BACTEC Mycosis IC/F Culture Vials

Átírás

1 BACTEC Mycosis IC/F Culture Vials Szeletkív tápközeg élesztőkhöz és gombákhoz PP113JAA(01) Magyar HASZNÁLATI JAVASLAT BACTEC Mycosis IC/F tenyésztő palackok aerob vérkultúrákhoz használandók. Elsősorban élesztők és gombák vérből való szelektív kitenyésztésére és kimutatására használandó a BACTEC fluoreszcens sorozatához tartozó készülékekkel. ÖSSZEGZÉS ÉS MAGYARÁZAT Egy vagy több palackot inokulálni kell a vizsgálandó mintával, majd a palackokat inkubálás és időszakos leolvasás céljából a BACTEC fluoreszcens sorozatú készülékbe kell helyezni. Minden palack kémiai érzékelőt tartalmaz, amely kimutatja a mikroorganizmusok szaporodása következtében termelt CO 2 -szint növekedését. A készülék 10 percenként ellenőrzi az érzékelő fluoreszcenciájának növekedését, amely egyenes arányban van a jelenlévő CO 2 mennyiségével. A pozitív leolvasási eredmény azt jelenti, hogy a palackban feltételezhetően élő mikroorganizmusok vannak. AZ ELJÁRÁS MŰKÖDÉSI ELVE Ha a BACTEC palack tesztinokulátumában élesztők és gombák találhatók, akkor CO 2 képződik, miközben a mikroorganizmusok metabolizálják a palackban található szubsztrátokat. A palack érzékelő fluoreszcenciájában bekövetkező növekedést, amit a nagyobb mennyiségű CO 2 okoz, a BACTEC fluoreszcens sorozatú készülék mérni képes. A CO 2 növekedés sebességének és mértékének elemzése lehetővé teszi, hogy a BACTEC fluoreszcens sorozatú készülék meghatározza, hogy a palack pozitív-e, azaz a tesztminta tartalmaz-e élő mikroorganizmusokat. REAGENSEK A BACTEC Mycosis IC/F tenyésztő palackok az eljárás kezdete előtt a következő aktív hatóanyagokat tartalmazzák: Összetevők listája Tisztított víz ml Szív-agyvelő agar... 1,0% m/v Emésztett szója-kazein tápleves... 0,5% m/v Élesztőkivona... 0,035% m/v Szacharóz... 0,6% m/v Dextróz... 0,1% m/v m-inozit... 0,05% m/v Vas-ammónium-citrát... 0,0001% m/v Nátrium polianetol-szulfonát (SPS)... 0,05% m/v Szaponin... 0,24% m/v Kloramfenikol... 0,0037% m/v Tobramicin... 0,001% m/v Habzásgátló anyag... 0,01% m/v Valamennyi BACTEC tápközeg hozzáadott CO 2 -ot tartalmaz. Az összetétel változtatható a specifikus teljesítményelvárások kielégítése céljából. Figyelmeztetés In vitro diagnosztizáláshoz. A termék száraz természetes gumit tartalmaz. A klinikai mintákban patogén mikroorganizmusok, pl. Hepatitis és HIV vírusok lehetnek jelen. Minden vérrel, illetve más testnedvvel szennyezett anyagot a Standard Precautions 1-4 előírásai szerint, illetve az intézet irányelvei szerint kell kezelni. Használat előtt minden palackot meg kell vizsgálni, hogy nem található-e rajta sérülésre, befertőződésre vagy károsodásra utaló nyom. A nyilvánvalóan károsodott, illetve befertőződött palackokat melyek szivárognak, homályosak, tartalmuk elszíneződött (sötétebb), a gumikupak beszívódott vagy kidudorodik ne használja fel. A fertőzött palackokban túlnyomás uralkodhat. Ha befertőződött palackot használ közvetlen vérvételhez, a befertőződött tápközeg visszafolyhat a beteg vénájába. A palackok fertőzöttsége nem mindig nyilvánvaló. Közvetlen vérvétel során kísérje figyelemmel végig a folyamatot annak érdekében, hogy semmilyen anyag ne folyhasson vissza a beteg szervezetébe. Ritkán előfordulhat, hogy az üveg nyaka megreped, vagy a kupak lepattintása, illetve munka közben letörik. Ezenkívül, ritkán előfordulhat, hogy a palack nem lett kellően lezárva. A palackok tartalma mindkét esetben kifröccsenhet, illetve szivároghat. Ha a palackokat már inokulálta, a kicsepegett és kiszivárgott anyaggal bánjon óvatosan, mivel azok fertőző organizmusokat vagy anyagokat tartalmazhatnak. Kidobás előtt minden inokulált palackot autoklávozással sterilizáljon. 1

2 Továbboltáshoz vagy festéshez, stb.-hez való pozitív tenyészapalackok: Mintavétel előtt ki kell engedni a mikrobiális metabolizmus során gyakran képződő gázt. Amennyiben lehetséges, a mintavételt biológiai biztonsági elszívó fülke alatt, megfelelő védőöltözékben (beleértve a kesztyűt és maszkot) kell elvégezni. A továbboltásról további információk az Eljárás című szakaszban találhatók. Hogy a tenyésztő palackok inokulálása alatt minimálisra csökkentse a szivárgás lehetőségét, használjon rögzített tűjű fecskendőket vagy Luer-Lok hegyeket. Tárolási útmutató A BACTEC palackok kézhezvételkor használatra készek, további feloldás, illetve hígítás már nem szükséges. Tárolás 2 25 C hőmérsékleten, száraz, fénytől védett helyen. MINTÁK GYŰJTÉSE A befertőződés elkerülése végett a mintavételhez használjon aszeptikus technikákat. A minta ajánlott térfogata 8 10 ml. A BACTEC palackokat tanácsos közvetlenül a betegágynál inokulálni a mintával. A mintavételhez leggyakrabban egy Luer-Lok heggyel ellátott 10 vagy 20 ml-es fecskendőt használnak. A mintavételhez optimális esetben Vacutainer Needle Holder-t és Vacutainer Blood Collection Set-et, Vacutainer Safety-Lok Blood Collection Set-et vagy más pillangótű készletet kell használni. Ha tűt és vérvételi csőrendszert (közvetlen vérvétel) használ, a mintavétel kezdete után fokozott figyelemmel kísérje végig a vér folyásának irányát. A palackban lévő vákuum általában meghaladja a 10 ml-t, ezért a felhasználónak a palack címkéjén lévő 5 ml-es jelek segítségével ellenőriznie kell a levett minta mennyiségét. Ha a kívánt 8 10 ml-t sikerült levenni, a további áramlást a cső elszorításával, és a vérvételi készlet BACTEC palackból való kihúzásával kell megállítani. 3 ml-es térfogatú minták is felhasználhatók, ilyenkor azonban a kimutatás nem olyan sikeres, mint nagyobb térfogatú minták esetében. Az inokulált BACTEC palackot a lehető legrövidebb időn belül a laboratóriumba kell juttatni. ELJÁRÁS Távolítsa el a BACTEC palack tetejéről a levehető kupakot, majd vizsgálja meg az üveget különös trekintettel a repedésekre, a befertőződésre, a túlzott zavarosságra, a kupak beszívódására, illetve kidudorodására. Ha bármilyen hibát észlel, NE HASZNÁLJA FEL a palackot. Inokulálás előtt törölje le a gumikupakot alkohollal (jódtartalmú fertőtlenítő szer használata nem javallott). Aszeptikus módon fecskendezzen vagy engedjen közvetlenül a palackba, palackonként 8 10 ml mintát. A tápközeg 3 10 ml vérmintával használható. Amennyiben a minta mennyisége kevesebb, mint 3 ml, a kimutatás nem olyan sikeres, mint nagyobb térfogatú minták esetében (lásd Az eljárás korlátai). Az inokulált palackokat inkubálás és monitorozás céljából a lehető legrövidebb időn belül be kell tenni a BACTEC fluoreszcens sorozatú készülékébe. Ha az inokulált palackot nem helyezi időben a készülékbe és a palackban jól láthatóan elindult a szaporodás, akkor a palackot ne tesztelje BACTEC fluoreszcens sorozatú készülékben, hanem oltsa tovább, készítsen megfelelő festést, és tekintse a palackot feltehetően pozitívnak. A készülékben elhelyezett palackokat a készülék automatikusan, a teszt protokoll időtartama alatt 10 percenként teszteli. A pozitív palackokat a BACTEC fluoreszcens sorozatú készülék meghatározza, és pozitívnak minősíti (lásd a megfelelő BACTEC fluoreszcens sorozatú készülék használati útmutatóját). Az üvegen belül található érzékelő nem mutat szemmel látható különbséget a pozitív vagy negatív palackokban, ennek ellenére a BACTEC fluoreszcens sorozatú készülék ki tudja mutatni a fluoreszcenciában bekövetkezett változásokat. Amennyiben a tesztperiódus végére egy negatív BACTEC Mycosis IC/F palack szemmel láthatóan pozitívvá válik (azaz a gumikupak kidudorodik és/vagy a tápközeg zavaros), oltsa tovább, fesse meg megfelelő módon, és tekintse feltehetően pozitívnak. A pozitív palackokat tovább kell oltani, és megfelelően festett kenetet kell készíteni. Az esetek többségében a mikroorganizmusok láthatóvá válnak, és az orvossal az előzetes eredményeket közölni lehet. Továbboltás: Továbboltás előtt helyezze a palackot álló helyzetbe, és takarja le a palack kupakját egy alkoholos törlővel. A palackban uralkodó túlnyomás megszüntetésére szúrjon egy megfelelő szűrővel (vagy vattacsomóval) ellátott steril tűt az alkoholos törlőn át a palack kupakjába. A tűt a nyomás csökkentése után, a továbboltáshoz való minta kivétele előtt el kell távolítani. A tű beszúrását és kihúzását egyenes irányú mozdulatokkal kell elvégezni, és kerülni kell a tekerő mozdulatokat. A maximális izolátum hozamhoz, a negatív tenyészeteket ellenőrizze festéssel és/vagy továbboltással, mielőtt a mintákat negatívnak értékelné, és kidobná. MINŐSÉGELLENŐRZÉS A minőség-ellenőrzési vizsgálatokat a vonatkozó helyi, állami és/vagy szövetségi jogszabályoknak és akkreditációs követelményeknek, illetve a laboratórium standard minőség-ellenőrzési eljárásainak megfelelően kell elvégezni. A megfelelő minőség-ellenőrzési gyakorlat kialakításánál tanácsos figyelembe venni a megfelelő CLSI irányelveket és a CLIA előírásokat. A lejárati idő után NE HASZNÁLJA FEL a tenyésztő palackokat. NE HASZNÁLJA FEL azokat a palackokat, melyeken sérülés bármilyen nyoma látszik. Az ilyen palackokat a megfelelő módon dobja ki. 2

3 A Quality Control Certificate (Minőségellenőrzési tanúsítvány) minden tápközeg dobozban megtalálható. A Minőségellenőrzési tanúsítvány felsorolja a teszt mikroorganizmusokat, beleértve az CLSI standard, Quality Control for Commercially Prepared Microbiological Culture Media fejezetében leírt ATCC tenyészeteket is. 5 Az érzékelés időtartama ezen táptalaj esetén a Minőségellenőrzési tanúsítványban felsorolt valamennyi mikroorganizmus esetében 72 óra: Mikrooganizmus Candida albicans* ATCC Candida parapsilosis ATCC Candida (Torulopsis) glabrata ATCC Candida albicans ATCC Candida krusei ATCC Cryptococcus neoformans ATCC Candida tropicalis ATCC 750 *CLSI törzs Minden tápközeg szállítmány teljesítményét egy negatív és egy pozitív palack teszttel ajánlatos megvizsgálni. A pozitív palackokat 0,1 ml 0.5 McFarland-os Standard Candida albicans (ATCC 10231) vagy Candida (Torulopsis) glabrata oldattal kell inokulálni. Ezt, valamint egy nem inokulált palackot a készülékbe kell helyezni, majd tesztelni. A készüléknek az inokulált palackokat 72 órán belül pozitívnak kell mutatnia. A negatív, kontroll palacknak negatívnak kell maradnia. Ezzel ellenőrizheti, hogy a tápközeget nem tárolták-e vagy szállították-e káros körülmények között a laboratóriumba érkezés előtt. Ha bármelyik palack nem a várt eredményt adja, mindaddig ne használja a tápközeget, amíg fel nem vette a BD helyi képviseletével. A BACTEC fluoreszcens sorozatú készülékek minőség-ellenőrzéséről a megfelelő BACTEC fluoreszcens sorozatú készülék használati útmutatójában olvashat további információkat. AZ ELJÁRÁS KORLÁTAI Befertőződés Ügyelni kell, hogy a mintavétel alatt és az inokulálás során a BACTEC palackokba kerülő minták ne fertőződjenek be. A bertőződött minták ugyan pozitív eredményt adnak, mégsem számítanak releváns klinikai mintáknak. Az ilyen meghatározást a felhasználónak kell elvégeznie olyan tényezők alapján, mint a kimutatott mikroorganizmus típusa, ugyanannak a mikroorganizmusnak a gyakorisága több tenyészetben, a beteg kórelőélete, stb. Nem élő organizmusok A tenyésztő tápközegekből készített Gram-festett kenetek kis számú, nem élő mikroorganizmust tartalmazhatnak, melyek a tápközeg összetevőiből, a festékből, az immerziós olajból, az üveg tárgylemezekről, illetve az inokuláláshoz használt mintából származhatnak. Ezenkívül, a betegtől származó mintában lehetnek olyan mikroorganizmusok, melyek nem szaporodnak a tenyésztéshez vagy továbboltáshoz használt tápközegben. Az ilyen mintákat szükség esetén a megfelelő speciális tápközegben kell továbboltani. 6 Dimorf gombák A Mycosis IC/F Medium tápközeget elsősorban élesztők kimutatására fejlesztették ki. A tápközeg nem bizonyult hatékonynak a dimorf gombák kimutatásában. Általános szempontok Az izolátumok optimális kimutatásához 8 10 ml vér szükséges. Ennél kisebb vagy nagyobb térfogat kedvezőtlenül befolyásolhatja a kimutatást és/vagy az érzékelés időtartamát. A vér tartalmazhat antimikrobiotikumokat vagy egyéb olyan gátló anyagokat, melyek lelassítják, vagy megakadályozzák a mikroorganizmusok szaporodását. Amennyiben a mintában olyan mikroorganizmusok vannak jelen, amelyek nem termelnek elég CO 2 -ot ahhoz, hogy a rendszer kimutassa, illetve a szignifikáns szaporodás még a készülékbe helyezés előtt megtörtént, fals negatív leolvasást kaphatunk eredményként. Magas fehérvérsejt-szám esetében fals pozitív eredmény születhet. A táptalajokban levő biológiai anyagok és a mikroorganizmusok variabilitásának természete miatt a felhasználónak tudatában kell lennie annak, hogy az egyes mikroorganizmusok kimutatása potenciálisan variábilis eredményeket adhat. VÁRT ÉRTÉKEK ÉS SPECIFIKUS TELJESÍTMÉNY JELLEMZŐK Oltásos vértenyésztési vizsgálatok Az oltásos vértenyésztési vizsgálatokhoz teljes humán vért és CFU tartalmú inokulumokat használtak. A következő lista azokat a mikrooraganizmusokat tartalmazza, melyek szaporodnak a Mycosis IC/F tápközegben, és a BACTEC fluoreszcens sorozatú készülékkel kimutathatók. A BACTEC Mycosis IC/F Medium tápközegben az Oltásos vértenyésztési vizsgálatban kimutatott élesztők és gombák listája Aspergillus flavus Candida parapsilosis Mucor ramosissimus Candida albicans Candida rugosa Penicillium roqueforti Candida glabrata Candida tropicalis Trichosporon capitatum Candida krusei Cryptococcus neoformans 3

4 A BACTEC tápközeg teljesítményét az élesztők és gombák kimutatásának tekintetében a korábbiakban a BACTEC NR Fungal tápközeggel és a BACTEC nem-radiometrikus rendszerekkel állapították meg. A BD által kivitelezett oltásos laboratóriumi vizsgálatok során kimutatták, hogy a Mycosis IC/F tápközeg teljesítménye egyenértékű a NR Fungal tápközeg teljesítményével. KISZERELÉS Kat. sz. Leírás BACTEC Mycosis IC/F Culture Vials, 50 palackos kiszerelés BACTEC Mycosis IC/F Culture Vials, 25 palackos kiszerelés IRODALOMJEGYZÉK 1. Clinical and Laboratory Standards Institute Approved Guideline M29-A3. Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections, 3rd ed. CLSI, Wayne, Pa. 2. Garner, J.S Hospital Infection Control Practices Advisory Committee, U.S. Department of Health and Human Services, Centers for Disease Control and Prevention. Guideline for isolation precautions in hospitals. Infect. Control Hospital Epidemiol. 17: U.S. Department of Health and Human Services Biosafety in microbiological and biomedical laboratories, HHS Publication (CDC), 5th ed. U.S. Government Printing Office, Washington, D.C. 4. Directive 2000/54/EC of the European Parliament and of the Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work (seventh individual directive within the meaning of Article 16(1) of Directive 89/391/EEC). Official Journal L262, 17/10/2000, p Clinical and Laboratory Standards Institute Approved Standard M22-A3, Quality control for commercially prepared microbiological culture media, 3rd ed., CLSI, Wayne, Pa. 6. Murray, P.R., E.J. Baron, J.H. Jorgensen, M.L. Landry and M.A. Pfaller (ed.) Manual of clinical microbiology, 9th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 4

5 ==Becton, Dickinson and Company Benex Limited 7 Loveton Circle Pottery Road, Dun Laoghaire Sparks, MD Co. Dublin, Ireland (800) ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection. BD, BD Logo, BACTEC, Vacutainer, Safety-Lok and Luer-Lok are trademarks of Becton, Dickinson and Company BD 5