(11) Lajstromszám: E (13) T2 EURÓPAI SZABADALOM SZÖVEGÉNEK FORDÍTÁSA

Átírás

1 !HU T2! (19) HU (11) Lajstromszám: E (13) T2 MAGYAR KÖZTÁRSASÁG Magyar Szabadalmi Hivatal EURÓPAI SZABADALOM SZÖVEGÉNEK FORDÍTÁSA (21) Magyar ügyszám: E (22) A bejelentés napja: (96) Az európai bejelentés bejelentési száma: EP (97) Az európai bejelentés közzétételi adatai: EP A (97) Az európai szabadalom megadásának meghirdetési adatai: EP B (1) Int. Cl.: A61K 31/433 (06.01) C07D 28/08 (06.01) A61P 2/28 (06.01) A61P 3/ (06.01) C07D 417/04 (06.01) () Elsõbbségi adatok: EP (72) Feltalálók: Martinez Gil 287 Tres Cantos - Madrid (ES); Dorronsoro Diaz Isabel 287 Tres Cantos - Madrid (ES); Alonso Cascon Mercedes 287 Tres Cantos - Madrid (ES); Panizodel Pliego Gema 287 Tres Cantos - Madrid (ES); Fuertes Huerta Ana 287 Tres Cantos - Madrid (ES); Perez Puerto Maria José 287 Tres Cantos - Madrid (ES); Medina Padilla Miguel 287 Tres Cantos - Madrid (ES) (73) Jogosult: Noscira S. A. 287 Tres Cantos (ES) (74) Képviselõ: Lengyel Zsolt DANUBIA Szabadalmi és Jogi Iroda Kft. Budapest (4) Tiadiazolidinonok mint GSK 3-inhibitorok HU T2 A leírás terjedelme 14 oldal Az európai szabadalom ellen megadásának az Európai Szabadalmi Közlönyben való meghirdetésétõl számított kilenc hónapon belül felszólalást lehet benyújtani az Európai Szabadalmi Hivatalnál. (Európai Szabadalmi Egyezmény 99. cikk (1)) A fordítást a szabadalmas az 199. évi XXXIII. törvény 84/H. -a szerint nyújtotta be. A fordítás tartalmi helyességét a Magyar Szabadalmi Hivatal nem vizsgálta.

2 A találmány területe A találmány tárgyát enziminhibitorok képezik különösen a glikogén-szintáz-kináz 3 GSK 3 heterociklusos inhibitorai eljárások ilyen vegyületek elõállítására az azokat tartalmazó gyógyászati készítmények és azok alkalmazása olyan betegség kezelésére vagy profilaxisára amelyben a GSK 3 részt vesz mint például Alzheimer-kór vagy nem inzulinfüggõ cukorbetegség. A találmány háttere Az új terápiás ágensek kutatását nagymértékben segítette az elmúlt években az enzimek és más biomolekulák szerkezetének a megértése amelyek kapcsolatosak a célzott betegséggel. A kiterjedt vizsgálatnak kitett enzimek egy fontos osztálya a protein-kinázok. Sok betegség kapcsolatos protein-kináz által közvetített események által kiváltott abnormális celluláris válaszokkal. Ezen betegségek közé tartoznak autoimmun betegségek idegrendszeri és neurodegeneratív betegségek rák szív- és érrendszeri betegségek allergiák és asztma Alzheimer-kór vagy hormonokkal kapcsolatos betegségek. Ennek megfelelõen jelentõs törekvések voltak az orvosi kémiában olyan protein-kinázok megtalálására amelyek hatékonyak terápiás ágensként. A glikogén-szintáz-kináz¹3 (GSK 3) egy szerin/treonin protein-kináz amely ¹ és ¹izoformákból áll amelyeket különálló gének kódolnak [Coghlan et al. Chemistry & Biology oldal (00); Kim és Kimmel Curr. Opinion Genetics Dev oldal (00)]. A glikogén-szintáz-kináz¹3 (GSK 3) treonin/szerin kináz alapvetõ szerepet tölt be különféle receptorkapcsolt jeltovábbítási útvonalakon (Doble B. W. Woodgett J. R. J. Cell. Sci : oldal). Ezen útvonalak hibás szabályozását kulcsfontosságú eseménynek tekintik számos elterjed emberi rendellenességben mint például II¹es típusú cukorbetegség (Kaidanovich O. Eldar-Finkelman H. Expert Opin. Ther. Targets 02 6: 61. oldal) Alzheimer-kór (Grimes C. A. Jope R. S. Prog. Neurobiol. 01 6: oldal) központi idegrendszeri (CNS) rendellenességek mint például mániás depressziós rendellenesség és krónikus gyulladásos rendellenességek (Hoeflich K. P. Luo J. Ruble E. A. Tsao M. S. Jin O. Woodgett J. Nature 00 6: oldal). Ezeket a betegségeket bizonyos celluláris jeltovábbítási útvonalak amelyekben a GSK 3 szerepet játszik abnormális mûködése okozhatja vagy az azoknak lehet az eredménye. A GSK 3-ról azt találták hogy számos szabályozófehérjét foszforilál vagy modulálja azok aktivitását. Ezen fehérjék közé tartozik a glikogén-szintáz amely a glikogénszintézis sebességmeghatározó enzimje a mikrotubulisasszociált protein Tau ¹katenin géntranszkripciós faktor a c1f2b transzlációs iniciációs faktor valamint az ATP-citrát-liáz axin 1¹es hõsokk faktor c¹jun c¹myc c¹myb CREB és CEPBa. Ezek a szerteágazó fehérjecélpontok a GSK 3¹at a celluláris anyagcsere proliferáció differenciáció és fejlõdés számos aspektusába bevonják Jelenleg a GSK 3 gátlása egy életképes stratégiát képvisel új orvosi entitások kifejlesztésére ilyen kezeletlen betegségek kezelésében (Martinez A. Castro A. Dorronsoro I. Alonso M. Med. Res. Rev : oldal) inzulin-mimikri tau-defoszforiláció és amiloid processzálás vagy transzkripciómoduláció útján. Az eddig már megtalált GSK 3¹t gátló nagyon különbözõ kémiai szerkezetek (Dorronsoro I.; Castro A.; Martinez A. Exp. Opin. Ther. Patents 02 12: oldal; Alonso M. és Martinez A. Currrent Medicinal Chemistry oldal) közül a 24-diszubsztituált tiadiazolidinon (TDZD) képviseli az elsõ nem ATP-kompetitív GSK 3-inhibitort (Martinez A. Alonso M. Castro A. Perez C. Moreno F. J. Med. Chem. 02 4: oldal; WO számú nemzetközi közzétételi irat és US 03/ számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi bejelentés). Ezek a vegyületek nagy érdeklõdésre tarthatnak számot mert szelektívek és nem mutatják számos más kináz mint például PKA PKC CK 2 és CDK1/ciklin¹B gátlását. Azonban a tiadiazolidinonok hajlamosak reagálni nukleofilekkel és ez a tulajdonság veszélyeztetheti a gyógyszerként való potenciáljukat. Még mindig szükség van jó új GSK 3-inhibitorok megtalálására amelyek egyaránt hatékonyak és szelektívek és jó gyógyszerképzési tulajdonságaik vannak azaz jók a beadással eloszlással anyagcserével és kiválasztással kapcsolatos gyógyászati tulajdonságaik. A találmány leírása A molekuláris modellezési eredményeink és elméletek kihasználásával olyan második generációs 24- diszubsztituált tiadiazolidinonokat (TDZD) terveztünk meg és szintetizáltunk meg amelyek nagyon stabilak a tioltartalmú biológiai molekulákkal mint például glutationnal és BSA-val (szarvasmarha-szérumalbumin) szemben. Meglepõ módon ezeknek a vegyületeknek nagyon kedvezõ a gyógyszerészeti profilja különösen az orális bioelérhetõsége és agy¹ér gát penetrációja. Egy aspektusában a találmány tárgya az I¹es általános képletû vegyület: ahol: R 1 jelentése a következõk közül kiválasztott csoport: I 2

3 vagy R a R b R 2 R 3 R 4 R és R 6 függetlenül a hidrogén szubsztituált vagy szubsztituálatlan alkil szubsztituált vagy szubsztituálatlan cikloalkil szubsztituált vagy szubsztituálatlan alkenil szubsztituált vagy szubsztituálatlan aril szubsztituált vagy szubsztituálatlan heterociklil COR 7 C(O)OR 7 C(O)NR 7 R 8 C=NR 7 CN OR 7 OC(O)R 7 S(O) t R 7 NR 7 R 8 NR 7 C(O)R 8 NO 2 N CR 7 R 8 vagy halogén közül van kiválasztva t értéke vagy 3 R 7 és R 8 mindegyike függetlenül a hidrogén szubsztituált vagy szubsztituálatlan alkil szubsztituált vagy szubsztituálatlan cikloalkil szubsztituált vagy szubsztituálatlan alkenil szubsztituált vagy szubsztituálatlan aril szubsztituált vagy szubsztituálatlan heterociklil szubsztituált vagy szubsztituálatlan alkoxi szubsztituált vagy szubsztituálatlan aril-oxi vagy halogén közül van kiválasztva; ahol R a és R b együtt egy O csoportot alkothat és ahol R a R 2 R 2 R 3 R 3 R 4 R 4 R R R 6 R 6 R b vagy R 7 R 8 közül bármelyik pár együtt ciklusos szubsztituenst alkothat; Azt találtuk hogy a tiadiazolidinonok 4¹es pozíciójában benzilszerû szerkezetet és a 2¹es pozíciójában aromás gyûrût vagy gyûrûket tartalmazó nagy csoportot tartalmazó vegyületek optimálisan hatnak kölcsön a GSK 3 enzimmel miközben ugyanakkor jó gyógyszerképzési tulajdonságokat mutatnak. A vegyületek egy másik elõnyös osztálya azok amelyekben a TDZD 4¹es pozíciójában található szubsztituens szubsztituálatlan benzilcsoport. Egy másik aspektus szerint a találmány tárgyát olyan gyógyászati készítmények képezik amelyek I általános képlet szerinti vegyületet vagy annak gyógyászatilag elfogadható sóját vagy szolvátját és gyógyászatilag elfogadható hordozót adjuvánst vagy vivõanyagot tartalmaznak. Egy elõnyös megvalósítási mód szerint a kiszerelés orális. A találmány tárgyát képezi a fent definiált vegyületek alkalmazása gyógyszer gyártására elõnyösen GSK 3 által közvetített betegség vagy állapot esetében. Egy másik aspektusában a találmány tárgya a fent definiált vegyületek alkalmazása biológiai vizsgálati eljárások reagenseiként elõnyösen GSK 3 gátlására szolgáló reagensként. Egy másik aspektusában a találmány tárgya eljárás I általános képlet szerinti vegyület elõállítására a megfelelõ benzil-izotiocianát reagáltatásával az R 1 N=C=O általános képletû izotiocianáttal. A találmány részletes leírása A tipikus találmány szerinti vegyületek szelektíven gátolják a GSK 3 P¹t más protein-kinázok mint például PKA PKC CK 2 és CdK2 gátlása nélkül ami megszüntethetné a hatásukat. Ezenfelül azok nem kötõdnek szignifikáns mértékben modell fehérjékhez mint például glutationhoz és szarvasmarha-szérumalbuminhoz ami jó jelzõje azok plazmabeli stabilitásának. Azok továbbá jó adszorpciót és vér-agy gát permeabilitást mutatnak amint a példákban demonstráljuk. A vegyületek fenti (I) általános képlet szerinti definíciójában a következõ kifejezéseknek az alábbi a jelentése: Az alkil kifejezés alatt egyenes vagy elágazó szénhidrogén láncú gyököt értünk amely szén- és hidrogénatomokból áll nem tartalmaz telítést 1 8 szénatommal rendelkezik és amely a molekula többi részéhez egyetlen kötésen át kapcsolódik például metil etil n¹propil i¹propil n¹butil t¹butil n¹pentil stb. Az alkilgyökök adott esetben szubsztituálva lehetnek egy vagy több szubsztituenssel mint például halo¹ hidroxi¹ alkoxi¹ karboxi¹ ciano¹ karbonil¹ acil¹ alkoxi-karbonil¹ amino¹ nitro¹ merkapto- and és alkil-tiocsoporttal. Az alkoxi kifejezés alatt ORa képletû gyököt értünk ahol Ra jelentése alkilgyök amint fent definiáltuk például metoxi etoxi propoxi stb. Az alkoxi-karbonil kifejezés alatt C(O)ORa képletû gyököt értünk ahol Ra jelentése alkilgyök amint fent definiáltuk például metoxi-karbonil etoxi-karbonil propoxi-karbonil stb. Az alkil-tio kifejezés alatt SRa képletû gyököt értünk ahol Ra jelentése alkilgyök amint fent definiáltuk például metil-tio etil-tio propil-tio stb. Az amino kifejezés alatt NH 2 NHRa vagy NRaRb képletû gyököt értünk ahol Ra és Rb jelentése a fent definiált. Az aril kifejezés alatt fenil¹ naftil¹ indenil¹ fenantril- vagy antracilgyököt értünk elõnyösen fenil- vagy naftilgyököt. Az arilgyök adott esetben szubsztituálva lehet egy vagy több szubsztituenssel mint például hidroxi merkapto halo alkil fenil alkoxi haloalkil nitro 3

4 ciano dialkil-amino amino-alkil acil és alkoxi-karbonil amint a leírásban definiáljuk. Az aralkil kifejezés alatt alkil csoporthoz kapcsolódó aril csoportot értünk. Az elõnyös példák közé tartozik a benzil és fenetil. Az acil kifejezés alatt C(O) R c és C(O) Rd képletû gyököt értünk ahol Rc jelentése alkilgyök amint fent definiáltuk és Rd jelentése arilgyök amint fent definiáltuk például acetil propionil benzoil és hasonlók. Az aroil-alkil kifejezés alatt Ra C(O) Rd csoporttal szubsztituált alkilcsoportot értünk ahol Ra jelentése alkilgyök. Az elõnyös példák közé tartozik a benzoil-metil. A karboxi kifejezés alatt C(O)OH képletû gyököt értünk. A cikloalkil kifejezés alatt stabil 3 tagú monociklusos vagy biciklusos gyököt értünk amely telített vagy részlegesen telített és amely kizárólag szén- és hidrogénatomokból áll. Hacsak specifikusan másképpen nem mondjuk a leírásban a cikloalkil kifejezés alatt értünk olyan cikloalkilgyököket amelyek adott esetben szubsztituálva vannak egy vagy több szubsztituenssel mint például alkil halo hidroxi amino ciano nitro alkoxi karboxi és alkoxi-karbonil. A fuzionált aril kifejezés alatt olyan arilcsoportot értünk különösen fenil- vagy heteroarilcsoportot amely egy másik gyûrûhöz van fuzionáltatva. A halo kifejezés alatt bróm¹ klór¹ jód- és fluoratomot értünk. A haloalkil kifejezés alatt alkilgyököt értünk amint fent definiáltuk amely szubsztituálva van egy vagy több halogyökkel amint fent definiáltuk például trifluormetil triklór-metil 222-trifluor-etil 1¹fluor-metil-2- fluor-etil és hasonlók. A heterociklus kifejezés alatt heterociklilgyököt értünk. A heterociklus stabil 3 1 tagú gyûrût jelent amely szénatomokból és 1 heteroatomból áll amely a nitrogén oxigén és kén által alkotott csoportból van kiválasztva elõnyösen 4 8 tagú gyûrû egy vagy több heteroatommal elõnyösebben vagy 6 tagú gyûrû egy vagy több heteroatommal. A találmány szerinti értelemben a heterociklus lehet monociklusos biciklusos vagy triciklusos gyûrûs rendszer amely fuzionált gyûrûs rendszereket is tartalmazhat; és a nitrogén¹ szénvagy kénatomok a heterociklusos gyökben adott esetben oxidálva lehetnek; a nitrogénatom adott esetben kvaternerizálva lehet; és a heterociklusos gyök részlegesen vagy teljesen telített vagy aromás lehet. Ilyen heterociklusok nem korlátozó példái közé tartoznak az azepinek benzimidazol benzo-tiazol furán izotiazol imidazol indol piperidin piperazin purin quinolin tiadiazol tetrahidrofurán. A leírás szerint a találmány szerinti vegyületek szubsztituált csoportjai alatt azt a meghatározott molekularészt értjük amely szubsztituálva lehet egy vagy több hozzáférhetõ pozícióban egy vagy több alkalmas csoporttal például halogénnel mint például fluor klór bróm és jód; ciano; hidroxil; nitro; azido; alkanoil mint például C1 6 alkanoilcsoport mint például acil és hasonlók; karboxamido; alkilcsoportok beleértve 1 és körülbelül 12 közötti számú szénatomot vagy 1 és körülbelül 6 közötti számú szénatomot és elõnyösebben 1 3 szénatomot tartalmazókat; alkenil- és alkinilcsoportok beleértve olyan csoportokat amelyek egy vagy több telítetlen kötést tartalmaznak és 2 és körülbelül 12 vagy 2 és körülbelül 6 közötti számú szénatomot tartalmaznak; alkoxicsoportok amelyek egy vagy több oxigénkötést és 1 és körülbelül 12 közötti számú szénatomot vagy 1 és körülbelül 6 közötti számú szénatomot tartalmaznak; aril-oxi mint például fenoxi; alkil-tiocsoportok beleértve azokat a molekularészeket amelyek egy vagy több tioéterkötést és 1 és körülbelül 12 közötti számú szénatomot vagy 1 és körülbelül 6 közötti számú szénatomot tartalmaznak; alkil-szulfinilcsoportok beleértve azokat a molekularészeket amelyek egy vagy több szulfinilkötést és 1 és körülbelül 12 közötti számú szénatomot vagy 1 és körülbelül 6 közötti számú szénatomot tartalmaznak; alkil-szulfonilcsoportok beleértve azokat a molekularészeket amelyek egy vagy több szulfonilkötést és 1 és körülbelül 12 közötti számú szénatomot vagy 1 és körülbelül 6 közötti számú szénatomot tartalmaznak; amino-alkilcsoportok mint például amelyek egy vagy több N atomot és 1 és körülbelül 12 közötti számú szénatomot vagy 1 és körülbelül 6 közötti számú szénatomot tartalmaznak; karbociklusos aril amely 6 vagy több szénatomot tartalmaz különösen fenil vagy naftil és aralkil mint például benzil. Hacsak másképpen nem jelezzük egy adott esetben szubsztituált csoport a csoport összes szubsztituálható pozíciójában tartalmazhat szubsztituenst és mindegyik szubsztitúció független egymástól. Hacsak másképpen nem mondjuk a találmány magában foglal olyan vegyületeket is amelyek csak egy vagy több izotóposan dúsított atom jelenlétében térnek el. Például a találmány szerinti szerkezetû vegyületek azzal a kivétellel hogy egy hidrogén helyettesítve van deutériummal vagy tríciummal vagy egy szén helyettesítve van 13 C-ben vagy 14 C-ben dúsított szénnel vagy 1 N-ben dúsított nitrogénnel a találmány oltalmi körébe tartozik. A gyógyászatilag elfogadható sók és szolvátok kifejezés alatt bármilyen gyógyászatilag elfogadható sót vagy szolvátot értünk amely a befogadónak történõ beadás esetén képes (közvetlenül vagy közvetetten) a találmány szerinti vegyület biztosítására. Azonban nyilvánvaló hogy gyógyászatilag nem elfogadható sók is hasznosak lehetnek gyógyászatilag elfogadható sók elõállítására. A sók elõállítását a szakterületen ismert eljárásokkal hajthatjuk végre. Például a találmány szerinti vegyületek gyógyászatilag elfogadható sóit megszintetizálhatjuk hagyományos kémiai eljárásokkal szülõi vegyületekbõl amelyek bázisos vagy savas molekularészt tartalmaznak. Általában az ilyen sókat például a vegyületek szabad sav vagy bázis formáinak a reagáltatásával állíthatjuk elõ a megfelelõ bázis vagy sav sztöchiometrikus mennyiségével vízben vagy szerves oldószerben vagy a kettõ keverékében. Általában a nemvizes közeg elõnyös 4

5 mint például éter etil-acetát etanol izopropanol vagy acetonitril. A savaddíciós sók példái közé tartoznak ásványi savaddíciós sók mint például hidroklorid hidrobromid hidrojodid szulfát nitrát foszfát és szerves savaddíciós sók mint például acetát maleát fumarát citrát oxalát szukcinát tartrát malát mandelát metánszulfonát és p¹toluolszulfonát. Az alkáliaddíciós sók példái közé tartoznak szervetlen sók mint például nátrium¹ kálium¹ kalcium¹ ammónium¹ magnézium¹ alumínium- és lítiumsók és szerves alkálisók mint például etilén-diamin etanol-amin NN-dialkil-enetanolamin trietanol-amin glukamin és bázikus aminosav sók. A találmány szerinti vegyületek lehetnek kristályos formában akár szabad vegyületekként akár szolvátokként (például hidrátok) és mindkét forma a találmány oltalmi körébe tartozik. A szolvátképzési eljárások általánosan ismertek a szakterületen. Az alkalmas szolvátok gyógyászatilag elfogadható szolvátok. Egy elõnyös megvalósítási mód szerint a szolvát hidrát. Az (I) általános képletû vegyületek vagy sóik vagy szolvátjaik elõnyösen gyógyászatilag elfogadható vagy lényegében tiszta formában vannak. A gyógyászatilag elfogadható forma alatt többek között a tisztaság gyógyászatilag elfogadható szintjét értjük kizárva a normál gyógyászati adalék anyagokat mint például oldószereket és hordozókat és nem tartalmazva normál adagolási szinteken toxikusnak tekintett anyagokat. A hatóanyag tisztasági szintje elõnyösen 0% feletti elõnyösebben 70% feletti legelõnyösebben 90% feletti. Egy elõnyös megvalósítási mód szerint 9% feletti az (I) általános képletû vegyületre vagy sóira vagy szolvátjaira vonatkoztatva. A fent ismertetett (I) általános képlet által képviselt találmány szerinti vegyületek közé tartozhatnak enantiomerek királis centrumok jelenlététõl függõen vagy izomerek többes kötések jelenlététõl függõen (például Z E). Az egyszerû izomerek enantiomerek vagy diasztereoizomerek és azok keverékei a találmány oltalmi körébe esnek. Azt találtuk hogy a fenti I általános képlet szerinti vegyületek szelektív GSK 3-inhibitorok (nem mutatják más kinázok gátlását) és ezenfelül jó gyógyászati tulajdonságokat mutatnak ami alkalmassá teszi õket gyógyszerfejlesztésre. Sõt a TDZD-gyûrûn található szubsztituensek méretének és kémiai jellegzetességeinek megfelelõ megválasztásával olyan vegyületeket nyertünk amelyek nagyon stabilak plazmabeli molekulákkal mint például glutationnal és BSA-val szemben és jó orális bioelérhetõséget és vér-gát penetrációt mutatnak. R 1 aromás csoportot tartalmaz és ez javítja a stabilitási tulajdonságokat. Egy megvalósítási mód szerint R 1 legalább aromás szénatommal rendelkezik. Más megoldásképpen jó vegyületeket nyerhetünk az aromás gyûrûn található elektrondonor csoportokkal mint például alkoxil- vagy metilén-dioxi-csoportokkal. Habár R 1 bármilyen csoporton keresztül kapcsolódhat a TDZD-hez mindaddig amíg az nem C(O) (a plazmabeli degradáció és gyenge stabilitás miatt) elõnyös ha az aromás csoport közvetlenül kapcsolódik a TDZD nitrogénjéhez. Az R 1 -ként alkalmazható szubsztituensek a következõk: vagy Nagyon jó stabilitási és bioelérhetõségi eredményeket értünk el in vivo terebélyes aromás csoportokkal mint például naftillal. Különösen az alfa-naftil adott jó eredményeket. Amikor az R 1 alfa-naftil elõnyös ha az szubsztituálatlan alfa-naftil. A TDZD 4¹es pozíciójában található szubsztituens esetében elõnyös ha az R a és R b H atom. Egy másik megvalósítási mód szerint elõnyös ha R 2 R 3 R 4 R és R 6 egymástól függetlenül a hidrogén szubsztituált vagy szubsztituálatlan alkil COR 7 C(O)OR 7 OR 7 NR 7 R 8 vagy halogén által alkotott csoportból van kiválasztva. Legelõnyösebben a 4¹es pozícióban található szubsztituens szubsztituálatlan benzil. Találmány szerinti reprezentatív vegyületek a következõk: 4-benzil-2-fenetil¹[124]tiadiazolidin-3-dion 4-benzil-2-difenil-metil- 124-tiadiazolidin-3-dion

6 Táblázat (folytatás) vagy szolvátja elõállítására amely eljárás magában foglalja II általános képlet szerinti benzilszubsztituált izotiocianát reagáltatását 4-benzil-2-naftalen-1-il- [124]tiadiazolidin-3-dion 4-benzil-2-(4¹metoxi-ben- zil)¹[124]tiadiazolidin-3- dion 1 (II) képlet R 1 N=C=O képletû vegyülettel. Például a következõ eljárást alkalmazhatjuk 4¹Nbenzil-szubsztituált tiadiazolidinonok elõállítására: 4-benzil-2-(2¹terc-butil-6- metil-fenil)¹[124]tiadiazolidin-3-dion 1. reakcióséma 4-benzil-2-(4¹metil-benzil)- [124]tiadiazolidin-3-dion 2-benzo[13]dioxol--il-4- benzil-[124]tiadiazolidin- 3-dion 4-benzil-2-(2¹benzil-fe- nil)¹[124]tiadiazolidin-3- dion 4-benzil-2-(4¹fenoxi-fe- nil)¹[124]tiadiazolidin-3- dion és ezek sói és szolvátjai. A fent definiált (I) általános képlet szerinti vegyületeket hozzáférhetõ szintetikus eljárásokkal állíthatjuk elõ. Ezen eljárások némely példáját ismertetik a WO 01/868 számú nemzetközi közzétételi iratban és az US 03/ számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi bejelentésben és az azokban hivatkozott irodalmi helyeken. Ezen dokumentumok tartalma teljes terjedelmében a kitanítás részét képezi. Tehát egy másik megvalósítási mód szerint a találmány tárgya eljárás igénypontok bármelyike szerinti (I) általános képlet szerinti vegyület vagy sója Az 1. reakcióséma szerinti általános kísérletes eljárást ismertetik például a Slomczynska U.; Barany G. Efficient Synthesis of 124-Dithiazolidine-3-diones (Dithiasuccinoylamines) and observations on formation of 124-Thiadiazolidine-3-dione by related Chemistry J. Heterocyclic Chem oldal irodalmi helyen. Például szulfuril-kloridot adunk cseppenként kevertetés mellett nitrogénatmoszférában elõnyösen alacsony hõmérsékleten elõnyösen körülbelül C¹on benzil-izotiocianát és az egyes esetekben megjelölt izocianát oldatához alkalmas oldószerben mint például hexánban éterben vagy THF-ben. Amikor a hozzáadás befejezõdött a keveréket hagyjuk reagálni például kevertetve órán keresztül szobahõmérsékleten. Ezután a kapott terméket izoláljuk hagyományos eljárásokkal mint például szívásos szûréssel vagy az oldószer elpárologtatásával és azután tisztítást végzünk (például újrakristályosítással vagy szilikagéles oszlopkromatográfiával a megfelelõ eluens alkalmazásával). Más alternatív eljárások nyilvánvalóak a szakember számára mint például bármilyen más klórozó reagens alkalmazása a szulfuril-klorid helyett variációk a reagensek hozzáadásában és a reakciókörülményekben (oldószer hõmérséklet stb.). A reakciótermékeket szükség esetén hagyományos eljárásokkal tisztíthatjuk meg mint például kristályosítással kromatográfiával és triturálással. Egy elõnyös gyógyászatilag elfogadható forma a kristályos forma beleértve a gyógyászati készítményben található ilyen formát. A sók és szolvátok esetében a további ionos és szolvát molekularészeknek is nem toxikusnak kell lenniük. A találmány szerinti vegyületek különbözõ polimorf formákban lehetnek jelen és minden ilyen forma a találmány oltalmi körébe tartozik. 6

7 A találmány egy másik aspektusának tárgya eljárás GSK 3 által közvetített betegség kezelésére vagy megelõzésére a fent ismertetett GSK 3-inhibitorral amely eljárás magában foglalja ilyen kezelést igénylõ páciensnek (I) általános képlet szerinti vegyület vagy azt tartalmaz gyógyászati készítmény terápiásan hatásos mennyiségének beadását. A GSK 3 által közvetített betegség vagy GSK 3 által közvetített állapot kifejezések alatt a leírás szerint értelemben bármilyen olyan betegséget vagy más ártalmas körülményt vagy állapotot értünk amelyben a GSK 3 ismert módon szerepet játszik. Ilyen betegségek vagy állapotok nem korlátozó példái közé tartozik a cukorbetegség cukorbetegséggel kapcsolatos állapotok krónikus neurodegeneratív állapotok beleértve demenciákat mint például Alzheimerkór Parkinson-kór progresszív szupranukleáris bénulás szubakut szklerotikus panencefalitikus parkinsonizmus posztencefalitikus parkinsonizmus pugilisztikus encefalitisz guam parkinsonizmus-demencia komplexus Pick-kór kortikobazális degeneráció frontotemporális demencia Huntington-kór AIDS-asszociált demencia amiotrofikus laterális szklerózis sclerosis multiplex és neurotraumatikus betegségek mint például akut stroke epilepszia hangulatbetegségek mint például depresszió szkizofrénia és bipoláris betegség stroke utáni funkcionális gyógyulás elõsegítése cerebrális vérzés (például szoliter cerebrális amiloid angiopátia miatt) hajvesztés elhízottság atheroszklerotikus kardiovaszkuláris betegség magas vérnyomás policisztikus petefészek szindróma X¹szindróma ischaemia agyi sérülés különösen traumás agyi sérülés rák leukopenia Down-kór Lewy-testbetegség gyulladás krónikus gyulladásos betegségek rák és hiperproliferatív betegségek mint például hiperpláziák és immundeficiencia. A találmány egy elõnyös megvalósítási módja szerint az (I) általános képlet szerinti vegyületeket vagy az azokat tartalmazó gyógyászati készítményeket Alzheimer-kór kezelésére alkalmazzuk. A találmány egy másik megvalósítási módja szerint az (I) általános képletû vegyületeket vagy az azokat tartalmazó gyógyászati készítményeket például orális formában cukorbetegség kezelésére alkalmazzuk. A találmány egy másik megvalósítási módja szerint az (I) általános képletû vegyületeket vagy az azokat tartalmazó gyógyászati készítményeket például orális formában depresszió kezelésére alkalmazzuk. A találmány egy másik megvalósítási módja szerint az (I) általános képletû vegyületeket vagy az azokat tartalmazó gyógyászati készítményeket például orális formában agyi sérülés kezelésére alkalmazzuk. A találmány tárgyát képezik továbbá a találmány szerinti vegyületet gyógyászatilag elfogadható sóit vagy sztereoizomerjeit gyógyászatilag elfogadható hordozóval oldószerrel vagy vivõanyaggal együtt tartalmazó készítmények páciensnek történõ beadásra. A gyógyászati készítmények példái közé tartozik bármilyen szilárd (tabletta pirula kapszula granulátum stb.) vagy folyékony (oldat szuszpenzió vagy emulzió) készítmény orális topikális vagy parenterális beadásra. Egy elõnyös megvalósítási mód szerint a gyógyászati készítmények orális formában vannak. Az orális beadásra alkalmas dózisformák lehetnek tabletták és kapszulák és a szakterületen ismert hagyományos excipienseket tartalmazhatnak mint például kötõanyagokat például szirupot akáciát zselatint szorbitolt tragakantot vagy poli(vinil-pirrolidon)¹t; töltõanyagokat például laktózt cukrot kukoricakeményítõt kalciumfoszfátot szorbitolt vagy glicint; tablettázó kenõanyagokat például magnézium-sztearátot; dezintegránsokat például keményítõt poli(vinil-pirrolidon)¹t nátriumkeményítõ-glikolátot vagy mikrokristályos cellulózt; vagy gyógyászatilag elfogadható nedvesítõszereket mint például nátrium-lauril-szulfátot. A szilárd orális készítményeket hagyományos keverési töltési vagy tablettázási eljárásokkal állíthatjuk elõ. Ismételt keverési lépéseket alkalmazhatunk a hatóanyag eloszlatására a készítményekben töltõanyagok nagy mennyiségének alkalmazásával. Ilyen lépések hagyományosak a szakterületen. A tablettákat például nedves vagy száraz granulálással és adott esetben bevonattal készíthetjük el a normál gyógyszerészeti gyakorlatban jól ismert eljárások szerint különösen enterikus bevonattal. A gyógyászati készítményeket adaptálhatjuk parenterális beadásra is mint például steril oldatok szuszpenziók vagy liofilizált termékek formájában a megfelelõ dózisegység alakban. Megfelelõ excipienseket alkalmazhatunk mint például duzzasztószereket vagy felületaktív anyagokat. Az említett kiszereléseket szokásos eljárások alkalmazásával állíthatjuk elõ mint például amelyekre a Spanyol és US Gyógyszerkönyvekben és hasonló referenciaszövegekben hivatkoznak vagy ismertetnek. A találmány szerinti vegyületek vagy készítmények beadását bármilyen alkalmas eljárással elvégezhetjük mint például intravénás infúzióval orális készítményekkel és intraperitoneális és intravénás beadással. Az orális beadás az elõnyös a páciens számára való kényelmessége és sok kezelendõ betegség krónikus jellege miatt. Általában a találmány szerinti vegyület hatásos beadott mennyisége a kiválasztott vegyület relatív hatékonyságától a kezelt rendellenesség súlyosságától és a szenvedõ tömegétõl függhet. Azonban a hatóanyagokat tipikusan naponta egyszer vagy többször adjuk be például naponta vagy 4 alkalommal a 01 és 00 mg/kg/nap közötti tartományba esõ tipikus teljes napi dózissal. A találmány szerinti vegyületeket és készítményeket más drogokkal együtt alkalmazhatjuk kombinációs terápia keretében. A más drogok ugyanazon készítmény részét képezhetik vagy külön készítményként biztosíthatjuk azokat ugyanakkor vagy más idõben történõ beadásra. Egy másik aspektusban a találmány tárgya GSK 3- aktivitás gátlása biológiai mintában az (I) általános képletû vegyülettel amely eljárás magában foglalja a bio- 7

8 lógiai minta érintkeztetését az (I) általános képletû GSK 3-inhibitorral. A biológiai minta kifejezés alatt a leírás szerint korlátozás nélkül az alábbiakat értjük: sejttenyészetek vagy azok extraktumai; enzimpreparátum amely alkalmas in vitro vizsgálati eljáráshoz; emlõsbõl kinyert biopsziás anyag vagy annak extraktumai; és vér nyál vizelet ürülék ondó könny vagy más testfolyadék vagy ezek extraktumai. Ily módon egy aspektusában a találmány tárgya I általános képletû vegyületek alkalmazása biológia vizsgálati eljárások reaktánsaként különösen GSK 3 gátlására szolgáló reagensként. Az következõ példákat a találmány jobb szemléltetése érdekében mutatjuk be. Azok nem értelmezendõk korlátozónak a találmány igénypontokban definiált oltalmi körére vonatkozóan. Szabadalmi példák A vegyületek szintetizálása Általános kísérletes procedúra Szulfuril-kloridot adunk cseppenként kevertetés mellett nitrogénatmoszférában C¹on benzil-izotiocianát és az egyes esetekben megjelölt izocianát oldatához hexánban éterben vagy THF-ben. Amikor a hozzáadás befejezõdött a keveréket órán keresztül kevertetjük szobahõmérsékleten. Ezután a kapott terméket izoláljuk szívásos szûréssel vagy az oldószer elpárologtatásával és azután tisztítást végzünk újrakristályosítással vagy szilikagéles oszlopkromatográfíával a megfelelõ eluens alkalmazásával. Több részlet megtalálható a Slomczynska U.; Barany G. Efficient Synthesis of 124-Dithiazolidine-3-diones (Dithiasuccinoyl-amines) and observations on formation of 124-Thiadiazolidine- 3-dione by related Chemistry J. Heterocyclic Chem oldal irodalmi helyen. 1. példa 2-Fenetil-4-benzil¹(124)-tiadiazolidin-3-dion (1) Reagensek: benzil-izotiocianát (6 mmol 08 ml) fenetil-izocianát (6 mmol 089 ml) és SO 2 Cl 2 (6 mmol 02 ml) dietil-éterben (2 ml). Izolálás: oldószerbepárlás. Tisztítás: szilikagél-oszlopkromatográfia (AcOEt/ hexán 1:4). Kitermelés: 1 g (74%) sárga olaj. 1 H RMN (CDCl 3 ): 29 (t 2H CH 2 CH 2 Ph J=12 Hz); 39 (t 2H CH 2 CH 2 Ph J=72 Hz); 48 (s 2H CH 2 Ph); (m H aromás). 13 C RMN (CDCl 3 ): 349 (CH 2 CH 2 Ph); 49 (CH 2 CH 2 Ph); 462 (CH 2 Ph); 1269; 128; 1286; 1366 (C aromás CH 2 Ph); 1281; 1286; 1286; 130 (C aromás CH 2 CH 2 Ph); 126 (3¹C=O); 166 (¹C=O). Analízis (C 17 H 16 N 2 O 2 S) C H N S. 2. példa 4-Benzil-2-naftalén-1-il¹[124]tiadiazolidin-3-dion (2) Reagensek: benzil-izotiocianát (13 mmol 172 ml) 1¹naftil-izocianát (13 mmol 19 ml) és SO 2 Cl 2 (13 mmol 104 ml) hexánban (0 ml). Izolálás: a reakcióelegy szûrése. Tisztítás: újrakristályosítás EtOH-ból. Kitermelés: 38 g (87%) fehér tûkristályok. Olvadáspont=10 C. 1 H RMN (CDCl 3 ): 49 (s 2H CH 2 Ph); (m 12H aromás.) 13 C RMN (CDCl 3 ): 46 (CH 2 Ph); 1283; 1286; 1290; 130 (C aromás Ph); 1220; 123; 1268; 1272; 127; 128; 18; 1344 (C aromás naftil); 122 (3¹C=O); 169 (¹C=O). Analízis (C 19 H 14 N 2 O 2 S) C H N S. 3. példa (összehasonlító) 2-(1¹Adamantil)-4-benzil¹[124]tiadiazolidin-3- dion (3) Reagensek: benzil-izotiocianát (6 mmol 08 ml) 1¹adamantil-izocianát (6 mmol 11 g) és SO 2 Cl 2 (6 mmol 02 ml) dietil-éterben (2 ml). Izolálás: oldószerbepárlás. Tisztítás: szilikagél-oszlopkromatográfia (AcOEt/hexán 1:4). Kitermelés: 089 g (%) sárga kristályok. Olvadáspont=1288 C. 1 H RMN (CDCl 3 ): 17 (m 6H adamantil); 22 (m 3H adamantil); 23 (m 6H adamantil); 48 (s 2H CH 2 Ph); (m H aromás). 13 C RMN (CDCl 3 ): 299; 0; 39; 410; 0 (C adamantil); 43 (CH 2 Ph); 1278; 128; 1286; 134 (C aromás). Analízis (C 19 H 22 N 2 O 2 S) C H N S. 4. példa 4-Benzil-2-(4¹metil-benzil)¹[124]tiadiazolidin-3- dion (4) Reagensek: benzil-izotiocianát (6 mmol 08 ml) 4¹metil-benzil-izocianát (6 mmol 090 ml) és SO 2 Cl 2 (6 mmol 02 ml) dietil-éterben (2 ml). Izolálás: a reakcióelegy szûrése. Tisztítás: újrakristályosítás MeOH-ból. Kitermelés: 09 g (48%) fehér szilárd anyag olvadáspont 691 C. 1 H RMN (CDCl 3 ): 24 (s 3H CH 3 ); 47 (s 2H CH 2 Ph); 48 (2H s CH 2 Ph); 72 (s 4H aromás); 72 7 (m H aromás). 13 C RMN (CDCl 3 ): 213 (CH); 49 (CH 2 Ph); 48 (CH 2 Ph); 1281; 1286; 1287; 130 (C aromás); 1284; 129; 1311; 1386 (C aromás); 128 (3¹C=O); 167 (¹C=O). Analízis. (C 17 H 16 N 2 O 2 S) C H N S.. példa 4-Benzil 2¹((34-metilén-dioxi)- fenil)¹[124]tiadiazolidin-3-dion () Reagensek: benzil-izotiocianát (6 mmol 08 ml) 34-(metilén-dioxi)-fenil-izocianát (6 mmol 106 ml) és SO 2 Cl 2 (6 mmol 02 ml) dietil-éterben (2 ml). Izolálás: a reakcióelegy szûrése. Tisztítás: újrakristályosítás MeOH-ból. Kitermelés: 14 g (66%) fehér szilárd anyag. Olvadáspont=126 C 8

9 1 H RMN (CDCl 3 ): 49 (s 2H CH 2 Ph); 60 (s 2H O CH 2 O); (m 3H aromás); 73 7 (m H aromás) 13 C RMN (CDCl 3 ): 462 (CH 2 Ph); 1282; 1286; 1290; 1349 (C aromás); 18 (O CH 2 O); 64; 83; 1182; 1290; 1481; 1468 (C aromás); 112 (3¹C=O); 1649 (¹C=O) Analízis. (C 16 H 12 N 2 O 4 S) C H N S. 6. példa 4-Benzil-2-difenil-metil-124-tiadiazolidin-3-dion (6) Reagensek: benzil-izotiocianát (6 mmol 08 ml) difenil-metil-izocianát (6 mmol 123 ml) és SO 2 Cl 2 (6 mmol 02 ml) dietil-éterben (2 ml). Izolálás: a reakcióelegy szûrése. Tisztítás: újrakristályosítás MeOH-ból. Kitermelés: 179 g (80%) fehér szilárd anyag. Olvadáspont=111 C. 1 H RMN (CDCl 3 ): 48 (s 2HCH 2 Ph); 68 (s 1H Ph CH Ph); (m 1 H aromás) 13 C RMN (CDCl 3 ): 49 (CH 2 Ph); 616 (Ph CH-¹Ph); 1280; 1286; 1287; 130 (C aromás); 1281; 128; 128; 137 (2 Ph); 126 (3¹C=O); 168 (¹C=O). Analízis. (C 22 H 18 N 2 O 2 S) C H N S. 7. példa 4-Benzil-2-(4¹metoxi-benzil)¹[124]tiadiazolidin-3- dion (7) Reagensek: benzil-izotiocianát (6 mmol 08 ml) p¹metoxi-benzil-izocianát (6 mmol 092 ml) és SO 2 Cl 2 (6 mmol 02 ml) dietil-éterben (2 ml). Izolálás: oldószerbepárlás. Tisztítás: szilikagél-oszlopkromatográfia (AcOEt/hexán 1:4). Kitermelés: 1 g (61%) sárgás szilárd anyag. Olvadáspont=864 C. 1 H RMN (CDCl 3 ): 38 (s 3H CH 3 ); 47 (s 2H CH 2 Ph OMe); 48(s 2H CH 2 Ph); (m H aromás); 68 (d 2H J=86 Hz); 72 (d 2H J=86 Hz) (aromás). C RMN (CDCl 3 ): 49 (CH 2 Ph); 482 (CH 2 Ph OMe); 2 (O CH 3 ); 1280; 1298; 1284; 130 (C aromás Ph); 1262; 128; 1142; 197 (C aromás Ph OMe); 127 (3¹C=O); 166 (¹C=O). Analízis. (C 17 H 13 N 2 O 3 S) C H N S. 8. példa 4-Benzil-2-(2¹terc-butil-6-metil-fenil)¹(124)- tiadiazolidin-3-dion (8) Reagensek: benzil-izotiocianát (3 mmol 04 ml) 2¹terc-butil-6-metil-izocianát (3 mmol 662 mg) és SO 2 Cl 2 (3 mmol 02 ml) dietil-éterben (1 ml). Izolálás: oldószerbepárlás. Tisztítás: szilikagél-oszlopkromatográfia (AcOEt/ hexán 1:). Kitermelés: 017 g (14%) barna szilárd anyag. Olvadáspont=898 C. 1 H RMN (CDCl 3 ): 14 [s 9H C(CH 3 ) 3 ]; 21 (s 3H CH 3 ); 49 (2d 2H CH 2 Ph J=63 Hz); 71 7 (m 8H aromás). 13 C RMN (CDCl 3 ): 178 (CH 3 ); 319 [C(CH 3 )]; 39 [C(CH 3 )]; 462 (CH 2 Ph); 1261; 1286; 128; (C aromás Bn); 131; 104; 1394; 1281; 129; 1299 (C aromás Ph); 124 (3¹C=O); 167 (¹C=O) Analízis. (C H 22 N 2 O 2 S) C H N S. 9. példa 4-Benzil-2-(2¹benzil-fenil)¹[124]tiadiazolidin-3- dion (9) Reagensek: benzil-izotiocianát (6 mmol 08 ml) 2¹benzil-fenil-izocianát (6 mmol 082 ml) és SO 2 Cl 2 (6 mmol 0 ml) dietil-éterben (2 ml). Izolálás: a reakcióelegy szûrése. Tisztítás: újrakristályosítás EtOH-ból. Kitermelés: 10 g (62%) fehér szilárd anyag. Olvadáspont=149 C. 1 H RMN (CDCl 3 ): 39 (s 2H Ph CH 2 Ph); 486 (s 2H CH 2 Ph); 69 7 (m 14 H aromás). 13 C RMN (CDCl 3 ): 381 (Ph CH 2 Ph); 461 (C H 2 Ph); 131; 128; 1286; 1292 (C Bn); 1389; 1299; 1316; 1284; 1279; 1331 (Ph CH 2 Ph); 19; 1287; 1286; 1264 (Ph CH 2 Ph); 112 (3¹C=O); 1660 (¹C=O) Analízis. (C 22 H 18 N 2 O 2 S) C H N S.. példa 4-Benzil-2-(4¹fenoxi-fenil)¹[124]tiadiazolidin-3- dion () Reagensek: Benzil-izotiocianát (13 mmol 16 ml) 4¹fenoxi-fenil-izocianát (13 mmol 23 ml) és SO 2 Cl 2 (13 mmol 1 ml) dietil-éterben (0 ml). Izolálás: a reakcióelegy szûrése. Tisztítás: újrakristályosítás EtOH-ból. Kitermelés: 412 g (84%) fehér szilárd anyag. Olvadáspont=888 C. 1 H RMN (CDCl 3 ): 492 (s 2H CH 2 Ph); (m 14 H aromás). 13 C RMN (CDCl 3 ): 461 (CH 2 Ph); 1349; 1287; 1291; 1283 (CH 2 Ph); 11; 127; 1192; 163 (Ph O Ph); 163; 1191; 1298; 1238 (Ph O Ph); 111 (3¹C=O); 160 (¹C=O). Analízis. (C 21 H 16 N 2 O 3 S) C H N S. Biológiai eljárások 11. példa GSK 3 -gátlás A GSK 3 -aktivitást rekombináns humán GSK 3 enzim foszfátforrás és GSK 3-szubsztrát keverékének inkubálásával határoztuk meg a megfelelõ tesztvegyület jelenlétében és hiányában és a keverék GSK 3 aktivitásának mérésével. A rekombináns glikogén-szintáz-kináz 3 ¹t MOPS 8 mm ph=73 EDTA 02 mm MgCl 2 mm és nátrium-ortovanadát 02 mm pufferben mértük 62 M foszfo-glikogén-szintáz peptid¹2 (GS¹2) 0 Ci ¹ 33 P- ATP és 12 M végkoncentrációjú jelöletlen ATP jelenlétében. A mérési végtérfogat l volt. perc C¹on történõ inkubálás után 1 l¹es aliquotokat cseppentettünk P81 foszfo-cellulóz-papírokra. A szûrõket négyszer megmostuk egyenként legalább percen keresztül és leszámláltuk 1 ml szcintillációs koktélban szcintillációs számlálón. 9

10 A vegyületek IC 0 -értékeit gátlási görbék elemzésével számítottuk ki nem lineáris regresszióval a Graph- Pad Prism alkalmazásával. Az IC 0 (az a koncentráció amelynél az enzimgátlás 0%¹a mutatkozik) értékeket az 1. táblázatban gyûjtjük össze. 1. táblázat IC 0 -értékek Vegyület R 1 IC 0 GSK 3 ( M) Vegyület R 1 IC 0 GSK 3 ( M) <0 3. (összehasonlító) > példa GSH és BSA kötése Mintapreparálás A vegyületeket (1 mm¹os munkaoldat) percen keresztül inkubáltuk szobahõmérsékleten glutationnal (Sigma) és szarvasmarha-szérumalbuminnal (Fraction V Sigma) ekvimoláris koncentrációkban (1 mm). Ezután az oldatot leszûrtük és elemeztük HPLC-UV/MS-sel. Kromatográfiás eljárások HPLC¹t hajtottunk végre symmetry C18 (21 10 mm 3 m) oszloppal Waters Alliance 269 és 2996 fotodióda mérõsor alkalmazásával és ZQ00 tömegspektrométert alkalmaztunk az analitikai elválasztásra és UV és tömeg meghatározásra. A eluáláshoz alkalmazott gradiens az alábbi volt:

11 Idõ (perc) % A % B Sebesség: 02 ml/perc; hõmérséklet: C; detekció: nm; injekciós térfogat: l. Az eredményeket a 2. táblázatban gyûjtjük össze. Vegyület 2. táblázat % nem kötõdõ vegyület glutation albumin (összehasonlító) A táblázat egyértelmûen azt jelzi hogy az összes vegyület a 3¹as vegyület kivételével amelyben nincs aromás gyûrû esetében a két vizsgált tulajdonság legalább egyikében több mint 0% nem kötõdõ vegyület van. Vannak olyan vegyületek is amelyek esetében több mint 70% nem kötõdõ vegyület van a két vizsgálati eljárásban. Az aromás csoport jelenléte a TDZD 2¹es pozíciójában (R 1 ) egyértelmûen javítja ezen vegyületek tulajdonságait. Ez a hatás nagyobb ha legalább aromás szénatom van jelen a szubsztituensben vagy elektrondor szubsztituensek mint például az ¹ös vagy ¹es vegyületben. Azt is megfigyelhetjük hogy amikor az aromás csoport közvetlenül kapcsolódik a TDZD N atomjához az eredmények jobbak. A legjobb eredményt fenil-oxi-fenil és alfa-naftil esetében kaptuk. Ezek az adatok egyértelmûen jobbak mint a korábbi TDZD vegyületeké. Sõt a korábban ismertetett 24-dibenzil-124-tiadiazolidin-3-dion kisebb szubsztituenssel a tiadiazolidinon 2¹es pozíciójában 171¹es értéket ad a glutationvizsgálati eljárásban és 70¹et az albuminvizsgálati eljárásban sokkal kisebbet mint például a találmány szerinti 4¹es vegyület amelyben egy további metilcsoport van és a 3¹as összehasonlító példa tartományába esik amelyben nincsenek aromás gyûrûk. És az R 1 =benzoilt tartalmazó vegyület lebomlik a vizsgálati eljárás folyamán ily módon sokkal rosszabbul teljesít mint az I képletû vegyületek példa Agyi permeabilitás orális és intravénás beadás után Ezt a vizsgálatot a CIDA S. A. L. Sta Perpétua de Mogola (Barcelona Spain) intézetben hajtottuk végre. A vizsgálat célja a 2¹es vegyület (R 1 =alfa-naftil) farmakokinetikai viselkedésének és az agyszövetbeli lehetséges felhalmozódásának a tanulmányozása volt orális és intravénás beadás után. A Charles River laboratories Spain cégtõl való C7/BL6 egereket (1 g) alkalmaztunk ebben a vizsgálatban. Az összes egér szabadon hozzáférhetett a szárított standard egértáphoz. A víz is ad libitum hozzáférhetõ volt. Az állatokat 4 órán keresztül koplaltattuk a kezelés elõtt de vizet ad libitum kaptak. A beadás után két órával kaptak újra enni. A 2¹es vegyületet 0% PEG0 0% Cremophor elegyben szereltük ki bidesztillált vízzel. A beadás útja egyszeri orális beadás volt g/kg ( ml/kg) és egyszeri intravénás beadás volt 2 mg/kg ( ml/kg) értékben. Egy további kísérletet végeztünk 0 mg/kg értéken az orális útvonalon csak hogy meghatározzuk az abszorpció arányosságát. Négy állatot (2 hím és 2 nõstény) alkalmaztunk mindegyik extrakciós idõpontban. A vért heparinizáltuk és centrifugálás (00 rpm perc C) után két plazma aliquotot tároltunk el C¹on és C¹on az elemzésig (HPLC/MS MS). A kísérleti eredmények összefoglalását a 3. táblázatban mutatjuk be. 3. táblázat Dózis 0 mg/kg mg/kg Cmax ng/ml 9049 ng/ml Bioelérhetõség nem értékeltük 3187% A 2¹es vegyület gyorsan abszorbeálódik a GI¹traktusból az orális beadás után. 6 órás féléletidõt találtunk mg/kg orális beadása után. A 2¹es vegyület 3187% bioelérhetõséget mutatott. A 2¹es vegyület szintjét detektáltuk az agyban mind orális mind intravénás beadás után. Ez azt mutatja hogy a fenti I általános képletû vegyületeknek jó a bioelérhetõsége és alkalmasak gyógyszerfejlesztésre GSK 3 által közvetített betegségek és állapotok kezelésére. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Az (I) általános képletû vegyület (I) képlet 11

12 ahol R 1 jelentése csoport az alábbiak közül választva: 4. A 3. igénypont szerinti vegyület ahol R 2 R 3 R 4 R és R 6 jelentése H atom.. Az 1. igénypont szerinti vegyület amelynek képlete: 6. Az 1. igénypont szerinti vegyület amelynek képlete: 1 7. Az 1. igénypont szerinti vegyület amelynek képlete: vagy 2 R a R b R 2 R 3 R 4 R és R 6 függetlenül a hidrogén szubsztituált vagy szubsztituálatlan alkil szubsztituált vagy szubsztituálatlan cikloalkil szubsztituált vagy szubsztituálatlan alkenil szubsztituált vagy szubsztituálatlan aril szubsztituált vagy szubsztituálatlan heterociklus COR 7 C(O)OR 7 C(O)NR 7 R 8 C=NR 7 CN OR 7 OC(O)R 7 S(O) t ¹R 7 NR 7 R 8 NR 7 C(O)R 8 NO 2 N=CR 7 R 8 vagy halogén közül van kiválasztva ahol R a és R b együtt egy O csoportot alkothat és ahol R a R 2 R 2 R 3 R 3 R 4 R 4 R R R 6 R 6 R b vagy R 7 R 8 közül bármelyik pár együtt ciklusos szubsztituenst alkothat; t értéke vagy 3 R 7 és R 8 mindegyike függetlenül a hidrogén szubsztituált vagy szubsztituálatlan alkil szubsztituált vagy szubsztituálatlan cikloalkil szubsztituált vagy szubsztituálatlan alkenil szubsztituált vagy szubsztituálatlan aril szubsztituált vagy szubsztituálatlan heterociklus szubsztituált vagy szubsztituálatlan alkoxi szubsztituált vagy szubsztituálatlan aril-oxi vagy halogén közül van kiválasztva; 2. Az 1. igénypont szerinti vegyület ahol az R a és R b egyaránt H atom. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti vegyület ahol R 2 R 3 R 4 R és R 6 függetlenül a hidrogén szubsztituált vagy szubsztituálatlan alkil COR 7 C(O)OR 7 OR 7 NR 7 R 8 vagy halogén által alkotott csoportból van kiválasztva ahol R 7 és R 8 jelentése az 1. igénypontban definiált Az 1. igénypont szerinti vegyület amelynek képlete: 9. Az 1. igénypont szerinti vegyület amelynek képlete:. Az 1. igénypont szerinti vegyület amelynek képlete: 12

13 11. Az 1. igénypont szerinti vegyület amelynek képlete: 12. Az 1. igénypont szerinti vegyület amelynek képlete: 13. Az 1. igénypont szerinti vegyület amelynek képlete: 14. Eljárás igénypontok bármelyike szerinti (I) általános képletû vegyület vagy sója vagy szolvátja elõállítására amely eljárás magában foglalja az alábbi (II) képlet II általános képletû benzil-szubsztituált izotiocianát reagáltatását R 1 N=C=O képletû vegyülettel ahol R a R b ésr 1 R 6 jelentése az 1. igénypontban definiált. 1. A 14. igénypont szerinti eljárás amely magában foglalja az alábbi reakciót: ahol R 1 jelentése az 1. igénypontban definiált. 16. Gyógyászati készítmény amely igénypontok bármelyike szerinti vegyületet vagy annak gyógyászatilag elfogadható sóját vagy szolvátját és gyógyászatilag elfogadható hordozót adjuvánst vagy vivõanyagot tartalmaz. 17. A 16. igénypont szerinti gyógyászati készítmény orális beadásra. 18. Az igénypontok bármelyike szerinti vegyület alkalmazása gyógyszer gyártására. 19. A 18. igénypont szerinti alkalmazás ahol a gyógyszer GSK 3 által közvetített betegség vagy állapot kezelésére szolgál.. A 19. igénypont szerinti alkalmazás ahol a betegség vagy állapot cukorbetegség cukorbetegséggel kapcsolatos állapotok krónikus neurodegeneratív állapotok beleértve demenciákat mint például Alzheimerkór Parkinson-kór progresszív szupranukleáris bénulás szubakut szklerotikus panencefalitikus parkinsonizmus posztencefalitikus parkinsonizmus pugilisztikus encefalitisz guam parkinsonizmus-demencia komplexus Pick-kór kortikobazális degeneráció frontotemporális demencia Huntington-kór AIDS-asszociált demencia amiotrofikus laterális szklerózis sclerosis multiplex és neurotraumatikus betegségek mint például akut stroke epilepszia hangulatbetegségek mint például depresszió szkizofrénia és bipoláris betegség stroke utáni funkcionális gyógyulás elõsegítése cerebrális vérzés (például szoliter cerebrális amiloid angiopátia miatt) hajvesztés elhízottság atheroszklerotikus kardiovaszkuláris betegség magas vérnyomás policisztikus petefészek szindróma X¹szindróma ischaemia agyi sérülés különösen traumás agyi sérülés rák leukopenia Down-kór Lewy-testbetegség gyulladás krónikus gyulladásos betegségek rák és hiperproliferatív betegségek mint például hiperpláziák és immundeficiencia. 21. A. igénypont szerinti alkalmazás ahol a betegség Alzheimer-kór. 22. A. igénypont szerinti alkalmazás ahol a betegség II¹es típusú cukorbetegség. 23. A. igénypont szerinti alkalmazás ahol a betegség depresszió. 24. A. igénypont szerinti alkalmazás ahol a betegség agyi sérülés. 2. A. igénypont szerinti alkalmazás ahol a betegség progresszív szupranukleáris bénulás. 26. Az igénypontok bármelyikében definiált (I) képletû vegyületek alkalmazása biológiai vizsgálati eljárás reagenseként elõnyösen GSK 3 gátlásra szolgáló reagensként. 13

14 Kiadja a Magyar Szabadalmi Hivatal Budapest Felelõs vezetõ: Szabó Richárd osztályvezetõ Windor Bt. Budapest