Áramlási citometria elve
|
|
- János Csonka
- 8 évvel ezelőtt
- Látták:
Átírás
1 Áramlási citometria elve Olyan műszer, amely szuszpendált egyedi sejtek fluoreszcens és fényszórási paramétereit méri nagy sebességgel (akár több ezer sejt/sec) Áramlási citometria Fluoreszcens mikroszkópia Fluorimetria Sejtek típusa szuszpendált szuszpendált és kitapadt szuszpendált (v. kitapadt) Sejtszintű feloldás egyedi sejtek (nincs szubcelluláris info.) egyedi sejtek szubcelluláris info. populáció Mért paraméter fluoreszcens és fényszórás elsősorban fluoreszcens elsősorban fluoreszcens Sebesség több ezer sejt/sec néhány sejt/perc NA Manipuláció szortírozás egyedi sejtek manipulációja - 1/34
2 Áramlási citometria működési elve eltérítő kondenzátor lemezek 2/34
3 köpenyfolyadék mintafolyadék Áramlási rendszer A köpenyfolyadék koncentrikus körökben veszi körül a mintafolyadékot (lamináris áramlás). Ezáltal a mintafolyadékot az áramlási fej közepére fókuszálja (hidrodinamikai fókuszálás). A hidrodinamikai fókuszálás célja: a sejtek ott haladjanak, ahol a lézer megvilágítja őket. Tintasugár hidrodinamikai fókuszálása köpenyfolyadék lézerfény Az áramlási cella felülnézete 3/34
4 Sejtszeparálás A piezoelektromos kristály rezgése cseppekre bontja a folyadékoszlopot. A cseppeket a mért fényszórás és fluoreszcens jelek alapján töltik fel pozitív vagy negatív töltéssel. eltérítő kondenzátor lemezek: állandó feszültség van rajtuk. 4/34
5 jet-in-air (áramlás a levegőben): áramlási fej Megvilágítás Az áramlási cella felülnézete DETEKTOR kis NA-jú LENCSE lézerfény. küvetta: az emittált fény sokkal nagyobb %- át detektáljuk áramlás a levegőben lézerfény emittált fény nagy NA-jú LENCSE jet-in-air küvetta. áramlási fej DETEKTOR lézerfény 5/34
6 A fény: A fény és a fluoreszcencia tulajdonságai mind az elektromos, mind a mágneses tér vektor, azaz van irányuk és nagyságuk 630 nm-es sávszűrő: 520 nm-es felüláteresztő (LP): az elektromos tér iránya hullámhossz a mágneses tér iránya fehér fény nm 575 nm-es aluláteresztő (SP): fehér fény >520 nm 550 nm-es dikroikus tükör: >550 nm a terjedés iránya Fluoreszcencia: gerjesztett állapot fehér fény <575 nm gerjesztési szűrő fehér fény emissziós szűrő <550 nm gerjesztési alapállapot spektrum A gerjesztést követően a molekula visszajut az első gerjesztett szint legalsó (ún. vibrációs) alszintjére. Minden további folyamat ebből a helyzetből indul. A fluoreszcencia magasabb hullámhosszú, mint a gerjesztő fény. emissziós spektrum hullámhossz 6/34
7 Detektorok foton Φ elsődleges (foto)-elektron μ sok másodlagos elektron elektronok száma kvantumhatásfok(φ): Φ = 100 fotonok száma erősítés (μ): elektronok végső száma μ = 100 fotoelektronok száma Fotodióda: depléciós zóna - + pl. ha minden dinóda 10 másodlagos elektront bocsát ki, és 8 dinóda van: μ =10 8 bejövő fotonok katód anód ablak dinódák a dinódák egyre pozitívabb feszültségen vannak, és a gyorsuló elektronok a dinódákba ütközve másodlagos elektronokat válatanak ki alacsony kvantumhatásfok magas erősítés felerősített jel magas kvantumhatásfok nulla erősítés p-típusú n-típusú fény indukálta impulzus A kétféle üzemmód: 1. nincs feszültség, 2. záró irányú feszültség - + Fotoelektronsokszorozó (photomultiplier, PMT): Lavina fotodióda (avalanche photodiode): a diódára magas záró irányú feszültséget kapcsolnak, és a fotoelektronok annyira felgyorsulnak, hogy másodlagos elektronokat váltanak ki (μ 0) a fotodióda és a PMT előnyös tulajdonságait kombinálja magas kvantumhatásfok magas erősítés hátrány: magas sötétáram 7/34
8 Detektorok összehasonlítása 8/34
9 Azonos helyen történő gerjesztés esetén PMT4 sávszűrők PMT3 575 BP PMT2 525 BP Detektorok elrendezése I. 488 BP PMT1 cells megvilágító lézer A dikroikus tükrökkel a közös sugárból leválasztanak egyet-egyet, amit még egy optikai filterrel tovább szűrnek. 675 BP 600 DL 550 DL dikroikus tükrök 488 DL FSC Térben szétválasztott gerjesztés esetén térben elválasztott lézersugarak tükör detektorok a kék lézer által gerjesztett fotonok számára detektorok a vörös lézer által gerjesztett fotonok számára tükör detektorok a zöld lézer által gerjesztett fotonok számára 9/34
10 A jel detektálása A detektoron mért jel: terület magasság szélesség 10/34
11 Detektorok elrendezése II. PMT 5 minta áramlási cella dikroikus tükör PMT 2 PMT 4 PMT 3 fényszórás detektor sávszűrő PMT 1 lézer 11/34
12 Az adatok tárolása Az adatok elmentése általában ún. FCS (flow cytometry standard) file-ban történik, ahol minden sejtről elmentik az összes mért adatot = list mode file header $FIL=pi04.LMD $INST=EPICS DIVISION OF COULTER CORPORATION $CYT=Elite $DATE=04-Jan-80 $BTIM=19:21:30 $SRC=tr $SMNO=1 TESTNAME=Peter FITC/pmt4 lin/log TESTFILE=Pe PRO $BYTEORD=12 $DATATYPE=I $NEXTDATA=0 $MODE=L $P1N=FS $P1S=FS $P1R=1024 $P1B=16 $P1E=0,0 $P2N=PMT1... $TOT=25114 adatok FSC SSC FL sejt sejt sejt /34
13 Egydimenziós ábrázolási mód: hisztogram Count logaritmikus skálán FL4-H Az adatok megjelenítése I. ugyanazon adatok Count lineáris skálán FL4-H A logaritmikus skála előnye: összenyomja a skálát a magas értékeknél sok biológiai paraméter lognormális eloszlást mutat, ez log skálán haranggörbének látszik. Hátránya: nulla és negatív számokat nem tud ábrázolni ún. binning artefaktum Megoldás: olyan skála, amely alacsony értékeknél lineáris, magasaknál logaritmikus: hiperlog skála (Cytometry, 64A, 34) Binning artefaktum: úgy tűnik, hogy az alacsony intenzitású populáció elnyúlik balra, és az első csatornában sok sejt halmozódik fel. r HL = lg 1+ x + b d r d 13/34
14 Kétdimenziós ábrázolási módok: 1. dotplot: a két tengelyen egy-egy mért paramétert tüntetünk fel, az ábrán minden pont egy sejtnek felel meg Az adatok megjelenítése II. 2. density plot: az ábrán minden pont színe a sejtek számát jelenti FL4-H 10 2 FL4-H FL1-H 3. contour plot: az azonos sejtszámú pontokat vonalakkal kötik össze FL1-H 4. 3D (surface, felszín) ábra: a sejtek számát a z tengelyen ábrázolják (ritkán alkalmazott) FL4-H 10 2 Count FL1-H E0 10 FL1-H FL4-H 14/34
15 1024 Kapuzás 32 SSC-H lympho Az összes lemért sejt FL4 eloszlása. Count FSC-H Csak a piros kapun (limfociták) belül levő sejtek FL4 eloszlása FL4-H Count FL4-H 15/34
16 Áramlási citométerek Coulter Epics Elite Becton Dickinson FacsVantage DiVa Becton Dickinson FACScan Becton Dickinson FacsArray 16/34
17 Fluorescence intensity 543 nm-es gerjesztés 488 nm-es gerjesztés 100 A488, exc. A488, em. A546, exc. 80 A546, em BP wavelength (nm) Kompenzáció I. Ha egyszerre két fluoreszcens festéket (Alexa488, Alexa546) vizsgálunk, a legtöbb esetben a mért fluoreszcencia intenzitás mindkét festék hozzájárulását tartalmazza. A488channel = I + I S A488 A546 A546 A488 A488channel mért fl. int. az A488 csatornában I A488, I A546 az A488 és A546 festékek tiszta fluoreszcencia intenzitása S A546 A488 spektroszkópiai állandó, ami meghatározza, hogy az A546 festék mennyire világít át az A488 csatornába Hasonló egyenlet írható fel az A546 csatornára is: A546channel = I + I S A546 A488 A488 A Az S faktorokat egyszeresen (pl. csak A488) jelölt mintákkal határozzuk meg, melyek a kompenzáció után vagy vízszintesen vagy függőlegesen helyezkednek el az ábrán. A546 channel nem kompenzált kompenzált A488 channel 17/34
18 Kompenzáció II. Kompenzáció során tiszta, átvilágítástól mentes intenzitásokat számítunk ki. Egyszerű eset: egyirányú átvilágítás, tehát pl. S A546 A488 0, S A488 A546 =0 A488channel = I A488 + I A546 S A546 A488 I A488 = A488channel A546channel S 546 A488 A546channe l = A I A546 Bonyolultabb eset: kétirányú átvilágítás, tehát pl. S A546 A488 0, SA488 A546 0 A488channel A546channel = I = I + I S A488 A546 A546 A488 + I S A546 A488 A488 A546 Kétismeretlenes egyenletrendszert kell megoldani. I I A488 A546 A488channel A546channel S = A546 A488 1 S A546 A488 S A488 A546 A546channel A488channel S = A488 A546 1 S A546 A488 S A488 A546 A logaritmikus skála gyakran félrevezető képet mutat a kompenzációról: úgy tűnik, mintha alulkompenzált lenne. 18/34
19 Quantum dot-ok (qdot, QD) optikai tulajdonságai A kompenzáció elkerülhető, ha olyan fluoreszcens festékeket használunk, melyeknek keskeny az emissziós spektrumuk, ezért csak egy fluoreszcens detektor detektálja őket. Ilyenek pl. a quantum dot-ok. foton vezetési sáv vegyérték sáv lyuk exciton Bohr radius 5.6 nm (CdSe) elektron Széles Széles gerjesztési gerjesztési spektrum spektrum Keskeny Keskeny emissziós emissziós csúcs csúcs Nagy Nagy fotostabilitás fotostabilitás (nincs (nincs photobleaching) photobleaching) A széles gerjesztési spektrum miatt egy, pl. 488 nm-es lézerrel több quantum dot gerjeszthető, és a keskeny emissziós spektrumok miatt a fluoreszcencia átfedés nélkül mérhető. 3 nm 5.5 m 19/34
20 Immunfenotipizálás áramlási citometriával szuszpenziós ill. könnyen szuszpendálható sejtek vizsgálatára alkalmas sejtfelszíni antigéneket (ill. fixált és permeabilizált sejtek intracelluláris antigénjeit) monoklonális antitesttel megjelöljük. Klinikai alkalmazásokban általában elsődlegesen jelölt antitesteket használnak. A B C sejtszám B A C vörös intenzitás B A C B double negative A single positive C double positive Felhasználás: zöld intenzitás zöld intenzitás leukémiák diagnózisa AIDS diagnosztika (CD4 + limfocita szám) 20/34
21 Sejtciklus és DNS tartalom analízis sejtmag 1. a sejteket fixáljuk és permeabilizáljuk, hogy a DNS festék hozzáférjen a DNS-hez 2. a DNS festék (pl. propidium jodid) eljut a sejtmagba, és ott sztöchiometrikusan kötődik a DNS-hez 3. a mért fluoreszcencia intenzitás arányos a sejt DNS tartalmával Alkalmazási terület: daganatos sejtek a normálisnál magasabb DNS tartalommal rendelkeznek magasabb S és G2/M aránnyal rendelkeznek apoptotikus sejtek sub-g1 DNS tartalommal rendelkeznek G1%=79% S%=16% G2/M%=3% G1 intensity=216 G1%=40% S%=39% G2/M%=20% G1 intensity=309 humán diploid sejt JIMT-1 (humán emlőtumor sejtvonal) 21/34
22 FRET gerjesztett állapot donor akceptor alapállapot A gerjesztést követően a molekula visszajut az első gerjesztett szint legalsó (ún. vibrációs) alszintjére. Minden további folyamat ebből a helyzetből indul. FRET esetében a donor molekula közelében található egy akceptor molekula, amely sugárzásnélküli energiaátadással átveszi a donor energiáját. a FRET abban nyilvánul meg, hogy a donor gerjesztését követően az akceptor emittálja a fotont A FRET sebességi állandóját a következő egyenlet írja le: k FRET 4 6 = konst Jn k f R 2 κ 22/34
23 A FRET mérése áramlási citometriával I. Szenzitizált emisszió: az akceptor gerjesztése a donoron keresztül (az akceptor fluoreszkál a donor gerjesztését követően, F AD akceptor fluoreszcencia intenzitás donor jelenlétében; F A akceptor fluoreszcencia intenzitás donor nélkül) E F AD = 1 FA ε Ac ε Dc A D Probléma: nem lehet specifikusan a donort gerjeszteni nem lehet csak az akceptor fluoreszcenciáját detektálni donor gerjesztési donor emissziós akceptor emissziós akceptor gerjesztési akceptor emissziós szűrő Az egyes csatornák közötti átvilágításra korrigálni kell. donor gerjesztési hullámhossz direkt akceptor gerjesztés hullámhossz donor emisszió az akceptor csatornában 23/34
24 A FRET mérése áramlási citometriával II. ( λ ) = I 1 ex, D,λem, D ( λ ) = I 2 ex, D,λem, A I D ( 1 E) + I D ( 1 S E) 1 I A S I A S 2 S I D Eα S I D Eα donor csatorna FRET csatorna S3 3 ( λex, A,λem A )= I D ( 1 E) S3 + I A + I D Eα S1 I, akceptor csatorna donor jel akceptor jel FRET jel S 1 = I I 2, D 1, D S 3 = I I 3, D 1, D S 2 = I I 2, A 3, A S 4 = I I 1, A 3, A α = I I 2 1 ε DL ε L A D A E 1 I1( S1 S2S3) + I2( S3S4 1) + I3( S2 S1S = A = 1 E α I1( S2S3 / S1 1) + I 2( S4 / S2 S3S4 / S1) 4 ) 24/34
25 A FRET mérése áramlási citometriával III. akceptor FRET donor gerjesztés FRET emisszió Donor (pl. CFP) Akceptor (pl. YFP) antitesttel vagy Fab-vel GFP-vel és spektrális variánsaival jelölt fúziós fehérjékkel 25/34
26 A FRET alkalmazása intracelluláris enzimaktivitás és ionkoncentráció mérésére Proteáz szenzorok: Kalcium szenzorok: FRET CFP YFP CFP YFP pl. kaszpáz szenzitív linker -Ca 2+ FRET + 4 Ca 2+ YFP CFP CFP nincs FRET YFP Nature, 388, /34
27 FRET-en alapuló szortírozás Cytometry, 67A, 86. Unsorted 1000 A FRET Nem szortírozott gombasejtek populációja, melyben FRET-et mutató és nem mutató sejtek keverednek egymással CFP-Kip1 Gomba sejteket YFP-CDK2-vel és CFPKip1-gyel transzfektálunk YFP-Cdk CFP-Kip1 Sorted 1000 C FRET CFP-Kip1 volt donor és akceptor nagy volt a FRET csatornában az intenzitás Sorted D Relative frequency of cells YFP-Cdk2 A szortírozott sejtekben csak FRET-et mutató sejtek voltak. B A sejteket az A és B részben feltüntetett kapuknak megfelelően szortíroztuk, és a szortírozást ellenőriztük. Olyan sejteket választottunk ki, ahol Unsorted CFP-Kip1 E Sorted 0.08 Unsorted FRET (%) 27/34
28 Ionkoncentrációk, membránpotenciál és intracelluláris enzimaktivitás mérése aspecifikus észteráz oxonol - indikátor indikátor-am MDR1 pumpa 1. Az indikátor hidrofób, acetoximetilészter (AM) formája átjut a sejtmembránon. 2. Intracellulárisan aspecifikus észterázok hidrolizálják. 3. A felszabaduló, hidrofil indikátor nem képes az elő sejtek membránján átjutni, ezért intracellulárisan felhalmozódik. 4. Az indikátorok egy részének fluoreszcenciája a környezet ionkoncentrációjától függ. oxonol - oxonol - indikátor-am 5. multidrog rezisztencia mérése: az MDR pumpák kipumpálják a sejtekből az indikátort és/vagy annak AM formáját. A calcein olyan indikátor, amely nem indikál semmit, tehát csak a felhalmozódását mérjük, ill. annak hiányát MDR-t mutató sejtekben. 6. A negatív töltésű oxonol a membránpotenciálnak (Nernst egyenlet) megfelelően oszlik meg a membrán két oldalán. Depolarizáció esetén nő a sejtben levő oxonol mennyisége, így nő a sejtek fluoreszcencia intenzitása. Indikátor neve BCECF FURA-2, INDO-1, Fluo-3 SBFI PBFI fluoreszcein-diacetát (FDA) calcein oxonol Mért paraméter ph Ca 2+ Na + K + életképesség, mivel a festék nem (nagyon) érzékeny semmire, csak a felhalmozódását mérjük elő sejteken belül multidrog rezisztencia membránpotenciál 28/34
29 Multiplex bead analízis bead 1 citokin A bead 2 citokin B bead 3 citokin C bead 4 citokin D Különböző színű bead-ek, melyekhez különböző citokinekre specifikus antitest van kötve. bead 1 citokin A bead 2 citokin B bead 3 citokin C bead 4 citokin D A beadek keverékéhez egy sejt lizátumát adják. A beadekhez a lizátumban levő mennyiséggel arányos mennyiségű citokin kötődik. bead 1 citokin A bead 2 citokin B bead 3 citokin C bead 4 citokin D A mintához a bead-ek színétől eltérű színű fluoreszcens festékkel jelölt, citokin ellenes detektáló antitestet adnak, ami kötődik a bead-hez már kikötött citokinhez. intenzitás intenzitás 1 Minden bead populációt külön-külön analizálunk. sejtszám 3 és antitest fluoreszcencia int. A bead-eket egyszerre lehet az áramlási citométeren futtatni. Előny: egy sejten belül egyszerre sok citokin (vagy más fehérje) szintje mérhető. 29/34
30 FCB: fluorescent cell barcoding (fluoreszcens sejt vonalkódolás) Nat. Methods, 3, 361 kevés kék, kevés zöld (A) kontroll stimulus 1 sok kék, kevés zöld (B) kevés kék, sok zöld (C) stimulus 2 stimulus 3 sok zöld, sok kék (D) A sejteket összekeverjük, és megjelöljük egy eltérő színnel megjelölt antitesttel. A sejteket fixáljuk, permeabilizáljuk, és megjelöljük különböző színű és koncentrációjú festékekkel. zöld intenzitás C A D B Minden populációt külön-külön analizálunk. sejtszám B D A C Előny: alacsonyabb antitest felhasználás egyszerre sok minta vizsgálható kék intenzitás antitest fluoreszcencia int. 30/34
31 In vivo áramlási citometria Daganatsejtek követhetők nyomon nyirokerekben in vivo. Cancer Res 67:8223 (2007) In vivo imaging Olympus OV100 Fluoreszcensen jelzett sejtek vizsgálhatók élő állatban, és az áramlási citometriához hasonló ábrák készíthetők. Cancer Res 64:5044 (2004), Nat. Rev. Canc. 3: 921 (2003) 31/34
32 Átmenet a mikroszkópia és az áramlási citometria között Áramlási citometria: sok szuszpenziós sejt analízise gyorsan, automatikusan szubcelluláris felbontóképesség nélkül Mikroszkópia: kevés kitapadt sejt analízise jelentős felhasználói munka árán szubcelluláris információ Képalkotó áramlási citometria: áramlósejtekről képeket készít a sejtek fluoreszcencia intenzitását az áramlási citométerhez hasonlóan megméri, áramlási citométerhez hasonló hisztogram és dot plot formájában megjeleníti az egy és kétdimenziós hisztogramon kiválasztott sejtek képeit vissza lehet keresni a sejteken kolokalizációs és morfológiai analízist is lehet végezni Lézer scanning citométer (LSC): tárgylemezen levő sejteket vizsgál az egész tárgylemezt (tehát nemcsak egy mikroszkóp látóteret) beszkennel alacsony NA-jú objektívvel a sejteket automatikusan azonosítja a sejteken morfológiai és kolokalizációs vizsgálatokat is lehet végezni a sejtek fluoreszcencia intenzitás adatait az áramlási citométeren megszokott egy- és kétdimenziós hisztogram formájában is meg lehet jeleníteni sok sejt mérése automatikusan szubcelluláris felbontóképességgel 32/34
33 Képalkotó áramlási citometria (imaging flow cytometry) 1. A sejtek az áramlási citometriában megszokotthoz hasonló áramlási cellában áramlanak. 2. Az áramlási cellában a sejteknek nemcsak az összes (vagy maximális) fluoreszcencia intenzitását mérjük meg, hanem róluk kép is készül. 3. A sejtek képeit a készülék elmenti és a sejtek fluoreszcencia adatait az áramlási citométerhez hasonlóan elemezhetjük. 33/34
34 Laser scanning cytometry (LSC) 1. A mikroszkóp tárgylemezt a lézersugár végigpásztázza. 2. Magfestés alapján a sejtmagokat a szoftver azonosítja, és a magot, ill. a körülötte levő citoplazmát körülrajzolja (szegmentálás). 3. A sejtek fluoreszcencia intenzitás értékeit a gép kiszámolja, és az áramlási citométeren megszokotthoz hasonlóan elemzi. 34/34
Az áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése, diagnosztikai alkalmazásai
Az áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése, diagnosztikai alkalmazásai Az áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése Kereskedelmi forgalomban kapható készülékek 1 Fogalmak
RészletesebbenAz áramlási citometria elve
Az áramlási citometria elve Olyan műszer, amely szuszpendált egyedi sejtek fluoreszcens és fényszórási paramétereit méri nagy sebességgel (akár több ezer sejt/sec) Áramlási citometria Fluoreszcens mikroszkópia
Részletesebben2011.11.25. Modern Biofizikai Kutatási Módszerek 2011.11.03. Kereskedelmi forgalomban kapható készülékek. Áramlási citometria (flow cytometry)
Modern Biofizikai Kutatási Módszerek 2011.11.03. Kereskedelmi forgalomban kapható készülékek Áramlási citometria (flow cytometry) Eljárás vagy mérési módszer, amellyel folyadékáramban lévő önálló részecskék,
RészletesebbenAz áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése, diagnosztikai alkalmazásai
Az áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése, diagnosztikai alkalmazásai Diagnosztikai és terápiás módszerek biofizikai alapjai Tóth Mónika Ágnes PTE ÁOK Biofizikai Intézet 2010.04.19. Az
RészletesebbenTóth Mónika Ágnes PTE ÁOK Biofizikai Intézet Kereskedelmi forgalomban kapható készülékek
Az áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése, diagnosztikai alkalmazásai Az áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése Biofizika szeminárium Tóth Mónika Ágnes PTE ÁOK Biofizikai
RészletesebbenA lézer-szkenning citometria lehetőségei. Laser-scanning cytometer (LSC) Pásztázó citométer. Az áramlási citometria fő korlátai
Az áramlási citométer bevezetésének fontosabb állomásai A lézer-szkenning citometria lehetőségei Bacsó Zsolt Coulter, 1949 Coulter számláló szabadalmaztatása Crosland-Taylor, 1953 sejtek hidrodinamikai
RészletesebbenPÉCSI TUDOMÁNYEGYETEM ÁLTALÁNOS ORVOSTUDOMÁNYI KAR Áramlási citometria, sejtszeparálás ÁRAMLÁSI CITOMETRIA, SEJTSZEPARÁLÁS BIOFIZIKA 2. 2015. március 3. Dr. Bugyi Beáta Biofizikai Intézet ÁRAMLÁSI folyadékáramban
RészletesebbenRöntgendiffrakció. Grama László május
Röntgendiffrakció Grama László 2012. május Áramlási citometria Visegrády Balázs Biofizika előadás - 2012 Az áramlási citometria - fogalmak Áramlási citometria (flow cytometry) Eljárás, amellyel
RészletesebbenAz áramlási citometria - fogalmak. Áramlási citometria. TörténeZ há]ér 5/21/12. Az áramlási citometria alapjai. alkalmazhatósága.
Az áramlási citometria - fogalmak Áramlási citometria (flow cytometry) Áramlási citometria Visegrády Balázs Biofizika előadás - 2012 Az áramlási citometria alkalmazhatósága Részecskék (sejtek) számlálása
RészletesebbenÁramlási citometria 2011. / 4. Immunológiai és Biotechnológiai Intézet PTE KK
Áramlási citometria 2011. / 4 Immunológiai és Biotechnológiai Intézet PTE KK Az áramlási citometria elve Az áramlási citometria ( Flow cytometria ) sejtek gyors, multiparaméteres vizsgálatára alkalmas
RészletesebbenRövid ismertető. Modern mikroszkópiai módszerek. A mikroszkóp. A mikroszkóp. Az optikai mikroszkópia áttekintése
Rövid ismertető Modern mikroszkópiai módszerek Nyitrai Miklós 2010. március 16. A mikroszkópok csoportosítása Alapok, ismeretek A működési elvek Speciális módszerek A mikroszkópia története ld. Pdf. Minél
RészletesebbenÁramlási citometria, sejtszeparációs technikák. Immunológiai és Biotechnológiai Intézet ÁOK, PTE
Áramlási citometria, sejtszeparációs technikák Immunológiai és Biotechnológiai Intézet ÁOK, PTE Az áramlási citometria elve Az áramlási citometria ( Flow cytometria ) sejtek gyors, multiparaméteres vizsgálatára
RészletesebbenFluoreszcencia módszerek (Kioltás, Anizotrópia, FRET)
Fluoreszcencia módszerek (Kioltás, Anizotrópia, FRET) Biofizika szeminárium PTE ÁOK Biofizikai Intézet Huber Tamás 2014. 02. 11-13. A gerjesztett állapotú elektron lecsengési lehetőségei Gerjesztés Fluoreszcencia
RészletesebbenBevezetés a fluoreszcenciába
Bevezetés a fluoreszcenciába Gerjesztett Excited Singlet szingulett Manifold állapot S1 Jablonski diagram Belső internal konverzió conversion S2 k isc k -isc Triplett állapot Excited Triplet Manifold T1
RészletesebbenRagyogó molekulák: dióhéjban a fluoreszcenciáról és biológiai alkalmazásairól
Ragyogó molekulák: dióhéjban a fluoreszcenciáról és biológiai alkalmazásairól Kele Péter egyetemi adjunktus Lumineszcencia jelenségek Biolumineszcencia (biológiai folyamat, pl. luciferin-luciferáz) Kemilumineszcencia
RészletesebbenSpeciális fluoreszcencia spektroszkópiai módszerek
Speciális fluoreszcencia spektroszkópiai módszerek Fluoreszcencia kioltás Fluoreszcencia Rezonancia Energia Transzfer (FRET), Lumineszcencia A molekuláknak azt a fényemisszióját, melyet a valamilyen módon
RészletesebbenFluoreszcencia módszerek (Kioltás, Anizotrópia, FRET) Modern Biofizikai Kutatási Módszerek
Fluoreszcencia módszerek (Kioltás, Anizotrópia, FRET) Modern Biofizikai Kutatási Módszerek 2012. 11. 08. Fotonok és molekulák ütközése Fény (foton) ütközése a molekulákkal fényszóródás abszorpció E=hν
RészletesebbenAz áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése. Az áramlási citométer diagnosztikai alkalmazásai
Az áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése Az áramlási citométer diagnosztikai alkalmazásai Az áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése Diagnosztikai és terápiás módszerek
RészletesebbenAbszorpció, emlékeztetõ
Hogyan készültek ezek a képek? PÉCI TUDMÁNYEGYETEM ÁLTALÁN RVTUDMÁNYI KAR Fluoreszcencia spektroszkópia (Nyitrai Miklós; február.) Lumineszcencia - elemi lépések Abszorpció, emlékeztetõ Energia elnyelése
RészletesebbenTartalomjegyzék. Emlékeztetõ. Emlékeztetõ. Spektroszkópia. Fényelnyelés híg oldatokban 4/11/2016. A fény; Abszorpciós spektroszkópia
Tartalomjegyzék PÉCS TUDOMÁNYEGYETEM ÁLTALÁNOS ORVOSTUDOMÁNY KAR A fény; Abszorpciós spektroszkópia Elektromágneses hullám kölcsönhatása anyaggal; (Nyitrai Miklós; 2016 március 1.) Az abszorpció mérése;
RészletesebbenHasználati útmutató a Cell Lab Quanta SC (Beckman Coulter) áramlási citométerhez
Használati útmutató a Cell Lab Quanta SC (Beckman Coulter) áramlási citométerhez Tartalom A citométerek általános működési elve... 1 A Cell Lab Quanta SC áramlási citométer sajátosságai... 2 A Cell Lab
RészletesebbenTartalomjegyzék. Emlékeztetõ. Emlékeztetõ. Spektroszkópia. Fényelnyelés híg oldatokban A fény; Abszorpciós spektroszkópia
Tartalomjegyzék PÉCS TUDOMÁNYEGYETEM ÁLTALÁNOS ORVOSTUDOMÁNY KAR A fény; Abszorpciós spektroszkópia Elektromágneses hullám kölcsönhatása anyaggal; (Nyitrai Miklós; 2015 január 27.) Az abszorpció mérése;
RészletesebbenFluoreszcencia 2. (Kioltás, Anizotrópia, FRET)
Fluoreszcencia 2. (Kioltás, Anizotrópia, FRET) Gerjesztés A gerjesztett állapotú elektron lecsengési lehetőségei Fluoreszcencia 10-9 s k f Foszforeszcencia 10-3 s k ph 10-15 s Fizika-Biofizika 2. Huber
Részletesebben6. Fehérjék kimutatása. Biokémiai és sejtszintű vizsgálatok
6. Fehérjék kimutatása. Biokémiai és sejtszintű vizsgálatok Immunaffinitás, ellenanyagok. Western blot, ELISA, FACS, immuncitokémia, mikroszkópok (fény, EM, fluoreszcens, konfokális) 6. Fehérjék kimuatásának
Részletesebben6. Fehérjék kimutatása. Biokémiai és sejtszintű vizsgálatok
6. Fehérjék kimutatása. Biokémiai és sejtszintű vizsgálatok Immunaffinitás, ellenanyagok. Western-blot, ELISA, FACS, immuncitokémia, mikroszkópok (fény, EM, fluoreszcens, konfokális) 6. Fehérjék kimutatásának
RészletesebbenAbszorpciós spektroszkópia
Tartalomjegyzék Abszorpciós spektroszkópia (Nyitrai Miklós; 2011 február 1.) Dolgozat: május 3. 18:00-20:00. Egész éves anyag. Korábbi dolgozatok nem számítanak bele. Felmentés 80% felett. A fény; Elektromágneses
Részletesebben(www.biophys.dote.hu./icys).
1 (www.biophys.dote.hu./icys). A Debreceni Egyetem GVOP-3.2.1.-2004-04-0351/3.0 számú projektje során a Debreceni Egyetem Biofizikai és Sejtbiológiai Intézetében telepítésre került egy nagy értékű képalkotó
RészletesebbenAz áramlási citometria gyakorlati alkalmazása az ondó rutin analízisben. Hajnal Ágnes, Dr Mikus Endre, Dr Venekeiné Losonczi Olga
Az áramlási citometria gyakorlati alkalmazása az ondó rutin analízisben Hajnal Ágnes, Dr Mikus Endre, Dr Venekeiné Losonczi Olga Labmagister Kft aktivitásai HumanCell SynLab Diagnosztika MensMentis LabMagister
RészletesebbenAbszorpciós spektrometria összefoglaló
Abszorpciós spektrometria összefoglaló smétlés: fény (elektromágneses sugárzás) tulajdonságai, kettős természet fény anyag kölcsönhatás típusok (reflexió, transzmisszió, abszorpció, szórás) Abszorpció
Részletesebben6. Fehérjék kimutatása. Biokémiai és sejtszintű vizsgálatok
6. Fehérjék kimutatása. Biokémiai és sejtszintű vizsgálatok Immunaffinitás, ellenanyagok. Western-blot, ELISA, FACS, immuncitokémia, mikroszkópok (fény, EM, fluoreszcens, konfokális) 6. Fehérjék kimutatásának
RészletesebbenAz ellenanyagok orvosbiológiai. PhD kurzus 2011/2012 II. félév
Az ellenanyagok orvosbiológiai alkalmazása PhD kurzus 2011/2012 II. félév Ellenanyaggal működő módszerek Analitikai felhasználás Analitikai felhasználás Ellenanyag / antigén kapcsolódás Az Ab/Ag kapcsolat
RészletesebbenNév... intenzitás abszorbancia moláris extinkciós. A Wien-féle eltolódási törvény szerint az abszolút fekete test maximális emisszióképességéhez
A Név... Válassza ki a helyes mértékegységeket! állandó intenzitás abszorbancia moláris extinkciós A) J s -1 - l mol -1 cm B) W g/cm 3 - C) J s -1 m -2 - l mol -1 cm -1 D) J m -2 cm - A Wien-féle eltolódási
RészletesebbenMézerek és lézerek. Berta Miklós SZE, Fizika és Kémia Tsz. 2006. november 19.
és lézerek Berta Miklós SZE, Fizika és Kémia Tsz. 2006. november 19. Fény és anyag kölcsönhatása 2 / 19 Fény és anyag kölcsönhatása Fény és anyag kölcsönhatása E 2 (1) (2) (3) E 1 (1) gerjesztés (2) spontán
RészletesebbenModern mikroszkópiai módszerek 2 2011 2012
FLUORESZCENCIA MIKROSZKÓPIA A mintának a megvilágító fény által kiváltott fluoreszcencia emisszióját képezzük le. 1 Bugyi Beáta - PTE ÁOK Biofizikai Intézet 2 FLUOROFÓROK BELSŐ (INTRINSIC) FLUORESZCENCIA
RészletesebbenA fluoreszcencia orvosibiológiai. alkalmazásai. Fluoreszcencia forrása I. Fluoreszcencia alkalmazások. Kellermayer Miklós
A fluoresczencia orvosbiológiai alkalmazásai Kellermayer Miklós A fluoreszcencia orvosibiológiai alkalmazásai Fluoreszcencia mikroszkópia DNS szekvenálás (lánc terminációs módszer) DNS festés (EtBr) DNS
RészletesebbenJelátvitel az idegrendszerben:
Jelátvitel az idegrendszerben: Másodlagos hírvivő rendszerek: Feladatuk: Elektromos jel továbbítása a sejtszervecskék felé. Eredmény: Posztszinaptikus receptorok kémiai módosítása (foszforilálás, csatorna
Részletesebben-A homogén detektorok közül a gyakorlatban a Si és a Ge egykristályból készültek a legelterjedtebbek.
Félvezető detektorok - A legfiatalabb detektor család; a 1960-as évek közepétől kezdték alkalmazni őket. - Működésük bizonyos értelemben hasonló a gáztöltésű detektorokéhoz, ezért szokták őket szilárd
RészletesebbenSzívbetegségek hátterében álló folyamatok megismerése a ciklusosan változó szívélettani paraméterek elemzésén keresztül
Dr. Miklós Zsuzsanna Semmelweis Egyetem, ÁOK Klinikai Kísérleti Kutató- és Humán Élettani Intézet Szívbetegségek hátterében álló folyamatok megismerése a ciklusosan változó szívélettani paraméterek elemzésén
RészletesebbenOPTIKA. Fénykibocsátás mechanizmusa fényforrás típusok. Dr. Seres István
OPTIKA Fénykibocsátás mechanizmusa Dr. Seres István Bohr modell Niels Bohr (19) Rutherford felfedezte az atommagot, és igazolta, hogy negatív töltésű elektronok keringenek körülötte. Niels Bohr Bohr ezt
RészletesebbenAz elektromágneses spektrum
Az elektromágneses spektrum 400 nm 750 nm Hőmérsékleti sugárzás 1 Minden test anyagi minőségétől független, csak a test hőmérséklete által meghatározott spektrumú elektromágneses sugárzást bocsát ki, melyet
RészletesebbenDaganat immunterápia molekuláris markereinek tanulmányozása biofizikai módszerekkel. Áramlási és képalkotó citometria
Daganat immunterápia molekuláris markereinek tanulmányozása biofizikai módszerekkel. Áramlási és képalkotó citometria Szöllősi János, Vereb György Biofizikai és Sejtbiológiai Intézet Orvos- és Egészségtudományi
RészletesebbenAbszorpciós fotometria
abszorpció Abszorpciós fotometria Spektroszkópia - Színképvizsgálat Spektro-: görög; jelente kép/szín -szkópia: görög; néz/látás/vizsgálat Ujfalusi Zoltán PTE ÁOK Biofizikai Intézet 2012. február Vizsgálatok
RészletesebbenIn vivo szövetanalízis. Különös tekintettel a biolumineszcens és fluoreszcens képalkotási eljárásokra
In vivo szövetanalízis Különös tekintettel a biolumineszcens és fluoreszcens képalkotási eljárásokra In vivo képalkotó rendszerek Célja Noninvazív módon Biológiai folyamatokat képes rögzíteni Élő egyedekben
RészletesebbenRészletes szakmai beszámoló Az erbb proteinek asszociációjának kvantitatív jellemzése című OTKA pályázatról (F049025)
Részletes szakmai beszámoló Az erbb proteinek asszociációjának kvantitatív jellemzése című OTKA pályázatról (F049025) A pályázat megvalósítása során célunk volt egyrészt a molekulák asszociációjának tanulmányozására
RészletesebbenAntigén ellenanyag kapcsolódás kimutatásán alapuló analitikai módszerek II. Áramlási citofluorimetria Konfokális lézerpásztázó mikroszkópia
Antigén ellenanyag kapcsolódás kimutatásán alapuló analitikai módszerek II. Áramlási citofluorimetria Konfokális lézerpásztázó mikroszkópia Biológiai Intézet Immunológiai Tanszék Uzonyi Barbara 2019.03.25.
RészletesebbenMűszeres analitika. Abrankó László. Molekulaspektroszkópia. Kémiai élelmiszervizsgálati módszerek csoportosítása
Abrankó László Műszeres analitika Molekulaspektroszkópia Minőségi elemzés Kvalitatív Cél: Meghatározni, hogy egy adott mintában jelen vannak-e bizonyos ismert komponensek. Vagy ismeretlen komponensek azonosítása
RészletesebbenMembránpotenciál, akciós potenciál
A nyugalmi membránpotenciál Membránpotenciál, akciós potenciál Fizika-Biofizika 2015.november 3. Nyugalomban valamennyi sejt belseje negatív a külső felszínhez képest: negatív nyugalmi potenciál (Em: -30
RészletesebbenAbszorpciós fotometria
A fény Abszorpciós fotometria Ujfalusi Zoltán PTE ÁOK Biofizikai ntézet 2011. szeptember 15. E B x x Transzverzális hullám A fény elektromos térerősségvektor hullámhossz Az elektromos a mágneses térerősség
RészletesebbenMozgékony molekulák vizsgálata modern mikroszkópiával
Dr. Vámosi György Mozgékony molekulák vizsgálata modern mikroszkópiával Debreceni Egyetem ÁOK Biofizikai és Sejtbiológiai Intézet Debrecen, 2015. nov. 25. www.meetthescientist.hu 1 26 Fulbright ösztöndíj
RészletesebbenKonfokális mikroszkópia elméleti bevezetõ
Konfokális mikroszkópia elméleti bevezetõ A konfokális mikroszkóp fluoreszcensen jelölt minták vizsgálatára alkalmas. Jobb felbontású képeket ad, mint a hagyományos fluoreszcens mikroszkópok, és képes
RészletesebbenVIZSGÁLATA FLOWCYTOMETRIA
TERÁPIAREZISZTENCIA FEHÉRJ RJÉK K MŐKÖDÉSÉNEK M VIZSGÁLATA FLOWCYTOMETRIA ALKALMAZÁSÁVAL Szendi Eszter V. évfolyam Témavezetı: Dr. Vajdovich Péter TDK konferencia, 2008.11.26. Terápiarezisztencia alapvetı
RészletesebbenFény- és fluoreszcens mikroszkópia. A mikroszkóp felépítése Brightfield mikroszkópia
Fény- és fluoreszcens mikroszkópia A mikroszkóp felépítése Brightfield mikroszkópia Történeti áttekintés 1595. Jensen (Hollandia): első összetett mikroszkóp (2 lencse, állítható távolság) 1625. Giovanni
RészletesebbenLumineszcencia Fényforrások
Kiegészítés: színkeverés Lumineszcencia Fényforrások Alapszinek additív keverése Alapszinek kiegészítő szineinek keverése: Szubtraktív keverés Fidy udit Egyetemi tanár 2015, November 5 Emlékeztető.. Abszorpciós
RészletesebbenFluoreszcencia spektroszkópia
Elektromágneses spektrum Fluoreszcencia spektroszkópia Ujfalusi Zoltán A fény: elektromágneses hullám Biofizika szeminárium PTE ÁOK Biofizikai Intézet 2011. február 14-16. Lumineszcencia: a fényt kibocsátó
RészletesebbenFluoreszcencia spektroszkópia
Fluoreszcencia spektroszkópia A fény: elektromágneses hullám Huber Tamás Biofizika szeminárium PTE ÁOK Biofizikai Intézet 2014. február 04-06. 1 Elektromágneses spektrum Lumineszcencia: gerjesztett állapotú
RészletesebbenLumineszcencia. Lumineszcencia. mindenütt. Lumineszcencia mindenütt. Lumineszcencia mindenütt. Alapjai, tulajdonságai, mérése. Kellermayer Miklós
Alapjai, tulajdonságai, mérése Kellermayer Miklós Fotolumineszcencia Radiolumineszcencia Fotolumineszcencia Radiolumineszcencia Aurora borrealis (sarki fény) Biolumineszcencia GFP-egér Biolumineszcencia
RészletesebbenJASCO FTIR KIEGÉSZÍTŐK - NE CSAK MÉRJ, LÁSS IS!
JASCO FTIR KIEGÉSZÍTŐK - NE CSAK MÉRJ, LÁSS IS! Szakács Tibor, Szepesi Ildikó ABL&E-JASCO Magyarország Kft. 1116 Budapest, Fehérvári út 132-144. ablehun@ablelab.com www.ablelab.com JASCO SPEKTROSZKÓPIA
RészletesebbenA fény tulajdonságai
Spektrofotometria A fény tulajdonságai A fény, mint hullámjelenség (lambda) (nm) hullámhossz (nű) (f) (Hz, 1/s) frekvencia, = c/ c (m/s) fénysebesség (2,998 10 8 m/s) (σ) (cm -1 ) hullámszám, = 1/ A amplitúdó
RészletesebbenOrvosi Biofizika I. 12. vizsgatétel. IsmétlésI. -Fény
Orvosi iofizika I. Fénysugárzásanyaggalvalókölcsönhatásai. Fényszóródás, fényabszorpció. Az abszorpciós spektrometria alapelvei. (Segítséga 12. tételmegértéséhezésmegtanulásához, továbbá a Fényabszorpció
RészletesebbenModern fizika laboratórium
Modern fizika laboratórium Röntgen-fluoreszcencia analízis Készítette: Básti József és Hagymási Imre 1. Bevezetés A röntgen-fluoreszcencia analízis (RFA) egy roncsolásmentes anyagvizsgálati módszer. Rövid
RészletesebbenA LÉZERSUGÁRZÁS ALAPVETŐ ISMÉRVEI SPONTÁN VS. INDUKÁLT EMISSZIÓ A FÉNYERŐSÍTÉS FELTÉTELE A POPULÁCIÓ INVERZIÓ FELTÉTELE
A LÉZERSUGÁRZÁS ALAPVETŐ ISMÉRVEI Időbeli inkoherencia Térbeli inkoherencia Polikromatikus fény Kis energia sűrűség Nem poláros fény Spontán emisszió Térbeli koherencia Indukált emisszió Időbeli koherencia
RészletesebbenRöntgensugárzás az orvostudományban. Röntgen kép és Komputer tomográf (CT)
Röntgensugárzás az orvostudományban Röntgen kép és Komputer tomográf (CT) Orbán József, Biofizikai Intézet, 2008 Hand mit Ringen: print of Wilhelm Röntgen's first "medical" x-ray, of his wife's hand, taken
RészletesebbenEgy idegsejt működése. a. Nyugalmi potenciál b. Transzport proteinek c. Akciós potenciál
Egy idegsejt működése a. Nyugalmi potenciál b. Transzport proteinek c. Akciós potenciál Nyugalmi potenciál Az ionok vándorlása 5. Alacsonyabb koncentráció ioncsatorna membrán Passzív Aktív 3 tényező határozza
RészletesebbenLumineszcencia spektrometria összefoglaló
Lumineszcencia spektrometria összefoglaló Ismétlés: fény (elektromágneses sugárzás) elnyelés: abszorpció elektron gerjesztés: excitáció alap és gerjesztett állapot atomi energiaszintek, energiaszintek
Részletesebben2008 Small World contest -18th Prize - Dr. Tamily Weissman (Harvard University - Cambridge, Massachusetts, United States) Specimen: Brainbow
2008 Small World contest -18th Prize - Dr. Tamily Weissman (Harvard University - Cambridge, Massachusetts, United States) Specimen: Brainbow transgenic mouse hippocampus (40x) Technique: Confocal Mikroszkóp
Részletesebbena. Nyugalmi potenciál b. Transzport proteinek c. Akciós potenciál. Nyugalmi potenciál. 3 tényező határozza meg:
Egy idegsejt működése a. Nyugalmi potenciál b. Transzport proteinek c. Nyugalmi potenciál Az ionok vándorlása 5. Alacsonyabb koncentráció ioncsatorna membrán Passzív Aktív 3 tényező határozza meg: 1. Koncentráció
RészletesebbenE (total) = E (translational) + E (rotation) + E (vibration) + E (electronic) + E (electronic
Abszorpciós spektroszkópia Abszorpciós spektrofotometria 29.2.2. Az abszorpciós spektroszkópia a fényabszorpció jelenségét használja fel híg oldatok minőségi és mennyiségi vizsgálatára. Abszorpció Az elektromágneses
RészletesebbenModern Fizika Labor Fizika BSC
Modern Fizika Labor Fizika BSC A mérés dátuma: 2009. május 4. A mérés száma és címe: 9. Röntgen-fluoreszencia analízis Értékelés: A beadás dátuma: 2009. május 13. A mérést végezte: Márton Krisztina Zsigmond
RészletesebbenA Flowcytometriás. en. Sinkovichné Bak Erzsébet,
A Flowcytometriás keresztpróba jelentısége élıdonoros veseátültet ltetést megelızıen. en. Sinkovichné Bak Erzsébet, Schmidt Lászlóné Mikor végezhetv gezhetı el a veseátültet ltetés? Veseátültetés s akkor
RészletesebbenAbszorpciós fotometria
abszorpció A fény Abszorpciós fotometria Ujfalusi Zoltán PTE ÁOK Biofizikai Intézet 2013. január Elektromágneses hullám Transzverzális hullám elektromos térerősségvektor hullámhossz E B x mágneses térerősségvektor
RészletesebbenLumineszcencia spektroszkópia
Lumineszcencia spektroszkópia Elektron+vibrációs+rotációs-spektroszkópia alapjai 213. február Fizika-Biofizika II. szemeszter Orbán József PTE ÁOK Biofizikai Intézet Definíciók, törvények SPEKTROSZKÓPIAI
RészletesebbenLumineszcencia. Dr. Vámosi György
Lumineszcencia Dr. Vámosi György Lumineszcencia Lumineszcencia: gerjesztett molekulák fényemissziója a hőmérsékleti sugárzáson kívül, hideg emisszió Fluoreszcencia: szinglet-szinglet átmenet Foszforeszcencia:
RészletesebbenLumineszcencia: a fényt kibocsátó rendszer nem a magas hőmérséklet miatt világít!!! Ez az ún. hideg emisszió
Fluoresz Fluores zcenc cencia ia spektroszkópia Lumineszcencia: a fényt kibocsátó rendszer nem a magas hőmérséklet miatt világít!!! Ez az ún. hideg emisszió emisszió jelensége. Orbán József Biofizika szeminárium
RészletesebbenSpeciális fluoreszcencia spektroszkópiai alkalmazások. Emlékeztető: az abszorpció definíciója. OD = A = - log (I / I 0 ) = ε (λ) c x
Speciális fluoreszcencia spektroszkópiai alkalmazások Nyitrai Miklós; 2011 február 21. FRET Emlékeztető: az abszorpció definíciója I 0 I anyag OD = A = - log (I / I 0 ) = ε (λ) c x Röv: optical density
RészletesebbenAz áramlási citometria alkalmazási területei
Áramlási citométer Az áramlási citometria alkalmazási területei Hogyan működik? I.Lamináris áramlás, - hidrodinamikus fókuszálás - akusztikus fókuszálás (>2MHz UH) II.Optika (fényforrás, szűrők, tükrök,
RészletesebbenAbszorpciós fotometria
2013 január Abszorpciós fotometria Elektron-spektroszkópia alapjai Biofizika. szemeszter Orbán József PTE ÁOK Biofizikai ntézet Definíciók, törvények FÉNYTAN ALAPOK SMÉTLÉS - Elektromágneses sugárzás,
RészletesebbenRÉSZLETES BESZÁMOLÓ Az OTKA által támogatott konzorcium működésében az Uzsoki utcai Kórház feladata a szövetminták gyűjtése, előzetes feldolgozása, ill. a betegek utánkövetése, valamint az utánkövétésre
RészletesebbenHLA-B27 pozitivitás vizsgálati lehetőségei
HLA-B27 pozitivitás vizsgálati lehetőségei Pálinkás László, Uherkovichné Paál Mária, Berki Timea Pécsi Tudományegyetem Klinikai Központ Immunológiai és Biotechnológiai Intézet HLA-B27 Humán Leukocita Antigén
RészletesebbenLézerek. A lézerműködés feltételei. Lézerek osztályozása. Folytonos lézerek (He-Ne) Impulzus üzemű lézerek (Nd-YAG, Ti:Sa) Ultrarövid impulzusok
Lézerek Lézerek A lézerműködés feltételei Lézerek osztályozása Folytonos lézerek (He-Ne) Impulzus üzemű lézerek (Nd-YAG, Ti:Sa) Ultrarövid impulzusok Extrém energiák Alkalmazások A lézerműködés feltételei
Részletesebben1. Atomspektroszkópia
1. Atomspektroszkópia 1.1. Bevezetés Az atomspektroszkópia az optikai spektroszkópiai módszerek csoportjába tartozó olyan analitikai eljárás, mellyel az anyagok elemi összetételét határozhatjuk meg. Az
RészletesebbenAtomfizika. Fizika kurzus Dr. Seres István
Atomfizika Fizika kurzus Dr. Seres István Történeti áttekintés J.J. Thomson (1897) Katódsugárcsővel végzett kísérleteket az elektron fajlagos töltésének (e/m) meghatározására. A katódsugarat alkotó részecskét
RészletesebbenOptikai spektroszkópiai módszerek
Mi történhet, ha egy mintát fénnyel világítunk meg? Optikai spektroszkópiai módszerek megvilágító fény (elnyelt fény) minta átjutott fény Abszorpció UV-VIS, IR Smeller László kibocsátott fény Lumineszcencia
RészletesebbenDr. JUVANCZ ZOLTÁN Óbudai Egyetem Dr. FENYVESI ÉVA CycloLab Kft
Dr. JUVANCZ ZOLTÁN Óbudai Egyetem Dr. FENYVESI ÉVA CycloLab Kft Atom- és molekula-spektroszkópiás módszerek Módszer Elv Vizsgált anyag típusa Atom abszorpciós spektrofotometria (AAS) A szervetlen Lángfotometria
RészletesebbenADATÉRTÉKEL ELJÁRÁSOK SEJTFELSZÍNI FEHÉRJEMINTÁZATOK ANALÍZISÉRE SZENTESI GERGELY
ADATÉRTÉKEL ELJÁRÁSOK SEJTFELSZÍNI FEHÉRJEMINTÁZATOK ANALÍZISÉRE SZENTESI GERGELY Témavezet k: Dr. Mátyus László Dr. Jenei Attila DEBRECENI EGYETEM ORVOS ÉS EGÉSZSÉGTUDOMÁNYI CENTRUM ÁLTALÁNOS ORVOSTUDOMÁNYI
RészletesebbenSzerves oldott anyagok molekuláris spektroszkópiájának alapjai
Szerves oldott anyagok molekuláris spektroszkópiájának alapjai 1. Oldott molekulában lejátszódó energetikai jelenségek a Jablonski féle energia diagram alapján 2. Példák oldatok abszorpciójára és fotolumineszcenciájára
Részletesebben11.3. Az Achilles- ín egy olyan rugónak tekinthető, amelynek rugóállandója 3 10 5 N/m. Mekkora erő szükséges az ín 2 mm- rel történő megnyújtásához?
Fényemisszió 2.45. Az elektromágneses spektrum látható tartománya a 400 és 800 nm- es hullámhosszak között található. Mely energiatartomány (ev- ban) felel meg ennek a hullámhossztartománynak? 2.56. A
RészletesebbenÁttekintés 5/11/2015 MIKROSZKÓPIAI MÓDSZEREK 1 FÉNYMIKROSZKÓPIA FLUORESZCENCIA MIKROSZKÓPIA. Mikroszkópia, fénymikroszkópia
forrás: ldutolsó dia PÉCSI TUDOMÁNYEGYETEM ÁLTALÁNOS ORVOSTUDOMÁNYI KAR www.aok.pte.hu MIKROSZKÓPIAI MÓDSZEREK 1 FÉNYMIKROSZKÓPIA FLUORESZCENCIA MIKROSZKÓPIA humán tüdőszövet (hisztológia) sejtmozgás (fázis
RészletesebbenTermodinamikai egyensúlyi potenciál (Nernst, Donnan). Diffúziós potenciál, Goldman-Hodgkin-Katz egyenlet.
Termodinamikai egyensúlyi potenciál (Nernst, Donnan). Diffúziós potenciál, Goldman-Hodgkin-Katz egyenlet. Biológiai membránok passzív elektromos tulajdonságai. A sejtmembrán kondenzátorként viselkedik
RészletesebbenRöntgen-gamma spektrometria
Röntgen-gamma spektrométer fejlesztése radioaktív anyagok elemi összetétele és izotópszelektív radioaktivitása egyidejű meghatározására Szalóki Imre, Gerényi Anita, Radócz Gábor Nukleáris Technikai Intézet
RészletesebbenMűszeres analitika II. (TKBE0532)
Műszeres analitika II. (TKBE0532) 4. előadás Spektroszkópia alapjai Dr. Andrási Melinda Debreceni Egyetem Természettudományi és Technológiai Kar Szervetlen és Analitikai Kémiai Tanszék A fény elektromágneses
RészletesebbenSejttenyésztési alapismeretek
Sejttenyésztési alapismeretek 1. Bevezetés A sejteknek ún. sejtkultúrákban történő tenyésztése (a sejteket az eredeti helyükről eltávolítva in vitro tartjuk fenn ill. szaporítjuk) és tanulmányozása több
RészletesebbenMérés: Millikan olajcsepp-kísérlete
Mérés: Millikan olajcsepp-kísérlete Mérés célja: 1909-ben ezt a mérést Robert Millikan végezte el először. Mérése során meg tudta határozni az elemi részecskék töltését. Ezért a felfedezéséért Nobel-díjat
RészletesebbenBiomolekuláris szerkezeti dinamika
Kísérletek, mérések célja Biomolekuláris szerkezeti dinamika Kellermayer Miklós Biomolekuláris szerkezet és működés pontosabb megismerése (folyamatok, állapotok, átmenetek, kölcsönhatások, stb.) Rádióspektroszkópiák
RészletesebbenLumineszcencia. Lumineszcencia. Molekulaszerkezet. Atomszerkezet
Lumineszcencia Lumineszcencia Alapok, tulajdonságok Molekula energiája Spinállapotok Lumineszcencia típusai Lumineszcencia átmenetei A lumineszcencia paraméterei A lumineszcencia mérése Polarizáció, anizotrópia
RészletesebbenMULTIDROG REZISZTENCIA IN VIVO KIMUTATÁSA PETEFÉSZEK TUMOROKBAN MOLEKULÁRIS LEKÉPEZÉSSEL
MULTIDROG REZISZTENCIA IN VIVO KIMUTATÁSA PETEFÉSZEK TUMOROKBAN MOLEKULÁRIS LEKÉPEZÉSSEL Dr. Krasznai Zoárd Tibor Debreceni Egyetem OEC Szülészeti és Nőgyógyászati Klinika Debrecen, 2011. 10.17. Bevezetés
RészletesebbenModern mikroszkópiai technikák
Modern mikroszkópiai technikák NAGYFELBONTÁSÚ MIKROSZKÓPIA Szabó-Meleg Edina Hiszem, ha látom, tartja a mondás. Mindig többet és többet szeretnénk látni minél részletgazdagabban. 1. ábra www.zeiss.com/microscopy
RészletesebbenFizikai kémia és radiokémia labor II, Laboratóriumi gyakorlat: Spektroszkópia mérés
Fizikai kémia és radiokémia labor II, Laboratóriumi gyakorlat: Spektroszkópia mérés A gyakorlatra vigyenek magukkal pendrive-ot, amire a mérési adatokat átvehetik. Ajánlott irodalom: P. W. Atkins: Fizikai
RészletesebbenMódszer az ASEA-ban található reaktív molekulák ellenőrzésére
Módszer az ASEA-ban található reaktív molekulák ellenőrzésére Az ASEA-ban található reaktív molekulák egy komplex szabadalmaztatott elektrokémiai folyamat, mely csökkenti és oxidálja az alap sóoldatot,
RészletesebbenModern Fizika Labor. Fizika BSc. Értékelés: A mérés dátuma: A mérés száma és címe: 5. mérés: Elektronspin rezonancia. 2008. március 18.
Modern Fizika Labor Fizika BSc A mérés dátuma: 28. március 18. A mérés száma és címe: 5. mérés: Elektronspin rezonancia Értékelés: A beadás dátuma: 28. március 26. A mérést végezte: 1/7 A mérés leírása:
RészletesebbenMembránpotenciál. Nyugalmi membránpotenciál. Akciós potenciál
Membránpotenciál Vig Andrea 2014.10.29. Nyugalmi membránpotenciál http://quizlet.com/8062024/ap-11-nervous-system-part-5-electrical-flash-cards/ Akciós potenciál http://cognitiveconsonance.info/2013/03/21/neuroscience-the-action-potential/
Részletesebben