Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István

Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István

Kockázat-menedzsment A kockázat menedzselés egy tevékenységi sor a rendszer kockázatnak az elfogadható szinten belülre vitelére gyakori Valószínűség közepes eseti csekély valószínűtlen elhanyagolható jelentéktelen kritikus katasztrofális Következmény Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 2

A fertőzési lánc A kórokozó forrása A kiszabadulás útja Átvitel Megfelelő tevékenységi gyakorlat és munkakörülmény Egyéni védőeszközök Szervezetbe jutás útja Érzékeny befogadó Inkubációs szakasz Betegség Immunizáció Kezelés Elkülönítés Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 3

BSL-3 laboratóriumok A BSL-3 laboratórium egy un. elkülönített laboratórium, ahol súlyos betegséget okozó biológiai ágensek jelenlétével lehet számolni A biológiai kockázat minimalizálására a Jó (vagyis biztonságos) Mikrobiológiai Technikák alkalmazása mellett speciális megszorítások és eszközök is szükségesek. Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 4

BSL-3 laboratóriumok* A BSL-3 laboratóriumokkal kapcsolatos elvárások és előírások a BSL-1 és BSL-2 laboratóriumoknál megtárgyaltakon alapulnak, de kiegészülnek néhány helyen: Eljárások kódexe Laboratórium elrendezése és felszereltsége Egészségügyi és orvosi felügyelet Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 5

BSL-3 laboratóriumok* Eljárások kódexe A bejárati ajtónál nem elegendő a biológiai veszély nemzetközi jelölését kitenni, hanem a részletes információt tartalmazó formát (kitöltve!) kell alkalmazni Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 6

BSL-3 laboratóriumok* Eljárások kódexe Az utcai ruhát cseréjük a munkavégzésre kijelöltre A laboratóriumi védőruha zárt kell legyen, hogy a teljes testfelületet elfedje Az elől-gombos hagyományos laboratóriumi köpeny nem alkalmas, mert nem teljesen takarja az alkart. A védőruha csak a laboratóriumon belül használható Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 7

BSL-3 laboratóriumok* Eljárások kódexe Fejfedőt kell viselni Szakállvédőt kell alkalmazni Csak a helyi munkára szentelt cipőt, vagy cipővédőt kell használni A szennyezett védőruhát mentesíteni kell a tisztítás (mosás) előtt Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 8

BSL-3 laboratóriumok* Eljárások kódexe Potenciálisan fertőző anyaggal végzett minden nyitott műveletet biobiztonsági fülkében, vagy egyéb elsődleges elkülönítő eszközben kell végezni! Légzésvédő eszköz alkalmazás szükséges egyes munkafolyamatoknál, vagy állatokkal való munkavégzésnél Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 9

BSL-3 laboratóriumok* Laboratórium elrendezése és felszereltsége A laboratóriumot el kell különíteni azoktól, ahol szabad közlekedés engedélyezett, pl.: Vak-folyosó végére helyezni Kettős ajtón és egy előtéren keresztüli bejutás (nyomáskülönbség, piszkos-tiszta oldal, esetleg zuhany) Az előtér ajtaja automatikusan záródjon, s meg kell akadályozni, hogy a két ajtó egyszerre nyitva legyen A falak, padlózat és mennyezet könnyen tisztítható, vízálló kell legyen. A laboratórium, illetve a rajtuk lévő nyílások tömíthetőek legyenek (fertőtleníthetőség miatt) Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 10

BSL-3 laboratóriumok* Laboratórium elrendezése és felszereltsége Ha vannak ablakok, azoknak törés-biztosnak, tömítetteknek kell lenniük, és zárva kell tartani azokat A kijárathoz közel olyan kézmosót kell elhelyezni, melyek kézzel történő működtetést nem igényelnek Szabályozott szellőztetési rendszert kell üzemeltetni, mely az irányított légáramokat fenntartja. A szellőzőrendszert úgy kell kiépíteni, hogy a BSL-3 laboratórium levegője ne kerülhessen más helyiségekbe. HEPA szűrővel meg kell szűrni az elszívott levegőt. Ha szükséges, ismételten HEPA szűrőn kell a környezetbe kibocsátani a levegőt Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 11

BSL-3 laboratóriumok* Laboratórium elrendezése és felszereltsége A HEPA szűrőket úgy kell beépíteni, hogy ellenőrizhetőek, illetve gázzal fertőtleníthetőek legyenek A biobiztonsági fülkéket úgy kell elhelyezni, hogy ne legyenek a laboron belüli mozgás, valamint az ajtó és szellőzető rendszer által meghatározott légáram fő irányában A fülkéből elszívott levegőt HEPA szűrőn keresztül kell kibocsátani, úgy hogy az ne zavarja sem a fülke, sem a szellőztető rendszer légáramait Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 12

BSL-3 laboratóriumok* Laboratórium elrendezése és felszereltsége A szennyezett hulladékok mentesítésére autoklávot kell rendszeresíteni a BSL-3 területen belül. Ha fertőző hulladékot távolítunk el a laboratóriumból, azt kizárólag tömítetten lezárt, törhetetlen és nem légáteresztő tartályban szabad, a hazai és nemzetközi előírásoknak megfelelően. A vízvezeték csövébe visszafolyást megakadályozó szelepet kell elhelyezni, a központi vákuum-rendszert HEPA szűrővel, vagy csapdákkal kell megvédeni a fertőző anyagoktól. Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 13

BSL-3 laboratóriumok* Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 14

BSL-3 laboratóriumok* Egészségügyi és orvosi felügyelet A BSL-3 laboratóriumokban dolgozók rendszeres orvosi vizsgálata a felvételkor végzett alkalmassági vizsgálaton túl kötelező. A vizsgálatnak a munkakörre jellemző fizikális vizsgálatokra is ki kell terjednie. A BSL-3 laboratóriumokban dolgozók számára javasolt egy orvosi kártya kibocsátása, mely zsebméretű fényképes kártya tartalmazza azt a tényt, hogy az illető egy BSL-3 laboratóriumban, fertőzés okozó biológiai ágensekkel dolgozik. A kártya ugyancsak tartalmazza a munkáltató által kijelölt kapcsolattartó nevét, elérhetőségét is. Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 15

BSL-4 laboratóriumok A BSL-4 laboratórium egy maximális elkülönítést biztosító laboratórium, ahol a 4. veszélyességi csoportba tartozó, vagyis súlyos betegséget és járványokat okozó biológiai ágensek jelenlétével lehet számolni A BSL-4 laboratóriumoknak szigorúan a nemzeti és más egészségügyi hatóságok ellenőrzése alatt kell tevékenykednie A BSL-3 laboratóriumokra vonatkozó előírások alkalmazandók a következő kiegészítésekkel, módosításokkal: Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 16

BSL-4 laboratóriumok* Eljárások kódexe Alkalmazni kell a kétszemélyes szabályt, vagyis egy ember soha nem dolgozhat egyedül a laboratóriumban A ruházat és a cipő teljes lecserélése szükséges a BSL-4 laboratóriumba való belépés előtt, majd a laboratórium elhagyása után A személyzetet ki kell képezni azokra a vészhelyzeti eljárásokra, melyek az egyéni sérülések vagy betegségek esetére vonatkoznak Ki kell dolgozni a rutinszerű kommunikáció és a vészhelyzeti kapcsolatteremtés módszereit a BSL-4 laboratóriumon belül és kívül dolgozó munkatársak között Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 17

BSL-4 laboratóriumok* Class III. fülkelaboratórium Legalább két ajtón keresztül lehet bejutni a Class III. fülkét tartalmazó szobába. Az elsődleges védelmi eszköz a Class III. fülke. Személyi zuhany szükséges belső és külső öltözővel Az eszközöket és anyagokat nem az öltözőkön keresztül viszik a fülkeszobába, hanem egy kétoldalú autokláv vagy fertőtlenítő-kamra szolgál erre a célra. A belső ajtó csak akkor nyitható, ha a külsőt biztonságosan bezárták. Elektronikusan, vagy mechanikusan meg kell akadályozni, hogy a két ajtó egyszerre nyitva lehessen Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 18

BSL-4 laboratóriumok* Öltözet-laboratórium Az elsődleges védelmi eszköz az egybeöntött, pozitívnyomású, HEPA szűrős, levegő betáplálású védőruha A laboratóriumot úgy tervezik, hogy a személyzetnek át kell haladnia az öltözőn és a fertőtlenítő helyiségen, mielőtt bejutna a fertőző anyaggal történő munkavégzés helyére Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 19

BSL-4 laboratóriumok* Öltözet-laboratórium Kötelező a fertőtlenítő zuhany használata a fertőző helyiség elhagyásakor Külön zuhanyt és kapcsolódó belső és külső öltözőt kell alkalmazni a laboratóriumba történő bemenetelnél és kijövetelnél A betáplált levegőt biztosító rendszernek 100 % tartalékkapacitással kell rendelkeznie egy független levegőforrásból, baleset esetére Az bejárati ajtóknak légmentesen záróknak kell lenniük Ki kell dolgozni egy megfelelő figyelmeztető rendszert, mely arról tájékoztatja a személyzet, hogy a mechanikai védelmi rendszer sérült vagy levegőellátási zavar keletkezett Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 20

BSL-4 laboratóriumok* Laboratórium elrendezése és felszereltsége Ellenőrzött hozzáférés A BSL-4 laboratóriumot egy különálló épületben, vagy egy biztonságos épület jól elhatárolt részén kell létesíteni A személyzet be- és kilépése, valamint az eszközök és anyagok be- és kijuttatása légzsilipeken, vagy átadórendszereken keresztül történik Belépéskor teljes ruhacsere szükséges, távozáskor zuhanyozni kell az utcai ruha felvétele előtt Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 21

BSL-4 laboratóriumok* Laboratórium elrendezése és felszereltsége Ellenőrzött levegőztető rendszer Csökkentett nyomást kell alkalmazni a vizsgálóhelyen Mind a táplevegőt, mind az elszívott levegőt HEPA szűrőn át kell szűrni A HEPA szűrőket évente tesztelni és bizonylatolni kell Az eltávolított HEPA szűrőket veszélyes, fertőző hulladékként kell kezelni, légmentesen lezárt tartályban kell megsemmisítésre, égetésre küldeni Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 22

BSL-4 laboratóriumok* Laboratórium elrendezése és felszereltsége Minden kibocsátott anyagot fertőtleníteni kell kidobás előtt A hőkezelés a leginkább preferált módszer a fertőtlenítésre A személy-zuhany (és nem a fertőtlenítő zuhany!!) és a WC-k vize közvetlenül a szennycsatornába vezethető A laboratóriumok, mentesítő kamrák, fertőtlenítő zuhanyok, biobiztonsági fülkék részére elkülönítő szennyvízelvezetőt kell kiépíteni Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 23

BSL-4 laboratóriumok* Laboratórium elrendezése és felszereltsége Kétoldali ajtajú autoklávot kell működtetni, de más fertőtlenítő eljárásokra is fel kell készülni, pl. a műszerek, vagy nem hőkezelhető anyagok fertőtlenítése esetén Minták, anyagok, állatok a BSL-4 területre juttatásához légzsilipes átadóhelyeket kell biztosítani Vészenergia és dedikált energiavezetékek szükségesek egy esetleges vészhelyzet megoldásához Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 24

BSL-4 laboratóriumok Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 25

BSL-2+ laboratóriumok Hivatalosan nincs benne az előírásokban, de számos intézményben alkalmazzák a BSL- 2+ biobiztonsági szint előírásrendszerét (Yale Egyetem, Institut Pasteur, Sanofi, stb.) Felismerve, hogy sok vizsgálóhely nem rendelkezik a megfelelő BSL-3 fizikai feltétellel, CDC és NIH támogatta a BSL-3 megfelelést úgy, hogy BSL-2 vizsgálóhelyen szigorúan alkalmazott BSL-3 gyakorlatot folytassanak (BSL-2/3-nak is jelölik)*. Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 26

Nagyon fontos!! BSL-2+ laboratóriumok BSL-2+ laboratórium kialakítható, vagy működtethető egy meglévő BSL-2 vizsgálóhelyen, amennyiben a kórokozó típusa, illetve a kórokozót tartalmazó mátrix mennyisége azt megengedi, de új vizsgálóhely létesítésekor BSL-3 feltételeket kell betervezni és megvalósítani! Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 27

BSL-2+ laboratóriumok* Egyéni védőeszközök (PPE) A kísérletekhez szánt egyéni védőeszközöket használjuk. A BSL-2+ munkahelyen használt egyéni védőeszközöket ne használjuk más területeken, vegyük le, mielőtt elhagyjuk a laboratóriumot Viseljünk laboratóriumi köpenyt, lehetőleg rögzített mandzsettával A biobiztonsági fülkében végzett munkához viseljünk dupla kesztyűt. Vegyük le a külsőt mielőtt kijövünk a fülkéből, és húzzunk egy újat, amikor újrakezdjük a munkát A kesztyű érjen túl a köpeny ujján. A csuklónál nyitott köpeny lehetőséget ad a csukló és alkar szennyeződésére, így könyékig kell kezet mosni * Biological Safety Manual, Yale University, Office of Environmental Health and Safety, 2008 Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 28

BSL-2+ laboratóriumok Egyéni védőeszközök (PPE) Az arcvédő (maszk és szemüveg) megvédi a nyálkahártyákat az esetlegesen kispriccelő anyagtól. Őrizkedjünk a szemek, orr és száj érintésétől, amikor a biobiztonsági fülkében dolgozunk Az egyéni védőeszközöket megfelelő sorrendben kell levenni. Először a külső kesztyűt, majd a laboratóriumi köpenyt kell levenni, melyet az alsó kesztyű levétele követ. Végül az arcvédőt távolítsuk el. Sose érintsük az arcot kesztyűs kézzel. A kesztyűket úgy vegyük le, hogy annak belső oldala kívülre kerüljön, megakadályozva a szennyeződés átvitelét * Biological Safety Manual, Yale University, Office of Environmental Health and Safety, 2008 Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 29

BSL-2+ laboratóriumok Egyéni védőeszközök (PPE) A többször használatos egyéni védőeszközöket a leghamarabb mentesíteni kell. A kis területen történő szennyeződéseket megfelelő fertőtlenítővel tisztíthatjuk A laboratóriumi köpenyeket autoklávozhatjuk Az egyszerhasználatos egyéni védőeszközöket biológiai veszélyes anyagként kezeljük és semmisítjük meg Mindig mossunk kezet szappannal és vízzel az egyéni védőeszközök eltávolítása után és a laboratórium elhagyása előtt * Biological Safety Manual, Yale University, Office of Environmental Health and Safety, 2008 Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 30

BSL-2+ laboratóriumok Munkafolyamatok a biobiztonsági fülkében Minden munkát biobiztonsági fülkében végezzünk, beleértve a hulladék kidobását. A kéz kivétele és betétele a fülkébe megbontja a fülke védő levegő-függönyét Minden szükséges anyagot és eszközt a kísérlet előtt tegyünk a fülkébe A fülkébe való betétel előtt minden eszközt töröljünk le fertőtlenítő szerrel Válasszuk szét a fülke alatti tiszta és fertőzött területeket Tartsuk tisztán és ne torlaszoljuk el a fülke szellőző rácsait. Lehetőleg legyen minimális a mozgás a fülke környékén, és az ajtók nyitása-csukása se befolyásolja a légáramokat * Biological Safety Manual, Yale University, Office of Environmental Health and Safety, 2008 Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 31

BSL-2+ laboratóriumok Munkafolyamatok a biobiztonsági fülkében Ne használjunk lángot a biobiztonsági fülkében (tűzveszély mellett sérülhet a szűrő is) Ne használjunk üveg Pasteur pipettákat vagy fecskendőt tűvel. Helyettesítsük azokat műanyag eszközökkel Ha nem tudjuk elkerülni szúró-vágó eszközök használatát, alkalmazzunk könnyen elérhető távolságba helyezett szilárdfalú gyűjtőedényt. A szúró-vágó eszközöket használat után azonnal dobjuk ki. Egykezes eldobási módszert alkalmazzunk. Soha ne csomagoljunk vissza, hajlítsunk kézzel szúróvágó eszközöket. A tű eltávolítására a fecskendőről (ha feltétlen szükséges használjuk a tűdoboz tetején lévő nyitót * Biological Safety Manual, Yale University, Office of Environmental Health and Safety, 2008 Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 32

BSL-2+ laboratóriumok Egyebek A bejárati ajtónál helyezzük el a biológiai veszély nemzetközi jelét és a BSL-2+ (BL-2+, P2+) feliratot A bejárást korlátozni kell (beléptető elektronika, kívülgombos kilincs) A biológiai veszély nemzetközi jelét helyezzük el veszélyes anyagokat tároló eszközökön (inkubátor, fagyasztó) Amennyiben házon belül szállítani kell a biológiai veszélyes anyagot, hézagmentes kettős konténert kell alkalmazni. A külső konténeren fel kell tüntetni a biológiai veszély nemzetközi jelét, a belsőt a veszélyes anyag nevét * Biological Safety Manual, Yale University, Office of Environmental Health and Safety, 2008 Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 33

ABSL-3 Egy állatkísérletes egységben 3-as szintű biobiztonsági fokozat alkalmazandó, amikor olyan őshonos, vagy egzotikus biológiai ágensekkel fertőzött állatokkal dolgoznak, amelyek súlyos, vagy halálos megbetegedéseket képesek okozni, és amelyek elsősorban az aeroszolok belélegzése, az emésztőrendszerbe jutás, a bőr vágott vagy horzsolásos sérülésein keresztül, valamint szembe, orrba vagy szájba történő fröccsenés útján fertőzhetnek. Az ABSA oktatófilmje magyar fordítás a sanofi-aventis/chinoinban történt 2010-ben Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 34

Főbb felhasznált irodalmak Laboratory Biosafety Manual (3rd Edition). Part I. 3. Basic Laboratories, World Health Organization, Geneva, 2004 Emery et al.: Achieving Biosafety Level 3 Trough the Use of Biosafety Level 2 Facilities and Biosafety Laboratory 3 Practices. (1997) Journal of the Americal Biological Safety Association, 2(4) pp. 43-46 Az illusztrációként használt képek többsége a Wikipédiáról lett letöltve Felhasználásra került az ABSA honlapján (www.absa.org) megtalálható oktatófilmje a sanofiaventis/chinoin-ban készült magyar fordítással Biobiztonság 4. Dr. Szatmári István 35