KÖRNYEZETTOXIKOLÓGIA

Átírás

1 Budapesti Műszaki és Gazdaságtudományi Egyetem Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszertudományi Tanszék KÖRNYEZETTOXIKOLÓGIA Egy fajt alkalmazó tesztek Vízi tesztorganizmusok, tesztek Fekete-Kertész Ildikó, Molnár Mónika, Kunglné Nagy Zsuzsanna

2 TEMATIKA Egy fajt alkalmazó laboratóriumi tesztek Vízi ökoszisztéma tesztelése Algateszt Állati egysejtűt alkalmazó teszt Békalencse teszt Kagylósrák teszt Daphnia teszt Tócsarák teszt Hal teszt Békaembrió teratogenitás vizsgálata (FETAX) Árvaszúnyoglárva teljes életciklus (FLC) teszt

3 Vízi tesztek jellemzői Vízi ökoszisztéma tesztelése szárazföldi ökoszisztéma tesztelése Környezeti elem expozíciós útvonal Vízi tesztek esetén expozíció egész test Sok, elterjedt szabvány módszer Széles körben alkalmazott tesztorganizmusok Mérési végpont Teszt vizsgálati végpontja

4 Algatesztek Az algák használata a vízi rendszerek ökotoxikológiai vizsgálatára általánosan elterjedt. Az alga növekedési teszt a toxikus vegyi anyagoknak az elsődleges termelők anyagcsere-folyamataira gyakorolt gátló hatását vizsgálja. Édesvízi és tengeri algákat használhatunk tesztorganizmusként. Az ASTM (American Society for Testing and Materials) ajánlásai: Édesvízi algák Zöld algák: Selenastrum capricornutum, Scenedesmus subspicatus, Chlorella vulgaris Kék algák (cianobaktériumok): Microcystus aeruginosa, Anabena flos-aquae Kovamoszatok: Navicula pelliculosa Tengeri algák Kovamoszatok: Skeltonema costatum, Thalassiosira pseudonana Ostoros moszatok: Dunaliella tertolecta

5 Algatesztek édesvízi algák az ökotoxikológiában (Calow, 1993) Vizsgált vegyület Tesztorganizmus A teszt időtartama Tiszta vegyületek Selenastrum capricornutum 5 nap Microcystis aeruginosa Navicula seminulum Növényvédőszerek Selenastrum capricornutum 5 nap Anabaena flos-aquae Navicula seminulum Vízoldható vegyületek Selenastrum capricornutum 3 nap Scenedesmus subspicatus Chlorella vulgaris Tiszta vegyületek keveréke Selenastrum capricornutum Scenedesmus quadricauda 4 nap Humán és állati gyógyszerek Chlorella vulgaris Selenastrum capricornutum Microcystis aeruginosa 14 nap

6 Édesvízi algák az ökotoxikológiában Chlorella vulgaris mikroszkópos képe (BME-ABÉT) Pseudokirchneriella subcapitata mikroszkópos képe (BME-ABÉT) Scenedesmus subspicatus mikroszkópos képe (BME-ABÉT)

7 Algateszt kivitelezés A tesztet 2-5 x 10 4 db sejt / tesztoldat koncentrációjú algaszuszpenzióval indítjuk. Inokulum készítése (adaptálódás) 2-3 nappal a teszt indítása előtt. A teszt kivitelezése Erlenmeyer-lombikban (rázatott, nem rázatott) A teszt időtartama 96 óra, két ismétlés legalább szükséges. Az optimális átlagos hőmérséklet 24 o C az édesvízi fajoknál, 20 o C a tengerieknél. A megvilágítás hideg fehér fénnyel, 10:14 órás sötét:világos ciklussal, a fényintenzitás állandó legyen. A ph fajfüggő: 7,5-8,0 között változhat. A mérési végpont lehet a sejttömeg, a sejtszám vagy a klorofill tartalom.

8 Algateszt a teszt jellemzői Teszt típusa: Egy fajt alkalmazó, laboratóriumi, akut toxicitási teszt Tipikus alkalmazási területe: Vízben oldható vegyi anyagok; felszíni vizek, talajvizek, szennyvizek toxikológiai vizsgálata. Tesztorganizmus: egysejtű, édesvízi vagy tengeri algafajok Teszt végpontja: szaporodásgátlás Szükséges műszer: mikroszkóp vagy fotométer A teszt időtartalma: h (vagy hosszabb) A teszt során felhasznált tenyészet kora: A sejtszaporodás logaritmikus fázisában lévő tenyészet (kb. 6-8 napos) A teszt szabványosított formája: MSZ :1986 Veszélyes hulladékok vizsgálata. Algateszt (metanolos klorofill extrakció) MSZ :1989 Veszélyes hulladékok vizsgálata. A mérgezőképesség meghatározása algatenyészettel MSZ EN ISO 8692:2005 Vízminőség. Édesvízi alga növekedésgátlási tesztje egysejtű zöldalgafajokkal ISO 8692:2004 Water quality - Freshwater algal growth inhibition test with unicellular green algae OECD 201 Alga, Growth Inhibition Test (extrakció nélkül)

9 Állati egysejtű Tetrahymena pyriformis Vízben élő állati egysejtű Protozoák országán belül, a csillós egysejtűek (Ciliopora) törzsébe tartozik. Mérete µm között változik, nevét körteszerű alakjáról, ill. a sejtszáj négy mozgó, hártyaszerű képletéről kapta. Külső felületén sűrű, hajszerű bevonatot képeznek a csillók. Kutatások kedvelt tesztorganizmusa könnyű fenntarthatósága, gyors szaporodása miatt, de főként azért, mert sejtje sokban hasonlít a fejlettebb gerincesek sejtjeihez (sejtmembrán összetétele, kulcsenzimek, inzulin és adrenalin termelés).

10 Tetrahymena pyriformis teszt kivitelezés Tesztközeg összeállítása: 100 ml-es lombikokba ml T-P tápoldatot 468 μl antibiotikum mix oldatot a sejtszuszpenzióból 600 μl-t pipettázunk és bemérjük a mintát. Sejtszámlálás és mintavétel a tesztoldatból: körülbelül 24 óránként számoljuk meg a sejteket fénymikroszkóp segítségével minden mintavételnél 0,5 ml-t veszünk ki a felkevert sejtszuszpenzióból 20 μl 1 %-os formaldehid oldatot adunk hozzá majd egy 2 μl-es csepp sejtszámát Bürker-kamrában fénymikroszkóp segítségével 100 vagy 400-szoros nagyításban megszámoljuk. A mérési végpont: sejtszám/ml

11 Tetrahymena pyriformis teszt jellemzői Teszt típusa: Egy fajt alkalmazó, akut, laboratóriumi teszt Alkalmas: Vízben oldható vegyi anyagok; felszíni vizek, talajvizek, szennyvizek toxikológiai vizsgálata Tesztorganizmus: Tetrahymena pyriformis, állati egysejtű A tesztorganizmus kora: 6 napos Teszt végpontja: szaporodásgátlás Szükséges berendezés, eszköz: fénymikroszkóp, Bürker-kamra Tesztelés időtartalma: 96 h A teszt szabványosított formája: nincsen

12 Békalencse A békalencsék a víz felszínén úszó egyszikű, lágyszárú vízinövények. Nagyon elterjedt, gyorsan szaporodó évelők. Méretük 2 12 mm lehet. Virágaik egyivarúak. Ritkán virágoznak, általában testük sarjadzásával szaporodnak. A békalencsék szaporodási sebessége eltérő, a Lemna nemzetség duplázódási ideje laboratóriumi körülmények között 0,35 2,8 nap. Az apró békalencse tömeges megjelenése eutrofizációt jelez. Lemna minor, Lemna gibba

13 Békalencse teszt kivitelezés Tesztoldatok: 150 ml-es főzőpoharakba a hígítási sor minden tagjából kiveszünk 1 1 ml-t és a békalencsék fenntartásához használt tápoldattal kiegészítjük 125 ml-re. Kontroll minták A tesztoldatok tetejére darab kétlevelű, sérülésmentes zöld színű békalencsét helyezünk. Az összeállított mérőoldatokat C-os termosztátban inkubáljuk 7 napig megvilágítás mellett (10:14 órás sötét:világos ciklus, Daylite, lux). A tesztelési idő alatt minden nap ugyanabban az időpontban megszámoljuk a békalencsék leveleinek számát. 7 nap elteltével 96%-os etanolba tesszük a leveleket és extraháljuk a klorofill-tartalmat. Mérés végpontja: levélkeszám, ép, zöld levélrészek területe, klorofill tartalom

14 Békalencse teszt jellemzői Teszt típusa: Egy fajt alkalmazó, laboratóriumi, növényi teszt Alkalmas: Vízben oldható vegyi anyagok; felszíni vizek, talajvizek, szennyvizek toxikológiai vizsgálata. Tesztorganizmus: Lemna minor, Lemna gibba Teszt végpontja: szaporodásgátlás Tesztelés időtartalma: 7 nap A teszt szabványosított formája: MSZ EN ISO 20079:2006 Vízminőség. A víz alkotóelemei és a szennyvíz békalencsére (Lemna minor) gyakorolt toxikus hatásának meghatározása. A békalencse-növekedés gátlásának vizsgálata (ISO 20079:2005) ISO 20079:2005 ISO Water quality -- Determination of the toxic effect of water constituents and waste water on duckweed (Lemna minor) - Duckweed growth inhibition test OECD :2002 Lemna species Growth inhibition test

15 Kagylósrák A kagylósrákok (Ostracoda) osztályába tartozó állatok legjellemzőbb tulajdonsága a kettős teknő, melybe a lágytest visszahúzódhat. Az állat testét meszes héj fedi, melyet egy rugalmas sarokpánt nyit és egy haránt izomnyaláb zár.. Amikor kinőtték a héjat, levedlik azt és újat növesztenek. Mérete: 0,1 32 mm között változik. A héj hasítékából kinyúlik 7 pár láb. Váltivarúak. Szaporodhatnak mind megtermékenyített, mind szűz peték révén. Kagylósrákok élhetnek édes- és tengervízben is. Fenéklakó állat, az iszapot túrja. Üledéklakó állat révén ideális vízi tesztorganizmus üledék toxicitásának tesztelésére.

16 Kagylósrák teszt kivitelezés A mérőedényekbe bemérünk ml-t a tesztelni kívánt mintákból ezekbe átemelünk darab tesztorganizmust. A mérés során 3 párhuzamossal dolgozunk. A mérőedényeket lefedjük és 21,5±1 C -os termosztátban inkubáljuk 3 napig 10:14 órás sötét:világos ciklusú megvilágítás mellett. 24 óránként megszámoljuk az életben maradt állatokat. 24 óránként videó kamera és mozgáskövetés kiértékelésére alkalmas szoftver segítségével mérjük az egyedek mozgási paramétereit. Mérés végpontja: A mozgó állatok száma valamint újabb, még kidolgozás alatt álló mérési végpontok: megtett összes út, átlagsebesség.

17 Kagylósrák teszt jellemzői Teszt típusa: Egy fajt alkalmazó, laboratóriumi, állati teszt Tipikus alkalmazási területe: Szerves és szervetlen vegyületekkel szennyezett édesvízi üledékek és talajok toxikológiai vizsgálata Tesztorganizmus neve: Heterocypris incongruens Teszt végpontja: mozgásképesség gátlása Tesztelés időtartalma: 3 nap A teszt szabványosított formája: ISO 14371:2012 Water quality -- Determination of fresh water sediment toxicity to Heterocypris incongruens (Crustacea, Ostracoda)

18 Daphnia Forrás: parasitismdaphnia/ch2f1.htm A Daphnia, a vízibolha az egyik legelterjedtebb vízi tesztorganizmus. Két faja népszerű, mint ökotoxikológiai tesztorganizmus: a Daphnia magna és a Daphnia pulex. A Daphnia magna akár 5 mm-re is megnőhet, míg a D. pulex és C. dubia maximális mérete 2 3 mm. A Daphniák baktériumokat és élesztőt is esznek. Vízminőség fontos faktor.

19 Daphnia A Daphniák szűznemzéssel szaporodnak, egy nőstény általában egyszerre 4 10 ivadéknak ad életet (ez időszak alatt a kikelt lárvák is nőstények). Az embriók fejlődése az anyaállat testében akár mikroszkóp nélkül is megfigyelhető. A fiatal nőstények négy napos koruktól már minden harmadik napon tovább szaporodnak 40 napos életükben. Daphnia embrió fejlődése Daphnia születése Forrás: /publications/parasitismdaphnia/ch2f1.htm

20 Daphnia, akut teszt 10 db 24 órásnál nem idősebb újszülött. Az állatkákat 100 ml tesztoldatot tartalmazó 125 ml-es edénybe helyezzük. A tesztelendő vegyi anyag 5 különböző koncentrációját vizsgáljuk + a negatív kontroll és a referenciaanyag. (3 ismétlés ) Végpontként a mozgásképtelenséget illetve mozdulatlanságot használjuk. A mérést 24 óra és 48 óra elteltével végezzük. Az akut teszt során nem etetjük az állatokat. Optimális hőmérséklet 20 o C, a megvilágító fény intenzitása lux közötti érték lehet, 14 órás megvilágítást 10 óra sötétség követ. A ph: 7,0-8,6 között változhat, az oldott oxigén koncentrációja %. A 48 órás akut teszt jól alkalmazható tiszta vegyi anyagok veszélyességének felmérésére, vegyi anyagok keverékeire, szennyvizekre és más elfolyó vizekre, veszélyes hulladékokra.

21 Daphnia, krónikus teszt A 21 napos krónikus teszt: az állatok túlélésén kívül növekedésüket és szaporodásukat is vizsgálhatjuk. Az állatok etetéséről gondoskodni kell. Szakaszos vagy folytonos. A szakaszos kísérletet rendszeresen frissíteni kell. A folyamatos átfolyást biztosító kamra előnye, hogy hígítással állandó összetételű és minőségű közeget produkál, nem kell frissíteni. A krónikus teszt szintén 10 állatot alkalmaz, minimum 2 ismétlésben, 100 ml-es edényben 80 ml tesztoldattal, 21 napon keresztül. A végpontok a túlélés, a növekedés és a szaporodás.

22 Daphnia teszt jellemzői Teszt típusa: Egy fajt alkalmazó, akut v. krónikus toxicitási teszt Tipikus alkalmazási területe: Vízben oldható vegyi anyagok; felszíni vizek, talajvizek, szennyvizek toxikológiai vizsgálata Tesztorganizmus neve: Daphnia magna, Daphnia pulex és Ceridodaphnia dubia Teszt végpontja: Immobilizáció, túlélés, növekedés, szaporodás A teszt időtartalma: 6 96 h A teszt során felhasznált tenyészet kora: 24 órás A teszt szabványosított formája: MSZ :1993 Települési szilárd hulladékok vizsgálata. Daphniateszt MSZ :1985 Veszélyes hulladékok vizsgálata. Daphniateszt MSZ EN ISO 6341:1998 Vízminőség. A mobilitásgátlás meghatározása Daphnia magna Strauson (Cladocera, Crustacea). Akut toxicitási teszt (ISO 6341:1996) MSZ ISO 10706:2002 Vízminőség. Anyagok hosszú távú mérgező hatásának meghatározása Daphnia magna Strauson (Cladocera, Crustacea) OECD 202 Daphnia species, acute Immobilisation Test, Part I the 24 h EC 50 acute immobilisation test, Part II the reproduction test (at least 14 days)

23 Daphnia, szívritmus mérése Szívritmus mérése: új mérési végpont Érzékenyítés Kutatási eredmények: koffein BME ABÉT tesztek koffein, nikotin, triklozán, BPA, diklofenák, paracetamol Daphnia szívritmus mérése elated

24 Tócsarák content/content.php?content.8 A tócsarák egy fajta édesvízi rák, időszakos vizekben megtalálható élőlény. Hasi oldalukat felfelé tartva úsznak a 11 pár lábukkal. Két szemük és két típusú antennával rendelkezik. Az egyik típus a feje búbján, a másik a szája mellett található. A hím egyedeknek hosszabb az antennájuk, mint a nőneműeknek. A méretük 2,5-5 cm között változik, és körülbelül 3-4 hónapot élnek a jó körülmények között. Thamnocephalus platyurus:

25 Tócsarák teszt jellemzői Teszt típusa: Egy fajt alkalmazó, laboratóriumi, állati teszt Tipikus alkalmazási területe: Vízben oldható vegyi anyagok; felszíni vizek, talajvizek, szennyvizek toxikológiai vizsgálata. Tesztorganizmus neve: Thamnocephalus platyurus 24 h-s lárva Teszt végpontja: halálozás Tesztelés időtartalma: 24 h A teszt szabványosított formája: MSZ 20359: 2003 Környezetvédelmi ökotoxicitásvizsgálatok Thamnocephalus platyurus-szal ISO 14380:2011 Water quality -- Determination of the acute toxicity to Thamnocephalus platyurus (Crustacea, Anostraca)

26 Haltesztek 1. Kiterjedten használják vízi ökoszisztémák érzékenységének jellemzésére, a vízi ökoszisztémát veszélyeztető vegyi anyagok hatásának vizsgálatára. Általánosan elterjedt a peszticidek és más ipari és mezőgazdasági vegyi anyagok hatásának mérésére, valamint szennyvizek, elfolyók és veszélyes hulladékok vizsgálatára. A legnépszerűbb édesvízi teszthalak a Pimephales promelas, a Lepomis macrochirus, az Ictalarus punctatus és az Oncorhynchus mykiss. Guppi: Poecilia reticulata Zebradánió: Brachidanio rerio

27 Haltesztek 2. A tesztállatok: korban és méretben azonos egyedek. Fiatal állatok, melyek tömege fajtól függően 0,1-5,0 g lehet. A leghosszabb hal hosszmérete ne legyen nagyobb, mint a legrövidebb kétszerese. A tesztedény méretaránya adott. A tesztoldat legalább 150 mm mély legyen a 0,5 g-nál nagyobb tömegű halak számára, és legalább 50 mm mély a 0,5 g alattiak esetében. A teszt időtartama statikus teszt esetén 96 óra, hosszabb idejű teszteknél legalább 96 óránként frissítésre van szükség, vagy átfolyásos megoldásra. A víz hőmérséklete fajtól függően 12 o C-tól (O. mykiss) 25 o C-ig (P. promelas) változhat. A víz ph-ja a vízkeménységtől és a fajok igényétől függően 6,5 és 8,5 között változhat. A megvilágítás: a 16 órás megvilágítást perc átmenettel 8 órás sötétség kövesse. Az oldott oxigén koncentráció % között változhat. Végpontként a pusztulás vagy a mozgásképtelenség mérhető.

28 Teratogenitás vizsgálata békaembrióval (FETAX) A teratogenitási tesztek: az utódokban jelentkező fejlődési rendellenességeket vizsgálják, amely megmutatkozhat az embrió pusztulásában, gátolt növekedésében és fejlődésében, valamint fenotípusban is jelentkező fejlődési rendellenességekben. Az embriók érzékenyebbek, mint a kifejlett egyed. A természet általában többszörös védelemmel látja el az embriókat, de a békaembriók a szabadban fejlődnek. A Xenopus laevis békafaj az emberre is extrapolálható eredményt ad. Jól ismert kísérleti állatfaj, széles körben használják genetikai és fejlődésgenetikai vizsgálatokhoz. Laboratóriumi körülmények között jól tenyészthető és fenntartható, egyszerre sok utódot hoz létre, így a kísérletekhez és mérésekhez megfelelő számú egyed áll rendelkezésünkre.

29 Teratogenitás vizsgálata békaembrióval (FETAX) A FETAX - gyorsteszt. Segítségével veszélyes hulladékok valamint tiszta és keverék vegyi anyagok teratogén Mindez hatása a tesztelhető. metanotróf baktériumban: Ökotoxicitás pontos előrejelzésére is alkalmas, hiszen a gyanúsított anyagok már sokkal kisebb koncentrációban hatnak a békaembriókra, mint a felnőtt, kifejlett egyedekre. A FETAX módszert a teratogenitás szűrésére és kizárására lehet a legjobban használni, negatív eredmény esetén. ov/docs/fetax2000/feta X.jpg

30 Teratogenitás vizsgálata békaembrióval (FETAX) kivitelezés Minimum 2 éves felnőtt hímekre és 3 éves nőstényekre van szükség. A felnőtt hím 7,5-10 cm hosszú, a nőstény cm hosszú. A tesztedény egy nagyméretű akvárium a tenyésztésre szánt felnőttek számára, Mindez legalább a metanotróf 30 cm baktériumban: magas, liter térfogatú, buborékoltató levegőztetéssel. Egy 40x40 cm-es akváriumban 4-6 egyed élhet. Az embriókat Petri-csészében tartjuk és a tesztelést is abban végezzük. 10 ml tesztelegyben 25 embriót helyezünk a vizsgálathoz. Az embriók a tesztelendő vegyi anyagnak állandóan, végig a teszt alatt ki vannak téve. A tesztelendő anyagot naponta ismételten alkalmazzuk. A teszt időtartama 96 óra. A koncentrációk száma 5, az ismétléseké legalább 2. A tesztközeg hőmérséklete a felnőtteknél átlagosan 23 o C, az embrióknál 24 O C. 12 órás megvilágítást 12 órás sötétség követ. A végpont az akut tesztnél a pusztulás, a szubakut vizsgálatnál a teratogenitás.

31 Teratogenitás vizsgálata békaembrióval (FETAX) alkalmazások Ammónium-perklorát hatása (Oklahoma State University, 2008) Időtartam: 4 nap Mindez a metanotróf baktériumban: Végpont: növekedés, fejlődési rendellenességek 1 mg/l fejlődési rendellenesség 2000 mg/l 50 % reproduktivitás csökkenés Areas/Environmental- Restoration/Risk-Assessment/ER- 1236

32 Árvaszúnyoglárva Árvaszúnyog lárva C. riparius hím imágó Chironomus riparius Az árvaszúnyogok (Chironomidae) közeli rokonai a szúnyogoknak. Hosszúlábú állatok, magaspúpú, csuklyaalakúan előrenyúlt torrészlettel és karcsú lábakkal. A rovarok osztályán belül található Chironomidae családban található a legtöbb és ökológiai szempontból legfontosabb faj. A világszerte elterjedt árvaszúnyog a vízi táplálékláncban kiemelkedő szerepet játszik, mivel számos gerinces és gerinctelen állatnak fontos táplálékforrásként szolgál.

33 Árvaszúnyoglárva teljes életciklus teszt Az árvaszúnyogok életszakaszai Az árvaszúnyog teszt előnye, hogy a tesztorganizmusok könnyen kezelhetők és fenntarthatók, viszonylag rövid életciklussal (3-4 hét) rendelkeznek, ivaros szaporodásuk miatt vegyületek endokrin rendszer károsító hatása vizsgálható. A gerinctelen állatok közül a rovarok endokrin rendszere ismert a legjobban, a két nem egyedei könnyen megkülönböztethetők egymástól. Az FLC teszt robosztus, populáció-releváns végpontokat állít fel, amik használhatók a mezőgazdaságban alkalmazott vegyszerek kockázatfelmérése során.

34 Árvaszúnyoglárva teljes életciklus (FLC) teszt Különböző expozíciós útvonalak vizsgálhatók; mind a szennyezett vizek, mind a szennyezett üledékek tesztorganizmusokra gyakorolt hosszútávú hatása tanulmányozható. Az FLC teszt nem ér véget az imágó bábból való kikelésével, hanem azok (szülői generáció, P) összegyűjtése és tenyész-ketrecbe engedése után a következő utód generáció (F1) egyedei révén vizsgálja a szaporodási képességet, a termékenységet. Azokat a tojásokat, amikből a későbbi utód generáció alakul ki ugyanolyan szennyezett víz-üledék rendszerben tartják fejlődésük során, mint a szülői generációt. Két generációt ölel föl (P és F1), az alábbi plusz információkat szolgáltatva ezzel: másodgenerációs végpontok (az akkumuláció, továbbörökített hatások, stb eredményeként érzékenyebb generáció) reprodukciós képesség, termékenység felmérése.

35 Microbiotesztek Környezeti minták ökotoxicitásának vizsgálata: törzstenyészet fenntartása. Nehézkes és időigényes feladat: az állománynak ugyanis ellenőrzött és állandó érzékenységűnek kell lennie. A tenyészet fenntartása kiküszöbölhető tartósított tesztszervezetek felhasználásával, ún. mikrobiotesztek alkalmazásával. A Ghenti Egyetemen a LABRAP (Laboratory for Biological Research in Aquatic Pollution) kifejlesztett toxkitek. A tesztek közös jellemvonása, hogy a tesztszervezeteket immobilizált vagy alvó formában lehet tárolni, életképességüket fél-egy évig megőrzik, tesztszervezettől függően. Ezeket meghatározott körülmények közé helyezve kikeltethetők, a teszt gyorsan, alacsony költség- és időráfordítással elvégezhető.

36 Microbiotesztek példák ALGAL TOXKIT F: de%20show.pdf DAPHTOXKIT F MAGNA: na%20slide%20show.pdf OSTRACODTOXKIT F: lide%20show.pdf THAMNOTOXKIT F: ide%20show.pdf

37 OECD tesztek OECD guidelines for testing chemicals Organization for Economic Cooperation and Development (OECD) : Guidelines for the Testing of Chemicals 7_ _1_1_1_1,00.html Vegyi anyagok hatásának tesztelése REACH rendelet

38 OECD tesztek, irányelvek A REACH rendelet értelmében alkalmazandó ökotoxicitási tesztek: a BIZOTTSÁG 440/2008/EK RENDELETE (2008. május 30.) a vegyi anyagok regisztrálásáról, értékeléséről, engedélyezéséről és korlátozásáról (REACH) szóló 1907/2006/EK európai parlamenti és a tanácsi rendelet értelmében alkalmazandó módszerek: C.1. Akut toxicitás hal esetében C.2. Daphnia-fajok akut immobilizációs vizsgálata C.3. Alganövekedés-gátlási vizsgálat C.4. A gyors biológiai lebonthatóság meghatározása II. Rész. DOC (oldott szerves szén) csökkenésének vizsgálata (C.4-a. Módszer) III. Rész. Módosított OECD-vizsgálat (DOC-csökkenés) (C.4-b. Módszer) IV. Rész. CO 2 -fejlődés-vizsgálat (C.4-c. Módszer) V. Rész. Manometrikus respirometriás mérés (C.4-d. Módszer) VI. Rész. Zártpalack-módszer (C.4-e. Módszer) VII. Rész. MITI-vizsgálat (C.4-f. Módszer) C.5. Lebomlás biokémiai oxigénigény C.6. Lebomlás kémiai oxigénigény C.7. Lebomlás abiotikus lebomlás: hidrolízis a ph függvényében

39 OECD tesztek, irányelvek 2. C.8. Toxicitás földigilisztákra C.9. Biológiai lebomlás Zahn Wellens vizsgálat C.10. Biológiai lebomlás eleveniszap-szimulációs vizsgálat C.11. Biológiai lebomlás eleveniszap-légzésgátlási vizsgálat C.12. Biológiai lebomlás módosított SCAS-vizsgálat C.13. Biokoncentráció vizsgálata: átfolyásos hal vizsgálat C.14. Halivadékok növekedési vizsgálata C.15. Rövid távú toxicitási vizsgálat halembriókkal és hallárvákkal C.16. Háziméh akut orális toxicitás-vizsgálat C.17. Háziméh akut kontakt toxicitás-vizsgálat C.18. Kémiai anyagok talajon történő adszorpciójának vizsgálata egyensúlyi rendszerben C.19. Adszorpciós együttható becslése talajon és szennyvíziszapon nagyhatékonyságú folyadékkromatográfiával (HPLC) C.20. Daphnia magnán végzett reprodukciós vizsgálat C.21. Talajlakó mikroorganizmusok: nitrogén-átalakítási vizsgálat C.22. Talajlakó mikroorganizmusok: szénátalakítási vizsgálat C.23. Aerob és anaerob átalakítás a talajban C.24. Aerob és anaerob átalakítás vízi üledékrendszerekben

40 Referenciák Gruiz Katalin, Horváth Beáta, Molnár Mónika: Környezettoxikológia, Műegyetemi Kiadó, Képtár és E-tanfolyam gyakorlati alkalmazás, talaj és felszín alatti víz, biológiai-ökológiai és környezettoxikológiai felmérés/monitoring Adatbázisok biológiai, ökotoxikológiai felmérési és monitoring módszerek

41 KÖSZÖNÖM A FIGYELMET! Kérdések?