LABORÁ ÁLLATOK VISELKEDÉ ÉSI FORMÁI Timár Júlia Farmakológiai és Farmakoterápiás Intézet Semmelweis Egyetem 2011 timjul@pharma.sote.hu
SPONTÁN VISELKEDÉS INDUKÁLT VISELKEDÉS
általános aktivitás kognitív funkciók szexuális aktivitás táplálkozási aktivitás
Kontroll (fiz.só kezelés) MDMA (ecstasy) kezelés
ÁLTALÁNOS AKTIVITÁS (lokomotoro os aktivitás) "Open-field" teszt új környezetben - keresı kutató aktivitás mérési idı 3 10 perc Hyper-v. hypoaktivitás környezethez történı habituálódás után mérési idı 10 perc - 24 óra Paraméterek horizontális aktivitás- lokomoció (ambulation) vertikális aktivitás - ágaskodás (rearing) sztereotip fejmozgások mosakodás
SPONTÁN MOTILITÁS (horizo ontális) 4 3 perc 2 1 0 0-5' 5-10' 10-15' 15-20' nyugalmi állapot locomoció
perc 10 7,5 5 2,5 * kontroll Diazepam (SEDUXEN) 0 0-5 perc 0-20 perc per 15 rc *** kontroll d-mdma (ecstasy) 12,5 10 7,5 5 2,5 0 0-5 perc 0-20 perc
morfin (3 mg/kg) perc 10 7,5 *** 5 *** *** 2,5 0 0-5 perc 0-20 perc 30-60 perc kontroll morfin
TANULÁS és MEMÓRIA feltételes és feltétlen inger külön és párosítva aktív egyirányú tanulási tesztek kétirányú tanulási tesztek passzív
SHUT TTLE-BOX kétirányú akt tív elhárítási teszt Trial 1 intertrial crossing IC
SHUTTL LE-BOX kétirányú aktív elhárítási teszt Trial 1 CS 10 sec Trial 2 Conditioned avoidance response CAR
SHUTTL LE-BOX kétirányú aktív elhárítási teszt Trial 1 Trial 2 CS 10 sec CS+US (0.8mA, 5 sec)
SHUTTL LE-BOX kétirányú aktív elhárítási teszt Trial 1 Trial 2 CS+US (0.8mA, 5 sec) Escape failure EF
IC MÉRT PARAMÉTEREK IC (intertrial crossing) nyugalmi periódusban mért mozgás CAR CAR (conditioned av voidance response) menekülési reakció (feltétlen ingerre adott válasz) EF (escape failure) menekülési reakció (feltétlen ingerre adott válasz) hiánya
SHUTTLE-BOX VISELKEDÉS 50 40 30 20 IC Wistár I. 100 75 50 CAR Wistár I. 10 Wistár II. 25 Wistár II. 0 1 2 3 4 5 nap 0 1 2 3 4 5 nap 75 EF istar I - HSd Wistar (LATI) 50 istar II - Charles River Wistar (Knoll J et al., Life Sci, 58, 1996) 25 0 1 2 3 4 5 Wistár II. Wistár I. nap
100 Di+ DiDi CAR ACTIVE AV VOIDANCE EF 80 15 60 40 10 ** 20 0 0 1 2 3 4 5 ** nap 5 0 nap 0 1 2 3 4 5 60 IC 40 20 0 0 1 2 3 4 5 nap
ACTIVE AV VOIDANCE 100 CAR 50 0 3 4 5 6 7 17 18 19 20 21 nap
ACTIVE AV VOIDANCE 30 EF 20 10 0 3 4 5 6 7 17 18 19 20 21 nap
PASSZÍV ELHÁ ÁRÍTÁSI TESZT (training) nyitott guillotine ajtó zárt guillotine ajtó sötét megvilágított áramütés (1 ma 10 mp)
PASSZÍV ELHÁ ÁRÍTÁSI TESZT (retenció) memória tesztelése (retenció) 48 h múlva nyitott guillotine ajtó sötét megvilágított
PASSZÍV ELHÁ ÁRÍTÁSI TESZT sec 120 80 * 40 ±22 ±17 0 ±5 solvent ±4 scopolamin retenció training *p>0,05 Mann-Whitney U teszt
ÁLLATKÍS SÉRLETES MOD DELLEK Anxietás mérésére szolgáló modellek Depresszió mérésére szolgáló modellek Dependencia mérésére szolgáló modellek Pszichózis mérésére szolgáló modellek Dementia mérésére szolgáló modellek
ANXIETAS MÉRÉSE Porsholt teszt (büntetéssel kiváltott viselkedésii gátlás oldása) "elevated plus maze" (emelt keresztpalló) teszt
"elevated plus maze" teszt Megfigyelési idı: 5 perc
ELEVATED PLU US MAZE TESZT diazepam (SEDUXEN) sec *** nyitott 200 100 zárt kar ka ar 100 0 * 200 megfigyelési idı 5 perc kontroll diazepam *** p <0.001; * p <0.05 (két mintás Studentt t- test)
DEPRESSZIÓ ÁLL LATKÍSÉRLETES MODEL LLJEI I kétoldali bulbectomia (bulbus olfactorius eltávolítása) után mért viselkedési változások (motilitás változás, menekülési reakció hiánya, memória romlása, stb.)
DEPRESSZIÓ ÁLL LATKÍSÉRLETES MODEL LLJEI II "learned helplessness (tanult reménytele enség) teszt (shuttle box-ban)
LEARNED HELPL LESSNESS TESZT (negatív menek külési reakció) 20 * * * 15 10 5 Elháríthatatlan áramütés 0 1. 2. 3. nap Kontroll * p <0.05 ANOVA
LEARNED HELPL LESSNESS TESZT (negatív menek külési reakció) 20 15 10 5 * * * Elháríthatatlan áramütés 0 1. 2. 3. nap Elháríthatatlan áramütés + antidepresszáns * p <0.05 ANOVA
FIZIKÁLIS FÜGGİSÉG MÉRÉSÉRE SZOLGÁLÓ ÁLLATKÍSÉRLE ETES MODELLEK (pozitív vagy negatív megerısítı hatás) Kondicionált "place preference" teszt Kondicionált "place aversion" teszt Kondicionált "taste preference" teszt Kondicionált "taste aversion" teszt Kondicionált motilitás Önadagolás
Infuziós pumpa Computer katéter pedál
Önada agolás pozitiv negativ folyamarosan növekvı egyenletes nincs növekedés nem egyenletes gyakori nem gyakori Morfin Codein Heroin Alkohol* Nikotin Benzo diazepinek Kokain Koffein Ecstasy Inhalált narkotikumok THC (marihuána) LSD Meszkalin STP (DOM) Naloxon Fiz. só * Patkányok nem kedvelik
FIZIKÁLIS FÜGGİSÉG MÉRÉSÉRE SZOLGÁLÓ ÁLLATKÍSÉRLE ETES MODELLEK (pozitív vagy negatív megerısítı hatás) Kondicionált "place preference" teszt Kondicionált "place aversion" teszt
Kondicionált hely preferencia/averzió teszt 15 perc kondicionálás 4 nap nyitott guillotine ajtó zárt guillotine ajtó
Kondicionált hely preferencia/averzió teszt 15 perc hely preferencia fehér boxban eltöltött idı változása hely averzió szürke boxban eltöltött idı változása nyitott guillotine ajtó
KONDICIONÁLT PLA ACE PREFERENCE 160 *** ** MDMA - ecstasy 120 se ec 80 40 * 0 S Morfin (+)MDMA (-)MDMA 1 mg/kg 2 mg/ /kg 10 mg/kg * p <0.05; ** p <0.01 (két mintás Student t- teszt)
KONDICIONÁLT P PLACE AVERSION (szürke boxban eltö öltött idı változása) 10 0 ** -10-20 se ec -30-40 -50-60 -70-80 S ** p <0.01 (két mintás Student t- teszt) (-)MDMA 10 mg/kg
SPONTÁN VISELKEDÉS INDUKÁLT VISELKEDÉS
INDUKÁLT VISELKEDÉS transzmitter felszabadulás szintézis preszinaptikus sejt raktározás posztszinaptikus sejt indirekt utón ható agonista vegyületek direkt receptor agonista vegyületek
PSZICHÓZIS ÁLL LATKÍSÉRLETES MODE ELLJEI Shuttle-box tanulás gátlása Katalepszia mérése DA agonista (apomorfin, amfetamin) indukálta viselkedésekk befolyásolása Glutamát antagonista (pl. fenciklidin) indukálta viselkedésekk befolyásolása 5-HT agonista (fenfuramin) indukálta viselkedések befolyásolása
RECEPTOR AKTIVÁLÁ ÁS ÚTJÁN KIVÁLTOTT "SZTEREOTIP" MOZGÁSFORMÁK DA sztereotipia 5-HT 5-HT szindróma ketrec elhagyás "cage leaving" teszt (5-HT 1 ) fejrázás "wet dog shake (5-HT 2 )
5-HT szi indróma Elülsı lábak keresztezése, taposó mozgása (forepaw treading) Hátsó láb elnyújtása (hind limb abduction) S-alakú farokemelkedés (Straub tail) Mérés kezdete: kezelés után 15 perc Mérési intervallumok: 5 perc Pontszám: 0-4/mérés/paraméter max: 36
DA szter reotipia ágaskodás szimatolás nyalás, harapás Mérés kezdete: kezelés után azonnal Mérési intervallumok: 10 perc Pontszám: 0 - nyugalom 1 - ágaskodás, idınkénti szimatolás 2 - folyamatos szimatolás 3 - folyamatos szimatolás, idınkénti nyalás/harapás 4 - folyamatos nyalás/harapás
Köszön nöm a figyel lmet
Optikai izomera jelentısége a viselkedési hatásokban Simuláns hatású amfetamin származék kabító ószer - Ecstasy (MDMA) optikai izomerjeinek összehasonlításaa Ecstasy - racém (+ +) és (-) keveréke
R (-) R- (-) S - (+) S (+)
MDMA ENANTIOMERE EK ELTÉRİ HATÁSAI 5-HT felszabadítás (+) MDMA (-)MDMA DA felszabadítás 5-HT receptor kötıdés Stimuláns hatás Eufória ++ ++ + +
5-HT SZINDRÓMA DA SZTEREOTIPIA Po ont érték 25 20 15 10 5 ** ** ** Po ont érték 30 20 10 ** ** ** 0 + - + - + - 0 + - + - + - A MA MDMA A MA MDMA ** p<0,01 a (-) enantiomerhez hasonlítva (Mann-Whitney U-teszt) Dózis: 10 mg/kg + A : 3 mg/kg
t(sec) 150 CPP (hely-preferenci ia) (fehér boxban eltöltött idı válto ozása) *** 100 *** ** ** 50 * 0 Fiz. só +A - A + MA - MA +MDMA Fiz. só -50-100 (szürke boxban eltöltött idı vál ltozása) CPA (hely-elutasításelutasítás s) *** - MDMA *p< 0,05; **p <0,01; ***p <0,001 (kétmintás Student t-teszt)
Ecstasy (+/-) MDMA neurotoxikus hatású rágcsálóban, majomban és emberben is
Dark-field photomicrograph, sagittal plane, of 5-HT immunoreactive axons in the caudate nucleus of a control monkey (A), a 2 week MDMA-treated monkey (B), and a 7 year MDMA-treated monkey (C). Scale bar, 100 µm. (Hatzidimitriou G et al, (1999) J. of Neurosci. 19, 5096)
Decreased DA activity