Tiszta vizet a pohárba Vízminőség javítását célzó vízmikrobiológiai és vízkémiai vizsgálatok egy városi ivóvízhálózaton Bálint Boglárka 1, Palatinszky Márton 1, Kéki Zsuzsa 1, Barkács Katalin 2, Márialigeti Károly 1 1 : Eötvös Loránd Tudományegyetem, Mikrobiológiai Tanszék Budapest 2 : Eötvös Loránd Tudományegyetem, Környezettudományi Kooperációs Kutató Központ, Budapest
Prológus Babits Mihály: Kútban Gondoljátok-e, mi van a kútban, kút fenekén és kút közepén: tudnám bár, mit egykor tudtam, elmesélhetném. az emberi szem nem látta nép.
A szegedi víz Mélyfúrású kutakkal táplált városi ivóvízhálózat Napi 35-40.000 m 3 ivóvíz 7 vízműtelep 180-560 m mély kutak 650 km-nyi vízhálózat Átlagosnál kisebb stabilitású ivóvíz!
Célkitűzések Csökkent stabilitás hátterében rejlő okok feltárása Közösségszerkezeti elemzések, baktériumközösségek összehasonlítása
Anyag és módszer Minták Fizikai és kémiai vizsgálatok DNS izolálás PCR Sejtszám meghatározás 16S rdns alapú klónkönyvtár T-RFLP ARDRA Szekvencia analízis Hasonlósági fa szerkesztése EzTaxon
Minták Hőmérséklet (ºC) Oldott O 2 (mg/l) Szulfid (mg/l) 30. Nov 30. Nov 13. Nov 30. Nov IV-02-01 kút 34,20 0,07 2,0 <0,1 IV-02-02 kút 31,40 0,10 <0,1 IV-02-03 kút 29,30 0,10 0,1 Eredmények I. Kémiai és fizikai vizsgálatok IV-04-01 kút 31,20 0,06 <0,1 0,1 IV-04-02 kút 27,50 0,06 <0,1 1,0 IV-04-03 kút 26,50 0,10 0,6 0,9 IV-05-01 kút 32,50 0,15 0,7 <0,1 IV-05-03 kút 30,00 0,10 <0,1 <0,1 IV-05-04 kút 26,80 0,08 1,0 0,1 IV-5A-01 kút 19,00 0,04 <0,1 <0,1 NO 2 -, NO 3 -, SO 4 2-, NH 4 +, Fe 2+, Mn 2+, Cl -, KOIps, Keménység, Vezetőképesség IV-5A-02 kút 21,20 0,02 <0,1 0,1 IV-5A-03 kút 20,70 0,04 0,6 <0,1 IV-06-01 kút 25,90 0,04 <0,1 N/A IV-06-02 kút 23,20 0,06 <0,1 <0,1 IV-06-03 kút 26,70 0,06 1,2 <0,1 Bejövő (belső kutak) 28,10 0,06 <0,1 Bejövő (2-es, 4-es kútcsoport) 28,80 0,15 1,2 Klórozás után 27,20 0,09 0,5 <0,1 Metán, a lehetséges elektrondonor Tározott víz 23,50 0,12 <0,1 <0,1 IV Hálózati betáp 27,00 0,09 <0,1 1,4 HÁL-1 20,30 0,08 <0,1 N/A HÁL-2 24,10 0,08 <0,1 0,5 HÁL-3 16,60 0,12 <0,1 <0,1 HÁL-4 10,50 0,13 <0,1 <0,1 HÁL-5 18,20 0,05 <0,1 3,1 4320 ± 860 ppm HÁL-6 23,30 0,07 0,1 <0,1
Eredmények I. Kémiai és fizikai vizsgálatok A vizsgált ivóvíz anaerob Alacsony nitrát-, nitrit-, ammónia- és szulfidkoncentráció Jelentős mennyiségű metán
Eredmények II. Sejtszámlálás Minta Sejtszámok (sejt/ml) (November 13.) Sejtszámok (sejt/ml) (November 30.) Kutak átlaga 5,17*10 4 2,39*10 4 Tározott víz 8,39*10 5 6,62*10 4 Klórozás után 1,12*10 5 9,61*10 4 Hálózati betáp. 2,82*10 5 9,19*10 4 Hálózati pontok átlaga 2,30*10 5 1,86*10 5
Eredmények III: T-RFLP analízis IV-5A-01 IV-06-02 IV-05-01 IV-05-04 IV-06-03 IV-5A-03 IV-06-01 IV-02-01 IV-04-03 IV-04-02 IV-05-03 IV-5A-02 HÁL-6 HÁL-1 HÁL-2 Tár. víz HÁL-3 HÁL-4 HÁL-5 Klór. U. 13. Nov 30. Nov Hál. Betáp. HÁL-2 Klór. U. HÁL-5 HÁL-1 HÁL-4 HÁL-6 HÁL-3 Tár. víz IV-05-03 IV-06-02 IV-04-03 IV-06-01 IV-05-04 IV-06-03 IV-04-02 IV-02-02 Bejövő(belső) Bejövő(2,4) IV-5A-01 IV-5A-02 IV-5A-03
Eredmények IV. Klónkönyvtár analízis A 16S rdns alapú klónkönyvtár 192 klónnal. ARDRA 17 major csoport Szekvenálás 70 minor klón EzTaxon
% Legközelebbi rokon típustörzs Szekvencia hasolóság Főbb jellemzők 11.24 (Ignavibacterium album Mat9-16) 80.2 Gram, anaerob, termofil 9.07 (Clostridium tepidiprofundi SG508) 74.4 Gram+, anaerob, termofil, elemi ként redukálhat 8.87 Methylomonas scandinavica R5 97.7 Gram, aerob, obligát metanotróf 5.92 Dechloromonas (agitata CKB) 92.7 Gram, fakultatív anaerob, klorát és perklorát redukáló 5.13 (Thermobrachium celere JW/YL-NZ35) 78.1 anaerob, termofil 4.73 (Desulfosarcina cetonica DSM 7267) 83.8 anaerob, szulfát redukáló 4.14 Curvibacter delicatus LMG 4328 98.5 Gram, aerob 4.14 Methylotenera( mobilis JLW8) 95.2 Gram, aerob, obligát metil-amin hasznosító 2.36 Methylobacillus (flagellatus KT) 91.4 obligát metanotróf 1.78 Flavobacterium (cauense R2A-7) 94.9 Gram, kemoorganotróf 1.78 (Thermodesulfobium narugense Na82) 77.5 anaerob, termofil, szulfát redukáló 1.77 (Chondromyces pediculatus Cm p17) 86.8 Gram, aerob, mezofil 1.18 (Anaerolinea thermolimosa IMO-1) 82.5 Gram, obligát anaerob, termofil 1.18 (Corynebacterium efficiens YS-314) 81.2 Gram+, fakultatív anaerob 1.18 (Desulfuromonas acetexigens DSM1397) 80.7 anaerob, szulfát redukáló 1.18 (Pelobacter venetianus DSM 2394) 76.5 Gram, anaerob 1.18 Pseudorhodoferax soli TBEA3 98.5 Gram, Comamonadaceae rokon 1.18 (Streptacidiphilus rugosus AM-16) 78.7 Gram+, aerob, acidofil 1.18 (Thermanaeromonas toyohensis ToBE) 80.5 Gram+, anaerob, termofil, tioszulfát redukáló 1.18 (Thermohalobacter berrensis CTT3) 76.6 Gram, anaerob, termofil, Clostridiales rokon
% Legközelebbi rokon típustörzs Szekvencia hasolóság Főbb jellemzők 0.59 (Acidicaldus organivorans Y008(T)) 79.0 Gram, kén-oxidáló, ferri vas-redukáló, termofil, acidofil 0.59 Actinotalea fermentans DSM 3133 96.6 Gram+, fakultatív anaerob, mezofil 0.59 (Caldanaerobacter subterraneus subsp. tengcongensismb4) 73.5 Gram, obligát anaerob, termofil 0.59 (Candidatus Accumulibacter phosphatis) 89.5 Polifoszfát akkumuláló, nem tenyészthető genusz 0.59 (Desulfofaba fastidiosa DSM 15249) 84.8 szulfát redukáló, mezofil 0.59 (Desulfofaba gelida PSv2)9 85.2 szulfát redukáló, pszichrofil 0.59 (Desulfonema magnum DSM 2077) 84.6 Gram, obligát anaerob, szulfát redukáló 0.59 (Desulfovibrio alkalitolerans DSM 16529) 80.9 Gram, obligát anaerob, szulfát redukáló, alkálitoleráns 0.59 (Flavobacterium subsaxonicum WB 4.1-42) 84.6 Gram, kemoorganotróf 0.59 (Fodinicola feengrottensis HKI 0501) 77.0 Gram+ 0.59 (Helicobacter brantae MIT 04-9366) 79.0 Gram, mikroaerofil, termofil 0.59 (Legionella oakridgensis Oak Ridge 10) 82.6 Gram, aerob 0.59 Limnohabitans (curvus MWH-C5) 94.3 Gram, kemoorganotróf, aerob/ fakultatív anaerob 0.59 (Melittangium alboraceum Me b7) 77.5 Gram, 0.59 Methylocystis hirsuta CSC1 97.9 Gram, aerob, metanotróf 0.59 (Pelobacter acetylenicus WoAcy1 DSM2348) 85.4 Gram, obligát anaerob, mezofil 0.59 (Rhodobacter vinaykumarii JA123) 78.5 Gram, mezofil, fakultatív anaerob 0.59 (Rhodococcus aetherivorans 10bc312) 76.5 Gram+, aerob 0.59 (Salinimicrobium xinjiangense BH206) 84.2 Gram, fakultatív aerob, mérsékelten halofil 0.59 (Saxeibacter lacteus DLS-10) 75.2 Gram+, aerob, mezofil 0.59 Variovorax paradoxus IAM 12373 99.5 Gram, aerob, metanotróf közösség tagjaként is leírták 0.59 (Wandonia haliotis Haldis-1) 82.7 Gram, obligát anaerob, mezofil
Eredmények IV. Klónkönyvtár analízis Anaerob, termofil, metano- és metilotróf szervezetek nagy aránya Klórozott vegyületeket hasznosítók jelenléte (Dechloromonas sp.) Sok esetben alacsony szekvencia hasonlóság
Eredmények V. T-RFLP mintázatok összevetése a klónkönyvtár elemzés eredményeivel HÁL-6 34,28 19,50 2,59 17,04 21,10 1,60 1,08 A legközelebbi típustörzs genusza (Clostridium) (Desulfosarcina) Methylobacillus Methylobacillus Dechloromonas Curvibacter Methylotenera Methylomonas Methylomonas (Desulfuromonas) (Thermodesulfobium) (Thermohalobacter) (Ignavibacterium) (Thermanaeromonas) Szekvencia hasonlóság 80,7% 77,5% 74,4% 83,8% 76,6% 91,4% 90,8% 91,7% 94,2% 95,2% 94,3% 97,7% 80,0% 80,5% IV-02-01 2,08 3,30 IV-02-02 3,36 IV-04-02 0,50 3,22 13,54 3,94 2,98 4,76 3,07 IV-04-03 17,29 1,37 0,95 20,37 9,57 2,28 IV-05-01 44,39 54,44 IV-05-03 1,86 2,01 1,09 6,36 1,20 8,17 30,16 1,23 IV-05-04 1,67 1,49 14,08 14,96 24,79 39,69 13,04 10,29 IV-06-01 2,20 0,42 2,40 1,80 1,76 1,79 4,46 0,79 0,50 IV-06-02 0,20 0,19 13,62 25,87 1,08 1,54 IV-06-03 48,35 31,72 3,50 4,43 4,52 IV-5A-01 2,44 36,10 17,14 0,49 1,58 IV-5A-02 1,40 18,75 1,51 1,55 1,89 0,71 0,86 6,54 15,91 19,88 1,00 IV-5A-03 0,42 10,34 4,57 19,49 31,95 4,70 Klórozás után 17,66 16,37 18,98 18,18 Tározott víz 6,56 18,77 32,80 HÁL-1 33,32 34,25 16,85 19,85 11,39 3,25 1,40 HÁL-2 8,36 15,11 14,36 23,85 1,16 2,34 0,41 HÁL-3 21,54 27,59 8,89 HÁL-4 9,70 25,96 20,70 20,70 2,17 0,40 1,87 HÁL-5 4,51 22,19 14,25 2,52
Összefoglalás Instabilitás vélhető oka: Aerálódás Metán hasznosítók elszaporodása Kemoorgano-heterotrófok biomasszája Átfedő, de mégis jellegzetesen elkülönülő közösségösszetétel a kutak és a hálózat vizében Metano- és metilotrófok, anaerob és termofil szervezetek dominanciája
Epilógus Fehérgyarmat - 2010. július 13.
Köszönetnyílvánítás Palatinszky Márton Kéki Zsuzsi dr. M. Tóth Erika dr. Barkács Katalin Dr. Márialigeti Károly Szelepcsényi Zsolt
Köszönöm a megtisztelő figyelmet!