Parasit. Hung. 5. 39-42. 1972. Diplostomum (Trematodes)-fajok metacerkáriáiban előforduló mésztestek vizsgálata Dr. MATSKÁSI István Természettudományi Múzeum Állattára, Budapest A Strigeidida /la Rue,1926/ rendbe tartozó mételyek jellegzetes szervrendszere a másodlagos kiválasztó rendszer. Ez a csatornákból és ampullákból álló, gyakorta bonyolult hálózatot képező szervrendszer a strigeididák metacerkáriáiban éri el legdifferenciáltabb fejlettségét, mig az aduit férgekben leegyszerűsödik. A másodlagos kiválasztó rendszer /paranephridiális plexus/ lakunáiban találhatók a mésztestek, valamint a zsircseppek. A mésztestek száma, nagysága és a metacerkária testén belüli elrendeződése a Diplostomum genuson belül fajra jellemző bélyeg /SIGIN, 1965/. A mésztestek funkciója nem teljesen tisztázott. SIGIN /1964/ a Diplostomum spathaceum élettartamát vizsgálva, arra a megállapításra jutott, nogy a mésztestek akkor játszanak jelentős szerepet, amikor a halak szemében élősködő metacerkária bekerül a végső gazda - valamilyen madárfaj - gyomrába, A gyomorba jutást követően a mésztestek gyorsan eltűnnek, feltehetően feloldódnak a savas közegben, és igy segitik elő a gyomorsavak közömbösítésé t. A mésztestek száma változik a metacerkária fejlődése folyamán. Megjelenésük j e l z i, hogy a metacerkária fertőzőképessé vált. Bár a mésztesteket régóta ismerik /CREPLIN, 1825, CLAPARÉDE, 1858/, kémiai szerkezetüket alig vizsgálták. E képződmények
mész /CaCO^Z-tartalmára csak az a megfigyelés utalt, hogy hig savak, igy a gyomorsav hatására is feloldódnak. Sósavban történő oldódáskor gázképződés figyelhető meg. /SZUDARIKOV, 1959; SIGIN, 1964; REISINGER és GRAACK, 1962/. A fejlődő gáz - amint azt REISINGER és GRAACK kimutatta - széndioxid. Rögzitett állatokon a mésztestek a rögzitőszerek hatására eltűnnek, igy csak élő példányokon vizsgálhatók. SZUDARIKOV /1959/ keletkezésüket tárgyalva emliti, hogy számos esetben több kristályosodási góc körül indul meg a CaCO^ kiválása - ekkor szabálytalan alakú kögök keletkeznek, máskor az egy góc körüli, de egyenletlen ütemű mészlerakódás miatt réteges, a keményitőszemcsékre emlékeztető szerkezetű mésztestek jönnek létre. Vizsgálataimat a Diplostomum spathaceum /Rudolphi, 1819/, D.indistinctum /Guberlet, 1923/ és a D. baeri Dubois, 1937 fajokon végeztem. Élő és 70%-os alkoholban elölt férgeket tanulmányoztam. Alkoholos rögzités után KOSSÁ ezüstözési módszerével tüntettem fel a mésztesteket, majd ezután timsós-karmin festést végeztem. A mésztestek reakcióit 1 %-os sósav, 5 %-os ecetsav /CHgCOOH/, illetve 1 %-os oxálsav /C00H/ 2 oldatba helyezett é- lő metacerkáriákon figyeltem meg. Vizsgálataimat Zeiss NfPk fénymikroszkóppal és Leitz Panphot-Pol mikroszkóppal végeztem, ez utóbbin vizsgálva a mésztestek kettős törését. A metacerkáriában elhelyezkedő mésztestek élő állatokban fénytörésük miatt jól megfigyelhetők /1. ábra/. KOSSA-féle ezüstözéssel a karbonátok és foszfátok helyét a kiváló fémezüst fekete csapadéka j e l z i. A mésztestek sötétbarna-fekete szinüvé válnak hatására, alkohollal rögzitett férgekben. Bár a KOSSAféle eljárást mint mészkimutató módszert használják a hisztokémiában, ennek ellenére nem fogadható el - nem specifikus vol ta miatt - egyedüli bizonyítékként a CaCO^ jelenlétére. Hig savak /sósav, ecetsav/ hatására a mésztestek heves buborékképződés közben oldódtak, mint azt már a bevezetőben emiitett szerzők is megfigyelték. A CaCOg kimutatására használt legmegbízhatóbb eljárás az oxálsavval történő reagáltatás. Ez a módszer a CaCOg kvantitativ
analízisére is alkalmas. Kísérletünkben élő férgeket helyeztünk hig oxálsav-oldatba. A sav hatására az eredetileg legömbölyödött formájú mésztestek szabálytalan elrendeződésü kristálycsoportokká alakultak át. Viszonylag gyakran keletkeztek ikerkristályok /2. ábra/. Panphot-Pol mikroszkóppal vizsgálva a keletkezett kristályok kettőstörőeknek bizonyultak /3. ábra/, holott eredetileg a mésztestek sohasem kettőstörők. Az oxálsav-oldat hatására a CaCO^-ból kristályos kalciumoxalát Ca/COO/ 2 keletkezett. Ez az átalakulás ujabb bizonyiték a "mésztestek" CaCO^tartalmára vonatkozóan. összefoglalás A st.rigeididák másodlagos kiválasztó rendszerében található mésztestek eredeti állapotukban nem kettőstörők. Hig oxálsavval történő reagálásuk során kristályos, erősen kettőstörő kalciumoxalát Ca/COO/2 keletkezik. Ez az átalakulás ujabb bizonyíték arra vonatkozóan, hogy a "mésztestek valóban CaCO^-tartalmuak. Ezúton is szeretjném megköszönni dr. Noskené Fazekas Gabriellának, a Természettudományi Múzeum Ásványtára munkatársának vizsgálatomhoz nyújtott segitségét. MATSKÁSI, I.: On the Calcareous Bodies of the Metacercariae of Diplostomatidae (Trematodes,) The calcareous bodies in the secondary excretory system of Strigeididae are not refracting in native condition. After reaction with oxalic acid, strongly refracting oxalate crystals originate. This transformation is a new evidence on the CaCO content of the "calcareous bodies".
Irodalom CLAPARÉDE, E.: Über die Kalkkörperchen der Trematoden und die Gattung Tetracotyle. Z. Wiss. Zool., 9, 99-105. 1858. CREPLIN, F. C.: Observationes de Entozois. Greifswald, 1825. REISINGER, E. - GRAACK, B.: Untersuchungen an Codonocephalus /Trematoda,Digenea: Strigeidae/, Nervensystem und Paranephridialer plexus. /Z. Parasitenkd., 22., 1-42. 1962./ SZUDARIKOV, V. E.: Otrjad Strigeidida /La Rue, 1926/ Sudarikov, 1959. I. /In: SZKR3ABIN, K. I. ; Trematodi zsivotnüh i cseloveka, t. 16. Moszkva, la59. 217-632./ SIGIN, A. A.: K voproszu o dlityelnosztyi zsiznyi Diplostomum spathaceum v organizme dopolnyitelnovo hozjaina /Trudü GELAN, 14, 262-272, 1964./ SIGIN, A.A.: 0 taxonomicseszkom znacsenyii vtoricsnoj exkretornoj szisztemü metacerkariev roda Diplostomum /Trudü GELAN, 15, 200-202, 1965./ Érkezett: 1971. XII. 10. dr. MATSKÁSI István Természettudományi Múzeum Állat tá ra Budapest V I I I. Baross u.13 1. ábra. Diplostomum indistinctum metacerk. Mésztestek nativ állapotban. Obj. 16 x. Ok. 6,3. 2. ábra. 1 %-os oxálsav kezelés hatására keletkezett kristályok. Obj. 40 x. Ok. 6,3. 3. ábra. Diplostomum spathaceum. Az 1%-os oxálsav kezelés hatására keletkezett kettőstörő kristályok.obj. 40 x. Ok. 2,5. 4. ábra. Ugyanazon állat a kezelés előtt.