Baromfifélék mycoplasmosisa. Mycoplasma synoviae. MS - Kórfejlődés. MS - Járványtan Madarakban előforduló Mycoplasma fajok. M.

Átírás

1 Madarakban előforduló Mycoplasma fajok Baromfifélék mycoplasmosisa dr. Gyuranecz Miklós ATK Állatorvos-tudományi Intézet Kb.25 faj A gazdasági jelentőségű baromfi fajok legjelentősebb Mycoplasma fajai: Tyúk, pulyka: M. gallisepticum(mg) M. synoviae(ms) M. meleagridis(mm) M. iowae Galamb: M. columorale M. columbinasale M. columbinum Liba, kacsa: M. anserisalpingitidis M. anseris M. anatis M. cloacale (Acholeplasma fajok) 1 2 Mycoplasma synoviae M. synoviae Első leírás: Olsonés mtsai., 1954 Tápanyag igény: NAD, cisztein, sertés savó Antigén szerkezet: vlha gén és vlha pszeudogének rekombináció Törzsek virulenciája eltérő Gazdafajok: tyúk, pulyka (fácán, fürj, fogoly, liba, stb.) 3 4 Világszerte elterjedt Gyakori (kivéve törzsállományok) MS - Járványtan MS - Kórfejlődés Vertikális terjedés: -Gyakoribb heveny, ritkább krónikus fertőzés esetén -Fontos a törzsállományok monitoringja! Horizontális terjedés: - direkt vagy indirekt kapcsolat - vad madarak - ragályfogó tárgyak (haj, toll, stb.) -por -szél Társfertőzések stressz Horizontális terjedés (felső légút/kötőhártya) Hámsejtekhez kötődik és szaporodik: nyálkahártya erózió sejtes immunválasz befolyásolása Nem fagocitálósejtekbe hatolás és a felszíni fehérjék változatos kifejeződése: elbújik az immunrendszer elől elbújik az antibiotikumok elől szisztémás és/vagy krónikus fertőzés alakul ki Vertikális fertőzés 5 6 1

2 MS - Kórfejlődés Lappangási idő változhat az alábbiak függvényében: Törzs virulenciája Társfertőzések Környezeti és stressz hatások Gyakran szubklinikai a fertőzés Általában a lappangási idő: vertikális fertőzés: 6 nap horizontális fertőzés: 2-20 nap MS Klinikai tünetek, kórbonctan Fertőző ízület- ínhüvely, bursa-gyulladás Légzsákgyulladás Napos kori légzsákgyulladás Tojásvég deformitás (EAA) (akár 4%) Tojástermelés és tojásminőség csökkenés Takarmányértékesítés csökkenés, súlygyarapodás csökkenés Egyéb fertőzések hatásának felerősítése Tünetmentes fertőzés, értékesítési korlátozások Morbiditás: ízületgyulladás: 5-15% (2-75%) Légzőszervi fertőzöttség: % Mortalitás: 1-10% (pulykáknál kannibalizmus) 7 8 MS Klinikai tünetek, kórbonctan MS Klinikai tünetek, kórbonctan Landman W. CM CM Landman W MS Klinikai tünetek, kórbonctan MS Klinikai tünetek, kórbonctan Horváth-Papp I. Horváth-Papp I

3 MS Társfertőzések Diagnosztika Vírusok NDV & IBV Vakcina törzsek is! Baktériumok E. coli M. meleagridis, M. gallisepticum S. aureus Megfelelő minta: légcsőtampon (ízületi váladék, tojócső) vér Mintaszám és mintavétel gyakorisága Ideális esetben a különböző (indirekt és direkt) diagnosztikai módszerek kombinációja Alap diagnosztikai módszerek Indirekt módszerek szerológia: Tárgylemez agglutináció ELISA Haemagglutináció gátlási próba Egyéb diagnosztikai módszerek DIVA (Differentiating Infected from Vaccinated Animals): lásd később Genotipizálás: járványtani nyomozás céljából Direkt módszerek: PCR(konvencionális, real-time) izolálás Száraz tampon (PCR) Izolálás Diagnosztikai PCR Vad és vakcina törzs elkülönítés (DIVA) Genotipizálás Száraz tampon Izolált törzs MS Izolálás Megfelelő minta: Choanaés/vagy légcső tampon 4 tamponból képzünk 1 pool-t. Általában 20 állat mintázása elegendő(5 pool) Megfelelő mintaküldés: transzport rendszer lehetővé teszi, hogy napig túlél a levett mintában a Mycoplasma hűtés nélkül. Hosszú tenyészidő (2-4 hét), speciális tápközeg Antibiotikum érzékenység meghatározás

4 Mycoplasma transzport rendszer MS Védekezési lehetőségek Rövid távú Antibiotikumos gyógykezelés Hosszú távú Mentes állomány Vakcinázás Antibiotikumos gyógykezelés EAA esetismertetés, 2011 Csak ideiglenes megoldás (ha tartós lenne, akkor már az 1950-es években megszabadultunk volna a mycoplasmosis-tól) Csökkenti a klinikai tüneteket, veszteséget, vertikális terjedést β-laktámantibiotikumok, szulfonamidok nem alkalmasak a mycoplasmosis gyógykezelésére Antibiotikumos gyógykezelés Minimális gátló koncentráció érték meghatározás (MIC) mikroleves hígítással Magyarországon leghatékonyabbnak talált AB-ok: tetraciklinek tiamulin makrolidok Potencionálisan hatékony antibiotikumok: fluorokinolonok: enrofloxacin, difloxacin aminociklitolok: spektinomicin linkózamid: linkomicin tetraciklinek:doxiciklin, klórtetraciklin, oxitetraciklin makrolidok: tilmikozin, tilozin, tilvalozin pleuromutilinek: tiamulin fenikolok: florfenikol kombináció:linkomicin és spektinomicin(1:2) Mentesség fenntartása Hosszú távú védekezési lehetőség Szigorú járványvédelem, megfelelő higiénia, egyszerre be és kitelepítés Rendszeres szűrővizsgálatok

5 Bakterin vakcinák Mérsékelt védelmet adnak Humorálisimmunválasz, melynek mértéke nem arányos a védettséggel MS Vakcinázás Élő, attenuált vakcinák Tartós, hatékony védelem Kolonizálják a légutakat betöltik a niche-t folyamatos antigén stimulus nyálkahártya immunitást váltanak ki (humorális immunitás változó) Az élő, attenuált vakcinák használata került előtérbe MS-H törzs (Bioproperties Pty Ltd.): szemcseppentés MS1 törzs (MSD Animal Health Inc.): spray Nyálkahártya immunitás Rövid időtartamú Fennmaradása állandó stimulációt igényel Mértéke nem mindig párhuzamos a humorális immunválasszal Élő attenuáltvakcina törzsek, amik kolonizálják a nyálkahártyát egy életre, azok megfelelő megoldást biztosítanak erre: Megakadályozzák a vad törzs fertőzését. A kolonizációnak meg kell történnie a vad törzzsel való érintkezés előtt Nyálkahártya immunitás és szerológiai immunválasz élő, attenuált törzzsel történő vakcinázás után Vakcina törzs kinetikája és az immunitás kialakulása Vakcinázott és fertőzött Nem vakcinázott és fertőzött Tracheal pop (organisms per swab) ,8 0,6 0,4 Immunity (Resistance to wild colonization) 10 0, Trachael population Mucosal immunity time (weeks) Vakcina törzs kinetikája és az immunitás kialakulása + Antibiotikum Tracheal pop (organisms per swab) A n t i b i o t i c Trachael population A n t i b i o t i c Mucosal immunity 1 0,6 0,4 0,2 0 time (weeks) Immunity (Resistance to wild colonization) Antibiotikum átveszi a 0,8 vakcina szerepét DIVA (Differentiating Infected from Vaccinated Animals) Humorálisimmunválasz mértéke nincs összefüggésben a védettséggel szerológia vizsgálat nem alkalmas a vakcinázás hatékonyságának az ellenőrzésére A nyálkahártyán lévő Mycoplasmatörzs Vpizálására van szükség légcső tampon minta molekuláris biológiai vizsgálat: DIVA tesztek 6 (MS-H) 8 (MS1) héttel a vakcinázás után M wt MS-H 5

6 Mycoplasma gallisepticum M. gallisepticum Első leírások: Dodd, 1905; Nelson, 1936 Tápanyag igény: kevésbé igényes mint az MS Antigén szerkezet: haemagglutininek, adhezinek 5 vlha gén váltakozóan az egyik áxródik variabilitás pvpa gén váltakozó alegységekből áll variabilitás GapA, CrmA variábilis Törzsek virulenciája, antigenitása (szerológiai tesztek!) eltérő Keresztreakció (szerológia, egyes PCR-k): M. imitans Gazdafajok: tyúk, pulyka (fácán, fürj, fogoly, liba, kacsa, papagáj, pintyek (USA), stb.) MG - Járványtan MG - Kórfejlődés Világszerte elterjedt Ritka azokon a helyeken, ahol védekeznek/mentesítenek ellene Magyarországon ritka a nagyüzemi tyúk állományokban, pulykában előfordul Háztájiban/díszbaromfiban gyakori: tünetmentes hordozás Vertikális terjedés: -Gyakoribb heveny, ritkább krónikus fertőzés esetén (de nem mindig) -Fontos a törzsállományok monitoringja! Horizontális terjedés: - direkt vagy indirekt kapcsolat - vad madarak - ragályfogó tárgyak (haj, toll, stb.) -por -szél Társfertőzések stressz Horizontális terjedés (felső légút/kötőhártya) Hámsejtekhez kötődik és szaporodik: nyálkahártya erózió sejtes immunválasz befolyásolása Nem fagocitálósejtekbe hatolás és a felszíni fehérjék változatos kifejeződése: elbújik az immunrendszer elől elbújik az antibiotikumok elől szisztémás és/vagy krónikus fertőzés alakul ki Vertikális fertőzés MG - Kórfejlődés MS MG kórfejlődés Lappangási idő változhat az alábbiak függvényében: Törzs virulenciája Társfertőzések Környezeti és stressz hatások Gazdafaj Lehet szubklinikaia fertőzés, ami aztán stressz hatására manifesztálódhat Általában a lappangási idő: 6-21 nap, de tág határok között változhat

7 MG Klinikai tünetek, kórbonctan MG Klinikai tünetek, kórbonctan Tyúkok krónikus légzőszervi megbetegedése (CRD) Pulykák fertőző sinusitise Keltethetőség romlása, napos kori légzsákgyulladás Tojástermelés és tojásminőség csökkenés Takarmányértékesítés csökkenés, súlygyarapodás csökkenés Egyéb fertőzések hatásának felerősítése Értékesítési korlátozások Morbiditás: Tyúk: akár 100% Pulyka: légzőszervi: 80-90%, sinusitis: 1-70% Mortalitás: brojler: 0-30% Horváth-Papp I. Horváth-Papp I. Morrow C MG Klinikai tünetek, kórbonctan MG Klinikai tünetek, kórbonctan Horváth-Papp I. Horváth-Papp I. Horváth-Papp I. Morrow C MG Klinikai tünetek, kórbonctan MG Társfertőzések Virusok NDV & IBV Vakcina törzsek is! Madárinfluenza(H9) TRT Baktériumok E. coli Avibacterium paragallinarum Ornithobacterium rhinotracheale Sporadikusan AMPV, ILT, reovirus, adenovirus ésgomba, P. multocida, B. avium

8 Diagnosztika Megfelelő minta: légcsőtampon (ízületi váladék, tojócső) vér Mintaszám és mintavétel gyakorisága Ideális esetben a különböző (indirekt és direkt) diagnosztikai módszerek kombinációja Diagnosztikai módszerek (ugyan az, mint MS) Indirekt módszerek szerológia: Tárgylemez agglutináció ELISA Haemagglutináció gátlási próba M. imitans keresztreakciót okozhat (szerológia és egyes PCR rendszerek) Direkt módszerek: PCR Izolálás Egyéb: Molekuláris DIVA tesztek Genotipizáló rendszerek járványtani nyomozás MG Védekezési lehetőségek MG Vakcinázás Rövid távú Antibiotikumos gyógykezelés: mint MS (tetraciklinek, pleuromutilinok, makrolidok, stb.) Hosszú távú Mentes állomány: mint MS Vakcinázás Bakterin vakcinák Mérsékelt védelmet adnak Humorális immunválasz, melynek mértéke nem arányos a védettséggel Élő, attenuált vakcinák Tartós, hatékony védelem Kolonizálják a légutakat betölvk a niche-t folyamatos antigén stimulus nyálkahártya immunitást váltanak ki (humorálisimmunitás változó) Vektor vakcina (poxalapú) Antibiotikumterápia mellett is használható Tyúkon,pulykán alkalmazható Nem okoz szerológiai áthangolódást Az élő, attenuált vakcinák használata került előtérbe (hatékonyság ellenőrzés molekuláris DIVA tesztekkel) MG Élő, attenuált vakcinák Vakcina Fejlesztés Tulajdonságok Terjedés Állatfaj Alkalmazás F (CEVA, Fort-Dodge) 6/85 (MSD) 1970-es évek, Természetes szelekció 1970-es évek, Természetes szelekció Mérsékelten virulens Liofilizált, sprayzhető Attenuált Liofilizált, sprayzhető Vertikális, Horizontális tyúk Horizontális tyúk Főleg harmadik világ, Európában nem Világszerte Mycoplasma meleagridis Ts11 (Bioproperties) K (Vaxxinova) 1980-as évek, Kémiai mutáció 1990-es évek? Természetes szelekció Attanuált Fagyasztott, szembe cseppentés Attenuált Liofilizált, sprayzhető (Vertikális, ß- verzió nem) Horizontális tyúk pulyka (ßverzió) Nemismert csak tyúk? Világszerte Japán 8

9 M. meleagridis Első leírás: Adler, 1958 Tápanyag igény: glükózt nem fermentál, arginint hidrolizál Antigén szerkezet: kevéssé ismert, eltér a többi Mycoplasma fajtól Törzsek virulenciája eltérő Gazdafajok: pulyka (tyúk, páva, galamb, fürj, ragadozó madarak) MM - Járványtan Nagy mentesítési programok az 1970-es években Világszerte ritka 2011 óta 3 hazai izolálás tünetmentes állományokból Vertikális terjedés: -Ez a jelentősebb -Spermával, (embrionális fejlődés során fertőződött tojókkal) -Ha csak a légutakból mutatható ki a kórokozó a felnőtt madárban, akkor az nem jut át vervkálisan felnő\ korban történő légúti fertőződés nem eredményez vertikális terjedést Horizontális terjedés: - direkt vagy indirekt kapcsolat -légúti fertőződés a keltetőben, felnőtt madarak között -légúti fertőződés esetén a fiatal madarak 5%-ban genitális hordozás is kialakul -Szexálás, mesterséges termékenyítés, stb. MM Járványtan/Kórfejlődés MM Klinikai tünetek, kórbonctan Vertikális fertőzés Napos madarak/embriók: - légzsákgyulladás - keltethetőség romlik - genitális fertőződés perzisztál a kórokozó (Kakas: kloáka, phallus) vervkális terjedés a következő nemzedékre Növendék madarak: - légzsákgyulladás - generalizált fertőzés: turkey syndrome 65 (kórfejlődése nem tisztázott: biotin, arginin kompetíció???) Légúti fertőzés Napos/fiatal madarak: -keltetőben, akár az állomány 100% fertőződhet -madarak 5%-ban genitáliákba is eljut a kórokozó Felnőtt madarak: -gyakran tünetmentes hordozás, genitáliákba nem megy át a kórokozó Késői embrió mortalitás (5-6%) Légzsákgyulladás (társfertőzés, negatív környezeti hatások (magas por koncentráció) nélkül hetes korra eltűnik) Turkey syndrome 65: 1-6 hetes madarak 5-10%-a Tarsometatarsus görbül, csavarodik, rövidül Csánkizület: folyadék felhalmozódás Hátcsigolya deformitás Satnyaság Tollasodási zavar MM Klinikai tünetek, kórbonctan MM Klinikai tünetek, kórbonctan dyschondroplasia

10 MM Társfertőzések, (differenciál diagnózis) M. iowae M. synoviae M. gallisepticum E. coli MM Diagnosztikai módszerek hasonló, mint MS és MG Megfelelő minta: Légcső, choána tampon Sperma, kloáka tampon Indirekt módszerek szerológia: Tárgylemez agglutináció ELISA Haemagglutináció gátlási próba Direkt módszerek: PCR Izolálás MM Védekezési lehetőségek Rövid távú Antibiotikumos gyógykezelés: mint MS (tetraciklinek, pleuromutilinok, makrolidok, stb.) Hosszú távú Mentes törzsállományok: 1970-es évek Tojások AB-ba merítése/oltás Sperma AB-os kezelése Vakcinázás: nincs Mycoplasma iowae M. iowae Első leírás: Yoder, 1962 Tápanyag igény: glükózt fermentál, arginint hidrolizál Antigén szerkezet: alig ismert rossz antigén, alig vált ki immunválaszt Sok szerotípus, szerológiailag nem egységes Törzsek virulenciája eltérő Enyhén immunszupresszív MI Járványtan, kórfejlődés Világszerte elterjedt, kivéve Ausztrália Ritkának hitt, nagy tenyésztő cégek elvileg mentesítettek Ennek ellent mond, hogy jelenleg gyakori hazánkban, hatalmas veszteségeket okoz Gazdafajok: pulyka (tyúk, liba, papagáj)

11 MI Járványtan, kórfejlődés A M. iowae predilekciós helye a bélcsatorna vertikális terjedés (kloáka, sperma mesterséges megtemékenyítés) horizontális terjedés (keltető, élet első néhány napja) Mesterséges fertőzések esetén azt figyelték meg, hogy a kórokozó a bélbolyhokhoz tapad (felszívódási zavar??) Embrióban a CAM nem specifikus heveny gyulladása MI Klinikai tünetek, kórbonctan Vertikálisan Embriómortalitás/keltethetőség romlása: A keltethetőség romlása széles tartományban szórhat (ált. 2-5%) A legtöbb elhullás a keletetés napja között Az elpusztult embriókban: Májgyulladás, ödéma, lépduzzanat, fejlődésben való visszamaradás A kikelő fertőzött madarakban kelésgyengeség Elhullás a kelést követő egy héten belül A túlélőkben egyéb patológiás elváltozások: Fejlődésben való visszamaradás Tollasodási zavar Lábdeformitások : Chondrodystrophia, Tibiarotáció, Csontok rövidülése, elhajlása, Lábak szétcsúszása, Lábujjak elhajlása, görbülete, Folyadék felhalmozódás az ízületek üregében, Néha gyulladásos elváltozások az Achilles ínban Bursa atrófia Horizontálisan (bélsárral) Csontelváltozások (lásd feljebb) Csak az élet első néhány napjában bekövetkező fertőzés esetén Keltető?? MI Klinikai tünetek, kórbonctan MI Klinikai tünetek, kórbonctan MI Klinikai tünetek, kórbonctan MI Társfertőzések, (differenciál diagnózis) M. meleagridis

12 MI Diagnosztikai módszerek MI Védekezési lehetőségek Indirekt módszerek szerológia: nem vált ki detektálható mértékű humorálisimmunválaszt nincs szerológiai vizsgálati lehetőség Direkt módszerek: PCR és izolálás Megfelelő minta: Befulladt tojás Kloáka (és nyelőcső) tampon Intermittáló baktérium ürítés Ürítés mértéke idővel csökken. Ideális mintavétel 1 és 6 hetes kor között. 12. hét után csak nehezen kimutatható Rövid távú Antibiotikumos gyógykezelés: Nehezebb gyógykezelni, mint az egyéb Mycoplasma fertőzéseket (tetraciklinek, pleuromutilinok, makrolidok, stb.) Hosszú távú Mentes törzsállományok: Elvileg a tenyésztő cégek mentesítettek (Tojások AB-ba merítése/oltás) Vakcinázás: nincs Genotipizálás: törzsek összehasonlítása, járványtani nyomozás Vízi baromfi patogén Mycoplasma fajok Vízi baromfi mycoplasmosis Faj Első leírás Tápanyag igény M. anserisalpingitidis Stipkovits, 1984 Glükózt fermentál M. anatis Roberts, 1976 Glükózt fermentál M. anseris Stipkovits, 1984 Arginint hidrolizál M. cloacale Bradbury, 1984 Arginint hidrolizál Antigén szerkezet, Törzsek virulenciája Nem ismert Nem ismert Nem ismert Nem ismert Gazdafaj Liba (kacsa) Kacsa (liba) Liba Liba, kacsa (pulyka, stb.) Acholeplasmafajok 1940-es, 50-es évek Változatos Liba és számos egyéb állatfaj Járványtan, kórfejlődés Tünetmentes állatokból is kimutathatóak Törzsek patogenitása, virulenciája valószínűleg eltérő Klinikai tünetek megjelenéséhez hajlamosító tényezők hozzájárulhatnak: Stressz (szaporodási időszak) Nagyüzemi, intenzív tartásmód (klímás liba) Vertikálisan (sperma, tojás) és horizontálisan (termékenyítés, bélsár) is terjednek M. anserisalpingitidis Klinikai tünetek, kórbonctan Nagyon gyakori, legjelentősebb kórokozó Kloáka és nemi szervek gyulladása: Phallus gyulladás: savós-fibrines gyulladás nekrotizál Here sorvadás Petevezető gyulladás, degenerált tüszők Tojástermelés csökken, keltethetőség romlik, embrió mortalitás, a kikelt madaraknál légzőszervi tünetek és a testtömeg gyarapodás elmaradása jelentkezhet Légzsák, hashártya szívburok gyulladás Légcső és sinus-bansavós váladék, kötőhártya gyulladás Idegrendszeri tünetek, agyvelőgyulladás

13 M. anserisalpingitidis Klinikai tünetek, kórbonctan Klinikai tünetek, kórbonctan M. anseris Közepesen gyakori Hasonló, mint a M. anserisalpingitidis: phallus gyulladás, embrió mortalitás, hashártya és légzsák gyulladás Thuma Á Thuma Á M. cloacale Gyakori Kommenzalista? (nemi szervek gyulladása, embrió mortalitás) Klinikai tünetek, kórbonctan M. anatis Tapasztalataink alapján ritka Idegrendszeri tünetek, agyvelő és agyhártya gyulladás: egyensúlyzavar, retrográd mozgás, tortikollisz, nyakferdeség Lábgyengeség, leülés Légzsákgyulladás, légzőszervi tünetek Hasmenés Embrió mortalitás, kelési arány csökken Acholeplasma fajok Ivanics és mtsai., 1988 Gyakori, de legtöbbször csak melléklelet Embrió mortalitás Növendék madarakban légzsák és savóshártya gyulladás Diagnosztikai módszerek Indirekt módszerek szerológia:jelenleg nem áll rendelkezésre Direkt módszerek: Megfelelő minta: Phallus lympha Kloáka tampon (sperma, petevezető, légzsák) PCR: Izolálás Genotipizálás: törzsek összehasonlítása, járványtani nyomozás Védekezési lehetőségek Az elhangozottakról bővebben: Rövid távú Antibiotikumos gyógykezelés: Nehezebb gyógykezelni, mint az egyéb Mycoplasma fertőzéseket, széles körű rezisztencia Leghatékonyabb AB-ok: tiamulin, tilvalozin, doxiciklin Hosszú távú Mentes törzsállományok: Nehezen megvalósítható a tartástechnológia miatt Vakcinázás: kereskedelmi forgalomban kapható vakcina nincs, csak autovakcinák Grózner, D; Gyuranecz, M: Kacsák és ludak Mycoplasmafertőzései. MAGYAR ÁLLATORVOSOK LAPJA 141 : (8) pp , 10 p. (2019) Nemes, C; Schvarcz, C; Simonyi, E; Turbók, J; Yvon, C; Grózner, D; Gyuranecz, M: Mycoplasma iowaefertőzés előfordulása egy előnevelt pulykaállományban. MAGYAR ÁLLATORVOSOK LAPJA 141 : (10) pp , 8 p. (2019) Bekő, K; Gyuranecz, M: Mycoplasma synoviaeokozta baromfibetegségek. MAGYAR ÁLLATORVOSOK LAPJA 142 : (1) pp , 12 p. (2020) Bekő, K; Gyuranecz, M: Baromfiállományok Mycoplasma gallisepticum okozta fertőzései. MAGYAR ÁLLATORVOSOK LAPJA 142 : Májusi szám. (2020)

14 Köszönöm a figyelmet! Elérhetőség: dr. Gyuranecz Miklós ATK Állatorvos-tudományi Intézet, 1143 Budapest, Hungária krt m.gyuranecz@gmail.com; Mobil: ; Fax: