Hagyományos kínai gyógynövények az alfa-szinuklein amiloid képződés gátlásában
|
|
- Károly Veres
- 8 évvel ezelőtt
- Látták:
Átírás
1 Tudományos Diákköri Dolgozat GELENCSÉR ANNAMÁRIA Hagyományos kínai gyógynövények az alfa-szinuklein amiloid képződés gátlásában Dr. Tompa Péter MTA-SZBK Enzimológiai Intézet Eötvös Loránd Tudományegyetem Természettudományi Kar Budapest, 2010
2 Tartalomjegyzék Köszönetnyilvánítás..3 Bevezetés 4 Amiloidózis 6 1. Az amiloid kialakulásának kinetikája Az amiloid szerkezeti modellje.6 3. A lag-fázis idejének csökkentése..8 Hagyományos kínai gyógynövények (Traditional Chinese Medicine, TCM) használata 10 Munkám célja..12 Kísérleti rész 13 α-synuclein kifejeztetése (WT, A30P, A53T, E46K)...13 Amiloid képződés nyomon követése.14 Módszerek.15 Eredmények Kinetika Fémionok hatása TCM-ek hatása #1 TCM #2, #6 TCM hatása az amiloid képződésre #2, #6 TCM hatása a kialakult amiloid szálakra..21 Következtetések...24 Függelék...25 Irodalom
3 Köszönetnyilvánítás Elsődlegesen hálás köszönet Dr. Tompa Péternek, az Enzimológiai Intézet csoportvezetőjének, aki amellett, hogy mentorom volt a teljes kutatási tevékenység során, jelen dolgozat elkészüléséhez is nagyban hozzájárult. Köszönettel tartozom Dr. Buday László igazgatónak is, amiért engedélyezte, hogy kutatómunkámat az Enzimológiai Intézetben folytassam. Köszönetet mondok továbbá Ságiné Házy Eszter Ph.D. hallgatónak a kutatási folyamatban nyújtott támogatás, a kutatási anyagok feltétel nélküli rendelkezésre bocsátása, valamint a kutató-lét során megtett első lépések levezénylése miatt. Ezen felül köszönet illeti kínai együttműködő partnerünket, Jingyan Zhang professzor asszonyt, aki amellett, hogy rendelkezésünkre bocsátotta a kínai gyógynövénykivonatokat, biztosította a dolgozathoz elengedhetetlenül szükséges háttérirodalmat különös tekintettel a számomra leküzdhetetlen akadályokat jelentő nyelvi nehézségek áthidalására. Emellett köszönet Dr. Mező Gábornak, az ELTE oktatójának, aki amellett, hogy lehetővé tette számomra az Enzimológiai Intézettel való kapcsolatfelvételt, ígéretet tett arra, hogy belső konzulensként egy majdani diplomadolgozat folyamán segíti e téma továbbélését a TDK keretein túl is. Továbbá köszönet mindenkinek, aki ötletekkel, tanácsokkal és építő kritikával segítette a kutatást és a TDK dolgozat előmenetelét. 3
4 Bevezetés Bár a Parkinson-kórra, napjaink második leggyakoribb neurodegeneratív betegségére (az első az Alzheimer-kór) utaló tüneti feljegyzéseket évezredekkel korábbról találhatunk, magát a betegséget kevesebb, mint 200 éve, egészen pontosan 1817-ben írta le először névadója, James Parkinson. A lassú lefutású, legfőképpen az agy substantia nigra (1. ábra) részében lévő idegsejtek degenerációját okozó Parkinson-kór- tipikusan öregkori betegség, nagyrészt a 60 év felettieket sújtja. A betegség tipikus tüneteit a dopaminerg (dopamin neurotranszmitterrel működő) idegsejtek elvesztése okozza, amelyek a teljesség nélkül a következők: remegés, a mozgásszervek merevsége és lassulása, apróléptű, csoszogó járás, mimikaszegénység, egyensúlyzavarok. A felsorolt fizikai tünetek azonban nagyon gyakran pszichés problémákkal, úgy mint- szorongás, alvászavar és depresszió is együtt járnak.. Mivel a tüneteket a dopamin hiánya okozza, a dopaminszintet helyreállító gyógyszerekkel lehetséges a betegség tüneti kezelése, a sejtpusztulás megakadályozására azonban a mai ismereteink szerint nincs mód [1]. 1. ábra: A substantia nigra helye az agyban 2. ábra: Lewy-testek mikroszkópos felvétele A kór klinikai markere az ún. Lewy-testek (2. ábra) jelenléte [2], amelyek az idegsejtekben lerakódó toxikus aggregátumok, melyek kiváltják a neuronok pusztulását. Fő komponensük az α-szinuklein nevű fehérje, mely elsősorban a preszinaptikus terminálokon fordul elő, funkciója egyelőre még nem tisztázott, a közvélekedés szerint azonban a szinaptikus transzmisszió befolyásolásában játszhat szerepet [1]. Az α-szinuklein rövid (140 aminosav hosszú), jól oldódó, hőstabil, rendezetlen fehérje [6], melynek 3 öröklődő, szintén a Parkinson kórhoz köthető mutánsa, A53T [3], A30P [3, 4] és E46K [5], ismert. 4
5 A fehérje három régiót tartalmaz: egy amfipatikus N-terminális régiót ( aminosav), egy ún. NAC [Függ.][7] részt ( aminosav) és egy prolinban és savas aminosavakban gazdag C-terminális részt ( aminosav). A leginkább hidrofób, és ennek következtében β-konformációba való rendeződésre hajlamos része a NAC régió -aminek ezért kulcsszerepe van az aggregátumok kialakulásában-, míg legrendezetlenebb régiója a C-terminális rész, amint azt szemléletesen rendezetlenséget jósló programmal (pl. IUPred [Függ.]) mutatható be (3.ábra). 3. ábra: Rendezetlenség jóslása, szekvencia alapján IUPred programmal Az α-szinuklein szekvencia további érdekessége az alábbi ábrán szemléltetésre kerülő 6 aminosavból álló, hétszer, nem teljesen konzerváltan megismétlődő KTKEGV motívum (4. ábra) MDVFMKGLSK AKEGVVAAAE KTKQGVAEAA GKTKEGVLYV GSKTKEGVVH GVATVAEKTK EQVTNVGGAV VTGVTAVAQK TVEGAGSIAA ATGFVKKDQL GKNEEGAPQE GILEDMPVDP DNEAYEMPSE EGYQDYEPEA 4. ábra: α-szinuklein szekvencia, az ismétlődő motívumokkal A motívum a fent említett mutánsokban is megmarad: az A30P mutáns a 2. és 3., az A53T a 4. és 5. ismétlődés között helyezkedik el, míg az E46K a 4. ismétlődő szakaszban található. A NAC régió tekintetében azonban eddig még nem találtak mutációt. Az α-szinuklein más neurodegeneratív betegségekben is szerepet játszik, úgy, mint például az agykérgi Lewy-test demencia (LBD), Alzheimer-kór, multiple system atrophy (MSA), amiotróp laterális szklerózis (ALS), Hallervorden-Spatz szindróma, és a now called neurodegeneration with brain iron accumulation type 1 (NBIA 1), mely betegségeket az irodalomban synucleopathies (szinukleinopátiák) gyűjtőnéven nevezik [8]. 5
6 Mivel a betegségek mindegyikében lassú, halálos és az orvostudomány jelen állása szerint gyógyíthatatlan folyamatról van szó, alapvető fontosságú lehet a betegség hátterében álló fehérje aggregációjának (amiloidképzésének) megakadályozására, illetőleg a képződött aggregátumok szétszedésére vonatkozó kutatások. Amiloidózis 1. Az amiloid kialakulásának kinetikája [1] Az amiloid szál kialakulása a fehérje alapvető szerkezeti átrendeződésével jár, mely a natív állapot stabilitása miatt lassan megy végbe, ezért egy kritikus méretű rost kialakulása sebesség-meghatározó az amiloidok képződésének szempontjából. Többek között ezért, in vitro a folyamat 3 fázisra bontható: az első az előbbiekben megindokolt úgynevezett lag-fázis (késleltetés, a kritikus rostok kialakulása), amit egy gyors növekedési fázis követ, végezetül pedig telítési görbébe megy át a folyamat. A késleltetés in vivo is megfigyelhető, nagyrészt ennek köszönhető, hogy a betegségek csak idős korban jelentkeznek. 2. Az amiloid szerkezeti modellje A szinukleionopátiák, és más neurodegeneratív betegségek hátterében is fehérje aggregátumok amiloidok kialakulása áll. Az amiloid képződés egy fehérjeszerkezeti hiba, melynek lényege, hogy a párhuzamosan futó peptidláncok között az aminosav-sorrendtől függetlenül- hidrogénhidak alakulhatnak ki, melyek így β-szerkezetet alkotnak. Ez a szerkezet sok esetben a láncban található aminosavaktól függetlenül stabil, ezért kialakulásával gyakorlatilag minden fehérje esetében számolni kell. Ez azt jelenti, hogy akárhány, ily módon párhuzamosan futó lánc összekapcsolódhat és óriásméretű- akár szabad szemmel is láthatóaggregátumot képezhet, melynek kialakulása gyakran irreverzibilis folyamat. Az ily módon képződött aggregátumokat hívjuk amiloidoknak. 6
7 5. ábra: Az amiloid kialakulásának sémája[1] A fenti ábrán bemutatott képződési folyamat az alábbi lépésekből, egységekből áll: a) A fehérje natív állapotban van. b) Külső behatások, vagy mutáció hatására a szerkezet felbomlik, egyfajta olvadt állapotba kerül. Rendezetlen fehérjéknél ez az állapot tekinthető natív állapotnak. c) Teljesen kitekeredett, denaturált állapot d) A polipeptidlánc bizonyos szakaszai a szomszédos fehérjével hidrogénhidakon keresztül összekapcsolódnak. Ez gyakran időben a leghosszabb szakasz. Egy kritikus méret fölött az aggregáció irreverzibilis, további fehérjemolekulák befogásával egyre nő a lánc. e) Amiloid rostokká alakul az aggregátum. Ezek a rostok a szervezet különböző pontjain lerakódnak, és toxikusságuk révén elpusztítják a sejteket. Az előbbiekben, kinetikai és elméleti megfontolások alapján megfogalmazott képződési folyamat a gyakorlatban is jól nyomon követhető, az alábbi AFM-el [Függ.] rögzített sorozaton (6. ábra), amelynek keretében először csak a kezdeti oligomerek/kis rostok láthatók, majd az egyre nagyobb hosszúságú és számú amiloid szálak is megfigyelhetővé válnak. 7
8 6. ábra: Amiloid képződés (nem publikált eredmények, Ságiné Házy Eszter által készített felvétetek a hollandiai Twente- Egyetemen) 3. A lag-fázis idejének csökkentése A lag-fázis hossza nagyban függ a körülményektől, hiszen in vitro kísérletekbenamelyek során az amiloid képződését fluoreszcens festékkel Tioflavin-T-vel [ThT, Függ.] követik nyomon [11]- bizonyították, hogy a késleltetést befolyásolja egyrészt a ph (7. ábra), másrészt a hőmérséklet (8. ábra), valamint a fehérje-koncentráció (9. ábra). Ezeket a változásokat érzékeltetik az alábbi ábrák. 7. ábra: ph hatása az amiloid képződés sebességére [9} 8. ábra: hőmérséklet hatása az amiloid képződés sebességére [9] 8
9 9. ábra: fehérje-koncentráció hatása az amiloid képződés sebességére [10] A fent említetteken kívül nehézfém-ionok jelenléte is hatással van az amiloid képződésre. Egy as michigani felmérés szerint szignifikánsan nagyobb volt a Parkinson-kór általi halálozás aránya, olyan területeken élőknél, ahol a lakóhely közelében papír-, vas- illetve réz feldolgozó gyárak voltak [12]. A betegek agyában a substantia nigra terület megnövekedett redox-aktív iontartalma (pl. réz, vas) alapján úgy gondolják, az oxidatív stressz is szerepet játszhat az idegsejtek pusztulásában. In vitro kísérletek kimutatták, hogy a többértékű fémionok lényegesen gyorsítják, és így elősegítik az amiloid képződést (10. ábra). A fémionok megváltoztatják a fehérje környezetében a töltéssűrűséget, ezáltal elősegítik a rendezetlen α-szinuklein szerkezetváltozását. 10. ábra: Fémionok hatása az amiloid képződésre ([M n+ ] = 2mM) [10] 9
10 Hagyományos kínai gyógynövények (Traditional Chinese Medicine, TCM) használata A modern szintetikus gyógyszerek orvoslásban betöltött szerepe mellett újra előtérbe kerül a gyógynövények használata is. Kínában egyrészt nagy hagyománya van a gyógyhatású növények alkalmazásának, másrészt széleskörűen kiterjedt adatbázis áll rendelkezésre az alkalmazásuk során elsajátított tapasztalatokról, valamint a különböző füvek betegségekre való hatásáról. Ma teljes kutatóintézetek foglalkoznak e növények hatásának megértésével, kutatják azokat a vegyületeket, amelyek egy-egy betegséget meggyógyítanak. A neurodegeneratív betegségek gyógyítására irányuló kutatások egyik szegmense a különböző TCM-ek vizsgálata, melyeknek neuron-védő szerepet tulajdonítanak. Kínai együttműködő partnereink az amiloid képződés gátlásának szempontjából6 gyógynövényt találtak figyelemre méltónak. Ezek a növények az alábbiak: Gastrodia elata (Tian ma), Cistanche deserticola (Rou Cong Rong), Sichuan lovage rhizome (Chuan Xiong), Polygonum multiforum thunb (Fo-ti), Acorus tatarinowii schott és Uncaria rhynchophylla (Gou Teng) (11. ábrasorozat). Gastrodia elata Cistanche deserticola Sichuan lovage rhizome Polygonum multiforum thunb Acorus tatarinowii schott Uncaria rhynchophylla 11. ábrasorozat: Kínai gyógynövények 10
11 Az alábbiak szerint ezeket a gyógynövényeket olyan körülmények között használták, ami kapcsolatban lehet kognitív kórképekkel, időskori elbutulással (demencia), neurodegeneratív betegségekkel. Gastrodia elata: az orchideák családjába tartozó évszázadok óta használt gyógynövény. A hagyományos kínai orvoslásban fejfájásra, szédülésre, epilepsziára, valamint agyvérzés illetve időskori elbutulás esetén használják, legújabban neuron-védő szerepét vizsgálják. Például, az Alzheimer-kórt okozó amiloid-β által kiváltott sejthalál esetén védő hatásúnak bizonyult a növény éteres kivonata [13]. Cistanche deserticola: a sivatagok ginzengjének becézett növényt szintén évszázadok óta használják a vesebetegségek-, az impotencia-, illetve a terméketlenség kezelésére óta hatásspektrumát, hatásmechanizmusát részletes vizsgálatoknak vetették alá, amely alapján kijelenthetjük, hogy különböző kivonatai hatásosnak bizonyulnak a tanulás és memóriazavarok javításában, a vesebetegség gyógyításában, az Alzheimeres betegek kezelésében, az immunerősítésben. A növényben található feniletanoid glikozidokat [Függ.] vélik neuron-védő hatásúnak [14]. Sichuan lovage rhizome: menstruációs görcsök, szív- és érrendszeri betegségek, fejfájás esetén használt gyógynövény. Polygonum multiforum thunb: a kínai gyógyászatban az idős kori betegségek kezelésére, veseproblémákra, a memória javítására használták ezt a növényt. In vivo kísérletek alapján neuron-védő hatást tulajdonítanak neki [15]. Acorus tatarinowii schott: étvágytalanság, halláskárosodás, epilepsziás rohamok esetén használják. A legújabb kutatások alapján szintén neuron-védő szerepet tulajdonítanak neki [16]. Uncaria rhynchophylla: a cats claw, vagyis macskakarom néven ismert növényt leginkább szív- és érrendszeri panaszokra, a központi idegrendszerrel kapcsolatos problémákra használják. Fő alkotóelemei között alkaloidok találhatók, melyek vérnyomáscsökkentő hatásúak [17]. Az Alzheimer kórral kapcsolatba hozható amiloid-β aggregációjának gátlására tett kísérletek is kecsegtetőek [18]. 11
12 Munkám célja Mint már említettem, αaz -szinuklein amiloid képzése több neurodegeneratív betegséghez is köthető, melyek mai ismereteink szerint még gyógyíthatatlanok. Talán a természetből vett ötletekkel (vagyis a növényekben található aktív komponensek megtalálásával) juthatunk közelebb számos betegség kezeléséhez. E gondolat megvalósításának, gyakorlatba való átültetésének fontos szegmense az én munkám, melynek során a kiemelt kínai medicinák hatását vizsgáltam in vitro az α-szinuklein amiloid képzésére abból a célból, hogy potenciális gátló hatású vegyületeket azonosítsak. Ezek az eredmények fontos lépést jelenthetnek gyógyszerhatású készítmények kidolgozása, illetve kezelések kifejlesztése felé. 12
13 Kísérleti rész α-synuclein kifejeztetése (WT, A30P, A53T, E46K) Kiindulás: az α-synuclein génjét tartalmazó prk172 vektorból, mely BL21 (DE3) Star E. coli sejtekbe van transzformálva. A -70 C-on tárolt sejteket 5 ml NZYM tápban egy éjszakán át 37 C-on felszaporítom Carbenicillin [Függ.] antibiotikum mellett. Másnap kifejeztetem a fehérjét: az éjszaka felszaporított sejteket 500 ml NZYM tápba pipettázom, antibiotikumot adok hozzá és OD 600 =0,6-0,8-ig tovább szaporítom. 100µl IPTG-t [Függ.] adok hozzá, 4 órán át 37 C-on indukálok: ekkor fejeződik ki a fehérje. 20 perc alatt Sigma 4-16K típusú centrifuga segítségével ülepítem a sejteket (4000 rpm, 4 C), másnapig -20 C-on tárolom. Következő nap 100 ml lízispufferben felszuszpendálom a sejteket, 4 C-on kevertetem 1 órán át. A baktériumsejtek roncsolása ultrahanggal történik: 2 x 2 percig szonikálok közte 1 perc szünettel, a szuszpenziót jégben tartom, hogy ne melegedjen fel. A sejttörmeléket centrifugálással ülepítem (Sigma 4-16K készülék, 9000rpm, 4 C, 30perc), a fehérje a felülúszóban marad. A felülúszóhoz 1g Streptomicin-szulfátot [Függ.] adok, fél órán át kevertetem 4 C-on. Ekkor az esetlegesen még megmaradt DNS-törmelékek kicsapódnak. A csapadékot lefugálom (Sigma 4-16K készülék, 9000rpm, 4 C, 30 perc). A felülúszóban lévő fehérjét 29,5 g ammónium-szulfáttal ((NH 4 ) 2 SO 4 ) csapom ki- egy órát kevertetem 4 C-on. Végül a kicsapódott fehérjét centrifugálással ülepítem (Sigma 4-16K készülék, 9000rpm, 4 C, 30perc), a csapadék -20 C-on tárolható másnapig. A csapadékot 100 ml 10mM Tris [Függ.] pufferben (ph=7,4) feloldom, 0,2 mikronos steril szűrőn átszűröm. A fehérjét anion cserélő oszlopon tisztítom (ld. módszerek)- azokból a frakciókból, melyek a kromatogram alapján tartalmazhatják a kívánt fehérjét, mintát veszek, SDS-PAGE-sel (ld. módszerek) ellenőrzöm a frakciók fehérjetartalmát. A megfelelő frakciókat összeöntöm, százszoros mennyiségű desztillált vízben 16 órán át 3500 Da-s (Serva) membránban dializálom (közben egyszer vízcsere). Végül liofilizálom a fehérjét, amelyet felhasználásig -20 C-on tárolok. Felhasznált oldatok: NZYM táp összetétele: N-Z Care Plus, NaCl, élesztő, MgSO 4 7H 2 O, H 2 O; ph=7 Lízispuffer összetétele: 10mM Tris [Függ.], 1mM EDTA [Függ.], 1mM PMSF [Függ.]; ph=8, mindig frissen készítve 13
14 Amiloid képződés nyomon követése A méréshez a liofilizált fehérjét megfelelő pufferben feloldom: 4mg/ml-es oldatot készítek. Ezután 100kDa-os szűrőn (Amicon Ultra-0,5 ml) szűröm a preparálás során keletkezett oligomerek eltávolítása céljából. Meghatározom a szűrés után maradt fehérjeoldat koncentrációját (ld. Módszerek), általában µm-os az oldat. Standardizálás céljából 100µM-ra hígítom a pufferrel. Ezután előkészítem a méréshez a 100 µm-os fehérjeoldatot: 100 µl-enként szétosztom egy plate-be (BRAND, 96 lyukú, fekete), 1 µl Tioflavin-T törzsoldatot adok hozzá, ezen kívül a mérésnek megfelelő anyagokat (CuCl 2 -oldat CdCl 2 -oldat, TCM)- ld. Eredmények. A méréseket Biotek SYNERGYMx típusú plate-olvasóban végzem. Paraméterek: - termosztálás: 37 C-on - mérési mód: fluoreszcencia - gerjesztés: 445nm - emisszió: 485 nm - érzékenység: 75 % A mérés menete a mérés típusától függ: a) Kinetika mérése: 2 perc inkubálás, majd mérés, ezután 2 óránkénti mérés 3-4 napig. A mérések között a műszerben a plate folyamatosan 800 rpm-en rázódik. b) TCM hatásának vizsgálata: 1. A mintához az előkészítés során adom hozzá a TCM-et. Ebben az esetben 0 és 90 óránál végzek mérést, Cu 2+, ill. Cd 2+ mellett 0 és 24 óránál. A két időpont között külső rázóban kevertetem a mintákat 37 C-on 800 rpm-mel. A növekedés arányát figyelem. 2. Amiloidok képződése után adom hozzá a TCM-et. Ekkor az előkészítés során a TCM-eket kihagyom. A Cu 2+ -t nem tartalmazó mintáknak kb. 4 nap szükséges az amiloid képzéshez, a Cu 2+ -t tartalmazóknak óra. Ezután adom hozzá a különböző mennyiségű TCM-et. A mérés menete: a TCM hozzáadása után a plate-olvasóban 10 másodpercig rázódik a plate, majd mérés következik. Ezután fél órán át percenként mér a műszer. 14
15 Fontosnak tartom megjegyezni, hogy bár in vitro kísérleteket végeztem, a lehetőségekhez mérten megpróbáltam minél inkább közelíteni a fiziológiás körülményekhez: a mérések 37 C-on, körülbelül fiziológiás ph-n, vizes extraktumok segítségével történtek. Felhasznált oldatok: Puffer a fehérje feloldásához: 10mM Tris, 50mM NaCl, 0,02% NaN 3, törzsoldatokból mindig frissen készítve (törzsoldatok: 10 mm Tris, 50 mm NaCl, 0,02% NaN 3 ) Tioflavin-T (ThT) törzsoldat: 500 µm ThT [Függ.] 50 mm glicinben, ph = 8,0 CuCl 2 és CdCl 2 -oldat: 5, illetve 50 mm-os törzsoldatokat használok. TCM: a vizes TCM-kivonatokat kínai együttműködő partnereinktől kapom készen. Módszerek 1. Fehérjetisztítás anion cserélő oszlopon: Célja: α-synuclein tisztítása más szennyező fehérjéktől Oszlop: Resource Q, 6ml Gradiens: A: 10mM Tris (ph=7,4) B: 10mM Tris, 1M NaCl (ph=7,4), steril szűrt, a pufferek buborék mentesítve vannak. Lineáris gradienst használok, max. 50% B puffer, 25 oszloptérfogat. Az α-synuclein kb. 25,5% B-nél eluálódik. 12. ábra: Példa kromatogramra 2. SDS-PAGE: SDS-poliakrilamid gélelektroforézis Fehérjék méret szerinti elválasztását és detektálását teszi lehetővé. Lényege: az SDS [Függ.] alifás láncával kötődik a fehérjéhez, kitekeri a fehérjeláncot, felszínét 15
16 egyenletesen bevonja negatív töltéssel. A nettó töltés arányos a mérettel, így a fehérje mozgékonysága a gélben csak méretfüggő lesz. Szeparáló gél: 15% akrilamidot tartalmaz Koncentráló gél: 4% akrilamidot tartalmaz : 13. ábra: Példa gélfuttatásra Bár a fehérjék csak 14,5 kda nagyságúak, rendezetlenségük miatt nagyobb molekulatömegnek megfelelő sávban futnak. 3. Fehérjekoncentráció meghatározása: Jasco V-550 típusú spektrofotométeren 280nm-en mért fényelnyelés mérésével Vak: 10mM Tris, ph=7,4 Minta: 10 mm Trisben (ph=7,4) ötvenszeres hígítás Paraméterek: - mód: abszorbancia - válasz: gyors - résszélesség: 2,0 nm - leolvasási sebesség: 1000 nm/min - leolvasás kezdete: 350 nm - leolvasás vége: 220 nm - leolvasás: 2,0 nm-enként Kiértékelés: Lambert-Beer törvény alapján: A = ε c l A: abszorbancia, a mért érték ε: abszorpciós koefficiens, értéke: 5960 l: küvettahossz, értéke: 1 cm c: koncentráció, a keresett mennyiség (az egyenletből számolt értéket 50-nel kell szorozni a hígítás miatt. 16
17 Eredmények 1. Kinetika Munkám első szakaszában ellenőrzésként az irodalomból ismert amiloid képződési kinetikák nyomon követését végeztem el. Ezen mérések segítségével állítottam be a plateolvasó optimális paramétereit. A 14. ábrán példaként egy-egy mérés eredménye látható. A különböző szakaszok (lag-fázis, növekedés, telítés) elkülönülése mellett az is jól látszik az ábrán, hogy az A30P és E46K mutánsok szálképzése a vad típusú (WT) α-szinukleinhez képest sokkal gyorsabb. Kinetika Relatív intenzitás WT A30P E46K A53T t(h) 14. ábra: Kinetika mérése 2. Fémionok hatása A mérések gyorsítása és az intenzitásnövekedés szórásának csökkentése érdekében a továbbiakban fémionokat adtam a mérendő fehérje oldatokhoz. Különböző fémionkoncentrációk hatását vizsgáltam az amiloid képzésre. A koncentrációk: 100 µm, 500 µm és 2000 µm. A különböző mutánsok esetében különböző fémion-koncentrációk segítették legjobban az amiloid szálak képződést, így a későbbi TCM-es mérésekhez az optimalizált fémion-koncentrációkat használtam: - WT: 500 µm Cu 2+, 500 µm Cd 2+ - A30P: 2000 µm Cu 2+, 500 µm Cd 2+ - E46K: 500 µm Cu 2+, 2000 µm Cd 2+ - A53T: 100 µm Cu 2+, 100 µm Cd 2+ Megjegyzendő, hogy a kadmium hatása az irodalomnak megfelelően valamennyivel kisebb volt a rézhez képest, viszont attól eltérően már a 24 órás méréseknél is volt hatása. 17
18 3. TCM-ek hatása Ezek után elkezdődhetett a TCM-ek hatásának vizsgálata az amiloid képzésre (a kísérleti részben b)/1.-ként leírt módszer). Először az összes rendelkezésemre álló növényi kivonatot teszteltem: 24 órás méréseket végeztem, 100 µl fehérje oldathoz 1 µl TCM-et adva. A TCM-minták: #1: Gastrodia elata #2: Cistanche deserticola #3: Sichuan lovage rhizome #4: Polygonum multiforum thunb #5: Acorus tatarinowii schott #6: Uncaria rhynchophylla A TCM-ek gyakorlatilag ugyanazt a hatást mutatták a vad típusú fehérjénél, mind a mutánsoknál, így az egyik mutáns példáján mutatom be a mérési eredményeket (15. ábra). Az ábrán jól látszik a megnövekedett jelintenzitás a fémionok jelenlétében a fém nélküli mintához viszonyítva (csak 24 óra után!). A diagram utolsó részében kontrollmérések találhatók, a fehérje oldat helyett csak a feloldásához használt puffert mértem be. Így ki lehetett küszöbölni a TCM-ek esetleges kölcsönhatását a ThT-vel. 15. ábra: TCM-ek hatása az amiloid képződésre fémionok mellett. 18
19 Ha ugyanezeket a 24 órás méréseket fémionok nélkül végeztem el, természetesen nem vártam jelintenzitás növekedést a fehérjéknél önmagukban, azonban érdekes megfigyelés, hogy az #1 TCM a fémionok nélkül is jelentős mértékben elősegítette az amiloid képződést (16. ábra) Intenzitás változás aránya A53T A53T A53T+TCM#1 A53T+TCM#2 A53T+TCM#3 A53T+TCM#4 A53T+TCM#5 A53T+TCM#6 16. ábra: TCM-ek hatása az amiloid képződésre fémionok nélkül A mérések eredménye: az #1 TCM jelentős mértékben növeli az amiloid szálak képződését, a #2 és #6 TCM viszont teljes mértékben gátolják azt. A szálnövekedést a többi növényi kivonat is gátolja valamilyen mértékben, de a további mérésekhez csak ezt a 3 kiemelt mintát használtam, mivel ezeknek volt a legnagyobb hatásuk. Továbbá, mivel a réz- és a kadmium ionok mellett is ugyanolyan volt a TCM-ek hatása, a későbbiekben a fémionos méréseknél csak a Cu 2+ -t használtam. 4. #1 TCM A következő kísérletekben először az #1 TCM-et vizsgáltam. Bár az ellenkező hatást érte el, mint ami várható volt, további vizsgálatát ez indokolta. Ugyanis egyes elgondolások szerint a kisebb α-szinuklein oligomerek toxikusabbak, mint maguk az amiloidok, így akár az amiloid képzés irányába eltolt hatás is lehet jó. Különböző mennyiségben adtam a fehérjéhez a TCM-et, keresve, hogy van-e esetleg egy kritikus mennyiség, ami már növeli az amiloid képzést. Sajnos nem találtam ilyen kritikus mennyiséget, sőt, ahogy a 17. ábra mutatja, nem is látható egyirányú növekedés a TCM mennyiségének növelésével. 19
20 Ezután olyan mérést végeztem, mely során a kész amiloidokhoz adtam a TCM-et (b)/2. módszer), hátha tovább növeli az amiloid szálak képződését, de ebben a kísérleti elrendezésben sem figyeltem meg lényeges hatást. Így a továbbiakban a két gátló hatású TCM-re koncentráltam. 17. ábra: #1 TCM titrálás: 0,2-5µl TCM/ 100 µl fehérje 5. #2, #6 TCM hatása az amiloid képződésre A két gátló hatású TCM-nél is először megpróbáltam behatárolni, hogy minimálisan körülbelül mennyi TCM szükséges ahhoz, hogy csökkentse az amiloid képződést. Először a 0,2-5 µl TCM/ 100 µl fehérje oldat intervallumban mértem (0,2; 0,5; 1; 2; 5). Mivel az amiloid képződést már 0,2 µl TCM hozzáadása teljesen legátolta, kisebb mennyiségekre tértem át (ezekhez 10-szeresére hígított TCM- kivonatot használtam). A 18. ábra egy fémion nélküli 90 órás mérést mutat, a 19. pedig egy Cu 2+ - ionok által segített 24 órás mérést. Az ábrákból látható, hogy már nagyon kis mennyiségű TCM is hatással van a fehérjék aggregációjára. 20
21 18. ábra: #2, #6 TCM titrálás fémion nélkül 19. ábra: #2, #6 TCM titrálás fémion mellett 21
22 6. #2, #6 TCM hatása a kialakult amiloid szálakra Eddigi méréseim csak azt mutatták, hogy a szálképződés folyamatát a TCM-ek gátolják. A következő mérésekkel sikerült azt is bebizonyítanom, hogy ezen anyagok képesek szétszedni az amiloid szálakat. Ebben az esetben a b)/2. eljárással végeztem méréseimet. Bár a méréseket elvégeztem mind a fémionok nélkül képződött, mind a Cu2+ által segített amiloidokra, azt tapasztaltam, hogy a fémion nélküli minták fluoreszcenciás jelintenzitása nagyon szórt, míg a Cu2+-t tartalmazóké egységesebb volt, így az intenzitás arányának csökkenését nem találtam kiértékelhetőnek a Cu2+ nélküli minták esetében. A fémionos mérésekből viszont meggyőzően látszik (20., 21., 22. ábra), hogy az egyre nagyobb mennyiségben hozzáadott TCM-ek lecsökkentik a ThT jelintenzitását, tehát előidézik az amiloid szétesését, már fél órán belül! 1,00 0,90 0,80 0,70 0,60 0,50 0,40 0,30 0,20 0,10 0,00 E46K+Cu2+ 0,01ul#2 0,1ul #2 0,2ul#2 0,5 ul#2 1 ul #2 2ul#7 új 0,01ul#6 0,1ul #6 0,2ul#6 0,5 ul#6 1 ul #6 2ul#6 20. ábra: Jelintenzitás csökkenésének aránya TCM hozzáadása előtti intenzitáshoz képest 22
23 Arány a kezdeti intenzitáshoz képest E46K + #2TCM t(min) 0,01ul#2 0,1ul #2 0,2ul#2 0,5 ul#2 1 ul #2 2ul#2 21. ábra: Az amiloid szálak szétesésének nyomon követése a #2 TCM esetében Arány a kezdeti intenzitáshoz képest E46K + #2TCM t(min) 0,01ul#6 0,1ul #6 0,2ul#6 0,5 ul#6 1 ul #6 2ul#6 22. ábra: Az amiloid szálak szétesésének nyomon követése a #6 TCM esetében 23
24 Következtetések Az általam vizsgált különböző neuron-védő hatásúnak tartott kínai gyógynövények mindegyikéről elmondható, hogy in vitro hatással van az α -szinuklein amiloid képzésére. Mivel növényi kivonatokkal dolgoztam, a hatáshoz rendelhető félmaximális koncentráció értékeket nem lehetett meghatározni, azonban a nagy hígítások mellett is megfigyelhető hatások arra utalnak, hogy a növényekben nagyon hatásos vegyületek léteznek. További bizakodásra ad okot, hogy a kiemelt és részletesen tanulmányozott TCM-ek nem csak gátolták az aggregációt, a már kialakult amiloidokat is képesek voltak szétszedni. Úgy gondolom, hogy ez egy jó jel annak érdekében, hogy egy kicsit közelebb kerüljünk a Parkinson-kórból való felgyógyulás lehetősége felé. Természetesen ezek csak a kezdeti lépések. A továbbiakban egyrészt szeretnénk megtalálni a növényekben lévő aktív komponenseket, melyek a gátló hatást okozzák, másrészt AFM-es méréseket végezni azokkal a mintákkal, ahol a TCM előidézte az amiloidok szétesését, hogy megtudjuk, esetleg csak oligomerekre sikerült szétszedni a szálakat, vagy monomer α-szinuklein fehérjék keletkeztek. Tervbe vettük a megfigyelt hatások sejtbiológiai megerősítését is, az amiloidok toxicitására érzékeny sejtes tesztek segítségével. Összességében megállapítható, hogy kezdeti vizsgálataim rendkívül bíztatóak, számos hatásos és gyógyszerfejlesztési szempontból potenciálisan ígéretes vegyületre mutatnak rá. Mindezek fényében kijelenthetem, hogy érdemes kutatni a hagyományos kínai gyógynövények hatásait, mert lehet, hogy a fejfájás és hasonló kisebb betegségek gyógyítása mellett nagyobb lehetőségek is rejlenek bennük. 24
25 Függelék: NAC: non-aβ component of AD amyloid Neve onnan származik, hogy az Alzheimer-kórra (AD) jellemző amiloidban az Aβ -n kívül más peptidet is találtak, melyet NAC-nak neveztek el. Ennek prekurzoraként nevezték el NACP-nek a140 aminosav hosszú fehérjét, mely egyet jelent az α-szinukleinnel. IUPred: fehérje rendezetlenséget predikáló interneten hozzáférhető program: iupred.enzim.hu. Lényege: míg a globuláris fehérjék aminosavai között kölcsönhatások stabilizálják a szerkezetet, addig a rendezetlen fehérjéknél szekvenciájukból adódóan az ilyen kölcsönhatások nem jellemzők. A program algoritmusa ezeket az aminosav párokat veszi végig. A kölcsönható párok hiányából lehet következtetni a rendezetlenségre. A 0,5 fölötti értékű régiók tekinthetők biztosan rendezetlennek. AFM: Atomic Force Microscopy = atomi erő mikroszkópia Közvetlen módszer amiloid rostok jelenlétének vizsgálatára ThT: Tioflanin-T Specifikusan amiloid szálakhoz kapcsolódik, ebben az állapotában gerjesztve kék fényt emittál (maximum nm-nél), így jelenlétében fluoreszcenciás méréssel az amiloid képződés nyomon követhető. TCM: Traditional Chinese Medicine. Ez a betűszó használatos általánosságban az irodalomban a hagyományos kínai gyógyszerekre. Feniletanoid glikozidok: az ábrán az alapváz látható, az R csoportoktól függően nagyon sok fajta feniletanoid glikozid létezik. Carbenicillin: 25
26 Streptomicin-szulfát: IPTG: Izopropil β-d-1-tiogalaktopiranozid-hatására a baktériumsejtek szaporodása lecsökken, helyette a célfehérjét fejezik ki. Tris: 2-amino-2-hidroximetil-propán-1,3-diol EDTA: etilén-diamin-tetraecetsav-komplexképző PMSF: fenil-metil-szulfonil-fluorid- proteázgátló: sejthalál esetén fehérjéket lebontó proteázok szabadulnak fel, ezt akadályozza meg a PMSF. 26
27 SDS: nátrium-dodecil-szulfát 27
28 Irodalom 1. Csermely Péter, Tompa Péter (2007) Kórós fehérjék, fehérjeszerkezeti betegségek, Dr. Mandl József és Dr. Machovich Raymund szerk. Orvosi Patobiokémia könyvben Budapest, Medicina Könyvkiadó Zrt oldal 2. Galvin, J.E., V.M. Lee, M.L. Schmidt, P.H. Tu, T. Iwatsubo, and J.Q. Trojanowski (1999) Pathobiology of the Lewy body. Adv Neurol 80: Polymeropoulos, M.H., C. Lavedan, E. Leroy, S.E. Ide, A. Dehejia, A. Dutra, B. Pike, H. Root, J. Rubenstein, R. Boyer, E.S. Stenroos, S. Chandrasekharappa, A. Athanassiadou, T. Papapetropoulos, W.G. Johnson, A.M. Lazzarini, R.C. Duvoisin, G. Di Iorio, L.I. Golbe, and R.L. Nussbaum (1997) Mutation in the alpha-synuclein gene identified in families with Parkinson's disease. Science 276: Kruger, R., W. Kuhn, T. Muller, D. Woitalla, M. Graeber, S. Kosel, H. Przuntek, J.T. Epplen, L. Schols, and O. Riess (1998) Ala30Pro mutation in the gene encoding alpha-synuclein in Parkinson's disease. Nat Genet 18: Zarranz, J.J., J. Alegre, J.C. Gomez-Esteban, E. Lezcano, R. Ros, I. Ampuero, L. Vidal, J. Hoenicka, O. Rodriguez, B. Atares, V. Llorens, E. Gomez Tortosa, T. del Ser, D.G. Munoz, and J.G. de Yebenes (2004) The new mutation, E46K, of alphasynuclein causes Parkinson and Lewy body dementia. Ann Neurol 55: Weinreb, P.H., W. Zhen, A.W. Poon, K.A. Conway, and P.T. Lansbury, Jr. (1996) NACP, a protein implicated in Alzheimer's disease and learning, is natively unfolded. Biochemistry 35: Ueda, K., H. Fukushima, E. Masliah, Y. Xia, A. Iwai, M. Yoshimoto, D.A. Otero, J. Kondo, Y. Ihara, and T. Saitoh (1993) Molecular cloning of cdna encoding an unrecognized component of amyloid in Alzheimer disease. Proc Natl Acad Sci U S A 90: Bennett, M. Catherine (2005) The role of α-synuclein in neurodegenerative diseases. Pharmacology &Therapeutics 105: Uversky, V. N., Li,J. and Fink, A.L. (2001)Evidence for a Partially Folded Intermediate in α-synuclein Fibril Formation J. Biol. Chem. 276: Uversky, V. N., Li,J. and Fink, A.L. (2001) Metal-triggered Structural Transformations, Aggregation, and Fibrillation of Human α-synuclein J. Biol. Chem. 276: Voropai, E. S., Samtsov, M. P., Kaplevskii, K. N., Maskevich, A. A., Stepuro, V. I., Povarova, O. I., Kuznetsova, M., Turoverov, K. K., Fink, A. L. Uversky, V. N. (2003) Spectral Properties of Thioflavin T and its complexes with amyloid fibrils J. of Applied Spectroscopy 70: No Rybicki, B. A., Johnson, C. C., Uman, J., and Gorell, J. M. (1993) Parkinson's disease mortality and the industrial use of heavy metals in Michigan. Movement Disorders 8, H.-J. Kim et al. (2003) Ethyl ether fraction of Gastrodia elata Blume protects amyloid β peptide-induced cell death Journal of Ethnopharmacology 84 95_/ Y. Jiang, P.-F. Tu (2009) Analysis of chemical constituents in Cistanche species J. Chromatogr. A Li, X., Matsumoto, K., Murakami, Y., Tezuka, Y., Wu, Y., Kadota, S. (2005) Neuroprotective effects of Polygonum multiforum on nigostriatal dopaminergic 28
29 degeneration induced by paraquat and maneb in mice Pharmacology, Biochemistry and behavior 82: Huang Z, Mao QQ, Zhong XM, Feng CR, Pan AJ, Li ZY. (2009) J Ethnopharmacol. 125(3): Shi, J.S., Yu, J.X., Chen, X.P., Xu, R.X. (2003) Pharmacological actions of Uncaria alkaloids, rhynchophylline and isorhynchophylline Acta Pharmacol Sin 24 (2): Fujiwara H, Iwasaki K, Furukawa K, Seki T, He M, Maruyama M, Tomita N, Kudo Y, Higuchi M, Saido TC, Maeda S, Takashima A, Hara M, Ohizumi Y, Arai H. (2006) J Neurosci Res. 84:
K68464 OTKA pályázat szakmai zárójelentés
K68464 OTKA pályázat szakmai zárójelentés A fehérjeaggregáció és amiloidképződés szerkezeti alapjai; a különféle morfológiájú aggregátumok kialakulásának körülményei és in vivo hatásuk vizsgálata Vezető
RészletesebbenTRIPSZIN TISZTÍTÁSA AFFINITÁS KROMATOGRÁFIA SEGÍTSÉGÉVEL
TRIPSZIN TISZTÍTÁSA AFFINITÁS KROMATOGRÁFIA SEGÍTSÉGÉVEL Az egyes biomolekulák izolálása kulcsfontosságú a biológiai szerepük tisztázásához. Az affinitás kromatográfia egyszerűsége, reprodukálhatósága
RészletesebbenFOLYÉKONY ÉS POR ALAKÚ MOSÓSZEREK IRRITÁCIÓS HATÁSÁNAK ÉS MOSÁSI TULAJDONSÁGAINAK ÖSSZEHASONLÍTÁSA
Eötvös Loránd Tudományegyetem Természettudományi Kar Környezettudományi Centrum FOLYÉKONY ÉS POR ALAKÚ MOSÓSZEREK IRRITÁCIÓS HATÁSÁNAK ÉS MOSÁSI TULAJDONSÁGAINAK ÖSSZEHASONLÍTÁSA Varga Dóra Környezettudomány
RészletesebbenAz agy betegségeinek molekuláris biológiája. 1. Prion betegség 2. Trinukleotid ripít betegségek 3. ALS 4. Parkinson kór 5.
Az agy betegségeinek molekuláris biológiája 1. Prion betegség 2. Trinukleotid ripít betegségek 3. ALS 4. Parkinson kór 5. Alzheimer kór 28 Prion betegség A prion betegség fertőző formáját nem egy genetikai
Részletesebbenmintasepcifikus mikrokapilláris elektroforézis Lab-on-Chip elektroforézis / elektrokinetikus elven DNS, RNS, mirns 12, fehérje 10, sejtes minta 6
Agilent 2100 Bioanalyzer mikrokapilláris gélelektroforézis rendszer G2943CA 2100 Bioanalyzer system forgalmazó: Kromat Kft. 1112 Budapest Péterhegyi u. 98. t:36 (1) 248-2110 www.kromat.hu bio@kromat.hu
RészletesebbenÉlelmiszerek. mikroszennyezőinek. inek DR. EKE ZSUZSANNA. Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium. ALKÍMIA MA november 5.
Élelmiszerek mikroszennyezőinek inek nyomában DR. EKE ZSUZSANNA Elválasztástechnikai Kutató és ktató Laboratórium ALKÍMIA MA 2009. november 5. Kémiai veszélyt lytényezők Természetesen előforduló mérgek
RészletesebbenRIBOFLAVINUM. Riboflavin
Riboflavinum 1 01/2008:0292 RIBOFLAVINUM Riboflavin C 17 H 20 N 4 O 6 M r 376,4 [83-88-5] DEFINÍCIÓ 7,8-Dimetil-10-[(2S,3S,4R)-2,3,4,5-tetrahidroxipentil]benzo[g]pteridin- 2,4(3H,10H)-dion. E cikkely előírásait
RészletesebbenVálasz Tombácz Etelkának az MTA doktorának disszertációmról készített bírálatában feltett kérdéseire és megjegyzéseire
Válasz Tombácz Etelkának az MTA doktorának disszertációmról készített bírálatában feltett kérdéseire és megjegyzéseire Tisztelt Professzor nő! Először bírálatában feltett kérdéseire válaszolok majd a bírálatban
RészletesebbenNEHÉZFÉMEK ELTÁVOLÍTÁSA IPARI SZENNYVIZEKBŐL Modell kísérletek Cr(VI) alkalmazásával növényi hulladékokból nyert aktív szénen
NEHÉZFÉMEK ELTÁVOLÍTÁSA IPARI SZENNYVIZEKBŐL Modell kísérletek Cr(VI) alkalmazásával növényi hulladékokból nyert aktív szénen Készítette: Battistig Nóra Környezettudomány mesterszakos hallgató A DOLGOZAT
RészletesebbenFEHÉRJÉK A MÁGNESEKBEN. Bodor Andrea ELTE, Szerkezeti Kémiai és Biológiai Laboratórium. Alkímia Ma, Budapest,
FEHÉRJÉK A MÁGNESEKBEN Bodor Andrea ELTE, Szerkezeti Kémiai és Biológiai Laboratórium Alkímia Ma, Budapest, 2013.02.28. I. FEHÉRJÉK: L-α aminosavakból felépülő lineáris polimerek α H 2 N CH COOH amino
RészletesebbenSZABVÁNYMŰVELETI ELŐÍRÁS
SEMMELWEIS EGYETEM Orvosi Biokémiai Intézet 1094 Budapest, Tű zoltó u. 37-47. SZABVÁNYMŰVELETI ELŐÍRÁS Készítette: 2009.01.19. A dokumentáció kódja: SE-OBI-H-MU-04 Dr. Kolev Kraszimir részlegvezető Dátum
RészletesebbenFotoszintézis. fotoszintetikus pigmentek Fényszakasz - gránum/sztrómalamella. Sötétszakasz - sztróma
Fotoszintézis fotoszintetikus pigmentek Fényszakasz - gránum/sztrómalamella Sötétszakasz - sztróma A növényeket érı hatások a pigmentösszetétel változását okozhatják I. Mintavétel (inhomogén minta) II.
RészletesebbenSZABVÁNYMŰVELETI ELŐÍRÁS. A tejsavdehidrogenáz enzim izoenzimeinek vizsgálata című gyakorlat előkészítése
SEMMELWEIS EGYETEM Orvosi Biokémiai Intézet 1094 Budapest, Tűzoltó u. 37-47. SZABVÁNYMŰVELETI ELŐÍRÁS című gyakorlat előkészítése Készítette: 2011.02.21. A dokumentáció kódja: SE-OBI-OKT- MU-16 Dr. Bauer
RészletesebbenFehérjék szerkezetének kialakulása II
Egy kis fehérje gombolyodása több párhuzamos úton Fehérjék szerkezetének kialakulása II Osváth Szabolcs Semmelweis Egyetem hélix kialakulás és kollapszus több párhuzamos úton további kollapszus és hélix
RészletesebbenGLUCAGONUM HUMANUM. Humán glükagon
01/2008:1635 GLUCAGONUM HUMANUM Humán glükagon C 153 H 225 N 43 O 49 S M r 3483 DEFINÍCIÓ A humán glükagon 29 aminosavból álló polipeptid; szerkezete megegyezik az emberi hasnyálmirígy α-sejtjei által
RészletesebbenOTKA Nyilvántartási szám: T 043410 ZÁRÓJELENTÉS
OTKA Nyilvántartási szám: T 043410 ZÁRÓJELENTÉS Témavezető neve: Dr. Vágó Imre A téma címe: Talajok könnyen felvehető bórkészletének meghatározására alkalmas kivonószer kidolgozása, az egyes talajtulajdonságok
RészletesebbenA Caskin1 állványfehérje vizsgálata
A Caskin1 állványfehérje vizsgálata Doktori tézisek Balázs Annamária Semmelweis Egyetem Molekuláris Orvostudományok Doktori Iskola Témavezeto: Dr. Buday László egyetemi tanár, az orvostudományok doktora
RészletesebbenA negyedleges szerkezet szerepe a kis hő-sokk fehérjék
A negyedleges szerkezet szerepe a kis hő-sokk fehérjék chaperon működésében Készítette: Böde Csaba Témavezető: Dr. Fidy Judit egyetemi tanár Semmelweis Egyetem Elméleti Orvostudományok Doktori Iskola Szigorlati
RészletesebbenVILÁGÍTÓ GYÓGYHATÁSÚ ALKALOIDOK
VILÁGÍTÓ GYÓGYHATÁSÚ ALKALIDK Biczók László, Miskolczy Zsombor, Megyesi Mónika, Harangozó József Gábor MTA Természettudományi Kutatóközpont Anyag- és Környezetkémiai Intézet Hordozóanyaghoz kötődés fluoreszcenciás
RészletesebbenFehérjék szerkezetének kialakulása II. Semmelweis Egyetem. Osváth Szabolcs
Fehérjék szerkezetének kialakulása II Osváth Szabolcs Semmelweis Egyetem szabolcs.osvath@eok.sote.hu Egy kis fehérje gombolyodása több párhuzamos úton hélix kialakulás és kollapszus több párhuzamos úton
RészletesebbenERD14: egy funkcionálisan rendezetlen dehidrin fehérje szerkezeti és funkcionális jellemzése
Doktori értekezés tézisei ERD14: egy funkcionálisan rendezetlen dehidrin fehérje szerkezeti és funkcionális jellemzése DR. SZALAINÉ ÁGOSTON Bianka Ildikó Témavezetők Dr. PERCZEL András egyetemi tanár és
RészletesebbenModern Fizika Labor. 11. Spektroszkópia. Fizika BSc. A mérés dátuma: dec. 16. A mérés száma és címe: Értékelés: A beadás dátuma: dec. 21.
Modern Fizika Labor Fizika BSc A mérés dátuma: 2011. dec. 16. A mérés száma és címe: 11. Spektroszkópia Értékelés: A beadás dátuma: 2011. dec. 21. A mérést végezte: Domokos Zoltán Szőke Kálmán Benjamin
RészletesebbenMINTAJEGYZŐKÖNYV A VÉRALVADÁS VIZSGÁLATA BIOKÉMIA GYAKORLATHOZ
MINTAJEGYZŐKÖNYV A VÉRALVADÁS VIZSGÁLATA BIOKÉMIA GYAKORLATHOZ Feladatok 1. Teljes vér megalvasztása rekalcifikálással 1.1 Gyakorlat kivitelezése 1.2 Minta jegyzőkönyv 2. Referenciasor készítése fehérjeméréshez
RészletesebbenFehérjék nyomás által indukált szerkezetváltozásainak jellemzése infravörös és fluoreszcencia spektroszkópiai módszerekkel
Fehérjék nyomás által indukált szerkezetváltozásainak jellemzése infravörös és fluoreszcencia spektroszkópiai módszerekkel Doktori tézisek Somkuti Judit Semmelweis Egyetem Elméleti Orvostudományok Doktori
RészletesebbenAbszorpciós fotometria
abszorpció Abszorpciós fotometria Spektroszkópia - Színképvizsgálat Spektro-: görög; jelente kép/szín -szkópia: görög; néz/látás/vizsgálat Ujfalusi Zoltán PTE ÁOK Biofizikai Intézet 2012. február Vizsgálatok
RészletesebbenKÉSŐ AVAR ÜVEGGYÖNGYÖK ÖSSZETÉTEL- VIZSGÁLATA
. BUDAPESTINENSIS DE EÖTVÖS NOM. * KÉSŐ AVAR ÜVEGGYÖNGYÖK ÖSSZETÉTEL- VIZSGÁLATA különös tekintettel a mállási jelenségek kimutatására Készítette: Király Csilla: Környezettudomány MSc. I. évf. Mácsai Cecília:
RészletesebbenAminosavak, peptidek, fehérjék
Aminosavak, peptidek, fehérjék Az aminosavak a fehérjék építőkövei. A fehérjék felépítésében mindössze 20- féle aminosav vesz részt. Ezek általános képlete: Az aminosavakban, mint arra nevük is utal van
RészletesebbenKáplán Mirjana Környezettudomány MSc
Eötvös Loránd Tudományegyetem Természettudományi kar Talajvizek triklóretilén tartalmának meghatározására szolgáló GC-ECD módszer kidolgozása Káplán Mirjana Környezettudomány MSc Témavezetők: Dr. Záray
RészletesebbenA KAR-2, egy antimitotikus ágens egyedi farmakológiájának atomi és molekuláris alapjai
A KAR-2, egy antimitotikus ágens egyedi farmakológiájának atomi és molekuláris alapjai A doktori értekezés tézisei Horváth István Eötvös Loránd Tudományegyetem Biológia Doktori Iskola (A Doktori Iskola
RészletesebbenNano cink-oxid toxicitása stimulált UV sugárzás alatt és az N-acetilcisztein toxicitás csökkentő hatása a Panagrellus redivivus fonálféreg fajra
Nano cink-oxid toxicitása stimulált UV sugárzás alatt és az N-acetilcisztein toxicitás csökkentő hatása a Panagrellus redivivus fonálféreg fajra KISS LOLA VIRÁG, SERES ANIKÓ ÉS NAGY PÉTER ISTVÁN Szent
RészletesebbenKUTATÁSI JELENTÉS. DrJuice termékek Ezüstkolloid Hydrogél és Kolloid oldat hatásvizsgálata
KUTATÁSI JELENTÉS A Bay Zoltán Alkalmazott Kutatási Közalapítvány Nanotechnológiai Kutatóintézet e részére DrJuice termékek Ezüstkolloid Hydrogél és Kolloid oldat hatásvizsgálata. E z ü s t k o l l o
RészletesebbenAz 5 leghatékonyabb keleti gyógynövény Az 5 leghatékonyabb keleti gyógynövény
Az 5 leghatékonyabb keleti gyógynövény Szűztea, ginzeng, alga, galagonya és halolaj: ezek a legnépszerűbb kínai természetgyóg Annak ellenére, hogy a statisztikák szerint Magyarország lakossága élen jár
RészletesebbenVízben oldott antibiotikumok (Fluorokinolonok) sugárzással indukált lebontása
Vízben oldott antibiotikumok (Fluorokinolonok) sugárzással indukált lebontása Doktori beszámoló 1. félév Készítette: Tegze Anna Témavezető: Dr. Takács Erzsébet Tartalomjegyzék Bevezetés: Gyógyszerhatóanyagok
RészletesebbenA pulzáló és folyamatos norfloxacin itatás összehasonlító vizsgálata csirkében és pulykában. Sárközy Géza
A pulzáló és folyamatos norfloxacin itatás összehasonlító vizsgálata csirkében és pulykában Sárközy Géza Gyógyszertani és Méregtani tanszék Állatorvos-tudományi fakultás Szent István Egyetem Budapest 2002
RészletesebbenPórusos polimer gélek szintézise és vizsgálata és mi a közük a sörgyártáshoz
Pórusos polimer gélek szintézise és vizsgálata és mi a közük a sörgyártáshoz Póta Kristóf Eger, Dobó István Gimnázium Témavezető: Fodor Csaba és Szabó Sándor "AKI KÍVÁNCSI KÉMIKUS" NYÁRI KUTATÓTÁBOR MTA
RészletesebbenMérés: Millikan olajcsepp-kísérlete
Mérés: Millikan olajcsepp-kísérlete Mérés célja: 1909-ben ezt a mérést Robert Millikan végezte el először. Mérése során meg tudta határozni az elemi részecskék töltését. Ezért a felfedezéséért Nobel-díjat
RészletesebbenTartalomjegyzék. Emlékeztetõ. Emlékeztetõ. Spektroszkópia. Fényelnyelés híg oldatokban A fény; Abszorpciós spektroszkópia
Tartalomjegyzék PÉCS TUDOMÁNYEGYETEM ÁLTALÁNOS ORVOSTUDOMÁNY KAR A fény; Abszorpciós spektroszkópia Elektromágneses hullám kölcsönhatása anyaggal; (Nyitrai Miklós; 2015 január 27.) Az abszorpció mérése;
RészletesebbenINTERFERONI GAMMA-1B SOLUTIO CONCENTRATA. Tömény gamma-1b-interferon-oldat
01/2008:1440 javított 7.0 INTERFERONI GAMMA-1B SOLUTIO CONCENTRATA Tömény gamma-1b-interferon-oldat C 734 H 1166 N 204 O 216 S 5 M r 16 465 DEFINÍCIÓ A tömény gamma-1b-interferon-oldat a gamma interferon
RészletesebbenA basidiomycota élesztőgomba, a Filobasidium capsuligenum IFM 40078 törzse egy olyan
A basidiomycota élesztőgomba, a Filobasidium capsuligenum IFM 40078 törzse egy olyan fehérjét (FC-1 killer toxint) választ ki a tápközegbe, amely elpusztítja az opportunista patogén Cryptococcus neoformans-t.
RészletesebbenRagyogó molekulák: dióhéjban a fluoreszcenciáról és biológiai alkalmazásairól
Ragyogó molekulák: dióhéjban a fluoreszcenciáról és biológiai alkalmazásairól Kele Péter egyetemi adjunktus Lumineszcencia jelenségek Biolumineszcencia (biológiai folyamat, pl. luciferin-luciferáz) Kemilumineszcencia
RészletesebbenKlórbenzol lebontásának vizsgálata termikus rádiófrekvenciás plazmában
Klórbenzol lebontásának vizsgálata termikus rádiófrekvenciás plazmában Fazekas Péter Témavezető: Dr. Szépvölgyi János Magyar Tudományos Akadémia, Természettudományi Kutatóközpont, Anyag- és Környezetkémiai
RészletesebbenAbszorpciós spektroszkópia
Tartalomjegyzék Abszorpciós spektroszkópia (Nyitrai Miklós; 2011 február 1.) Dolgozat: május 3. 18:00-20:00. Egész éves anyag. Korábbi dolgozatok nem számítanak bele. Felmentés 80% felett. A fény; Elektromágneses
RészletesebbenELEKTROFORÉZIS TECHNIKÁK
11. fejezet ELEKTROFORÉZIS TECHNIKÁK ELEKTROFORÉZIS Olyan elválasztási technikák, amelyben a molekulák elektromos erőtér hatására különbözőképpen mozdulnak el, és ezáltal szétválaszthatók. Dr. Pécs Miklós
RészletesebbenBD Vacutainer Molekuláris Diagnosztikai termékei
BD Vacutainer Molekuláris Diagnosztikai termékei Andrea Süle, PhD Termékspecialista BD Diagnostics, Preanalytical Systems MOLSZE XI. Nagygyőlés, Pécs, 2009 augusztus 27-29. BD A BD egy orvostechnológiai
RészletesebbenXXXVIII. KÉMIAI ELŐADÓI NAPOK
Magyar Kémikusok Egyesülete Csongrád Megyei Csoportja és a Magyar Kémikusok Egyesülete rendezvénye XXXVIII. KÉMIAI ELŐADÓI NAPOK Program és előadás-összefoglalók Szegedi Akadémiai Bizottság Székháza Szeged,
RészletesebbenVíztechnológiai mérőgyakorlat 2. Klórferőtlenítés törésponti görbe felvétele. Jegyzőkönyv
A mérést végezte: NEPTUNkód: Víztechnológiai mérőgyakorlat 2. Klórferőtlenítés törésponti görbe felvétele Jegyzőkönyv Név: Szak: Tagozat: Évfolyam, tankör: AABB11 D. Miklós Környezetmérnöki Levlező III.,
RészletesebbenAbszorpciós fotometria
abszorpció A fény Abszorpciós fotometria Ujfalusi Zoltán PTE ÁOK Biofizikai Intézet 2013. január Elektromágneses hullám Transzverzális hullám elektromos térerősségvektor hullámhossz E B x mágneses térerősségvektor
RészletesebbenA fény tulajdonságai
Spektrofotometria A fény tulajdonságai A fény, mint hullámjelenség (lambda) (nm) hullámhossz (nű) (f) (Hz, 1/s) frekvencia, = c/ c (m/s) fénysebesség (2,998 10 8 m/s) (σ) (cm -1 ) hullámszám, = 1/ A amplitúdó
Részletesebben6. Zárványtestek feldolgozása
6. Zárványtestek feldolgozása... 1 6.1. A zárványtestek... 1 6.1.1. A zárványtestek kialakulása... 2 6.1.2. A feldolgozási technológia... 3 6.1.2.1. Sejtfeltárás... 3 6.1.2.2. Centrifugálás, tisztítás...
Részletesebben2006 1. Nemszinaptikus receptorok és szubmikronos Ca2+ válaszok: A két-foton lézermikroszkópia felhasználása a farmakológiai vizsgálatokra.
2006 1. Nemszinaptikus receptorok és szubmikronos Ca 2+ válaszok: A két-foton lézermikroszkópia felhasználása a farmakológiai vizsgálatokra. A kutatócsoportunkban Közép Európában elsőként bevezetett két-foton
Részletesebben(11) Lajstromszám: E 008 405 (13) T2 EURÓPAI SZABADALOM SZÖVEGÉNEK FORDÍTÁSA
!HU000008T2! (19) HU (11) Lajstromszám: E 008 (13) T2 MAGYAR KÖZTÁRSASÁG Szellemi Tulajdon Nemzeti Hivatala EURÓPAI SZABADALOM SZÖVEGÉNEK FORDÍTÁSA (21) Magyar ügyszám: E 03 77970 (22) A bejelentés napja:
RészletesebbenTartalomjegyzék. Emlékeztetõ. Emlékeztetõ. Spektroszkópia. Fényelnyelés híg oldatokban 4/11/2016. A fény; Abszorpciós spektroszkópia
Tartalomjegyzék PÉCS TUDOMÁNYEGYETEM ÁLTALÁNOS ORVOSTUDOMÁNY KAR A fény; Abszorpciós spektroszkópia Elektromágneses hullám kölcsönhatása anyaggal; (Nyitrai Miklós; 2016 március 1.) Az abszorpció mérése;
RészletesebbenSZENNYVÍZKEZELÉS NAGYHATÉKONYSÁGÚ OXIDÁCIÓS ELJÁRÁSSAL
SZENNYVÍZKEZELÉS NAGYHATÉKONYSÁGÚ OXIDÁCIÓS ELJÁRÁSSAL Kander Dávid Környezettudomány MSc Témavezető: Dr. Barkács Katalin Konzulens: Gombos Erzsébet Tartalom Ferrát tulajdonságainak bemutatása Ferrát optimális
RészletesebbenI. MELLÉKLET ALKALMAZÁSI ELŐÍRÁS
I. MELLÉKLET ALKALMAZÁSI ELŐÍRÁS 1 1. A GYÓGYSZER MEGNEVEZÉSE VPRIV 200 egység por oldatos infúzióhoz. 2. MINŐSÉGI ÉS MENNYISÉGI ÖSSZETÉTEL Egy injekciós üveg 200 egység* velagluceráz-alfát tartalmaz.
RészletesebbenNANOEZÜST ALAPÚ ANTIBAKTERIÁLIS SZÓRHATÓ SZOL KIFEJLESZTÉSE MŰANYAG FELÜLETEKRE
NANOEZÜST ALAPÚ ANTIBAKTERIÁLIS SZÓRHATÓ SZOL KIFEJLESZTÉSE MŰANYAG FELÜLETEKRE Gábor Tamás1, Hermann Zsolt2, Hubai László3 1: PhD, 2: kutató, 3: kutató NANOCENTER Kft. BEVEZETÉS A nanorészecskéket tartalmazó
Részletesebbenph mérés indikátorokkal
ph mérés indikátorokkal Általános tudnivalók a ph értékéről és méréséről Egy savat vagy lúgot tartalmazó vizes oldat savasságának vagy lúgosságának erősségét a H + vagy a OH - ion koncentrációval lehet
RészletesebbenAbszorpciós fotometria
A fény Abszorpciós fotometria Ujfalusi Zoltán PTE ÁOK Biofizikai ntézet 2011. szeptember 15. E B x x Transzverzális hullám A fény elektromos térerősségvektor hullámhossz Az elektromos a mágneses térerősség
RészletesebbenNATRII AUROTHIOMALAS. Nátrium-aurotiomalát
Natrii aurothiomalas Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.5.8-1 07/2007:1994 NATRII AUROTHIOMALAS Nátrium-aurotiomalát DEFINÍCIÓ A (2RS)-2-(auroszulfanil)butándisav mononátrium és dinátrium sóinak keveréke. Tartalom: arany
RészletesebbenAz áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése, diagnosztikai alkalmazásai
Az áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése, diagnosztikai alkalmazásai Az áramlási citométer és sejtszorter felépítése és működése Kereskedelmi forgalomban kapható készülékek 1 Fogalmak
Részletesebben6 Ionszelektív elektródok. elektródokat kiterjedten alkalmazzák a klinikai gyakorlatban: az automata analizátorokban
6. Szelektivitási együttható meghatározása 6.1. Bevezetés Az ionszelektív elektródok olyan potenciometriás érzékelők, melyek valamely ion aktivitásának többé-kevésbé szelektív meghatározását teszik lehetővé.
RészletesebbenVálasz Bereczki Dániel Professzor Úr bírálatára
Válasz Bereczki Dániel Professzor Úr bírálatára Először is hálás köszönettel tartozom Bereczki Professzor Úrnak, amiért elvállalta a disszertációm bírálatát és azt védésre alkalmasnak tartotta. A formai
RészletesebbenA proteomika új tudománya és alkalmazása a rákdiagnosztikában
BIOTECHNOLÓGIAI FEJLESZTÉSI POLITIKA, KUTATÁSI IRÁNYOK A proteomika új tudománya és alkalmazása a rákdiagnosztikában Tárgyszavak: proteom; proteomika; rák; diagnosztika; molekuláris gyógyászat; biomarker;
Részletesebben~ 1 ~ Ezek alapján a következő célokat valósítottuk meg a Ph.D. munkám során:
~ 1 ~ Bevezetés és célkitűzések A sejtekben egy adott időpillanatban expresszált fehérjék összessége a proteom. A kvantitatív proteomika célja a proteom, egy adott kezelés vagy stimulus hatására bekövetkező
RészletesebbenMikrohullámú abszorbensek vizsgálata 4. félév
Óbudai Egyetem Anyagtudományok és Technológiák Doktori Iskola Mikrohullámú abszorbensek vizsgálata 4. félév Balla Andrea Témavezetők: Dr. Klébert Szilvia, Dr. Károly Zoltán MTA Természettudományi Kutatóközpont
RészletesebbenTények a Goji bogyóról:
Tények a Goji bogyóról: 19 aminosavat (a fehérjék építőkövei) tartalmaz, melyek közül 8 esszenciális, azaz nélkülözhetelen az élethez. 21 nyomelemet tartalmaz, köztük germániumot, amely ritkán fordul elő
Részletesebben5. Az adszorpciós folyamat mennyiségi leírása a Langmuir-izoterma segítségével
5. Az adszorpciós folyamat mennyiségi leírása a Langmuir-izoterma segítségével 5.1. Átismétlendő anyag 1. Adszorpció (előadás) 2. Langmuir-izoterma (előadás) 3. Spektrofotometria és Lambert Beer-törvény
RészletesebbenIPARI KINYERÉSTECHNIKA GYAKORLAT BIOMÉRNÖK MSc V. LIZOZIM TISZTÍTÁSA TOJÁSFEHÉRJÉBŐL IONCSERÉLŐ KROMATOGRÁFIÁVAL
IPARI KINYERÉSTECHNIKA GYAKORLAT BIOMÉRNÖK MSc V. LIZOZIM TISZTÍTÁSA TOJÁSFEHÉRJÉBŐL IONCSERÉLŐ KROMATOGRÁFIÁVAL 1. LIZOZIM DE TTK Biomérnöki Tanszék Kémia épület D6 Gyakorlatvezető: Molnár Ákos Péter
RészletesebbenNÖVÉNYÉLETTAN. Az Agrármérnöki MSc szak tananyagfejlesztése TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0010
NÖVÉNYÉLETTAN Az Agrármérnöki MSc szak tananyagfejlesztése TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0010 Sejtfal szintézis és megnyúlás Környezeti tényezők hatása a növények növekedésére és fejlődésére Előadás áttekintése
RészletesebbenReakciókinetika és katalízis
Reakciókinetika és katalízis 2. előadás: 1/18 Kinetika: Kísérletekkel megállapított sebességi egyenlet(ek). A kémiai reakció makroszkópikus, fenomenológikus jellemzése. 1 Mechanizmus: Az elemi lépések
RészletesebbenGyógyszerhatóanyagok azonosítása és kioldódási vizsgálata tablettából
Gyógyszerhatóanyagok azonosítása és kioldódási vizsgálata tablettából ELTE TTK Szerves Kémiai Tanszék 2015 1 I. Elméleti bevezető 1.1. Gyógyszerkönyv A Magyar gyógyszerkönyv (Pharmacopoea Hungarica) első
RészletesebbenLakos István WESSLING Hungary Kft. Zavaró hatások kezelése a fémanalitikában
Lakos István WESSLING Hungary Kft. Zavaró hatások kezelése a fémanalitikában AAS ICP-MS ICP-AES ICP-AES-sel mérhető elemek ICP-MS-sel mérhető elemek A zavarások felléphetnek: Mintabevitel közben Lángban/Plazmában
RészletesebbenDér András MTA SZBK Biofizikai Intézet
Hogyan befolyásolja a határfelületi vízréteg szerkezete a fehérjeműködést? Dér András MTA SZBK Biofizikai Intézet Felületi feszültség Geometriai optimalizáció Biológiai érhálózat γ dw da Eötvös mérései
RészletesebbenSpeciális fluoreszcencia spektroszkópiai módszerek
Speciális fluoreszcencia spektroszkópiai módszerek Fluoreszcencia kioltás Fluoreszcencia Rezonancia Energia Transzfer (FRET), Lumineszcencia A molekuláknak azt a fényemisszióját, melyet a valamilyen módon
RészletesebbenRöntgen-gamma spektrometria
Röntgen-gamma spektrométer fejlesztése radioaktív anyagok elemi összetétele és izotópszelektív radioaktivitása egyidejű meghatározására Szalóki Imre, Gerényi Anita, Radócz Gábor Nukleáris Technikai Intézet
Részletesebben9 gyak. Acél mangán tartalmának meghatározása UV-látható spektrofotometriás módszerrel
9 gyak. Acél mangán tartalmának meghatározása UV-látható spektrofotometriás módszerrel A gyakorlat célja: Megismerkedni az UV-látható spektrofotometria elvével, alkalmazásával a kationok, anionok analízisére.
RészletesebbenAMIKACINUM. Amikacin
07/2012:1289 AMIKACINUM Amikacin C 22 H 43 N 5 O 13 M r 585,6 [37517-28-5] DEFINÍCIÓ 6-O-(3-Amino-3-dezoxi-α-D-glükopiranozil)-4-O-(6-amino-6-dezoxi-α-D-glükopiranozil)-1-N-[(2S)-4- amino-2-hidroxibutanoil]-2-dezoxi-d-sztreptamin.
RészletesebbenMérési jegyzőkönyv. 1. mérés: Abszorpciós spektrum meghatározása. Semmelweis Egyetem, Elméleti Orvostudományi Központ Biofizika laboratórium
Mérési jegyzőkönyv 1. mérés: Abszorpciós spektrum meghatározása A mérés helyszíne: Semmelweis Egyetem, Elméleti Orvostudományi Központ Biofizika laboratórium A mérés időpontja: 2012.02.08. A mérést végezte:
RészletesebbenMikroszkóp vizsgálata Folyadék törésmutatójának mérése
KLASSZIKUS FIZIKA LABORATÓRIUM 8. MÉRÉS Mikroszkóp vizsgálata Folyadék törésmutatójának mérése Mérést végezte: Enyingi Vera Atala ENVSAAT.ELTE Mérés időpontja: 2011. október 12. Szerda délelőtti csoport
Részletesebben23. Indikátorok disszociációs állandójának meghatározása spektrofotometriásan
23. Indikátorok disszociációs állandójának meghatározása spektrofotometriásan 1. Bevezetés Sav-bázis titrálások végpontjelzésére (a mőszeres indikáció mellett) ma is gyakran alkalmazunk festék indikátorokat.
RészletesebbenEcetsav koncentrációjának meghatározása titrálással
Ecetsav koncentrációjának meghatározása titrálással A titrálás lényege, hogy a meghatározandó komponenst tartalmazó oldathoz olyan ismert koncentrációjú oldatot adagolunk, amely a reakcióegyenlet szerint
RészletesebbenBIOTECHNOLÓGIÁK EGYÉB IPARÁGAKBAN. Pókselyemfehérjék előállítása dohányban és burgonyában
BIOTECHNOLÓGIÁK EGYÉB IPARÁGAKBAN Pókselyemfehérjék előállítása dohányban és burgonyában Tárgyszavak: selyemfehérje; transzgénikus növény; szintetikus pókselyem; selyemfehérjegén. A Nephila clavipes pók
RészletesebbenCLOXACILLINUM NATRICUM. Kloxacillin-nátrium
Cloxacillinum natricum Ph.Hg.VIII. Ph.Eur.5.7-1 04/2007:0661 CLOXACILLINUM NATRICUM Kloxacillin-nátrium C 19 H 17 ClN 3 NaO 5 S.H 2 O M r 475,9 DEFINÍCIÓ Nátrium-[(2S,5R,6R)-6-[[[3-(2-klórfenil)-5-metilizoxazol-4-il]karbonil]amino]-
RészletesebbenPrimer demenciák, Parkinson-kór és Parkinson plusz szindrómák diagnosztikus és terápiás kérdései
Primer demenciák, Parkinson-kór és Parkinson plusz szindrómák diagnosztikus és terápiás kérdései Prof. Komoly Sámuel MTA doktora PTE Neurológiai Klinika igazgatója Demenciákról általában Progresszív memóriazavar
RészletesebbenTárgyszavak: Diclofenac; gyógyszermineralizáció; szennyvíz; fotobomlás; oxidatív gyökök.
VÍZGAZDÁLKODÁS ÉS SZENNYVIZEK 3.5 6.5 A Diclofenac gyógyszer gyorsított mineralizációja Tárgyszavak: Diclofenac; gyógyszermineralizáció; szennyvíz; fotobomlás; oxidatív gyökök. A gyógyszerek jelenléte
RészletesebbenÁltalános Kémia GY, 2. tantermi gyakorlat
Általános Kémia GY, 2. tantermi gyakorlat Sztöchiometriai számítások -titrálás: ld. : a 2. laborgyakorlat leírásánál Gáztörvények A kémhatás fogalma -ld.: a 2. laborgyakorlat leírásánál Honlap: http://harmatv.web.elte.hu
RészletesebbenKONDUKTOMETRIÁS MÉRÉSEK
A környezetvédelem analitikája KON KONDUKTOMETRIÁS MÉRÉSEK A GYAKORLAT CÉLJA: A konduktometria alapjainak megismerése. Elektrolitoldatok vezetőképességének vizsgálata. Oxálsav titrálása N-metil-glükamin
RészletesebbenNyilvános Értékelő Jelentés. Alleopti Komfort. 20 mg/ml oldatos szemcsepp egyadagos tartályban. (nátrium-kromoglikát)
Nyilvános Értékelő Jelentés Gyógyszernév: (nátrium-kromoglikát) Nemzeti eljárás A forgalomba hozatali engedély jogosultja: Sanofi-aventis Zrt. Kelt: 2014. november 11. TARTALOM NEM EGÉSZSÉGÜGYI SZAKEMBEREKNEK
RészletesebbenZn-tartalmú szennyvíz membránszűrése. Dr. Cséfalvay Edit, egyetemi tanársegéd BME Kémiai és Környezeti Folyamatmérnöki Tanszék
Zn-tartalmú szennyvíz membránszűrése Dr. Cséfalvay Edit, egyetemi tanársegéd BME Kémiai és Környezeti Folyamatmérnöki Tanszék 1 Alapfogalmak Permeát: tisztított víz Permeát fluxus: a membránon átszűrt
RészletesebbenElektro-analitikai számítási feladatok 1. Potenciometria
Elektro-analitikai számítási feladatok 1. Potenciometria 1. Vas-só részlegesen oxidált oldatába Pt elektródot merítettünk. Ennek az elektródnak a potenciálját egy telített kalomel elektródhoz képest mérjük
RészletesebbenFelületi feszültség és viszkozitás mérése. I. Felületi feszültség mérése. Felületi feszültség mérés és viszkozimetria 2. Fizikai kémia gyakorlat 1
Fizikai kémia gyakorlat 1 Felületi feszültség mérés és viszkozimetria 2 I. Felületi feszültség mérése 1. Bevezetés Felületi feszültség és viszkozitás mérése A felületi feszültség fázisok határfelületén
RészletesebbenA fehérjék szerkezeti hierarchiája. Fehérje-szerkezetek! Klasszikus szerkezet-funkció paradigma. szekvencia. funkció. szerkezet! Myoglobin.
Myoglobin Fehérje-szerkezetek! MGLSDGEWQLVLNVWGKVEADIPGGQEVLIRLFK GPETLEKFDKFKLKSEDEMKASE DLKKGATVLTALGGILKKKGEAEIKPLAQSA TKKIPVKYLEFISECIIQVLQSK PGDFGADAQGAMNKALELFRKDMASNYKELGFQG Fuxreiter Mónika! Debreceni
Részletesebben(11) Lajstromszám: E 005 564 (13) T2 EURÓPAI SZABADALOM SZÖVEGÉNEK FORDÍTÁSA
!HU0000064T2! (19) HU (11) Lajstromszám: E 00 64 (13) T2 MAGYAR KÖZTÁRSASÁG Magyar Szabadalmi Hivatal EURÓPAI SZABADALOM SZÖVEGÉNEK FORDÍTÁSA (21) Magyar ügyszám: E 0 704342 (22) A bejelentés napja: 0.
RészletesebbenSZABVÁNYMŰVELETI ELŐÍRÁS
SEMMELWEIS EGYETEM Orvosi Biokémiai Intézet 1094 Budapest, Tű zoltó u. 37-47. SZABVÁNYMŰVELETI ELŐÍRÁS Készítette: 2009.02.04. A dokumentáció kódja: SE-OBI-OKT-MU- 05 Dr. Komorowicz Erzsébet adjunktus
RészletesebbenTermészetvédő 1., 3. csoport tervezett időbeosztás
Természetvédő 1., 3. csoport tervezett időbeosztás 3. ciklus: 2012. január 05. Elektro-analitika elmélet. 2012. január 12. Titrimetria elmélet 2012. január 19. március 01. A ciklus mérései: 1. ph-mérés,
RészletesebbenTPPP, EGY ÚJ FEHÉRJE CSALÁD: HOMOLÓG SZEKVENCIÁK ELTÉRŐ SZERKEZETI ÉS FUNKCIONÁLIS SAJÁTSÁGOKKAL
TPPP, EGY ÚJ FEHÉRJE CSALÁD: HOMOLÓG SZEKVENCIÁK ELTÉRŐ SZERKEZETI ÉS FUNKCIONÁLIS SAJÁTSÁGOKKAL Vincze Orsolya Eötvös Loránd Tudományegyetem Biológia Doktori Iskola (Iskolavezető: Dr. Erdei Anna) Molekuláris
Részletesebben2.6.16. VIZSGÁLATOK IDEGEN KÓROKOZÓKRA HUMÁN ÉLŐVÍRUS-VAKCINÁKBAN
2.6.16. Vizsgálatok idegen kórokozókra Ph.Hg.VIII. - Ph.Eur.7.0 1 2.6.16. VIZSGÁLATOK IDEGEN KÓROKOZÓKRA HUMÁN ÉLŐVÍRUS-VAKCINÁKBAN 01/2011:20616 Azokhoz a vizsgálatokhoz, amelyekhez a vírust előzőleg
RészletesebbenMódszer az ASEA-ban található reaktív molekulák ellenőrzésére
Módszer az ASEA-ban található reaktív molekulák ellenőrzésére Az ASEA-ban található reaktív molekulák egy komplex szabadalmaztatott elektrokémiai folyamat, mely csökkenti és oxidálja az alap sóoldatot,
Részletesebben3/11/2015 SZEDIMENTÁCIÓ ELEKTROFORÉZIS. Szedimentáció, elektroforézis. Alkalmazások hematológia - vér frakcionálása
PÉCSI TUDOMÁNYEGYETEM ÁLTALÁNOS ORVOSTUDOMÁNYI KAR hematológia - vér frakcionálása Példa: teljes vérkép www.aok.pte.hu SZÉTVÁLASZTÁSI MÓDSZEREK: SZEDIMENTÁCIÓ ELEKTROFORÉZIS vérplazma (55 %) BIOFIZIKA
RészletesebbenEgy idegsejt működése
2a. Nyugalmi potenciál Egy idegsejt működése A nyugalmi potenciál (feszültség) egy nem stimulált ingerelhető sejt (neuron, izom, vagy szívizom sejt) membrán potenciálját jelenti. A membránpotenciál a plazmamembrán
RészletesebbenMEMBRÁNKONTAKTOR ALKALMAZÁSA AMMÓNIA IPARI SZENNYVÍZBŐL VALÓ KINYERÉSÉRE
MEMBRÁNKONTAKTOR ALKALMAZÁSA AMMÓNIA IPARI SZENNYVÍZBŐL VALÓ MASZESZ Ipari Szennyvíztisztítás Szakmai Nap 2017. November 30 Lakner Gábor Okleveles Környezetmérnök Témavezető: Bélafiné Dr. Bakó Katalin
Részletesebben