Mikrobiális aktivitás mérése talajban a CO2-termelés alapján

Hasonló dokumentumok
Mikrobiális aktivitás mérése talajban CO 2 -termelés alapján

Ecetsav koncentrációjának meghatározása titrálással

Ivóvíz savasságának meghatározása sav-bázis titrálással (SGM)

1. feladat Összesen: 7 pont. 2. feladat Összesen: 16 pont

dinamikus rendszerben

Hulladékos csoport tervezett időbeosztás

7. gyak. Szilárd minta S tartalmának meghatározása égetést követően jodometriásan

VIDÉKFEJLESZTÉSI MINISZTÉRIUM. Petrik Lajos Két Tanítási Nyelvű Vegyipari, Környezetvédelmi és Informatikai Szakközépiskola

Titrimetria - Térfogatos kémiai analízis -

Tartalom. 1. Gázszagosító anyagok vizsgálata

5. Laboratóriumi gyakorlat

Jegyzőkönyv Arundo biogáz termelő képességének vizsgálata Biobyte Kft.

Általános Kémia GY, 2. tantermi gyakorlat

A 27/2012. (VIII. 27.) NGM rendelet (29/2016. (VIII. 26.) NGM rendelet által módosított) szakmai és vizsgakövetelménye alapján.

Dr. JUVANCZ ZOLTÁN Óbudai Egyetem Dr. FENYVESI ÉVA CycloLab Kft

ÁGAZATI SZAKMAI ÉRETTSÉGI VIZSGA VEGYÉSZ ISMERETEK EMELT SZINTŰ SZÓBELI VIZSGA MINTAFELADATOK ÉS ÉRTÉKELÉSÜK

Fenyvesi Éva, Molnár Mónika, Kánnai Piroska, Illés Gábor, Balogh Klára, Gruiz Katalin

Biodegradáció a talajban. Biotesztek szennyezőanyagok talajban történő biodegradációjának vizsgálatára KÖRINFO

5. sz. gyakorlat. VÍZMINTA OXIGÉNFOGYASZTÁSÁNAK ÉS LÚGOSSÁGÁNAK MEGHATÁROZÁSA MSZ és MSZ 448/11-86 alapján

Adatgyűjtés, mérési alapok, a környezetgazdálkodás fontosabb műszerei

Talaj mikrobiális biomasszatartalom. meghatározásának néhány lehetősége és a módszerek komparatív áttekintése

HInd Ind + H + A ph érzékelése indikátorokkal

Modern Fizika Labor. 11. Spektroszkópia. Fizika BSc. A mérés dátuma: dec. 16. A mérés száma és címe: Értékelés: A beadás dátuma: dec. 21.

Ag + +Cl - AgCl (1) HCl + NaOH NaCl + H 2 O (2)

5. Az adszorpciós folyamat mennyiségi leírása a Langmuir-izoterma segítségével

a NAT /2010 nyilvántartási számú akkreditált státuszhoz

1. feladat Összesen: 8 pont. 2. feladat Összesen: 11 pont. 3. feladat Összesen: 7 pont. 4. feladat Összesen: 14 pont

Vízben oldott antibiotikumok (fluorokinolonok) sugárzással indukált lebontása

Jegyzőkönyv. Konduktometria. Ungvárainé Dr. Nagy Zsuzsanna

4.Gyakorlat Oldatkészítés szilárd sóból, komplexometriás titrálás. Oldatkészítés szilárd anyagokból

TALAJVÉDELEM XI. A szennyezőanyagok terjedését, talaj/talajvízbeli viselkedését befolyásoló paraméterek

Atomok. szilárd. elsődleges kölcsönhatás. kovalens ionos fémes. gázok, folyadékok, szilárd anyagok. ionos fémek vegyületek ötvözetek

Kőolaj- és élelmiszeripari hulladékok biodegradációja

Szabadföldi kísérletek

KÖZEG. dv dt. q v. dm q m. = dt GÁZOK, GŐZÖK ÉS FOLYADÉKOK ÁRAMLÓ MENNYISÉGÉNEK MÉRÉSE MÉRNI LEHET:

Sók oldáshőjének és jég olvadáshőjének meghatározása anizotermés hővezetéses kaloriméterrel

Modern Fizika Labor. 12. Infravörös spektroszkópia. Fizika BSc. A mérés dátuma: okt. 04. A mérés száma és címe: Értékelés:

Mérési hibák

Mivel foglalkozik a hőtan?

ROMAVERSITAS 2017/2018. tanév. Kémia. Számítási feladatok (oldatok összetétele) 4. alkalom. Összeállította: Balázs Katalin kémia vezetőtanár

1. feladat Összesen: 15 pont. 2. feladat Összesen: 10 pont

VIDÉKFEJLESZTÉSI MINISZTÉRIUM. Petrik Lajos Két Tanítási Nyelvű Vegyipari, Környezetvédelmi és Informatikai Szakközépiskola

Vízben oldott antibiotikumok (fluorokinolonok) sugárzással indukált lebontása

a NAT /2013 nyilvántartási számú akkreditált státuszhoz

Minta feladatsor. Az ion neve. Az ion képlete O 4. Szulfátion O 3. Alumíniumion S 2 CHH 3 COO. Króm(III)ion

Hulladékfogadás, együttes rothasztás, biogáz hasznosítás hatékonyságának növelése a DÉL-PESTI SZENNYVÍZTISZTÍTÓ TELEPEN

Modern Fizika Labor. A mérés száma és címe: A mérés dátuma: Értékelés: Infravörös spektroszkópia. A beadás dátuma: A mérést végezte:

Curie Kémia Emlékverseny 2016/2017. Országos Döntő 9. évfolyam

Nemzeti Akkreditáló Hatóság. SZŰKÍTETT RÉSZLETEZŐ OKIRAT (2) a NAT /2014 nyilvántartási számú akkreditált státuszhoz

1) Standard hidrogénelektród készülhet sósavból vagy kénsavoldatból is. Ezt a savat 100-szorosára hígítva, mekkora ph-jú oldatot nyerünk?

Abszorpciós fotometria

az Észak-pesti Szennyvíztisztító Telepen Telek Fanni környezetvédelmi előadó

1.1. Reakciósebességet befolyásoló tényezők, a tioszulfát bomlása

Curie Kémia Emlékverseny 9. évfolyam III. forduló 2018/2019.

Atomok. szilárd. elsődleges kölcsönhatás. kovalens ionos fémes. gázok, folyadékok, szilárd anyagok. ionos fémek vegyületek ötvözetek

Számítások ph-val kombinálva

Kémiai reakciók sebessége

Műszeres analitika. Abrankó László. Molekulaspektroszkópia. Kémiai élelmiszervizsgálati módszerek csoportosítása

NUKLEÁRIS LÉTESÍTMÉNYEK LÉGNEMŰ 14C KIBOCSÁTÁSÁNAK MÉRÉSE EGYSZERŰSÍTETT LSC MÓDSZERREL

O k t a t á si Hivatal

A szennyvíztisztítás üzemeltetési költségeinek csökkentése - oxigén beviteli hatékonyság értékelésének módszere

KÉMIAI ALAPISMERETEK (Teszt) Összesen: 150 pont. HCl (1 pont) HCO 3 - (1 pont) Ca 2+ (1 pont) Al 3+ (1 pont) Fe 3+ (1 pont) H 2 O (1 pont)


TÉMAVEZETŐ TAKÁCS ERZSÉBET BEZSENYI ANIKÓ A GYÓGYSZERMARADVÁNYOK ELTÁVOLÍTÁSNAK LEHETŐSÉGEI A DÉL-PESTI SZENNYVÍZTISZTÍTÓ TELEPEN

SZENNYVÍZ ISZAP KELETKEZÉSE,

KÉMIA FELVÉTELI DOLGOZAT

Szennyvíziszap dezintegrálási és anaerob lebontási kísérlete. II Ökoenergetika és X. Biomassza Konferencia Lipták Miklós PhD hallgató

T I T - M T T. Hevesy György Kémiaverseny. országos döntő. Az írásbeli forduló feladatlapja. 8. osztály

1. feladat Összesen: 7 pont. 2. feladat Összesen: 8 pont

Folyadékok és szilárd anyagok sűrűségének meghatározása különböző módszerekkel

laboratóriumi technikus laboratóriumi technikus laboratóriumi technikus

TCE-el szennyezett földtani közeg és felszín alatti víz kármentesítése bioszénnel

Jakab Dorottya, Endrődi Gáborné, Pázmándi Tamás, Zagyvai Péter Magyar Tudományos Akadémia Energiatudományi Kutatóközpont

A szennyvíztisztítás üzemeltetési költségének csökkentése

A feladatok megoldásához csak a kiadott periódusos rendszer és számológép használható!

Modern Fizika Labor. 5. ESR (Elektronspin rezonancia) Fizika BSc. A mérés dátuma: okt. 25. A mérés száma és címe: Értékelés:

a. 35-ös tömegszámú izotópjában 18 neutron található. b. A 3. elektronhéján két vegyértékelektront tartalmaz. c. 2 mól atomjának tömege 32 g.

Gázégő üzemének ellenőrzése füstgázösszetétel alapján

KÉMIA JAVÍTÁSI-ÉRTÉKELÉSI ÚTMUTATÓ

AER MEDICINALIS. Levegő, gyógyászati

Hevesy György Országos Kémiaverseny Kerületi forduló február évfolyam

Hangfrekvenciás mechanikai rezgések vizsgálata

O k t a t á si Hivatal

Oldatkészítés, ph- és sűrűségmérés

Biológiai szennyvíztisztítás

Eljárás nitrogénben koncentrált szennyviz kezelésére

Kémia OKTV I. kategória II. forduló A feladatok megoldása

ph-számítás A víz gyenge elektrolit. Kismértékben disszociál hidrogénionokra (helyesebben hidroxónium-ionokra) és hidroxid-ionokra :

ph-számítás A víz gyenge elektrolit. Kismértékben disszociál hidrogénionokra (helyesebben hidroxónium-ionokra) és hidroxid-ionokra :

Modern Fizika Labor. Fizika BSc. Értékelés: A mérés dátuma: A mérés száma és címe: 12. mérés: Infravörös spektroszkópia május 6.

NYOMÁS ÉS NYOMÁSKÜLÖNBSÉG MÉRÉS. Mérési feladatok

Kémia OKTV 2006/2007. II. forduló. A feladatok megoldása

Nemzeti Akkreditáló Testület. MÓDOSÍTOTT RÉSZLETEZŐ OKIRAT (1) a NAT /2014 nyilvántartási számú akkreditált státuszhoz

RÉSZLETEZŐ OKIRAT (3) a NAH / nyilvántartási számú akkreditált státuszhoz

Előadás címe: A vörösiszappal szennyezett felszíni vizek kárenyhítése. Mihelyt tudjátok, hogy mi a kérdés érteni fogjátok a választ is Douglas Adams

Gázelosztó rendszerek üzemeltetése V. rész

V átlag = (V 1 + V 2 +V 3 )/3. A szórás V = ((V átlag -V 1 ) 2 + ((V átlag -V 2 ) 2 ((V átlag -V 3 ) 2 ) 0,5 / 3

Természetes vizek, keverékek mindig tartalmaznak oldott anyagokat! Írd le milyen természetes vizeket ismersz!

ALKÍMIA MA Az anyagról mai szemmel, a régiek megszállottságával.

MÓDOSÍTOTT RÉSZLETEZŐ OKIRAT (2) a NAH /2014 nyilvántartási számú (2) akkreditált státuszhoz

Átírás:

Mikrobiális aktivitás mérése talajban a CO2-termelés alapján Laboratóriumi gyakorlat 1. A mérés célja Laboratóriumi kísérletekre van szükség annak megállapítására, hogy a talajban található mikroflóra működőképes-e és aktiválható-e, amennyiben igen, akkor milyen módon (például levegőztetés, olajbontó baktériumok talajhoz keverése, tápanyag-kiegészítés). E laboratóriumi gyakorlat során két, a fenti igények kielégítésére szolgáló mini-reaktoros gyorstesztelő módszert ismerünk meg. Mindkét módszer viszonylag egyszerű talajlégzés-mérőrendszer alkalmas a talajok állapotának és a talajszennyező szénhidrogének bonthatóságának megítélésére, valamint a remediációhoz használható technológia vizsgálatára. 2. Elméleti összefoglalás 2.1. A talajlégzés és a szubsztrát indukált talajlégzés fogalma; a talajlégzésmérés és jelentősége A talaj biológiai állapota és aktivitása jól jellemezhető az ún. talajlégzésmérés segítségével. A talajlégzés az a folyamat, amikor a talajban található élőlények a talajba került vagy az ott képződött szerves anyagok átalakításához oxigént vesznek fel, illetve az átalakításkor keletkező szén-dioxidot leadják. A szerves szénforrás szervetlen szénné (CO2-dá) való átalakítását nevezzük mineralizációnak. A talajba kerülő szerves vegyületek lebontása végbemehet oxigén jelenlétében, aerob módon és anaerob viszonyok között is, amikor az oxigént például nitrát, nitrit vagy szulfát helyettesíti. A talajlégzésmérés során legtöbbször a talaj aerob légzését mérjük. Az aerob talajlégzést általában a termelt CO2 és/vagy az elfogyasztott O2 koncentrációjának mérésével határozzák meg. A gyakorlatban inkább a kibocsátott CO2 mennyiségi meghatározása terjedt el, hiszen szén-dioxidot mind az aerob, mind az anaerob szervezetek bocsátanak ki, továbbá a szén-dioxid-koncentráció meghatározására szolgáló módszerek érzékenyebbek, mivel az atmoszférikus szén-dioxid-koncentráció 0,033 V/V%, míg az atmoszférikus oxigén-koncentráció 20 V/V%. A termelt szén-dioxid kvantitatív meghatározása durva közelítéssel jellemzi a talaj biológiai aktivitását. Novák (1973) szerint ez az ún. alaplégzés.

A talajlégzés dinamikáját sokkal jobban jellemzi azonban az Anderson és Domsch (1978) által kidolgozott, ún. szubsztrát indukált légzésmérési módszer. Ennek lényege, hogy az aerob talajlégzés folyamatos monitorozása közben bontható szubsztrátot (például glükózt) adagolunk a rendszerhez. Az impulzusszerű, egyszeri szubsztrátadagolás hatására bekövetkező légzésintenzitás-növekedést például a szén-dioxid-termelés időgörbéjének meredekségével lehet jellemezni. Az így mért talajlégzés mind a természetes állapotú (antropogén és természetes szennyezőanyagoktól mentes), mind pedig a szennyezett talajok jellemzésére alkalmas. A talajlégzést mérő tesztrendszerek segítéségével az alkalmazástól függően választ kaphatunk a következőkre: szennyezett-e a talaj; toxikusan hat-e a szennyezőanyag, vagyis gátolt-e a mikroorganizmusok működése vagy sem; adaptálódott-e a mikroflóra és aktívan működik-e; aktiválható-e a mikroflóra; amennyiben aktiválható a mikroflóra, milyen technológiai paraméterekre van szükség az optimális működéshez. A termelődött CO2 mennyisége arányos az elbontott szénhidrogének mennyiségével, a biológiai oxidáció mértékével, tehát a rendszer alkalmas, mind a talaj biológiai állapotának felmérésére, mind a biodegradáció folyamatának jellemzésére és követésére. A szénhidrogének vagy más szerves szennyezőanyagok típusából, a talaj fajtájából, a szennyezőanyag korából és koncentrációjából adódó különbségek kimérésére is alkalmazható a mérőrendszer. A technológiát tekintve válasz kapható például arra (levegőztetett rendszer esetében) hogy milyen mértékű levegőztetésre van szükség a mikroflóra aktiválásához. Szükség van-e tápanyag adagolásra (N- és/vagy P-forrás), szükségesek-e adalékanyagok (például hozzáférhetőséget javító anyagok). Ugyanakkor karbonátos talajok esetén a felszabaduló CO2 zavarhatja a mérést. 2.2. Statikus és dinamikus talajlégzésmérés definíciói, típusai A talaj CO2-termelésének mérésére számos eljárást dolgoztak ki. Vannak szabadföldi vagy in situ (1. ábra) és laboratóriumi mérési módszerek, előbbiekkel a talaj aktuális biológiai aktivitása, míg utóbbiakkal a talaj potenciális biológiai aktivitása határozható meg. Továbbá megkülönböztetünk statikus és dinamikus talajlégzés mérési módszereket is.

1. ábra: Intelligens in situ talajlégzésmérő készülék A statikus légzésmérés során a zárt, inkubált, a levegő cirkuláltatásától mentes rendszerben elhelyezett talajmintából származó CO2 vagy O2 koncentrációját határozzák meg. A statikus módszerek tovább csoportosíthatók aszerint, hogy a mérési elv a képződő CO2-gáz abszorpcióján vagy pedig a kísérleti kamrában lévő levegő CO2-tartalmának dúsulásán (statikus zárt kamrás módszer) alapul. A statikus abszorpciós módszer azon alapul, hogy a talajlégzés során képződő CO2-gázt valamilyen abszorbensen (például NaOH, KOH, Ca(OH)2 oldatokban vagy ugyanezen vegyszerek szilárd hordozóin) elnyeletik, majd az elnyelt CO2 mennyiségét meghatározzák titrimetriásan vagy gravimetriásan. A statikus zárt kamrás módszer alapja, hogy a kísérleti kamrában, reaktorban megnövekedett CO2 koncentrációt mérjük az eltelt idő függvényében. A reaktorban lévő levegő CO2 koncentrációját a kamra légteréből vett levegőminta gázkromatográfiás elemzésével mérik (2. ábra). 2. ábra: Statikus zárt kamrás talajlégzésmérés folyamatábrája A dinamikus légzésmérés során folyamatosan levegőt (vagy CO2-mentes levegőt) áramoltatnak át a kísérleti kamrán és a gázanalizátoron. A CO2 fluxust a kísérleti kamrába belépő és a kísérleti kamrából kilépő CO2 koncentrációjának különbségeként számítják. A dinamikus mérések során gyakran alkalmaznak infravörös gázanalizátort (3. ábra).

3. ábra: A dinamikus talajlégzésmérés folyamatábrája 2.3. A talajlégzés során képződő CO2 kvantitatív meghatározására szolgáló módszerek Az előbbiekben áttekintettük, hogy a talajlégzés mérésének milyen módszerei terjedtek el a modern talajmikrobiológiai gyakorlatban. Most tekintsük át, hogy a talajlégzés során képződő szén-dioxid kvantitatív meghatározására milyen módszerek használatosak. A statikus és dinamikus abszorpciós talajlégzésmérési eljárásoknál, amikor a képződő CO2-gázt pontosan ismert koncentrációjú NaOH-oldatban nyeletik el, akkor képződik a vizes oldatban Na2CO3. A NaOH és a Na2CO3 egymás melletti kvantitatív meghatározása pontosan ismert koncentrációjú sósav mérőoldat segítségével acidimetriás kettős titrálással történik (4. ábra). Ennek lényege, hogy a NaOH Na2CO3 vizes oldat adott térfogatát fenolftalein indikátor jelenlétében pontosan ismert koncentrációjú sósav mérőoldattal titrálják halvány rózsaszín megjelenéséig. Ezen első titrálási lépés során a minta NaOH-tartalma vízzé és NaCldá, míg Na2CO3-tartalma NaHCO3-tá alakul. A második titrálási lépésben a már csak NaHCO3-ot tartalmazó vizes oldatot titrálják pontosan ismert koncentrációjú sósav mérőoldattal metilvörös vagy metilnarancs indikátor jelenlétében. 4. ábra: NaOH és Na 2CO 3 kvantitatív meghatározása vizes oldatban egymás mellett acidimetriás kettős titrálással

A második titrálási lépés során fogyott sósav mérőoldat anyagmennyisége ekvivalens a vizsgált talajból származó szén-dioxid anyagmennyiségével. Ez az eljárás akkor alkalmazható, ha a karbonátok mennyisége a hidroxidokéhoz viszonyítva nem nagy, ellenkező esetben a fenolftalein indikátor átcsapása nem elég éles. Az előbbiekben ismertetett módszer egyszerűsíthető és gyorsítható potenciometriás titrálással, melynek során kiküszöbölhetők a fenolftalein és a metilnarancs indikátorok átcsapásainak bizonytalanságaiból eredő hibák. A klasszikus és műszeres acidimetriás CO2-meghatározáson kívül elterjedten használják a gázkromatográfiás és az infravörös spektroszkópiai gázanalízist is. A gázkromatográfiás CO2-méréshez általában töltetes kolonnákat használnak, és a detektálás hővezetési detektorral történik. A hővezetési detektorban két fémszál található egymástól térben elválasztva, melyeket konstans áramerősséggel fűtenek, ezek a fémszálak adott hőmérsékleten adott elektromos ellenállásúak. Ha a mintaágban a vivőgázban lévő mérendő komponens eléri a fűtött fémszálat, akkor annak hőmérséklete és ezáltal az elektromos ellenállása megváltozik, szemben a referencia ágban lévő fűtött fémszál elektromos ellenállásával. Az ohmikus ellenállás változása arányos a mérendő komponens koncentrációjával. A hővezetési detektorok az elektromos ellenállás változását hídkapcsolásban (például Wheatstone-híd) mérik. Az infravörös gázanalízis (IRGA = InfraRed Gas Analysis) egy rezgési spektroszkópiai módszer. Az infravörös tartományban az IR aktív molekulák (az IR-aktivitás feltétele, hogy a molekula dipólus momentuma megváltozzon az IR-besugárzás hatására) kölcsönhatásba lépnek a besugárzó fénnyel, ekkor a besugárzó infravörös sugárzásból a molekulák a saját, normál rezgési frekvenciájuknak megfelelő frekvenciájú részt abszorbeálják. Az elnyelt sugárzás következtébe a vizsgálandó molekulák nagyobb energiára tesznek szert, így erőteljesebben vibrálnak (rezegnek). E rezgés következtében a gázmolekulák hőmérséklete emelkedik. A hőmérséklet pedig arányosan nő a gáz koncentrációjával, és ezt érzékeli a detektor (például termoelektromos, piroelektromos detektor). 2.4. Talajlégzésmérés zárt palackban manometrikus oxigén-meghatározással A talajok biológiai aktivitásának mérésére jól használható manometrikus módszert Warburg dolgozta ki, aki után a technikát később elnevezték Warburg-féle respirációs talajlégzésmérésnek. A manometrikus oxigén-meghatározás lényege, hogy a talajban élő szervezetek a légzési oxigén elfogyasztása mellett szén-dioxid-gázt termelnek. A termelt széndioxid-gázt megfelelő abszorpciós szerrel megkötik.

Ezzel zárt gáztérben azt érik el, hogy a gáztér nyomása lecsökken, ami kizárólag az oxigénfogyasztásra vezethető vissza, amit manometrikusan mérnek. Az oxigénfogyasztás manometrikus méréséhez a következő feltételeknek kell teljesülniük: a biológiailag aktív mintának gázt át nem eresztő edénybe zárva kell lennie; a minta fölött levegővel töltött, megfelelően méretezett gáztérnek kell lennie, amely elegendő oxigént biztosít a biológiai lebontáshoz; a zárt mérőedényben a szén-dioxid-gáz megkötésére szolgáló abszorpciós szert kell elhelyezni úgy, hogy az ne kerülhessen érintkezésbe a mintával; a reakció edényen megfelelő nyomásmérő berendezést kell elhelyezni; a reakciós edényt a mérés közben állandó hőmérsékletű helyen, fénytől elzárva kell tartani. A manometrikus oxigén-meghatározáshoz használt rendszert mutatja az 5. ábra. A reakciós edényekre erősített sárga-fekete színű elektronikus nyomásmérők ún. membrános nyomásmérők. A nyomás változásának hatására egy rugalmas elem jelen esetben egy membrán deformálódik, és a létrejött deformáció érzékelésével kapott elektromos feszültség vagy áram szolgál kimenőjelként. Az 5. ábrán látható készülék nem abszolút (vákuumhoz mért) nyomást mér, hanem relatív a mindenkori légköri nyomáshoz viszonyított nyomásváltozást (pontosabban nyomáscsökkenést) mér. 5. ábra: A zárt palackos manometrikus oxigén-meghatározáshoz használt apparátus

3. Talajlégzés mérése átlevegőztetett rendszerben 3.1. A mérés elve A bemutatott mérési eljárás azon alapul, hogy a vizsgálni kívánt talajrészletet meghatározott ideig és meghatározott áramlási sebességű CO2-mentesített levegővel levegőztetjük át. Így a reaktorból távozó levegő szén-dioxid-tartalma teljes mértékben a talajmikroflóra tevékenységéből származik. A keletkezett szén-dioxidot ismert összetételű lúgoldatban elnyeletjük, mennyiségét acidimetriás kettős titrálással határozzuk meg. 3.2. A mérőrendszer összeállítása A mérőrendszer (6. és 7. ábra) szénhidrogénekkel szennyezett talajok mikrobiológiai állapotáról ad felvilágosítást. Segítségével megállapítható, hogy van-e a talajban működőképes mikroflóra, a mikroflóra aktiválható-e a technológiai paraméterek megváltoztatásával (például levegőztetéssel, nitrogén- és foszforforrás, vagy hozzáférhetőséget fokozó adalékanyagok adagolásával). A talaj származhat szennyezett területről, de vizsgálhatunk mesterséges szennyezett talajokat is. A talajlégzést vizsgáló tesztrendszerben központi szerepe van egy folyamatosan levegőztethető 1100 cm 3 hasznos térfogatú üvegreaktornak. Az üvegreaktor aljára kavicsréteget, erre pedig vászonlapot teszünk a levegőztető eldugulásának elkerülésére. A reaktor tetejéhez gumidugó, üvegcső és gumicső segítségével csatlakozik a vízsugárszivattyú, melynek segítségével levegőt áramoltatunk át a rendszeren. A talajjal töltött reaktoron való áthaladás előtt kétszeres, lúgban történő elnyeletéssel eltávolítható a levegő CO2-tartalma. Így az acidimetriás kettős titrálás során már csak azt a CO2 mennyiséget mérjük, amely a mikroorganizmusok életműködéséből származik, tehát az olajbontást jellemzi. 6. ábra: A dinamikus talajlégzésmérés során használt mérőrendszer összeállítása

7. ábra: A dinamikus légzésmérés során használt mérőrendszer összeállításának gyakorlati megvalósítása 3.3. A mérés kivitelezése A mérés során különböző típusú és koncentrációjú szénhidrogén-származékokkal szennyezett talajok CO2-termelését vizsgáljuk. Első feladat, hogy oszlopreaktorokba töltött vizsgálandó talajt levegőztetjük. A szennyezett talaj levegőztetésének időtartamát a laboratóriumi gyakorlat során a gyakorlatvezető mondja meg. Második feladat, hogy az egyes oszlopreaktorokban adott átlevegőztetési idő alatt termelt szén-dioxid-gáz mennyiségét meghatározzuk. A termelődött CO2 mennyiségi meghatározása acidimetriás kettős titrálással történik, melyet a CO2-gáz 150 cm 3 térfogatú gázmosópalackban, 100 cm 3 térfogatú 1 mol/dm 3 anyagmennyiség-koncentrációjú NaOH-oldatban való elnyeletése előz meg. Az elnyeletést követően a lúgoldatból 10-10 cm 3 térfogatú mintákat titrálunk, és három párhuzamos mérést végzünk.

Az acidimetriás kettős titrálás lépései: 1. A 10,0 cm 3 mintát tartalmazó Erlenmeyer-lombikba 3 4 csepp fenolftalein indikátort csepegtetünk. A Erlenmeyer-lombik tartalmát 1,0 mol/dm 3 néveleges anyagmennyiség koncentrációjú sósav mérőoldattal halvány rózsaszínig titráljuk. 2. A halvány rózsaszín megjelenésekor az Erlenmeyer-lombik tartalmához 3 4 csepp metilvörös indikátort adunk, majd hagymaszínig titráljuk 0,1 mol/dm 3 névleges anyagmennyiség koncentrációjú és f = faktorú sósav mérőoldattal. 3. A második titrálás végpontja előtt az oldatot kiforraljuk, hogy a NaHCO3 és sósav reakciójakor képződő szén-dioxid-gázt kiűzzük az oldatból. A forralás után vízfürdőn lehűtjük az oldatot, majd tovább titráljuk hagymaszínig. (Fontos, hogy a titrálást viszonylag alacsony hőmérsékleten körül, erős rázogatást kerülve végezzük!) 4. Talajlégzés mérése zárt palackban az OxiTop légzésmérő rendszerrel 4.1. Az OxiTop Control zárt palackos légzésmérő rendszer jellemzése Az alkalmazott OxiTop Control készülék légzésintenzitás változások mérésére alkalmazható manometrikus módszer. A rendszer a mintában lévő élő mikroorganizmusok aerob légzése során felhasznált oxigén fogyását, és az ezzel arányosan növekvő, kilélegzett szén-dioxid mennyiségét követi nyomon. A szén-dioxid a talajminta fölötti légtérbe kerül, ahol egy NaOH-ot tartalmazó edény található, a keletkező szén-dioxid megkötésére. Mivel az oxigén fogy, és a keletkező szén-dioxid pedig elnyelődik, ezért az edény légterében a légzés hatására nyomáscsökkenés figyelhető meg, amit a mérőfejben elhelyezett membrános nyomásmérő mér. A készülék vezérlése és az információk lekérdezése a Control Panel-lel történik. A Control Panel infravörös jelekkel képes kapcsolatot teremteni a mérőfejekkel. Az összeállított mérőrendszer felépítését mutatja a 8. ábra.

8. ábra: A zárt palackos OxiTop Control talajlégzésmérő rendszer. 4.2. A mérés kivitelezése A mintatartó edényekben (250 cm 3 ) elhelyezzük a talajmintákat (20 50 g), majd hozzáadjuk a szükséges adalékanyagokat. Ezután az edényben elhelyezett anyagokat homogenizáljuk, majd csatlakoztatjuk a NaOH-ot tartó edényt. Ebbe az edénybe ~1 g szilárd, lemezes NaOH-ot mérünk be. A NaOH-tartó csavarosan illeszkedik a fedélhez. A NaOH-os edények csatlakoztatása után rögzítjük a tömítéseket csavaros technikával. A Control Panelen már ezt megelőzőleg be kell állítani a mérési módot, időt és a méréshatárt. A megfelelő beállítások ellenőrzése után elindíthatjuk a mérést, mégpedig úgy, hogy a Control Panel-t megfelelően közel (kb. 40 cm távolságba) helyezzük a mintatartó edényhez, hogy az infravörös kapcsolat létrejöjjön. A kapcsolat tényleges létrejöttét a mérőfejen piros fény felvillanása jelzi. A mérés ideje alatt állandó hőmérsékletet, és napsugárzástól mentes környezetet kell biztosítani, mert ezek mind hatással vannak a mért nyomásértékekre. A változásokat az idő függvényében rögzíti a készülék, az időadatokat percekben jeleníti meg. A mért adatokat az adatátviteli vezeték segítségével továbbíthatjuk a számítógépre egy a készülékhez tartozó számítógépes szoftver segítségével, majd Microsoft Excel táblában elvégezhetjük a kiértékelést. A talaj-mikrokozmosz kísérleteink során nyomásváltozást mértünk, mely a talaj mikroflóra aerob légzése során felhasznált oxigénfogyásból adódik. A zárt palackban OxiTop Control mérőrendszerrel végzett talajlégzésmérés főbb paramétereit az 1. táblázat foglalja össze.

1. táblázat: A zárt palackos OxiTop Control mérőrendszerrel végzett talajlégzésmérés főbb mérési paraméterei Kísérleti/mérési paraméter Beállított érték Mérőedény (reaktor) térfogata 250 cm 3 Talajmennyiség a reaktorban 20 50 g Talajminták nedvességtartalma 15 18 % Hőmérséklet 25 C Mérési mód nyomásváltozás hpa dimenzióban Méréshatár 300 hpa Mérési idő A CO2-gáz elnyeletésére használt abszorbens ágens és tömege 3 nap szilárd, lemezes NaOH kb. 1 g 4.3. A mérési eredmények értékelése Az OxiTop Control mérőfej öt napon keresztül, öt percenként rögzíti a palackban a nyomásváltozás értékét. Mivel a tesztedényt állandó hőmérsékleten tartjuk, ezért a nyomásváltozás elvileg kizárólag a talaj légzése során termelődött, és a NaOH által elnyelt szén-dioxid mennyiségével arányos. A kiértékelés szemléltetésére egy, különböző szerves szennyezőkkel kezelt kísérlet talajainak teszteredményeit közöljük (9. ábra). A 9. ábra alapján az alábbi következtetéseket vonhatjuk le. 1. A mindegyik görbén megjelenő nyomáscsökkenés azt mutatja, hogy a szennyezőanyagok gyors biodegradációja elkezdődött. 2. A meredeken induló görbék azt mutatják, hogy a dízelolaj sokkal gyorsabban és könnyebben bontható a mikroorganizmusok számára, mint a hosszabb szénláncú szénhidrogéneket tartalmazó pakura.

3. A frissen szennyezett talajban gyorsabban bontják a szennyező anyagot a mikroorganizmusok, mint a régebben szennyezett talajban. Gyorsabban aktiválódnak a szénhidrogén-bontó mikroorganizmusok a friss szennyeződések esetében, hiszen nagyobb a hozzáférhető frakció, míg a régi szennyeződés esetén feldúsultak a nehezebben bontható, kevésbé hozzáférhető komponensek. 4. Nagymértékű a nyomáscsökkenés a dízelolajjal régóta szennyezett talajban is, ami az adaptálódott mikroflóra jelentét és aktivitását mutatja. 5. A szennyezett területről származó, régi, koros szennyeződést tartalmazó pakurával szennyezett talajnak még a kontroll talajénál is kisebb az aktivitása, ami arra utal, hogy az ebben lévő szénhidrogének már biológiailag nem vagy csak nagyon nehezen hozzáférhetőek, a mikroflóra aktivitásának növelésére van szükség. A nyomásértékek jól szemléltetik a talajokban zajló különböző folyamatok eredményét és a mikroflóra adaptációs képességét. A könnyebben bontható dízelolajhoz gyorsabban adaptálódtak a mikroorganizmusok; nagyobb a mikrobiális aktivitás ezek a talajokban. A dízelolajjal szennyezett mintáknál megfigyelhető, hogy a mérőedénybe helyezett NaOH kimerülése miatt nem nyelődött el a CO2, ezért nem tudott tovább csökkenni a nyomás. Ilyen nagy légzésintenzitásnál több NaOH-ra van szükség. Továbbá a nagy mikrobiológiai aktivitás miatt a dízelolajjal szennyezett talajban a rendelkezésre álló oxigén is kevés volt, nagyobb reaktortér szükséges.

9. ábra: Nyomáscsökkenés az 5 napos zárt palack teszt során. A laboratóriumi gyakorlat során feljegyzendő információk és a mérési jegyzőkönyv tartalma a) Dinamikus légzésmérés: A laboratóriumi gyakorlat során feljegyezendő paraméterek, értékek: a reaktorok levegőztetésének időtartama [óra] a reaktorokban található talajok tömege [g] a reaktorokban található talajokban található szénhidrogén- -szennyezések típusai, koncentrációi [mg/kg talaj] a laboratóriumban a méréskor uralkodó hőmérséklet [ C] és légnyomás [hpa] az acidimetriás kettős titrálás során mért sósav mérőoldat-fogyások [cm 3 ] az acidimetriás kettős titráláshoz használt sósav mérőoldat faktora. A jegyzőkönyvben szerepeljen: a mérés rövid elve a gyakorlat során végzett mérés rövid leírása, készülékrajz az acidimetriás kettős titrálás leírása, a három rendezett sztöchiometriai reakcióegyenlet

az acidimeteriás titrálás során kapott mérőoldat-fogyások számtani közepe a három különböző talajminta esetén a termelt szén-dioxid anyagmennyiségének és térfogatának kiszámítása a termelt szén-dioxid megadása [cm 3 /kg talaj óra] mértékegységben a termelt szén-dioxid térfogatok alapján meghatározni, hogy melyik reaktor milyen szennyeződést tartalmazhatott a vizsgálat során kapott és számított adatok alapján a szennyezett talajok szöveges értékelése és jellemzése b) Statikus légzésmérés és röntgenfluoreszcens analízis: A jegyzőkönyvben szerepeljen: a mérés rövid elve, a gyakorlat során végzett mérés rövid leírása, készülékrajz, a fémszennyezést tartalmazó minta röntgenfluoreszcens spektruma, a spektrum alapján a Kα és/vagy Lα értékek segítségével meghatározni, hogy a fémmel szennyezett talaj milyen fémes elemet tartalmazott (szöveges indoklással együtt) a fémes szennyező anyag koncentrációjának megadása [mg/kg talaj] a nyomáscsökkenést [hpa] ábrázolni az idő [nap] függvényében mind a három minta esetén egy diagramon az előbbiekben felvett diagram szöveges értékelése. A mérési jegyzőkönyv megírása során figyeljen a megfelelő mértékegység-használatra, továbbá ügyeljen a számításai során kapott végső eredmények értékes jegyeinek megadására!