltávolítjuk. A 3-benzil-éter- vagy 3-metil-éter-17- acetátokat (83 87) CH 2 Cl 2, míg a 3,17-diacetátokat (88, 89) 2% EtOAc/98% CH 2 Cl 2 eluenssel, oszlop-kromatográfiásan tisztítjuk. 91

7.2. Ösztron alkinek (90 94, 102, 103, 117) előállítása 7.2.1. Alkin funkció kialakítása a fenolos A-gyűrűn A 13-epimer 3-hidroxi-D-szekoalkoholokat (73, 74, 288 mg, 1,00 mmol) vagy a 3-hidroxi-Dszekooximokat (77, 78, 301 mg, 1,00 mmol) vagy a 3-hidroxi-13α-ösztra-1,3,5(10)-trién-17- ont (4a, 270 mg, 1,00 mmol) vagy a 3-hidroxi-13α-ösztra-1,3,5(10)-triént (116, 256 mg, 1,00 mmol) acetonban (10 ml) feloldjuk, majd propargil-bromidot (0,17 ml, 1,5 mmol) (80 t%-os toluolban oldva) és kálium-karbonátot (968 mg, 7,00 mmol) adunk hozzá. Az elegyet 70 Con 24 órán keresztül kevertetjük. Az oldószert bepárlással eltávolítjuk, majd a nyersterméket (90 94 vagy 117) oszlopkromatográfiásan tisztítjuk, 10% EtOAc/90% CH 2 Cl 2 vagy 2% EtOAc/98% CH 2 Cl 2 eluens alkalmazásával. 7.2.2. A savamid-alkinek (102, 103) előállításának általános leírása A 13-epimer 3-benziloxi-D-szekokarbonsavakat (79, 80, 195 mg, 0,50 mmol) vagy a 3- metoxi-d-szekokarbonsavakat (17, 18, 157 mg, 0,50 mmol) 5 ml dimetil-formamidban oldjuk, és rendre hozzáadjuk a következőket: HOBt-t (75 mg, 0,55 mmol), HBTU-t (208 mg, 0,55 mmol) és DIPEA-t (65 mg, 0,50 mmol). A reakcióelegyet 15 percig szobahőmérsékleten kevertetjük, majd hozzáadjuk a propargil-amint (27,5 mg, 0,50 mmol) DMF-ben (1 ml) feloldva. Szobahőmérsékleten 2 óra kevertetés után a reakció lejátszódik, az elegyet vízre öntjük, diklórmetánnal extraháljuk, a szerves fázist izzított nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. A nyersterméket (102, 103) oszlopkromatográfiásan tisztítjuk, CH 2 Cl 2 eluenssel. 92

7.3. Szteroid alkinek (90 94, 102, 103, 117) és benzil-azidok (104) "click"-reakciója 7.3.1. Triazol-gyűrű kialakítása az aromás A-gyűrűn (105 109, 118) A megfelelő 3-propargil-éter (90, 327 mg, 1,00 mmol vagy 92, 340 mg, 1,00 mmol vagy 94, 308 mg, 1,00 mmol vagy 117, 294 mg, 1,00 mmol) toluolos oldatához (10 ml) hozzáadjuk a megfelelő benzil-azidot (104a e, 1,00 mmol), trifenilfoszfánt (52 mg, 0,20 mmol), réz(i)- jodidot (19 mg, 0,10 mmol) és N,N-diizopropil-etilamint (52 µl, 3,00 mmol). A reakcióelegyet 1 órán át forraljuk, majd az oldószer bepárlása után a nyersterméket (105 109, 118) oszlopkromatográfiásan tisztítjuk, eluensként 10% EtOAc/80% CH 2 Cl 2 50% EtOAc/ 50% CH 2 Cl 2 elegyét használva. 7.3.2. Triazol-gyűrű kialakítása a nyitott D-gyűrűn (110, 111) A 17-savamid-alkin 3-metil-éterének (102a, 103a, 352 mg, 1,00 mmol) vagy 3-benziléterének (102b, 103b, 428 mg, 1,00 mmol) toluolos oldatához (10 ml) hozzáadjuk a megfelelő benzil-azidot (104a, b, e, ill. 104c, d, 1,00 mmol), trifenilfoszfánt (52 mg, 0,20 mmol), réz(i)-jodidot (19 mg, 0,10 mmol) és N,N-diizopropil-etilamint (52 µl, 3,00 mmol). A reakcióelegyet 1 órán át forraljuk, majd az oldószer bepárlása után a nyersterméket (110, 111) oszlopkromatográfiásan tisztítjuk, eluensként 10% EtOAc/80% CH 2 Cl 2 50% EtOAc/ 50% CH 2 Cl 2 elegyét használva. 93

7.4. A 17-oxocsoport komplex fémhidrides redukciója 7.4.1. A 13 -ösztron alapvegyületek (4) 17-ketocsoportjának redukciója A 3-hidroxi-13α-ösztra-1,3,5(10)-trién-17-ont (4a, 270 mg, 1,00 mmol) vagy a 3-metiloxi- 13α-ösztra-1,3,5(10)-trién-17-ont (4b, 284 mg, 1,00 mmol) vagy a 3-benziloxi-13α-ösztra- 1,3,5(10)-trién-17-ont (4c, 360 mg, 1,00 mmol) feloldjuk diklórmetán és metanol 1:1 (5 ml) elegyében, majd 5 ekvivalens nátrium-tetrahidrido-borátot adunk hozzá. A reakcióelegyet 3 órán át szobahőmérsékleten keverjük, vízre öntjük, éterrel extraháljuk, a szerves fázist nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. Az előállított diasztereomereket (114, 115) oszlopkromatográfiával tisztítjuk: 30% EtOAc/70% CH 2 Cl 2 (114a, 115a) vagy 5% EtOAc/ 95% CH 2 Cl 2 (114b, 115b) vagy 2% EtOAc/98% CH 2 Cl 2 (114c, 115c) eluenssel. 7.4.2. A click -termékek (109a, 109e) 17-oxocsoportjának redukciója A 3-[(1-benzil-1H-1,2,3-triazol-4-il)metoxi]-13α-ösztra-1,3,5(10)-trién-17-ont (109a, 487 mg, 1,00 mmol) vagy a 3-{[(1-(4-nitrobenzil)-1H-1,2,3-triazol-4-il]metoxi}-13α-ösztra-1,3,5(10)- trién-17-ont (109e, 515 mg, 1,00 mmol) feloldjuk diklórmetán és metanol 1:1 (5 ml) elegyében, majd 5 ekvivalens nátrium-tetrahidrido-borátot adunk hozzá. A reakcióelegyet 3 órán át szobahőmérsékleten keverjük, vízre öntjük, éterrel extraháljuk, a szerves fázist nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. Az előállított diasztereomereket (112a,e; 113a,e) oszlopkromatográfiával tisztítjuk, 30% EtOAc/70% CH 2 Cl 2. 94

7.5. Szteroid alkinek (90, 92, 94, 102a,b, 103b) és szteroid azidok (37a,b) "click"-reakciója 7.5.1. D+D típusú heterodimerek (119 124) előállításának általános receptje A 17-savamid-alkin 3-benziléterének (102b, 103b, 428 mg, 1,00 mmol) vagy 3-metiléterének (102a, 352 mg, 1,00 mmol) toluolos oldatához (10 ml) hozzáadjuk a megfelelő 13 ösztron azidoalkoholt (37a vagy 37b, 404 mg, 1,00 mmol), trifenilfoszfánt (52 mg, 0,20 mmol), réz(i)-jodidot (19 mg, 0,10 mmol) és N,N-diizopropil-etilamint (52 µl, 3,00 mmol). A reakcióelegyet 1 órán át forraltuk, majd az oldószer bepárlása után a nyersterméket (119 124) oszlopkromatográfiásan tisztítjuk, eluensként 70% EtOAc/30% hexán elegyét használva. 7.5.2. D+A típusú ösztron dimerek (125 130) előállításának általános leírása A megfelelő 3-propargil-éter (90, 327 mg, 1,00 mmol vagy 92, 340 mg, 1,00 mmol vagy 94, 308 mg, 1,00 mmol) toluolos oldatához (10 ml) hozzáadjuk a megfelelő 13 -ösztron azidoalkoholt (37a vagy 37b, 404 mg, 1,00 mmol), trifenilfoszfánt (52 mg, 0,20 mmol), réz(i)-jodidot (19 mg, 0,10 mmol) és N,N-diizopropil-etilamint (52 µl, 3,00 mmol). A reakcióelegyet 1 órán át forraljuk, majd az oldószer bepárlása után a nyersterméket (125 130) oszlopkromatográfiásan tisztítjuk, eluensként 70% EtOAc/30% hexán elegyét használva. 95

7.6. D-szekoösztronok aromás A-gyűrűjének jódozása 7.6.1. A 3-védett D-szekoösztronok (88, 89, 131) jódozása A D-szekoalkohol-diacetátot (88, 372 mg, 1,00 mmol) vagy a D-szekooxim-diacetátot (89, 385 mg, 1,00 mmol) vagy a 3-metoxi-D-szekooximot (131, 315 mg, 1,00 mmol) N-jódszukcinimiddel (225 mg, 1,00 mmol) reagáltatjuk triflourecetsav (5 ml) oldószerben. 2 óra szobahőmérsékleten történő kevertetés után a reakcióelegyet vízre öntjük, diklórmetánnal extraháljuk, ammóniával semlegesítjük, nátrium-tioszulfát oldattal mossuk, majd az egyesített szerves fázisokat izzított nátrium-szulfáton szárítjuk. Az oldószer bepárlása után a nyerstermékeket (134, 135, 136) oszlopkromatográfiásan tisztítjuk, 10% EtOAc/90% hexán 15% EtOAc/85% hexán eluenssel. 7.6.2. A 3-hidroxi-D-szekoösztronok (73, 77) jódozása A D-szekoalkoholt (73, 288 mg, 1,00 mmol) vagy a D-szekooximot (77, 301 mg, 1,00 mmol) N-jód-szukcinimiddel (225 mg, 1,00 mmol) reagáltatjuk trifluorecetsav (5 ml) oldószerben. A reakcióelegyet két órán át szobahőmérsékleten kevertetjük, majd vízre öntjük. Diklórmetánnal extraháljuk, ammóniával semlegesítjük, nátrium-tioszulfát oldattal mossuk, majd az egyesített szerves fázisokat izzított nátrium-szulfáton szárítjuk. Az oldószer bepárlása után a nyerstermékeket (137, 138) oszlopkromatográfiásan tisztítjuk, 30% EtOAc/70% hexán eluenssel. 96

7.7. Szteroid-jodidok Sonogashira-kapcsolása mikrohullámú reaktorban 7.7.1. A 3-védett D-szekoösztronok (134, 135, 136b) Sonogashira kapcsolása fenilacetilénekkel (139) A mikrohullámú reaktorhoz használatos reakcióedényben a megfelelő jódszármazékhoz (134a, 249 mg, 0,50 mmol vagy 135a, 135b, 256 mg, 0,50 mmol vagy 136b, 220 mg, 0,50 mmol) rendre 10 mol% Pd(OAc) 2 katalizátort (11 mg, 0,05 mmol) és 5 mol% catacxium A ligandumot (9 mg, 0,025 mmol), 3 ml dimetil-formamid oldószert, 3 ekvivalens trietilamin bázist (210 l, 1,50 mmol) adunk, majd hozzácsepegtetünk 2 ekvivalensnyit a megfelelő acetilénből. A reakcióelegyet 30 percig, 100 C-on, mikrohullámú reaktorban reagáltatjuk. A reakcióelegyeket közvetlenül, szilikagélre párolva, szilikagél oszlopon, 15% EtOAc/85% hexán eluenssel tisztítjuk. 7.7.2. A 2-jód-3-metoxi-D-szekooxim (136a) és a 3-hidroxi-2-jód származékok (137a, 138a) Sonogashira kapcsolása fenilacetilénekkel (139) A jódszármazékhoz (136a, 220 mg, 0,50 mmol vagy 137a, 207 mg, 0,50 mmol vagy 138a, 214 mg, 0,50 mmol) rendre hozzáadjuk az 5 mol% Pd(PPh 3 ) 4 katalizátort (29 mg, 0,025 mmol) és a 5 mol% CuI segédkatalizátort (5 mg, 0,025 mmol). 3 ml tetrahidrofuránban oldjuk, majd 3 ekvivalens trietilamin bázist (210 l, 1,50 mmol) és a megfelelő acetilén 2 ekvivalensét csepegtetjük hozzá. A reakcióelegyet 20 percig, 60 C-on, mikrohullámú reaktorban reagáltatjuk. A reakcióelegyeket közvetlenül, szilikagélre párolva, szilikagél oszlopon, 15% EtOAc/85% hexán eluenssel tisztítjuk. 97

7.8. One-pot Sonogashira- click -reakció ösztrán vázon 7.8.1. A 3-metoxi-D-szekooxim (136a) és a 3-hidroxi-származékok (138a, 54a) 2-jódvegyületének átalakítása A jódszármazékhoz (136a, 220 mg, 0,50 mmol vagy 138a, 214 mg, 0,50 mmol vagy 54a, 198 mg, 0,50 mmol) rendre hozzáadjuk az 5 mol% Pd(PPh 3 ) 4 katalizátort (29 mg, 0,025 mmol) és a 5 mol% CuI segédkatalizátort (5 mg, 0,025 mmol). 3 ml tetrahidrofuránban oldjuk, majd 3 ekvivalens trietilamin bázist (210 l, 1,50 mmol) és trimetilszilil-acetilént (138 l, 1,00 mmol) csepegtetünk hozzá. A reakcióelegyet 20 percig, 60 C-on, mikrohullámú reaktorban reagáltatjuk. Az átalakulást vékonyréteg-kromatográfiásan ellenőrizzük, majd 1 ekvivalens tetrabutil-ammónium-fluoridot (145 l, 0,50 mmol) csepegtetünk hozzá. 5 perc szobahőmérsékletű kevertetés után 5 mol% CuI katalizátort (5 mg, 0,025 mmol) és 1 ekvivalens benzil-azidot adunk hozzá, majd újra 20 percig, 60 C-on reagáltatjuk mikrohullámú reaktorban. A reakcióelegyet közvetlenül szilikagélre párolva, szilikagél oszlopon, 15% EtOAc/85% hexán eluenssel tisztítjuk. 7.8.2. A 3-metoxi-13 -ösztron 2-halogenidjeinek (55a és 152a) átalakítása A-módszer: A jódvegyülethez (55a, 205 mg, 0,50 mmol) hozzáadunk 5 mol% Pd(PPh 3 ) 2 Cl 2 katalizátort (17 mg, 0,025 mmol), 6 ekvivalens 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktán bázist (336 mg, 3,00 mmol), 3 ml acetonitrilt és a trimetilszilil-acetilént (138 l, 1,00 mmol). A reakcióelegyet 100 C-on, 10 percig reagáltatjuk mikrohullámú reaktorban. Az átalakulást vékonyréteg-kromatográfiásan ellenőrizzük, majd 1 ekvivalens tetrabutil-ammóniumfluoridot (145 l, 0,50 mmol) csepegtetünk hozzá. 5 perc szobahőmérsékletű kevertetés után 5 mol% CuI katalizátort (5 mg, 0,025 mmol) és 1 ekvivalens benzil-azidot adunk hozzá, majd újabb 10 percig, 120 C-on reagáltatjuk a reaktorban. A reakcióelegyet közvetlenül szilikagélre párolva, szilikagél oszlopon, 15% EtOAc/85% hexán eluenssel tisztítjuk. 98

B-módszer: A brómszármazékhoz (152a, 181 mg, 0,50 mmol) hozzáadunk 5 mol% Pd(OAc) 2 katalizátort (6 mg, 0,025 mmol) és 2 mol% catacxium A ligandumot (4 mg, 0,01 mmol). Miután feloldottuk 3 ml acetonitrilben, trietilamin bázist (210 l, 1,50 mmol) és trimetilszililacetilént (138 l, 1,00 mmol) csepegtetünk hozzá. A reakcióelegyet 100 C-on, 20 percig reagáltatjuk mikrohullámú reaktorban. Az átalakulást vékonyréteg-kromatográfiásan ellenőrizzük, majd 1 ekvivalens tetrabutil-ammónium-fluoridot (145 l, 0,50 mmol) csepegtetünk hozzá. 5 perc szobahőmérsékletű kevertetés után 5 mol% CuI katalizátort (5 mg, 0,025 mmol) és 1 ekvivalens benzil-azidot adunk hozzá, majd újabb 10 percig, 120 C-on reagáltatjuk a reaktorban. A reakcióelegyeket közvetlenül szilikagélre párolva, szilikagél oszlopon, 15% EtOAc/85% hexán eluenssel tisztítjuk. 99

8. Összefoglalás* Kutatásunk során antitumor hatású ösztron származékokat állítottunk elő, az ösztron vázmódosítását követő Cu(I)-katalizált azid-alkin cikloaddíciós reakciókkal és Sonogashira keresztkapcsolással. Első lépésként a kiindulási 3-benziloxi-14 -(prop-2-enil)-des-d-ösztra- 1,3,5(10)-trién-13 -karbaldehidet (1) és 13-epimerét (2) karbonsavvá (3, 4), alkohollá (5, 6), ill. oximmá (7, 8) alakítottuk (I. ábra). Az így nyert alapvegyületeket a továbbiakban három ponton módosítottuk: a 3-benzil-éter védőcsoportot eltávolítottuk (9 14), a hidroxil funkciókat észteresítettük, ill. éteresítettük, és telítettük a 14-(prop-2-enil)-oldalláncot. I. ábra Az előállított 13-epimer D-szekoalkoholok és -oximok (9 14), továbbá az intakt D-gyűrűs 13 -ösztron (15) fenolos hidroxilcsoportját propargil-bromiddal éteresítettük (II. ábra), így kemo- és regioszelektíven különböző 3-propargil-étereket (16 20, A-alkin ) nyertünk. A 3-védett D-szekokarbonsavakból (3, 4) propargil-aminnal és peptidkémiai kapcsolószerekkel: HBTU és HOBt 1:1 arányú keverékével képeztünk savamid-származékokat (21, 22, Dalkin, II. ábra). A különböző vázszerkezetű A- és D-alkineket (16 22) (9 db) szubsztituálatlan, vagy p-helyzetben szubsztituált benzil-aziddal, továbbá szteroid azidokkal is Cu(I)-katalizált azid-alkin click -reakcióban (CuAAC) reagáltattuk (II. ábra). A cikloaddíciók olyan konjugátumokat eredményeztek, amelyekben az aromás A- (23 27) vagy a nyitott D-gyűrűhöz (28, 29) kapcsolódik a benzil (a e) vagy a 13-epi-ösztron (f, g) szerkezet triazol linkeren keresztül (47 db). Katalizátorként réz(i)-jodidot, ligandumként * A vegyületek számozása független a disszertációban alkalmazottól. 100

trifenilfoszfánt alkalmaztunk. A reakciók minden esetben az anguláris metilcsoport térállásától, az alkin funkció helyzetétől és az azid partner minőségétől függetlenül, regioszelektíven, kiváló hozammal szolgáltatták a várt céltermékeket. II. ábra Kutatásunk folytatásában kidolgoztunk egy hatékony eljárást a 13 -sorbeli D- szekoalkoholok és -oximok aromás A-gyűrűjének jódozására (III. ábra). A hidroxil funkciókon észteresített (30a, b), ill. 3-metil-éter (30c) és 3-hidroxi-származékokat (11, 13) N-jód-szukcinimiddel, trifluorecetsavban reagáltatva, regioizomer jódvegyületek (31 35) keverékét kaptuk (11 db). Megállapítottuk, hogy a 2- és 4-jód regioizomerek aránya a 3-as helyzetű funkciós csoport (OAc, OMe, OH) kémiai minőségétől függ. A reakciók kemoszelektíven és a 3-védett származékok esetében (30) (OAc, OMe) regioszelektíven (31:32=3:1) játszódtak le. Főtermékként minden esetben a 2-jódvegyület (31, 33) képződött. III. ábra 101

A 2,4-biszjód származék (35) keletkezését csak a szabad fenolos OH jelenlétében tapasztaltuk (33:34:35=2:1:1). Ezt követően az így nyert jódozott D-szekoösztronok fenilacetilénnel történő konjugálására hatékony mikrohullámú Sonogashira kapcsolási eljárást dolgoztunk ki (IV. ábra). A 3-as helyzetben lévő csoport kémiai minősége és a jód helyzete döntően befolyásolta a reakciókörülményeket. A diacetátok jódszármazékaiból (31a,b; 32b), ill. a sztérikusan gátoltabb 4-jód-3-metoxi-D-szekooximból (34b) kiindulva az erélyesebb Pd(OAc) 2 katalizátor és catacxium A ligandum alkalmazásával, trietilamin jelenlétében nyertük a 2-, ill. 4-(fenetinil)-termékeket (36, 37, 41, 42, 11 db). Az oxim funkció (31b, 32b) azonban a 3 ekvivalensnyi bázis és a 100 C-os hőmérséklet hatására dezacetileződőtt és vízvesztéssel nitrillé (37, 41) alakult. A továbbiakban ezt a hőmérséklet 100 C-ról 60 C-ra történő csökkentésével és 30 helyett 20 perces MW-besugárzással küszöböltük ki. A D- szekoalkohol diacetátjának (31a) esetében sem dezacetileződést, sem egyéb szteroid jellegű melléktermék keletkezését nem tapasztaltuk. A 3-metil-éter-oxim (31c), ill. a 3-hidroxi származékok 2-jód izomereiből (33a,b) ugyanezen hőmérsékleten és idő alatt, Pd(PPh 3 ) 4 katalizátor és CuI segédkatalizátor alkalmazásával, tetrahidrofuránban nyertük kiváló hozammal a céltermékeket (38 40, 15 db, IV. ábra). A legjobb konverziót minden alapváz esetében a p-helyzetben elektronküldő szubsztituenst tartalmazó fenilacetilénekkel értük el. IV. ábra Munkám utolsó részében a Sonogashira kapcsolás és a click -reakció egymást követő, one-pot megvalósítására dolgoztunk ki mikrohullámú módszert, szteroid modellen (V. ábra). Első lépésként trimetilszilil-acetilénnel TMS-etinilcsoportot építettünk be a 2-es helyzetbe. A 3-metoxi- és 3-hidroxi-D-szekooxim (31c, 33b), ill. a 3-hidroxi-13 -ösztron 102

(44) 2-jód vegyülete a fenilacetilénekkel megegyező körülmények között reagált az alifás acetilénnel. A Sonogashira kapcsolást a 13 -ösztron 3-metil-éterének 2-jód és 2-bróm vegyületéből (43a, b) kiindulva is megvalósítottuk (V. ábra). A reaktívabb 2-jód-származék (43a) réz és amin mentes közegben: Pd(PPh 3 ) 2 Cl 2 katalizátor és DABCO jelenlétében alakult a várt termékké. A kevésbé reaktív 2-bróm vegyületből (43b) Pd(OAc) 2 katalizátor és catacxium A ligandum alkalmazásával, NEt 3 bázissal nyertük ugyanazt a köztiterméket. A 2- (TMS-etinil) intermediert minden esetben izolálás nélkül alakítottuk tovább, a szilil védőcsoport lehasítását követő CuAAC-reakcióval. A megfelelő 2-triazolil-származékokat (45 48, 14 db) sztereoszelektíven, szteroid jellegű melléktermék képződése nélkül, rövid idő alatt, jó-kiváló hozammal kaptuk (V. ábra). V. ábra Az előállított vegyületek sejtosztódás gátló hatását az SZTE GYTK Gyógyszerhatástani és Biofarmáciai Intézetében vizsgálták in vitro MTT-módszerrel, humán adherens tumorsejtvonalakon. Az eredmények alapján megállapítottuk, hogy a biológiai aktivitást döntően befolyásolja az anguláris metilcsoport térállása és a 3-as, ill. 17-es helyzetben lévő csoport kémiai minősége. A D-szeko-származékoknál (I) a 13-as metilcsoport -térállása és a fenolos OH éteresítése előnyös az antiproliferatív hatás szempontjából (VI. ábra, piros). A vegyületek sejtosztódás gátló képességét a triazol egységnek az A-, ill. nyitott D-gyűrűre történő beépítésével (23 26, 28, 29: a e) minden esetben tovább tudtuk javítani. A legpotensebb konjugátumok a szubsztituálatlan (23a 26a, 28ba), ill. kis térkitöltésű alkil csoporttal szubsztituált click -termékek (23 26, 28b: b és c), amelyek alacsony, szubmikromólos IC 50 értéket mutatnak. Az intakt D-gyűrűs 13 -ösztron-3-oh és 3-éter alapvegyületek (II) a nyitott D-gyűrűsektől (I) eltérően viselkednek, az éteresítés nem javított a biológiai aktivitáson (VI. ábra, piros). A benzilaziddal történő konjugálás (27) ebben az esetben is fokozta a vegyületek sejtosztódás gátló képességét. Továbbá megállapítottuk, hogy 103

a 17-es helyzetben oxigén tartalmú funkciós csoport jelenléte szükséges az anitproliferatív hatás kifejtéséhez. A heterodimerek (23, 25, 27 29: f és g) biológiai aktivitását legnagyobb mértékben a triazol egység és a hidroxilcsoport térállása befolyásolja (VI. ábra, piros). A diasztereomer párok közül csak a 16,17 -izomerek (23f, 25f, 27f 29f) fejtettek ki jelentős sejtosztódás gátló hatást, ami a D+A típusú dimereknél (23f, 25f, 27f) volt a legkifejezettebb. A kiválasztott vegyületek 17 -HSD1 enzim gátló hatását az SZTE ÁOK I. sz. Belgyógyászati Klinikájának endokrin laboratóriumában vizsgálták in vitro radioszubsztrát inkubációs módszerrel. A 3-as helyzetben különböző csoportot tartalmazó származékok inhibitor hatását összehasonlítva arra jutottunk, hogy a 13 - és 13 -ösztron sorban egyaránt a fenolos hidroxilcsoport jelenléte a legkedvezőbb (I, VI. ábra, kék). A 3-metil-éterek viszonylag jó gátlónak bizonyultak, míg a 3-benzil-éter védőcsoport teljesen visszaszorította az inhibitor hatást. A 13-epimer D-szekoösztronokra (I) kapott eredmények arra utalnak, hogy a gátló hatás szempontjából a β-térállású anguláris metilcsoport jelenléte kedvező. Az aromás gyűrű jódozása a 13β-D-szekooxim (11) és a 13β-D-szekoalkohol (13) alapvegyületek gátló hatását ellentétes irányban befolyásolta: az oximnál (33b, 34b) hátrányosnak, míg az alkoholnál (33a) előnyösnek bizonyult (VI. ábra, kék). A fenetinil-származékok (36 42) eredményeit összevetve megállapítottuk, hogy csak a 2-es helyzetben konjugált 3-hidroxioximok (40) rendelkeznek alacsony, szubmikromólos IC 50 értékkel. A benziltriazolil-egység 2-es helyzetbe történő beépítése szintén jelentős inhibitor hatást eredményezett a 3-hidroxi-Dszekooxim sorban (46). Azonban ezekkel az átalakításokkal nem tudtuk tovább javítani az alapvegyületek esetenként nanomólos tartományba eső enzimgátló képességét. VI. ábra 104

9. Summary* In the present study we synthesized potential antitumoral estrone derivatives through modifications of the estrane skeleton followed by Cu(I)-catalyzed azide-alkyne cycloaddition reactions (CuAAC) and Sonogashira cross couplings. Firstly the starting 3-benzyloxy-14 - (prop-2-en-yl)-des-d-estra-1,3,5(10)-trien-13 -carbaldehyde (1) and its 13-epimer (2) were transformed into carboxylic acids (3, 4), into alcohols (5, 6) or into oximes (7, 8) (Scheme I). The resulting compounds (3 8) were further modified at three sites in the molecules: the 3- benzyl protecting group was removed (9 14), the hydroxyl functions were esterified or etherified, and the 14-(prop-2-en-yl) sidechain was saturated. Scheme I The phenolic hydroxyl groups of the prepared 13-epimeric D-secoalcohols or -oximes (11 14) or of the 13 -estrone with intact ring D (15) were chemo- and regioselectively transformed into propargyl ethers (16 20, A-alkynes ) with propargyl bromide (Scheme II). The terminal alkyne function (21, 22, D-alkynes ) was introduced onto the opened ring D through a carboxamido group starting from the 3-protected D-secocarboxylic acids (3, 4) and propargyl amine, using peptide coupling agents: the 1:1 mixture of HBTU and HOBt (Scheme II). The A- or D-akynes (16 22, 9 compounds) were reacted not only with unsubstituted or p-substituted benzyl azides, but with steroidal azides too, via CuAACs (Scheme II). The cycloadditions resulted in conjugates, where the N-benzyl (a e) or 13 -estrone (f, g) moiety is coupled to the aromatic ring (23 27) or to the opened ring D (28, 29) through a triazolyl * The numbering of the molecules is independent from the numbering used in dissertation. 105

linker. Cu(I)-iodide was used as a catalyst and triphenylphosphine as an accelerating ligand. All the reactions led to the desired products (47 compounds) regioselectively. Neither the orientation of the angular methyl group, nor the position of the alkyne function or the nature of the azide partner influenced the course of the reactions. Scheme II In continuation of our work we worked out an efficient method for the iodination of the aromatic ring A of 13 -D-secoalcohols or -oximes (Scheme III). The appropriate derivatives (11, 13, 30) were transformed with N-iodosuccinimide in trifluoroacetic acid solvent which resulted in the mixture of regioisomeric iodo compounds (31 35, 11 compounds). The ratio of the 2- and 4-iodo regioisomers depended on the nature of the functional group at C-3. The reactions proceeded chemoselectively and in the case of 3- protected derivatives (30) regioselectively (31:32=3:1). The major compound was the 2-iodo isomer (31, 33) in each reaction. Scheme III 106

The formation of the 2,4-bisiodo compound (35) was observed only in the presence of phenolic OH (33:34:35=2:1:1). After that we developed an efficient microwave-assisted method for the Sonogashira coupling of the prepared iodinated D-seco-compounds and phenyl acetylenes (Scheme IV). The reaction conditions were greatly influenced by the nature of the functional group at C-3 and the position of the iodine. Couplings of the iodo derivatives of the diacetates (31a,b; 32b) or of the sterically hindered 4-iodo-3-methoxy-D-secooxime (34b) resulted in the 2- or 4-(phenethynyl)-products (36, 37, 41, 42, 11 db) using Pd(OAc) 2 as catalyst and catacxium A as ligand, in the presence of NEt 3. Unfortunately the 3 equiv. of the base and the high temperature led to the deacetylation and water elimination of the oxime function (31b, 32b) resulting in a D-seconitrile (37, 41). After further optimization, this side reaction was avoided by the reduction of the temperature and by shorter MW-irradiation. The 2-iodo derivative of D-secoalcohol diacetate (31a) was reacted without formation of any steroidal side-products. The 2-iodo isomers of the 3-methyl ether oxime (31c) and of the 3- hydroxy D-secoestrones (33a, b) were efficiently transformed under the same lowered temperature and shortened reaction time, using Pd(PPh 3 ) 4 as catalyst and CuI co-catalyst in tetrahydrofuran, in excellent yields (38 40, 15 compounds, Scheme IV). The best conversions were achieved using phenyl acetylenes bearing an electron withdrawing group at p-position. Scheme IV Finally, we developed a microwave-assisted method for a step-by-step, one-pot Sonogashira-CuAAC-reaction, on a steroid model (Scheme V). As first step we introduced a TMS-ethynyl group into C-2. The 2-iodo derivatives of 3-methoxy- and 3-hydroxy-Dsecooximes (31c, 33b) and 3-hydroxy-13 -estrone (44) reacted with trimethylsilyl acetylene 107

under the same conditions as it was established for phenyl acetylenes. The coupling reaction of the 3-methoxy-13 -estrone was achieved from its 2-iodo and 2-bromo compound (43a, b) too (Scheme V). Different Sonogashira reaction conditions were established depending on the nature of the starting halogenide. The more reactive 2-iodo derivative (43a) was efficiently transformed into the desired Sonogashira product under copper and amine free conditions: using Pd(PPh 3 ) 2 Cl 2 as catalyst in the presence of DABCO. The less reactive 2-bromo steroid (43b) furnished the same intermediate using Pd(OAc) 2 as catalyst and catacxium A as ligand, in the presence of NEt 3. The 2-(TMS-ethynyl) intermediate was further transformed without isolation, after desilylation followed by CuAAC-reaction. The appropriate 2-triazolyl derivatives (45 48, 14 compounds, Scheme V) were accomplished stereoselectively, without steroidal side-product, under short reaction time, in good-excellent yield. Scheme V The antiproliferative effect of the synthesized compounds was investigated in vitro on human adherent cancer cell lines by means of MTT assay at the Institute of Pharmacodinamics and Biopharmacy. From the results we established that the biological activity greatly influenced by the orientation of the angular methyl group and by the nature of the substituent at C-3 and C-17. In the D-seco series the -orientation of the 13-methyl group and the etherification of the phenolic OH are favourable in point of cell growth inhibition (I, Scheme VI, red). The incorporation of the triazol moiety into the A or opened ring D (23 26, 28, 29: a e) improved the biological activity of the compounds. The most potent conjugates were those that bearing unsubsituted N-benzyl group (23a, 25a, 28ba) or less bulky alkyl substituent on the benzyl ring (23, 25, 28b: b and c). These compounds exerted low or submicromolar IC 50 values. Conserning the antiproliferative behavior of the 13 -estrone derivatives bearing intact ring D (II), the etherification of the phenolic OH-group seemed to be disadvantageous (Scheme VI, red). The conjugation with benzylazide (27) improved the 108

cell growth inhibitory potential of the steroids. Furthermore it can be stated that the presence of an oxygene-containing functionality at C-17 is essential for the antiproliferative activity. The biological activity of the heterodimers (23, 25, 27 29: f and g) was greatly influenced by the orientation of the triazolyl and hydroxyl moiety. Only the 16,17 -isomers (23f, 25f, 27f 29f) exerted significant cell growth inhibition in the diastereomer series, which was the most outstanding in case of D+A type estrone dimers (23f, 25f, 27f) (Scheme VI, red). The 17 -HSD1 enzyme inhibitory potential of the chosen compounds was investigated in vitro by radiosubstrate incubation method at the Endocrine Laboratory of the 1 st Department of Medicine. Concerning the relative conversion values obtained for the derivatives bearing different substituent at C-3, some valuable structure-activity relationships appeared. It can be stated that the presence of the 3-OH function is the most favorable in both the 13 - and 13 -estrone series (I, Scheme VI, blue). The 3-methyl ethers proved to be relatively good inhibitors, while the protection with benzyl group absolutely decreased the inhibitory potential of the estrone derivatives. In the D-secoestrone series, the 13 -epimers (I) are more potent inhibitors than their 13 -counterparts. The iodinated D-secooximes (33b, 34b) inhibited the enzymatic reaction with higher IC 50 values, while the 2-iodo secoalcohol (33a) proved to be more potent than its non-iodinated counterpart (11) (Scheme VI, blue). Comparing the results of 2- and 4-phenethynyl derivatives (36 42) we established that only the 3-hydroxy oximes conjugated at C-2 (40) displayed low or submicromolar IC 50 values. The introduction of the benzyltriazolyl moiety to position 2 led to moderate enzyme inhibitory effect in the D-secooxime (46) 3-hydroxy series. However we could not further improve the enzyme inhibitory potential of the basic compounds with these transformations. Scheme VI 109

10. Irodalomjegyzék 1. Maltais, R.; Poirier, D. Steroids 2011, 76, 929. 2. Minorics, R.; Bózsity, N.; Wölfling, J.; et al. J Steroid Biochem Mol Biol 2012, 132, 168. 3. Penov Gasi, K.; Sakac, M.; Jovanovic-Santa, S.; et al. Curr Org Chem, 2014, 18, 216. 4. Newman, D.J.; Cragg, G.M. RSC 2011, 320, 3. 5. Gupta, A.; Kumar, S.B.; Negi, A.S. J Steroid Biochem Mol Biol 2013, 137, 242. 6. Cushman, M.; He, H.M; Katzenellenbogen, J.A.; et al. J Med Chem 1997, 40, 2323. 7. Wang. Z.; Yang, D.; Mohanakrishnan, A.K.; et al. J Med Chem 2000, 43, 2419. 8. Bérubé, G.; Rabouin, D.; Perron, V.; et al. Steroids 2006, 71, 911. 9. Saxena, H.O.; Faridi U.; Kumar, J.K.; et al. Steroids 2007, 72, 892. 10. Bunyathaworn, P.; Boonananwong, S.; Kongkathip, B.; et al. Steroids 2010, 75, 432. 11. Schobert, R.; Seibt, S.; Effenberger-Neidnicht, K.; et al. Steroids 2011, 76, 393. 12. Billich, A.; Nussbaumer, P.; Lehr, P. J Steroid Biochem Mol Biol 2000, 73, 225. 13. Ishida, H.; Nakata, T.; Suzuki, M.; et al. Breast Cancer Res Treatm 2007, 106, 215. 14. Jourdan, F.; Leese, M.P.; Dohle, W.; et al. J Med Chem 2008, 51, 1295. 15. Numazawa, M.; Ando, M.; Watari, Y.; et al. J Steroid Biochem Mol Biol 2005, 96, 51. 16. Cadot, C.; Laplante, Y.; Kamal, F.; et al. Bioorg Med Chem 2007, 15, 714. 17. Lawrence, H.; Vicker, H.; Allan, N.; et al. J Med Chem 2005, 48, 2759. 18. Poirier, D.; Boivin, R.P.; Tremblay, M.R.; et al. J Med Chem 2005, 48, 8134. 19. Husen, B.; Huhtinen, K.; Saloniemi, T.; et al. Endocrinol 2006, 147, 5333. 20. Deluka, D.; Möller, G.; Rosinus, A.; et al. Mol Cell Endocrinol 2006, 248, 218. 21. Allan, G.M.; Bubert, C.; Vicker, N.; et al. Mol Cell Endocrinol 2006, 248, 204. 22. Poirier, D.; Chang, H.J.; Azzi, A.; et al. Mol Cell Endocrinol 2006, 248, 236. 23. Möller, G.; Deluca, D.; Gege, C.; et al. Bioorg Med Chem Lett 2009, 19, 6740. 24. Poirier, D. J Steroid Biochem Mol Biol, 2011, 125, 83. 25. Brozic, P.; Rizner, T.; Lanisnik; Gobec, S. Current Med Chem 2008, 15, 137. 110

26. Lin, S-X.; Chen, J.; Mazumdar, M.; et al. Nat Rev Endocrinol 2010, 6, 485. 27. Butenandt, A.; Wolff, A.; Karlson, P. Ber Dtsch Chem Ges 1941, 74, 1308. 28. Yaremenko, F.G.; Khvat, A.V. Mendeleev Commun 1994, 4, 187. 29. Schönecker, B.; Lange, C.; Kötteritzsch, M.; et al. J Org Chem 2000, 65, 5487. 30. Ayan, D.; Roy, J.; Maltais, R.; Poirier, D. J Steroid Biochem Mol Biol 2011, 127, 324. 31. Berényi, Á.; Minorics, R.; Iványi, Z.; et al. Steroids 2013, 78, 69. 32. Wölfling, J.; Mernyák, E.; Forgó, P.; Schneider, G. Steroids, 2003, 68, 451. 33. Schneider, G.; Hackler, L.; Sohár, P. Liebigs Ann Chem 1988, 679. 34. Schneider, G.; Bottka, S.; Hackler, L.; et al. Liebigs Ann Chem, 1989, 263. 35. Wölfling, J.; Mernyák, E.; Forgó, P.; Schneider, G. Steroids 2003, 68, 451. 36. Mernyák, E.; Wölfling, J.; Bunkóczi, G.; et al. Collect Czech Chem Commun 2003, 68, 1141. 37. Grob, C.A.; Schiess, P.W. Angew Chem 1967, 79, 1. 38. Adam, G.; Schreiber, K. Liebigs Ann Chem 1967, 191. 39. Appel, R.; Halstenberg, M. In Organophosphorus Reagents In Organic Synthesis; Cadogan, J.I.G., Ed.; Academic: London, 1979, p. 378. 40. Frank, É.; Mernyák, E.; Wölfling, J.; Schneider, G. Synlett 2002, 11, 1803. 41. Frank, É.; Wölfling, J.; Aukszi, B.; et al. Tetrahedron 2002, 58, 6843. 42. Mernyák, E.; Benedek, G.; Schneider, G.; Wölfling, J. Synlett 2005, 637. 43. Wölfling, J.; Mernyák, E.; Frank, É.; et al. Steroids 2003, 68, 277. 44. Mernyák, E.; Huber, J.; Szabó, J.; et al. Steroids 2013, 78, 1021. 45. Jovanovic-Santa, S.; Petrovic, J.; Andric, S.; et al. Bioorg Chem 2003, 31, 475. 46. Penov Gasi, K.M.; Miljkovic, D.A.; Medic Mijacevic L.D.; et al. Steroids 2003, 68, 667. 47. Jovanovic-Santa, S.; Andric, S.; Kovacevic, R.; et al. Coll Czech Chem Commun 2000, 65, 77. 48. Petrovic J.A.; Stepic, T.Z.; Pejanovic, V.M.; et al. J Serb Chem Soc 1998, 63, 113. 49. Petrovic, J.A.; Pejanovic, V.M.; Miljkovic, D.A.; et al. Steroids 1990, 55, 276. 50. Emmens CW. Hormone assay. New York: Academic Press; 1950. 111

51. Jovanovic-Santa, S.; Petri, E.T.; Klisuric, O.R.; et al. Steroids 2015, 97, 45. 52. Nikolic, A.R.; Petri, E.T.; Klisuric, O.R.; et al. Bioorg Med Chem 2015, 23, 703. 53. Eglen R.M. Assay Drug Dev Technol 2002, 1, 97. 54. Kolb, H.C.; Finn, M.G.; Sharpless, K.B. Angew Chem Int Ed 2001, 40, 2004. 55. Huisgen, R. Angew Chem Int Ed 1963, 2, 565. 56. Rostovtsev, V.V.; Green, L.G.; Fokin, V.V.; et al. Angew Chem Int Ed 2002, 41, 2596. 57. Tornøe, C.W.; Christiensen, C.; Meldal, M. J Org Chem 2002, 67, 3057. 58. Himo, F.; Lovell, T.; Hilgraf, R.; et al. J Am Chem Soc 2005, 1, 210. 59. Liang, L.; Astruc, D. Coord Chem Rev 2011, 255, 2933. 60. Meldal, M.; Tornoe, C.W. Chem Rev 2008, 108, 2952. 61. Tornøe, C.W.; Sanderson, S.J.; Mottram, J.C.; et al. J Comb Chem 2004, 6, 312. 62. Pedersen, D.S.; Abell, A. Eur J Org Chem 2011, 2399. 63. Kovács, D.; Kádár, Z.; Mótyán, G.; et al. Steroids 2012, 77, 1075. 64. Frank, É.; Molnár, J.; Zupkó, I.; et al. Steroids 2011, 76, 1141. 65. Kádár, Z.; Frank, É.; Schneider, G.; et al. Arkivoc 2012, (iii), 279. 66. Kádár, Z.; Kovács, D.; Frank, É.; et al. Molecules 2011, 16, 4786. 67. Kádár, Z.; Molnár, J.; Schneider, G.; et al. Bioorg Med Chem 2012, 20, 1396. 68. Kádár, Z.; Baji, Á.; Zupkó, I.; et al. Org Biomol Chem 2011, 9, 8051. 69. Mernyák, E.; Kovács, I.; Minorics, R.; et al. J Steroid Biochem Mol Biol 2015, 150, 123. 70. Schneider, G.; Mernyák, E.; Wölfling, J.; et al. Steroids 2015, 98, 153. 71. Molnar, J.; Frank, É.; Minorics, R.; et al. PLoS ONE 2015, 10, e0118104/1. 72. Feher, K.; Balogh, J.; Csok, Zs.; et al. Steroids 2012, 77, 738. 73. Messinger, J.; Schoen, U.; Husen, B.; et al. (2008) WO 2008034796 A2 20080327. 74. Marchais-Oberwinkler, S.; Henn, C.; Möller, G.; et al. J Steroid Biochem Mol Biol 2011, 125, 66. 75. Mernyák E.; Schönecker B.; Lange C.; et al. Steroids 2003, 68, 289. 76. Lipshutz, B.H.; Taft, B.R. Angew Chem Int Ed 2006, 45, 8235. 112

77. Alonso, F.; Moglie, Y.; Radivoy, G.; Yus, M. Tetrahedron Lett 2009, 50, 2358. 78. Montenegro, H.E.; Ramirez-Lopez, P.; de la Torre, M.C.; et al. Chem Eur J 2010, 16, 3798. 79. Buzby Jr., G.C.; Edgren, R.A.; Fisher, J.A.; et al. J Med Chem 1964, 7, 755. 80. Fisher, J.F.; Smith, L.L (1966) US 3264288 19660802. 81. Ramirez-Lopez, P.; de la Torre, M.C.; Montenegro, H.E.; et al. Org Lett 2008, 10, 3555. 82. Ramirez-Lopez, P.; de la Torre, M.C.; Asenjo, M.; et al. Chem Commun 2011, 47, 10281. 83. Alonso, F.; Moglie, Y.; Radivoy, G.; Yus, M. Heterocycles 2012, 84, 1033. 84. Jurasek, M.; Dzubak, P.; Sedlak, D.; Dvorakova, H.; et al. Steroids 2013, 78, 356. 85. Sonogashira, K.; Tohda, Y.; Hagihara, N. Tetrahedron Lett 1975, 4467. 86. Fauvarque, F.; Pflueger, F.; Troupel, M. J Organomet Chem 1981, 208, 419. 87. Miyaura, N.; Suzuki, A. Chem Rev 1995, 95, 2457. 88. Stanforth, S.P. Tetrahedron 1998, 54, 263. 89. Kotha, S.; Lahiri, K.; Kashinath, D. Tetrahedron 2002, 58, 9633. 90. Miyaura, N. Top Curr Chem 2002, 219, 11. 91. Bellina, F.; Carpita, A.; Rossi, R. Synthesis 2004, 15, 2419. 92. Stille, J.K.; Lau, K.S.Y. Acc Chem Res 1977, 434. 93. Casado, A.L.; Espiet, P. J Am Chem Soc 1998, 120, 8978. 94. Cotter, W.D.; Barbour, L.; McNamara, K.L.; et al. J Am Chem Soc 1998, 120, 11016. 95. Gillie, A.; Stille, J.K. J Am Chem Soc 1980, 102, 4933. 96. Ozawa, F.; Ito, T.; Nakamura, Y.; Yamamoto, A. Bull Chem Soc Jpn 1981, 54, 1868. 97. Christmann, U.; Vilar, R. Angew Chem Int Ed 2005, 44, 366. 98. Galardon, E.; Ramdeehul, S.; Brown, J.M.; et al. Angew Chem 2002, 114, 1838. 99. Strieter, E.R.; Blackmond, D.G.; Buchwald, S.L. J Am Chem Soc 2003, 125, 13978. 100. Borsodiné Komáromi Anna, Doktori értekezés, ELTE, 2010. 101. van Leeuwen, P.W.N.M.; Kamer, P.C.J.; Reek, J.N.S.; et al. Chem Rev 2000, 100, 2741. 102. Tolman, C.A. Chem Rev 1977, 77, 313. 113

103. Wei, C.S.; Davies, G.H.M.; Soltani, O.; et al. Angew Chem Int Ed 2013, 52, 5822. 104. Wolfe, J.P.; Singer, A.R.; Yang, H.B.; Buchwald, S.L. J Am Chem Soc 1999, 121, 9550. 105. Aranyos, A.; Old, D.W.; Kiyomori, A.; et al. J Am Chem Soc 1999, 121, 4369. 106. Wolfe, J.P.; Wagaw, S.; Marcoux, J-F.; Buchwald, S. L. Acc Chem Res 1998, 31, 805. 107. Littke, A.F.; Fu, G.C. Angew Chem Int Ed 2002, 41, 4176. 108. Zapf, A.; Ehrentraut, A.; Beller, M. Angew Chem Int Ed 2000, 39, 4153. 109. Glaser, C. Ber Dtsch Chem Ges 1869, 2, 422 110. Ljungdahl, T.; Pettersson, K.; Albisson, B.; Martensson, J. J Org Chem 2006, 71, 1677. 111. Yi, C.; Hua, R. Cat Commun 2006, 7, 377. 112. Liang, B.; Dai, M.; Chen, J.; Yang, Z. J Org Chem 2005, 70, 391. 113. Shi, S.; Zhang, Y. Synlett 2007, 1843. 114. Guan, J.T.; Weng, T.Q.; Yu, G.-A.; Liu, S.H. Tetrahedron Lett 2007, 7129. 115. de Lima, P.G.; Antunes, O.A.C. Tetrahedron Lett 2008, 49, 2506. 116. Soheili, A.; Albaneze-Walker, J.; Murry, J.A.; et al. Org Lett 2003, 5, 4191. 117. Tougerti, A.; Negri, S.; Jutand, A. Chem Eur J 2007, 13, 666. 118. Mizoroki, T.; Mori, K.; Ozaki, A. Bull Chem Soc Jpn 1971, 44, 581. 119. Heck, R.F. J Am Chem Soc 1968, 90, 5518. 120. Heck, R.F.; Nolley, J.P. J Org Chem 1972, 37, 2320. 121. Heck, R.F. Acc Chem Res 1979, 12, 146. 122. Jutand, A.; Negri, S.; Principaud, A. Eur J Inorg Chem 2005, 631. 123. Ljungdahl, T.; Bennur, T.; Dallas, A.; et al. Organometallics 2008, 27, 2490. 124. Mingzhong, C.; Quihua, X.; Junchao, S. J Mol Cat 2007, 272, 293. 125. Wüst, F.; Zessin, J.; Johannsen, B. J Label Compd Radiopharm 2003, 46, 333. 126. Ferber, B.; Top, S.; Jaouen, G. J Organomet Chem 2004, 689, 4872. 127. Ramesh, C.; Bryant, B.; Nayak, T.; et al. J Am Chem Soc 2006, 128, 14476. 128. Manosroi, J.; Rueanto, K.; Boonpisuttinant, K.; et al. J Med Chem 2010, 53, 3937. 114

129. Pchelintseva, A.A.; Skorobogatyi, M.V.; Petrunina, A.L.; et al. Nucleosides, Nucleotides & Nucleic Acids 2005, 24, 923. 130. Skorobogatyi, M.V.; Pchelintseva, A.A.; Petrunina, A.L.; et al. Tetrahedron 2006, 62, 1279. 131. Bérubé, M.; Poirier, D. Org Lett 2004, 6, 3127. 132. Bérubé, M.; Poirier, D. Can J Chem 2009, 87, 1180. 133. Ghosh, D.; Pletnev, V.Z.; Zhu, D.W.; Wawrzak, Z.; et al. Structure 1995, 3, 503. 134. Breton, R.; Housset, D.; Mazza, C.; Fontecilla-Camps, J.C. Structure 1996, 4, 905. 135. Hirvelae, L.; Kangas, L.; Koskimies, P.; et al. (2014) WO 2014207311 A1 20141231. 136. Messinger, J.; Schoen, U.; Thole, H.-H.; et al. (2008), US 20080146531 A1 20080619. 137. Hillisch, A.; Peters, O.; Gege, C.; Siemeister, G.; et al. (2011) US RE42132 E1. 138. Levesqe, C.; Merand, Y.; Dufour, J-M.; et al. J Med Chem 1991, 34, 1624. 139. Cui, J.; Zhou, A.; Fan, L.; Huang, L. (2008) CN 101245090 A 20080820. 140. Braekman, J-C.; Ingrassia, L.; Nshimyumukiza, P.; et al. (2005) WO 2005058934 A2 20050630. 141. Numazawa, M.; Tominaga, T.; Watari, Y.; Tada, Y. Steroids 2006, 71, 371. 142. Woo, L.W.L.; Leblond, B.; Purohit, A.; et al. Bioorg Med Chem 2012, 20, 2506. 143. Hillisch, A.; Regenhardt, W.; Gege, C.; et al. (2006) WO 2006003013 A2 20060112. 144. Dugar, S.; Mahajan, D.; Schreiner, G.F. (2016) WO 2016013030 A2 20160128. 145. Hillman-Elies, A.; Hillman, G.; Schiedt, U. Z Naturforsch 1953, 8b, 436. 146. Potter, B.V.L.; Reed, M.J.; Woo, L.W.L. (2003) WO 2003033518 A1. 147. Horiuchi, C.A.; Satoh, J.Y. J Chem Soc, Chem Commun 1982, 12, 671. 148. Numazawa, M.; Kimura, K.; Ogata, M.; Nagaoka, M. J Org Chem 1985, 50, 5421. 149. Slaga, T.J. Kumar, A.; Alworth, W. (2003) US 20030027803 A1. 150. Hasrat, A.; Ghaffari, M.A.; van Lier, J.E. J Steroid Biochem 1987, 28, 21. 151. Bulman Page, P.C.; Hussein, F.; Maggs, J.L.; et al. Tetrahedron 1990, 46, 2059. 152. Bauman, V.T; Shults, E.E.; Shakirov, M.M.; et al. Russian J Org Chem 2012, 48, 1473. 153. Bacsa, I.; Jójárt, R.; Schneider, G.; Wölfling, J.; et al. Steroids 2015, 104, 230. 115

154. Kappe, C.O. Angew Chem Int Ed 2004, 43, 6250. 155. Appukkuttan, P.; van der Eycken, E. Eur J Org Chem 2008, 1133. 156. Caddick, S.; Fitzmaurice, R. Tetrahedron 2009, 65, 3325. 157. Appukkuttan, P.; Mehta, V.P.; van der Eycken, E. Chem Soc Rev 2010, 39, 1467. 158. Mehta, V.P.; van der Eycken, E.V. Chem Soc Rev 2011, 40, 4925. 159. Huang, H.; Liu, H.; Jiang, H.; Chen, K. J Org Chem 2008, 73, 6037. 160. Sedelmeier, J.; Ley, S.V.; Lange, H.; Baxendale, I.R. Eur J Org Chem 2009, 4412. 161. Dahlén, K.; Wallén, E.A.A.; Grøtli, M.; Luthman, K. J Org Chem 2006, 71, 6863. 162. McCarroll, A.J.; Bradshaw, T.D.; Westwell, A.D.; et al. J Med Chem 2007, 50, 1707. 163. Appukkuttan, P.; Dehaen, W.; Fokin, V.V.; van der Eycken, E. Org Lett 2004, 6, 4223. 164. Ermolat ev, D.; Dehaen, W.; van der Eycken, E. QSAR CombSci 2004, 23, 915. 165. Guezguez, R.; Bougrin, K.; El Akri, K.; Benhida, R. Tetrahedron Lett 2006, 47, 4807. 166. Lucas, R.; Neto, V.; Bouazza, A.H.; Zerrouki, R.; et al. Tetrahedron Lett 2008, 49, 1004. 167. Pieters, R.J.; Rijkers, D.T.S.; Liskamp, R.M.J. QSAR Comb Sci 2007, 26, 1181. 168. Yoon, K.; Goyal, P.; Weck, M. Org Lett 2007, 9, 2051. 169. Joosten, J.A.F.; Tholen, N.T.H.; El Maate, F.A.; et al. Eur J Org Chem 2005, 3182. 170. Rijkers, D.T.S.; van Esse, G.W.; Merkx, R.; et al. Chem Commun 2005, 4581. 171. Bouillon, C.; Meyer, A.; Vidal, S.; Jochum, A.; et al. J Org Chem 2006, 71, 4700. 172. Langa, F.; de la Cruz, P.; de la Hoz, A.; Espildora, E.; et al. J Org Chem 2000, 65, 2499. 173. Delgado, J.L.; de la Cruz, P.; Langa, F.; Urbina, A.; et al. Chem Commun 2004, 1734. 174. Brunetti, F.G.; Herrero, M.A.; Munoz, J.D.M.; et al. J Am Chem Soc 2007, 129, 14580. 175. Ermolat ev, D.S.; Mehta, V.P.; van der Eycken, E. QSAR Comb Sci 2007, 26, 1266. 176. Keilitz, J.; Malik, H.A.; Lautens, M. Top Heterocycl Chem 2013, 32, 187. 177. Tietze, L.F.; Beifuss, U. Angew Chem Int Ed 1993, 32, 131. 178. Fogg, D.E.; dos Santos, E.N. Coord Chem Rev 2004, 248, 2365. 179. Friscourt, F.; Boons, G-J. Organic Letters 2010, 12, 4936. I. Mernyák, E.; Szabó, J.; Bacsa, I.; Huber, J.; et al. Steroids 2014, 87, 128. 116

II. Mernyák, E.; Fiser, G.; Szabó, J.; Bodnár, B.; et al. Steroids 2014, 89, 47. III. Szabó, J.; Jerkovics, N.; Schneider, G.; Wölfling, J.; et al. Molecules 2016, 21, 611. IV. Szabó, J.; Pataki, Z.; Wölfling, J.; Schneider, G.; et al. Steroids 2016, 113, 14. V. Szabó, J.; Bacsa, I.; Wölfling, J.; Schneider, G.; et al. J Enzyme Inhib Med Chem 2016, 31, 574. 180. Sheehan, J.C.; Hess, G.P. J Am Chem Soc 1955, 77, 1067. 181. Rich, D.H.; Singh, J. The carbodiimid method, in E. Gross, J. Meienhofer editors, The peptids: Analysis, Synthesis, Biology, Academid, New York, 1979, 1, 241. 182. Sheehan, J.C.; Cruickshank, P.A.; Boshart, G.L. J Org Chem 1961, 26, 2525. 183. Castro, B.; Dormoy, J.R.; Evin, G.; Castro, B. Tetrahedron Lett 1975, 1219. 184. Dourtoglou, V.; Ziegler, J.-C.; Gross, B. Tetrahedron Lett 1978, 1269. 185. Coste, J.; Frerot, E.; Jouin, P. J Org Chem 1994, 59, 2437. 186. Subiros-Funosas, R.; El-Faham, A.; Albericio, F. Org Biomol Chem 2010, 8, 3665. 187. El-Faham, A.; Funosas, R.S.; Prohens, R.; et al. Chem Eur J 2009, 15, 9404. 188. Shchukina, L.A.; Kara-Mouza, S.N.; Vdovina, R.G. Zh Obshch Khim 1959, 29, 340. 189. Rich, D.H.; Singh, J. The peptides 1979, 1, 241. 190. (104a, 104b) Pardin, C.; Roy, I.; Lubell, W.D.; Keillor, J.W. Chem Biol Drug Des 2008, 72, 189. 191. (104a, 104c) Maycock, C.D.; Santos, J.P.; Duarte, M.F.; et al. J Mol Struct 2010, 980, 163. 192. (104d) Pötzsch, R.; Voit, B. Macromol Rapid Commun 2012, 33, 635. 193. (104e) Barr, L.; Lincoln, S.F; Easton, C.J. Supramol Chem 2005, 17, 547. 194. Pérez-Balado, C.; Willemsens, A.; Ormerod, D.; et al. Org Process Res Dev 2007, 11, 237. 195. S timac, V.; S kugor, M.M.; Jakopovic, I.P.; et al. Org Process Res Dev 2010, 14, 1393. 196. Mernyák, E.; Fiser, G.; Szabó, J.; Bodnár, B.; et al. Steroids 2014, 89, 47. 197. Jójárt Rebeka, Szakdolgozat, Szegedi Tudományegyetem 2015. 198. Li, J.-H.; Liang, Y.; Xie, Y.-X. J Org Chem 2005, 70, 4393. 199. Dutta, U.; Maity, S.; Kancherla, R.; Maiti, D. Org Lett 2014, 16, 6302. 117

200. Cordoba, M.; Izquierdo, M.L.; Alvarez-Builla, J. Tetrahedron Lett 2011, 52, 1738. 201. Mosmann, T. J Immunol Methods 1983, 65, 55. VI. Herman, B.E.; Szabó, J.; Bacsa, I.; Wölfling, J.; et al. J Enzyme Inhib Med Chem 2016, 31, 574. 202. Tóth, I.; Szécsi, M.; Julesz, J.; Faredin, I. Skin Pharmacol 1997, 10, 160. 203. Darvas, B.; Székács, A.; Fónagy, A.; et al. Gen Comp Endocrinol 1997, 107, 450. 204. Djurendic, E.A.; Klisuric, O.; Szécsi, M.; et al. Struct Chem 2014, 25, 1747. 205. Maltais, R.; Ayan, D.; Poirier, D. Med Chem Lett 2011, 2, 678. 118

11. Köszönetnyilvánítás Mindenekelőtt köszönettel tartozom témavezetőmnek, Dr. Mernyák Erzsébet egyetemi adjunktusnak, aki a mesterképzés óta egyengette pályafutásom, és megmutatta a preparatív munka szépségeit. Továbbá köszönöm Neki disszertációm alapos áttanulmányozását, és értékes tanácsait a kutatómunkámhoz és az élethez is. Köszönettel tartozom másik témavezetőmnek, prof. Dr. Wölfling János tanszékvezető egyetemi tanárnak, kutatásom feltételeinek biztosításáért, hasznos tanácsaiért és támogatásáért. Hálával tartozom Dr. Schneider Gyula, professzor emeritusnak az évek során átadott sok bölcsességért és tapasztalatért a labormunkában és az előadásoknál. Továbbá köszönöm együttmőködő partnereinknek: Dr. Zupkó Istvánnak, Dr. Minorics Renátának és Dr. Bózsity Noéminek a sejtosztódás gátlási vizsgálatok elvégzését, valamint Dr. Szécsi Mihálynak és Herman Bianka Edinának az enzimgátlási tesztek kivitelezését. Köszönöm a tömegspektrumok felvételét Dr. Varga Mónikának (Szegedi Gabonakutató Nonprofit Kft.). Hálával tartozom Kutatócsoportunk minden tagjának, különösképpen Bacsa Ildikónak, akihez bármikor fordulhattam munkám során felmerülő problémáimmal. Továbbá köszönöm a munkáját a BSc-s és MSc-s hallgatóknak, akikkel együtt dolgoztam: Pataki Zoltánnak, Pálházi Balázsnak, Pancza Tímeának, Jerkovics Nórának és Józsa Gerdának. Külön köszönettel tartozom családomnak és férjemnek, Zóka Istvánnak, akik mindvégig mellettem álltak és támogattak. Végül köszönöm az NKFIH 113150 és a GINOP-2.3.2-15-2016-00038 (NKFIH), ill. a Richter Gedeon Nyrt. Centenáriumi Alapítványának anyagi támogatását. 119

12. Mellékletek I. A vegyületek fizikai adatai Szám Vegyület képlete Összegképlet Molekulatömeg Hozam (%) Op. ( C) R f 17 C 20 H 26 O 3 314,42 71 167 169 0,59 a 18 C 20 H 26 O 3 314,42 70 137 139 0,13 a 21 C 20 H 28 O 2 300,44 97 55 57 0,27 a 22 C 20 H 28 O 2 300,44 96 80 82 0,80 a 71 C 26 H 32 O 2 376,53 87 olaj 0,53 b 72 C 26 H 32 O 2 376,53 92 50 52 0,47 b 73 C 19 H 27 O 2 288,42 87 60 62 0,17 b 74 C 19 H 27 O 2 288,42 93 50 52 0,27 b 75 C 26 H 31 NO 2 389,53 93 124 126 0,42 b 76 C 26 H 31 NO 2 389,53 92 105 107 0,52 a 120

77 C 19 H 27 NO 2 301,42 79 133 135 0,48 c 78 C 19 H 27 NO 2 301,42 77 163 167 039 b 79 C 26 H 30 O 3 390,5 65 120 122 0,32 b 80 C 26 H 30 O 3 390,5 67 85 87 0,17 a 81 C 19 H 26 O 3 302,41 97 145 147 0,32 c 82 C 19 H 26 O 3 302,41 96 123 125 0,17 c 83 C 28 H 34 O 3 418,57 91 90 92 0,78 b 84 C 28 H 33 NO 3 431,57 82 olaj 0,67 b 85 C 28 H 33 NO 3 431,57 85 60 62 0,45 a 86 C 22 H 29 NO 3 355,47 74 olaj 0,63 b 87 C 22 H 29 NO 3 355,47 76 53 55 0,37 a 88 C 23 H 32 O 4 372,50 86 olaj 0,69 b 121

89 116 C 23 H 31 NO 4 385,50 C 18 H 24 O 256,38 97 olaj 0,23 b 99 164 165 0,48 a 131 C 20 H 29 NO 2 315,45 85 129 131 0,48 b 122

I. Melléklet A vegyületek NMR adatai 17: 1 H-NMR ppm 1,17(s, 3H, 18-H 3 ); 2,83(m, 2H, 6-H 2 ); 3,77(s, 3H, OCH 3 ); 5,00(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,87(m, 1H, 16-H); 6,62(d, 1H, J=2,4Hz, 4-H); 6,71(dd, 1H, J=8,6Hz, J=2,4Hz, 2- H); 7,18(d, 1H, J=8,6Hz, 1-H); 13 C-NMR ppm 14,9(C-18); 27,6; 27,2; 30,1; 35,6; 37,4; 40,9; 43,0; 45,4; 47,5; 55,2(OCH 3 ); 111,7(C-2); 113,5(C-4); 115,3(C-16a); 126,3(C-1); 132,1(C-10); 137,8(C-5); 138,8(C-16); 157,6(C-3); 185,3(C-17). 18: 1 H-NMR ppm 1,31(s, 3H, 18-H 3 ); 2,84(m, 2H, 6-H 2 ); 3,75(s, 3H, OCH 3 ), 5,01(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,85(m, 1H, 16-H); 6,60(d, 1H, J=2,5Hz, 4-H); 6,68(dd, 1H, J=8,6Hz, J=2,5Hz, 2- H); 7,15(d, 1H, J=8,6Hz, 1-H); 13 C-NMR ppm 26,3(C-18); 27,6; 27,7; 30,4; 34,9; 38,8; 42,5; 43,4; 47,3(C-13); 50,6; 55,2(OCH 3 ); 111,6(C-2); 113,5(C-4); 114,0(C-16a); 126,3(C-1); 132,4(C-10); 138,0(C-5); 140,8(C-16); 157,5(C-3); 183,0(C-17). 21: 1 H-NMR δ ppm 0,79(s, 3H, 18-H 3 ); 2,86(m, 2H, 6-H 2 ); 3,30 és 3,61(2xd, 2x1H, J=10,8Hz, 17-H 2 ); 3,79(s, 3H, 3OMe); 4,98 és 5,07(2xd, 2x1H, 16a-H 2 ); 5,94(m, 1H, 16-H); 6,64(s, 1H, 4-H); 6,73(d, 1H, J=8,3Hz, 2-H); 7,23(d, 1H, J=8,3Hz, 1-H); 13 C-NMR δ ppm 15,9(C-18); 25,9; 27,3; 30,2; 32,1; 35,6; 38,7; 40,9; 43,2; 44,0; 54,9(3OMe); 70,8(C-17); 111,3(C-4); 113,1(C-2); 114,0(C-16a); 126,1(C-1); 132,5(C-10); 137,7(C-5); 140,2(C-16); 157,2(C-3). 22: 1 H-NMR δ ppm 1,06(s, 3H, 18-H 3 ); 2,82(m, 2H, 6-H 2 ); 3,54 és 3,72(2xd, 2x1H, J=10,8Hz, 17-H 2 ); 3,78(s, 3H, 3OMe); 4,96 és 5,05(2xd, 2x1H, 16a-H 2 ); 5,85(m, 1H, 16-H); 6,62(s, 1H, 4-H); 6,71(d, 1H, J=8,3Hz, 2-H); 7,20(d, 1H, J=8,3Hz, 1-H); 13 C-NMR δ ppm 25,3(C-18); 26,5; 27,8; 30,3; 32,4; 35,6; 38,8; 41,2; 43,7; 50,7; 55,2(3OMe); 64,5(C-17); 111,6(C-4); 113,4(C-2); 114,6(C-16a); 126,3(C-1); 132,8(C-10); 137,8(C-5); 140,2(C-16); 156,8(C-3). 71: 1 H-NMR δ ppm 0,80(s, 3H, 18-H 3 ); 2,85(m, 2H, 6-H 2 ); 3,30 és 3,61(2xm, 2x1H, 17-H 2 ); 5,03(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,04(s, 2H, OCH 2 ); 5,93(m, 1H, 16-H); 6,73(d, 1H, J=2,3 Hz, 4-H); 6,79(dd, 1H, J=8,5 Hz, J=2,3 Hz, 2-H); 7,22(d, 1H, J=8,5 Hz, 1-H); 7,32(t, 1H, J=7,3 Hz, 4 - H); 7,38(t, 2H, J=7,3 Hz, 3 -H és 5 -H); 7,43(d, 2H, J=7,3 Hz, 2 -H és 6 -H); 13 C-NMR δ ppm 16,2(C-18); 26,2; 27,6; 30,4; 32,4; 35,9; 38,9(C-13); 41,2; 43,5; 44,3; 70,0(OCH 2 ); 71,0(C-17); 112,4(C-2); 114,3(C-16a); 114,4(C-4); 126,4(C-1); 127,4(2C: C-2,6 ); 127,8(C- 4 ); 128,5(2C: C-3,5 ); 133,1(C-10); 137,3(C-1 ); 138,0(C-5); 140,5(C-16); 156,8(C-3). MS m/z (%): 431 (100). 123

72: 1 H-NMR δ ppm 1,06(s, 3H, 18-H 3 ); 2,82(m, 2H, 6-H 2 ); 3,53 és 3,72(2xd, 2x1H, J=10,8 Hz, 17-H 2 ); 4,96-5,07(átfedő multiplettek, 4H, 16a-H 2, OCH 2 ); 5,87(m, 1H, 16-H); 6,71(s, 1H, 4-H); 6,79(d, 1H, J=8,3 Hz, 2-H); 7,21(d, 1H, J=8,3 Hz, 1-H); 7,32(t, 1H, J=6,9 Hz, 4 - H); 7,38(t, 2H, J=7,1 Hz, 3 -H és 5 -H); 7,42(d, 2H, J=6,7 Hz, 2 -H és 6 -H); 13 C-NMR δ ppm 25,3(C-18); 26,5; 27,8; 30,3; 32,4; 35,6; 38,8; 41,2; 43,7; 50,7; 64,5(C-17); 69,9(OCH 2 ); 112,4(C-2); 114,5(C-4); 114,6(C-16a); 126,3(C-1); 127,4(2C:C-3,5 ); 127,8; 128,5(2C:C- 2,6 ); 133,0(C-4 ); 137,3(C-10); 137,9(C-5); 140,2(C-16); 156,8(C-3). 73: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,81(t, 3H, J=6,7 Hz, 16a-H 3 ); 0,77(s, 3H, 18-H 3 ); 2,82(m, 2H, 6-H 2 ); 3,35 and 3,52(2xd, 2x1H, J=10,9 Hz, 17-H 2 ); 6,56(d, 1H, J=2,3Hz, 4-H); 6,63(dd, 1H, J=8,5 Hz, J=2,3 Hz, 2-H); 7,16(d, 1H, J=8,5 Hz, 1-H); 13 C-NMR δ ppm 14,7 és 15,9(C- 18 és Ac-Me); 25,0; 26,4; 27,4; 30,5; 31,2; 35,6; 38,8(C-13); 41,8; 43,5; 45,3; 71,4(C-17); 112,8(C-2); 114,9(C-4); 126,7(C-1); 132,9(C-10); 138,3(C-5); 153,5(C-3). MS m/z (%): 289 (100, [M+H] + ). 74: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,89(t, 3H, J=6,7 Hz, 16a-H 3 ); 1,17(s, 3H, 18-H 3 ); 2,69(m, 2H, 6-H 2 ); 3,19 és 3,48(2xm, 2x1H, 17-H 2 ); 4,18(s, 1H, 17-OH); 6,41(s, 1H, 4-H); 6,50(dd, 1H, J=1,76 Hz, J=8,2 Hz, 2-H); 7,04(d, 1H, J=8,5 Hz, 1-H); 8,96(s, 1H, 3-OH). 13 C-NMR δ ppm 14,4(C-16a); 25,0; 25,2(C-18); 26,3; 27,4; 29,8; 30,3; 35,1; 38,0; 41,3; 43,2; 50,8; 61,5(C-17); 112,7(C-2); 114,5(C-4); 126,0(C-1); 130,6(C-10); 136,9(C-5); 154,8(C-3). 75: 1 H-NMR δ ppm 1,12(s, 3H, 18-H 3 ); 2,86(m, 2H, 6-H 2 ); 5,00(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,05(s, 2H, OCH 2 ); 5,85(m, 1H, 16-H); 6,74(d, 1H, J=2,2 Hz, 4-H); 6,81(dd, 1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2- H); 7,21(d, 1H, J=8,6 Hz, 1-H); 7,32(s, 1H, 17-H); 7,33(t, 1H, J=7,2 Hz, 4'-H); 7,40(t, 2H, J=7,2 Hz, 3',5'-H); 7,45(d, 2H, J=7,2 Hz, 2',6'-H); 8,13(s, 1H, OH); 13 C-NMR δ ppm 15,6(C- 18); 25,8; 27,3; 30,2; 34,1; 37,7; 40,6; 41,5(C-13); 43,2; 47,5; 69,9(OCH 2 ); 112,5(C-2); 114,5(C-4); 115,0(C-16a); 126,4(C-1); 127,4(2C, C-2',6'); 127,8(C-4'); 128,5(2C: C-3',5'); 132,4(C-10); 137,2(C-1 ); 137,9(C-5); 139,3(C-16); 156,8(C-3); 160,4(C-17). 76: 1 H-NMR δ ppm 1,21(s, 3H, 18-H 3 ); 2,83(m, 2H, 6-H 2 ); 4,98 5,06(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,03(s, 2H, OCH 2 ); 5,84(m, 1H, 16-H); 6,71(d, 1H, J=2,2 Hz, 4-H); 6,78(dd, 1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2-H); 7,19(d, 1H, J=8,6 Hz, 1-H); 7,32(t, 1H, J=7,2 Hz, 4'-H); 7,38(t, 2H, J=7,2 Hz, 3',5'- H); 7,42(d, 2H, J=7,2 Hz, 2',6'-H); 7,57(s, 1H, 17-H); 13 C-NMR δ ppm 26,4(C-18); 27,0; 27,4; 30,3; 33,3; 39,2; 40,9(C-13); 42,3; 43,5; 50,9; 70,0(OCH 2 ); 112,5(C-2); 114,5(C-4); 114,9(C-16a); 126,4 (C-1); 127,4(2C: C-2',6'); 127,8(C-4'); 128,5(2C: C-3',5'); 132,5(C-10); 137,3(C-1 ); 137,8(C-5); 139,4(C-16); 156,0(C-17); 156,8(C-3). 77: 1 H-NMR δ ppm 0,82(t, 3H, J=6,8 Hz, 16a-H 3 ); 0,97(s, 3H, 18-H 3 ); 2,71(m, 2H, 6-H 2 ); 6,42(d, 1H, J=2,2 Hz, 4-H); 6,51(dd, 1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2-H); 7,05(d, 1H, J=8,6 Hz, 1- H); 7,17(s, 1H, 17-H); 9,00(s, 1H, 3-OH); 10,38(s, 1H, NOH); 13 C-NMR δ ppm 14,4 és 15,4(C-16a és C-18); 23,8; 25,7; 26,9; 29,7; 31,5; 37,2; 40,6(C-13); 40,7; 42,7; 47,0; 112,8(C- 2); 114,5(C-4); 126,2(C-1); 130,0(C-10); 137,0(C-5); 154,9(C-3); 157,8(C-17). 78: 1 H-NMR δ ppm 0,88 (t, 3H, J=6,8 Hz, 16a-H 3 ); 1,09 (s, 3H, 18-H 3 ); 2,70 (m, 2H, 6-H 2 ); 6,42 (d, 1H, J=2,2 Hz, 4-H); 6,51 (dd, 1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2-H); 7,03 (d, 1H, J=8,6 Hz, 1-H); 7,38 (s, 1H, 17-H); 9,00 (s, 1H, 3-OH); 10,47 (s, 1H, NOH); 13 C-NMR δ ppm 14,3 és 124

26,6(C-18 és C-16a); 24,6; 26,8; 26,9; 29,9; 31,4; 38,7; 40,2; 42,3; 42,9; 50,7; 112,8(C-2); 114,5(C-4); 126,2(C-1); 130,2(C-10); 137,0(C-5); 153,5(C-17); 154,8(C-3). 79: 1 H-NMR δ ppm 1,19(s, 3H, 18-H 3 ); 2,84(m, 2H, 6-H 2 ); 5,01(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,05(s, 2H, OCH 2 ); 5,88(m, 1H, 16-H); 6,73(d, 1H, J=2,3 Hz, 4-H); 6,80(dd, 1H, J=8,5 Hz, J= 2,3 Hz, 2- H); 7,20(d, 1H, J=8,5 Hz, 1-H); 7,32(t, 1H, J=7,3 Hz 4 -H); 7,39(t, 2H, J=7,3 Hz, 3 -H és 5 - H); 7,43(d, 2H, J=7,3 Hz, 2 -H és 6 -H); 13 C-NMR δ ppm 15,0(C-18); 27,1; 28,7; 30,2; 35,7; 37,4; 40,9; 43,0; 45,4; 47,4(C-13); 70,0(OCH 2 ); 112,5(C-2); 114,5(C-4); 115,3(C-16a); 126,4(C-1); 127,4(2C: C-2,6 ); 127,9(C-4 ); 128,5(2C: C-3,5 ); 132,4(C-10); 137,2(C-1 ); 137,9(C-5); 138,8(C-16); 156,8(C-3); 184,5(C-17). MS m/z (%): 435 (100). 80: 1 H-NMR δ ppm 1,32(s, 3H, 18-H 3 ); 2,83 (m, 2H, 6-H 2 ); 4,93(m, 1H) és 5,00-5,04(átfedő multiplettek: 3H): 16a-H 2 és OCH 2 ; 5,86(m, 1H, 16-H); 6,70(d, 1H, J=2,3 Hz, 4-H); 6,76(dd, 1H, J=8,5 Hz, J= 2,3 Hz, 2-H); 7,17(d, 1H, J=8,5 Hz, 1-H); 7,32(t, 1H, J=7,3 Hz 4 -H); 7,37(t, 2H, J=7,3 Hz, 3 -H és 5 -H); 7,41(d, 2H, J=7,3 Hz, 2 -H és 6 -H); 13 C-NMR δ ppm 26,3(C-18); 27,6; 29,7; 30,4; 34,9; 38,8; 42,4; 43,5; 47,2(C-13); 50,5; 69,9(OCH 2 ); 112,4(C- 2); 114,1(C-16a); 114,5(C-4); 126,3(C-1); 127,4(2C: C-2,6 ); 127,8(C-4 ); 128,5(2C: C- 3,5 ); 132,7(C-10); 137,3(C-1 ); 138,0(C-5); 140,8(C-16); 156,8(C-3); 181,6(C-17). 81: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,83(t, 3H, J=6,7 Hz, 16a-H 3 ); 1,01(s, 3H, 18-H 3 ); 2,71(m, 2H, 6-H 2 ); 6,43(d, 1H, J=2,3Hz, 4-H); 6,51(dd, 1H, J=8,5 Hz, J=2,3 Hz, 2-H); 7,04(d, 1H, J=8,5 Hz, 1-H); 8.99(s, 1H, 3OH); 12,07(s, 1H, COOH); 13 C-NMR δ ppm 14,5 és 15,0(C-18 és C-16a); 23,5; 25,7; 26,7; 29,7; 33,4; 36,4; 40,9; 42,7; 45,9; 46,6; 112,8(C-2); 114,5(C-4); 126,1(C-1); 129,9(C-10); 136,9(C-5); 154,9(C-3); 179,4(C-17). 82: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,88(t, 3H, J=6,7 Hz, 16a-H 3 ); 1,15(s, 3H, 18-H 3 ); 2,71 (m, 2H, 6-H 2 ); 6,42(d, 1H, J=2,3 Hz, 4-H); 6,50(dd, 1H, J=8,5 Hz, J= 2,3 Hz, 2-H); 7,01(d, 1H, J=8,5 Hz, 1-H); 8,97(s, 1H, 3OH); 11,98(s, 1H, COOH); 13 C-NMR δ ppm 14,3 és 22,7(C-18 és C-16a); 23,0; 25,5; 27,2; 28,9; 29,2; 29,7; 31,0; 42,1; 42,7; 45,4; 112,7(C-2); 114,5(C-4); 125,9(C-1); 130,3(C-10); 136,9(C-5); 154,8(C-3); 177,0(C-17). 83: 1 H-NMR δ ppm 0,87(s, 3H, 18-H 3 ); 2,09(s, 3H, Ac-Me); 2,85(m, 2H, 6-H 2 ); 3,84 és 4,00(2xd, 2x1H, J=11,2 Hz, 17-H 2 ); 4,97(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,04(s, 2H, OCH 2 ); 5,84(m, 1H, 16-H); 6,72(d, 1H, J=2,3 Hz, 4-H); 6,79(dd, 1H, J=8,5 Hz, J=2,3 Hz, 2-H); 7,21(d, 1H, J=8,5 Hz, 1-H); 7,30(t, 1H, J=7,3 Hz, 4 -H); 7,38(t, 2H, J=7,3 Hz, 3 -H és 5 -H); 7,43(d, 2H, J=7,3 Hz, 2 -H és 6 -H); 13 C-NMR δ ppm 16,2 és 20,9: C-18 és Ac-Me; 26,2; 27,5; 30,4; 32,7; 36,3; 37,6(C-13); 41,3; 43,4; 44,8; 69,9(OCH 2 ); 71,9(C-17); 112,4(C-2); 114,4(C-16a); 114,5(C-4); 126,4(C-1); 127,4(2C: C-2 ;6 ); 127,8(C-4 ); 128,5(2C: C-3 ;5 ); 132,9(C-10); 137,3(C-1 ); 137,9(C-5); 139,7(C-16); 156,8(C-3); 171,2(C-17). MS m/z (%): 431 (100). 84: 1 H-NMR δ ppm 1,21(s, 3H, 18-H 3 ); 2,16(s, 3H, Ac-CH 3 ); 2,84(m, 2H, 6-H 2 ); 4,98(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,04(s, 2H, OCH 2 ); 5,83(m, 1H, 16-H); 6,72(d, 1H, J=2,2 Hz, 4-H); 6,79(dd, 1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2-H); 7,19(d, 1H, J=8,6 Hz, 1-H); 7,32(t, 1H, J=7,2 Hz, 4'-H); 7,38(t, 2H, J=7,2 Hz, 3'-H és 5'-H); 7,42(d, 2H, J=7,2 Hz, 2'-H és 6'-H); 7,56(s, 1H, 17-H). 13 C- NMR δ ppm 15,4 és 19,7(C-18 és Ac-CH 3 ); 25,6; 27,3; 30,2; 34,2; 37,3; 40,5; 42,3(C-13); 43,2; 47,4; 70,0(OCH 2 ); 112,5(C-2); 114,5(C-4); 115,3(C-16a); 126,4(C-1); 127,4(2C: C-2' és 125

C-6'); 127,9(C-4'); 128,5(2C: C-3' és C-5'); 132,2(C-10); 137,2(C-1'); 137,8(C-5); 139,0(C- 16); 156,9(C-3); 167,0(Ac-CO); 167,1(C-17). 85: 1 H-NMR δ ppm 1,32(s, 3H, 18-H 3 ); 2,12(s, 3H, Ac-H 3 ); 2,85(m, 2H, 6-H 2 ); 5,01(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,03(s, 2H, OCH 2 ); 5,83(m, 1H, 16-H); 6,71(d, 1H, J=2,2 Hz, 4-H); 6,79(dd, 1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2-H); 7,19(d, 1H, J=8,6 Hz, 1-H); 7,32(t, 1H, J=7,2 Hz, 4'-H); 7,38(t, 2H, J=7,2 Hz, 3'- H és 5'-H); 7,43( d, 2H, J=7,2 Hz, 2'-H és 6'-H); 7,87(s, 1H, 17-H). 13 C- NMR δ ppm 19,6 és 26,0(C-18 és Ac-CH 3 ); 27,0; 27,3; 30,2; 33,1; 39,0; 41,7(C-13); 42,1; 43,4; 50,7; 70,0(OCH 2 ); 112,5(C-2); 114,5(C-4); 115,5(C-16a); 126,4(C-1); 127,4(2C: C-2' és C-6'); 127,8(C-4'); 128,5(2C: C-3' és C-5'); 132,3(C-10); 137,2(C-1'); 137,7(C-5); 138,6(C- 16); 156,9(C-3); 163,2(C-17); 168,8(Ac-CO). 86: 1 H-NMR δ ppm 1,21(s, 3H, 18-H 3 ); 2,16(s, 3H, Ac-CH 3 ); 2,85(m, 2H, 6-H 2 ); 3,78(s, 3H, 3-OCH 3 ); 4,96 5,03(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,83(m, 1H, 16-H); 6,63(d, 1H, J=2,2 Hz, 4-H); 6,73(dd, 1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2-H); 7,19(d, 1H, J=8,6 Hz, 1-H); 7,55(s, 1H, 17-H); 13 C- NMR δ ppm 15,3 and 19,7(C-18 és Ac-CH 3 ); 25,6; 27,3; 30,2; 34,2; 37,3; 40,5; 42,3(C-13); 43,1; 47,4; 55,2(3-OCH 3 ); 111,7(C-2); 113,5(C-4); 115,3(C-16a); 126,3(C-1); 132,0(C-10); 137,8(C-5); 139,0(C-16); 157,6(C-3); 167,0(C-17); 168,9(Ac-CO). 87: 1 H-NMR δ ppm 0,83(t, 3H, J=6,8 Hz, 16a-H 3 ); 0,97(s, 3H, 18-H 3 ); 2,78(m, 2H, 6-H 2 ); 3,69(s, 3H, 3-OCH 3 ); 6,60(d, 1H, J=2,2 Hz, 4-H); 6,67(dd, 1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2-H); 7,17(s, 1H, 17-H); 7,18(d, 1H, J=8,6 Hz, 1-H); 10,38(s, 1H, NOH); 13 C-NMR δ ppm 14,4 és 15,4(C-16a és C-18); 23,8; 25,7; 26,8; 29,9; 31,5; 37,1; 40,5; 40,6(C-13); 42,7; 47,0; 54,8(3- OCH 3 ); 111,6(C-2); 113,0(C-4); 114,9(C-16a); 126,3(C-1); 131,8(C-10); 137,3(C-5); 157,0(C-3); 157,8(C-17); 168,5(Ac-CO). 88: 1 H-NMR δ ppm 0,83(s, 3H, 18-H 3 ); 2,09 és 2,28(2xs, 2x3H, 2xAc-Me); 2,86(m, 2H, 6- H 2 ); 3,86 és 3,92(2xd, 2x1H, J=11,3 Hz, 17-H 2 ); 6,79(d, 1H, J=2,3 Hz, 4-H); 6,83(dd, 1H, J=8,5 Hz, J=2,3 Hz, 2-H); 7,27(d, 1H, J=8,5 Hz, 1-H); 13 C-NMR δ ppm 14,1 és 15,5(C-18 és C-16a); 19,3 és 20,7(2xOAc-Me); 24,4; 25,8; 26,8; 30,0; 30,9; 35,6; 36,9(C-13); 40,9; 43,3; 45,4; 71,7(C-17); 118,2; 120,9; 126,2(C-4); 137,6 és 137,8: C-5 és C-10; 148,0(C-3); 169,4 és 170,9(2xOc-CO). MS m/z (%): 427 (100). 89: 1 H-NMR δ ppm 0,88(t, 3H, J=6,6Hz, 16a-H 3 ); 1,16(s, 3H, 18-H 3 ); 2,17(s, 3H, 17-OAc- Me); 2,28(m, 3H, 3-OAc-Me); 2,87(s, 2H, 6-H 2 ); 6,80(d, 1H, J=2,2Hz, 4-H); 6,84(dd, 1H, J=8,6Hz, J=2,2Hz, 2-H); 7,27(d, 1H, J=8,6Hz, 1-H); 7,54(s, 1H, 17-H). 13 C-NMR δ ppm 14,4 és 15,0(C-16a és C-18); 19,6 és 21,0(2 OAc-Me); 24,2; 25,5; 26,8; 30,0; 32,2; 36,9; 40,3; 42,1; 43,3; 47,5; 118,7(C-2); 121,3(C-4); 126,4(C-1); 137,2 és 137,9(C-5 és C-10); 148,4(C- 3); 166,7(C-17); 168,9 és 169,7(2 OAc-CO). 116: DMSO-d 6, 1 H-NMR δ ppm 0,92(s, 3H, 18-H 3 ); 2,66(m, 2H, 6-H 2 ); 6,42(s, 1H, 4-H); 6,50(m, 1H, 2-H); 7,07(m, 1H, 1-H). 13 C-NMR δ ppm 20,4; 26,6; 27,2; 27,9; 29,7(18-Me); 29,8; 33,0; 35,5; 40,8; 41,4(C-13); 41,7; 51,1; 112,7(C-2); 114,6(C-4); 126,5(C-1); 130,3(C- 10); 137,4(C-5); 154,7(C-3). MS m/z (%): 260 (100). 126

II. A vegyületek fizikai adatai Szám Vegyület képlete Ö.képlet Mol. tömeg Hozam (%) Op. ( C) R f 90 C 22 H 30 O 2 326,47 86 olaj 0,40 b 91 C 22 H 30 O 2 326,47 86 olaj 0,50 b 92 C 22 H 29 NO 2 339,47 89 olaj 0,46 b 93 C 22 H 29 NO 2 339,47 87 olaj 0,55 b 94 C 21 H 24 O 2 308,41 97 132 134 0,70 b 102a C 23 H 29 NO 2 351,48 78 olaj 0,40 a 102b C 29 H 33 NO 2 427,58 77 olaj 0,59 a 103a C 23 H 29 NO 2 351,48 81 olaj 0,54 a 103b 117 C 29 H 33 NO 2 427,58 C 21 H 26 O 294,43 83 olaj 0,68 a 95 140 143 0,32 d 127

II. Melléklet A vegyületek NMR adatai 90: 1 H-NMR δ ppm 0,78(s, 3H, 18-H 3 ); 0,92(t, 3H, J=6,9 Hz, 16a-H 3 ); 2,50(s, 1H, C=CH); 2,86(m, 2H, 6-H 2 ); 3,34 és 3,52(2xd, 2x1H, J=10,9 Hz, 17-H 2 ); 4,66(s, 2H, OCH 2 ); 6,70(d, 1H, J=2,3 Hz, 4-H); 6,79(dd, 1H, J=8,5 Hz, J=2,3 Hz, 2-H); 7,24(d, 1H, J =8,5 Hz, 1-H). 13 C- NMR δ ppm14,7(c-16a); 15,9(C-18); 25,0; 26,4; 27,5; 30,7; 31,2; 35,6; 38,7; 41,7; 43,5; 45,2; 55,7 és 71,3(2xOCH 2 ); 74,9(C CH); 78,5(C CH); 112,4(C-2); 114,5(C-4); 126,6(C-1); 133,8(C-10); 138,1(C-5); 155,4(C-3). 91: 1 H-NMR δppm 0,92(t, 3H, J=6,9 Hz, 16a-H 3 ); 1,03(s, 3H, 18-H 3 ); 2,50(s, 1H, C=CH); 2,84(m, 2H, 6-H 2 ); 3,47 és 3,73(2xd, 2x1H, J=10,9 Hz, 17-H 2 ); 4,65(s, 2H, OCH 2 ); 6,68(d, 1H, J=2,3 Hz, 4-H); 6,78(dd, 1H, J=8,5 Hz, J=2,3 Hz, 2-H); 7,22(d, 1H, J =8,5 Hz, 1-H). 13 C- NMR δ ppm 14,6(C-16a); 24,9(C-18); 25,5; 26,6; 27,7; 30,6; 31,0; 35,2; 38,6; 41,7; 43,7; 51,4; 55,7 és 64,1(2xOCH 2 ); 75,2(C CH); 78,9(C CH); 112,4(C-2); 114,5(C-4); 126,5(C-1); 133,8(C-10); 137,9(C-5); 155,4(C-3). 92: 1 H-NMR δ ppm 0,89(t, 3H, J=6,8 Hz, 16a-H 3 ); 1,07(s, 3H, 18-H 3 ); 2,51(s, 1H, C CH); 2,86(m, 2H, 6-H 2 ); 4,66(s, 2H, OCH 2 ); 6,70(d, 1H, J=2,2 Hz, 4-H); 6,79(dd, 1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2-H); 7,21(d, 1H, J=8,6 Hz, 1-H); 7,30(s, 1H, 17-H); 13 C-NMR δ ppm 14,5 és 15,4(C-16a és C-18); 24,3; 25,9; 27,2; 30,5; 32,2; 37,4; 40,9; 41,3(C-13); 43,3; 47,9; 55,7(OCH 2 ); 75,3(C CH); 79,9(C CH); 112,5(C-2); 114,5(C-4); 126,5(C-1); 133,2(C-10); 137,9(C-5); 155,5(C-3); 160,5(C-17). 93: 1 H-NMR δ ppm 0,92 (t, 3H, J=6,8 Hz, 16a-H 3 ), 1,19 (s, 3H, 18-H 3 ), 2,51 (s, 1H, C CH), 2,85 (m, 2H, 6-H 2 ), 4,66 (s, 2H, OCH 2 ), 6,69 (d, 1H, J=2,2 Hz, 4-H), 6,77 (dd, 1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2-H), 7,20 (d, 1H, J=8,6 Hz, 1-H), 7,56 (s, 1H, 17-H). 13 C-NMR δ ppm 14,5 és 26,4 (C-16a és C-18); 25,1; 27,2; 29,7; 30,5; 31,9; 39,0; 40,9; 42,8; 43,6; 51,4; 55,7(OCH 2 ); 75,3(C CH); 78,8(C CH); 112,5(C-2); 114,5(C-4); 126,6(C-1); 133,2(C-10); 137,9(C-5); 155,4(C-3); 156,5(C-17). 94: 1 H-NMR δ ppm 1,06(s, 3H, 18-H 3 ); 2,49(s, 1H, C CH); 2,83(m, 2H, 6-H 2 ); 4,65(s, 2H, OCH 2 ); 6,68(s, 1H, 4-H); 6,77(d, J= 8,5 Hz, 1H, 2-H); 7,19(d, J= 8,5 Hz, 1H, 1-H). 13 C-NMR δ ppm 20,6; 24,7(18-Me); 27,8; 27,9; 29,9; 31,7; 33,1; 41,1(2C: C-8, C-9); 48,9(C-14); 49,7(C-13); 55,3(OCH 2 ); 74,9(C CH); 78,5(C CH); 112,1(C-2); 114,3(C-4); 126,5(C-1); 132,6(C-10); 137,7(C-5); 155,1(C-3); 221,2(C-17). MS (negatív ion mód) m/z (%): 285 (100), 307 (54, [M-H] - ), 299 (36). 102a: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 1,18(s, 3H, 18-H 3 ); 2,24(s, 1H, C CH); 2,83(m, 2H, 6- H 2 ); 3,78(s, 3H, OCH 3 ); 4,06(m, 2H, HN-CH 2 ); 4,97(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,85(m, 1H, 16-H); 5,91(m, 1H, NH); 6,63(s, 1H, J=2,2Hz, 4-H); 6,71(dd, 1H, J=8,6Hz, J=2,2Hz, 2-H); 7,18(d, 1H, J=8,6Hz, 1-H); 13 C-NMR δ ppm, 15,2(C-18); 25,9; 27,2; 29,5; 30,2; 35,3; 37,9; 40,9; 42,9; 45,7; 47,3, 55,2(OCH 3 ); 71,6(C CH); 79,8(C CH); 111,7(C-2); 113,5(C-4); 115,0(C- 128

16a); 126,3(C-1); 132,2(C-10); 137,8(C-5); 138,9(C-16); 157,5(C-3); 177,9(C-17). MS m/z(%): 352 (MH +, 100), 236 (38). 102b: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 1,05(s, 3H, 18-H 3 ); 2,75(m, 2H, 6-H 2 ); 3,01(s, 1H, C CH); 3,84(m, 2H, HN-CH 2 ); 4,92(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,05(s, 2H, OCH 2 ); 5,81(m, 1H, 16-H); 6,69(d, 1H, J=2,2Hz, 4-H); 6,75(dd, 1H, J=8,6Hz, J=2,2Hz, 2-H); 7,16(d, 1H, J=8,6Hz, 1-H); 7,31(t, 1H, J=7,6Hz, 4'-H); 7,38(t, 2H, J=7,6Hz, 3',5'-H); 7,42(d, 2H, J=7,6Hz, 2',6'-H); 8,01(t, 1H, J=5,2Hz, NH); 13 C-NMR δ ppm 15,1(C-18); 25,7; 26,8; 28,2; 29,6; 34,6; 36,7; 40,6; 42,5; 45,2; 46,7; 68,8(OCH 2 ); 72,1(C CH); 81,7(C CH); 112,3(C-2); 114,1(C-4); 114,5(C-16a); 126,2(C-1); 127,4(2C: C-2,6 ); 127,6(C-4 ); 128,2(2C: C-3,5 ); 132,0(C-10); 137,2 és 137,3(C-5 és C-1 ); 139,5(C-16); 156,1(C-3); 177,0(C-17). MS m/z (%): 428 (MH +, 100), 450 (36). 103a: 1 H-NMR δ ppm 1,30(s, 3H, 18-H 3 ); 2,20(s, 1H, C CH); 2,84(m, 2H, 6-H 2 ); 3,77(s, 3H, OCH 3 ); 3,98(m, 2H, NH-CH 2 ); 5,01(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,76(s, 1H, NH); 5,87(m, 1H, 16-H); 6,60(d, 1H, J=2,2Hz, 4-H); 6,67(dd, 1H, J=2,2Hz, J=8,6Hz, 2-H); 7,15(d, 1H,J=8,6Hz, 1-H); 13 C-NMR δ ppm 27,2(C-18); 27,4; 27,8; 29,1; 30,4; 35,1; 39,7; 42,3; 43,6; 46,6; 51,7; 55,2(OCH 3 ); 71,5(C CH); 82,6(C CH); 111,5(C-2); 113,3(C-4); 113,9(C-16a); 126,2(C-1); 132,4(C-10); 138,1(C-5); 140,9(C-16); 157,4(C-3); 175,7(C-17). MS m/z (%): 352 (MH +, 100). 103b: 1 H-NMR δ ppm 1,31(s, 3H, 18-H 3 ); 2,83(m, 2H, 6-H 2 ); 2,98(s, 1H, C CH); 3,81(m, 2H, HN-CH 2 ); 5,01(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,02(s, 2H, OCH 2 ); 5,70(m, 1H, NH); 5,86(m, 1H, 16- H); 6,69(d, 1H, J=2,2Hz, 4-H); 6,75(dd, 1H, J=8,6Hz, J=2,2Hz, 2-H); 7,12(d, 1H, J=8,6Hz, 1-H); 7,31(t, 1H, J=7,5Hz, 4 -H); 7,38(t, 1H, J=7,5Hz, 3,5 -H); 7,42(t, 1H, J=7,5Hz, 2,6 - H); 7,87(t, 1H, J=5,6Hz, 1H, NH); 13 C-NMR δ ppm 15,(C-18); 27,1; 27,4; 27,8; 29,1; 30,4; 35,1; 39,7; 42,3; 43,6; 51,7; 69,9(OCH 2 ); 71,5(C CH); 79,8(C CH) 112,3(C-2); 114,4(C-4); 113,9(C-16a); 126,3(C-1); 127,4(2C: C-2,6 ); 127,8(C-4 ); 128,4(2C: C-3,5 ); 132,7(C-10); 137,3(C-1 ); 138,1(C-5); 140,9(C-16); 156,7(C-3); 175,7(C-17). MS m/z (%): 428 (MH +, 100), 429 (36). 117: 1 H-NMR δ ppm 0,96(s, 3H, 18-H 3 ); 2,50(s, 1H, C CH); 2,81(m, 2H, 6-H 2 ); 4,65(s, 2H, OCH 2 ); 6,69(s, 1H, 4-H); 6,78(dd, J= 8,5 Hz,J= 2,0 Hz, 1H, 2-H); 7,25(d, J= 8,5 Hz, 1H, 1- H). 13 C-NMR δ ppm 20,9; 26,9; 27,8; 29,7; 29,9(18-Me); 30,7; 33,6; 35,8; 41,2; 41,9(C-13); 42,3; 51,7; 55,7(OCH 2 ); 75,2(C CH); 78,8(C CH); 112,4(C-2); 114,6(C-4); 126,9(C-1); 134,0(C-10); 138,5(C-5); 155,3(C-3). MS m/z (%): 295 (24, [M+H] + ), 255 (36, [M + -(CH C- CH 2 )]. 129

III. A vegyületek fizikai adatai Szám Vegyület képlete Összegképlet Mol. tömeg Hozam (%) Op. ( C) R f 105a C 29 H 37 N 3 O 2 459,62 93 41 43 0,46 c 105b C 30 H 39 N 3 O 2 473,65 92 50 52 0,26 c 105c C 32 H 43 N 3 O 2 501,70 90 41 43 0,30 c 105d C 33 H 45 N 3 O 2 515,73 92 58 60 0,32 c 105e C 29 H 36 N 4 O 4 504,62 94 65 67 0,20 c 106a C 29 H 37 N 3 O 2 459,62 95 olaj 0,19 c 106b C 30 H 39 N 3 O 2 473,65 91 49 51 0,16 c 130

106c C 32 H 43 N 3 O 2 501,70 92 47 49 0,19 c 106d C 33 H 45 N 3 O 2 515,73 91 58 60 0,32 c 106e C 29 H 36 N 4 O 4 504,62 94 50 52 0,12 c 107a C 29 H 36 N 4 O 2 472,62 92 67 69 0,40 c 107c C 32 H 42 N 4 O 2 514,70 90 59 62 0,44 c 107e C 29 H 35 N 5 O 4 517,62 93 76 79 0,33 c 108a C 29 H 36 N 4 O 2 472,62 94 62 64 0,34 c 131

108c C 32 H 42 N 4 O 2 514,70 92 67 69 0,38 c 108e C 29 H 35 N 5 O 4 517,62 93 76 78 0,30 c 109a C 28 H 31 N 3 O 2 441,56 98 163 165 0,35 e 109b C 29 H 33 N 3 O 2 455,59 97 119 121 0,26 e 109c C 31 H 37 N 3 O 2 483,64 96 102 104 0,30 e 109d C 32 H 39 N 3 O 2 497,67 97 110 112 0,28 e 109e C 28 H 30 N 4 O 4 486,56 95 144 148 0,27 e 132

110aa C 30 H 36 N 4 O 2 484,63 96 61 63 0,44 f 110ab C 31 H 38 N 4 O 2 498,66 95 54 57 0,40 f 110ae C 30 H 36 N 5 O 6 529,63 97 52 54 0,29 f 110ba C 36 H 40 N 4 O 2 560,78 97 51 53 0,38 f 110bb C 37 H 42 N 4 O 2 574,75 97 olaj 0,44 f 110bc C 39 H 46 N 4 O 2 602,87 98 43 45 0,51 f 110bd C 40 H 48 N 4 O 2 616,83 97 45 47 0,53 f 110be C 36 H 39 N 5 O 4 605,73 96 87 90 0,22 f 111aa C 30 H 36 N 4 O 2 484,63 98 57 59 0,54 f 133

111ab C 31 H 38 N 4 O 2 498,66 98 32 34 0,37 f 111ae C 30 H 36 N 5 O 6 529,63 99 60 62 0,31 f 111ba C 36 H 40 N 4 O 2 560,78 98 olaj 0,67 f 111bb C 37 H 42 N 4 O 2 574,75 97 46 48 0,63 f 111be C 36 H 39 N 5 O 4 605,73 99 75 77 0,42 f 118 C 28 H 33 N 3 O 427,58 99 147 148 0,41 b 134

III. Melléklet A vegyületek NMR adatai 105a: 1 H-NMR δppm 0,77(s, 3H, 18-H 3 ); 0,92(t, 3H, J=6,9 Hz, 16a-H 3 ); 2,84(m, 2H, 6-H 2 ); 3,34 és 3,52(2xd, 2x1H, J=10,9 Hz, 17-H 2 ); 5,16(s, 2H, NCH 2 ); 5,53(s, 2H, OCH 2 ); 6,69(d, 1H, J=2,3 Hz, 4-H); 6,77(dd, 1H, J=8,5 Hz, J=2,3 Hz, 2-H); 7,21(d, 1H, J =8,5 Hz, 1-H); 7,28(dd, 2H, J=8,6 Hz, J=2,9 Hz, 2 -H és 6 -H), 7,38(átfedő multiplettek, 3H, 3 -H, 4 -H és 5 -H); 7,52 (s, 1H, C=CH). 13 C-NMR δ ppm 14,6(C-18); 16,0(C-16a); 25,0; 26,4; 27,4; 30,6; 31,2; 35,6; 38,7; 41,7; 43,5; 45,2; 54,2(NCH 2 ); 62,1(OCH 2 ); 71,3(C-17); 112,4(C-2); 114,4(C-4); 122,5(C=CH); 126,6(C-1); 128,1(2C: C-3,5 ); 128,8(C-4 ); 129,1(2C: C-2,6 ); 133,5(C-10); 134,4(C-1 ); 138,1(C-5); 144,9(C=CH); 156,0(C-3). 105b: 1 H-NMR δppm 0,77(s, 3H, 18-H 3 ); 0,91(t, 3H, J=6,9 Hz, 16a-H 3 ); 2,35(s, 3H, 4 - CH 3 ); 2,83(m, 2H, 6-H 2 ); 3,34 és 3,52(2xd, 2x1H, J=10,9 Hz, 17-H 2 ); 5,15(s, 2H, NCH 2 ); 5,48(s, 2H, OCH 2 ); 6,68(d, 1H, J=2,3 Hz, 4-H); 6,76(dd, 1H, J=8,5 Hz, J=2,3 Hz, 2-H); 7,17-7,20(átfedő multiplettek, 6H, 1-H, C=CH, 2 -H, 3 -H, 5 -H és 6 -H). 13 C-NMR δ ppm 14,6(C-18); 15,9(C-16a); 21,1(4 -CH 3 ); 24,9; 26,4; 27,4; 30,6; 31,2; 35,6; 38,7; 41,7; 43,5; 45,3; 54,2(NCH 2 ); 62,1(OCH 2 ); 71,3(C-17); 112,4(C-2); 114,4(C-4); 122,4(C=CH); 126,5(C- 1); 128,2(2C: C-3,5 ); 129,7(2C: C-2,6 ); 131,3 és 133,5(C-10 és C-4 ); 138,1(C-5); 138,7(C-1 ); 144,7(C=CH); 156,0(C-3). 105c: 1 H-NMR δ ppm 0,77(s, 3H, 18-H 3 ); 0,91(t, 3H, J=6,9 Hz, 16a-H 3 ); 1,24(d, 6H, 2xiPr- CH 3 ); 2,83(m, 2H, 6-H 2 ); 3,33 és 3,52(2xd, 2x1H, J=10,9 Hz, 17-H 2 ); 5,19(s, 2H, NCH 2 ); 5,50(s, 2H, OCH 2 ); 6,68(d, 1H, J=2,3 Hz, 4-H); 6,75(dd, 1H, J=8,5 Hz, J=2,3 Hz, 2-H); 7,22-7,24(átfedő multiplettek, 5H, 1-H, 2 -H, 3 -H, 5 -H és 6 -H); 7,55 (s, 1H, C=CH). 13 C- NMR δ ppm 14,6 és 15,9(C-18 és C-16a); 23,8(2C: 2xiPr-CH3); 24,9; 26,4; 27,4; 30,6; 31,2; 33,8(iPr-CH); 35,6; 38,7; 41,7; 43,5; 45,2; 54,0(NCH 2 ); 62,0(OCH 2 ); 71,2(C-17); 112,3(C-2); 114,3(C-4); 122,5(C=CH); 126,5(C-1); 127,1(2C: C-3,5 ); 128,2(2C: C-2,6 ); 131,7(C-1 ); 133,5(C-10); 138,1(C-5); 144,7(C-4 ); 149,6(C=CH); 156,1(C-3). 105d: 1 H-NMR δ ppm 0,77(s, 3H, 18-H 3 ); 0,91(t, 3H, J=6,9 Hz, 16a-H 3 ); 1,31(s, 9H, 3x t Bu- CH 3 ); 2,83(m, 2H, 6-H 2 ); 3,33 és 3,52(2xd, 2x1H, J=10,9 Hz, 17-H 2 ); 5,18(s, 2H, NCH 2 ); 5,50(s, 2H, OCH 2 ); 6,68(d, 1H, J=2,3 Hz, 4-H); 6,77(dd, 1H, J=8,5 Hz, J=2,3 Hz, 2-H); 7,20-7,24(átfedő multiplettek, 3H, 1-H, 2 -H és 6 -H); 7,39(d, 2H, J=8,1 Hz, 3 -H és 5 -H); 7,54 (s, 1H, C=CH). 13 C-NMR δ ppm 14,7 és 15,9(C-18 és C-16a); 24,9; 26,4; 27,4; 29,7; 30,7; 31,1(3C: C(CH 3 ) 3 ); 34,6(C(CH 3 ) 3 ); 35,6; 38,7; 41,7; 43,5; 45,2; 54,0(NCH 2 ); 62,1(OCH 2 ); 71,3(C-17); 112,4(C-2); 114,4(C-4); 122,5(C=CH); 126,0(2C: C-3,5 ); 135

126,6(C-1); 127,9(2C: C-2,6 ); 131,3(C-1 ); 133,5(C-10); 138,1(C-5); 144,8(C-4 ); 151,9(C=CH); 156,0(C-3). 105e: 1 H-NMR δ ppm 0,77(s, 3H, 18-H 3 ); 0,91(t, 3H, J=6,9 Hz, 16a-H 3 ); 2,83(m, 2H, 6-H 2 ); 3,34 és 3,52(2xd, 2x1H, J=10,9 Hz, 17-H 2 ); 5,19(s, 2H, NCH 2 ); 5,64(s, 2H, OCH 2 ); 6,67(d, 1H, J=2,3 Hz, 4-H); 6,76(dd, 1H, J=8,5 Hz, J=2,3 Hz, 2-H); 7,21(d, 1H, J =8,5 Hz, 1-H); 7,40(d, 2H, J=8,6 Hz, 2 -H, 6 -H); 7,62 (s, 1H, C=CH); 8,22(d, J=8,6 Hz, 2H, 3 -H, 5 - H). 13 C-NMR δ ppm 14,6(C-18); 15,9(C-16a); 24,9; 26,4; 27,4; 30,7; 31,2; 35,6; 38,7; 41,7; 43,5; 45,2; 53,1(NCH 2 ); 62,0(OCH 2 ); 71,2(C-17); 112,3(C-2); 114,3(C-4); 122,8(CH=C); 124,3(2C: C-3,5 ); 126,6(C-1); 128,6(2C: C-2,6 ); 133,7(C-10); 138,2(C-5); 141,5 és 145,5(C-1 és C=CH); 148,1(C-4 ); 155,9(C-3). 106a: 1 H-NMR δ ppm 0,89(t, 3H, J=7,2 Hz, 16a-H 3 ); 1,00(s, 3H, 18-H 3 ); 2,80(m, 2H, 6-H 2 ); 3,44 és 3,70(2xd, 2x1H, J=10,9 Hz, 17-H 2 ); 5,13(s, 2H, NCH 2 ); 5,50(s, 2H, OCH 2 ); 6,66(d, 1H, J=2,4 Hz, 4-H); 6,73(dd, 1H, J=8,5 Hz, J=2,1 Hz, 2-H); 7,16(d, 1H, J =8,5 Hz, 1-H); 7,24(d, 2H, J=7,6 Hz, 2 -H és 6 -H), 7,35(átfedő multiplettek, 3H, 3 -H, 4 -H és 5 -H); 7,51 (s, 1H, C=CH). 13 C-NMR δ ppm 14,5(C-16a); 24,9(C-18); 25,5; 26,6; 27,7; 30,5; 30,9; 35,2; 38,5; 41,6; 43,7; 51,4; 54,2(NCH 2 ); 62,0 és 64,0(2xOCH 2 ); 112,3(C-2); 114,3(C-4); 122,5(C=CH); 126,5(C-1); 128,1(2C: C-3,5 ); 128,8(C-4 ); 129,1(2C: C-2,6 ); 133,4(C- 10); 134,4(C-1 ); 137,9(C-5); 145,0(C=CH); 156,0(C-3). 106b: 1 H-NMR δ ppm 0,90(t, 3H, J=7,5 Hz, 16a-H 3 ); 1,02(s, 3H, 18-H 3 ); 2,36(s, 3H, 4 - CH 3 ); 2,82(m, 2H, 6-H 2 ); 3,47 és 3,73(2xd, 2x1H, J=10,9 Hz, 17-H 2 ); 5,14(s, 2H, NCH 2 ); 5,48(s, 2H, OCH 2 ); 6,68(s, 1H, 4-H); 6,76(d, 1H, J=7,8 Hz, 2-H); 7,17(átfedő multiplettek, 6H, 1-H, C=CH, 2,3,5,6 -H). 13 C-NMR δ ppm 14,6(C-16a); 21,1(4 -CH 3 ); 24,9(C-18); 25,5; 26,6; 27,7; 30,5; 30,9; 35,2; 38,6; 41,7; 43,7; 51,4; 54,2(NCH 2 ); 62,0 és 64,1(2xOCH 2 ); 112,4(C-2); 114,3(C-4); 122,4(C=CH); 126,5(C-1); 128,2(2C: C-3,5 ); 129,8(2C: C-2,6 ); 131,3(C-4 ); 133,4(C-10); 137,9(C-5); 138,8(C-1 ); 144,7(C=CH); 156,0(C-3). 106c: 1 H-NMR δ ppm 0,91(t, 3H, J=6,8 Hz, 16a-H 3 ); 1,02(s, 3H, 18-H 3 ); 1,24(d, 2x3H, J=11,4 Hz, 2xiPr-CH3); 2,82(m, 2H, 6-H 2 ); 2,90(m, 1H, ipr-ch); 3,47 és 3,73(2xd, 2x1H, J=10,8 Hz, 17-H 2 ); 5,15(s, 2H, NCH 2 ); 5,49(s, 2H, OCH 2 ); 6,68(d, 1H, J=2,2 Hz, 4H); 6,76(dd, 1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2-H); 7,19 7,23(átfedő multiplettek, 5H, 1-H, 2,3,5,6 - H); 7,57(s, 1H, C=CH). 13 C-NMR δ ppm 14,5(C-16a); 23,8(2C: 2xiPr-CH 3 ); 24,8(C-18); 25,5; 26,6; 27,7; 30,6; 31,0; 33,8(iPr-CH); 35,2; 38,6; 41,7; 43,7; 51,4; 54,2(NCH 2 ); 62,1(OCH 2 ); 64,1(C-17); 112,4(C-2); 114,4(C-4); 122,6(C=CH); 126,5(C-1); 127,2(2C: C-3,5 ); 128,2(2C: C-2,6 ); 131,7(C-1 ); 133,4(C-10); 137,9(C-5); 149,7(C-4 ); 150,1(C=CH); 156,0(C-3). 106d: 1 H-NMR δ ppm 0,91(t, 3H, J=7,2 Hz, 16a-H 3 ); 1,02(s, 3H, 18-H 3 ); 1,32(s, 3x3H, 3x t Bu-CH 3 ); 2,82(m, 2H, 6-H 2 ); 3,47 és 3,73(2xd, 2x1H, J=10,9 Hz, 17-H 2 ); 5,16(s, 2H, NCH 2 ); 5,49(s, 2H, OCH 2 ); 6,67(d, 1H, J=2,2 Hz, 4H); 6,76(dd, 1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2- H); 7,18(d, 1H, J=8,6 Hz, 1-H); 7,21(d, 2H, J=8,2 Hz, 2, 6 -H); 7,39(d, 2H, J=8,2 Hz, 3, 5 -H); 7,54(s, 1H, C=CH). 13 C-NMR δ ppm 14,5(C-16a); 24,9(C-18); 25,5; 26,6; 27,7; 30,5; 30,9; 31,2(3C: C(CH 3 ) 3 ); 34,6(C(CH 3 ) 3 ); 35,2; 38,6; 41,7; 43,7; 51,4; 54,0(NCH 2 ); 62,1(OCH 2 ); 64,1(C-17); 112,4(C-2); 114,3(C-4); 122,6(C=CH); 126,0(2C: C-3,5 ); 136

126,5(C-1); 127,9(2C: C-2,6 ); 131,3(C-1 ); 133,4(C-10); 137,9(C-5); 144,7(C-4 ); 151,9(C=CH); 156,0(C-3). 106e: 1 H-NMR δ ppm 0,91(t, 3H, J=6,9 Hz, 16a-H 3 ); 1,02(s, 3H, 18-H 3 ); 2,82(m, 2H, 6-H 2 ); 3,47 és 3,73(2xd, 2x1H, J=10,9 Hz, 17-H 2 ); 5,19(s, 2H, NCH 2 ); 5,65(s, 2H, OCH 2 ); 6,68(s, 1H, 4-H); 6,76(d, 1H, J=8,6 Hz, 2-H); 7,20(d, 1H, J=8,6 Hz, 1-H); 7,40(d, 2H, J=8,3 Hz, 2,6 -H); 7,64(s, 1H, C=CH); 8,23(d, 2H, J=8,5 Hz, 3,5 -H). 13 C-NMR δ ppm 14,5(C-16a); 24,9(C-18); 25,5; 26,6; 27,7; 30,6; 31,0; 35,2; 38,6; 41,7; 43,7; 51,4; 53,3(NCH 2 ); 62,0(OCH 2 ); 64,1(C-17); 112,3(C-2); 114,4(C-4); 124,3(2C: C-3,5 ); 124,8(C=CH); 126,6(C-1); 128,6(2C: C-2,6 ); 133,6(C-10); 138,0(C-5); 141,4(C-1 ); 144,0(C=CH); 144,8(C-4 ); 155,9(C-3). 107a: 1 H-NMR δ ppm 0,88(t, 3H, J=6,8 Hz, 16a-H 3 ); 1,06(s, 3H, 18-H 3 ); 2,83(m, 2H, 6-H 2 ); 5,16(s, 2H, OCH 2 ); 5,53(s, 2H, NCH 2 ); 6,69(d, 1H, J=2,2 Hz, 4-H); 6,77(dd, 1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2-H); 7,18(d, 1H, J=8,6 Hz, 1-H); 7,26 7,29(átfedő multiplettek, 3H: 3,4,5 -H); 7,37(s, 1H, 17-H); 7,38(d, 2H, J=7,3 Hz, 2,6 -H); 7,52(s, 1H, C=CH); 13 C-NMR δ ppm 14,5 és 15,4(C-16a és C-18); 24,3; 25,9; 27,2; 30,4; 32,2; 37,4; 40,9; 41,3(C-13); 43,3; 47,9; 54,3(NCH 2 ); 62,2(OCH 2 ); 112,5(C-2); 114,4(C-4); 122,5(C=CH); 126,5(C-1); 128,1(2C) és 129,1(2C): C-2 ;3 ;5 ;6 ; 128,8(C-4 ); 132,9(C-10); 134,4(C-1 ); 137,9(C-5); 149,0(C=CH); 156,2(C-3); 160,5(C-17). 107c: 1 H-NMR δ ppm 0,88(t, 3H, J=6,8 Hz, 16a-H 3 ); 1,06(s, 3H, 18-H 3 ); 1,25(átfedő multiplettek, 6H, 2xiPr-CH 3 ); 2,83(m, 2H, 6-H 2 ); 5,17(s, 2H, OCH 2 ); 5,49(s, 2H, NCH 2 ); 6,69(d, 1H, J=2,2 Hz, 4-H); 6,77(dd, 1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2-H); 7,18(d, 1H, J=8,6 Hz, 1- H); 7,20 7,24(átfedő multiplettek, 4H, 2,3,5,6 -H); 7,29(s, 1H,(17-H); 7,53(s, 1H, C=CH); 13 C-NMR δ ppm 14,5 és 15,4(C-16a és C-18); 23,9(2C: 2xiPr-CH 3 ); 24,3; 25,9; 27,2; 30,4; 32,1; 33,8; 37,4; 40,9; 41,3(C-13); 43,3; 47,9; 54,1(NCH 2 ); 62,1(OCH 2 ); 112,5(C-2); 114,4(C-4); 122,4(C=CH); 126,5(C-1); 127,2(2C) és 128,2(2C): C-2 ;3 ;5 ;6 ; 131,6(C-1 ); 132,9(C-10); 137,9(C-5); 145,3(C=CH); 149,7(C-4 ); 156,0(C-3); 160,4(C-17). 107e: 1 H-NMR δ ppm 0,88(t, 3H, J=6,8 Hz, 16a-H 3 ); 1,05(s, 3H, 18-H 3 ); 2,83(m, 2H, 6-H 2 ); 5,19(s, 2H, OCH 2 ); 5,65(s, 2H, NCH 2 ); 6,69(d, 1H, J=2,2 Hz, 4-H); 6,77(dd, 1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2-H); 7,19(d, 1H, J=8,6 Hz, 1-H); 7,29(s, 1H,(17-H); 7,40(d, 2H, J=8,6 Hz, 2 -H és 6 -H); 7,61(s, 1H, C=CH); 8,22(d, 2H, J=8,6 Hz, 3 -H és 5 -H); 13 C-NMR δ ppm 14,5 és 15,4(C-16a és C-18); 24,3; 26,0; 27,2; 30,4; 32,1; 37,4; 40,9; 41,3(C-13); 43,3; 47,9; 53,1(NCH 2 ); 62,0(OCH 2 ); 112,4(C-2); 114,4(C-4); 122,7(C=CH); 124,3(2C) és 128,6(2C): C- 2 ;3 ;5 ;6 ; 126,6(C-1); 133,0(C-10); 138,0(C-5); 141,5 és 145,6 és 148,1(C-1 és C-4 és C=CH); 156,0(C-3); 160,4(C-17). 108a: 1 H-NMR δ ppm 0,92(t, 3H, J=6,8 Hz, 16a-H 3 ); 1,17(s, 3H, 18-H 3 ); 2,82(m, 2H, 6-H 2 ); 5,17(s, 2H, OCH 2 ); 5,53(s, 2H, NCH 2 ); 6,67(d, 1H, J=2,2 Hz, 4-H); 6,75(dd, 1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2-H); 7,17(d, 1H, J=8,6 Hz, 1-H); 7,27 7,37(átfedő multiplettek, 6H: 2,3,4,5,6 -H és 17-H); 7,54(s, 1H, C=CH). 13 C-NMR ppm 14,5 és 26,4(C-16a és C-18); 25,1; 27,3; 29,7; 30,5; 31,9; 38.9; 40,9; 42,8; 43,5; 51,4; 54,6(NCH 2 ); 61,9(OCH 2 ); 112,5(C- 2); 114,4(C-4); 126,6(C-1); 127,3(C=CH); 128,2(2C) és 129,2(2C): C-2,3,5,6 ; 128,9(C- 4 ); 131,5(C-1 ); 133,1(C-10); 137,9(C-5); 149,0(C=CH); 156,7(C-3), 163,7(C-17). 137

108c: 1 H-NMR δ ppm 0,91(t, 3H, J=6,8 Hz, 16a-H 3 ); 1,18(s, 3H, 18-H 3 ); 1,24(átfedő multiplettek, 6H, 2xiPr-CH 3 ); 2,82(m, 2H, 6-H 2 ); 2,90(m, 1H, ipr-ch); 5,13(s, 2H, OCH 2 ); 5,49(s, 2H, NCH 2 ); 6,69(d, 1H, J=2,2 Hz, 4-H); 6,77(dd, 1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2-H); 7,18 7,23(átfedő multiplettek, 6H, 2,3,5,6 -H és C=CH és 17-H). 13 C-NMR δ ppm 14,2 és 26,1(C-16a és C-18); 23,6(2C: 2xiPr-CH 3 ); 24,8; 27,0; 29,4; 30,2; 31,6; 33,5(iPr-CH); 38,7; 40,6; 42,5; 43,3; 51,2; 54,5(NCH 2 ); 61,8(OCH 2 ); 112,2(C-2); 114,1(C-4); 122,4(C=CH); 126,3(C-1); 126,9(2C) és 128,1(2C): C-2,3,5,6 ; 131,3(C-1 ); 132,7(C-10); 137,7(C-5); 144,8(C=CH); 149,5(C-4 ); 155,8(C-3); 162,8(C-17). 108e: 1 H-NMR δ ppm 0,91(t, 3H, J=6,8 Hz, 16a-H 3 ); 1,18(s, 3H, 18-H 3 ); 2,81(m, 2H, 6-H 2 ); 5,18(s, 2H, OCH 2 ); 5,65(s, 2H, NCH 2 ); 6,67(d, 1H, J=2,2 Hz, 4-H); 6,75(dd, 1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2-H); 7,16(d, 1H, J=8,6 Hz, 1-H); 7,39(d, 2H, J=8,6 Hz, 2,6 -H); 7.55(s, 1H, 17- H); 7,74(s, 1H, C=CH); 8,21(d, 2H, J=8,6 Hz, 3,5 -H). 13 C-NMR δ ppm 14,5 és 26,4(C-16a és C-18); 25,1; 27,2; 29,7; 30,5; 31,8; 38,9; 40,9; 42,8; 43,5; 51,4; 53,5(NCH 2 ); 61,9(OCH 2 ); 112,4(C-2); 114,4(C-4); 122,7(C=CH); 124,3(2C) és 128,7(2C): C-2,3,5,6 ; 126,7(C-1); 133,1(C-10); 138,0(C-5); 141,4 és 145,6 és 148,1(C-1 és C-4 és C=CH); 155,9(C-3); 163,1(C-17). 109a: 1 H-NMR δ ppm 1,05(s, 3H, 18-H 3 ); 2,80(m, 2H, 6-H 2 ); 5,14(s, 2H, NCH 2 ); 5,51(s, 2H, OCH 2 ); 6,67(s, 1H, 4-H); 6,75(dd, J= 8,5 Hz, J= 2,0 Hz, 1H, 2-H); 7,16(d, J= 8,5 Hz, 1H, 1- H); 7,27(m, 2H, 2 -H, 6 -H); 7,36(m, 3H, 3 -H, 4 -H, 5 -H); 7,50(s, 1H, C=CH). 13 C-NMR δ ppm 21,0; 25,1(C-18); 28,2; 28,3; 30,3; 32,0; 33,4; 41,4(2C: C-8, C-9); 49,3(C-14); 50,1(C- 13); 54,2(NCH 2 ); 62,1(OCH 2 ); 112,5(C-2); 114,4(C-4); 122,4(C=CH); 126,9(C-1); 128,1(2C: C-3, C-5 ); 128,8(C-4 ); 129,1(2C: C-2, C-6 ); 132,6(C-10); 134,4(C-1 ); 138,1(C-5); 144,9(C=CH); 156,1(C-3); 221,5(C-17). MS m/z (%): 442 (100, [M+H] + ), 144 (22), 91 (14, Bn). 109b: 1 H-NMR δ ppm 1,05(s, 3H, 18-H 3 ); 2,35(s, 3H, 4 -CH 3 ); 2,80(m, 2H, 6-H 2 ); 5,13(s, 2H, NCH 2 ); 5,47(s, 2H, OCH 2 ); 6,66(s, 1H, 4-H); 6,74(dd, J= 8,5 Hz, J= 2,0 Hz, 1H, 2-H); 7,15 7,17(átfedő multiplettek, 5H, 1-H, 2 -H, 3 -H, 5 -H, 6 -H); 7,49(s, 1H, C=CH). 13 C- NMR δ ppm 21,0; 21,1(4 -CH 3 ); 25,1(C-18); 28,3; 29,7; 30,3; 32,0; 33,4; 41,4(2C: C-8, C-9); 49,3(C-14); 50,1(C-13); 54,1(NCH 2 ); 62,1(OCH 2 ); 112,5(C-2); 114,4(C-4); 122,4(C=CH); 126,9(C-1); 128,1(2C: C-3, C-5 ); 129,8(2C: C-2, C-6 ); 131,4(C-10); 132,6(C-4 ); 138,1(C-5); 138,7(C-1 ); 144,7(C=CH); 156,1(C-3); 221,5(C-17). MS m/z (%): 456 (100, [M+H] + ), 158 (29), 105 (27, p-xilol). 109c: 1 H-NMR δ ppm 1,05(s, 3H, 18-H 3 ); 1,24(m, 2x3H, 2xiPr-CH3); 2,80(m, 2H, 6-H 2 ); 2,91(m, 1H, ipr-ch); 5,13(s, 2H, NCH 2 ); 5,48(s, 2H, OCH 2 ); 6,68(s, 1H, 4-H); 6,75(d, J= 8,5 Hz, 1H, 2-H); 7,15 7,22(átfedő multiplettek, 5H, 1-H, 2 -H, 3 -H, 5 -H, 6 -H); 7,65(s, 1H, C=CH). 13 C-NMR δ ppm 20,6; 23,5(2xiPr-CH 3 ); 24,7(C-18); 27,8; 27,9; 29,3; 29,9; 31,7; 33,1; 33,4(iPr-CH); 41,1(2C: C-8, C-9); 48,9(C-14); 49,7(C-13); 53,9(NCH 2 ); 61,7(OCH 2 ); 112,2(C-2); 114,1(C-4); 125,9(C=CH); 126,5(C-1); 126,8(2C: C-3, C-5 ); 127,8(2C: C-2, C-6 ); 131,3(C-10); 132,2(C-4 ); 137,7(C-5); 149,3(C-1 ); 155,8(C-3); 221,1(C-17). MS m/z (%): 484 (100, [M+H] + ), 133 (33, 1-metil-4-(propán-2-il)benzol). 109d: 1 H-NMR δ ppm 1,05(s, 3H, 18-H 3 ); 1,31(s, 3x3H, 3x t Bu-CH3); 2,81(m, 2H, 6-H 2 ); 5,11(s, 2H, NCH 2 ); 5,50(s, 2H, OCH 2 ); 6,69(s, 1H, 4-H); 6,78(m, 1H, 2-H); 7,16 7,20(átfedő 138

multiplettek, 3H, 1-H, 2 -H, 6 -H); 7,39(d, 2H, 3 -H, 5 -H). 13 C-NMR δ ppm 20,9; 25,1(C- 18); 28,2; 28,3; 30,3; 31,2(3C: C(CH 3 ) 3 ); 32,0; 33,4; 34,6; 37,5(C(CH 3 ) 3 ); 41,4(2C: C-8, C-9); 49,2(C-14); 49,8(C-13); 50,1(NCH 2 ); 62,1(OCH 2 ); 112,5(C-2); 114,4(C-4); 122,8(C=CH); 125,9(2C: C-3, C-5 ); 126,9(C-1); 127,9(2C: C-2, C-6 ); 131,3(C-10); 132,6(C-1 ); 138,1(C-5); 151,9(C-4 ); 156,1(C-3); 221,5(C-17). MS m/z (%): 498 (100, [M+H] + ), 147 (36, 1-(terc-butil)-4-metilbenzol). 109e: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,96(s, 3H, 18-H 3 ); 2,74(m, 2H, 6-H 2 ); 5,08(s, 2H, NCH 2 ); 5,78(s, 2H, OCH 2 ); 6,69(s, 1H, 4-H); 6,75(dd, J= 8,5 Hz, J= 2,0 Hz, 1H, 2-H); 7,16(d, J= 8,5 Hz, 1H, 1-H); 7,52(d, J= 8,6 Hz, 2H, 2 -H, 6 -H); 8,23(d, J= 8,6 Hz, 2H, 3 -H, 5 -H); 8,31(s, 1H, C=CH). 13 C-NMR δ ppm 20,4; 24,5(C-18); 27,6; 27,9; 29,7; 31,5; 32,8; 40,7(2C: C-8, C- 9); 48,5(C-14); 49,4(C-13); 51,8(NCH 2 ); 60,9(OCH 2 ); 112,4(C-2); 114,1(C-4); 123,8(2C: C- 3, C-5 ); 124,8(C=CH); 126,7(C-1); 128,9(2C: C-2, C-6 ); 131,9(C-10); 137,8(C-5); 143,3 és 143,4(C-1 és C=CH); 147,2(C-4 ); 155,7(C-3); 220,6(C-17). MS m/z (%): 487 (100, [M+H] + ), 143 (18). 110aa: 1 H-NMR δ ppm 1,05(s, 3H, 18-H 3 ); 2,74(m, 2H, 6-H 2 ); 3,68(s, 3H, OCH 3 ); 4,29(m, 2H, HN-CH 2 ); 4,81(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,55(s, 2H, N-CH 2 ); 5,71(m, 1H, 16-H); 6,59(d, 1H, J=2,2Hz, 4-H); 6,67(dd, 1H, J=8,6Hz, J=2,2Hz, 2-H); 7,16(d, 1H, J=8,6Hz, 1-H); 7,29-7,36 átfedő multiplettek: 2 -H, 3 -H, 4 -H, 5 -H, 6 -H; 7,84(m, 1H, C=CH); 8,12(m, 1H, NH); 13 C-NMR δ ppm 15,2(C-18); 25,8; 26,9; 29,6; 34,6; 34,7; 36,9; 40,8; 42,5; 45,0; 46,7; 52,6; 54,8(OCH 3 ); 111,6(C-2); 113,0(C-4); 114,3(C-16a); 122,8(C=CH); 126,3(C-1); 127,8(2C: C- 2,C-6 ); 128,0(C-4 ); 128,7(2C, C-3, C-5 ); 131,8(C-10); 136,1(C-1 ); 137,3(C-5); 139,5(C-16); 145,8(C=CH); 157,0(C-3); 177,4(C-17). MS m/z (%): 485 (MH +, 100), 486 (36). 110ab: 1 H-NMR δ ppm 1,14(s, 3H, 18-H 3 ); 2,34(s, 3H, 4 -CH 3 ); 2,81(m, 2H, 6-H 2 ); 3,77(s, 3H, OCH 3 ); 4,47(m, 2H, HN-CH 2 ); 4,80(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,44(m, 2H, N-CH 2 ); 5,71(m, 1H, 16-H); 6,62(m, 1H, J=2,2Hz, 4-H); 6,65(m, 1H, NH); 6,70(dd, 1H, J=2,2Hz, 2-H); 7,15(átfedő multiplettek, 5H: 1-H és 2 -H, 3 -H, 5 -H, 6 -H); 7,46(s, 1H, C=CH); 13 C-NMR δ ppm 15,2(C-18); 24,1(4 -CH 3 ); 25,9; 27,2; 30,2; 35,0; 35,2; 37,8; 40,9; 42,9; 45,5; 47,3; 54,0(N-CH 2 ); 55,2(OCH 3 ); 111,6(C-2); 113,4(C-4); 114,6(C-16a); 122,2(C=CH); 126,3(C-1); 128,1 és 129,7(2x2C: C-2,C-3, C-5, C-6 ); 131,3(C-1 ); 132,0(C-10); 137,8(C-5); 138,7(C-4 ); 139,0(C-16); 145,2(C=CH); 157,5(C-3); 178,4(C-17). MS m/z (%): 499 (MH +, 100), 500 (38). 110ae: 1 H-NMR δ ppm 1,15(s, 3H, 18-H 3 ); 2,82(m, 2H, 6-H 2 ); 3,77(s, 3H, OCH 3 ); 4,51(m, 2H, HN-CH 2 ); 4,82(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,61(m, 2H, N-CH 2 ); 5,71(m, 1H, 16-H); 6,62(d, 1H, J=2,2Hz, 4-H); 6,70(dd, 1H, J=8,6Hz, J=2,2Hz, 2-H); 7,17(d, 1H,J=8,6Hz, 1-H); 7,39(d, 2H, J=8,5Hz, 2 -H, 6 -H); 8,21(d, 2H, J=8,2Hz, 3 -H,5 -H); 7,61(s, 1H, C=CH). 13 C-NMR δ ppm 15,2(C-18); 25,9; 27,2; 29,6; 34,9; 35,2; 37,9; 40,9; 42,9; 45,6; 47,4; 53,2; 55,2(OCH 3 ); 111,6(C-2); 113,4(C-4); 114,3(C-16a); 124,3(3C: C=CH, C-2,6 ); 126,3(C-1); 128,6(2C: C- 3,5 ); 132,0(C-10); 137,8(C-5); 138,6(C-16); 139,6(C-1 ); 141,3(C-4 ); 145,2(C=CH); 157,5(C-3); 178,6(C-17). MS m/z (%): 159 (100), 59 (50), 552 (38), 530 (MH +, 31). 110ba: 1 H-NMR δ ppm 1,15(s, 3H, 18-H 3 ); 2,82(s, 2H, 6-H 2 ); 4,50(m, 2H, HN-CH 2 ); 4,80(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,02(s, 2H, OCH 2 ); 5,50(s, 2H, N-CH 2 ); 5,70(m, 1H, 16-H); 6,70(d, 1H, 139

J=2,2Hz, 4-H); 6,74(m, 1H, NH); 6,77(dd, 1H, J=8,6Hz, J=2,2Hz, 2-H); 7,16(d, 1H, J=8,6Hz, 1-H); 7,27(m, 2H) és 7,31(m, 1H) és 7,37(m, 5H) és 7,42(m, 2H): benzil aromás protonok; 7,52(s, 1H, C=CH); 13 C-NMR δ ppm 15,3(C-18); 25,9; 27,2; 30,2; 34,9; 35,2; 37,8; 41,0; 42,9; 45,5; 47,3; 54,3; 69,9(OCH 2 ); 112,4(C-2); 114,0(C-4), 114,2(C-16a); 122,6(C=CH); 126,3(C-1); 127,4(2C) és 127,8 és 128,1(2C) és 128,5(2C) és 128,9 és 129,1(2C):C-2, C-3, C-4, C-5, C-6, C-2, C-3, C-4, C-5, C-6 ; 132,5(C-10); 134,2(C-1 ); 137,2(C-1 ); 137,9(C-5); 138,8(C-16); 145,4(C=CH); 156,8(C-3); 178,4(C-17). MS m/z (%): 561 (MH +, 100), 562 (44). 110bb: 1 H-NMR δ ppm 1,15(s, 3H, 18-H 3 ); 2,35(s, 3H, 4 -CH 3 ); 2,81(m, 2H, 6-H 2 ); 4,48(m, 2H, HN-CH 2 ); 4,80(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,03(s, 2H, OCH 2 ); 5,44(s, 2H, N-CH 2 ); 5,71(m, 1H, 16- H); 6,65(m, 1H, NH); 6,70(d, 1H, J=2,2Hz, 4-H); 6,77(dd, 1H, J=2,2Hz, J=8,6Hz, 2-H); 7,17(átfedő multiplettek, 5H, 1-H, 2 -H, 3 -H, 5 -H, 6 -H); 7,31(t, 1H, J=7,3Hz, 4 -H); 7,37(t, 2H, J=7,3Hz, 3 -H, 5 -H); 7,42(d, 2H, J=7,3Hz, 2 -H, 6 -H); 7,49(s, 1H, C=CH); 13 C- NMR δ ppm 14,9(C-18); 20,8(4 -CH 3 ); 25,6; 26,8; 29,8; 34,6; 34,8; 37,5; 40,6; 42,6; 45,2; 46,9; 53,7; 69,6(OCH 2 ); 112,0(C-2); 114,1(C-4); 114,2(C-16a); 121,9(C=CH); 126,0(C-1); 127,0(2C) és 127,4 és 127,8(2C) és 128,1(2C) és 129,4(2C): C-2, C-3, C-4, C-5, C-6, C- 2, C-3, C-5, C-6 ; 130,9(C-1 ); 132,1(C-10); 136,9(C-1 ); 137,5(C-5); 138,4(C-16); 144,8(C-4 ); 145,6(C=CH); 156,4(C-3); 178,0(C-17). MS m/z (%): 575 (MH +, 100), 576 (42), 597 (34). 110bc: 1 H-NMR δ ppm 1,14(s, 3H, 18-H 3 ); 1,24(d, 6H, J=7,0Hz, CH(CH 3 ) 2 ); 2,80(m, 2H, 6- H 2 ); 2,91(m, 1H, CH(CH 3 ) 2 ); 4,41(m, 2H, HN-CH 2 ); 4,80(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,02(s, 2H, OCH 2 ); 5,44(s, 2H, N-CH 2 ); 5,68(m, 1H, 16-H); 6,69(d, 1H, J=2,2Hz, 4-H); 6,77(dd, 1H; J=2,2Hz, J=8,6Hz, 2-H); 6,89(m, 1H, NH); 7,18-7,23(átfedő multiplettek, 5H, 1-H, 2 -H, 3 - H, 5 -H, 6 -H); 7,31(t, 1H, J=7,3Hz, 4 -H); 7,37(t, 2H, J=7,3Hz, 3 -H, 5 -H); 7,42(d, 2H, J=7,3Hz, 2 -H, 6 -H); 7,50(C=CH); 13 C-NMR δ ppm 15,2(C-18); 23,9(2C: CH(CH 3 ) 2 ); 25,9; 27,2; 30,2; 33,9(CH(CH 3 ) 2 ); 34,6; 35,2; 37,8; 41,0; 42,9; 45,5; 47,3; 54,3; 69,9(OCH 3 ); 112,4(C-2); 114,3(C-16a); 114,5(C-4); 122,4(C=CH); 126,3(C-1); 127,2(2C) és 127,4(2C) és 128,3(2C) és 128,5(2C): C-2, C-3, C-5, C-6, C-2, C-3, C-5, C-6 ; 127,8(C-4 ); 131,4(C-1 ); 132,5(C-10); 137,3(C-1 ); 137,9(C-5); 138,7(C-16); 145,0(C=CH); 149,8(C-4 ); 156,8(C-3); 178,0(C-17). MS m/z (%): 603 (MH +, 100), 542 és 604 (42). 110bd: 1 H-NMR δ ppm 1,15(s, 3H, 18-H 3 ); 1,31(s, 9H, C(CH 3 ) 3 ); 2,81(m, 2H, 6-H 2 ); 4,45(m, 2H, HN-CH 2 ); 4,78(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,02(s, 2H, OCH 2 ); 5,45(s, 2H, N-CH 2 ); 5,71(m, 1H, 16- H); 6,70(d, 1H, J=2,2Hz, 4-H); 6,77(dd, 1H; J=8,6Hz, J=2,2Hz, 2-H); 7,16(d, 1H, J=8,6Hz, 1-H); 7,20(d, 2H, J=8,2Hz, 2 -H, 6 -H); 7,31(t, 1H, J=7,3Hz, 4 -H); 7,36-7,43(átfedő multiplettek, 6H, 2 -H, 3 -H,5 -H, 6 -H, 3 -H, 5 -H); 7,50(C=CH); 13 C-NMR δ ppm 15,2(C- 18); 31,2(3C: C(CH 3 ) 3 ); 25,9; 27,2; 29,7; 30,2; 34,7; 35,2; 37,8(C(CH 3 ) 3 ); 40,9; 42,9; 45,5; 47,3; 54,2; 69,9(OCH 2 ); 112,4(C-2); 114,6(C-4); 114,6(C-16a); 122,5(C=CH); 126,1(2C: C- 3, C-5 ); 126,3(C-1); 127,4(2C: C-2, C-6 ); 127,8(C-4'); 128,0(2C: C-2, C-6 ); 128,5(2C, C-3', C-5'); 131,1(C-1 ); 132,5(C-10); 137,2(C-1 ); 137,9(C-5); 138,9(C-16); 145,0; 152,1; 156,8(C-3); 178,4(C-17). MS m/z (%): 617 (MH +, 100), 618 (44). 110be: 1 H-NMR δ ppm 1,15(s, 3H, 18-H 3 ); 2,82(m, 2H, 6-H 2 ); 4,51(m, 2H, HN-CH 2 ); 4,82(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,02(s, 2H, OCH 2 ); 5,60(s, 2H, N-CH 2 ); 5,71(m, 1H, 16-H); 6,55(s, 1H, NH); 6,70(d, 1H, J=2,2Hz, 4-H); 6,77(dd, 1H, J=8,6Hz, J=2,2Hz, 2-H); 7,10(d, 1H, J=8,6Hz, 140

1-H); 7,31(m, 1H, 4'-H); 7,36-7,43(átfedő multiplettek, 6H, 2'-H, 3'-H, 5'-H, 6'-H, 2 -H, 6 - H); 7,60(s, 1H, C=CH); 8,21(m, 2H, 3 -H, 5 -H); 13 C-NMR δ ppm 15,2(C-18); 25,9; 27,2; 30,1; 35,1; 35,2; 37,9; 40,9; 42,9; 45,6; 47,4; 53,1; 69,9(OCH 2 ); 112,5(C-2); 114,5(C-4); 114,7(C-16a); 124,3(C=CH); 124,3(2C) és 126,3 és 127,4(2C) és 127,8 és 128,5(2C) és 128,6(2C): C-1, C-2, C-3, C-4, C-5, C-6 C-2, C-3, C-5, C-6 ; 132,4(C-10); 136,8(C- 1 ); 137,8(C-5); 139,0(C-16); 139,6(C-1 ); 141,4(C-4 ); 145,8(C=CH); 156,8(C-3); 178,6(C- 17). MS m/z (%): 606 (MH +, 100), 236 és 607 (40), 620 (36). 111aa: 1 H-NMR δ ppm 1,26(s, 3H, 18-H 3 ); 2,81(m, 2H, 6-H 2 ); 3,77(s, 3H, OCH 3 ); 4,40(m, 2H, HN-CH 2 ); 4,94(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,44(m, 2H, N-CH 2 ); 5,82(m, 1H, 16-H); 6,35(m, 1H, NH); 6,61(d, 1H, J=2,2Hz, 4-H); 6,67(dd, 1H, J=8,6Hz, J=2,2Hz, 2-H); 7,12(d, 1H, J=8,6Hz, 1-H); 7,20(m, 2H) és 7,32(m, 3H): 2 -H, 3 -H, 4 -H, 5 -H, 6 -H); 7,40(s, 1H, C=CH); 13 C- NMR δ ppm 27,1(C-18); 27,3; 27,8; 30,4; 34,7; 35,1; 39,7; 42,5; 43,6; 46,5; 51,7; 54,1(N- CH 2 ); 55,2(OCH 3 ); 111,5(C-2); 113,3(C-4); 113,8(C-16a); 122,1(C=CH); 126,2(C-1); 128,0(2C: C-2, C-6 ); 128,7(C-4 ); 129,1(2C: C-3, C-5 ); 132,5(C-10); 134,4(C-1 ); 138,1(C-5); 141,0(C-16); 145,3(C=CH); 157,4(C-3); 176,2(C-17). MS m/z (%): 485 (MH +, 100), 486 és 507 (30). 111ab: 1 H-NMR δ ppm 1,26(s, 3H, 18-H 3 ); 2,33(s, 3H, 4 -CH 3 ); 2,82(m, 2H, 6-H 2 ); 3,76(s, 3H, OCH 3 ); 4,40(m, 2H, HN-CH 2 ); 4,92(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,40(m, 2H, N-CH 2 ); 5,83(m, 1H, 16-H); 6,40(m, 1H, NH); 6,60(d, 1H, J=2,2Hz, 4-H); 6,67(d, 1H, J=8,6Hz, J=2,2Hz, 2-H); 7,10(átfedő multiplettek, 5H, 1-H, 2 -H, 3,-H, 5 -H, 6 -H); 7,37(s, 1H, C=CH); 13 C-NMR δ ppm 21,2(4 -CH 3 ); 27,1(C-18); 27,3; 27,8; 30,4; 34,6; 35,2; 39,7; 42,5; 43,6; 51,7; 46,5; 54,0; 55,2(OCH 3 ); 111,5(C-2); 113,3(C-4); 113,8(C-16a); 122,0(C=CH); 126,3(C-1); 128,1(2C: C- 3, C-5 ); 129,7(2C: C-2, C-6 ); 131,6(C-1 ); 132,5(C-10); 138,1(C-5); 138,6(C-4 ); 141,0(C-16); 145,9(C=CH); 156,3(C-3), 175,8(C-17). MS m/z (%): 499 (MH +, 100), 521 (64), 500 (36). 111ae: 1 H-NMR δ ppm 1,27(s, 3H, 18-H 3 ); 2,82(m, 2H, 6-H 2 ); 3,76(s, 3H, OCH 3 ); 4,42(m, 2H, HN-CH 2 ); 4,92(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,55(s, 2H, N-CH 2 ); 5,81(m, 2H, 16-H); 6,36(m, 1H, NH); 6,62(s, 1H, J=2,2Hz, 4-H); 6,67(dd, 1H, J=8,6Hz, J=2,2Hz, 2-H); 7,10(d, 1H, J=8,6Hz, 1-H); 7,31(d, 2H, J=8,6Hz, 2 -H, 6 -H); 7,49(s, 1H, C=CH); 7,66(d, 2H, J=2,2Hz, 3 -H, 5 - H); 13 C-NMR δ ppm 25,9; 27,2(C-18); 27,8; 30,4; 34,7; 35,2; 39,7; 42,5; 43,5; 46,7; 51,7; 53,1; 55,2(OCH 3 ); 111,5(C-2); 113,4(C-4); 114,0(C-16a); 122,6(C=CH); 124,3(2C: C-2, C- 6 ); 126,2(C-1); 128,5(2C: C-3, C-5 ); 132,3(C-10); 137,9(C-5); 139,5(C-1 ); 140,9(C-16); 141,3(C-4 ); 146,3(C=CH); 157,4(C-3); 176,4(C-17). MS m/z (%): 530 (MH +, 100), 552 (84), 531 (38). 111ba: 1 H-NMR δ ppm 1,26(s, 3H, 18-H 3 ); 2,80(m, 2H, 6-H 2 ); 4,41(m, 2H, HN-CH 2 ); 4,91(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,02(s, 2H, OCH 2 ); 5,44(m, 2H, N-CH 2 ); 5,82(m, 1H, 16-H); 6,36(m, 1H, NH); 6,69(d, 1H, J=2,2Hz, 4-H); 6,74(dd, 1H, J=8,6Hz,J=2,2Hz, 2-H); 7,11(d, 1H, J=8,6Hz, 1-H); 7,32(m, 1H) és 7,37(m, 2H) és 7,41(m, 2H): 2,3,4,5,6 -H; 7,40(s, 1H, C=CH); 13 C-NMR δ ppm 27,2(C-18); 27,3; 27,8; 30,4; 34,6; 35,2; 39,7; 42,4; 43,6; 46,6; 51,7; 54,3; 69,9(OCH 2 ); 112,3(C-2); 113,9(C-16a); 114,4(C-4); 121,7(C=CH); 126,3(C-1); 127,4(2C) és 127,8 és 128,1(2C) és 128,5(2C) és 128,8; 129,1(2C): C-2, C-3, C-4, C-5, C- 6 C-2, C-3, C-4, C-5, C-6 ; 132,8(C-10); 134,5(C-1 ); 138,01(C-1 ), 138,1(C-5); 141

140,9(C-16); 145,9(C=CH); 156,7(C-3); 176,3(C-17). MS m/z (%): 561 (MH +, 100), 485 (40). 111bb: 1 H-NMR δ ppm 1,26(s, 3H, 18-H 3 ); 2,33(s, 3H, 4 -CH 3 ); 2,82(m, 2H, 6-H 2 ); 4,40(m, 2H, HN-CH 2 ); 4,92(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,02(s, 2H, OCH 2 ); 5,40(m, 2H, N-CH 2 ) 5,83(m, 1H, 16- H); 6,45(m, 1H, NH); 6,70(s, 1H, 4-H); 6,75(m, 1H, 2-H); 7,07-7,14 átfedő multiplettek (5H, 1-H; 2 -H, 3 -H, 5 -H, 6 -H); 7,28-7,42 átfedő multiplettek (6H, 2'-H, 3'-H, 4'-H, 5'-H, 6'-H, C=CH); 13 C-NMR δ ppm 20,7(4 -CH 3 ); 26,8(C-18); 26,9 és 27,4 és 30,0 és 34,2 és 34,7(5C, C-6, C-7, C-11, C-12, C-15); 39,3(C-13); 42,0 és 43,2 és 51,3(3C, C-8, C-9, C-14); 46,2(HN- CH 2 ); 53,6(N-CH 2 ); 69,5(OCH 2 ); 111,9 és 114,0 (2C: C-2 és C-4); 113,4(C-16a); 121,7(C=CH); 125,9(C-1); 127,0(2C: C-3,5 ); 127,4(C-4'); 127,7(2C: C-2,6 ); 128,1(2C: C-3',5'); 129,4(2C: C-2',6'); 130,9(C-4 ); 132,4(C-10); 137,0(C-1 ); 137,8(C-5); 138,3(C-1'); 140,6(C-16); 144,9(C=CH); 156,3(C-3); 175,8(C-17). 111bb: (C 6 D 6 ) 1 H-NMR δ(ppm) 1,07(s, 3H, 18-H 3 ); 2,02(s, 3H, 4 -CH 3 ); 2,71(m, 2H, 6-H 2 ); 4,40(m, 2H, NH-CH 2 ); 4,72(s, 2H, N-CH 2 ); 4,79(s, 2H, OCH 2 ); 4,95(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,84(m, 1H, 16-H); 6,53(m, 1H, NH); 6,71(átfedő multiplettek, 3H, 4-H és 2 -H, 6 -H); 6,80(d, 2H, J=7,8Hz, 3 -H és 5 -H); 6,85(dd, 1H, J=8,6Hz, J=2,2Hz, 2-H); 6,96(s, 1H, C=CH); 7,08(t, 1H, J=7,4Hz, 4 -H); 7,12-7,17(átfedő multiplettek, 3H, 1-H és 3 -H és 5 -H); 7,32(d, 2H, J=7,4Hz, 2 -H, 6 -H); 13 C-NMR δ(ppm) 21,0(4 -CH 3 ); 27,0(C-18); 27,8; 28,5; 30,8; 35,0; 35,9; 40,0; 42,9; 44,1; 46,7; 52,2; 53,4; 69,9(OCH 2 ); 113,0(C-2); 113,8(C-16a); 114,9(C-4); 122,3(C=CH); 126,7(C-1); 127,6(2C: C-2,6 ); 128,1(2C: C-3,5 ); 128,3(C-4 ); 128,6(2C, C- 2,6 ); 129,7(2C: C-3,5 ); 132,5(C-1 ); 133,3(C-10); 138,2(C-4 ); 138,4(2C: C-1 és C-5); 141,8(C-16); 145,4(C=CH); 157,4(C-3); 175,9(C-17). MS m/z (%): 575 (MH +, 100), 597 (65), 576 (34). 111be: 1 H-NMR δ ppm 1,21(s, 3H, 18-H 3 ); 2,74(m, 2H, 6-H 2 ); 4,25(m, 2H, HN-CH 2 ); 4,91(m, 2H, 16a-H 2 ); 5,03(s, 2H, OCH 2 ); 5,72(s, 2H, N-CH 2 ); 5,80(m, 1H, 16-H); 6,68(d, 1H, J=2,2Hz, 4-H); 6,71(dd, 1H, J=8,6Hz,J=2,2Hz, 2-H); 7,08(d; 1H, J=8,6Hz, 1-H); 7,31(t, 1H, J=7,3Hz, 4'-H); 7,35-7,45(átfedő multiplettek, 6H, 2 -H, 3 -H, 4 -H, 5 -H, 6 -H, 2 -H, 6 -H); 7,89(s, 1H, C=CH); 8,00(m, 1H, HN); 8,17(d, 2H, J=8,5Hz, 3 -H, 5 -H); 13 C-NMR δ ppm 26,3(C-18); 26,7; 27,4; 29,8; 34,2; 35,1; 38,7; 41,9; 42,9; 46,1; 51,2; 51,6; 68,9(OCH 2 ); 112,1(C-2); 113,5(C-16a); 114,1(C-4); 123,7(2C) és 127,4(2C) és 127,6 és 128,3(2C) és 128,6 és 128,7(2C): C-1, C-2, C-3, C-4, C-5, C-6 C-2, C-3, C5, C-6 ; 126,0(C=CH); 132,6(C-10); 137,3(C-1 ); 137,4(C-5); 141,5(C-16); 143,6; 147,1; 153,5; 156,0(C-3); 175,4(C-17). MS m/z (%): 236 (100), 606 (MH +, 77), 159 (50), 279 (42). 118: 1 H-NMR δ ppm 0,96(s, 3H, 18-H 3 ); 2,78(m, 2H, 6-H 2 ); 5,15(s, 2H, NCH 2 ); 5,53(s, 2H, OCH 2 ); 6,68(s, 1H, 4-H); 6,77(d, J= 8,5 Hz, 1H, 2-H); 7,22(d, J= 8,5 Hz, 1H, 1-H); 7,27(átfedő multiplettek, 3H, C=CH, 2 -H, 6 -H); 7,37(m, 3H, 3 -H, 4 -H, 5 -H). 13 C-NMR δ ppm 20,9; 26,9; 27,8; 28,3; 29,9(18-CH3); 30,6; 33,6; 35,8; 41,2; 41,9(C-13); 42,3; 51,7; 57,3(NCH 2 ); 62,1(OCH 2 ); 112,4(C-2); 114,5(C-4); 125,9(C=CH); 126,9(C-1); 128,2(2C: C- 3, C-5 ); 128,8(C-4 ); 129,1(2C: C-2, C-6 ); 133,7(C-10); 134,4(C-1 ); 138,5(C-5); 142,1(C=CH); 155,9(C-3). MS m/z (%): 428 (100, [M+H] + ), 144 (24). 142

IV. A vegyületek fizikai adatai Szám A vegyület képlete Összegképlet Mol. tömeg Hozam (%) Op. ( C) R f 112a C 28 H 33 N 3 O 2 443,58 56 163 165 0,63 g 112e C 28 H 32 N 4 O 4 488,58 45 135 136 0,50 g 113a C 28 H 33 N 3 O 2 443,58 40 146 148 0,52 g 113e C 28 H 32 N 4 O 4 488,58 52 175 177 0,40 g 114a C 18 H 24 O 2 272,38 48 185 187 0,62 g 114b C 19 H 26 O 2 286,41 50 75 77 0,52 e 114c C 25 H 30 O 2 362,50 45 80 84 0,45 b 143

115a C 18 H 24 O 2 272,38 42 192 194 0,53 g 115b C 19 H 26 O 2 286,41 44 105 107 0,41 e 115c C 25 H 30 O 2 362,50 49 64 66 0,58 b 144

IV. Melléklet A vegyületek NMR adatai 112a: 1 H-NMR δ ppm 0,93(s, 3H, 18-H 3 ); 2,77(m, 2H, 6-H 2 ); 4,19(m, 1H, 17 -H); 5,15(s, 2H, NCH 2 ); 5,52(s, 2H, OCH 2 ); 6,66(s, 1H, 4-H); 6,75(m, 1H, 2-H); 7,19(m, 1H, 1-H); 7,26(m, 2H, 2,6 -H); 7,36(m, 3H, 3,4,5 -H); 7,51(s, 1H, C=CH). 13 C-NMR δ ppm 22,1(C- 18); 23,6; 26,2; 28,1; 29,7; 30,1; 32,6; 41,8(2C: C-8, C-9); 43,1(C-13); 49,9(C-14); 53,9 (NCH 2 ); 61,8(OCH 2 ); 73,8(C-17); 112,1(C-2); 114,1(C-4); 122,1(C=CH); 126,6(C-1); 127,8(2C: C-3,5 ); 128,4(C-4 ); 128,7(2C: C-2,6 ); 132,8(C-10); 134,0(C-1 ); 138,0(C-5); 144,6(C=CH); 155,6(C-3). MS m/z (%): 444 (100, [M+H] + ), 466 (35), 144 (18), 91 (8, Bn). 112e: 1 H-NMR δ ppm 0,93(s, 3H, 18-H 3 ); 2,77(m, 2H, 6-H 2 ); 4,19(m, 1H, 17 -H); 5,19(s, 2H, NCH 2 ); 5,64(s, 2H, OCH 2 ); 6,67(d, J=2,3 Hz, 1H, 4-H); 6,76(dd, J=8,6 Hz, J=2,3 Hz, 1H, 2-H); 7,21(d, J=8,6 Hz, 1H, 1-H); 7,39(d, J=8,5 Hz, 2H, 2,6 -H); 7,59(s, 1H, C=CH); 8,22(d, J=8,5 Hz, 2H, 3,5 -H). 13 C-NMR δ ppm 22,5(C-18); 23,9; 26,5; 28,5; 29,7; 30,0; 32,9; 42,2(2C: C-8, C-9); 43,4(C-13); 50,2(C-14); 53,2(NCH 2 ); 62,0(OCH 2 ); 74,2(C-17); 112,4(C-2); 114,5(C-4); 122,7(C=CH); 124,3(2C: C-3,5 );127,0(C-1); 128,6(2C: C-2,6 ); 133,3(C-10); 138,5(C-5); 141,5(C-1 ); 145,6(C=CH); 148,5(C-4 ); 155,9(C-3). MS m/z (%): 453 (100), 469 (65, [M+H] + -H 2 O), 350 (39, p-nitrotoluol), 489 (14, [M+H] + ). 113a: 1 H-NMR δ ppm 0,94(s, 3H, 18-H 3 ); 2,76(m, 2H, 6-H 2 ); 3,82(m, 1H, 17 -H); 5,15(s, 2H, NCH 2 ); 5,52(s, 2H, OCH 2 ); 6,65(s, 1H, 4-H); 6,75(dd, J=8,6 Hz, J=2,3 Hz, 1H, 2-H); 7,16(d, J=8,6 Hz, 1H, 1-H); 7,26(m, 2H, 2,6 -H); 7,36(m, 3H, 3,4,5 -H); 7,50(s, 1H, C=CH). 13 C-NMR δ ppm 26,6; 28,8; 29,0; 29,8(C-18); 30,5; 31,4; 33,2; 40,1; 42,1; 44,4(C- 13); 51,5; 54,2(NCH 2 ); 62,2(OCH 2 ); 83,5(C-17); 112,5(C-2); 114,3(C-4); 122,5(C=CH); 127,5(C-1); 128,1(2C: C-3,5 ); 128,8(C-4 ); 129,1(2C: C-2,6 ); 134,0(C-10); 134,5(C-1 ); 138,4(C-5); 145,0(C=CH); 155,8(C-3). MS m/z (%): 444 (100, [M+H] + ), 466 (29), 144 (19), 91 (10, Bn). 113e: 1 H-NMR δ ppm 0,93(s, 3H, 18-H 3 ); 2,75(m, 2H, 6-H 2 ); 3,82(m, 1H, 17 -H); 5,18(s, 2H, NCH 2 ); 5,63(s, 2H, OCH 2 ); 6,64(s, 1H, 4-H); 6,74(dd, J=8,6 Hz, J=2,3 Hz, 1H, 2-H); 7,17(d, J=8,6 Hz, 1H, 1-H); 7,38(d, J=8,4 Hz, 2H, 2,6 -H); 7,58(s, 1H, C=CH); 8,21(d, J=8,4 Hz, 2H, 3,5 -H). 13 C-NMR δ ppm 26,2; 28,5; 28,7; 29,4(C-18); 30,1; 31,1; 32,8; 39,8; 41,7; 44,0(C-13); 51,1; 52,7(NCH 2 ); 61,6(OCH 2 ); 83,1(C-17); 112,1(C-2); 113,9(C-4); 122,4(C=CH); 123,9(2C: C-3,5 ); 127,2(C-1); 128,2(2C: C-2,6 ); 133,8(C-10); 138,1(C-5); 141,2(C-1 ); 145,3(C=CH); 147,7(C-4 ); 155,3(C-3). MS m/z (%): 489 (100, [M+H] + ). 114a: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,84(s, 3H, 18-H 3 ); 2,64(m, 2H, 6-H 2 ); 3,62(m, 1H, 17-H); 4,40(s, 1H, OH); 6,40(s, 1H, 4-H); 6,50(d, J=8,5 Hz, 1H, 2-H); 7,02(d, J=8,5 Hz, 1H, 1-H); 13 C-NMR δ ppm 26,0; 28,6(2C); 29,7(C-18); 29,8; 31,8; 32,7; 39,9; 41,3; 43,8(C-13); 51,1; 81,2(C-17); 112,9(C-2); 114,4(C-4); 126,9(C-1); 131,3(C-10); 137,4(C-5); 154,5(C-3). 114b: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,85(s, 3H, 18-H 3 ); 2,71(m, 2H, 6-H 2 ); 3,63(m, 1H, 17-H); 3,68(s, 3H, 3-OMe); 4,43(s, 1H, OH); 6,57(s, 1H, 4-H); 6,66(d, J=8,5 Hz, 1H, 2-H); 7,14(d, 145

J=8,5 Hz, 1H, 1-H); 13 C-NMR δ ppm 26,2; 28,6; 28,7; 29,8(C-18); 30,1; 31,9; 32,9; 40,1; 41,3; 43,9(C-13); 51,2; 54,9(3-OMe); 81,3(C-17); 111,8(C-2); 113,0(C-4); 127,2(C-1); 133,1(C-10); 137,7(C-5); 156,8(C-3). 114c: 1 H-NMR δ ppm 0,95(s, 3H, 18-H 3 ); 2,79(m, 2H, 6-H 2 ); 3,83(m, 1H, 17 -H); 5,03(s, 2H, OCH 2 ); 6,69(s, 1H, 4-H); 6,77(dd, J= 8,6 Hz, J= 2,3 Hz, 1H, 2-H); 7,19(d, J=8,6 Hz, 1H, 1-H);7,31(t, J=7,3 Hz, 1H, 4 -H); 7,37(t, J=7,3 Hz, 2H, 3 -H, 5 -H); 7,42(d, J=7,3 Hz, 2H, 2 - H, 6 -H); 13 C-NMR δ ppm 26,7; 28,9; 29,0; 29,8(C-18); 30,5; 31,4; 33,2; 40,1; 42,2; 44,4(C- 13); 51,5; 69,9(OCH 2 ); 83,5(C-17); 112,6(C-2); 114,4(C-4); 127,4(3C: C-3,4,5 ); 127,8(C- 1); 128,5(2C: C-2, 6 ); 133,7(C-10); 137,4(C-1 ); 138,3(C-5); 156,5(C-3). MS m/z (%): 363 (100, [M+H] + ), 91 (15, Bn). 115a: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,94(s, 3H, 18-H 3 ); 2,74(m, 2H, 6-H 2 ); 4,20(m, 1H, 17-H); 4,40(s, 1H, OH); 6,48(s, 1H, 4-H); 6,58(d, J=8,5 Hz, 1H, 2-H); 7,15(d, J=8,5 Hz, 1H, 1-H); 13 C-NMR δ ppm 22,2(C-18); 23,6; 26,6; 28,6; 28,7; 30,2; 32,7; 42,3; 42,8; 43,3(C-13); 50,3; 73,2(C-17); 112,5(C-2); 114,4(C-4); 126,5(C-1); 131,1(C-10); 137,8(C-5); 154,5(C-3) 115b: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,82(s, 3H, 18-H 3 ); 2,71(m, 2H, 6-H 2 ); 3,68(s, 3H, 3- OMe); 4,01(m, 1H, 17-H); 4,35(s, 1H, OH); 6,58(s, 1H, 4-H); 6,66(d, J=8,5 Hz, 1H, 2-H); 7,18(d, J=8,5 Hz, 1H, 1-H); 13 C-NMR δ ppm 22,9; 23,6(C-18); 26,3; 28,1; 29,2; 29,9; 32,7; 41,8(2C); 42,9(C-13); 49,7(C-14); 54,7(3-OMe); 71,7(C-17); 111,5(C-2); 113,1(C-4); 126,6(C-1); 131,9(C-10); 137,7(C-5); 156,9(C-3). 115c: 1 H-NMR δ ppm 0,95(s, 3H, 18-H 3 ); 2,80(m, 2H, 6-H 2 ); 4,21(m, 1H, 17 -H); 5,04(s, 2H, OCH 2 ); 6,72(s, 1H, 4-H); 6,80(dd, J=8,6 Hz, J=2,3 Hz, 1H, 2-H); 7,24(d, J=8,6 Hz, 1H, 1-H); 7,32(t, J=7,3 Hz, 1H, 4 -H); 7,38(t, J=7,3 Hz, 2H, 3,5 -H); 7,43(d, J=7,3 Hz, 2H, 2,6 - H); 13 C-NMR δ ppm 22,1(C-18); 23,6; 26,2; 28,2; 29,7; 30,1; 32,7; 41,8; 41,9; 43,1(C-13); 49,9; 69,6(OCH 2 ); 73,8(C-17); 112,1(C-2); 114,2(C-4); 126,5(C-1); 127,0(2C: C-3,5 ); 127,4(C-4 ); 128,1(2C: C-2, 6 ); 132,4(C-10); 136,9(C-1 ); 137,9(C-5); 156,3(C-3). MS m/z (%): 363 (100, [M+H] + ), 345 (30, [M+H] + -H 2 O), 91 (21, Bn). 146

V. A vegyületek fizikai adatai Név A vegyület képlete Összegképlet Mol. tömeg Hozam (%) Op. ( C) R f 119 C 54 H 62 N 4 O 4 831,09 93 81 84 0,29 h 120 C 48 H 58 N 4 O 4 755,00 91 80 82 0,41 h 121 C 54 H 62 N 4 O 4 831,09 89 214 216 0,51 h 122 C 54 H 62 N 4 O 4 831,09 90 76 79 0,29 h 123 C 48 H 58 N 4 O 4 755,00 88 72 75 0,22 h 124 C 54 H 62 N 4 O 4 831,09 92 90 92 0,48 h 125 C 47 H 59 N 3 O 4 729,99 94 98 102 0,76 h 147

126 C 47 H 58 N 4 O 4 742,99 89 112 115 0,67 i 127 C 46 H 53 N 3 O 4 711,93 95 215 217 0,14 i 128 C 47 H 59 N 3 O 4 729,99 87 104 108 0,80 h 129 C 47 H 58 N 4 O 4 742,99 90 108 110 0,73 i 130 C 46 H 53 N 3 O 4 711,93 91 220 222 0,16 i 148

V. Melléklet A dimerek NMR adatai 119: 1 H-NMR δ ppm 1,10 és 1,12(2xs, 2x3H, 18-H 3 és 18 -H 3 ); 2,80(átfedő multiplettek, 2x2H, 6-H 2 és 6 -H 2 ); 4,37(d, 1H, J=8,1 Hz, 17-H); 4,48(m, 2H, NCH 2 ); 4,76 és 4,88(2xm, 2x1H, 16a -H 2 ); 4,89(m, 1H, 16-H); 5,02 és 5,03(2xs, 2x2H, 2xOCH 2 ); 5,73(m, 1H, 16 -H); 6,68 és 6,70(2xd, 2x1H, J=2,2 Hz, 4-H és 4 -H); 6,76 és 6,79(2xdd, 2x1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2-H és 2 -H); 6,80(s, 1H, NH); 7,13 7,19(átfedő multiplettek, 2x1H, 1-H és 1 -H); 7,32 (átfedő multiplettek, 2x1H, 4 -H és 4 -H); 7,36 7,39(átfedő multiplettek, 2x2H, 3,5 - és 3,5 -H), 7,42(átfedő multiplettek, 2x2H, 2,6 - és 2,6 -H); 7,72(s, 1H, C=CH); 13 C- NMR δ ppm 22,8 és 23,0(C-18 és C-18 ); 25,9; 26,5; 27,3; 27,4; 28,7; 29,7; 30,2; 30,3; 31,4; 33,1; 34,7; 35,3; 37,8; 40,9; 42,1; 42,9; 43,3; 45,7; 47,3; 66,2(C-16); 69,9(2C: 2xbenzil- OCH 2 ); 85,4(C-17); 112,4 és 112,6(C-2 és C-2 ); 114,3 és 114,7(C-4 és C-4 ); 114,5(C-16a ); 121,4(C=CH); 126,4 és 126,9(C-1 és C-1 ); 127,4(4C: C-2,6 és C-2,6 ); 127,8(2C: C- 4 és C-4 ); 128,5(4C: C-3,5 és C-3,5 ); 132,5 és 133,8(C-10 és C-10 ); 137,2 és 137,8 (2C) és 138,1(C-5, C-5 és C-1, C-1 ); 139,1(C-16 ); 144,8(C=CH); 156,7 és 156,8(C-3 és C-3 ); 178,6(NCO). 120: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,97 és 1,05(2xs, 2x3H, 18-H 3 és 18 -H 3 ); 2,73 2,77(átfedő multiplettek, 2x2H, 6-H 2 és 6 -H 2 ); 3,68(s, 3H, 3 -OCH 3 ); 4,31(m, 1H, 17-H); 4,79 és 4,86(2xm, 2x1H, 16a -H 2 ); 4,99(m, 2H, NCH 2 ); 5,14(m, 1H, 16-H); 5,70(m, 1H, 16 -H); 5,75(s, 2H, OCH 2 ); 6,57 és 6,67 és 6,71 és 6,75(4xm, 4H, 4-H, 4 -H és 2-H, 2 -H); 7,14 és 7,22(2xm, 2H, 1-H és 1 -H); 7,31(m, 1H, 4 -H); 7,34 7,39(átfedő multiplettek, 4H, 2,3,5,6 -H); 7,75(s, 1H, C=CH); 8,09(s, 1H, NH); 13 C-NMR δ ppm 15,2 és 22,8(C-18 és C-18 ); 25,7; 26,1; 26,9; 27,8; 28,9; 29,6; 32,0; 32,6; 34,6; 34,7; 36,9; 40,8; 41,5; 42,3; 42,4; 42,8; 45,0; 46,7; 47,5; 54,8(3 -OMe); 65,2(C-16); 68,9(OCH 2 ); 77,2(C-17); 111,5 és 112,4(C- 2 és C-2 ); 112,9 és 114,2(C-4 és C-4 ); 114,4(C-16a ); 121,9(C=CH); 126,2 és 126,7(C-1 és C-1 ); 127,3(2C: C-2,6 ); 127,6(C-4 ); 128,3(2C: C-3,5 ); 131,8 és 131,9(C-10 és C-10 ); 137,2 és 137,3 és 137,6(C-5, C-5 és C-1 ); 139,6(C-16 ); 145,5(C=CH); 156,1 és 156,9(C-3 és C-3 ); 177,3(NCO). 121: 1 H-NMR δ ppm 1,05 és 1,25(2xs, 2x3H, 18-H 3 és 18 -H 3 ); 2,75 2,89(2xm, 2x2H, 6-H 2 és 6 -H 2 ); 3,22(m, 1H, OH); 4,18 4,33(m, 2H, NCH 2 ); 4,38(m, 1H, 17-H); 4,70(m, 1H, 16- H); 4,89 5,02(átfedő multiplettek, 2H, 16a -H 2 ); 5,01 és 5,02(2xs, 2x2H, 2xOCH 2 ); 5,83(m, 1H, 16 -H); 6,47(m, 1H, NH); 6,69 és 6,70(2xd, 2x1H, J=2,2 Hz, 4-H és 4 -H); 6,74 6,78(átfedő multiplettek, 2x1H, 2-H és 2 -H); 7,08 7,12(átfedő multiplettek, 2x1H, 1-H és 1 - H); 7,31(t, 2x1H, 4 -H és 4 -H); 7,37(t, 2x2H, 3,5 - és 3,5 -H), 7,41(d, 2x2H, 2,6 - és 2,6 -H); 7,53(s, 1H, C=CH); 13 C-NMR δ ppm 23,0 és 27,1(C-18 és C-18 ); 26,4; 27,3; 149

27,8; 28,3; 30,4; 30,5; 31,4; 33,0; 34,5; 35,2; 39,8; 42,0; 42,4; 42,7; 43,2; 43,6; 46,5; 48,2; 51,7; 66,2(C-16); 69,9(2C: 2xOCH 2 ); 78,7(C-17); 112,4 és 112,6(C-2 és C-2 ); 113,8(C- 16a ); 114,3 és 114,6(C-4 és C-4 ); 122,5(C=CH); 126,2 és 127,0(C-1 és C-1 ); 127,4(4C: C- 2,6 és C-2,6 ); 127,8(2C: C-4 és C-4 ); 128,5(4C: C-3,5 és C-3,5 ); 132,1 és 132,8(C-10 és C-10 ); 137,2(2C: C-1, C-1 ); 138,1 és 138,2(C-5, C-5 ); 141,0(C-16 ); 144,6(C=CH); 156,6 és 156,7(C-3 és C-3 ); 176,5(NCO). 122: 1 H-NMR δ ppm 1,16 és 1,26 (2xs, 2x3H, 18-H 3 és 18 -H 3 ); 2,80 (átfedő multiplettek, 2x2H, 6-H 2 és 6 -H 2 ); 4,09 (d, 1H, J=8,1 Hz, 17-H); 4,49(m, 2H, NCH 2 ); 4,89 és 4,79(2xm, 2x1H, 16a -H 2 ); 4,77(m, 1H, 16-H); 5,02 és 5,03(2xs, 2x2H, 2xOCH 2 ); 5,73(m, 1H, 16 -H); 6,70 és 6,71(2xd, 2x1H, J=2,2 Hz, 4-H és 4 -H); 6,77 és 6,81(2xdd, 2x1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2-H és 2 -H); 6,88(s, 1H, NH); 7,15 7,18(átfedő multiplettek, 2x1H, 1-H és 1 -H); 7,32(átfedő multiplettek, 2x1H, 4 -H és 4 -H); 7,36 7,39(átfedő multiplettek, 2x2H, 3,5 - H és 3,5 -H), 7,42(átfedő multiplettek, 2x2H, 2,6 -H és 2,6 -H); 7,72(s, 1H, C=CH); 13 C-NMR δ ppm 15,2 és 28,8(C-18 és C-18 ); 25,9; 26,9; 27,2; 27,4; 28,7; 29,7; 30,2; 31,9; 34,8; 35,3; 37,4; 37,8; 40,9; 41,0; 42,1; 42,9; 45,7; 47,3; 48,5; 66,2(C-16); 69,9(2C: 2xOCH 2 ); 85,2(C-17); 112,4 és 113,0(C-2 és C-2 ); 114,2 és 114,5(C-4 és C-4 ); 114,5(C- 16a ); 122,5(C=CH); 126,3 és 127,7(C-1 és C-1 ); 127,4(4C: C-2,6 és C-2,6 ); 127,8(2C: C-4 és C-4 ); 128,5(4C: C-3,5 és C-3,5 ); 132,5 és 133,8(C-10 és C-10 ); 137,2 és 137,5 (2C) és 137,8(C-5, C-5 és C-1, C-1 ); 139,1(C-16 ); 144,8(C=CH); 156,6 és 156,8(C-3 és C-3 ); 178,6(NCO). 123: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 1,07 és 1,38(2xs, 2x3H, 18-H 3 és 18 -H 3 ); 2,73(átfedő multiplettek, 2x2H, 6-H 2 és 6 -H 2 ); 3,68(s, 3H, 3 -OCH 3 ); 3,89(m, 1H, 17-H); 4,81 4,92(átfedő multiplettek, 3H, 16a -H 2 és 16 -H); 5,04(m, 2H, NCH 2 ); 5,24(m, 1H, 16-H); 5,74(s, 2H, OCH 2 ); 6,59 és 6,68 és 6,77(3xm, 4H, 4-H, 4 -H és 2-H, 2 -H); 7,15(m, 2H, 1-H és 1 -H); 7,31(m, 1H, 4 -H); 7,38(m, 2H, 3,5 -H), 7,41(m, 2H, 2,6 -H); 7,83(s, 1H, C=CH); 8,12(s, 1H, NH); 13 C-NMR δ ppm 15,2 és 28,8(C-18 és C-18 ); 25,8; 26,9; 27,2; 28,3; 28,5; 28,9; 29,6; 29,7; 30,1; 34,7; 36,9; 37,8; 40,1; 40,9; 41,8; 42,6; 45,1; 46,8; 48,5; 54,8(3 -OMe); 66,2(C-16); 68,9(OCH 2 ); 84,3(C-17); 111,6 és 112,7(C-2 és C-2 ); 113,0 és 113,9(C-4 és C-4 ); 114,3(C-16a ); 122,5(C=CH); 126,3 és 127,4(C-1 és C-1 ); 128,3(2C: C- 2,6 ); 128,6(C-4 ); 128,7(2C: C-3,5 ); 131,8 és 133,5(C-10 és C-10 ); 137,3 és 137,4 és 138,0(C-5, C-5 és C-1 ); 139,7(C-16 ); 144,8(C=CH); 155,8 és 157,0(C-3 és C-3 ); 177,4(NCO). 124: 1 H-NMR δ ppm 1,21 és 1,29(2xs, 2x3H, 18-H 3 és 18 -H 3 ); 2,79 2,86(átfedő multiplettek, 2x2H, 6-H 2 és 6 -H 2 ); 3,99(d, 1H, J=7,9 Hz, 17-H); 4,35 4,48(m, 2H, NCH 2 ); 4,70(m, 1H, 16-H); 4,90 5,01(m, 2H, 16a -H 2 ); 5,01 és 5,02(2xs, 2x2H, 2xOCH 2 ); 5,84(m, 1H, 16 -H); 6,51(m, 1H, NH); 6,68 és 6,70(2xd, 2x1H, J=2,2 Hz, 4-H és 4 -H); 6,74 és 6,79(2xdd, 2x1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2-H és 2 -H); 7,12 és 7,14(2xd, 2x1H, J=8,6 Hz, 1-H és 1 -H); 7,31 és 7,33(2xt, 2x1H, J=7,3 Hz, 4 -H és 4 -H); 7,37(2xd, 2x2H, J=7,3 Hz, 2,6 -H és 2,6 -H); 7,40 7,43(átfedő multiplettek, 2x2H, 3,5 - és 3,5 -H); 7,58(s, 1H, C=CH); 13 C-NMR δ ppm 27,0; 27,1 és 28,7(C-18 és C-18 ); 27,3; 27,6; 27,8; 28,8; 30,2; 30,4; 31,9; 34,6; 35,2; 37,5; 39,8; 40,9; 42,1; 42,5; 43,6; 46,6; 48,6; 51,7; 66,1(C-16); 69,9 és 70,0(2xOCH 2 ); 85,3(C-17); 112,2 és 113,0(C-2 és C-2 ); 114,2 és 114,5(C-4 és C-4 ); 113,9(C-16a ); 122,5(C=CH); 126,2 és 127,7(C-1 és C-1 ); 127,4(4C: C-2,6 és C-2,6 ); 127,8 és 127,9(2C: C-4 és C-4 ); 128,5(4C: C-3,5 és C-3,5 ); 132,8 és 133,7(C-10 és 150

C-10 ); 137,3(2C) és 137,6 és 138,1(C-5, C-5 és C-1, C-1 ); 141,0(C-16 ); 144,6(C=CH); 156,6 és 156,7(C-3 és C-3 ); 176,5(NCO). 125: 1 H-NMR δ ppm 0,76 és 1,09(2xs, 2x3H, 18-H 3 és 18 -H 3 ); 0,91(t, 1H, J=6,8 Hz, 16a - H 3 ); 2,71 2,92(átfedő multiplettek, 2x2H, 6-H 2 és 6 -H 2 ); 3,33 és 3,51(2xd, 2x1H, J=10,9 Hz, 17 -H 2 ); 4,52(d, 1H, J=8,2 Hz, 17-H); 4,77(m, 1H, 16-H); 5,03(s, 2H, 3-OCH 2 ); 5,13(s, 2H, 3 -OCH 2 ); 6,71(2xd, 2x1H, J=2,2 Hz, 4-H és 4 -H); 6,78(2xdd, 2x1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2- H és 2 -H); 7,20(2xd, 2x1H, J=8,6 Hz, 1-H és 1 -H); 7,31(t, 1H, J=7,3 Hz, 4 -H); 7,38(t, 2H, 3,5 -H), 7,42(d, 2H, J=7,3 Hz, 2,6 -H); 7,66(s, 1H, C=CH); 13 C-NMR δ ppm 14,7 és 16,0 és 23,0(C-18 és C-18 és C-16a ); 25,0; 26,4; 26,5; 27,4; 28,3; 30,3; 30,7; 31,2; 31,7; 33,1; 35,6; 38,7; 41,7; 42,0; 42,9; 43,2; 43,5; 45,2; 48,3; 62,0(3 -OCH 2 ); 66,4(C-16); 69,9(3- OCH 2 ); 71,3(C-17 ); 78,7(C-17); 112,3 és 112,7(C-2 és C-2 ); 114,3 és 114,6(C-4 és C-4 ); 122,4(C=CH); 126,6 és 126,9(C-1 és C-1 ); 127,4(2C: C-2,6 ); 127,8(C-4 ); 128,5(2C: C- 3,5 ); 132,0 és 133,4(C-10 és C-10 ); 137,2 és 138,1 és 138,2(C-1 és C-5 és C-5 ); 142,8(C=CH); 156,1 és 156,7(C-3 és C-3 ). 126: 1 H-NMR δ ppm 0,88(t, 3H, J=6,8 Hz, 16a -H 3 ); 1,06 és 1,10(2xs, 2x3H, 18-H 3 és 18 - H 3 ); 2,83(átfedő multiplettek, 4H, 6-H 2 és 6 -H 2 ); 4,53(m, 1H, 17-H); 4,84(m, 1H, 16-H); 5,03(s, 2H, 3-OCH 2 ); 5,18(m, 2H, 3 -OCH 2 ); 6,70 6,72(átfedő multiplettek, 2H, 4-H és 4 - H); 6,77 6,80(átfedő multiplettek, 2H, 2-H és 2 -H); 7,19 7,21(átfedő multiplettek, 2H, 1-H és 1 -H); 7,31(t, 1H, J=7,3 Hz, 4 -H); 7,38(t, 2H, J=7,3 Hz, 3,5 -H), 7,42(d, 2H, J=7,3 Hz, 2,6 -H); 7,81(s, 1H, C=CH); 13 C-NMR δ ppm 14,5 és 22,9 és 23,0(C-18 és C-18 és C- 16a ); 24,3; 26,0; 26,4; 27,2; 28,3; 30,3; 30,5; 31,2; 31,7; 32,3; 33,1; 37,5; 40,9; 42,0; 43,0; 43,2; 43,3; 47,9; 48,3; 64,4(3 -OCH 2 ); 66,4(C-16); 70,0(3-OCH 2 ); 78,7(C-17); 112,5 és 112,7(C-2 és C-2 ); 114,4 és 114,6(C-4 és C-4 ); 122,5(C=CH); 126,6 és 126,9(C-1 és C-1 ); 127,4(2C: C-2,6 ); 127,8(C-4 ); 128,5(2C: C-3,5 ); 132,0 és 133,0(C-10 és C-10 ); 138,0 és 138,2 és 138,5(C-5, C-5 és C-1 ); 142,8(C=CH); 156,2 és 156,6(C-3 és C-3 ); 160,4(C- 17 ). 127: 1 H-NMR δ ppm 1,05 és 1,09(2xs, 2x3H, 18-H 3 és 18 -H 3 ); 2,81(átfedő multiplettek, 4H, 6-H 2 és 6 -H 2 ); 4,51(m, 1H, 17-H); 4,79(m, 1H, 16-H); 5,03(s, 2H, 3-OCH 2 ); 5,15(s, 2H, 3 - OCH 2 ); 6,69(átfedő multiplettek, 2H, 4-H és 4 -H); 6,77(átfedő multiplettek, 2H, 2-H és 2 - H); 7,18(átfedő multiplettek, 2H, 1-H és 1 -H); 7,32(t, 1H, J=7,3 Hz, 4 -H); 7,37(t, 2H, J=7,3 Hz, 3,5 -H); 7,42(d, 2H, J=7,3 Hz, 2,6 -H); 7,69(s, 1H, C=CH); 13 C-NMR δ ppm 21,0; 22,9 és 25,1(C-18 és C-18 ); 26,5; 27,8; 28,2; 28,3; 29,7; 30,3; 31,7; 32,1; 33,1; 33,5; 41,4; 41,5; 41,9; 42,9; 43,2; 48,3; 49,3; 50,0; 61,7(3 -OCH 2 ); 66,7(C-16); 69,9(3-OCH 2 ); 78,7(C- 17); 112,6 és 112,7(C-2 és C-2 ); 114,4 és 114,6(C-4 és C-4 ); 122,5(C=CH); 126,9(2C: C-1 és C-1 ); 127,4(2C: C-2,6 ); 127,8(C-4 ); 128,5(2C: C-3,5 ); 132,0 és 132,7(C-10 és C- 10 ); 137,3 és 138,1 és 138,2(C-1, C-5 és C-5 ); 142,8(C=CH); 156,1 és 156,8(C-3 és C-3 ); 221,6(C-17 ). 128: 1 H-NMR δ ppm 0,77 és 1,28(2xs, 2x3H, 18-H 3 és 18 -H 3 ); 0,92(t, 1H, J=6,8 Hz, 16a - H 3 ); 2,80 2,84(átfedő multiplettek, 2x2H, 6-H 2 és 6 -H 2 ); 3,33 és 3,51(2xm, 2x1H, 17 -H 2 ); 4,14(d, 1H, J=8,1 Hz, 17-H); 4,74(m, 1H, 16-H); 5,03(s, 2H, 3-OCH 2 ); 5,15(s, 2H, 3 -OCH 2 ); 6,69 és 6,71(2xd, 2x1H, J=2,2 Hz, 4-H és 4 -H); 6,78 és 6,81(2xdd, 2x1H, J=8,6 Hz, J=2,2 Hz, 2-H és 2 -H); 7,16 és 7,21(2xd, 2x1H, J=8,6 Hz, 1-H és 1 -H); 7,32(t, 1H, J=7,3 Hz, 4 - H); 7,38(t, 2H, 3,5 -H), 7,43(d, 2H, J=7,3 Hz, 2,6 -H); 7,69(s, 1H, C=CH); 13 C-NMR δ 151

ppm 14,7 és 16,0 és 28,7(C-18 és C-18 és C-16a ); 25,0; 26,4; 26,9; 27,4(2C); 28,8; 30,2; 30,7; 31,2; 31,9; 35,6; 37,4; 38,7; 40,9; 41,7; 42,1; 43,5; 45,2; 48,5; 62,0(3 -OCH 2 ); 66,1(C- 16); 69,9(3-OCH 2 ); 71,3(C-17 ); 85,2(C-17); 112,4 és 113,0(C-2 és C-2 ); 114,2 és 114,3(C-4 és C-4 ); 122,4(C=CH); 126,6 és 127,7(C-1 és C-1 ); 127,4(2C: C-2,6 ); 127,8(C-4 ); 128,5(2C: C-3,5 ); 133,5 és 133,8(C-10 és C-10 ); 137,2(C-1 ); 137,5 és 138,1(C-5 és C-5 ); 142,8(C=CH); 156,1 és 156,5(C-3 és C-3 ). 129: 1 H-NMR δ ppm 0,88(t, 3H, J=6.8 Hz, 16a -H 3 ); 1,06 és 1,28(2xs, 2x3H, 18-H 3 és 18 - H 3 ); 2,80 2,84(átfedő multiplettek, 4H, 6-H 2 és 6 -H 2 ); 4,15(d, 1H, J=7,8 Hz, 17-H); 4,75(m, 1H, 16-H); 5,03(s, 2H, 3-OCH 2 ); 5,17(m, 2H, 3 -OCH 2 ); 6,70 és 6,71(2xd, 2x1H, J=2,2 Hz, 4-H és 4 -H); 6,78 6,82(átfedő multiplettek, 2H, 2-H és 2 -H); 7,16 7,19(átfedő multiplettek, 2H, 1-H és 1 -H); 7,30(s, 1H, 17 -H), 7,33(t, 1H, J=7,3 Hz, 4 -H); 7,38(t, 2H, J=7,3 Hz, 3,5 -H), 7,43(d, 2H, J=7,3 Hz, 2,6 -H); 7,73(s, 1H, C=CH); 13 C-NMR δ ppm 14,5 és 15,4 és 28,7(C-16a és C-18 és C-18 ); 24,3; 26,0; 26,9; 27,2; 27,5, 28,9; 30,2; 30,5; 31,9; 32,2; 37,4; 37,5; 40,9; 41,0; 41,3; 42,1; 43,3; 47,9; 48,6; 62,0(3 -OCH 2 ); 66,3(C-16); 70,0(3- OCH 2 ); 85,3(C-17); 112,4 és 113,0(C-2 és C-2 ); 114,2 és 114,4(C-4 és C-4 ); 122,5(C=CH); 126,6 és 127,7(C-1 és C-1 ); 127,4(2C: C-2,6 ); 127,8(C-4 ); 128,5(2C: C-3,5 ); 132,9 és 133,7(C-10 és C-10 ); 137,3(C-1 ); 137,5 és 138,0(C-5 és C-5 ); 142,8(C=CH); 156,2 és 156,6(C-3 és C-3 ); 160,6(C-17 ). 130: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,85 és 0,97(2xs, 2x3H, 18-H 3 és 18 -H 3 ); 2,75(átfedő multiplettek, 4H, 6-H 2 és 6 -H 2 ); 3,91(m, 1H, 17-H); 4,84(m, 1H, 16-H); 5,04(s, 2H, 3- OCH 2 ); 5,06(s, 2H, 3 -OCH 2 ); 6,70(átfedő multiplettek, 2H, 4-H és 4 -H); 6,77(átfedő multiplettek, 2H, 2-H és 2 -H); 7,16(átfedő multiplettek, 2H, 1-H és 1 -H); 7,31(t, 1H, J=7,3 Hz, 4 -H); 7,38(t, 2H, J=7,3 Hz, 3,5 -H); 7,42(d, 2H, J=7,3 Hz, 2,6 -H); 8,24(s, 1H, C=CH); 13 C-NMR δ ppm 21,2; 23,0 és 26,7(C-18 és C-18 ); 26,8; 27,9; 28,4; 29,0; 29,9; 30,6; 31,9; 32,5; 33,6; 33,8; 39,9; 41,7; 42,1; 43,0; 43,5; 48,5; 49,6; 50,8; 61,9(3 -OCH 2 ); 66,9(C-16); 70,1(3-OCH 2 ); 85,4(C-17); 112,7 és 113,1(C-2 és C-2 ); 114,6 és 114,8(C-4 és C-4 ); 122,6(C=CH); 126,8(2C: C-1 és C-1 ); 127,7(2C: C-2,6 ); 128,2(C-4 ); 128,8(2C: C- 3,C-5 ); 132,5 és 132,9(C-10 és C-10 ); 137,6 és 138,5 és 138,7(C-1, C-5 és C-5 ); 143,2(C=CH); 156,4 és 156,7(C-3 és C-3 ); 222,0(C-17 ). 152

VI. A vegyületek fizikai adatai Szám Szerkezeti képlet Összegképlet Mol. tömeg Hozam Op ( C) R f 134a C 23 H 31 IO 4 498,39 75 olaj 0,42 j 134b C 23 H 31 IO 4 498,39 25 olaj 0,38 j 135a C 23 H 30 INO 4 511,39 77 113-120 0,28 j 135b C 23 H 30 INO 4 511,39 23 45-48 0,17 j 136a C 20 H 28 INO 2 441,35 75 154 156 0,40 j 136b C 20 H 28 INO 2 441,35 25 144 146 0,29 j 137a C 19 H 27 IO 2 414,32 55 olaj 0,46 j 137c C 19 H 26 I 2 O 2 540,22 45 olaj 0,65 j 138a C 19 H 26 INO 2 427,32 45 165 168 0,35 j 138b C 19 H 26 INO 2 427,32 30 156 158 0,23 j 138c C 19 H 25 I 2 NO 2 553,22 25 166 168 0,45 j 153

VI. Melléklet A vegyületek NMR adatai 134a: 1 H-NMR δ ppm 0,82(s, 3H, 18-H 3 ); 0,89(t, 3H, J=6,6Hz, 16a-H 3 ); 2,09(s, 3H, 17-OAc- Me); 2,34(s, 3H, 3-OAc-Me); 2,83(m, 2H, 6-H 2 ); 3,85 és 3,91(2 d, 2 1H, J=11,0Hz, 17-H 2 ); 6,81(s, 1H, 4-H), 7,69(s, 1H, 1-H). 13 C-NMR δ ppm14,5 és 15,9 (C-16a és C-18); 21,0 és 21,2 (2 OAc-Me); 24,8; 26,1; 27,0; 30,0; 31,2; 35,9; 37,3; 41,0; 43,3; 45,7; 72,0(C-17); 86,6(C-2); 122,6(C-4); 136,5(C-1); 138,8(C-10); 140,6 (C-5); 148,8(C-3); 169,0 és 171,3(2 OAc-CO). 134b: 1 H-NMR δ ppm 0,82(s, 3H, 18-H 3 ); 0,90(t, 3H, J=6,6Hz, 16-H 3 ); 2,09(s, 3H, 17-OAc- Me); 2,37(s, 3H, 3-OAc-Me); 2,93(m, 2H, 6-H 2 ); 3,86 és 3,92(2 d, 2H, J=11,0Hz, 17-H 2 ); 6,88(d, 1H, J=8,4Hz, 2-H), 7,32(d, 1H, J=8,4Hz, 1-H). 13 C-NMR δ ppm 14,1 és 15,5(C-16a és C-18); 20,6 és 21,0(2 OAc-Me); 24,4; 26,0; 27,7; 29,3; 30,9; 35,6; 37,4; 40,3; 43,6; 45,3; 71,6(C-17); 115,1(C-4); 119,2(C-2); 126,2(C-1); 139,6 és 140,8(C-5 és C-10); 148,7(C-3); 163,7 és 168,7(2 OAc-CO). 135a: 1 H-NMR δ ppm 0,86(t, 3H, J=6,6Hz, 16a-H 3 ); 1,16(s, 3H, 18-H 3 ); 2,17(s, 3H, 17-OAc- Me); 2,35(s, 3H, 3-OAc-Me); 2,83(m, 2H, 6-H 2 ); 6,81(s, 1H, 4-H); 7,54(s, 1H, 1-H); 7,68(s, 1H, 17-H). 13 C-NMR δ ppm 14,6 és 15,2(C-16a és C-18); 19,8 és 21,3(2 OAc-Me); 23,0; 24,4; 25,7; 26,8; 29,9; 32,4; 37,0; 40,3; 42,2; 43,2; 47,6; 122,8(C-4); 136,6(C-1); 138,7 és 140,0(C-5 és C-10); 149,0(C-3); 166,7(C-17); 169,1(2C: 2 OAc-CO). 135b: 1 H-NMR δ ppm 0,88(t, 3H, J=6,6Hz, 16a-H 3 ); 1,15(s, 3H, 18-H 3 ); 2,17(s, 3H, 17-OAc- Me); 2,37(s, 3H, 3-OAc-Me); 2,68 és 2,93(2 m, 2 1H, 6-H 2 ); 6,89(d, 2H, J=8,3Hz, 2-H); 7, 32(d, 1H, J=8,3Hz, 1-H); 7,55(s, 1H, 17-H). 13 C-NMR δ ppm 14,5 és 15,0(C-16a és C-18); 19,7 és 21,3(2 OAc-Me); 24,2; 25,7; 27,8; 32,2; 36,9; 37,5; 39,7; 42,0; 43,6; 47,4; 99,3(C-4); 119,6(C-2); 126,5(C-1); 139,2 és 140,9(C-5 és C-10); 149,2(C-3); 166,6(C-17); 168,9(2C: 2 OAc-CO). 136a: 1 H-NMR δ ppm 0,88(t, 3H, J=6,7Hz, 16a-H 3 ); 1,08(s, 3H, 18-H 3 ); 2,83(m, 2H, 6-H 2 ); 3,84(s, 3H, OMe); 6,53(s, 1H, 4-H); 7,31(s, 1H, 1-H); 7,64(s, 1H, 17-H). 13 C-NMR δ ppm 14,5 és 15,4(C-16a és C-18); 24,3; 25,9; 27,0; 30,3; 32,2; 37,2; 40,7; 41,4; 42,9; 47,8; 56,3(OMe); 82,7(C-2); 111,1(C-4); 136,6(C-1); 134,5 és 138,2 (C-5 és C-10); 155,9(C-3); 160,6(C-17). 136b: 1 H-NMR δ ppm 0,89(t, 3H, J=6,7Hz, 16a-H 3 ); 1,07(s, 3H, 18-H 3 ); 2,67 és 2,96(2 m, 2 1H, 6-H 2 ); 3,87(s, 3H, OMe); 6,67(d, 1H, J=8,5Hz, 2-H); 7,25(d, 1H, J=8,5Hz, 1-H); 7,31(s, 1H, 17-H). 13 C-NMR δ ppm 14,4 és 15,2(C-16a és C-18); 24,1; 26,0; 27,9; 31,9; 37,2; 37,6; 40,1; 41,1; 43,4; 47,6; 56,3(OMe); 94,5(C-4); 108,2(C-2); 126,1(C-1); 134,3 és 140,5(C-5 és C-10); 155,9(C-3); 160,4(C-17). 137a: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,79 0,86(átfedő multiplettek,2x3h, 18- és 16a-H 3 ); 2,68(m, 2H, 6-H 2 ); 4,18 és 4,24(2xd, 2x1H, J=11,0Hz, 17-H 2 ); 6,56(s, 1H, 4-H); 7,47(s, 1H, 1-H); 9,91(s, 1H, 3-OH). 13 C-NMR δ ppm 14,4 és 15,1(C-16a és C-18); 24,2; 25,6; 26,6; 154

29,4; 30,4; 35,0; 37,2; 40,9; 42,4; 45,1; 75,3(C-17); 81,4(C-2); 114,4(C-4); 135,4(C-1); 132,9 és 137,7(C-5 és C-10); 154,1(C-3). 137c: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,82(s, 3H, 18-H 3 ); 0,86(t, 3H, J=6,7Hz, 16a-H 3 ); 2,83(m, 2H, 6-H 2 ); 4,18 és 4,24(2xd, 2x1H, J=11,0Hz, 17-H 2 ); 7,61(s, 1H, 4-H); 9,20(s, 1H, 3-OH). 13 C-NMR δ ppm 14,1 és 15,0(C-16a és C-18); 24,1; 25,8; 27,4; 30,3; 35,0; 37,1; 37,7; 39,9; 42,6; 44,9; 75,2(C-17); 83,5(C-4); 95,9(C-2); 135,6(C-1); 136,0 és 140,2(C-5 és C-10); 152,9(C-3). 138a: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,82(t, 3H, J=6,7Hz, 16a-H 3 ); 0,97(s, 3H, 18-H 3 ); 2,69(m, 2H, 6-H 2 ); 6,56(s, 1H, 4-H); 7,17(s, 1H, 1-H); 7,48(s, 1H, 17-H); 9,91(s, 1H, oxim-oh); 10,38(s, 1H, 3-OH). 13 C-NMR δ ppm 14,4 és 15,4(C-16a és C-18); 23,8; 26,6; 29,3; 31,5; 33,5; 37,0; 40,3; 40,5; 42,2; 46,9; 81,4(C-2); 114,4(C-4); 135,4(C-1); 132,9 és 137,7(C-5 és C-10); 154,1(C-3); 157,7(C-17). 138b: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,77(t, 3H, J=6,7Hz, 16a-H 3 ); 0,89(s, 3H, 18-H 3 ); 2,25 és 2,27(2 m, 2 1H, 6-H 2 ); 6,65(d, 1H, J=8,5Hz, 2-H); 7,06(d, 1H, J=8,5Hz, 1-H); 7,11(s, 1H, 17-H); 10,19(s, 1H, oxim-oh); 10,43(s, 1H, 3-OH). 13 C-NMR δ ppm 14,7 és 15,6(C-16a és C-18); 24,0; 26,1; 27,9; 31,8; 37,3; 37,6; 40,1; 40,8; 43,1; 47,1; 92,9(C-4); 112,4(C-2); 126,6(C-1); 132,7 és 139,5(C-5 és C-10); 154,5(C-3); 158,6(C-17). 138c: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,82(t, 3H, J=6,7Hz, 16a-H 3 ); 0,95(s, 3H, 18-H 3 ); 2,22(m, 2H, 6-H 2 ); 7,17(s, 1H, 1-H); 7,61(s, 1H, 17-H); 9,21(s, 1H, oxim-oh); 10,39(s, 1H, 3-OH). 13 C-NMR δ ppm 14,4 és 15,3(C-16a és C-18); 23,7; 25,8; 27,5; 31,4; 37,0; 37,6; 40,2; 40,4; 42,5; 46,7; 83,5(C-4); 111,1(C-2); 135,6(C-1); 136,1 és 140,2(C-5 és C-10); 152,9(C-3); 157,6(C-17). 155

VII. A vegyületek fizikai adatai Szám Szerkezeti képlet Összegképlet Mol. tömeg Hozam (%) Op ( C) R f 140 C 29 H 31 NO 2 425,56 60 olaj 0,24 j 141 C 29 H 31 NO 2 425,56 55 olaj 0,26 j 144a C 31 H 36 O 4 472,62 70 olaj 0,38 j 144b C 31 H 35 FO 4 490,61 55 olaj 0,43 j 144c C 32 H 38 O 4 486,64 60 olaj 0,42 j 144d C 32 H 38 O 5 502,64 60 olaj 0,28 j 145a C 28 H 33 NO 2 415,57 68 99 100 0,40 j 145b C 28 H 32 FNO 2 433,56 60 150 152 0,40 j 145c C 29 H 35 NO 2 429,59 66 138 140 0,34 j 145d C 29 H 32 F 3 NO 2 483,57 63 145 147 0,36 j 156

145e C 29 H 35 NO 3 445,59 75 128 130 0,23 j 146a C 28 H 33 NO 2 415,57 65 73 75 0,24 j 146b C 28 H 32 FNO 2 433,56 58 78 80 0,22 j 146c C 29 H 35 NO 2 429,59 63 75 77 0,24 j 146d C 29 H 32 F 3 NO 2 483,57 61 77 79 0,22 j 146e C 29 H 35 NO 3 445,59 70 110 112 0,18 j 147a C 27 H 32 O 2 388,54 67 olaj 0,47 j 157

147b C 27 H 31 FO 2 406,53 61 51 52 0,48 j 147c C 28 H 34 O 2 402,57 65 olaj 0,52 j 147d C 28 H 31 F 3 O 2 456,54 63 90 91 0,48 j 147e C 28 H 34 O 3 418,57 73 83 85 0,39 j 148a C 27 H 31 NO 2 401,54 68 73 75 0,35 j 148b C 27 H 30 FNO 2 419,53 62 75 76 0,38 j 148c C 28 H 33 NO 2 415,57 67 71 72 0,31 j 148d C 28 H 30 F 3 NO 2 469,54 62 106 108 0,35 j 148e C 28 H 33 NO 3 431,57 74 95 97 0,23 j 158

VII. Melléklet A vegyületek NMR adatai 140: 1 H-NMR δ ppm 0,97(t, 3H, J=6,6Hz, 16a-H 3 ); 1,30(s, 3H, 18-H 3 ); 2,35(s, 3H, 3-OAc- Me); 2,88(m, 2H, 6-H 2 ); 6,84(s, 1H, 4-H); 7,34(m, 3H, 1-H, 2 -,6 -H); 7,47(m, 3H, 3,4,5 - H). 13 C-NMR δ ppm 14,2 és 16,9(C-16a és C-18); 20,7(OAc-Me); 23,9, 25,0; 26,4; 29,8; 33,6; 37,1; 37,2; 39,6; 42,6; 47,6; 84,4 és 93,1(2x1C: 2a és 2b); 114,4(C-2); 122,0(C-4); 122,9(C-1 ); 126,0(C-17); 128,2 és 131,3(2x2C+1C: C-2,3,4,5,6 ); 130,0(C-1); 136,8 és 138,5(C-5 és C-10); 149,2(C-3); 169,0(Ac-CO). 141: 1 H-NMR δ ppm 0,84(m, 3H, J=6,6Hz, 16a-H 3 ); 0,95(s, 3H, 18-H 3 ); 2,34(s, 3H, 3-OAc- Me); 2,84(m, 2H, 6-H 2 ); 7,00( d, 1H, J=8,5Hz, 2-H); 7,39(d, 1H, J=8,5Hz, 1-H); 7,43(m, 3H, 3,4,5 -H); 7,52(m, 2H, 2,6 -H). 144a: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,80(s, 3H, 18-H 3 ); 0,87(s, 3H, 16a-H 3 ); 2,04(s, 3H, 17- OAc-Me), 2,33(s, 3H, 3-OAc-Me); 2,85(m, 2H, 6-H 2 ); 3,80 és 3,87(2 d, 2 1H, J=11,0 Hz, 17-H 2 ); 6,92(s, 1H, 4-H); 7,42 7,49(átfedő multiplettek, 6H, 1-H, 2,3,4,5,6 -H). 13 C- NMR δ ppm 14,2 és 15,5(C-16a és C-18); 20,4 és 20,6 (2 1C: 3-OAc-Me és 17-OAc-Me); 24,2; 25,5; 26,4; 29,7; 30,5; 35,4; 36,9; 40,5; 42,7; 45,1; 71,1(C-17); 84,8 és 92,6(2x1C: 2a és 2b); 113,5(C-2); 122,0(C-4); 122,1(C-1 ); 128,7 és 131,1(2x2C+1C: C-2,3,4,5,6 ); 129,5(C-1); 138,1 és 139,3(C-5 és C-10); 148,8(C-3); 168,6 és 170,4(2 1C: Ac-CO). 144b: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,80(s, 3H, 16a-H 3 ); 0,87(s, 3H, 18-H 3 ); 2,04(s, 3H, 17- OAc-Me); 2,32(s, 3H, 3-OAc-Me); 2,84(m, 2H, 6-H 2 ); 3,80 és 3,87(2 d, 2 1H, J=11,0 Hz, 17-H 2 ); 6,93(s, 1H, 4-H); 7,27(t, 2H, J=8,8 Hz, 3,5 -H); 7,49(s, 1H, 1-H); 7,55(dd, 2H, J=8,8 Hz, J=5,5 Hz, 2,6 -H). 13 C-NMR δ ppm 14,2 és 15,5(C-16a és C-18); 20,4 és 20,6(2 1C: 3-OAc-Me és 17OAc-Me); 24,3; 25,5; 26,4; 28,9; 30,5; 35,4; 36,9; 40,5; 42,7; 45,1; 71,1(C-17), 84,6 és 91,5(2x1C: 2a és 2b); 113,2(C-2); 115,8(d, 2C, J=22,2 Hz, C- 3,5 ); 118,6(C-1 ); 122,1(C-4); 129,6(C-1); 133,4(d, 2C, J=8,5 Hz, C-2,6 ); 138,1 és 139,3(C-5 és C-10); 148,8(C-3); 160,9(d, J=244 Hz, C-4 ); 168,6 és 170,4(2 1C: Ac-CO). 144c: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,80(s, 3H, 18-H 3 ); 0,86(s, 3H, 16a-H 3 ); 2,04 és 2,32(2xs, 2x3H, 3-OAc-Me és 17-OAc-Me); 2,33(s, 3H, 4 -Me); 2,85(m, 2H, 6-H 2 ); 3,80 és 3,87(2 d, 2 1H, J=11,0 Hz, 17-H 2 ); 6,92(s, 1H, 4-H); 7,23(d, 2H, J=7,9 Hz, 3 -,5 -H); 7,39(d, 2H, J=7,9 Hz, 2 -,6 -H); 7,47(s, 1H, 1-H). 13 C-NMR δ ppm 14,2 és 15,5(C-16a és C-18); 20,4 és 159

20,6 és 20,9(2 1C: 3-OAc-Me és 17-OAc-Me és 4 -Me); 24,3; 25,5; 26,4; 29,0; 30,5; 35,4; 36,9; 40,6; 42,7; 45,1; 71,1(C-17); 84,2 és 92,8(2x1C: 2a és 2b); 113,7(C-2); 119,1(C-1 ); 122,0(C-4); 129,3 és 131,0(2x2C: C-2,3,5,6 ); 129,4(C-1); 138,1 és 138,5 és 139,0(C-5 és C-10 és C-4 ); 148,8(C-3); 168,6 és 170,4(2 1C: Ac-CO). 144d: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,80(s, 3H, 18-H 3 ); 0,87(t, 3H, J=6,6 Hz, 16a-H 3 ); 2,04(s, 3H, 17-OAc-Me); 2,31(s, 3H, 3-OAc-Me); 2,84(m, 2H, 6-H 2 ); 3,79(s, 3H, 3-OMe); 3,80 és 3,87(2 d, 2 1H, J=11,0 Hz, 17-H 2 ); 6,90(s, 1H, 4-H); 6,98(d, 2H, J=8,4 Hz, 3,5 -H); 7,43(d, 2H, J=8,4 Hz, 2,6 -H), 7,45(s, 1H, 1-H). 13 C-NMR δ ppm 14,2 és 15,5(C-16a és C- 18); 20,4 és 20,6(2 1C: 3-OAc-Me és 17-OAc-Me); 24,3; 25,6; 26,4; 29,9; 30,5; 35,4; 36,9; 40,6; 42,7; 45,1; 55,2(4 -OMe); 71,1(C-17); 83,4 és 92,8(2x1C: 2a és 2b); 113,9 és 114,0(C- 1 és C-2); 114,4 és 132,7(2x2C: C-2,3,5,6 ); 122,0(C-4); 129,3(C-1); 138,0 és 138,7(C-5 és C-10); 148,7(C-3); 159,5(C-4 ); 168,6 és 170,4(2 1C: Ac-CO). 145a: 1 H-NMR δ ppm 0,89(t, 3H, J=6,7 Hz, 16a-H 3 ); 1,08(s, 3H, 18-H 3 ); 2,88(m, 2H, 6-H 2 ); 3,88(s, 3H, OMe); 6,60(s, 1H, 4-H); 7,31 7,34(átfedő multiplettek, 4H, 1-H, 3,4,5 -H); 7,42(s, 1H, 17-H); 7,54(d, J=8,5 Hz, 2,6 -H). 13 C-NMR δ ppm 14,5 és 15,3(C-16a és C-18); 24,3; 25,8; 27,1; 30,6; 32,1; 37,3; 40,7; 41,2; 42,9; 47,8; 55,8(OMe); 86,1 és 92,3(2x1C: 2a és 2b); 109,8(C-2); 110,7(C-4); 123,7(C-1 ); 127,8(C-1); 128,1 és 131,5(2x2C: C-2,3,5,6 ); 130,7(C-4 ); 132,0(C-10); 138,7(C-5); 157,7(C-3); 160,6(C-17). 145b: 1 H-NMR δ ppm 0,89(t, 3H, J=6,7 Hz, 16a-H 3 ); 1,09(s, 3H, 18-H 3 ); 2,88(m, 2H, 6-H 2 ); 3,88(s, 3H, OMe); 6,60(s, 1H, 4-H); 7,02(m, 2H, 3,5 -H); 7,32 és 7,40(2xs, 2x1H, 1-H és 17-H); 7,52(m, 2H, 2,6 -H). 13 C-NMR δ ppm 14,5 és 15,4(C-16a és C-18); 24,3; 25,9; 27,1; 30,7; 32,2; 37,3; 40,8; 41,4; 43,0; 47,8; 55,8(OMe); 85,9 és 91,3(2x1C: 2a és 2b); 109,6(C-2); 110,8(C-4); 115,4(d, 2C, J=22,0 Hz, C-3,5 ); 119,9(C-1 ); 130,7(C-1); 133,4(d, 2C, J=8,4 Hz, C-2,6 ); 132,2(C-10); 138,8(C-5); 157,7(C-3); 160,7(C-17); 162,5(d, J=244 Hz, C-4 ). 145c: 1 H-NMR δ ppm 0,88(t, 3H, J=6,7 Hz, 16a-H 3 ); 1,08(s, 3H, 18-H 3 ); 2,35(s, 3H, 4 -Me); 2,88(m, 2H, 6-H 2 ); 3,87(s, 3H, OMe); 6,59(s, 1H, 4-H); 7,13(d, 2H, J=7,9 Hz, 3,5 -H); 7,31 és 7,41(2xs, 2x1H, 1-H és 17-H); 7,43(d, 2H, J=7,9 Hz, 2,6 -H). 13 C-NMR δ ppm 14,5 és 15,4(C-16a és C-18); 21,5(4 -Me); 24,3; 25,9; 27,2; 30,7; 32,2; 37,4; 40,8; 41,4; 43,1; 47,9; 55,9(OMe); 85,5 és 92,6(2x1C: 2a és 2b); 110,0(C-2); 110,8(C-4); 120,7(C-1 ); 128,9 és 131,5(2x2C: C-2,3,5,6 ); 130,7(C-1); 132,1(C-10); 137,9 és 138,5(C-5 és C-4 ); 157,7(C- 3); 160,8(C-17). 145d: 1 H-NMR δ ppm 0,89(t, 3H, J=6,7 Hz, 16a-H 3 ); 1,09(s, 3H, 18-H 3 ); 2,89(m, 2H, 6-H 2 ); 3,89(s, 3H, OMe); 6,62(s, 1H, 4-H); 7,32 és 7,43(2xs, 2x1H, 1-H és 17-H); 7,58(d, 2H, J=7,9 Hz, 3,5 -H); 7,63(d, 2H, J=7,9 Hz, 2,6 -H). 13 C-NMR δ ppm 14,5 és 15,4(C-16a és C-18); 24,3; 25,9; 27,1; 30,8; 32,2; 37,3; 40,8; 41,4; 43,0; 47,9; 55,9(OMe); 88,9 és 91,1(2x1C: 2a és 2b); 109,1(C-2); 110,8(C-4); 123,8(d, J=272 Hz, CF 3 ); 125,1(C-1 ); 129,6(C-1); 130,9 és 131,7(2x2C: C-2,3,5,6 ); 132,3(C-10); 139,5(C-5); 137,9(d, J=32,7 Hz, C-4 ); 157,9(C- 3); 160,8(C-17). 160

145e: 1 H-NMR δ ppm 0,89(t, 3H, J=6,7 Hz, 16a-H 3 ); 1,08(s, 3H, 18-H 3 ); 2,87(m, 2H, 6-H 2 ); 3,82 és 3,88(2xs, 2x3H, 3-OMe és 4 -OMe); 6,59(s, 1H, 4-H); 6,86(d, 2H, J=8,5 Hz, 3,5 - H); 7,31 és 7,40(2xs, 2x1H, 1-H és 17-H); 7,48(d, 2H, J=8,5 Hz, 2,6 -H). 13 C-NMR δ ppm 14,1 és 14,9(C-16a és C-18); 23,9; 25,5; 26,8; 30,3; 31,8; 36,9; 40,4; 40,9; 42,7; 47,5; 54,9 és 55,5(3-OMe és 4 -OMe); 84,4 és 91,9(2x1C: 2a és 2b); 109,7(C-2); 110,4(C-4); 113,4 és 132,6(2x2C: C-2,3,5,6 ); 115,5(C-1 ); 130,3(C-1); 131,7(C-10); 137,9(C-5); 157,2 és 158,9(C-3 és C-4 ); 160,2(C-17). 146a: 1 H-NMR δ ppm 0,88(t, 3H, J=6,7 Hz, 16a-H 3 ); 1,07(s, 3H, 18-H 3 ); 2,87 és 3,23(2xm, 2x1H, 6-H 2 ); 3,89(s, 3H, OMe); 6,75(d, 1H, J=8,5Hz, 2-H); 7,25(d, 1H, J=8,5Hz, 1-H); 7,30 7,34(átfedő multiplettek, 3H, 3,4,5 -H); 7,42(s, 1H, 17-H); 7,55(m, 2H, 2 -,6 -H). 13 C- NMR δ ppm 13,9 és 14,4(C-16a és C-18); 22,5; 24,2; 25,8; 27,0; 32,0; 37,3; 40,2; 41,2; 43,3; 47,8; 55,9(OMe); 84,8 és 97,8(2x1C: 4a és 4b); 107,9(C-2); 111,3(C-4); 123,8(C-1 ); 126,2(C-1); 127,8(C-4 ); 128,0 és 131,4(2x2C: C-2,3,5,6 ); 132,4(C-10) és 140,4(C-5); 158,1(C-3); 160,4(C-17). 146b: 1 H-NMR δ ppm 0,88(t, 3H, J=6,7 Hz, 16a-H 3 ); 1,07(s, 3H, 18-H 3 ); 2,87 és 3,22(2xm, 2x1H, 6-H 2 ); 3,89(s, 3H, OMe); 6,74(d, 1H, J=8,5 Hz, 2-H); 7,04(m, 2H, 3,5 -H); 7,19(d, 1H, J=8,5 Hz, 1-H); 7,30(s, 1H, 17-H); 7,53(m, 2H, 2,6 -H). 13 C-NMR δ ppm 14,5 és 15,3(C-16a és C-18); 24,3; 26,0; 27,1; 29,4; 31,9; 37,4; 40,3; 41,1; 43,3; 47,8; 55,9(OMe); 84,1 és 97,5(2x1C: 4a és 4b); 108,0(C-2); 111,2(C-4); 115,3(d, 2C, J=22,1 Hz, C-3,5 ); 120,0(C-1 ); 126,4(C-1); 133,3(d, 2C, J=8,5 Hz, C-2,6 ); 132,6(C-10); 140,1(C-5); 158,2(C- 3); 160,5(d, J=246 Hz, C-4 ); 160,6(C-17). 146c: 1 H-NMR δ ppm 0,89(t, 3H, J=6,7 Hz, 16a-H 3 ); 1,06(s, 3H, 18-H 3 ); 2,36(s, 3H, 4 -Me); 2,86 és 3,24(2xm, 2x1H, 6-H 2 ); 3,89(s, 3H, OMe); 6,74(d, 1H, J=8,5 Hz, 2-H); 7,14(d, 2H, J=7,9 Hz, 3, 5 -H); 7,23(d, 1H, J=8,5 Hz, 1-H); 7,29(s, 1H, 17-H); 7,45(d, 2H, J=7,9 Hz, 2,6 -H). 13 C-NMR δ ppm 14,5 és 15,4(C-16a és C-18); 20,2(4 -Me); 24,3; 26,0; 27,2; 29,4; 32,2; 37,4; 40,4; 42,5; 43,4; 47,9; 55,9(OMe); 84,4 és 97,8(2x1C: 4a és 4b); 108,0(C-2); 111,6(C-4); 124,4(C-1 ); 126,1(C-1); 128,9 és 131,4(2x2C: C-2,3,5,6 ); 130,8 és 132,6 és 140,5(C-5 és C-10 és C-4 ); 158,1(C-3); 160,7(C-17). 146d: 1 H-NMR δ ppm 0,85(t, 3H, J=6,7 Hz, 16a-H 3 ); 1,03(s, 3H, 18-H 3 ); 2,84 és 3,18(2xm, 2x1H, 6-H 2 ); 3,86(s, 3H, OMe); 6,72(d, 1H, J=8,5 Hz, 2-H); 7,22 7,26(átfedő multiplettek, 2H, 1-H és 17-H); 7,55(d, 2H, J=7,5 Hz, 3,5 -H); 7,61(d, 2H, J=7,5 Hz, 2,6 -H). 13 C-NMR δ ppm 14,6 és 15,4(C-16a és C-18); 24,3; 26,0; 27,1; 29,4; 32,2; 37,4; 40,4; 41,2; 43,3; 47,8; 55,9(OMe); 83,6 és 97,2(2x1C: 4a és 4b); 108,1(C-2); 110,7(C-4); 123,8(d, J=271 Hz, CF 3 ); 119,8(C-1 ); 121,5(C-1); 125,2 és 131,7(2x2C: C-2,3,5,6 ); 127,7(d, J=32,5 Hz, C-4 ); 132,7(C-10); 140,8(C-5); 158,4(C-3); 160,5(C-17). 146e: 1 H-NMR δ ppm 0,88(t, 3H, J=6,7 Hz, 16a-H 3 ); 1,07(s, 3H, 18-H 3 ); 2,85 és 3,23(2xm, 2x1H, 6-H 2 ); 3,82 és 3,89(2xs, 2x3H, 3-OMe és 4 -OMe); 6,73(d, 1H, J=8,5 Hz, 2-H); 6,87(d, 2H, J=8,5 Hz, 3,5 -H); 7,22(d, 1H, J=8,5 Hz, 1-H); 7,30(s, 1H, 17-H); 7,49(d, 2H, J=8,5 Hz, 2,6 -H). 13 C-NMR δ ppm 14,5 és 15,3(C-16a és C-18); 22,6; 24,2; 25,9; 27,1; 31,8; 37,3; 40,3; 41,1; 43,3; 47,8; 55,2 és 55,8(2x1C: 3-OMe és 4 -OMe); 82,9 és 98,6(2x1C: 4a és 4b); 107,9(C-2); 111,6(C-4); 113,8 és 132,9(2x2C: C-2,3,5,6 ); 116,0(C-1 ); 125,9(C-1); 132,5(C-10);140,3(C-5); 157,9 és 159,3(C-3 és C-4 ); 160,5(C-17). 161

147a: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,85 0,88(átfedő multiplettek, 2x3H, 18- és 16a-H 3 ); 2,75(m, 2H, 6-H 2 ); 4,20 és 4,26(2xd, 2x1H, J=11,0 Hz, 17-H 2 ); 6,58(s, 1H, 4-H); 7,26(s, 1H, 1-H); 7,39(t, 3H, J=8,5 Hz, 3,4,5 -H); 7,49(d, 2H, J=8,5 Hz, 2,6 -H); 9,64(s, 1H, 3-OH). 13 C-NMR δ ppm 14,5 és 15,3(C-16a és C-18); 24,3; 25,8; 27,1; 30,6; 32,1; 37,3; 40,7; 41,2; 42,9; 47,8; 75,2(C-17); 86,1 és 92,3(2x1C: 2a és 2b); 109,8(C-2); 110,7(C-4); 123,7(C-1 ); 127,8(C-1); 128,1 és 131,5(2x2C: C-2,3,5,6 ); 130,7(C-4 ); 132,0(C-10); 138,7(C-5); 157,7(C-3). 147b: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,84 0,86(átfedő multiplettek, 2x3H, 18- és 16a-H 3 ); 2,75(m, 2H, 6-H 2 ); 4,19 és 4,25(2xd, 2x1H, J=11,0 Hz, 17-H 2 ); 6,59(s, 1H, 4-H); 7,22 7,30(átfedő multiplettek, 4H, 2,3,5,6 -H); 7,54(s, 1H, 1-H); 9,62(s, 1H, 3-OH). 13 C-NMR δ ppm 14,2 és 15,1(C-16a és C-18); 24,2; 25,6; 26,6; 28,9; 29,8; 35,1; 37,2; 40,9; 42,5; 45,1; 75,3(C-17); 87,90 és 90,3(2x1C: 2a és 2b); 106,9(C-2); 114,9(C-4); 115,7(d, 2C, J=22,1 Hz, C-3,5 ); 119,6(C-1 ); 129,8(C-1); 130,7 és 138,8(C-5 és C-10); 133,2(d, 2C, J= 8,4 Hz, C- 2,6 ); 155,8(C-3), 162,5(d, J=244 Hz, C-4 ). 147c: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,85 0,87(átfedő multiplettek, 2x3H, 18- és 16a-H 3 ); 2,33(s, 3H, 4 -H 3 ); 2,75(m, 2H, 6-H 2 ); 4,20 és 4,26(2xd, 2x1H, J=11,0 Hz, 17-H 2 ); 6,58(s, 1H, 4-H); 7,20(d, 2H, J=7,9 Hz, 3,5 -H); 7,24(s, 1H, 1-H); 7,38(d, 2H, J=7,9 Hz, 2,6 -H); 9,59(s, 1H, 3-OH). 13 C-NMR δ ppm 14,5 és 15,4(C-16a és C-18); 21,5(4 -Me); 24,3; 25,9; 27,2; 30,7; 32,2; 37,4; 40,8; 41,4; 43,1; 47,9; 75,2(C-17); 85,5 és 92,6(2x1C: 2a és 2b); 110,0(C-2); 110,8(C-4); 120,7(C-1 ); 128,9 és 131,5(2x2C: C-2,3,5,6 ); 130,7(C-1); 132,1(C-10); 138,5(C-5); 137,9(C-4 ); 157,7(C-3). 147d: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,82 0,86(átfedő multiplettek, 2x3H, 18- és 16a-H 3 ); 2,76(m, 2H, 6-H 2 ); 4,19 és 4,25(2xd, 2x1H, J=11,0 Hz, 17-H 2 ); 6,61(s, 1H, 4-H); 7,29(s, 1H, 1-H); 7,69(d, 2H, J=7,9 Hz, 3,5 -H); 7,74(d, 2H, J=7,9 Hz, 2,6 -H); 9,77(s, 1H, 3-OH). 13 C-NMR δ ppm 14,0 és 14,9(C-16a és C-18); 24,1; 25,4; 27,5; 29,7; 30,3; 34,9; 37,1; 40,8; 42,3; 45,1; 75,1(C-17); 90,0 és 92,4(2x1C: 2a és 2b); 106,3(C-2); 114,9(C-4); 123,8(d, J=270 Hz, CF 3 ); 125,3 és 131,5(2x2C: C-2,3,5,6 ); 126,1(C-1 ); 127,4(C-1); 129,9(d, J=32,5 Hz, C-4 ); 130,7(C-10);139,5(C-5); 156,0(C-3). 147e: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,85 0,87(átfedő multiplettek, 2x3H, 18- és 16a-H 3 ); 2,75(m, 2H, 6-H 2 ); 3,78(s, 3H, OMe); 4,20 és 4,26(2xd, 2x1H, J=11,0 Hz, 17-H 2 ); 6,57(s, 1H, 4-H); 6,96(d, 2H, J=8,5 Hz, 2,6 -H); 7,23(s, 1H, 1-H); 7,43(d, 2H, J=8,5 Hz, 3,5 -H); 9,54(s, 1H, 3-OH). 13 C-NMR δ ppm 14,1 és 15,1(C-16a és C-18); 24,2; 25,6; 26,6; 29,8; 30,4; 35,1; 37,2; 40,9; 42,5; 45,1; 55,1(4 -OMe); 75,3(C-17); 84,4 és 91,9(2x1C: 2a és 2b); 109,7(C-2); 110,4(C-4); 113,4 és 132,6(2x2C: C-2,3,5,6 ); 115,5(C-1 ); 130,3(C-1); 131,7(C-10); 137,9(C-5); 157,2 és 158,9(C-3 és C-4 ). 148a: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,83(t, 3H, J=6,7 Hz, 16a-H 3 ); 0,98(s, 3H, 18-H 3 ); 2,75(m, 2H, 6-H 2 ); 6,59(s, 1H, 4-H); 7,18(s, 1H, 1-H); 7,26(s, 1H, 17-H); 7,39(d, 3H, J=8,5 Hz, 3,4,5 -H); 7,49(d, J=8,5 Hz, 2,6 -H); 9,63(s, 1H, 3-OH); 10,38(s, 1H, oxim-oh). 13 C- NMR δ ppm 14,2 és 15,2(C-16a és C-18); 23,6; 25,4; 26,5; 29,5; 31,3; 36,9; 40,2; 40,4; 42,2; 46,8; 87,2 és 91,2(2x1C: 2a és 2b); 106,9(C-2); 114,8(C-4); 123,1(C-1 ); 127,8(C-1); 128,4 és 130,8(2x2C: C-2,3,5,6 ); 129,6(C-4 ); 130,5(C-10); 138,6(C-5); 155,6(C-3); 157,6(C- 17). 162

148b: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,82(s, 3H, 16a-H 3 ); 0,97(s, 3H, 18-H 3 ); 2,75(m, 2H, 6- H 2 ); 6,59(s, 1H, 4-H); 7,16(s, 1H, 1-H); 7,24(m, 2H, 3,5 -H); 7,47(s, 1H, 17-H); 7,54(m, 2H, 2,6 -H); 9,63(s, 1H, 3-OH); 10,38(s, 1H, oxim-oh). 13 C-NMR δ ppm 14,3 és 15,3(C-16a és C-18); 23,7; 25,5; 29,2; 29,6; 31,4; 36,9; 40,2; 40,5; 42,3; 46,9; 86,9 és 90,2(2x1C: 2a és 2b); 106,9(C-2); 114,8(C-4); 115,6(d, 2C, J=22,0 Hz, C-3,5 ); 119,6(C-1 ); 129,7(C-1); 133,1(d, 2C, J=8,4 Hz, C-2,6 ); 132,8(C-10); 138,7(C-5); 155,7(C-3); 157,7(C-17); 160,4(d, J=244 Hz, C-4 ). 148c: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,82(t, 3H, J=6,7 Hz, 16a-H 3 ); 0,95(s, 3H, 18-H 3 ); 2,36(s, 3H, 4 -H 3 ); 2,73(m, 2H, 6-H 2 ); 7,15(s, 1H, 4-H); 7,32(d, 2H, J=7,9 Hz, 3,5 -H); 7,39(s, 1H, 1-H); 7,59(s, 1H, 17-H); 7,77(d, 2H, J=7,9 Hz, 2,6 -H); 10,38(s, 2H, oxim-oh és 3-OH). 13 C-NMR δ ppm 14,4 és 15,3(C-16a és C-18); 20,9(4 -Me); 23,8; 25,8; 27,5; 28,9; 31,4; 37,0; 37,6; 40,4; 42,5; 46,7; 82,4 és 83,5(2x1C: 2a és 2b); 119,7(C-2); 124,4(C-4); 126,7(C-1 ); 129,1 és 129,6(2x2C: C-2,3,5,6 ); 131,2(C-1); 135,6(C-4 ); 134,9(C-10); 140,2(C-5); 153,3(C-3); 157,7(C-17). 148d: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,82(t, 3H, J=6,7 Hz, 16a-H 3 ); 0,95(s, 3H, 18-H 3 ); 2,82(m, 2H, 6-H 2 ); 6,62(átfedő multiplettek, 3H, 4-H, 2,6 -H); 7,23(s, 1H, 1-H); 7,37(s, 1H, 17-H); 7,80(m, 2H, 3,5 -H); 10,38(s, 2H, oxim-oh és 3-OH). 13 C-NMR δ ppm 14,4 és 15,4(C-16a és C-18); 23,8; 25,7; 28,9; 31,5; 37,1; 37,1; 37,8; 40,5; 42,3; 46,9; 88,6 és 91,9(2x1C: 2a és 2b); 112,0(C-2); 119,3(d, 2C, J=269,4Hz, CF 3 ); 125,4(d, 2C, C-3,5 ); 125,8(C-4); 128,2(d, 2C, C-2,6 ); 129,2(d, 2C, J=32,8 Hz, C-4 ); 131,9(C-1 ); 133,5(C-1); 135,8(C-10); 138,8(C- 5); 154,6(C-3); 157,8(C-17). 148e: (DMSO-d 6 ) 1 H-NMR δ ppm 0,89(t, 3H, J=6,7 Hz, 16a-H 3 ); 1,08(s, 3H, 18-H 3 ); 2,87(m, 2H, 6-H 2 ); 3,88(s, 3H, 4 -OMe); 6,59(s, 1H, 4-H); 6,86(d, 2H, J=8,5 Hz, 3,5 -H); 7,31(s, 1H, 1-H); 7,40(s, 1H, 17-H); 7,48(d, 2H, J=8,5 Hz, 2,6 -H); 9,63 és 10,38(2xs, 2x1H, 3-OH és oxim-oh). 13 C-NMR δ ppm 14,2 és 15,2(C-16a és C-18); 23,6; 25,4; 26,5; 29,5; 31,3; 36,9; 40,2; 40,4; 42,2; 46,8; 55,6(4 -OMe); 85,6 és 91,2(2x1C: 2a és 2b); 107,4(C-2); 113,9 és 132,3(2x2C: C-2,3,5,6 ); 114,7(C-4); 115,0(C-1 ); 129,5(C-1); 130,5(C-10); 138,1(C- 5); 155,4(C-3); 157,6(C-17); 158,8(C-4 ). 163

VIII. A vegyületek fizikai adatai Szám A vegyület képlete Összegk. Mol. tömeg Hozam (%) Op. ( C) R f 149 C 25 H 37 NO 2 Si 411,65 97 nem izoláltuk 0,44 j 151a C 29 H 36 N 4 O 2 472,62 67 97 0,22 c 151b C 30 H 38 N 4 O 2 486,65 65 97 0,25 c 151c C 32 H 42 N 4 O 2 514,70 62 95 97 0,29 c 151d C 33 H 44 N 4 O 2 528,73 61 96 97 0,31 c 151e C 29 H 35 N 5 O 4 517,62 66 98 100 0,22 c 153 C 24 H 32 O 2 Si 380,60 98 123 125 0,31 j 154a C 28 H 31 N 3 O 2 441,56 68 98 0,49 c 164

154b C 29 H 33 N 3 O 2 455,59 66 100 0,83 c 154c C 31 H 37 N 3 O 2 483,64 64 100 102 0,57 c 154d C 32 H 39 N 3 O 2 497,67 63 98 100 0,59 c 154e C 28 H 30 N 4 O 4 486,56 67 115 118 0,73 c 155a C 28 H 34 N 4 O 2 458,60 68 89 90 0,33 i 155e C 28 H 33 N 5 O 4 503,59 67 97 98 0,12 i 156a C 27 H 29 N 3 O 2 427,54 69 102 105 0,26 i 156e C 27 H 28 N 4 O 4 472,54 67 110 112 0,57 i 165