Az endoplazmás retikulum - plazma membrán mikrodomének szerepe az intracelluláris Ca 2+ szignalizáció szabályzásában Maléth József Tudományos munkatárs MTA Orvosi Tudományok Osztálya 2017. 04. 19.
Az endoplazmás retikulum - plazma membrán kapcsolódás és az intracelluláris Ca 2+ szignalizáció GPCR Orai1 Saheki Y et al., Annu Rev Biochem. 2017 Feb 23 Intracelluláris Ca 2+ szignalizáció Lipid transzport és metabolizmus Enzim-szubrát interakciók (pl. Protein tirozin foszfatáz) IP 3 R Ca 2+ ER Store operated Ca 2+ entry (SOCE)
Normalized Current 5 pa/pf First Department of Medicine University of Szeged A SOCE szabályzása Orai1 100 100 IP:SARAF IB: STIM1 Input: STIM1 10mM Ca 2+ 35 0.00 Store depletion -0.25 Input: SARAF 1 min ER -0.50-0.75-1.00 1.5mM EGTA a pipetta oldatban STIM1+Orai1 STIM1+Orai1+SARAF SARAF: SOCE-Associated RegulAtory Factor Jha et al., J Cell Biol, 202, 71-79, 2013
Az Orai1 First fokozza Department of a Medicine Stim1- University SARAF of Szeged interakciót A Stim1-Orai1 interakció a Saraf-Stim1 kapcsolódás feltétele Maleth et al, Nat Commun. 2014 Dec 17;5:5843.
A Stim1 polibázikus K-doménja szükséges a Stim1- Saraf kölcsönhatáshoz, de az Orai1 aktiváláshoz nem 67-96 132-200 344 442 447 530 672-685 EF First Department of Medicine University of Szeged SAM TM CC1 SOAR CTID S/P K Maleth et al, Nat Commun. 2014 Dec 17;5:5843.
A PtdIns(4,5)P 2 szükséges a Stim1-Saraf kölcsönhatáshoz és az Orai1 szabályzásához Varnai P, J Cell Biol. 2006 Nov 6;175(3):377-82. PtdIns(4,5)P 2 : foszfatidilinozitol 4,5- biszfoszfát Maleth et al, Nat Commun. 2014 Dec 17;5:5843.
A Stim1 targetálása különböző plazma membrán mikrodoménekbe Orai1 Kras target szekvencia a PtdIns(4,5)P 2 -ban gazdag mikrodoménbe irányít STIM1-Lyn STIM1-Kras Lyn target szekvencia a PtdIns(4,5)P 2 -ban szegény mikrodoménbe irányít STIM1-CFP STIM1-CFP-Kras STIM1-CFP-Lyn 1 µm Maleth et al, Nat Commun. 2014 Dec 17;5:5843.
A Stim1 mikrodomén lokalizációja meghatározza a Saraf gátló működését Maleth et al, Nat Commun. 2014 Dec 17;5:5843.
A Stim1 transzlokációdik a PM mikrodomének között ER Ca 2+ depléciót követően Maleth et al, Nat Commun. 2014 Dec 17;5:5843.
Összefoglalás PI(4,5)P 2 Orai1 Orai1 Ca 2+ ER
Összefoglalás PI(4,5)P 2 Orai1 Orai1 Ca 2+ ER
Nyitott kérdések folyamatban lévő projektek I. AzER/PM mikrodomének molekuláris összetétele és funkcionális jelentősége molekuláris összetétel vizsgálata (kollaborációban Shmuel Muallem-mel) camp szignalizáció és az ER/PM mikrodomének kapcsolata az ER/PM mikrodomének szerepe a CFTR csatorna működésének szabályozásában II. Az ER/PM mikrodomének élettani szerepének vizsgálata polarizált epitél sejtekben Új modellek kidolgozása organoid kultúrák, in vivo shrna transzfekció III. Az ER/PM mikrodomének kórélettani szerepének vizsgálata polarizált epitél sejtekben
Köszönetnyílvánítás First Department of Medicine University of Szeged Hegyi Péter Pécsi Tudományegyetem - Transzlációs Medicina Intézet MTA-SZTE Lendület Gasztroenterológiai Multidiszciplináris Kutatócsoport Shmuel Muallem National Institute of Health - National Institute of Dental and Craniofacial Research
Köszönetnyílvánítás A munkacsoport tagjai: Madácsy Tamara M.Sc. II. éves Fanczal Júlia Ph.D. hallgató Tóth Emese Ph.D. hallgató Molnár Réka Ph.D. hallgató Görög Marietta Ph.D. hallgató Grassalkovich Anna ÁOK II. évf. Biró Péter ÁOK IV. évf. Rakonczay Zoltán SZTE ÁOK Kórélettani Intézet SZTE ÁOK I. számú Belgyógyászati Klinika Sejtélettani Labor munkatársai Kollaborációk: Németh István SZTE ÁOK Bőrgyógyászati és Allergológiai Klinika Rázga Zsolt SZTE ÁOK Patológiai Intézet Almássy János - Élettani Intézet, Debreceni Egyetem Erdélyi Miklós - SZTE TTIK Mike Gray - University of Newcastle, UK Shmuel Muallem - National Institutes of Health Alexander Kleger - University of Ulm, Germany Calcimedica