Jól érzed magad a talajban? Talajtani szeminárium 218. december 13. A gyökér dielektromos válaszának mérése Cseresnyés Imre Füzy Anna Kabos Sándor (ELTE TTK) Kelemen Bettina Kovács Ramóna Mikó Péter (MTA ATK MGI) Parádi István Pohner Zsuzsanna Rajkai Kálmán Rajkainé Végh Krisztina Szitár Katalin (MTA ÖK ÖBI) Takács Tünde Vozáry Eszter (SZIE)
A gyökér vizsgálata Minden eljárás problémás Destruktív (kiásás, talajfurat). Csak a gyökérzet egy kis részét látja, olykor műterméket ad (minirhizotron). Drága, munka- és eszközigényes (nyomjelzéses technikák). Felbontása főként a hajszálgyökerek szintjén korlátozott, nem ad információt a működési intenzitásról (talajradar). Egyszerű, in situ vizsgálati módszerek fejlesztésének igénye (még akkor is, ha ezek is problémásak)
Gyökér-talaj rendszer elektromos kapacitásának mérése O. Chloupek 1972 (Mendel Egyetem, Brno) Tápoldatban vagy homoktalajban nevelt növények (kukorica, napraforgó, repce) Növényelektród: tű vagy csipesz. Talajelektród: fémrúd. Külső polarizáció: ~1 khz, 1 V AC; LCR mérőhíddal. A mérhető gyökérkapacitás arányos a gyökér méretével (tömeg, hossz, felület). *Chloupek O (1972): The relationship between electric capacitance and some other parameters of plant roots. Biologia Plantarum 14: 227 23.
Dalton elvi modellje (1995)* *Dalton F N (1995): In-situ root extent measurements by electrical capacitance methods. Plant and Soil 173: 157 165.
Kétdielektrikumú kondenzátor modell (Rajkai et al. 25*) A Dalton-modell a talajt tisztán vezetőnek tekinti, holott a talaj kapacitása jelentős. Kétdielektrikumú kondenzátor modell szerint a gyökér talaj rendszer egy sorba kapcsolt gyökér dielektrikum és talaj dielektrikum (két veszteséges kondenzátor). Talaj dielektrikum Gyökér dielektrikum Gyökér talaj rendszer Sorba kapcsolt kondenzátorok kapacitása: ha C Soil >> C Root, akkor C RSS ~ C Root A modell kísérletes igazolása (Kormanek et al. 216)! Ez tápoldat és nedves talaj esetén fennáll. *Rajkai, K., Végh, R. K., Nacsa, T. (25): Electrical capacitance of roots in relation to plant electrodes, measuring frequency and root media. Acta Agronomica Hungarica 53: 197 21.
LCR mérőműszerek Precíziós laboratóriumi mérőhíd (GW Instek 811G) Horhozható LCR-mérő (Agilent U1733C) Előre programozható frekvenciaspektrum (2 Hz 1 MHz). Számos elektromos jellemző kijelzése (C, L, X, B, Z, Y, R, Q, D, G, Φ). Néhány frekvencia (pl. 1 Hz, 1 Hz). Szabadföldön ideális (9V-os elem)
Előnyök: Egyszerű és gyors. Roncsolásmentes (in situ) <főleg csipesszel...> Az aktív (abszorptív) gyökérfelszínt, illetve a gyökérzet aktivitását mutatja. Környezeti hatás indikációja a növényen keresztül. Hátrányok: Nem látjuk a gyökeret (architektúra, mélységi megoszlás) A gyökérméret becsléséhez adott talaj-növény rendszerben felvett kalibráció szükséges. A mérési eredményeket erősen befolyásolják a talajtulajdonságok (nedvesség- vagy szervesanyagtartalom), az elektródok típusa és elhelyezése. Jól definiált körülmények között megfelelő módszer a gyökérzet méretének és (aktivitásának) összehasonlítására és monitorozására.
Gyökérzet vízfelvételi aktivitásának monitorozása A szuberinizálódott gyökerek polarizálhatósága (kapacitása) lényegesen kisebb mint az aktív (felszívó) szegmenseké a mért kapacitás így egy funkcionális gyökérméretet mutat. CR (nf) 3 2 Emese Martina Aliz Bagera 1 A mért kapacitás arányos a vízfelvételi rátával, melyet a transzspiráció mérésével határoztunk meg. 1 2 3 4 5 6 16 14 Daily transpiration (ml) 12 1 8 6 4 2 1 2 3 4 5 6 Plant age (day)
Gyökérkörnyezeti hatások vizsgálata AMF(+) and AMF( ) kukorica optimális öntözés (WW) és szárazságstressz (DS) mellett. 12 AMF kolonizáció növelte a kapacitást, WW( ) WW(+) DS( ) DS(+) 1 8 CR (nf) Szárazság csökkentette a gyökértömeget és a kapacitást. 6 4 2 14 18 22 26 3 34 38 42 Plant age (day) Nem befolyásolta a gyökértömeget, sőt csökkentette a gyökérhosszt és a gyökérfelületet. A növekvő kapacitás az AMF hifák által megnövelt gyökér talaj kontaktfelületnek tulajdonítható.
Különböző korú, AMF(-) és AMF(+) kukorica gyökérmérete és kapacitása közötti összefüggés. AMF(+): nagyobb fajlagos (egységnyi gyökérméretre eső) kapacitás. CR (nf) 12 1 8 6 4 2 AMF( ) AMF(+) R 2 =.935 R 2 =.923,5 1 1,5 2 Root dry mass (g) Az AM gombák működésének (intenzívebb víz- és tápanyagfelvétel) közvetett, in situ detektálása az elektromos kapacitás mérésével. CR (nf) 12 1 8 6 4 2 R 2 =.895 R 2 =.918 5 1 15 2 Root length (m) 12 1 R 2 =.941 CR (nf) 8 6 4 R 2 =.937 2 4 8 12 16 Root surface area (cm 2 )
Totálherbicid hatásának vizsgálata Acetoklórt tartalmazó herbicid gyökérnövekedést gátló hatásának vizsgálata kukoricán. Alkalmazás fajspecifikus antidótummal (AD-67) és antidótum nélkül. CONTROLL; AC-1: 12 g ha -1 ; AC-2: 2 g ha -1 acetoklór a talajra a 9. napon. 16 14 12 CONTROLL AC-1 AC-2 antidótum nélkül 16 14 12 CONTROLL AC-1 AC-2 CR (nf) 1 8 6 CR (nf) 1 8 6 4 4 2 antidótummal 2 14 18 22 26 3 34 38 42 Plant age (day) 14 18 22 26 3 34 38 42 Plant age (day) AC-1: Átmeneti gátlás (22. napig) AC-2: Tartós gátlás AC-1: Nincs szignifikáns hatás AC-2: Átmeneti gátlás (26. napig)
Gyökéraktivitás monitorozása szabadföldön Monitorozás tenyészedényben, állandó talajnedvesség biztosításával. Szabadföldön csak adott időpontban történő összehasonlítás térben homogén talajnedvesség mellett. Talajnedvesség gyökérkapacitásra gyakorolt hatásának figyelembe vétele? Monitorozás szabadföldön, térben és/vagy időben változó talajnedvesség mellett. A talaj kapacitása nő a víztartalommal a víz relatív permittivitása jóval magasabb (ε r ~ 8) a levegőénél (ε r ~ 1) és a szilárd (ε r < 5) talajalkotókénál. A gyökér talaj rendszer kapacitása szintén nő a talaj víztartalmával, CSoil (nf) 2 16 12 8 4 C Soil = 152.8θ rel + 12.7 R 2 =.938,2,4,6,8 1, Ez nem magyarázható a kétdielektrikumú kondenzátor modellel! Számítással nem vehető figyelembe. Oka a talajelektród és talaj közötti elektromos kontakt változása. θ rel Kísérletes megközelítés
Kísérletes megközelítés Szója (15 különböző korú egyed) kapacitásának mérése a talaj víztelítettségének növelése mellett. A C rel a mért és a telítési kapacitás (C R* ; θ rel =1) hányadosa. Exponenciális C rel θ rel függvények; a paraméterek függetlenek a növény korától. Szabadföldi monitoring Mért kapacitás átszámítása telítési kapacitásra a talajnedvesség ismeretében ennek monitorozása a vegetációs szezon folyamán. AMF(-) és AMF(+) szója gyökérkapacitásának monitorozása (Martonvásár). A gyökéraktivitás a virágzás kezdetén a legnagyobb. Az AM gomba hatása a késői vegetatív fázisban mutatható ki (nagyobb hajtás biomassza is). Cseresnyés, I., Szitár, K., Rajkai, K., Füzy, A., Mikó, P., Kovács, R., Takács, T. (218): Application of electrical capacitance method for prediction of plant root mass and activity in field-grown crops. Frontiers in Plant Science 9: 93.
A fázisszög (Φ) mérése és jelentősége: Voltage Current A kondenzátorban az elektromos polarizáció (töltéstárolás) miatt az áram siet a feszültséghez képest, a köztük lévő fáziseltolódást mutatja a fázisszög: Φ Ideális kondenzátorokban Φ = 9 és nem függ a frekvenciától. A gyökér veszteséges kondenzátor, Φ = 1 ~ 35, függ a frekvenciától is. Miért jó mérni?? Nagyobb fázisszög (hatékonyabb töltéstárolás) megbízhatóbb a kapacitásmérés segíti az ideális mérőfrekvencia megválasztását és a rossz mérések kiszűrését; ráadásul
Fázisszög és stressz Búza Cd-terhelés és alkálistessz (Na 2 CO 3 ) tenyészedényben. Fázisszög monitorozása gyökér talaj rendszerben, 1 khz frekvencián. -3 4 NS Root CON: kontroll Cd1: 1 mg/kg Cd 2+ Cd2: 5 mg/kg Cd 2+ Φ ( ) -25-2 -15-1 CON Cd1 Cd2 15 2 25 3 35 4 45 5 55 6 Plant age (day) Dry mass (g) 3 2 1 Shoot * *** *** CON Cd1 Cd2 CON: kontroll Na1:,5 m/m% Na 2 CO 3 Na2:,1 m/m% Na 2 CO 3 Φ ( ) -3-25 -2-15 CON Na1 Na2 Dry mass (g) 4 3 2 1 NS *** Root Shoot *** *** -1 15 2 25 3 35 4 45 5 55 6 Plant age (day) CON Na1 Na2 A stresszválasz az intakt gyökérzeten mérhető fázisszöget csökkenése útján is detektálható!
1 Hz-es áram útja a szövetben Stresszválasz a gyökérben: Membránkondenzátor (constant phase element) Intracelluláris ellenállás Extracelluláris ellenállás Membránpotenciál (ionegyensúly) változása; Membrán kémiai változása (ROS lipidek peroxidációja) permeabilitás növekedése Exo- és endodermis gyorsabb fejlődése, lignin és szuberin berakódás gyorsulása, mennyiségének növekedése. Intracelluláris (symplast) útvonal Extracelluláris (apolplast) útvonal Membrán kapacitív hatékonyságának csökkenése (electrolyte leakage) Extracelluláris ellenállás növekedése Kevésbé hatékony töltéstárolás, növekvő energiaveszteség csökkenő fázisszög Egyetlen frekvencián, intakt gyökérzeten mért fázisszög alkalmazása stresszválasz detektálására
Jelenlegi és tervezett kutatások Borsó együttvetés hatása búzafajták gyökérnövekedésére; a gyökérkapacitás mérés együttes alkalmazása rizotron módszerrel (H22-SFS-216-2-727217-2) Egy- és kétszikűek gyökéraktivitásának monitorzása természetes társulásban (kiskunsági nyílt homokpusztagyep); csapadékviszonyok természetes változékonyságának és mesterséges nyári aszály hatásának vizsgálata (NKFIH K-112576, K-115714, K-12968) Szén-dioxid dúsítás (FACE) búza gyökérnövekedésére gyakorolt hatásának elemzése (GINOP-2.3.2-15-216-28) Nyárfacsemeték gyökéraktivitása szezonális változásának vizsgálata (GINOP-2.2.1-15-217-8).
Köszönjük a figyelmet!