GasPak EZ Gázfejlesztõ tartályrendszerek 8010412/04 2007/09 Magyar HASZNÁLATI JAVASLAT A GasPak EZ Gas Generating Container Systems (Gázfejlesztõ tartályrendszerek) többször használatos rendszerek, amelyekben az anaerob, a mikroaerofil vagy a kapnofil baktériumok elsõdleges izolálásához és tenyésztéséhez hozható létre a szükséges atmoszféra a gázfejlesztõ tasakok behelyezésével. ÖSSZEGZÉS ÉS MAGYARÁZAT 1965-ben Brewer és Allgeier kifejlesztettek egy eldobható hidrogénfejlesztõ levelet, amelyet késõbb egy szén-dioxidgenerátorral és egy belsõ katalizátorral egészítettek ki. 1,2 A GasPak EZ Gas Generating Container Systems biológiai teljesítményt és megbízhatóságot nyújt anélkül, hogy katalizátorra vagy aktiválásra lenne szükség. A GasPak EZ Gas Generating Sachet (Gázfejlesztõ tasak) tartalmazza valamennyi összetevõt, amely a minták inkubációjához szükséges atmoszféra elõállításához szükséges. A tasakot és a mintát a tiszta, egymásra rakható, mûanyag GasPak EZ Incubation Container (Inkubációs tartály) belsejében kell elhelyezni. A tartályt le kell zárni és inkubálni kell. A standard GasPak EZ Incubating Container, kat. sz. 260671, 15 18 BBL Stacker Petri-csésze elhelyezésére alkalmas. A nagy GasPak EZ Incubating Container, kat. sz. 260672, 30 33 BBL Stacker Petri-csésze, illetve Petri-csészék és ferde-agar együttes elhelyezésére alkalmas. A GasPak EZ 100 System (100-as rendszer), kat. sz. 260626, 12 BBL Stacker Petri-csésze, illetve Petri-csészék és ferde-agar együttes elhelyezésére alkalmas. A GasPak EZ 150 Large Anaerobic System (150-es nagy anaerob rendszer) kat. sz. 260628, 36 BBL Stacker Petri-csésze, illetve Petri-csészék és ferde-agar együttes elhelyezésére alkalmas. AZ ELJÁRÁS MÛKÖDÉSI ELVE A GasPak EZ Gas Generating Sachet egy reakciótasakból áll, amely elemi szenet, aktív szenet, aszkorbinsavat és vizet tartalmaz. Amikor a tasakot kiveszik a külsõ csomagolásból, a levegõ aktiválja a tasakot. Az aktivált reakciótasakot és a mintákat a GasPak EZ Incubation Container tartályba kell helyezni, majd azt le kell zárni. A tasak hamar lecsökkenti a tartályban levõ oxigénkoncentrációt. Ugyanakkor az elemi szén szén-dioxidot termel. Anaerob baktériumok tenyésztéséhez a GasPak EZ Anaerobe Container System Sachets 2,5 órán belül anaerob atmoszférát hoz létre, és 24 órán belül 15%-nál vagy annál nagyobb szén-dioxid-koncentráció alakul ki. Mikroaerofil baktériumok tenyésztéséhez a GasPak EZ Campy Container System Sachets 2 órán belül mikroaerofil atmoszférát hoz létre, és 24 órán belül 6-16%-os oxigén- és 2 10%-os szén-dioxid-koncentráció alakul ki. A szén-dioxidot igénylõ mikroorganizmusok tenyésztéséhez a GasPak EZ CO 2 Container System Sachets 24 órán belül 2,5%-os vagy nagyobb szén-dioxid-koncentrációjú atmoszférát hoz létre. REAGENSEK Figyelmeztetés: In vitro diagnosztizáláshoz Minden eljárás során tartsa be a mikrobiológiai veszélyek elkerülésére hozott rendszabályokat. Mielõtt a mintákat kidobná, a tárolóedényeket és a többi fertõzött anyagot autoklávozással fertõtleníteni kell. Használat után a tasakot meleg maradhat. Miután a reakció lezajlott (a tasak kihûlt), dobja ki a tasakot. NE HASZNÁLJA FEL a tasakot, ha annak csomagolása kilyukadt, illetve bármilyen más módon felnyílt. Ne tegye ki közvetlen napfénynek, illetve magas hõmérsékletnek. Ha egynél több tasakot használ, azokat NE HELYEZZE egymásra. Az inkubációs idõ vége elõtt NE NYISSA fel a tartályt. A GasPak EZ Container System Sachets tasakok a GasPak EZ Incubation Containers, valamint a BBL GasPak 100 System vagy a BBL GasPak 150 Large Anaerobic System rendszerben használhatók. Más rendszerekben való használatuk téves eredményekhez vezethet. A GasPak EZ Incubation Containers tartályt a GasPak EZ Container System Sachets tasakokkal való használatra tervezték. Ne használja azt más gázfejlesztõ tasakokkal vagy levelekkel (például: BBL GasPak/GasPak Plus Envelopes). Tárolási feltételek: Kézhez vétel után a tasakokat 2 25 C-on, száraz helyen tárolja. A GasPak EZ Container System Sachets tasakok azonnal használatba vehetõk. A szavatossági idõ az elõírásoknak megfelelõen tárolt, sértetlen és bontatlan tasakokra vonatkozik. Csak közvetlenül használat elõtt bontsa fel. Termék szavatossága: Ne használja fel a reakciótasakokat, ha azok külsõ csomagolása megsérült vagy felnyílt. Ne használjon repedt, törött, sérült tömítésû vagy egyéb, hibás tartályt. Aktív összetevõk: Aszkorbinsav, aktív szén és víz Figyelem: Az aktív szén szem-, légúti és bõrirritációt okozhat.
ELJÁRÁS Szállított anyagok: GasPak EZ Container System. Minden rendszerben egy konténer és egy vagy több tasak használandó (Lásd Kiszerelések ). Tartály Tasakok száma GasPak EZ Standard Incubation Container (Cat. No. 260671) 2 GasPak EZ Large Incubation Container (Cat. No. 260672) 3 BBL GasPak 100 System (Cat. No. 260626) 1 BBL GasPak 150 Large Anaerobic System (Cat. No. 260628) 3 Szükséges, de nem szállított anyagok: GasPak EZ Incubation Container Rack (Inkubálótartály-tartó) (Lásd Kiszerelések ), BBL GasPak csõállvány, kiegészítõ táptalajok, reagensek, anaerob indikátorok, minõség-ellenõrzõ mikroorganizmusok és laboratóriumi eszközök az eljárás követelményei szerint. A teszt kivitelezése: 1. Helyezze a kívánt lemezeket a GasPak EZ Incubation Container belsejében levõ tartóba. (Amennyiben a csöveket a BBL GasPak Jar-ban (BBL GasPak edény), használja a BBL GasPak csõállványt, kat. sz. 260630.) 2. A fenti táblázat segítségével állapíthatja meg a tartályonként felhasználandó tasakok számát. Vegye ki a GasPak EZ Container System Sachet tasako(ka)t a dobozból. Vegye ki a tasakot a fóliacsomagolásból. 3. Helyezze az aktivált tasakot a GasPak EZ Incubation Container vagy a BBL GasPak Jar belsejébe a lemezekkel együtt. A tasako(ka)t a lemeztartó és a tartály külsõ fala közötti lemezek mentén kell elhelyezni. Ha az inkubáláshoz GasPak EZ Anaerobe Sachet tasakot használ, egyidejûleg helyezzen a tartályba vagy az edénybe egy anaerob indikátort (Kat. sz. 260678) is. GasPak EZ w/indicator használata esetén nem szükséges külön O 2 -indikátort alkalmazni. Az O 2 - indikátor fehér, amikor a tasakot kiveszik a fóliás csomagolásból, és fokozatosan kékké válik, ahogy az oxigéntartalmú levegõvel érintkezik; akkor válik ismét fehérré, ha redukáló környezetbe kerül. 4. A GasPak EZ Containert úgy zárhatja le, hogy a fedelet a konténer aljára helyezi. Csatolja a fedélre megfelelõen mind a négy zárat. BBL GasPak Jar használata esetén az edényhez mellékelt használati útmutató alapján járjon el. 5. A GasPak EZ Container System rendszert a tenyésztendõ mikroorganizmus számára megfelelõ, de 45 C-nál nem magasabb hõmérsékleten kell inkubálni. A GasPak EZ Incubation Containers tartályok helytakarékos módon is egymásra helyezhetõk. 6. Inkubálás után nyissa ki a tartályt, vegye ki a lemezeket, és az elõírt módon dobja ki a GasPak EZ Container System Sachets tasakokat. Kezelési tanácsok: A GasPak EZ Incubation Container tartály kezelésekor tartsa be az alábbiakat: 1. Ne használjon súrolószereket. 2. Ne használjon hígító- és tisztítószereket. 3. Az enyhe tisztítószerrel végzett tisztítás után öblítse le és szárítsa meg. 4. A tartályt és annak fedelét soha ne autoklávozza. Felhasználói minõség-ellenõrzés: Az egyes GasPak EZ Gas Generating Container System rendszereket meghatározott idõközönként tesztelni kell, hogy megfelelõ körülményeket képesek-e biztosítani az adott baktérium tenyésztéséhez. Rendszer Minõség-ellenõrzési mikroorganizmus GasPak EZ Anaerobe Container System Bacteroides fragilis ATCC 25285 GasPak EZ Campy Container System Campylobacter jejuni ATCC 29428 GasPak EZ CO 2 Container System Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424 A minõség-ellenõrzési követelményeknek a helyi, állami és/vagy szövetségi jogszabályoknak és akkreditációs követelményeknek megfelelõen, illetve a laboratórium standard minõség-ellenõrzési módszereivel összhangban kell eleget tenni. A megfelelõ minõség-ellenõrzési gyakorlat kialakításánál tanácsos figyelembe venni az érvényes CLSI (eredetileg NCCLS) elõírásokat és a CLIA szabályzatot. EREDMÉNYEK Anaerob körülmények 2,5 órán belül jönnek létre, és 35 C-on 24 órán belül 15%-osnál vagy annál nagyobb szén-dioxidkoncentráció alakul ki. Az aktiválást követõ 30 percen belül látható párakicsapódásnak kell megjelennie. A vértartalmú agarlemezek redukciója 35 C-on 2 4 órán belül válik láthatóvá. A beépített anaerob indikátornak 35 C-on 9 órán belül redukálódnia kell (fehér színûvé kell válnia). 2 órán belül mikroaerofil körülmények jönnek létre, és 35 C-on 24 órán belül kb. 6 16%-os oxigén- és 2 10%-os széndioxid-koncentráció alakul ki. A szén-dioxiddal dúsított körülmények 35 C-on 24 órán belül jönnek létre 2,5%-os vagy annál nagyobb szén-dioxidkoncentrációval. TELJESÍTMÉNYJELLEMZÕK GasPak EZ Anaerobic Container System (260678) Kiadás elõtt egy reprezentatív minta alapján minden GasPak EZ Anaerobic Container System Sachets tétel teljesítményjellemzõit tesztelik. A GasPak EZ Anaerobic Container System minden mintatasakját aktiválják és egy-egy Anaerobic Indicatorral (anaerob indikátor) együtt az inkubálótartályba helyezik. A tartályt a címke útmutatásai szerint lezárják és a látható párakicsapódás megjelenéséig megfigyelik. Ezután a konténert 35 ± 2 C-on inkubálják. Kb. 2,5 óra múlva egy 22G x 1,5 méretû fecskendõtûvel gázmintát vesznek a tartály belsejébõl, azt gázkromatográfba helyezik és megmérik 2
a mintában (vagyis az inkubálótartályban) levõ oxigén mennyiségét. Az oxigén mennyisége az egyes tartályok esetében legfeljebb 1%, és az oxigéntartalom átlaga az összes tesztelt minta alapján kisebb mint 0,7%. 35 ± 2 C-on történõ, kb. 24 órás inkubáció után ismét mintát vesznek a tartályból és megmérik a minta szén-dioxid-tartalmát. Az egyes tartályokban a mért szén-dioxid-tartalom 15% vagy annál nagyobb. 9 órán belül az anaerob indikátorok fehérek (redukáltak) lesznek. A tartályok belsejében megjelenõ látható párakicsapódásig eltelt átlagos idõ az aktiválástól számítva kevesebb mint 20 perc. GasPak EZ Anaerobic System with Indicator (260001) Kiadás elõtt reprezentatív minta alapján minden GasPak EZ Anaerobic Container System Sachets with Indicator (Anaerob tartályrendszer tasakjai indikátorral) tétel teljesítményjellemzõit tesztelik. A GasPak EZ Anaerobic Container System with Indicator minden indikátoros mintatasakját aktiválják és az inkubáló tartályba helyezik. A tartályt a címke útmutatásai szerint lezárják és a látható párakicsapódás megjelenéséig megfigyelik. Ezután a konténert 35 ± 2 C-on inkubálják. Megközelítõen 2,5 óra múlva egy 3 ml-es fecskendõhöz csatlakoztatott 22G x 1,5 méretû fecskendõtûvel gázmintát vesznek a tartály belsejébõl, azt gázkromatográfba helyezik és megmérik a mintában (vagyis az inkubálótartályban) levõ oxigén mennyiségét. Az oxigén mennyisége az egyes minták esetében legfeljebb 1%, és az oxigéntartalom átlaga az összes tesztelt minta alapján kisebb mint 0,7% 35 ± 2 C-on történõ, kb. 24 órás inkubáció után ismét mintát vesznek a tartályból és megmérik a minta szén-dioxidtartalmát. Az egyes tartályokban a mért szén-dioxid-tartalom 15% vagy nagyobb. A tasakhoz rögzített Anaerobic Indicator pill (Anaerob indikátor) tablettának 35 ± 2 C-on 24 órán belül kell redukálódnia. A látható párakicsapódásnak az edényekben az aktiválás után 20 percen belül kell megjelennie. GasPak EZ Campy Container System (260680) Kiadás elõtt reprezentatív minta alapján minden GasPak EZ Campy Container System tétel teljesítményjellemzõit tesztelik. A GasPak EZ Campy Container System minden mintatasakját aktiválják és az inkubáló tartályba helyezik. A tartályt a címke útmutatásai szerint lezárják és a látható párakicsapódás megjelenéséig megfigyelik. Ezután a konténert 35 ± 2 C-on inkubálják. Kb. 2 óra múlva egy 22G x 1,5 méretû fecskendõtûvel gázmintát vesznek a tartály belsejébõl, azt gázkromatográfba helyezik és megmérik a mintában (vagyis az inkubálótartályban) levõ oxigén mennyiségét. Az oxigéntartalom az egyes tartályokban 6 16%. 35 ± 2 C-on történõ, kb. 24 órás inkubáció után ismét mintát vesznek a tartályból és megmérik a minta szén-dioxid-tartalmát. A szén-dioxid-tartalom az egyes tartályokban 2 10%. A tartályok belsejében megjelenõ látható párakicsapódásig eltelt átlagos idõ az aktiválástól számítva kevesebb mint 20 perc. GasPak EZ CO 2 Container System (260679) Kiadás elõtt reprezentatív minta alapján minden GasPak EZ CO 2 Container System tétel teljesítményjellemzõit tesztelik. A GasPak EZ CO 2 Container System minden egyes mintatasakját aktiválják és két tele Petri-csészével együtt az inkubálótartályba helyezik. Ezután a címke utasításainak megfelelõen lezárják és a tartályt 35 ± 2 C-on inkubálják. Kb. 24 óra múlva egy 22G x 1,5 méretû fecskendõtûvel gázmintát vesznek a tartály belsejébõl, azt gázkromatográfba helyezik és megmérik a mintában (vagyis az inkubálótartályban) levõ szén-dioxid mennyiségét. Az egyes zacskókban a mért szén-dioxid-tartalom 3% vagy annál nagyobb. KISZERELÉSEK Kat. sz. Leírás 260671 GasPak EZ Standard Incubation Container (15 18 lemez) 260672 GasPak EZ Large Incubation Container (30 33 lemez) 260678 GasPak EZ Anaerobe Container System Sachets (20 tasak/doboz) 260001 GasPak EZ Anaerobe Container System Sachets with Indicator (20 tasak/doboz) 260680 GasPak EZ Campy Container System Sachets (20 tasak/doboz) 260679 GasPak EZ CO 2 Container System Sachets (20 tasak/doboz) 260673 GasPak EZ Standard Incubation Container Rack (15 18 lemez) 260674 GasPak EZ Large Incubation Container Rack (30 33 lemez) 260630 BBL GasPak Tube Holder 271051 BBL GasPak Dry Anaerobic Indicator Strips (100 db/csomag) 260626 BBL GasPak 100 System 260628 BBL GasPak 150 Large Anaerobic System IRODALOMJEGYZÉK 1. Brewer, J.H. and D.L. Allgeier. 1966. Disposable hydrogen generator. Science 147:1033-1034. 2. Brewer, J.H. and D.L. Allgeier. 1966. Safe self-contained carbon dioxide-hydrogen anaerobic system. Appl. Microbiol. 16:848-850. 3
4
Becton, Dickinson and Company 7 Loveton Circle Sparks, Maryland 21152 USA 800-638-8663 BENEX Limited Bay K 1a/d, Shannon Industrial Estate Shannon County Clare, Ireland Tel: 353-61-47-29-20 Fax: 353-61-47-25-46 ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection. BBL, BD, BD Logo, GasPak and Stacker are trademarks of Becton, Dickinson and Company. 2007 BD.