Analitikai vizsgálatok a méhpusztulások okának feltárása érdekében Szemánné Dobrik Henriett NÉBIH NTAI Miskolci Növényvédőszermaradék-analitikai Laboratórium Hungalimentaria 2015
Méhtetemek vizsgálata Évről-évre visszatérő probléma Cél: okok feltárása o Betegség? o Mérgezés? Szándékos? Nem előírásszerű növényvédelmi tevékenység? Több szakterület együttműködésére van szükség o Szakmai tapasztalatok összegzése o Közös munka megkönnyítése eljárásrend kialakításával és alkalmazásával
Méhtetemek vizsgálata Ez évig 2 labor vizsgált akkreditáltan növényvédőszerre: o Miskolci Növényvédőszermaradék-analitikai Laboratórium (Kelet-Mo.) o Velencei Növényvédőszer-analitikai Laboratórium (Nyugat- Mo.) Összetett feladat több lépcsőben: o a növ. szermaradékok (különösen a méhekre veszélyesek) jelenlétének igazolása méhekben o a növ. szermaradékok (különösen a méhekre veszélyesek) jelenlétének igazolása a kapcsolódó növényi mintában o Méhtetem és növényi mintá(k) közti kapcsolat alátámasztása vagy elvetése vizsgálatokkal
Törvények, rendeletek Betegségek megelőzéséről szólók Méhekre veszélyes növényvédelmi tevékenységek megakadályozásáról szólók Ok: méhekre mérsékelten vagy növényvédőszerek vannak/voltak forgalomban (piretroidok, neonikotinoidok) Cél: a növényvédőszerek kijuttatása a közeli méhállomány károsítása nélkül
Laboratóriumi elvárások Minél több információ szolgáltatására alkalmas, megbízható vizsgálati módszer alkalmazása Módszerfejlesztés Vizsgálati eredmények minél rövidebb idő alatt Az eredményekből megállapítható legyen, mi okozta a pusztulást: o Szándékosság? o Gondatlanság? o Tiltott v. szennyezett szer alkalmazása?
Veszélyes hatóanyagok Mért paraméter Méhveszélyességi besorolás abamektin bifentrin ciflutrin (béta-ciflutrin) cipermetrin (izomerek összesen) deltametrin dimetoát + ometoát etofenprox fenitrotion fipronil + fipronil-szulfon foszmet + foszmet-oxon imidakloprid klórantraniliprol klórpirifosz klórpirifosz-metil lambda-cihalotrin malation + malaoxon metilparation + paraoxon-metil metomil + tiodikarb Mért paraméter bromoxinil diklórfosz eszfenvalerát + fenvalerát (RR+SS izomerek) eszfenvalerát + fenvalerát (RS+SR izomerek) fluorkloridon foszalon indoxakarb lufenuron prokloráz acetamiprid diazinon metoxifenozid pirimikarb + dezmetil-pirimikarb tau-fluvalinát teflutrin tiakloprid Méhveszélyességi besorolás mérsékelten veszélyes mérsékelten veszélyes mérsékelten veszélyes mérsékelten veszélyes mérsékelten veszélyes mérsékelten veszélyes mérsékelten veszélyes mérsékelten veszélyes mérsékelten veszélyes pirimifosz-metil spirodiklofen tiametoxam + klotianidin triflumuron tritikonazol
Vizsgálati módszer MSZ EN 15662:2009 (QuEChERS) 5 g minta 10 ml víz rázatás rázás 10 ml AcN Extrakciós sókeverék dspe tisztítás PSA-val Kifagyasztás rázatás centrifugálás rázatás centrifugálás Stabilizálás
Problémák Bonyolult mátrix (magas zsírtartalom) Rengeteg zavaró hatás Nincs két egyforma méh Kolonnákat rongálja, gyakran kell karbantartani
Piretroidok tartománya GC-ECD Problémák
GC-MS full scan
GC-MS/MS
Zavaró hatás kiküszöbölésének lehetőségei 5 g minta 10 ml víz rázatás rázás 10 ml AcN Csodaszerek? Hosszabb ideig? Extrakciós sókeverék dspe tisztítás PSA-val Kifagyasztás rázatás centrifugálás rázatás centrifugálás Stabilizálás További tisztítás?
Vizsgálódási irányok Szabvány alternatív javaslata: o hosszabb kifagyasztási idő o tisztító keverék: PSA + MgSO 4 + C18 További tisztítási lépésként Al 2 O 3 alkalmazása Zsíroknál hatásosan alkalmazott kirázásos módszer (n-hex: AcN elegyével) Újonnan megjelenő Z-Sep+ adszorbens alkalmazása a tisztításnál o SiO 2 felületén megkötött ZrO és C18 o 15 % zsírtartalomnál javasolt
Különböző méh mátrixokon tett próbák MR 416 (zsírokra) PSA+MgSO 4 és Al 2 O 3 tiszt. PSA+MgSO 4 +500 mg Z-Sep+ PSA+MgSO 4 +150 mg Z-Sep+ kifagyasztva PSA+MgSO 4 +150 mg Z-Sep+
Kiindulási méh minta módszer módosítások előtt
Kiindulási Vizsgálati méh mintán módszer végzett vizsgálatok PSA+MgSO 4 +150 mg Z-Sep+ PSA+MgSO 4 +150 mg Z-Sep+ kifagyasztva 500 mg Z-Sep+ 500 mg Z-Sep+ kifagyasztva
Vizsgálati módszer PSA+MgSO 4 +150 mg Z-Sep+ 500 mg Z-Sep+ PSA+MgSO 4
R % Visszanyerési eredmények 140 120 500 mg Z-Sep+ PSA + 150 mg Z-Sep+ 150 mg Z-Sep+ 100 80 60 40 20 0
Kísértő mátrix hatások? Lambda-cihalotrin gyanú
Alapminta spektruma Konfirmálás Lambda-cihalotrin gyanú St. addicionált minta spektruma
Pozitív minták Diazinon GC-MS/MS
Pozitív minták Terbutilazin és metolaklór Kontrol minta GC-MS/MS Méhhulla Hozzáadásos kontrol minta
Pozitív minták Boszkalid, fipronil és szulfonja GC-ECD
Pozitív minták Dimetoát LC-MS/MS
Előző évek eredményei A minták 83 %-a volt pozitív (218 db) 4 év alatt. Pozitív minták száma évente 2013 42 2014 118 2012 48 2011 10 2009 1
cipermetrin dimetoát és ometoát össz. fipronil fipronil-szulfon klórpirifosz klórpirifosz-metil klotianidin lambda-cihalotrin tiametoxam fluorkloridon foszalon indoxakarb lufenuron prokloráz proquinazid acetamiprid diazinon metoxifenozid tau-fluvalinát teflutrin tiakloprid 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 Előző évek eredményei Mért szermaradékok gyakorisága veszélyesség alapján kifejezetten mérsékelten figyelemre méltó
Előző évek eredményei 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 amitráz kumafosz boszkalid ciprodinil ciprokonazol difenokonazol diflubenzuron dimoxistrobin ditianon famoxadon fenazaquin fenhexamid fenpropimorf fluquinkonazol fluzilazol folpet kaptán karbendazim mandipropamid MCPA meptil-dinokap metolaklór metribuzin DEET novaluron pendimetalin penkonazol permetrin (izomerek ) pikoxistrobin piperonilbutoxid piraklostrobin pirimetanil protiokonazol-deztio spiroxamin tebufenpirad tebukonazol terbutilazin tetrametrin tiofanát-metil trifloxistrobin egyéb
fipronil ciprodinil karbendazim klotianidin ciprodinil dimetoát és ometoát össz. foszalon kaptán klórpirifosz lambda-cihalotrin prokloráz tebukonazol alfa-cipermetrin (alfametrin) cipermetrin difenokonazol dimetoát és ometoát össz. famoxadon fipronil-szulfon karbendazim klotianidin metolaklór pendimetalin prokloráz tau-fluvalinát teflutrin tiametoxam Előző évek eredményei 25 Mért szermaradékok évente 20 15 10 5 0 2009 2011 2012 2013
acetamiprid boszkalid ciprodinil diazinon diflubenzuron dimoxistrobin fenazaquin fenpropimorf fipronil-szulfon fluquinkonazol indoxakarb karbendazim klórpirifosz-metil kumafosz MCPA metolaklór DEET pendimetalin piperonilbutoxid pirimetanil proquinazid tau-fluvalinát tebukonazol tetrametrin tiametoxam Előző évek eredményei 80 70 60 50 40 30 20 10 0 Mért szermaradékok évente 2014
Előző évek eredményei Minták számának megoszlása megyék szerinti bontásban Zala Veszprém Vas Tolna Szabolcs-Szatmár-Bereg Somogy Pest Nógrád Komárom-Esztergom Hajdú-Bihar Győr-Moson-Sopron Fejér Csongrád Borsod-Abaúj-Zemplén Békés Baranya Bács-Kiskun 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 Pozitív esetek száma
Gyakoriság Előző évek eredményei Mintákban talált hatóanyagok száma 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Talált hatóanyagok száma egy mintában
Köszönöm szíves figyelmüket!