A rejtett bélvérzés lvérz s vizsgálata kettős (haemoglobin-albumin) albumin) fehérje kimutatásával Előadó: Zsigmondné Borisza MáriaM Szerzőtárs: rs: Varga Zsuzsanna Országos Onkológiai Intézet, Budapest Központi Laboratórium rium 2005. Szeptember 29-30. BükB
1. A rák r k időben törtt rténő felismerése: se: szűrővizsg vizsgálatok (tüdő-,, emlő-,, méhnyakm hnyak-,, prosztata- és s vastag-végb gbélrák) 2. A lakosság g aktív v részvr szvétele: kommunikáci ció (média, sajtó,, szaklapok, tájékoztatt koztató előad adások, Internet) 3. Szakszerű therapia,, utógondoz gondozás: lelkes szakemberek (mindenki, aki aktívan részt r vállal v egy-egy szűrőprogram szervezésében, lebonyolításában, ban, értékelésében és s az eredmények összegzésében)
A vastag- és s végbv gbélrák k hazánk rákhalr khalálozási statisztikájában a második helyet foglalja el. A betegség g többnyire t rákelr kelőző állapoton (polyp)) keresztül l fejlődik rosszindulatú tumorrá.. Kiemelt fontosságú népegészségügyi gyi feladat a daganatok időben törtt rténő felfedezése és terápi piája, mely jelentősen növeli n a gyógyul gyulás s esély lyét. DAGANATOS HALÁLOZ LOZÁSI SORREND (KSH 1999-2003) Nem Lokalizáció 1999 2000 2001 2002 2003 Nő (1.) Emlőrák 2356 2316 2304 2234 2309 FF (1.) Tüdőrák 5797 5727 5741 5661 5849 Nő (2.) FF (2.) Vastag - és végbélrák 2314 2598 2372 2514 2258 2594 2185 2605 2311 2787 Nő (9.) Méhnyak rák 500 481 539 513 465 FF (4.) Prosztatarák 1387 1413 1372 1292 1308
A RÁK R K ELLENI HARC SIKERE AZ ÖSSZEFOGÁSBAN SBAN REJLIK! ÁNTSZ (kordinátor) HÁZIORVOSOK (kapocs) KÓRHÁZ Országos Onkológiai Intézet (kivitelező) LAKOSSÁG (érintett korosztály)
Előadásom célja: Tapasztalataink ismertetése se a tünetmentes t lakosság, kiemelten a 45-65 év v közötti k korosztály komplex szűrése során: - rejtett bélvérzés kimutatása immunkémiai módszerrel - pozitivitás esetén endoscopos vizsgálat Szűrési módszerünk: Egy lépésben, l tisztított, tott, bispecifikus (anti-humán haemoglobin-albumin) albumin) antiszérummal rummal,, székletb kletből humán n vérfehv rfehérjék k kimutatása immunprecipitáci ciós agarose-gél counter-immunelektrofor immunelektroforézissel.
A kétlépcsős székletvizsgálat elve és gyakorlati kivitelezése Feca teszt: 3 egymást követő napon vett székletmintából a rejtett vér kimutatása a peroxidáz hatására az impregnált szűrőpapíron vér jelenléte esetén kékes elszíneződés keletkezik Immunkémiai-módszer: counter-immunelektroforézis során antigén antitest találkozáskor precipitációs ív jelenik meg, mely fixálódik az agarozban és Coomassie festéssel láthatóvá tehető
Színreakció elvégzése: 2. 1. Pozitivitás esetén kékes elszíneződés látható
Minta-korong levétele csipesszel Korongok áztatása 1. 2. Gél lyukasztása sablonnal Gél eltávolítása vízsugár-szivattyúval 3. 4.
minta kontroll 3 x 5 mikroliter anyag használata minta kettős antiszérum Székletminta, kontroll és antiszérum bemérések
Counter-immunelektroforézis Tápegység és futtatókád 30 perces futtatás
Értékelés bispecifikus antiszérummal A megfestett lemezen jól j l láthatl thatóak ak a megjelenő precipitáci ciós ívek a minták és antiszérumok között. A kettős antiszérum alkalmazásával az egyszerre feldolgozható vizsgálati minták k mennyisége is nőn plusz anyagkölts ltség g nélkn lkül. l. Illetve megfigyelhető az egy betegtől l 3 különbk nböző időpontban vett minta leadásának fontossága is. 1 betegtől származó 3 mintából 3 pozitív 1 betegtől származó 3 mintából 1 pozitív kontroll
VILÁGBANK ÁLTAL TÁMOGATOTT T KÍSÉRLETI K VASTAGBÉLSZ LSZŰRÉS (1997-1998) 1998) ÉS S AJKA-LOV LOVÁSZPATONA VASTAGBÉLSZ LSZŰRÉS S (2003-2004) 2004) ÖSSZESÍTETT EREDMÉNYEI (10801 FŐ) F POLYP KORAI RÁK R ÖSSZES RÁKR DAGANATOK Összesített Feca teszt színreakció + Feca teszt színreakció - Polyp 126 Korai rák 17 Összes rák 25 Polyp 67 Korai rák 10 Összes rák 16 Polyp 59 Korai rák 7 Összes rák 9
MODELLÉRT RTÉKŰ VASTAGBÉLSZ LSZŰRÉSEK SEK ÖSSZESÍTETT EREDMÉNYEI A szűrésben részt vett személyek száma Világbanki csoport 1997-1998 6805 % Ajka-Lovászpatona 2003-2004 3996 % Összesített 10801 % Részvételi arány Férfi Nő Átlagéletkor 31% 2858 3947 64 év 42 58 46% 1638 2358 58,6 év 41 59 35,3% 4496 6305 62,4 év 41,6 58,4 Feca teszt színreakció + 1892 28 1123 28 3015 28 Immunkémia + 377 6 321 8 698 6,5 Immunkémia + színreakció - 128 40 178 55 306 43,8 Hgb és alb együtt + 224 59 167 52 391 56,1 Csak albumin + 146 39 135 42 281 40,2 Csak hemoglobin + 7 2 19 6 26 3,7
Eredményeink: 1997-2003 között k végzett v FECA teszt kétfk tfázisú reakció használat latánál kiderült, hogy minden esetben szüks kséges elvégezni a székletmint kletminták immunkémiai miai vizsgálat latát t is. A tömeges t mértm rtéket elérő regionális szűrés 2004 nov-től fejlesztéseket seket igényelt a módszerben. m -Színreakció FECA teszt reagenssel -Humán specifikus Immunkémiai vizsgálattal haemoglobin és albumin kimutatása Általunk kifejlesztett, tisztított tott és s kipróbált antiszérum továbbfejlesztéseként seként Monospecifikus anti-human hemoglobin és anti-human albumin Bispecifikus anti-human hemoglobin-albumin A haemoglobin mellett párhuzamosan bekapcsolt albumin vérfehérje meghatározása, a szűrési modellben jelentősen megnövelte a felfedezésre került korai daganatok számát.
BUDAPEST kerületi lakossági szűrés s részeredmr szeredményei (2004.11.05-2005.08.31. 2005.08.31. között k érkezett minták összegzése) se) BUDAPEST IX.KER. 2004.11.05-2005.08.31 BUDAPEST XIV.KER. 2004.11.18-2005.08.31. Összesített A szűrésre meghívott személyek száma 11978 25134 37112 A szűrésen megjelent személyek száma 3761 31 % 9620 38 % 13381 36 % A szűrésben részt vett személyek száma 3761 % 9620 % 13381 % Férfi 1427 37,9 3482 36,2 4909 36,7 Nő 2334 62,1 6138 63,8 8472 63,3 Fecatest színreakció pozitív 1298 34,5 2854 29,7 4152 31,0 Immunkémiai pozitív kettős antiszérummal 200 5,3 451 4,7 651 4,9 Immunkém. poz. közül színreakció neg. 131 66,5 318 70,5 449 69,0
Összefoglalás Egyértelm rtelművé vált, hogy a kettős s immunkémiai miai fehérje kimutatást a színreakci nreakció eredmény nyétől l függetlenf ggetlenül l el kell végezni, és s a haemoglobin mellett az albumin párhuzamos vizsgálata sem nélkn lkülözhető,, ellenkező esetben a daganatok kb. felét t elveszíten tenénk. nk. A nagy mennyiségű minta gyorsabb, de ugyanolyan hatékony vizsgálat latát t biztosítja tja számunkra a most megismertetett bispecifikus antiszérum rum,, amelynek alkalmazásával megkétszerezhet tszerezhető a vizsgálati minták k mennyisége plusz anyagkölts ltség g nélkn lkül. l. Örvendetes, hogy a szűrési si programban feltűnően en nagy az időben felfedezésre került polypok és s korai rákok r aránya. Vagyis munkánk hozzáseg segíthet bárkit b egészs szsége óvásához. Ehhez kívánok k kitartó munkát t mindenkinek!
KÖSZÖNÖM M A FIGYELMET!