Neuropeptid-közvetített neurális, vaszkuláris és immunmechanizmusok komplex vizsgálata Szakmai vezető: Helyes Zsuzsanna

Átírás

1 Neuropeptid-közvetített neurális, vaszkuláris és immunmechanizmusok komplex vizsgálata Szakmai vezető: Helyes Zsuzsanna Szakmai kordinátor: Szőke Éva

2 A kórfolyamatok intenzitásának komplex megítélése (ízületi gyulladás, bőrgyulladás, légúti gyulladás, bélgyulladás modellek; akut és krónikus fájdalom- és migrén-modellek, stb.), új gyógyszerjelölt molekulák hatástani vizsgálata. A projekt célkitűzései A gyulladással, fájdalommal, degeneratív és kóros érszabályozási folyamatokkal járó betegségek kórélettani mechanizmusainak felderítése (E népbetegségek egy részének a kezelésére nincs hatékony terápiás eszköz, vagy a jelenlegi gyógyszerek a súlyos mellékhatások miatt nem jelentenek tartós megoldást.). Ezekben a krónikus betegségekben az ideg-immun interakciók szerepének, az érzőideg-végződésekből felszabaduló peptid szerkezetű jelátvivő molekulák hatásainak feltérképezése, új gyógyszerfejlesztési célpontok azonosítása.

3 A projekt keretén belül zajló feladatok vezetői Helyes Zsuzsanna Szolcsányi János Szőke Éva Reglődi Dóra Pintér Erika Koller Ákos Konzorciális partnereink Borsodi Anikó Magyar Tudományos Akadémia Szegedi Biológiai Kutatóközpont Kiss Tibor Magyar Tudományos Akadémia Balatoni Limnológiai Kutatóintézet

4 1. 2. Funkcionális vizsgálatok izolált érződúc sejteken és receptorokat stabilan kifejező sejtvonalakon Neuropeptid-felszabadulási vizsgálatok izolált szövet- és szervpreparátumokon Szőke Éva Konzorciális partner: Borsodi Anikó, Szegedi Biológiai Kutatóközpont Helyes Zsuzsanna, Reglődi Dóra Receptorexpressziós molekuláris biológia vizsgálatok állatkísérletekből nyert szövetmintákon, valamint emberi biopsziás és műtéti szövetmintákon Morfológiai, biokémiai, immunológiai, és funkcionális vizsgálatok érpreparátumokon, érszabályozási működések analízise komplex modellrendszerekben Neurodegeneratív folyamatok és mechanizmusok komplex vizsgálata, neuropeptidek szerepének tisztázása, potenciális új gyógyszercélpontok keresése Krónikus fájdalom- és migrén mechanizmusainak integratív elemzése, kulcsmediátorok és potenciális, új gyógyszercélpontok azonosítása (emberi vérminták vizsgálata, állatkísérletes modellrendszerek) Érzőideg-végződések és szenzoros neuropeptidek szerepének vizsgálata krónikus tüdő és ízületi gyulladásban: ideg-immun interakciók komplex analízise Neurogén gyulladásos mechanizmusok vizsgálata bőr- és bélgyulladás modellekben (emberi vér- és biopsziás minták, kísérletes modellrendszerek) Helyes Zsuzsanna Koller Ákos Reglődi Dóra, Konzorciális partner: Kiss Tibor, Balatoni Limnológiai Kutatóintézet Helyes Zsuzsanna, Szolcsányi János Helyes Zsuzsanna, Szolcsányi János Pintér Erika

5 1. Funkcionális vizsgálatok izolált érződúc sejteken és receptorokat stabilan kifejező sejtvonalakon Közreműködő partnerek: Horváth Györgyi PhD (Farmakognóziai Intézet) Deli József, MTA doktora (Orvosi Kémiai és Biokémiai Intézet) Bíró Tamás, PhD, DSc (Abiol Kft.) Sándor Zoltán és Tóth Dániel Márton (Richter Gedeon Gyógyszergyár) - Receptorkötődési vizsgálatok - G-proteinhez kötött receptoraktivációs és jelátviteli vizsgálatok - Ioncsatornához kapcsolt receptoraktivációs vizsgálatok (izotópos és fluoreszcens módszerek)

6 2. Neuropeptid-felszabadulási vizsgálatok izolált szövet- és szervpreparátumokon Németh József, PhD, tudományos főmunkatárs (Debreceni Egyetem, ÁOK, Farmakológiai és Farmakoterápiai Intézet). Tajti János, Tuka Bernadett (PhD, egyetemi docens, Szegedi Tudományegyetem, ÁOK, Neurológiai Klinika) David Kendall, professzor, Department of Physiology and Pharmacology, University of Nottingham, UK Eberhart Weihe, professzor, Anatómiai Intézet, Marburgi Egyetem, Németország - Agy, és agyideg-dúc preparátumokon végzett vizsgálatok - Légcső, hörgő és tüdőpreparátumokon végzett vizsgálatok - Bőr-és bélminták vizsgálata - Ízületi folyadék és kötőszöveti minták vizsgálata Közreműködő partnerek:

7 Bíró Tamás (az MTA doktora, Abiol Kft.) Alexandra Berger (Ontario Cancer Institute, University Health Network, Toronto, Canada) 3. Receptorexpressziós molekuláris biológia vizsgálatok állatkísérletekből nyert szövetmintákon, valamint emberi biopsziás és műtéti szövetmintákon - TRP csatornák, szenzoros neuropeptidek és receptoraik fehérjeszinten történő mérése (Western blot) - TRP csatornák, szenzoros neuropeptidek és receptoraik kifejeződésének fehérjeszinten történő vizsgálata szövetmintákon (immunhisztokémia) - TRP csatornák, szenzoros neuropeptidek és receptoraik génexpressziós vizsgálata Közreműködő partnerek:

8 4. Morfológiai, biokémiai, immunológiai, és funkcionális vizsgálatok érpreparátumokon, érszabályozási működések analízise komplex modellrendszerekben -A neuropeptidek, kapszaicin, illetve a TRPV1 csatornák szerepének vizsgálata az intraluminális nyomás és áramlás által kiváltott vasomotor reakciókra TRPV1-KO génhiányos egerekből származó agyi mikroereken és agyi lokális területek véráramlására - A TRPV1 csatornák szerepének vizsgálata vazokonstriktor es vazodilatátor reakciókra - A neuropeptidek, kapszaicin, illetve TRPV csatornák mikrovaszkuláris adaptációban betöltött szerepének vizsgálata -A neuropeptidek, kapszaicin,illetve a TRP csatornák mikrovaszkuláris adaptációban betöltött szerepének vizsgálata, illetve korfüggő eltérések vizsgálata

9 Közreműködő partnerek: Prof. Bernd Nilius, a leuven-i Katolikus Egyetem Molekuláris Sejtbiológia Tanszékének professzora az Ion Csatorna Laboratórium vezetője Prof. Michael S. Wolin, a New York Medical College Valhalla, USA Élettani Intézetének professzora. Prof. Zoltan Ungvari, az Oklahomai Egyetem keretén belül működő Reynolds Oklahoma Center on Aging, öregedést kutató központjának vezető kutatója kapszaicinnel és TRP blokkolókkal előkezelt egerekből és patkányokból származó agyi mikroereken és agyi lokális területek véráramlására.

10 5. Neurodegeneratív folyamatok és mechanizmusok komplex vizsgálata, neuropeptidek szerepének tisztázása, potenciális új gyógyszercélpontok keresése - A PACAP és egyéb rokon neuropeptidek szerepének vizsgálata Parkinson kór modellekben - A PACAP és egyéb rokon neuropeptidek szerepének vizsgálata demenciával járó kórképek modelljeiben - Érkárosodás-okozta idegrendszeri betegségmodellek analízise - Újszülöttkori idegrendszeri károsodás mechanizmusainak vizsgálata

11 Közreműködő partnerek: Seiji Shioda, Department of Anatomy Showa University School of Medicine, Japan Hitoshi Hashimoto, intézetvezető professzor, University of Osaka, Japan Vécsei László, az MTA doktora, az MTA rendes tagja, intézetvezető egyetemi tanár, Szegedi Tudományegyetem, ÁOK, Neurológiai Klinika Tuka Bernadett Szegedi Tudományegyetem, ÁOK, Neurológiai Klinika Tóth Gábor DSc, tanszékvezető egyetemi tanár SZTE Orvosi Vegytani Intézet: PACAP Joel Bockaert, Unité Propre de Recherche, Centre National de la Recherche Scientifique, Montpellier, Franciaország Czeglédi Levente (PhD, egyetemi adjunktus, Debreceni Egyetem, Agrártudományi Kar, Állattenyésztéstudományi Intézet) Markus Heimesaat, Department of Microbiology and Hygiene, Charité University Medicine Berlin, Campus Benjamin Franklin, Berlin, Germany (Markus Heimesaat)

12 6. Krónikus fájdalom- és migrén mechanizmusainak integratív elemzése, kulcsmediátorok és potenciális, új gyógyszercélpontok azonosítása - Migrénben szerepet játszó folyamatok analízise - Komplex regionális Fájdalom Szindróma mechanizmusainak elemzése, neuropeptidek szerepének tisztázása, állatmodellek kifejlesztése - Krónikus neuropátiás fájdalom vizsgálata - Ízületi gyulladás és degeneratív folyamatok okozta fájdalom vizsgálata -Zsigeri fájdalomállapotok analízise

13 Közreműködő partnerek: Gábriel Róbert, az MTA doktora, Szabadfi Krisztina PhD (TTK, Biológiai Intézet) Kéri György (Vichem Kft. DSc, egyetemi tanár, Semmelweis Egyetem, Orvosi Vegytani Intézet, MTA Peptid-Biokémiai Kutatócsoport) Szüts Tamás, Biostatin Kft. Budapest Mátyus Péter (az MTA doktora, intézetvezető egyetemi tanár) Semmelweis Egyetem, Szerves Vegytani Intézet Tajti János (PhD, egyetemi docens), Vécsei László (az MTA rendes tagja, intézetvezető egyetemi tanár) Szegedi Tudományegyetem, ÁOK, Neurológiai Klinika) John Quinn, tanszékvezető professzor, School of Biomedical Sciences, University of Liverpool Andreas Goebel, egyetemi docens, Department of Anaesthesiology, University of Liverpool, UK Alexandra Berger, egyetemi docens, Ontario Cancer Institute, University Health Network, Toronto, Canada Eberhart Weihe, professzor, Anatómiai Intézet, Marburgi Egyetem Keszthelyi Dániel, tudományos munkatárs, Department of Gastroenterology, universiyt of Maastricht

14 7. Érzőideg-végződések és szenzoros neuropeptidek szerepének vizsgálata krónikus tüdő és ízületi gyulladásban: ideg-immun interakciók komplex analízise - Asztmában és krónikus obstruktív tüdőbetegségben szerepet játszó folyamatok analízise - Reumatoid artritisz - Degeneratív ízületi gyulladás Közreműködő partnerek: Jason J. McDougall, tudományos főmunkatárs, University of Halifax, Canada David Kendall, professzor, Department of Physiology and Pharmacology, University of Nottingham, UK Piers Emson, professzor, Laboratory of Molecular Neuroscience, The Babraham Institute, Cambridge, UK Pierangelo Geppetti, intézetvezető professzor, Department of Anaesthesiology and Intensive Care, University of Florence, Olaszország

15 8. Neurogén gyulladásos mechanizmusok vizsgálata bőr- és bélgyulladás modellekben (emberi vér- és biopsziás minták, kísérletes modellrendszerek) - TRP csatornák, szenzoros neuropeptidek, és receptoraik előfordulásának vizsgálata a bélrendszerben, potenciális szerepének tisztázása gyulladásos bélbetegségekben és irritábilis bél szindrómában - TRP csatornák, szenzoros neuropeptidek, és receptoraik analízise pikkelysömörben és allergiás bőrgyulladásokban - TRP csatornák, szenzoros neuropeptidek, és receptoraik kifejeződésének vizsgálata és szerepének tisztázása bél- és bőr gyulladásos megbetegedéseinek komplex modelljeiben

16 Közreműködő partnerek: Pierangelo Geppetti professzor, Department of Anaesthesiology and Intensive Care, University of Florence, Italy Susan Brain, professzor, Centre for Cardiovascular Research, King s College, London Keszthelyi Dániel, tudományos munkatárs, Department of Gastroenterology, universiyt of Maastricht Bíró Tamás, PhD, DSc (Abiol Kft. vagy Debreceni Egyetem, ÁOK, Élettani Intézet) Markus Heimesaat, Department of Microbiology and Hygiene, Charité University Medicine Berlin, Campus Benjamin Franklin, Berlin, Germany (Markus Heimesaat)

17 A projekt megvalósítói Érintett szervezeti egységek: PTE Farmakológiai és Farmakoterápiai Intézet Kórélettani és Gerontológiai Intézet Anatómiai Intézet Konzorciális partnereink Magyar Tudományos Akadémia -Szegedi Biológiai Kutatóközpont -Balatoni Limnológiai Kutatóintézet Farmakológia (Farmakognózia, Kémia, TTK Biológia): Jelenleg: 11 fő Projekt végén összesen: 30 fő Külsős: 6 fő Bevont kutatók száma: Kórélettan: Jelenleg: 6 fő Projekt végén összesen: 12 fő Külsős: 4 fő Anatómia: Jelenleg: 7 fő Projekt végén összesen: 41 fő Külsős: 7 fő

18 További partnereink Biostatin Kft. Abiol Kft. Per-Form Hungária Kft. Auroscience Kft. Nem-peptid szerkezetű szomatosztatin receptorokon ható vegyületek előállítása -Receptoraktivációs vizsgálatok keratinocita, dendritikus sejt és fibrocita sejtkultúrákon -TRP csatornák és a PACAP/PAC1 receptor molekuláris biológiai vizsgálata klinikai és állatkísérletekből származó bőrmintákban A fluoreszcens és lumineszcens képalkotó diagnosztikai módszerek beállítása, standardizálása, validálása Intravitális mikroszkópos módszerek standardizálása, beállítása, értékelése

19 További partnereink Biomedica Hungária Kft. -Gyulladásos citokinek és kemokinek multiplex mérése, fehérjék analízise -Klinikai és állatkísérletekből származó bőrminták molekuláris biológiai analízise Vichem Kft. Ciklikus peptid szerkezetű szomatosztatin analógok szintézise Kemiome Kft. PACAP, peptidfragmensek és nempeptid analógok szintézise

20 További partnereink Vécsei László Tajti János Tuka Bernadett -Elektromos trigeminus dúc-ingerlés patkánymodelljének kivitelezése, vér, likvor és szövetminták preparálása a peptidmérési vizsgálatokhoz -Migrénes betegek vérmintáinak gyűjtése a peptid- és citokinmeghatározásokhoz Németh József Czeglédi Levente Radioimmunassay vizsgálatok kivitelezése bizonyos peptidek esetében (PACAP, VIP) Vér-, anyatej- és szövetminták gyűjtése háziállat-fajoktól, a minták mérésre való előkészítése

21 Szentágothai János Kutatóközpont

22 Célunk a Szentágothai Kutatóközpontban In vivo imaging módszerek bevezetése a módszertani repertoárba, mely mindhárom csoport számára a legmodernebb technikai berendezéseket biztosítja: -mikroct -fluoreszcens molekuláris tomográf -kemi- és biolumineszcens optikai képalkotó berendezés -intravitális mikroszkóp -lézer Doppler imager

23 In vivo imaging laboratórium Skyscan mikroct Fluoreszcens molekuláris tomográf Lumineszcens, fluoreszcens optikai imager Nikon intravitális video mikroszkóp Laser Doppler Imager

24 Köszönjük Prágay-Szabó Orsolya, projektmenedzser Latyák Helga, projekt asszisztens Valkó Kornélia, projekt asszisztens Huba-Varga Nikolett Lampek Kinga, pályázati igazgató