53 2 ( ) Vol.53 No JournalofXiamenUniversity (NaturalScience) Mar.2014 doi: /j.issn Hsp20 Adcs 1, 1, 2, 1* (1., 3

Hasonló dokumentumok
3


100% BIO Natur/Bio kozmetikumok és testápolás

Új temékek az UD- GenoMed Kft. kínálatában!

HYDROXYPROPYLBETADEXUM. Hidroxipropilbetadex

Új temékek az UD-GenoMed Kft. kínálatában!

HYDROXYPROPYLBETADEXUM. Hidroxipropilbetadex

LAKATOS - RÁCS KONSZIGNÁCIÓ

BIOTECHNOLÓGIÁK EGYÉB IPARÁGAKBAN. Pókselyemfehérjék előállítása dohányban és burgonyában

A basidiomycota élesztőgomba, a Filobasidium capsuligenum IFM törzse egy olyan

Oszvald Mária. A búza tartalékfehérjék tulajdonságainak in vitro és in vivo vizsgálata rizs modell rendszerben

Appendix. A. DNA sequences of the UZ3/4 TCR chains. Appendix 116. TCR alpha 7 chain

University of Bristol - Explore Bristol Research

MANGO MG termékcsalád

Autoimmun vizsgálatok (ML AU)

mintasepcifikus mikrokapilláris elektroforézis Lab-on-Chip elektroforézis / elektrokinetikus elven DNS, RNS, mirns 12, fehérje 10, sejtes minta 6


AZT 3/0 AUTONÓM ZÁRLATI TARTALÉKVÉDELEM AZT

Bp Almakerék u. 4 Tel:

36 7 Vol.36No ActaEcolog iaeanimalisdomastici Jul.2015 氥 氥 欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍氥 氥 10 犛犜犚! 1, 2, 2, 2, 1 (1., ;2., ) [" #] PCR! " # $ % & '

Szélesség (cm) 60 x 60. Magasság (cm) 60. Mélység (cm) 30. Felső sarok ferde konyhabútor elem. Ajtó típus ÁR kulcsrakész ÁR lapraszerelt

Szélesség (cm) 60 x 60. Magasság (cm) 60. Mélység (cm) 30. Felső sarok L konyhabútor elem. Ajtó típus ÁR kulcsrakész ÁR lapraszerelt

Immundiagnosztikai módszerek

víztoronynál lévő konténer víztoronynál lévő konténer

Lehet!ségek gombabetegségeknek ellenálló GM búza el!állítására

178,,,,,,,! : (2015) /01!"#$%&' ()*+, 1, 1, 1, 2, 2, 2, 1,! 1 (1."#$%&',"# # ;2.( )*+,, ) :"#$%&' (SHPB) ()*+,-./01#

a NAT /2012 nyilvántartási számú akkreditált státuszhoz

Szuperkritikus fluid kromatográfia (SFC)

Kapcsolatok, összehasonlítások

pjnc-pgluc Codon-optimized Gaussia luciferase (pgluc) Vector backbone: JM83 pjnc-pgluc is resistant to ampicillin and neomycin High or low copy:

Markerless Escherichia coli rrn Deletion Strains for Genetic Determination of Ribosomal Binding Sites

Gyakorló feladatok Tömegpont kinematikája

4. előadás: kontinuitás, Bernoulli. A diák alsó 45%-a általában üres, mert vetítéskor ki van takarva, hogy a táblát ne zavarja

Autoimmun vizsgálatok (ML AU)

KÖRNYEZETVÉDELMI- VÍZGAZDÁLKODÁSI ALAPISMERETEK

1. feladat R 1 = 2 W R 2 = 3 W R 3 = 5 W R t1 = 10 W R t2 = 20 W U 1 =200 V U 2 =150 V. Megoldás. R t1 R 3 R 1. R t2 R 2

Seven gene deletions in seven days: Fast generation of Escherichia coli strains tolerant to acetate and osmotic stress Supplementary Figure S1.

Termékkatalógus Guardall DesignLine mozgásérzékelő sorozat. design line

Egyetemi doktori (PhD) értekezés tézisei

Dr. JUVANCZ ZOLTÁN Óbudai Egyetem Dr. FENYVESI ÉVA CycloLab Kft

Szeretek kifogástalan ruhákat viselni

Az AGO-kötő silencing szupresszorok jellemzése és az első mesterséges silencing szupresszor létrehozása. Doktori tézisek. Szabó Edit Zsuzsanna

Supporting Information

Megbízható, pontos és az igényeknek megfelelő fertőtlenítenés

Egy- és kétutú szelepek termosztatikus szabályzókhoz és elektromos szelepmozgatókhoz VFG.. / VFGS2 / VFU..

Euro-Clear Magyarország Kft. Tel.: 96/ , Fax.: 96/ Oldalszám: 23/ / Vastalanítók

Fehérjebiotechnológia Emri, Tamás Csősz, Éva Tőzsér, József Szerkesztette Tőzsér, József, Debreceni Egyetem

Autoimmun vizsgálatok (ML AU)

PILLANGÓSZELEP KATALÓGUS LAP

A LISZTHARMAT ÉS A FOGÉKONY SZŐLŐ KÖZÖTTI MOLEKULÁRIS KAPCSOLAT. Tóth Zsófia 1 -Kiss Erzsébet 2

Nemzeti Akkreditáló Testület. RÉSZLETEZŐ OKIRAT a NAT /2015 nyilvántartási számú akkreditált státuszhoz

Színek és kárpitok Mondeo Bluetooth Megjegyzés:

a NAT /2010 nyilvántartási számú akkreditált státuszhoz

1 évre szükséges irodaszerek Jósa András Oktatókorház Nonprofit Kft


2011. január április 10. IPK Gatersleben (Németország) május 17. Kruppa Klaudia

Környezetvédelmi előírások változása

A szamóca érése során izolált Spiral és Spermidin-szintáz gén jellemzése. Kiss Erzsébet Kovács László

FAIPARI ALAPISMERETEK

A környezetvédelmi és vízügyi miniszter 3 /2009. ( III. 10. ) KvVM rendelete

Immunológiai módszerek a klinikai kutatásban 14-15

PRÓBAMÉRÉSEK TEREPI KÖRÜLMÉNYEK KÖZÖTT KÖNNYŰ EJTŐSÚLYOS DINAMIKUS TERHELŐTÁRCSÁVAL

Téli kedvezményes ajánlataink

A SZÁNTOFÖLDTŐL AZ ASZTALIG TÁMOP B Workshop az őshonos mangalica sertésn. Prof. dr. Bali Papp Ágnes. részproject felelős

J7KN. Engedélyezések. Motorindító mágneskapcsoló. Fő mágneskapcsoló. Tartozékok. Motorindító mágneskapcsoló J7KN 1

Termékismertető. Kandallócső, zománcozott füstcső és tartozékai


Ford Allergia szempontjából tesztelt belső tér

Zelio Time időrelék. Katalógus 2012

Hatvani István fizikaverseny forduló megoldások. 1. kategória. J 0,063 kg kg + m 3

Termékismertető Útmérők Mérőtapintók Szögelfordulásmérők Forgóadók Pályavezérlők Tapintórendszerek Helyzetkijelzők április

2011. tavaszi félév. Kopás, éltartam. Dr. Ozsváth Péter Dr. Szmejkál Attila

A vizsgált/mért jellemző, a vizsgálat típusa, mérési tartomány. Lobbanás és gyulladáspont nyílt téri (Cleveland) lobbanáspont

Perforált lemezek. Raktári lemezeink. Perforált lemezek. Raktári lemezeink. Rendelhető lemezek táblamérete: 1250x2500mm; 1500x3000mm

Megnevezés Sematikus rajz Típus D4N Típus Névleges feszültség Névleges terhelés D4N- 120 VAC 10 A 240 VAC 480 VAC 600 VAC

Megjegyzés: Az "E" és a "H" x y. helyzete egyesített asztalok

2016 GASTROBÁZIS KFT.

Zárójelentés a Hisztamin hatása a sejtdifferenciációra, összehasonlító vizsgálatok tumor - és embrionális őssejteken című számú OTKA pályázatról

PV253G Adcatrol pneumatikus szabályzó szelep (PA típusú lineáris működtetővel szerelhető V253G típusú szelep)

Légzés. A gázcsere alapjai

Ph.D. értekezés. Tóth Erzsébet Melinda. Témavezető: Dr. Sántha Miklós. MTA Szegedi Biológiai Kutatóközpont Biokémiai Intézet

Magyar Mérnöki Kamara ELEKTROTECHNIKAI TAGOZAT Villámvédelmi vizsgára felkészítő tanf Fémek korróziója

DNS molekulák elválasztása agaróz gélelektroforézissel és kapilláris elektroforézissel

PRO-CLEAN. Műszaki leírás. Műszaki adatok. Napkollektoros rétegtároló

PorceLine 2011 katalógus árlista

Prisma. Prisma C. Prisma G-DK. Prisma R. Jellemzők

M A B I S Z T E R M É K - M E G F E L E L Ő S É G I A J Á N L Á S

Költségvetés összesítő lap

2016 év eleji ajánlatok. Speciális áraink 2016 május 31-ig érvényesek!

Vasúti fejlesztések. Dr. Szepessy Zsolt K+F ágazatvezető. evopro Kft.

Thrombosishajlam gyulladásos bélbetegségben a betegségaktivitás vagy az öröklött tényezők játszanak-e fontosabb szerepet?

Kisgépek beszerzése. Közbeszerzési Értesítő száma: 2016/57. Eljárást megindító felhívás Közbeszerzési

Gyógyszerrezisztenciát okozó fehérjék vizsgálata

MATLAB-FEM OPTIMALIZÁCIÓS KÖRNYEZET KIALAKÍTÁSA ÉS ALKALMAZÁSA ELEKTROMOS JÁRMŰMOTOROK FEJLESZTÉSÉRE

Vidéki térségfejlesztés a Vidékfejlesztési Programban

Hometronic Manager HCM 200 HCM 200D. Telepítés és konfiguráció

ÉLELMISZERIPARI ISMERETEK. Cukorrépa (Beta vulgaris var. saccharifera) Dr. Varga Csaba főiskolai adjunktus

Prof. Dr. CSŐKE BARNABÁS egyetemi itanár, intézetigazgató Miskolci Egyetem. Intézet

Téglalap és kör alakú lemezek deformációjának számítása fröccsöntött szerszámok esetén

a NAT /2008 számú akkreditálási ügyirathoz

Átírás:

53 2 ( ) Vol53 No2 20143 JournalofXiamenUniversity (NaturalScience) Mar2014 doi:106043/jissn0438-0479201402022 Hsp20 Adcs 1 1 2 1* (1,361102;2 250012) : 2 (Hsp20)4- -4- (Adcs) (Agrobacterium) (Arabidopsisthaliana), (PCR) (Westernblot),Hsp20 Adcs, : 45 1h,Hsp20, ;Adcs,Hsp20,Adcs : ;4- -4- ;; : Q812 : A : 0438-0479 (2014)02-0267-06 [AgaricusbisporusLange(Imbach)], 02,, 8213 4- -4-, (Adcs)02 [1-2], 20 (Hsp20),,, :02, 25~28,,, ; 8213 11 02,, 16~22 02 8213 02 [3], pearleygate201 (Escherichiacoli) DB3 02 cdna [4], atl atr (LR) (Arabidopsisthaliana) [5-7] ( ) ; Marker ECL ; :2013-09-25 : (30571259) * :sysong@xmueducn, 1 Adcs (Agrobacterium) [4] ATEG5(GV3101) ; pdonr207 1 ; (Col-0) ;atb atp (BP) Invitrogen ;TaqDNA,DNA Marker ; (JacksonImmuno Research Laboratories, INC); Origene ; DNA ;MurashigeandSkoog Sigma

268 ( ) 2014 Aldrich 13 ATEG2 12 ATEG2 1μL ATEG2 (01μg)50μL Gateway ATEG2 GV3101, 5min; 1 PCR BP atb Hsp20 ORF, ExTaq PCR, atb1-2f111:5 -AAAAAGCAGGCT- TCATGTCTACTTTCTTCTACGA -3 atb2-2f111:5 - AGAAAGCTGGGTTTCAATGCCTCAGCTGGGCATC- 3, 95 2min;95 30s,68 30s,15 ; 72 2min; PCR, atb1- :5 -GGGGACAAGTTTGTA- CAAAAAAGCAGGCTTC-3 atb2- :5 -GGG- GACCACTTTGTACAAGAAAGCTGGGTT-3, 95 1 min;94 30s,55 (GV3101) ATEG5(GV3101) 30s,68 30s,25 ; 68 2 min;pcr, 500bp BP (5μL):atB-PCR (25fmol/L),pDONR-,T 3 PCR Western 207 (25fmol/L),BP 1μL, blot (5 μl): (25fmol/L),pEarleyg- ate201 (25fmol/L),LR 1μL, 5μL;25 ;1μL K,37 1 ATEG2 Fig1 AflowchartilustratingconstructionofATEG2vector 2mm, ( :25 μf :247kV :400Ω, :9ms) ;, 5 min 10 ml LB,28 1h; LB ( 50μg/mL 10μg/mL),28 2d PCR Hsp20 ATEG2(GV3101) 14 ATEG2 [8] T 1 30mg/L, 1,3, T 3 5μL;25 ;1μL K,37 15 10 min; 10 μl,1 μl T 3, 10 mg/l DB31, LB ( 10 1/2 MS T 3 μg/ml), PCR, T 2, (Entryclone), ;LR 1/4, T 3, 10 min; 10μL,1μL 16 PCR DB31, LB ( 50 SDS μg/ml), PCR, DNA PCR (expressionclone) pearleygate201 atb1- :5 -GGGGA- ATEG2,-20 CAAGTTTGTACAAAAAAGCAGGCTTC-3 atb2- :5 -GGGGACCACTTTGTACAAGAAAGCTGGGTT- 3 ATEG2 rtaq; 95 5min;95 30s,57 35s,72 30s,35 ; 72 10 min; 500bp ATEG5 LaTaq ; 95 5min;95 30s,57 35s,72 2 min,32 ; 72 10min; 2200bp 17 Westernblot,10 mg 40μL (10 mg/l 20 mg/lβ- ), 10 min; 4 20000g

2 : Hsp20 Adcs 269 15 min, 30μL 10μL 4,100 10 minateg2 ATEG5 15%10% SDS- (PAGE),40μg/ (PVDF), Western blot (HA) 1 2000( ); 1 5000( ) (ECL), Bio-RAD 18 :1/2 MS 21 DB31 500 T 1 pearleyg- bp ;3(b),ATEG-5(T 3 ) 5F-1 5F-2 ate201 (phosphinothri- 5L-1 5L-2 5G-1 5G-2atB1- atb2- [9] cinacetyltransferase) (bar), PCR 2200bp, T 1 2~3, 5F-1 5F-2 5L-1 5L-2, 7d, 4 5G-1 5G-2 Adcs,, 2 ATEG5 DB31 T 1, 30 2200bp mg/l 3, 15 24 Westernblot HA Westernblot : 25 22,4 3d,23 T 3 ATEG- --, 2d, 80% (T 3 )( geneline-strain), 08~1cm 36 1/2 MS 15 45 1 (10mg/L ),25 7d, h 23, 3d (1)ATEG2 3/4 2M- ; 3 [4] 2 2S-3, ATEG5 4 :,1/2 5F-1 5F-2 5G-1 5G-2 MS,4 3d,25 23 PCR 7d 45 1h, 3(a),ATEG-2(T 3 ) 2M-1 2M-2 2S- 25, 7d 1 2S-2 2S-3 2M(2M ATEG2T 2 ) ; 3 [5] 2 2 Fig2 Bastaresistanceselectionoftransgenic Athalianaseedlings, DNA,atB1- atb2- PCR 500bp, 2M-1 2M-2 2S-1 2S-2 2S-3 2M Hsp20, ATEG2 Tab1 1 T3 HomozygoteidentificationfortransgenicAthalianaT3generationseedlings Col-0 2M-1 2M-2 2S-1 2S-2 2S-3 5F-1 5F-2 5L-1 5L-2 5G-1 5G-2 0 23 27 9 2 30 36 36 30 21 36 36 :Col-0: ;2M-1 2M-2 2S-1 2S-2 2S-3: ATEG2 ;5F-1 5F-2 5G-1 5G-2 5L-1 5L-2:ATEG5

270 ( ) 2014 M2:DNA Marker2000;M15:DNA Marker15000; 2M:ATEG2 (T2)DNA PCR ;ATEG2 ATEG5: ATEG2 ATEG5 DB31 PCR,23 3d, ATEG-2M-2, ATEG-5L-2 ; HSP20, 4- -4- (ADCS) (5(a)) : 45 1h, ATEG-2M-2, ATEG-5L-2, HSP20, ADCS (5(b)) 3 PCR Fig3 PCRidentificationof transgenicathalianaseedlings ATEG-2(T 3 )2M-1 2M-2 2M,2S-1 2S-2 2S-3 ( )(4(a)), ATEG-2M-2 ; ATEG-5(T 3 )5L-2 5G- 2,5F-2 5L-1 5G-1,5F-1 (4(b)), ATEG- 5L-2 ATEG-5G-2, 3 :1:Col-0;2:2M-1;3:2M-2;4:2S-1;5:2S-2; 6:2S-3;7:2M;8:Col-0;9:5F-1;10:5F-2; 11:5G-1;12:5G-2;13:5L-1;14:5L-2 4, Fig4 Westernblotverification oftransgenicathalianaseedlings,, 45 1h, 25 5 Fig5 Thermotolerancephenotypeidentification oftransgenicathalianaseedlings 2, [4] Ⅰ( : 8213 : 02 ) 02 8213 ; Ⅱ( : 02 : 02 ), 02,,

2 : Hsp20 Adcs 271, I I AdcsHsp20,, 002% ( ), T 3 ATEG2ATEG5 PCR Westernblot ATEG2M-2ATEG5L-2 (heatshockproteins,hsp), (heatstressproteins),,, HSP100 HSP90 HSP70 HSP60 HSP,, [7,10] :1:Col-0;2:2M-2;3:5L-2;4:Col-0;5:2M-2;6:5L-2 1~3:NC ;4~6:HS, Hsp20,Hsp20 6 Adcs ( Fig6 Rootsandhypocotylselongationlengthoftransgenic 6(a) 3 NC ) Arabidopsisthalianaafterheat-stress Hsp20, Hsp20 ( 6(a) ATEG2 ( 6(b) 3 NC ), 3HS ) Pab ( Adcs )02, ADCS, ATEG5 ( 6(a)(b),, HS ) :1)45 8213 8213, ADCS, 23 Adcs 02 ( ADCS, [4],Adcs 25, 30 ADCS,ADCS, );2)ADCS ADC, ( ), Pab (Adcs ) [4] 3 :, : 332, (, (1~8 ), ) Pab ; (45 ), ( : ) [11], (ATEG-5A AT25-L7) 10~, 13mm,,5mm, - 10~13 mm [12] 45 1 ATEG5 h 3d,

272 ( ) 2014 ATEG2 5 mm turestress[j]proceedingsofthe NationalAcademyof ( ATEG-5L),,, HSP, 177-181 : [8] CloughSJ,BentA FFloraldip:asimplifiedmethodfor Agrobacterium-mediatedtransformation of Arabidopsis : [1],, blevectorsforplantfunctionalgenomicsandproteomics [M] :,2003 lecularapproachesingeneticimprovementofcultivated buton mushroom (Agaricusbisporus)[J]Symbiotic Fungi,Berlin Heidelberg,Germany:Springer,2009: 403-421 [3] RomaineCTransgenic breedingofagaricusbisporus:the nextfrontier[j]actaedulisfungi,2005,12:174-184 [12] JabrinS,RavanelS,GambonnetB,etalOne-carbonme- [4] tabolisminplantsregulationoftetrahydrofolatesyn- [D] :,2010 [5] HongS W,VierlingEMutantsofArabidopsisthaliana Sciences,2000,97(8):4392-4397 [2] GoltapehE M,DaneshY,KamalS,etalBiologyandmo- defectiveintheacquisitionoftolerancetohightempera- [6],, AtHs- fa2 [J] :C,2005,35(5):398-407 [7] PFsHSP17-1 [J],2011(11): thaliana[j]theplantjournal,1998,16(6):735-743 [J]PlantJournal,2006,45(4):616-629 [10] Sanmiya K,Suzuki K,Egawa Y,etalMitochondrial [9] EarleyK W,HaagJR,PontesO,etalGateway-compati- smalheat-shockproteinenhancesthermotoleranceinto- baccoplants[j]febsleters,2004,557(1):265-268 [11] ScotJ,RébeiléF,FletcherJFolicacidandfolates:the feasibilityfornutritionalenhancementinplantfoods[j] JSciFoodAgric,2000,80(7):795-824 thesisduringgerminationandseedlingdevelopment[j] PlantPhysiol,2003,131(3):1431-1439 IdentificationThermotoleranceFunctionofHsp20andAdcs GenesfromAgaricusbisporusbyArabidopsisthaliana DENGLi-xin 1,LUZhong-lei 1,SHEN Yue-mao 2,SONGSi-yang 1* (1SchoolofLifeSciences,XiamenUniversity,Xiamen361102,China; 2SchoolofPharmaceuticalSciences,ShandongUniversity,Jinan250012,China) Abstract: Astwodiferentiatedexpressinggenes,heatshockprotein20 (Hsp20)and4-amino-4-deoxychorismatesynthase(Adcs) weretransformedintowildtypearabidopsisplantsbyagrobacterium tumefaciens-mediatedfloraldip method,afterbastascreen- ing,pcrand WesternblotdetectionindicatedHsp20andAdcsgenehadbeenintegratedintothegenomeofArabidopsisandoverex- pressedtheperformanceofthetransformedplantsandthewildtypeunderheatstresswasanalyzedtheresultsshowedthat,after 1hourstressof45,thehypocotylofHsp20transgenicplantscanrecoverextending,what smore,someseedlingsoftransgenic plantscansurvive;however,likewildtype,thehypocotylofadcstransgenicplantscan trecoverextendingandtheirseedlingscan t surviveconsequently,theexperimentalresultsdisplayedthathsp20genecontributesthermotolerancetoagaricusbisporusdirectly whereasadcsgeneprobablynot Keywords: heatshockprotein20 ;4-amino-4-deoxychorismatesynthase;Arabidopsisthaliana;Agaricusbisporus