2012. XII. évfolyam 2. szám GEN-LAB Kft. Tartalom Kinetex UHPLC teljesítmény hagyományos készüléken 2-3. oldal Phenomenex alternatívák kedvező áron 4-5. oldal PAH elemzés gyorsan, egyszerűen 6-7. oldal Trihalometán alkalmazás 8. oldal HPLC csatlakozók bővebben 9-11. oldal Hírek röviden 12. oldal Gen-Lab Kft. H-1119 Budapest, Hadak útja 41. Telefon: (36-1)206-2455 Fax: (36-1)206-2451 Email: info@gen-lab.hu Web:
Kinetex UHPLC-s teljesítmény minden HPLC készüléken Bevezetés A Kinetex kéregszerkezetes kolonnák előnye, hogy gyorsabb analízist tesznek lehetővé. Ez különösen fontos lehet minőségellenőrző és bérlaboratóriumok számára, mert ezzel adott idő alatt több minta elemzése válik lehetővé. Az alábbiakban néhány gyógyszerkönyvi példán keresztül bemutatjuk, hogyan lehet minimális befektetés mellett többszörösére növelni a labor kapacitását. Bővebb tájékoztatásért kérjen segítséget kollégáinktól. A kiinduló módszerek mindegyike az Európai gyógyszerkönyv 7.0 kiadásának ajánlott módszerei alapján készültek. A gyógyszerkönyv megenged bizonyos változtatásokat, az ajánlott módszerhez képest, mely szerint az adott alkalmazás még validáltnak tekinthető. Az adjusztált módszerek minden esetben ezen változtatásoknak megfelelően történtek. A mérések mindegyike hagyományos HPLC készüléken futott, nagy hatékonyságot a Kinetex kéregszerkezetes kolonna biztosította. Atenolol szennyező vizsgálat (04/2009:0703) A Mobil Kolonna fázis: A: Mobil Kolonna fázis: B: Elúció: Mozgó fázis: Áramlási sebesség A: Áramlási sebesség B: Hőmérséklet: Detektálás: Injektált térfogat: Megjegyzés: Applikációk száma: Luna A: 0,1%5hangyasav µm C18(2) /125 víz x 4 mm 00E-4252-D0 A: 0,1% hangyasav Kinetex 2.6 µm C18 / víz 100 x 4.6 mm 00D-4462-D0 Izokratikus EP módszer szerint 0,6 ml/perc 0,9 ml/perc 25 0C UV @ 226 nm 5 µl 12.5 mm KH2PO4 in Water ph 3.0 + 2.0g Sodium Octanesulfonate + 0.8g Tetrabutyl Ammonium Hydrogen Sulfate/Methanol/THF v/v% 80:18:2 B Előnyök: 3x-os hatékonyság 1,5x-es csúcsmagasság 64%-kal gyorsabb analízis 33 perc helyett 12 perc új szennyező csúcs megjelenése 18825 (A) / 18827 (B) 2. oldal
Acetilszalicilsav szennyező vizsgálat (01/2011:0309) Waters 5µm Symmetry C18 250*4.6mm, Áramlási sebesség = 1.0ml/perc (Application ID=19009) Elúciós idő: 18.2 perc RS (Acetylsalcylic acid CRS and Salicylic acid (impurity C): 8.7 80%-kal gyorsabb analízis Szebb csúcsalak Jobb felbontás KinetexTM 2.6µm C18 100*4.6mm; Áramlási sebesség = 1.5ml/perc (Application ID=19011) Elúciós idő: 3.4 perc RS (Acetylsalcylic acid CRS and Salicylic acid (impurity C): 9.0 Prednisone szennyező vizsgálat (01/2008:0354) Waters 5µm Symmetry C18 250*4.6mm, Áramlási sebesség = 2.0ml/perc MBP=336bar (Application ID=6009) Elúciós idő: 29.5 perc RS Prednisone and Prednisolone: 3.8 65%-kal gyorsabb analízis Szebb csúcsalak Jobb felbontás KinetexTM 2.6µm C18 100*4.6mm, Áramlási sebesség = 1.5ml/perc MBP= 382bar (Application ID=6017) Elúciós idő: 13.2perc RS Prednisone and Prednisolone: 5.6 Amennyiben felkeltettük érdeklődését, kérjen tőlünk bővebb tájékoztatást! Az Symmetry, a Waters Corporation bejegyzett védjegye. A Gen-Lab Kft. nem áll semmilyen kapcsolatban a Waters Corporation-nel. Tudjon meg többet! 3. oldal
GARANTÁLT PHENOMENEX ALTERNATÍVÁK KEDVEZŐ ÁRAKON I. HyperClone vs HYPERSIL Phenomenex által gyártott töltet, amely a Thermo Hypersil-Keystone HYPERSIL kolonna helyettesítésére szolgál Kiváló reprodukálhatóság Hosszú élettartam Kedvező ár Phenomenex garancia Hyperclone (BDS szilika) 3, 5 130 155 0,6 HyperClone (reguláris szilika) 3, 5 120 155 0,6 HyperClone 7 11 6,5 10 4 szemcseméret (μm) pórusátmérő (Å) 2 felületi borítottság (m /g) pórus térfogat (ml/g) szemcseméret (μm) pórusátmérő (Å) 2 felületi borítottság (m /g) pórus térfogat (ml/g) széntöltet összehasonlítás (%) BDS C8 BDS C18 MOS (C8) ODS (C18) CN (CPS) HYPERSIL (BDS szilika) 3, 5 130 170 0,6 HYPERSIL (reguláris szilika) 3, 5 120 170 0,6 HYPERSIL 7 11 6,5 10 4 Körülmények mindkét kolonnán Dimenzió: 150 x 4,6mm Mozgófázis: metanol/50mm KH2PO4, ph=3,5 (60:40) Áramlási sebesség: 1,0ml/perc Detektálás: UV@254 nm Minta: 1. 2. 3. 4. 5. 6. uracil piridin metil-anilin dimetil-anilin diklór-anilin toluol A HYPERSIL a Thermo Hypersil Keystone bejegyzett névjegye. A Gen-Lab Kft. nem áll semmilyen kapcsolatban a Thermo Fisher Scienfitic-kel illetve Thermo Hypersil-Keystone-nal 4. oldal
GARANTÁLT PHENOMENEX ALTERNATÍVÁK KEDVEZŐ ÁRAKON II. SphereClone vs Spherisorb Phenomenex által kifejlesztett SphereClone garantált helyettesítője a Waters Spherisorb töltetnek Kiváló reprodukálhatóság Hosszú élettartam Kedvező ár Phenomenex garancia Tájékozódásul tekintse meg az oszlopok nettó árait egyes dimenziókban: A többi fázis és dimenzió ugyanebben az árkategóriában elérhető! Győződjön meg személyesen, kérjen tesztoszlopot! A Spherisorb a Waters bejegyzett névjegye. A Gen-Lab Kft. nem áll semmilyen kapcsolatban a Waters Corporation-nel 5. oldal
Komplett SPE-GC/HPLC módszer PAH elemzésre PAH SPE mintaelőkészítés: Gázkromatográfiás mérés: Oszlop: Strata PAH Dimenzió: 1,5 g / 6 ml Katalógusszám: 8B-S130-7CH Oszlop: Zebron ZB-5ms GC kapilláris oszlop Fázis: 5% fenil 95% dimetil-polisziloxán (Arilén Mátrix Technológia) Dimenzió: 30 m x 0,25 mm x 0,25 μm Katalógusszám: 7HG-G010-11 Kondícionálás: - 20 ml diklórmetán - 20 ml metanol - 20 ml deszt. víz Mintafelvitel: - 100 μl PAH standard (100μg/mL acetonitrilben) 100 ml víz/acetonitrilben (75:25) Mosás: Szárítás: Leoldás: - 5 ml metanol/víz (50:50) - 15 sec. 1011 Hg vákuum - 6 ml diklórmetán Hőmérséklet program: 140 C-ról 240 C-ra 15 C/perc-cel, 275 C-ra 4 C/perc-cel, majd 320 Cra 10 C/perc-cel (5 perc) Vivőgáz: Hélium, 1,4 ml/perc Injektálás: split 15:1 1 μl (310 C) Detektálás: MS (270 C) Komponensek: 1 D8-Naphthalene 2 Naphthalene 3 2-Methylnaphthalene 4 Acenaphthalene 5 Acenaphthene 6 Fluorene 7 Anthracene 8 Phenanthrene 9 Fluoranthene 10 D10-Pyrene 11 Pyrene 12 Benzo[a]anthracene 13 Chrysene 14 Benzo[b]fluroanthene 15 Benzo[k]fluroanthene 16 D12-Benzo[a]pyrene 17 Benzo[a]pyrene 18 Indeno[1,2,3-cd]pyrene 19 Dibenzo[a,h]anthracene 20 Benzo[g,h,i]perylene 6. oldal
Folyadékkromatográfiás mérés: Oszlop: Kinetex 2.6 μm C18 100 Å LC kolonna Dimenzió: 100 x 4.6 mm Katalógusszám: 00D-4462-E0 Elúció Típusa: gradiens A Eluens : deszt. víz B Eluens: acetonitril Gradiens profil: Lépés Idő (perc) Pct A Pct B 1 0 30 70 2 10 5 100 Áramlási sebesség: 1,5 ml/perc Kolonna hőmérséklete: 30 oc Detektálás: UV @ 254 nm A huminsav eltávolításának hatékonysága: Strata C18-E extraktum Strata PAH extraktum Komponensek: 1 2 3 4 5 6 7 8 Naphthalene Acenaphthylene Fluorene Acenaphthene Phenanthrene Anthracene Fluoranthene Pyrene 9 Chrysene 10 Benz[a]anthracene 11 Benzo[b]fluoranthene 12 Benzo[k]fluoranthene 13 Benzo[a]pyrene 14 Dibenzo[a,h]anthracene 15 Indeno(1,2,3-cd)pyrene 16 Benzo[ghi]perylene Oszlop: Kinetex 2.6 μm C8 100 Å LC kolonna Dimenzió: 50 x 2.1 mm Katalógusszám: 00B-4497-AN Elúció típusa: gradiens A Eluens : 5mM Ammónium-acetát B Eluens: metanol Gradiens profil: Lépés Idő (perc) Pct A Pct B 1 0 85 15 2 2 5 95 3 6 5 95 4 6.01 85 15 Áramlási sebesség: 0.4 ml/perc Detektálás: MS, 580.4 amu (ambient) Tudjon meg többet! 7. oldal
Trihalometán mérés Gázkromatográfiás mérés: Oszlop: Zebron ZB-5ms GC kapilláris kolonna Fázis: 5% fenil 95% dimetil-polisziloxán (Arilén Mátrix Technológia) Dimenzió: 30 m x 0.32 mm x 1.0 μm Katalógusszám: 7HM-G010-22 Detektor Hőmérséklet program: 40 C (6 perc),módszer majd 22 C/perc-cel 200 C-ra Vivőgáz: Hélium, 1,5 ml/perc Injektálás: split 10:1 1 μl (200 C) Detektálás: MS (200 C) Komponensek: 1 Trichlorofluoromethane 2 1,1-Dichloroethene 3 Dichloromethane 4 1,2-Dichloroethene 5 1,1-Dichloroethane 6 Chloroform 7 1,1,1-Trichloroethane 8 1,2-Dichloroethane 9 Carbon tetrachloride 10 Trichloroethylene 11 1,2-Dichloropropane 12 Bromodichloromethane 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 cis-1,3-dichloro-1-propene trans-1,3-dichloro-1-propene 1,1,2-Trichloroethane Dibromochloromethane Tetrachloroethylene Chlorobenzene Tribromomethane 1,1,2,2-Tetrachloroethane 1,3-Dichlorobenzene 1,4-Dichlorobenzene 1,2-Dichloromethane Tudjon meg többet! 8. oldal
HPLC oszlopok csatlakoztatása Ebben a cikkben szeretnénk egy olyan témakört körbejárni, mellyel ha HPLC készülékkel dolgozunk, napról napra találkozhatunk. Jogosan tehetjük fel a kérdést, hogy a katalógusokban megtalálható csatlakozók bármelyikével könnyedén szerelhetjük-e az oszlopainkat? Sajnos a választás ennél egy kicsit nehezebb, a továbbiakban erre is részletesen kitérünk írásunkban. Az analitikai felhasználású HPLC készülékeknél az oszlopok szereléséhez legáltalánosabban PEEK vagy rozsdamentes acél (SS) 1/16 külső átmérőjű kapillárist használunk. Ezek szereléséhez sztenderd 10-32-es (ahol a 10-es szám a menetátmérőre (0,190 ) és a 32 a menetek számára/inch-re utal) csatlakozót használunk. Nut-rész Ferrule Ferrule-rész Nut Egyrészes PEEK csatlakozó Kétrészes 10-32-es rozsdamentes(ss) csatlakozó Mint kiemeltük, hogy a HPLC-hez sztenderd csatlakozó és kapilláris méreteket használunk, ehhez képest a HPLC kolonna gyártók már nem teljes mértékben készítenek szabványos oszlop hardvereket. Benyúlási mélységben és a ferrule kiképzésében eltérő kolonnavégekkel találkozhatunk, mint ez a lenti táblázatból is előtűnik. X= 0,090 inch (2,29 mm) X= 0,090 inch (2,29 mm) X= 0,080 inch (2 mm) (Phenomenex) X= 0,130 inch (3,3 mm) (b e ny úl á si m él ys ég ) X= 0,170 inch (4,3 mm) 9. oldal
Probléma főleg akkor adódik, amikor a használt kolonnát egy másik gyártó termékére cseréljük. Az előző oszlopunkkal beállítottunk már egy benyúlási mélységet és fixáltuk a csatlakozót a kapillárison. Sok esetben ez a meghúzást követően annyira ráfeszül a kapillárisra, hogy nem tud szabadon mozogni és megfelelően beállni a szükséges (új) méretre. Ilyen esetben két fajta problémával találkozhatunk és sajnos az egyiket általában észre sem vesszük. Holttérfogat Abban az esetben, ha a csatlakozóból kilógó kapilláris rész nem megfelelő hosszúságú, az oszlop csatlakoztatása után holttérfogat alakul ki, mely jelentős hatékonyság (N) vesztéshez vezet. Sajnos ezt a hibát a legtöbb esetben nem vesszük észre. Ferrul nem fekszik fel Ilyenkor elég szembetűnő jelenséget tapasztalunk, jellemzően az oszlop csatlakozásunk ereszteni fog. A csatlakozó további meghúzásával sem tudjuk megszüntetni a csöpögést, végezetül a túlhúzás miatt a kapillárisunkat fogjuk eltörni vagy a menetben tehetünk kárt. Javaslatok: - Minden esetben ha más szabványú HPLC oszlopot szerelünk be, szereljünk új csatlakozót és vágjunk le a PEEK kapilláris végéből. - Mozdítsuk ki a csatlakozónkat a kapillárisról, hogy újra megfelelően be tudjuk majd állítani a megfelelő benyúlási mélységet. - Használjunk többször használatos csatlakozót és használhatunk önbeállófejes csatlakozót is. - Használjunk önbeállófejes védőkolonnát mint bemeneti csatlakozó. - Használjunk mechanikai in-line szűrőt az oszlopainkhoz. Ferrule eltávolító Tudjon meg többet! 10. oldal
Rendszerint a katalógusokban elveszhetünk a csatlakozók között, hogy melyik is lenne számunkra a legmegfelelőbb. A következőkben a legáltalánosabb típusokról ( a teljesség igénye nélkül) szóljunk pár szót. Egyrészes PEEK csatlakozó, 345bar nyomásig használható, széles perem a könnyedebb kézi meghúzás érdekében. Csak PEEK kapillárishoz használható típus. Kat.szám: AQ0-1388 1930 bar nyomásig stabil csatlakozást biztosító két részes rozsdamentes (SS) csatlakozó. Csak fém kapillárishoz használható. A ferrule és a nut is része a csomagnak. Kat.szám: AQ0-8506 Univerzális egyrészes PEEK csatlakozó. Használható mind PEEK és SS kapilláris csatlakoztatásához. 875 bar nyomásig megfelelő biztonsággal használható. Kat.szám: AQ0-8503 Háromrészes PEEK, fém O-gyűrűs csatlakozó. Mind PEEK és SS kapillárissal szerelhető. 1310 bar nyomásig használható. Külön kiszerelésben kapható a ferrule és a nut rész!! Kat.szám: AQ0-8504 és AQ0-8505 (10-10db/csomag) Önbeállófejes PEEK/SS csatlakozó. Rugós fejének köszönhetően mindig a megfelelő benyúlási mélységet állítja be. Szerelt, 20 cm-es PEEK vagy SS kapillárissal készül. Nyomásállóság 345bar. Kat.szám: AQ0-5726 SS kapillárissal Kat.szám: AQ0-7052 PEEK kapillárissal Kézzel szerelhető Kulcs szükséges a szereléséhez Tudjon meg többet! 11. oldal
Kedvezmények 2012 Június végéig Hírlevelünkkel együtt érkező brossúra alapján 2012. június 29-ig óriási kedvezménnyel érhetőek el bizonyos termékeink. A részletekért lapozza fel az idei Key Product Guide brossúrát, vagy keressen minket!. Tudjon meg többet! Gen-Lab Kft. H-1119 Budapest, Hadak útja 41. Telefon: (36-1)206-2455 Fax: (36-1)206-2451 Email: info@gen-lab.hu Web: