(11) Lajstromszám: E (13) T2 EURÓPAI SZABADALOM SZÖVEGÉNEK FORDÍTÁSA

Átírás

1 !HU T2! (19) HU (11) Lajstromszám: E (13) T2 MAGYAR KÖZTÁRSASÁG Magyar Szabadalmi Hivatal EURÓPAI SZABADALOM SZÖVEGÉNEK FORDÍTÁSA (21) Magyar ügyszám: E (22) A bejelentés napja: (96) Az európai bejelentés bejelentési száma: EP (97) Az európai bejelentés közzétételi adatai: EP (97) Az európai szabadalom megadásának meghirdetési adatai: EP B (1) Int. Cl.: A23L 1/29 (06.01) A23L 1/ (06.01) (87) A nemzetközi közzétételi adatok: WO PCT/US 03/03187 () Elsõbbségi adatok: P US (72) Feltalálók: BURGHER, Anita, Maria, King of Prussia, PA 196 (US); KAUP, Susan, Marie, Collingswood, NJ 089 (US); KUHLMAN, Charles, Francis, Media, PA (US) (73) Jogosult: Wyeth, Madison, New Jersey 079 (US) (74) Képviselõ: dr. Pethõ Árpád, DANUBIA Szabadalmi és Jogi Iroda Kft., Budapest (4) Nukleotidokat tartalmazó csecsemõtápszer (7) Kivonat A találmány tárgya koraszülötteknek és kis súllyal született csecsemõknek szánt tápszer, mely a koraszülöttet szült anyák tejének összetételén alapul, és a következõ nukleotidokat tartalmazza: 4,2 mg/l 11,6 mg/l CMP; 2,4 mg/l 8,3 mg/l UMP; 2,4 mg/l 6,0 mg/l GMP; 0,1 mg/l 1,7 mg/l IMP; és 3,3 mg/l 9,9 mg/l AMP. HU T2 A leírás terjedelme 6 oldal Az európai szabadalom ellen, megadásának az Európai Szabadalmi Közlönyben való meghirdetésétõl számított kilenc hónapon belül, felszólalást lehet benyújtani az Európai Szabadalmi Hivatalnál. (Európai Szabadalmi Egyezmény 99. cikk (1)) A fordítást a szabadalmas az 199. évi XXXIII. törvény 84/H. -a szerint nyújtotta be. A fordítás tartalmi helyességét a Magyar Szabadalmi Hivatal nem vizsgálta.

2 1 HU T2 2 A találmány tárgyköre A jelen találmány nukleotidokat tartalmazó csecsemõtápszerre irányul. Közelebbrõl a jelen találmány koraszülötteknek vagy kis súllyal világra jött csecsemõknek szánt, a táplálásukra alkalmas mennyiségû nukleotidokat tartalmazó tápszerrel kapcsolatos A technika állásának ismertetése A koraszülöttek tápanyagigénye magasabb, mert a testszöveteik gyors korai fejlõdését fedezni kell. A szülészeti ápolási intézményekben a kis súllyal (>00 g), de különösen a nagyon kis súllyal (<00 g) született csecsemõk túlélése folyamatosan nõ. Ezen csecsemõk belsõ tápanyag-raktározó kapacitása azonban súlyosan korlátozott. Az éretlen újszülött jelentõsen különbözik az idõre született újszülöttõl. Az éretlen újszülött kezdeti éretlensége és a rákövetkezõ gyors növekedés magasabb tápanyagbevitelt tesz szükségessé, mint az idõre született újszülöttnél. Az elmúlt néhány évben a táplálkozástudósok jelentõs haladást értek el az éretlen újszülött tápanyagigényének megállapításában, és a koraszülötteknek szánt készítmények összetételét ennek megfelelõen módosították. A koraszülötteknek szánt készítmények összetétele alapvetõen az anyatej összetételén és a méhen belüli növekedésen alapul. A koraszülötteknek szánt készítményeket ennek megfelelõen módosították, hogy megnövelt mennyiségû tápanyagot, így fehérjét és zsírt, valamint ásványi anyagokat, így kalciumot, foszfort, rezet és cinket tartalmazzanak. Az éretlen újszülöttek megfelelõ táplálására régóta keresnek megoldásokat. Erõfeszítések történtek a standard csecsemõtápszerek táplálóképességének növelésére, hogy különösen az éretlen újszülöttek táplálására alkalmasak legyenek. Nukleotidokat minden élõ sejtben találunk. Az emberi anyatej 13 különbözõ nukleotidot tartalmaz. A legmagasabb koncentrációban elõforduló nukleotid a citidin-monofoszfát (CMP), a guanozin-monofoszfát (GMP), az adenozin-monofoszfát (AMP), az uridin-monofoszfát (UMP) és az inozin-monofoszfát (IMP). Az emberi anyatej továbbá tartalmaz más nukleozidokat, nukleotid-polimereket és nukleotid-analógokat, melyek hozzáadódnak a teljes nukleotid-állományhoz. Az éretlen újszülöttek de novo nukleotid-szintetizáló és nukleotidvisszatartó képessége azonban elégtelen lehet. Csecsemõtápszereket többen feljavítottak nukleotidokkal, hogy az anyatejet szimulálják, és bizonyos állapotokat kezeljenek. Így például az US sz. szabadalom olyan csecsemõtápszert közöl, melyben CMP, UMP, AMP és GMP található, amivel az immunrendszer erõsödését és a hasmenés elkerülését lehetõvé tevõ táplálékot állítanak elõ. Az US sz. szabadalom nukleotiddal dúsított, újszülött táplálására szánt humanizált tejet közöl, mely AMP¹t, CMP¹t, GMP¹t, IMP¹t és UMP¹t tartalmaz megadott koncentrációkban. Az US és US sz. szabadalmak hozzáadott nukleotidokkal és nukleozidokkal dúsított csecsemõtápszereket közölnek, melyek erõsen hasonlítanak az anyatejhez, és élettani tulajdonságaik kedvezõbbek. M. Hamosh J. Nutr. 127: (1997) áttekintõ cikke hivatkozik más cikkekre, melyekben megadott koncentrációjú nukleotidokat adnak csecsemõtápszerekhez, hogy az éretlen újszülöttek vagy koraszülöttek számára alkalmassá tegyék azokat. Woltil et al., J. Clin. Nutr. 62: (199) szerint a nukleotid-koncentráció,1 mg/l UMP, 2,2 mg/l GMP, 2,0 mg/l AMP, 1,7 mg/l CMP és 0,7 mg/l IMP. Sanchez-Pozo et al., Pediatr. Res. 37: (199) szerint a nukleotid-koncentráció UMP 0,66 mg/0 kcal, GMP 0,28 mg/0 kcal, AMP 0,2 mg/0 kcal, CMP 0,21/0 kcal és IMP 0,09 mg/kcal. Henderson et al. Pediatr. Res. 1994, 3: 313 A (kivonat) bemutatja, hogy a vörösvértestekben a foszfolipid, dokozahexaénsav és arachidonsav koncentrációját a nagyon kis súllyal született csecsemõkben a tápszer nukleotiddal való dúsítása nem befolyásolja. A dúsítás a leírás szerint mennyiségben és összetételben az emberi tejhez hasonló, de numerikus értékeket nem közöl. A koraszülött gyermeket szült anya tejéhez nukleotidok hozzáadásával hasonlóvá tett csecsemõtápszer azonban mindeddig nem került közlésre. Feltehetõ, hogy a koraszülött esetében a táplálékkal bejuttatott nukleotidok létfontosságúak lehetnek, és fontos szerepet játszhatnak a sejtnövekedésben, energiaátadásban, valamint a bél érésének és fejlõdésének elõsegítésében. A nukleotidok további elõnyöket nyújthatnak biológiai hatásokhoz kapcsolódva, beleértve a jótékony bélflóra elõsegítését, a zsíranyagcsere javítását, és az immunválasz erõsítését. A találmány összefoglaló ismertetése A találmány tárgya koraszülötteknek és kis súllyal született csecsemõknek szánt tápszer, mely tartalmazza a következõket: 4,2 mg/l 11,6 mg/l CMP; 2,4 mg/l 8,3 mg/l UMP; 2,4 mg/l 6,0 mg/l GMP; 0,1 mg/l 1,7 mg/l IMP; és 3,3 mg/l 9,9 mg/l AMP. A találmány részletes leírása A jelen csecsemõtápszerben az összes nukleotidkoncentráció 9,3 mg/l 49,8 mg/l, elõnyösen 12,4 mg/l 37,4 mg/l, legelõnyösebben 1, mg/i 24,9 mg/l. A jelen csecsemõtápszerben a következõ nukleotidok vannak, az alábbi mennyiségekben: a) CMP: 4,2 mg/l 11,6 mg/l¹t; elõnyösen,3 mg/l 7,7 mg/l¹t; b) UMP: 2,4 mg/l 8,3 mg/l, elõnyösen 3,0 mg/l, mg/l¹t; c) GMP: 2,4 mg/l 6,0 mg/l, elõnyösen 3,0 mg/l 4,0 mg/l¹t; d) IMP: 0,1 mg/l 1,7 mg/l, elõnyösen 0,1 mg/l 1,1 mg/l¹t; és e) AMP: 3,3 mg/l 9,9 mg/l, elõnyösen 4,1 mg/l 6,6 mg/l. 2

3 1 HU T2 2 A jelen csecsemõtápszereket tovább lehet dúsítani más, a szakmában elismert, táplálkozás-élettanilag elõnyös összetevõkkel, pl. többszörösen telítetlen zsírsavakkal (pl. arachidonsav és dokozahexaénsav). A jelen tápszerben jelen lehet az összes vitamin és ásványi anyag, mely a koraszülött táplálkozásához nélkülözhetetlen. Ezen vitaminoknak táplálkozástani szempontból jelentõs mennyiségben kell jelen lenniük. A jelen csecsemõtápszerhez adható vitaminok és ásványi anyagok például az A¹vitamin, a B¹vitamin-komplex, a C¹vitamin, a D¹vitamin, az E¹vitamin, a K¹vitamin, a kalcium, a magnézium, a nátrium, a kálium, a foszfor, a réz, a cink, a klorid, a jodid, a szelén, a vas, a niacin, a folsav, a pantoténsav, a biotin, a kolin, az inozitol és a mangán. A jelen találmányban közölt csecsemõtápszerek továbbá tartalmazhatnak a koraszülöttek számára elõnyös makronutrienseket, így karotenoidokat, taurint, kókuszolajat, napraforgóolajat, szójaolajat, természetes vagy szintetikus zsírokat, palmitinsavat, közepes lánchosszúságú triglicerideket, laktózt, maltodextrint, glukózt, szarvasmarha-eredetû oligoszacharidokat vagy azok frakcióit, fölözött tejet, tejsavót, szójafehérjét, rizsfehérjét, fehérje-hidrolizátumokat és laktoferrint. A jelen csecsemõtápszerek a koraszülött és alacsony súllyal született csecsemõk táplálására szolgálnak, és a koraszülötteket világra hozó anyák tejében található koncentrációban tartalmaznak nukleotidokat. Ezen koncentrációk nagyon különböznek az idõre született gyermeket világra hozó anyák tejében található nukleotid-koncentrációktól. A jelen csecsemõtápszerek lehetnek folyékonyak, akár etetésre kész folyadék, akár koncentrált, vízzel hígítandó folyadék formájában; vagy por alakúak, melyeket vízzel kell keverni használat elõtt. A jelen csecsemõtápszer elõállítható megfelelõ mennyiségû tejsavó-fehérje-koncentrátum, fölözött tej, laktóz, növényi olajok és zsíroldható vitaminok összekeverésével, ionmentes vízben. Elõnyösen ezeket az anyagokat olyan mennyiségben keverjük össze, hogy mindegy 2 g/l összkoncentrációt adjanak. Ezután lehet hozzáadni az ásványi sókat, egy magas hõmérsékletû, rövid ideig tartó pasztörizálási lépés elõtt. A megfelelõ ásványi sók közé tartozik a kalcium-klorid, a kalcium-foszfát, a nátrium-citrát, a kálium-hidroxid, kálium-bikarbonát, vas(ii)-szulfát, cink-szulfát, nátriumklorid, réz-szulfát, kálium-jodid, nátrium-szelenit stb. Ezután a keveréket homogenizáljuk és lehûtjük. A hõérzékeny vitaminokat és mikronutrienseket ezután adjuk hozzá. A keveréket ezután ionmentesített vízzel standardizáljuk kb. kb. 160 g/l, elõnyösen kb. 1 g/l szárazanyag-koncentrációra, ami kb. 8 kcal/liternek felel meg. A készítményt hagyományos ultramagas hõmérsékletû sterilizálásnak vethetjük alá, majd csíramentes körülmények között a megfelelõ csomagolásba töltjük. Alternatív megoldásként a készítményt üvegekbe töltjük, és autoklávozzuk. A témában járatos szakember fel fogja ismerni, hogy más ismert eljárások is használhatók lehetnek a jelen csecsemõtápszer elõállítására és sterilizálására A jelen csecsemõtápszert elõ lehet állítani folyékony koncentrátum formájában, melyet azonos térfogatú vízzel kell hígítani a csecsemõ etetése elõtt. Továbbá a készítményt dehidrálni is lehet, például szárítótoronyban, stabil csecsemõtápszer-por elõállítása céljából, aminek elõnyei a stabilitás és a gazdaságos szállítás, mely port a csecsemõ etetése elõtt vízben kell elkeverni. Példák 1. példa Kutatást folytattunk éretlen újszülötteket világra hozott anyáktól gyûjtött tej összes nukleotidkoncentrációjának és az egyes nukleotidok koncentrációjának meghatározására. A kutatás prospektív, nem randomizált, nyílt kísérlet volt. 27 anya adott legalább ml¹es tejmintát. A kutatási programba a következõ kritériumok alapján kerültek be az anyák: nem bentfekvõ, egészséges nõk 18 év között; terhességek száma alatt; tejelválasztás folyamatban; a mintavétel elõre meghatározott napja a szüléstõl számított nap volt. A programba olyan anyák kerültek be, akiknek gyermeke hetes terhesség után született, a gyermek fejlettsége a terhességi hétnek megfelelt és a gyermek születési súlya 1800 g alatt volt. Az anyatej-mintákat szabad nukleotidokra és szabad nukleozidokra elemeztük lúgos foszfatázzal történt inkubáció után. Az enzimkezelés után mért szabadnukleozid-emelkedés a monomer nukleotid-tartalomnak felel meg moláris alapon. Az 1. táblázatban a koncentrációkat a megfelelõ monofoszfátokra fejeztük ki. Az elemzés eredménye az 1. táblázatban látható: 1. táblázat Tartomány (mg/l) Átlag (mg/l) CMP 0,46 14,48,3 UMP 0,29 6,6 3,0 GMP 0,87,16 4,8 IMP 0,00 1,3 0,1 AMP 1,82 8, 4,1 Összes monomer nukleotid 3,44 41,19 17,3 2. példa A jelen csecsemõtápszerre egy példát adunk az alábbiakban. A felhasználásra kész, folyékony csecsemõtápszer-keverék egy jellemzõ 00 literes adagját a következõ módon gyártottuk le. A zsírfázist 86, kg Betapol (Loders Croklaan), 36,1 l magas oleintartalmú napraforgóolaj vagy sáfrányos szeklice (olajözön)-olaj, 8,94 l szójaolaj, 24,7 kg közepes lánchosszúságú triglicerid, 1,36 kg szójalecitin, 2,47 kg 38% arachidonsav/összes zsírsavat tartalmazó olaj (ARASCO, Martek, Columbia, MD) és 3

4 1 HU T2 2 1,6 kg 38% dokozahexaénsav/összes zsírsavat tartalmazó olaj (DHASCO, Martek, Columbia, MD) összekeverésével állítottuk elõ. Ezután a zsíroldható vitaminokat: A¹vitamint (A¹vitamin-palmitát), béta-karotint, D¹vitamint (cholekalciferol), E¹vitamint (DL-alfa-tokoferolacetát), és K¹vitamint (fitonadion) diszpergáltuk a zsírfázisban. Elõmelegített folyékony fölözött tejet, vagy sovány tejport olyan mennyiségben adtunk meleg ionmentesített vízhez, hogy 44 kg fehérjét szolgáltasson; a keverõedényben elõzõleg 36 g nátrium-citrátot és 190 g kálium-bikarbonátot oldottunk fel forró vízben. A zsírfázist lassan adagoltuk a keverõedénybe. A fõbb száraz összetevõket, a laktózt, a tejsavó-fehérje-koncentrátumot és a maltodextrint portölcséres adagolón keresztül juttattuk be. Az adagolt tejsavó-fehérje-koncentrátum mennyisége a fehérjetartalmától függött oly módon, hogy 44 kg fehérjét szolgáltasson. 221 g taurint forró vízben feloldottunk és a keverõedénybe adtunk. A következõ ásványi anyagokat külön-külön feloldottuk vagy diszpergáltuk és intenzív keverés mellett a keverõedénybe adagoltunk: 22 g kalcium-foszfát; 17 g kalcium-klorid; 12 g nátrium-klorid; 643 g kálium-hidroxid; 13 g vas(ii)-szulfát; 72, g kálium-jodid (1%¹os, laktózban elkeverve); 39 g 44%¹os cink-szulfát; 98 g 2,%¹os réz-szulfát és 7,22 g nátrium-szelenit (0,3%¹os, kálium bikarbonátban elkeverve). A keveréket 96±2 C¹ra hevítettük másodpercre, majd 66±2 C¹ra hûtöttük. A keveréket ezután kétsebességû homogenizátorral homogenizáltuk, 0 psig nyomással az elsõ fázisban, és 00 psig-gel a másodikban. A homogenizált keveréket ezután C¹ra hûtöttük egy hõcserélõ tálcával. A keverék egy mintáját zsírtartalomra, ph¹ra és összes szárazanyagra elemeztük. Megfelelõ mennyiségû ionmentes vizet adtunk, hogy a teljes hígítás 80%¹át elérjük, majd elkevertük. Mintát vettünk teljes szárazanyagra és ph¹ra. A véghígításhoz szükséges vízmennyiséget kiszámítottuk. Ezen vízmennyiség egy részében oldottuk fel a nukleotidokat és a vízoldható vitaminokat, mielõtt a keverékhez adtuk õket. A következõ nukleotidokat oldottuk fel meleg vízben és adtuk a keverékhez: 31,7 g citidin- -monofoszfát; 27,9 g adenozin- -monofoszfát; 29,7 g uridin- -monofoszfát, dinátrium¹só;,43 g inozin- -monofoszfát, dinátrium¹só; 22,4 g guanozin- -monofoszfát, dinátrium¹só. A következõ vízoldható vitaminokat oldottuk fel meleg vízben és adtuk a keverékhez: 9 g nikotinamid; 42,3 g kalcium-pantotenát; 8,98 g tiamin-hidroklorid; 3, g riboflavin;,8 g pirodoxin-hidroklorid; 2,1 g folsav; 0,113 g D¹biotin; 7,24 g cianokobalamin; és 4 mio-inozitol. 180 g aszkorbinsavat oldottunk meleg vízben, majd 3 g kálium-bikarbonáttal semlegesítettük. A semleges aszkorbát-oldatot adtunk azután a keverékhez. 6 g citromsavat oldottunk meleg vízben, és adtuk a keverékhez. A keveréket percig kevertettük. A keveréket kb. 123 g/l összes szárazanyagra standardizáltuk. A kezdeti homogenizálás után órával a keveréket ismét homogenizáltuk, és egy Stork UHT (nagyon magas hõmérséklet) csíramentes rendszeren keresztül sterilizáltuk, majd 0 ml üvegekbe töltöttük. Az üvegeket egy Barriquand forgó sterilizátorban gõzsterilizáltuk. Ezen készítmény összetevõi a következõk: Összetevõk Egység /0 ml /0 kcal Fehérje g 2,0 2,44 Zsír g 4,4,37 Szénhidrát g 8,6, Linolénsav mg Energia kcal 82 0 A-vitamin g 90 1 D3-vitamin g 1, 1,8 E-vitamin mg 1,2 1, K1-vitamin g 8 9,76 B1-vitamin g B2-vitamin g B6-vitamin g B12-vitamin g 0,3 0,37 Niacin (NE) g 8 00 Folsav g 48 9 Pantoténsav g 49 Biotin g 2,4 2,9 C-vitamin mg 11 13,4 Kalcium mg 80 97,6 Foszfor mg 42, 1,8 Magnézium mg 8 9,76 Vas mg 0,8 0,98 Cink mg 0,8 0,98 Mangán g 12, Réz g 82, 1 Jód g 12,2 Nátrium mg 3 42,7 Kálium mg 8 4 Klorid mg 60 73,2 Cholin mg 1 18,3 Inozitol mg 4,,49 Taurin mg 4,8,9 CMP mg 0,7 0,9 UMP mg 0, 0,6 GMP mg 0,4 0, IMP mg 0,1 0,12 AMP mg 0,6 0,7 3. példa A következõ csecsemõtápszert készítettük a jelen találmány szerint, a 2. példában leírt eljárásnak megfelelõen: 4

5 1 HU T2 2 Összetevõk Egység /0 ml /0 kcal Fehérje g 2, 2,70 Zsír g 4,23, Szénhidrát g 8,62,6 Linolénsav mg Energia kcal 81,3 0 A-vitamin g D3-vitamin g 3,48 4,28 E-vitamin mg 4,09,03 K1-vitamin g 6,1 7, B1-vitamin g B2-vitamin g 3 B6-vitamin g 122 B12-vitamin g 0,33 0,41 Niacin (NE) g Folsav g,6 0,0 Pantoténsav g 16 1 Biotin g 3,2 4,00 C-vitamin mg 14,6 18,0 Kalcium mg 2 12 Foszfor mg 61 7 Magnézium mg 8,1,0 Vas mg 0,81 1,00 Cink mg 0,81 1,00 Mangán g 4,1,0 Réz g Jód g 24,0 Nátrium mg,6 0,0 Kálium mg 81 0 Klorid mg 73,2 90,0 Cholin mg 1,71 2, Összetevõk Egység /0 ml /0 kcal Inozitol mg,08 37,00 Taurin mg 4,80,90 CMP mg 0,7 0,9 UMP mg 0, 0,6 GMP mg 0,4 0, IMP mg 0,1 0,12 AMP mg 0,6 0,7 SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Csecsemõtápszer koraszülöttek vagy alacsony születési súlyú csecsemõk táplálására, mely 4,2 mg/l 11,6 mg/l CMP¹t; 2,4 mg/l 8,3 mg/l UMP¹t; 2,4 mg/l 6,0 mg/l GMP¹t; 0,1 mg/l 1,7 mg/l IMP¹t; és 3,3 mg/l 9,9 mg/l AMP¹t tartalmaz. 2. Az 1. igénypont szerinti csecsemõtápszer, mely,3 mg/l 7,7 mg/l CMP¹t; 3,0 mg/l, mg/l UMP¹t; 3,0 mg/l 4,0 mg/l GMP¹t; 0,1 mg/l 1,1 mg/l IMP¹t; és 4,1 mg/l 6,6 mg/l AMP¹t tartalmaz. 3. Az 1. igénypont szerinti csecsemõtápszer, melynek összes nukleotidkoncentrációja 9,3 mg/l 49,8 mg/l. 4. A 3. igénypont szerinti csecsemõtápszer, melynek összes nukleotidkoncentrációja 12,4 mg/l 37,4 mg/l.. A 4. igénypont szerinti csecsemõtápszer, melynek összes nukleotidkoncentrációja 1, mg/l 24,9 mg/l. 6. CMP, UMP, GMP, IMP és AMP alkalmazása koraszülöttek vagy alacsony születési súlyú csecsemõk táplálására szolgáló csecsemõtápszer formájában gyártott gyógyszer elõállítására, mely csecsemõtápszer 4,2 mg/l 11,6 mg/l CMP¹t; 2,4 mg/l 8,3 mg/l UMP¹t; 2,4 mg/l 6,0 mg/l GMP¹t; 0,1 mg/l 1,7 mg/l IMP¹t; és 3,3 mg/l 9,9 mg/l AMP¹t tartalmaz. 7. A 6. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a csecsemõtápszer koncentrált, az etetés elõtt vízzel hígítandó folyadék, vagy használat elõtt vízzel való elkeverést igénylõ por.

6 Kiadja a Magyar Szabadalmi Hivatal, Budapest Felelõs vezetõ: Törõcsik Zsuzsanna Windor Bt., Budapest