REGENERÁLÓDÓ BÉTA SEJTEK, REMÉNYSUGÁR AZ 1-ES ÉS 2-ES TÍPUSÚ DIABÉTESZBEN SZENVEDŐK SZÁMÁRA

Egészségtudományi Közlemények, 1. füzet, 1. szám (2011), 95 104. REGENERÁLÓDÓ BÉTA SEJTEK, REMÉNYSUGÁR AZ 1-ES ÉS 2-ES TÍPUSÚ DIABÉTESZBEN SZENVEDŐK SZÁMÁRA KOSKA PÉTER 1, DR. FODOR BERTALAN 1, KISS-TÓTH ÉVA 1, JUHÁSZNÉ SZALAI ADRIENN 1, DR. KISS-TÓTH EMŐKE 3, KOVÁCS L. GÁBOR 4, DR. BARKAI LÁSZLÓ 2 Összefoglalás: Az 1-es és 2-es típusú diabétesz egyetlen hatékony terápiás eszköze az inzulin adagolás. Az inzulin pontos dózisát azonban a szervezet folyamatosan változó metabolikus aktivitása miatt nehéz meghatározni, így inzulin terápiában részesülő betegek sem mentesülnek a vércukor koncentráció ingadozásainak káros következményeitől: retinopátia, nefropátia. Ezért a béta sejtek regenerálása lenne a legkedvezőbb terápiás cél. Az utóbbi évtized kutatásai felfedték, hogy a hasnyálmirigyben még 1-es típusú diabétesz esetén is maradnak reziduális béta sejtek, amelyek számottevően csökkentik a diabéteszes komplikációk súlyosságát. Állatkísérletes modellekből kiderült, hogy a hasnyálmirigy jelentős regeneratív kapacitással rendelekzik, melyet trofikus faktorok; glukagon szerű peptid, sziget neogenezis asszociált peptid is erősítenek. Jelen tanulmány áttekinti a hasnyálmirigy béta sejt regeneráció területén végzett kutatásokat, valamint a béta sejttömeg megőrzését, regenerálódását célzó terápiák klinikai próbáit. Kulcsszavak: 1-es típusú diabétesz, 2-es típusú diabétesz, glukagon szerű peptid, sziget neogenezis asszociált peptid, béta sejt regenerálás Bevezetés Az 1-es és 2-es típusú diabétesz progresszív kórfolyamat, melynek során a hasnyálmirigy endokrin szigeteinek béta sejtpopulációja fokozatosan elpusztul.a még nem diabéteszes, de már károsodott glükóztolerancia esetén a béta sejttömeg 50%- kal kisebb az egészséges glükóz anyagcserével rendelkezőkhöz képest. A klinikai fázisba jutott 2-es típusú diabéteszben a béta sejttömeg csökkenés már 65%-os, 1- es típusú diabéteszben több mint 90%-os. Az 1-es és 2-es típusú diabéteszben a béta sejtek nagyrészt apoptózissal pusztulnak el [1,2,3]. Az 1-es típusú diabéteszben az apoptózist autoimmun gyulladásos folyamatok okozzák [1,2,3]. A 2-es típusú diabéteszben az apoptózist kiváltó ágensek között szabad zsírsavak, bétaamiloid peptid, reaktív oxigén gyökök, endoplazmatikus retikulum károsodása, gyulladásos citokinek, IL-1β, szerepe merült föl [4,5,6,7,8,9,10]. 1 Miskolci Egyetem Egészségügyi Kar, Nanobiotechnológiai és Regeneratív Medicina Tanszék, Miskolc/Faculty of Health Care, University of Miskolc, Miskolc 2 Miskolci Egyetem Egészségügyi Kar, Elméleti Egészségtudományi Tanszék 3 Miskolci Egyetem Egészségügyi Kar, Védőnő Tanszék 4 Pécsi Tudományegyetem Általános Orvostudományi Kar, Laboratóriumi Medicina Intézete és Egészségtudományi Kar Diagnosztikai Intézete

96 Koska Fodor Kiss-Tóth Juhászné Szalai Kiss-Tóth Kovács Barkai A jelen terápiás stratégiák fókuszában az inzulin terápia, vagy az inzulin szekréciót fokozó hatóanyagokkal (szulfonil-urea származékok) történő kezelés áll, amelyet kiegészíthetnek az inzulin rezisztencia csökkentésére szolgáló hatóanyagok. Azonban az inzulin terápia sem jelenthet teljes megoldást a diabétesz terápiájában, mivel az inzulin dózisának a szervezet aktuális metabolikus igényeihez történő illesztése szinte lehetetlen feladat, amelynek ingadozó vércukorszint az eredménye. Ennek rövid és hosszú távú komplikációi a hipoglikémiás és hiperglikémiás periódusok váltakozása, retinopátia, nefropátia. Az inzulin kezelés új alternatívája lehet az inzulin termelés helyreállítása a béta sejt populáció regenerálásával, amely őssejt, vagy szigetsejt beültetéssel illetve endogén bétasejt regenerációval lehetséges. Az utóbbi időben egyre több kísérleti adat és megfigyelés bizonyítja, hogy a hasnyálmirigy számottevő regenerációs képességgel rendelkezik. Az elpusztult béta sejteket újak pótolhatják [11]. A terhesség, vagy elhízás okozta megváltozott metabolikus igényekhez, a hasnyálmirigy a béta sejt populáció növelésével reagál. Kísérletes modellekben a hasnyálmirigy részleges kémiai vagy műtéti elpusztításával diabéteszessé tett állatok a szigetsejtek regeneratív folyamatok eredményeként meggyógyulnak, inzulin függetlenné válnak. A preklinikai és klinikai fázisban járó új terápiás stratégiák a hasnyálmirigy regenerációs képességét próbálják kihasználni. Fontos terápiás cél a reziduális béta sejtek pusztulásának megakadályozása is. A béta sejtek megújulása proliferációval Jelenleg élénk vita tárgya az új béta sejtek keletkezésének forrása, amelyben béta sejt proliferációt, ductális progenitor sejtekből történő neogenezist és az alfa sejtekből történő transzdifferenciációt egyaránt valószínűsítenek. A magzati illetve csecsemőkori béta sejttömeg gyarapodáshoz valószínűleg mindhárom mechanizmus hozzájárul [12]. Részleges pancreatektomia, inkretin hormon analógokkal történő kezelés (Exendin-4) béta sejt replikációt vált ki a hasnyálmirigyben, melyet bázisanalóg BrDU jelöléssel detektáltak [13]. A sejtosztódásért felelős gének, (ciklinek, ciklin dependens kinázok) gátlása vagy kiütése az egészségesnél kisebb béta sejt populációt és csökkent regenerációs képességet eredményeznek [14,15,16].A béta sejtek alapszintű osztódó képessége az öregedéssel drasztikusan lassul, azonban a hasnyálmirigy részleges elpusztítását követő regeneratív folyamatokban még felnőtt korban is szerepet játszik a sejtosutódás[17].a béta sejtek korralösszefüggő osztódó képesség csökkenésében ciklin dependens kinázokat gátló tumor szupresszor gének aktivációja játszhat szerepet [18].

Regenerálódó béta sejtek 97 Béta sejtek regenerálódási folyamatai hasnyálmirigyben lévő progenitor sejtek differenciálódásával Feltételezik, hogy az exocrin állomány, vagy a ductális hálózat progenitor sejtjei is szerepet játszhatnak a béta sejtek regeneratív folyamataiban, melynek során a hasnyálmirigy embrionális fejlődését szabályozó gének reaktiválódnak. Megfigyelték, hogy a regenerálódó hasnyálmirigy ductus sejtjeinek egy része az endokrin differenciációra jellemző neurogenin-3 (Ngn3) fehérjét expresszálnak. Ngn3 gént overexpresszáló ductalis sejtek szigetsejtekké képesek differenciálódni Ngn3 deficiens egerekben [19]. Egyes tanulmányok szerint a béta sejt regerációban az exocrin állományban jelen lévő progenitor sejtek is részt vehetnek. Baeyens és munkatársai felnőtt patkány hasnyálmirigy acinus sejtjeinek primer tenyészetét epidermális növekedési faktorral (EGF), valamint leukémia gátló faktorral (LIF) kezelték. A kezelt tenyészetekben egy idő után inzulintermelő sejteket mutattak ki, amelyeket kémiai úton diabéteszessé tett egerekbe ültetettek. Az egerek a beültetést követően normoglikémiásokká váltak, amely annak a lehetőségét mutatja, hogy a hasnyálmirigy exocrin sejtjei bizonyos körülmények között funkcionáló béta sejtekké differenciálódhatnak [20]. Béta sejtek megújulásának lehetősége az alfa sejtek transzdifferenciációjával Thorel és munkatársai szövet specifikus nyomkövetéses módszer segítségével megfigyelték, hogy az újonnan kialakult béta sejtek alfa sejt prekurzorokból is létrejöhet [21]. Chung és munkatársai alfa sejtek közvetlen béta sejtté történő konverzióját mutatták ki, melyhez nem szükséges osztódás [22]. Trofikus peptidek szerepe a béta sejt regenerációs folyamataiban: a sziget neogenezissel asszociált fehérje (INGAP) és a glukagonszerű peptid (GLP) A hasnyálmirigy regenerációs folyamatokban szerepet játszó endogén trofikus hatású peptidek felfedezéséhez a ductus celofánnal történő elkötésén alapuló kísérletes modellek alkalmazása járult hozzá. Az elkötés utáni spontán regenerációs folyamatokban, fokozott szigetsejt osztódást figyeltek meg, főleg a ductusok körüli régiókban [23]. Terozano és munkatársai regenerálódó és kontroll hasnyálmirigyből származó mrns minták kvantitatív összehasonlító mrns analízisével kimutatták, hogy a ductus progenitorok osztódásával egy addig nem azonosított gén aktivációja jár együtt. A sziget neogenezishez kapcsolt peptid (INGAP) génjét Rafaeloff és munatársai klónozták és meghatározták bázissorrendjét [25]. Az INGAP hatására a ductális progenitor sejtekből jönnek létre béta sejtek [26]. Az INGAP overexpressziója transzgenikus egerekben gyorsítja a glükóz indukált inzulin felszabadulást, és késlelteti a streptozotocin indukált diabétesz kialakulását. [27].Egészséges patkányoknak adva szignifikánsan javította a homeosztati-

98 Koska Fodor Kiss-Tóth Juhászné Szalai Kiss-Tóth Kovács Barkai kus modell indexüket; mind HOMA-IR mind HOMA béta értékük növekedett, a glükóz indukált inzulinszekréciójuk fokozódott. A szövettani elemzés kimutatta, hogy az INGAP kezelt állatokban szignifikánsan több és nagyobb endokrin sziget alakult ki, a hasnyálmirigy Ngn-3, és PDX mrns tartalma is nagyobb volt a kezeletlen állatokéhoz képest [28]. Az inkretin hormonok közismert hatása, hogy fokozzák az étkezés utáni inzulin felszabadulást. Orálisan adott glükóz hatására a béta sejtek több inzulint szabadítanak fel, mint ugyanolyan mennyiségű intravénásan beadott glükóz hatására Közülük a legtöbbet tanulmányozott a glukagon szerű peptid (GLP-1), melyet a vékonybél L sejtjei termelnek. A GLP-1 inzulinotróp hatásában számos jelátviteli útvonal szerepet játszik, ezekről az elmúlt években számos tanulmányt publikáltak [29,30,31,32,33,34,35].A hormon inzulinotrop hatása mellett igen jelentős a regenerációs folyamatokban való szerepe. Kísérletes modellekben a GLP-1 fokozza a béta sejt proliferációt, és a neogenezist egyaránt, valamint apoptózist gátló hatása is van. Humán mintákból és rágcsálókból származó primer béta sejt tenyészetekben a GLP-1 receptor stimulálása védőhatást mutatott többféle citotoxikus ágenssel szemben is. Így gátolta a TNF-α, szabad zsírsavak, reaktív oxigén szabad gyökök, valamint dexamethazon indukált apoptózist [36].A béta sejt GLP-1 receptor stimulálásának proliferatív hatását igazolták primer szigetsejt kultúrákon is, amelyben a mitogén aktivált protein kináz (MAPK), foszfatidil-inozitol 3 kináz (PI-3K) és PKA szerepét igazolták a ciklinek mellett [37]. A GLP-1 indukálja a béta sejt neogenezist az acinus és a ductális hálózat prekurzor sejtjeiből is. GLP-1 receptorokat mutattak ki a ductális sejtekben rágcsáló és humán mintákból egyaránt. Hasnyálmirigy acinus és ductális eredetű sejtvonalak tenyészetét Exendin-4, GLP-1R agonistával kezelve, azok szigetsejt szerűvé differenciálódtak, amelyek PDX-1 transzkripciós faktort, béta sejt glükokinázt és GLUT2 típusú glükóz transzportert fejeztek ki, valamint glükózzal indukálható inzulin szekrécióval rendelkeztek [38]. Béta sejt funkciót javító új terápiás lehetőségek inkretin mimetikumokkal és inkretin hatást fokozó hatóanyagokkal 2-es típusú diabétesz esetén A GLP-1 közvetlen alkalmazása terápiás eljárásokban nem terjedhetett el, mivel a szervezetben lévő dipeptidil peptidáz (DPP-4) enzim gyorsan lebontja. Ezért humán terápiás alkalmazásokra GLP-1 analógokat fejlesztettek. Az első törzskönyvezett GLP-1 analóg az Exenatid. A szintetikus peptidet Amylin Pharmaceuticals és az Eli-Lilly fejlesztette ki, amelyet 2005-ben törzskönyveztek. Elkezdődött az Exenatid hosszúhatású biodegradabilis mikrohordozóba enkapszulált változatának fejlesztése is, amely kedvezőbb farmakokinetikát biztosít. Az új formula egyszeri 0,8 mg dózisban 15 héten keresztül történő alkalmazása 2-es típusú diabéteszben szenvedő betegek esetén átlag 1,4±0,3%-kal csökkentette a vér glikozilált hemoglobin HbA 1c koncentrációját. 2 mg dózis esetén a 1,7±0,3%-os HbA1c csökkenést

Regenerálódó béta sejtek 99 mértek. A tanulmány szerint szignifikánsan csökkent a koplalási és az étkezések utáni vércukor szint is. Ezek az adatok, a béta sejt funkció javulására utalnak [39]. A Liraglutid a GLP-1 zsírsavval kapcsolt változatának analógja. A szérum albuminhoz kapcsolódik így a dipeptidil dipeptidáz enzim (DPP-4) nem fér hozzá. A Liraglutid 14 hetes 2-es típusú diabéteszes betegeken történő alkalmazása során a béta sejt funkció szignifikáns javulását tapasztalták, az inzulin szekréció első és második fázisa fokozódott. A vizsgálatban az arginin stimulált inzulin szekréciós értékek is javultak, amely a béta sejt funkció javulása mellett a béta sejtpopuláció regenerációs folyamataira is utalhat [40]. Az inkretin hatást fokozó DPP-4 inhibitorok közül Sitagliptint és Vildagliptint is klinika III. fázisban tesztelik. Az eddig közzétett eredmények szerint 2-es típusú diabéteszes betegekben hatékonyan javította a béta sejt funkciót: fokozta az étkezések utáni inzulin szekréciót, és javította a glikémiás kontrollt [41,42]. Béta sejt regenerációs jelenségek 1-es típusú diabéteszben, béta sejt megóvó terápiás lehetőségek 1-es típusú diabéteszes betegek mintáinak patológiai elemzése során reziduális béta sejteket mutattak ki. A reziudális béta sejtek diabétesz időtartamától (4-67év) és a betegek korától függetlenül (14-77év) megtalálhatók voltak a mintákban, amelyekben az apoptotikus sejtek kétszer gyakrabban fordultak elő, mint a nem diabetikus egyedekben. A gyulladásos folyamatokra makrofágok és T sejtek jelenléte, valamint periductális fibrózis is utalt [3,12]. Reziduális béta sejtek aktivitásának fokozódására, esetleg spontán regenerációs folyamatokra utalhatnak a klinikumban nagyon ritka esetekben feljegyzett spontán remisssziók, és a betegésg kezdeti szakaszán visszatérő inzulinfüggetlen periódusok ( mézes hetek )[43]. A reziduális béta sejtek által kiválasztott minimális mértékű inzulin szekréció jelentőségét az 1-es típusú diabétesz hosszú távú komplikációinak csökkentésében a NIH 2003-ban közétett klinikai tanulmánya igazolta. A tanulmányban résztvevő betegeket C-peptid szekréció szempontjából 4 csoportra osztották: 0.03, 0.04 0.20, 0.21 0.50 nmol/l. A tanulmány adatai alapján kiderült, hogy a magasabb stimulált C-peptid szekrécióval, 0.20 nmol/l rendelkező betegek körében szignifikánsan kisebb gyakorisággal alakultak ki nefropátiás és retinopátiás szövődmények, valamint a hipoglikémia előfordulási gyakorisága fele volt minta a 0.20nmol/l-nél kisebb értéket mutató betegek esetében [44]. Az 1-es típusú diabétesz új terápiás stratégiájában a prevenciós szemlélet érvényesül, amelyet primer szekunder és tercier fázisokra osztanak attól függően, hogy a betegség mely fázisában kezdik meg a terápiát. A primer prevenciós terápiák során az autoimmun folyamatok kiváltásáért felelős környezeti faktorokat eliminálják, glutén- vagy tehéntejmentes étrend kialakításával csecsemőkorban. Az eljárás tesztelésébe veszélyeztetett csecsemőket vontak be, akiknek szülei közül valamelyik 1-es típusú diabéteszben szenved, és rendelkeznek az érzékenyítő HLA-

100 Koska Fodor Kiss-Tóth Juhászné Szalai Kiss-Tóth Kovács Barkai DQ/DR genotípussal. Ebben a csoportban két vizsgálat is folyik, az egyikben a csecsemők 8 hónapos korukig kizárólag anyatejet, vagy amennyiben ez nem lehetséges tehéntej hidrolizátumot kaphatnak. A másik vizsgálatban a glutén megvonás hatását vizsgálják. A vizsgálatokban 10 éves követési időt alkalmaznak, és azt remélik, hogy a tehéntej és a glutén megvonás a veszélyeztetett csoportban számottevően véd az 1-es típusú diabéteszhez vezető autoimmun folyamatoktól [45]. A szekunder prevenciós stratégiákat, amelyek immuntolerancia kialakításán alapulnak, az autoimmun folyamatokért felelős autoantitestekkel -GAD65 inzulin, béta sejt specifikus vezikuláris cink transzporter (Znt88) rendelkező, de még nem diabéteszes egyéneknél lehet alkalmazni, pl orálisan vagy parenterálisan adott inzulinnal. Ezek a terápiás próbálkozások, ha nem is tudták megakadályozni az 1-es típusú diabétesz kialakulását, számottevően csökkentették a ketoacidózis előfordulását az frissen diagnosztizált betegekben, amely a reziduális béta sejtek jelenlétére utal [46]. A tercier prevenció célja a reziduális béta sejtek megőrzése kialakult 1-es típusú diabétesz estén. A folyamatban lévő klinikai próbákban a vizsgálat végpontja többek között a béta sejtek mennyiségével arányos stimulált C-peptid szekréció. Immuntolerancia kialakítását célzó vakcinációk pl rhgad65, proinzulin peptid vagy a citotoxikus T sejteket gátló antitetestek, anti-cd-3, valamint T sejtfunkciót általánosan gátló kevert antilimfocita szérum, IL -1 receptor antagonista hatóanyagok is szerepelnek a kipróbálás alatt álló stratégiákban. A béta sejt regenerációját elősegítő GLP-1 receptor agonisták (Exenatid), valamint az (INGAP) 1-es típusú diabéteszben való alkalmazását vizsgáló klinikai próbákat is megkezdték. a GLP analóg Exenatid klinika IV-es fázisban, míg az INGAP alkalmazása klinika II-es stádiumban van [45, 46, 47]. Konklúziók és összefoglalás Az inzulin terápia jövőbeni alternatívája lehet az endogén inzulintermelés helyreállítása a béta sejttömeg regenerálásával, amelynek alapja a diabéteszes betegek hasnyálmirigyében jelenlévő reziduális béta sejtek, és a hasnyálmirigy számottevő regenerációs képessége. A béta sejt regenerációt inkretin hatású hormonokkal (GLP-1), valamint a hasnyálmirigy által termelt INGAP peptiddel gyorsítani lehet. A GLP-1 és az INGAP in-vitro és in-vivo modellekben aktiválja a béta sejt regenerálódásáért felelős gének géneket; a ciklin dependens kinázokat, növekedési faktor receptorokat melynek következtében, a diabéteszes állatok inzulin függetlenné váltak. 2-es típusú diabétesz kezelésére kifejlesztett GLP-1R agonisták közül az Exenatid és a Liraglutid már forgalomban van. Az inkretin hatást fokozó DPP4 gátlók közül a Sitagliptin és Vildagliptin vizsgálatai is a befejezésükhöz közeledik. Az adatok csökkenő HbA 1c szintről, javuló stimulált inzulin szekréciós értékekről, és jobb glikémiás kontrollról tanúskodnak [47].Az 1-es típusú diabétesz kezelésének kifej-

Regenerálódó béta sejtek 101 lesztett terápiás eljárások célja a béta sejtek pusztulásának megelőzése, illetve a klinikai stádiumba jutott 1-es típusú diabétesz esetén a reziduális béta sejtek pusztulásának megelőzése. Az inzlulin kezelés melletti immunterápiás eljárások alkalmazása során a tanulmányok csökkenő HbA 1c értékekről és diabétesz progressziójának lassulásáról számoltak be, amelyet stimulált C-peptid szekréció mérésével támasztottak alá. Megkezdődött a GLP-1 analógok és az INGAP 1-es típusú diabéteszben történő alkalmazásának klinikai tesztelése is, amelynek sikere meghatározó előrehaladást jelentene a béta sejt regenerálódást célzó terápiákban [45]. Köszönetnyilvánítás Jelen munka a TÁMOP-4.2.1.B-10/2/KONV-2010-0001 jelű projekt részeként - az Új Magyarország Fejlesztési Terv keretében- az Európai Unió résztámogatásával, az Európai Szociális Alap társfinanszírozásával valósult meg. Irodalomjegyzék [1]Gepts W: Pathologic anatomy of the pancreas in juvenile diabetes mellitus. Diabetes 1965; 14:619 663 [2] Meier JJ, Bhushan A, Butler AE, és mtsai: Sustained beta cell apoptosis in patients with long-standing type 1diabetes: indirect evidence for islet regeneration? Diabetologia 2005; 48:2221 2228 [3]Butler AE, Janson J, Bonner-Weir S és mtsai: Beta-cell deficit and increased beta-cell apoptosis inhumans with type 2 diabetes. Diabetes 2003;52:102 110 [4]Robertson RP, Harmon J, Tran PO, és mtsai: Beta-cell glucose toxicity, lipotoxicity, and chronic oxidative stress in type 2 diabetes. Diabetes 2004; 53(Suppl 1):S119 S124 [5]Bonner-Weir S, Trent DF, Weir GC : Partial pancreatectomy in the rat and subsequent defect in glucose-induced insulinrelease. J Clin Invest 1983;71:1544 1553 [6]Boden G, Chen X, Rosner J, Barton M:Effects of a 48-h fat infusion on insulin secretion and glucose utilization. Diabetes 1995;44:1239 1242 [7] Janson J, Ashley RH, Harrison D:The mechanism of islet amyloid polypeptide toxicity is membrane disruption by intermediate-sized toxic amyloid particles. Diabetes 1999;48:491 498 [8]Robertson R: Chronic oxidative stress as a central mechanism for glucose toxicity in pancreatic islet beta cells in diabetes. J Biol Chem 2004; 279:42351 42354 [9] Laybutt DR, Preston AM, Akerfeldt MC és mtsai: Endoplasmic reticulum stress contributes to beta cell apoptosis in type 2 diabetes. Diabetologia 2007 50:752 763 [10] Maedler K, Storling J, Sturis J és mtsai: Glucose- and interleukin-1β-induced betacell apoptosis requires Ca2+ influxdiabetes 2004 53 (7) 1706-1713 [11] Scaglia L, Cahill CJ, Finegood DT, Bonner-Weir S:Apoptosis participates in the remodelling of the endocrine pancreas in the neonatal rats. Endocrinology 1997;138:1736-41) [12] Roberto Gianin:Beta cell regeneration in human pancreas Semin Immunpathol 2011 33:23-27

102 Koska Fodor Kiss-Tóth Juhászné Szalai Kiss-Tóth Kovács Barkai [13] Patrick Collombat, Xiaobo Hu, Harry Heimberg, és mtsai: Pancreatic beta-cells: From generation to regeneration Seminars in Cell and Developmental Biology 21 (2010) 838-844 [14] Georgia S, Bhushan A:Beta cell replication is the primary mechanism for maintaining postnatal beta cell mass. J. Clin. Invest 2004;114:963-8 [15] Kushner JA, Cyermerych MA, Sicinska E: et al. Cyclins D2 and D1are essential for postnatal pancreatic beta cell growth. Mol. Cell Biol. 2005; 25:3752-62 [16] Rane SG, Dubus P, MEttus RV és mtsai:loss of Cdk4 expression causis insulindeficient diabetes and Cdk4 activation results in beta-islet cell hyperplasia.nat.genet 1999;22:44-52) [17] Teta M, Long SY, Wartschow ML és mtsai:very Slow Turnover of Beta-Cells in Aged Adult Mice. Diabetes 2005;54:2557-2567 [18] Dhawan S, Tschen SI, Bhusan A és mtsai:. Bmi-1 regulates the Ink4a/Arf locus to control pancreatic beta cell proliferation. Genes Dev 2009;23:906-11) [19] Xu X, D Hoker J, Stange G, Bonne S és mtsai:beta cells can be generated from endogenous progenitors in injured adult mouse pancreas. Cell 2008;132;197-207 [20] Baeyens L, Rooman I, Bouwens L és mtsai: Generation of beta cells from acinar cells. Stem Cell Biology and Regenerative Medicine 2010, 2, 153-166 [21] Thorel F, Népote V, Avril I, és mtsai Conversion of adult pancreatic alfa cells to beta cells after extreme beta cell loss Nature. 2010, 464(7292):1149-54. [22] Chung CH, Hao E, Piran R, és mtsai: Pancreatic β-cell neogenesis by direct conversion from mature α-cells. Stem Cells. 2010, (9):1630-8. [23] Rosenberg, L., Brown, R. A., Duguid, W. P.és mtsai A new approach to the induction of duct epithelial hyperplasia and nesidioblastosis by cellophane wrapping of the hamster pancreas. The Journal of Surgical Research, 1983 35:63 72. [24] Terazono K, Yamamoto H, Takasawaz S, és mtsai: A Novel Gene Activated in Regenerating Islets The Journal of Biologycal Chemistry 1988 263, 5:2111-2114 [25] Rafaeloff, R., Pittenger, G. L., Barlow, S. W és mtsai Cloning and sequencing of the pancreatic islet neogenesis associated protein (INGAP) gene and its expression in islet neogenesis in hamsters. The Journal of Clinical Investigation, 1997, 99: 2100 2109. [26] Lipsett M, Hanley S, Castellarin M és mtsai: The role of Islet Neogenesis-Associated Protein (INGAP) in islet neogenesis Cell Biochem Biophys (2007) 48:127 137 [27] Chang JT, Weaver JR, Bowman A és mtsai:targeted expression of islet neogenesis associated protein to beta cells enhances glucose tolerance and confers resistance to streptozotocin-induced hyperglycemia Molecular and Cellular Endocrinology 335 (2011) 104 109 [28] Madrid V, Héctor Del Zotto H, Maiztegui B, és mtsai: Islet neogenesis-associated protein pentadecapeptide (INGAP-PP): Mechanisms involved in its effect upon β-cell mass and function. Regulatory Peptides 157 (2009) 25 31 [29] Light PE, Manning Fox JE, Reidel MJ és mtsai: Glukagon like peptide-1 inhibits pancreatic ATP sensitive potassium channels via protein kinase A and ADP dependent mechanism. Mol Endocrinol 2002;16:2135-2144. [30] McDonald PE, Wang X, Xia F, El-kholyW és mtsai: Antagonism of rat beta-cell voltage dependent K+ currents by exendin 4 requires dual acktivation of the

Regenerálódó béta sejtek 103 camp/protein kinasea and phosphatidyl inositol 3-kinase signaling pathways. J Biol Chem 2003;278:52446-52453) [31] Kang G, Joseph JW, Chepurny OG és mtsai: Epac selective camp analog 8-ppCPT- 2 -O-Me-cAMP as a stimulus for Ca 2+ induced Ca 2+ release and exocitosis in pancreatic MIN6 betacells. Biochem J 2003;369:287-299) [32] Tillmar L, Carlsson C, Welsh N. Contorl of insulin mrna stability in rat pancreas islets. Regulatory role of 3 -untranslated region pyrimidin rich sequence. J. Biol Chem 2002;277:1099-1106. [33] Wang X, Cahill CM, Pineyro MA és mtsai: Glucagon-like peptide-1 regulates the beta cell transcription factor, PDX-1 in insulinoma cells. Endocrinology 1999;140:4904-4907 [34] Buteau J, Spatz ML, Accili D: Transcription factor FoxO1 mediates glucagon-like peptide-1 effects on pancreaic beta cell mass. Diabetes 2006;55:1190-1196 [35] Kitamura T, Nakae J, Kitamura Y, és mtsai: Arden KC, Accili D. The forkhead transcription factor FoxO1 links insulin signaling to Pdx1 regulation of pancreatic beta cell growth J. Clin Invest 2002;110:1839) [36] Li Y, Hansotia T, Yusta B, Ris F, Halban és mtsai: Glucagon like peptide-1 receptor signalling modulates beta cell apoptosis. J Biol Chem 2003;278:471-478) [37] Friedrichsen B, Neubauer N, Lee és mtsai: Stimulation of pancreatic beta cell replication by incretins involves transcriptional induction. Journal of Endocrinology 2006;188:481-492 [38] Jie Zhou, Xiaolin Wang, Marco A és mtsai:glucagon-like Peptide 1 and Exendin-4 Convert Pancreatic AR42J Cells Into Glucagon- and Insulin-Producing Cells. Diabetes 1999; 4 8 :2 3 5 8 2366 [39] Kim D, MacConell L, Zhuang D és mtsai: Effects of once-weekly dosing of a longacting release formulation of exenatide on glucose control and body weight in subjects with type 2diabetes. Diabetes Care 2007;30:1487 93. [40] Vilsbøll T, Brock B, Perrild H és mtsai: Liraglutide, a once-daily human GLP-1 analogue, improves pancreatic beta-cell function and arginine-stimulated insulin secretion during hyperglycaemia in patients with type 2 diabetes mellitus. Diabet Med 2008;25:152 6. [41] Amori RE, Lau JL, Pittas AG: Efficacy and safety of incretin therapy in type 2 diabetes. JAMA 2007;298:194 206 [42] Jemendy György: A 2-es típusú diabetes mellitus új terápiás lehetőségei: inkretinmimetikumok és inkretinhatás-fokozó készítmények LAM 2008;18(11):761-767 [43] Martin S, Pawlowski B, Greulich B és mtsai: Natural course of remission in IDDM during 1st yr after diagnosis. Diabetes Care 1992;15:66-74). [44] Steffes M, Sibley S, Jackson M, Thomas W: Beta cell Function and the development of Diabetes-Related Complications in the Diabetes Control and Complications Trial: Diabetes Care 26:832 836, 2003 [45] Rewers M, Gottlieb P:Immunotherapy for the Prevention andtreatment of Type 1 Diabetes. Diabetes Care 2009 32:1769-1782 [46] Effects of insulin in relatives of patientswith type 1 diabetes mellitus. N. Engl.J Med 2002;346:1685 1691

104 Koska Fodor Kiss-Tóth Juhászné Szalai Kiss-Tóth Kovács Barkai [47] Gale EA, Bingley PJ, Emmett CL, Collier T: European Nicotinamide Diabetes Intervention Trial (ENDIT): a randomised controlled trial of intervention before the onset of type 1 diabetes. Lancet 2004;363:925 931) [48] Rewers M, Gottlieb P Immunotherapy for the prevention and treatment of type-1 diabetes mellitus Diabetes Care 2009 32,10:1769-1782.