Engedélyszám: /2011-EAHUF Verziószám: Mikrobiológiai eljárások követelménymodul szóbeli vizsgafeladatok

Átírás

1 1. feladat Magyarázza el, a laboratóriumban szakmai gyakorlaton lévő kollégának hogy miként készíti el egy műtéti mintából izolált Gram-negatív pálca VITEK Compact automatával való azonosítását! A magyarázat során térjen ki az alábbiakra: - hogyan győződött meg arról, hogy a baktérium valóban Gram-negatív - a választott identifikáló panel - a szuszpenzió sűrűsége - a sűrűség ellenőrzése - kontroll leoltás - kb. mennyi idő múlva vár eredményt 2. feladat A laboratóriumba betanuló kollégának magyarázza el egy Listeria gyanús tenyészet azonosítását API rendszerrel! A magyarázat térjen ki az alábbiakra: - előzetes vizsgálat - identifikáló panel - a szuszpenzió sűrűsége - a sűrűség ellenőrzése - ellenőrző leoltás a szuszpenzióból - eredmény várható ideje 3. feladat Egy beteg vérmintájából Echinococcus granulosus ellenanyag kvantitatív kimutatását elvégezte el IHA módszerrel. Az eredmény> 1:256. Értékelje az eredményt a telefonon érdeklődő laborvezetőjének! Térjen ki a következőkre a referálása során: - a kontrollokkal kapott eredmények - az adott minta értékelése - milyen megjegyzést fog beírni az eredmény mellé 1

2 4. feladat Hematológiai beteg vérmintájából Aspergillus antigén kimutatást kérnek. A laboratóriumban latex agglutinációs vizsgálat áll rendelkezésre. Betanuló kollégájának értékelje a vizsgálat klinikai használhatóságát! Részletezze az alábbiakat: - a kimutatás elve - a vizsgálat indikációi - jelen beteg esetében a megfontolás szempontjai - ha az eredmény pozitív, ennek az értéke - ha a vizsgálat negatív, ennek az értéke 5. feladat A parazitológiai laboratóriumban egy AIDS-es beteg nyirokcsomó aspirátumából Toxoplasma gondii tenyésztést kell végeznie, mert a laboratóriumban nincs PCR vizsgálatra lehetőség. Tájékoztassa a laboratórium vezetőjét az alábbiakról! Tájékoztatása során térjen ki az alábbiakra: - a vizsgálatra és a passzálásra alkalmas állatok - a beoltást módja - párhuzamos oltások - az oltott állatok megfigyelése, ellenőrzésük gyakorisága - hány nap után mondható ki a negatív eredmény - a vizsgálati mintával oltott állatok, ha mutatják a pozitív jeleket, akkor hogyan győződik meg, hogy valóban a kórokozó jelenléte a felelős a tünetekért 6. feladat Liquorból HCV PCR-t készített. A reakció végén a készülék értékelésében azt látja, hogy az internális kontroll negatív. Értelmezze ezt az eredményt! Térjen ki a következőkre: - miért szükséges internális kontrollt beállítani a PCR vizsgálatoknál - mitől lehet negatív az internális kontroll - befolyásolja-e a vizsgálat végső eredményét - mit lehet tenni, hogy a vizsgálat értékelhető legyen 2

3 7. feladat Egy myocarditis miatt kezelt beteg szívizom biopsziájából szövettenyészeten végeztek vírustenyésztést. A vizsgálatra Rhézus majom veseszövetet alkalmaztak. Az inkubációs idő elteltével a tenyészeten elszórtan elhelyezkedő lekerekedett sejtek láthatók. A laboratóriumban egy tanulmányi gyakorlaton lévő kollégának mondja el, hogy miként lehet a sejttenyészeten látható elváltozást okozó vírust azonosítani! Magyarázatában térjen ki a következőkre: - a betegséget okozó víruscsoport - a víruscsoportot jellemzői - a cytopátiás hatás vizsgálatának módja - mi figyelmezteti, hogy a látott hatás nem specifikus - mi okozhat aspecifikus hatást - vírus azonosítás módjai - a módszerek kimutatásának elve - kontrollok 8. feladat A parazitológiai laboratóriumba sertéshúsból származó minta érkezett parazitológiai vizsgálatra. A vizsgálatkérő lapon a vizsgálatot kérő közli, hogy a beküldött minta disznóvágásból származik, az állat combjából végeztek kimetszéseket. A disznóvágáson az állat nyers húsából fogyasztóknál lázas megbetegedés, majd erős izomfájdalmak jelentkeztek. Magyaráznia a laboratóriumban betanuló kollégájának a minta feldolgozásának a menetét és a mikroszkópos vizsgálat kivitelezésének módját! Magyarázatában térjen ki a következőkre: - a mikroszkópos vizsgálatra való előkészítés menete - vizsgálati módok - szöveti preparátum elkészítése - lenyomatok készítése - nagyítás foka, fényerősség - milyen kórokozó jelenléte várható a mintákban - a várható kórokozó mikroszkópos jellemzői - biztonsági előírások a vizsgálat során 3

4 9. feladat Magyarázza meg kollégájának, aki két hete kezdte a parazitológiai laboratóriumban a munkát, hogy mit jelent terhes nő esetén a Toxoplasma IgM ELISA vizsgálat eredménye pozitív! Térjen ki a magyarázatában a következőkre: - IgM emelkedés magyarázata - az eredmény értelmezése - az ELISA módszer alapja - verifikáló vizsgálat 10. feladat Egy másik laboratóriumból szakmai látogatásra kollégák érkeztek. Mutassa be a kollégáknak röviden az Ön laboratóriumában használt APY identifikáló rendszert! Térjen ki a következőkre: - alkalmazható táptalajok - a telep kiválasztása szempontjai - a panel kiválasztása - kiegészítő vizsgálatok - előnyei és hátrányai a rendszernek 11. feladat Egy új típusú influenzavírus fertőzésre gyanús beteg mintáját kell embrionált tojásban tenyészteni. Magyarázza el a metodikában nem jártas kollégájának a vizsgálat kivitelezésének módját! Magyarázatában térjen ki a következőkre: - milyen tojás alkalmas a vizsgálatra - előkeltetés ideje - a beoltás helye - a beoltás módja - inkubálás a vizsgálat alatt - a vírus szaporodás jelei - a vírus azonosítás módjai 4

5 12. feladat Feladatul kapta, hogy tanítsa be a kollégáját a lárvavándoroltatás módszerre. Ismertesse kollégájával a módszer egyes lépéseit! Térjen ki a következőkre: - a vizsgálathoz szükséges eszközök - a vizsgálandó székletminta mennyisége - a módszer kivitelezése - a centrifugálás paraméterei - a tovább vizsgált frakció - a nagyítás mértéke 13. feladat A látott mikroszkópos kép egy köpet minta Gram-festett kenete. A látottak alapján értékelje a mintát a szakmai előírásoknak megfelelően! Térjen ki a következőkre: - a mikroszkópos kép m nagyítása - a granulocyták és laphámsejtek száma, aránya - a minta értékelése - további teendők a mintával - különbség a kórokozó nem tenyészett és a nem megfelelő minta eredmény között 5

6 14. feladat Magyarázza el betanuló kollégájának a Bearmann-féle lárvavándoroltatási módszert, majd részletezze a mikroszkópos vizsgálatot! A magyarázatában térjen ki a következőkre: - a lárvavándoroltatáshoz szükséges eszközök - vizsgálati minta - a módszer kivitelezése - a vándoroltatás utáni centrifugálás paraméterei - a mikroszkópos vizsgálat során alkalmazott nagyítás foka - a lárvák fixálásának módjai - a módszer előnyei - a módszer hátrányai - munkavédelmi előírások betartása 15. feladat A kollégája a CCDA táptalajon kitenyészett jellegzetes telepmorfológiájú telepből natív mikroszkópos preparátumot készített. Kéri az Ön segítségét a mikroszkópos kép értékelésében. Segítse a munkáját az alábbiakkal! - melyik baktérium tenyészik ki szelektív módon a fenti táptalajon - előzetes vizsgálat - milyen alakú és mozgású baktériumokat kell a preparátumban keresni - a preparátum elkészítése után mennyi ideig lehet a jellegzetes képet látni - a baktérium azonosításához további vizsgálatok 6

7 16. feladat Készítsen szubkultúrákat a szövettenyésztő laboratóriumban fenntartott HeLa sejtvonalból. A munka menetét magyarázza el a betanuló munkatársának! Magyarázatban térjen ki a következőkre: - a HeLa sejtkultúra eredete - a sejttenyészettel végzett vizsgálatok rövid ismertetése - a sejtkultúra kezelésének menete - a tripszinezések ideje - az inkubálási körülmények - az alkalmazható sejtkultúra médiumok - a sejt növekedését segítő faktorok - új tenyésztőedény beoltása 17. feladat A kollégája egy pozitív hemokultúra palackból készített kenet Gram-festésének értékelésében kér segítséget. A mikroszkópba nézve azt látja, hogy ez egész preparátum erősen pirosra festődött. Magyarázza el a kollégájának, hogy mi lehet ennek az oka! Magyarázatában térjen ki a következőkre: - a kenet készítés módja - a kenet vastagsága - a kenet szárításának módja - a festési fázisok ideje - a differenciálás módja - kontrollok alkalmazása - a mikroszkópos vizsgálat kivitelezése - a tapasztalt jelenség magyarázata 7

8 18. feladat Egy súlyos tüdővérzésben elhunyt beteg tüdőszöveti mintáját kell szövettenyészeten vizsgálnia. A laboratóriumban továbbképzésen tartózkodó kollégának mondja el a minta előkészítés és a szövetre vitel lépéseit! Magyarázatában térjen ki az alábbiakra: - a szövetminta laboratóriumba szállítás módja - milyen mennyiségű minta vizsgálata az optimális - a minta homogenizálásának menete - a nagyobb szövetdaraboktól hogyan mentesíti a homogenizátumot - az inokulálás módjai - az inkubálás ideje, körülményei - munkavédelmi előírások a mintafeldolgozás során 19. feladat CMV fertőzésre gyanús csecsemő vizeletmintáját kell sejttenyészetre oltania. Az egy hónapja a laboratóriumban dolgozó kollégájának magyarázza el a mintafeldolgozás menetét! - a Cytomegalovírus jellemző tulajdonságai - miért veszélyes a terhesség alatt létrejött fertőzés - megfelelő-e a küldött minta a kért vizsgálatra - helyes mintavétel - a minta toxicitásának csökkentési lehetősége - az inokulálás menete - a vírusszaporodás detektálása 8

9 20. feladat HSV PCR-el történő kimutatásának eredmény variációt kell elmagyaráznia kollégájának, aki gyakorlaton van a molekuláris biológiai laborban. A lehetséges eredmények a táblázatban összefoglalva láthatók. Minta csatorna Belső kontroll csatorna Eredmény + + vagy A magyarázatban térjen ki az alábbiakra: - eredmény az első, második, harmadik sor esetén - az eredmény oka - a vizsgálathoz szükséges minta - az inhibitoros mintából való vizsgálat végzése 21. feladat A laboratóriumba újonnan betanuló kollégának a Telemann-féle szedimentációs dúsítást kell bemutatnia. Ismertesse a módszer elvégzésének indikációit és a módszer kivitelezését! - a Magyarországon leggyakrabban előforduló enterális parazitózisok - járványügyi jelentőségük - a mintavétel helyes kivitelezése és a minta szállítása - a vizsgálathoz szükséges minta mennyisége - szükséges eszközök - a minta előkészítés lépései - a minta vizsgálatának módja - az alkalmazott nagyítás mértéke 9

10 22. feladat Egy feltehetően új influenza fertőzésben szenvedő beteg mintájából immunfluorescens módszerrel végeznek víruskimutatást. Mondja el a laborban betanuló kollégájának a vizsgálat menetét.! - a vírus rövid jellemzése - mennyiben más az új vírus, mint a szezonális influenza vírus - a vírus kimutatására alkalmas minta - a helyes mintavétel és szállítás módja - a minta előkészítés menete - a fixálás módja a tárgylemezre - az IF módszer elve - festési eljárás menete - a festés eredményének leolvasási módja - az eredmény értékelése 23. feladat A laboratóriumban tartózkodó vendég CMV PCR-t kivitelezését kérdezi Öntől. Arra kíváncsi, hogy a kit leíráson kívül milyen egyéb általános elveket kell betartani. Röviden mutassa be a módszert! - a vizsgálati minta - hol végzi a DNS preparálást - hol végzi a PCR-t - az elkülönült munkafázis oka - a vizsgálathoz szükséges eszközök - Milyen fertőzést okozhat a vizsgált vírus - Milyen esetekben van szükség erre a vizsgálatra 10

11 24. feladat A vírusvizsgálatokra akkreditált laboratóriumukban az akkreditáció helyszíni szemléje zajlik. A témában nem jártas vezető minősítőnek magyarázza el a laboratóriumba érkezett liquor minta sejtkultúrán történő vírustenyésztési vizsgálatának menetét. Térjen ki a következőkre: - a sejttenyészet megfelelőségének jellemzői - a minta felvitelének módja - milyen kontrollt alkalmaz - az inkubálás körülményi, ideje - a vírus jelenlétének jelei - a vírushatás vizsgálatának módja, értékelése - vírushatás észlelésekor a vírus azonosításának módszerei 25. feladat A fágtipizáló laboratóriumba MRSA törzsek fágtipizálását kell elvégeznie. Röviden magyarázza el a laboratóriumban szakmai gyakorlaton tartózkodó kollégának, hogy a fágtipizálás standardizálásának melyek a szempontjai! Előadásában térjen ki a következőkre: - a módszer elméleti alapjai - a tenyésztési körülmények - S-R formák figyelembe vétele - a leolvasás személyi feltétele - járványügyi megfigyelés figyelembe vétele - fágtípus változás okai - az MRSA törzsek fágtipizálásának nehézségei 11

12 26. feladat Más részlegen dolgozó, az ajánlásoknak megfelelő módon HB védőoltásban részesített kollégája érdeklődik a laboratóriumban a saját vérmintájából végzett hepatitis B vírus felületi antigén elleni ellenanyag, valamint a felületi antigén szintjéről. A vizsgálat eredménye a HBsAb esetén <10 WHO miu/ml, negatív és a HBsAg esetén is negatív lett. Értelmezze kollégájának az eredményt! Az eredmény értelmezésében térjen ki a következőkre: - a HBV rövid jellemzése - fertőződési lehetőségek - szerológiai vizsgálattal kimutatható vírus részek és jelentőségük - a vizsgált ellenanyag alkalmas-e a védőoltás hatékonyságának kimutatására - negatív érték jelentése HBsAb esetében - mi a HBsAg és hogyan értelmezi annak negatív eredményét 27. feladat A parazitológiai vizsgálatokat tanuló kollégájának mondja el az anorectális törléssel vett minta mikroszkópos vizsgálatának menetét! - a mintavétel indikációi - a mintavétel kivitelezése - a mikroszkópos vizsgálathoz szükséges eszközök - a celofán ráhelyezése a tárgylemezre - a mikroszkóp nagyításának beállítása - a keresett képletek leírása - a vizsgálat buktatói 12

13 28. feladat A leggyakoribb humán patogén sarjadzó gombák elkülönítését tudja elvégezni a kereskedelmi forgalomban kapható chromogén szubsztrátot tartalmazó agar táptalajok segítségével. Magyarázza el új kollégájának mit lát a mellékelt képen! - a kimutatás alapja - melyik sarjadzó gomba milyen színnel látható - előnyei a chromagar használatának - milyen minták közvetlen leoltását javasolná - a sarjadzó gombák species szintű azonosításának fontossága - Hogyan határozná meg az egyéb, ezzel a módszerrel nem azonosítható gombákat 13