MEDIPOLISZ. Dél-Dunántúli Regionális Egyetemi Tudásközpont ÉVES JELENTÉS. Életminôséget Javító Gyógyszerek és Gyógyító Eljárások Fejlesztése

Átírás

1

2 MEDIPOLISZ Dél-Dunántúli Regionális Egyetemi Tudásközpont ÉVES JELENTÉS 2007 Életminôséget Javító Gyógyszerek és Gyógyító Eljárások Fejlesztése 3

3 Tartalom Átfogó cél A kutatás-fejlesztési program...6 A központnak a befogadó egyetemen belül betöltött szerepe... 7 A Pécsi Tudományegyetem mint befogadó intézmény szerepe és bemutatása... 8 A Tudásközpont szervezeti felépítése és tudományos, szakmai és pénzügyi tervezési folyamatai Ipari együttmûködés...11 Fenntarthatóság és jövôkép A kutatási programok beszámolói Új hatásmódú kapszaicin receptoron ható fájdalomcsillapító gyógyszerek kifejlesztése Központi idegrendszeri gyógyszer-targeteken ható endogén és exogén anyagok kutatása A TT-232 nem-peptid követô molekulák kötôdési és hatástani vizsgálata COX-1 gátló gyógyszerek gyomorkárosító hatásának kivédése, COX-1 gátló és capsaicin tartalmú készítmények kifejlesztése, valamint további ismert hatóanyagú termék klinikofarmakológiai ipari együttmûködésen alapuló termék fejlesztése Gyógyszer hatóanyagok gyógyszerkészítményekben és biológiai mintákban történô meghatározása Az ibuprofen hatóanyagot tartalmazó készítmény gyártástechnológiai korszerûsítése Gyógyszeralkalmazás, gyógyszer interakciók informatikai jellemzôi Aszeptikus technológiával gyártható készítmények kifejlesztése Klinikofarmakológiai vizsgálatok Ultraszenzitív laboratóriumi technikák kifejlesztése bioaktív anyagok kimutatása céljából Gyógyszeres kezelésekre kialakuló rezisztencia megítélése a P-glicoproteinen (MDR1) és a citokróm P-450-en alapuló gén-polimorfizmusok azonosításával Szteroidok elemzése GC-MS eljárással; elektroforézis chip-technológia kidolgozása Diagnosztikai laboratóriumok akkreditálása Szakmai-gazdasági szempontból koordinált, hatékony regionális laboratóriumi ellátórendszer kialakítása, a regionális diagnosztikai beteg-utak modelljének kimunkálása Klinikai biokémikus szakirányú szakképzés Oktatás és képzés Publikációk (kutatási altémák szerint) A programban közremûködôk A tudásközpont médiaszereplései Teljesítményindikátorok Mellékletek

4 É VES J ELENTÉS 2007 Küldetésnyilatkozat A MEDIPOLISZ Dél-Dunántúli Regionális Egyetemi Tudásközpont küldetése kutatás-fejlesztési innovációs és oktatási kiválósági központ létrehozása a gazdasági szféra és egyetem együttmûködésén alapuló orvostudományi fejlesztések hatékony kiaknázása céljából. Életminôséget javító versenyképes gyógyszerek és gyógyeljárások felfedezése, új biotechnológiai módszerek bevezetésén alapuló diagnosztikai eljárások kidolgozása, valamint a Nemzeti Fejlesztési Tervben a régió egészségipari pólus programjainak megalapozása a kitûzött cél. Stratégiai célkitûzés A MEDIPOLISZ Regionális Egyetemi Tudásközpont a Dél-Dunántúli Régiónak olyan innovatív kutatás-fejlesztési és tudományos utánpótlást képzô konzorciuma, amely a Nemzeti Fejlesztési Tervben regionális prioritásként megjelölt egészségipari pólus program alapját kell, hogy képezze. A régióban az ipartelepítés jelentôsen elmaradt az országos átlagtól és így az állami és vállalati kutatásfinanszírozás megroppant, természettudományos kutatóintézet hiányzik és az eddigi egyetemi MTA támogatás is visszaszorult. A Pécsi Tudományegyetem Általános Orvostudományi Kara a Gyógyszerész szakkal kiegészülve Kiválóság Központ minôsítést kapott, s így jelentôs nemzetközi színvonalú kutató-oktatói gárdával rendelkezik amely angol, német, magyar nyelvû graduális képzésen kívül évente mintegy 50 új PhD doktor képzését biztosítja. Ez a meglévô szakember-kapacitás, késôbbiekben a PTE más karaival, valamint a Kaposvári Egyetemmel kiegészülve biztos alapot képez gazdasági partnerekkel való együttmûködésre és fejlesztési célú kutatási célok elérésére. A Tudásközpont stratégiai célja új termékek kifejlesztése, versenyképes innovatív vállalkozások bôvítése, tudásalapú termékstruktúra kialakítása, új munkahelyek létesítése és kutatói utánpótlás képzése. 5

5 Átfogó cél Innovatív termékfejlesztés Gazdasági szereplôk bevonása a régió kutatás-fejlesztési programjaiba Együttmûködésen alapuló tudás- és technológiatranszfer hatékony mûködtetése Egészségügyi ellátás és megelôzés terén költségcsökkentô innovatív eljárások kidolgozása Nemzetközi szintû tudományos tevékenység erôsítése Tudományos utánpótlás képzése A kutatás-fejlesztési program A kutatási programokat az egyetem kutatói bázisa és az együttmûködô vállalati partnerek által közösen preferált célkitûzések összehangolása alapján alakították ki. Két alprogram közül, az egyik a gyógyszerkutatás témakörében 9 altémát tartalmaz, melynek keretében hangsúlyos szerepet kap a farmakológusképzés és új kutatói laboratóriumok kialakítása. A másik alprogram diagnosztikai eljárások fejlesztését tûzte ki célul a gyógyszeres terápia és egyéb gyógyító eljárások hatékonyságának javítása érdekében. Ez utóbbi témakörbe 6 altéma tartozik, beleértve a klinikai biokémikus és genetikai szakirányú szakképzés bevezetését. Fontos eleme a Tudásközpontnak a Technológia Transzfer Iroda kialakítása, iparjogvédelem, az egyetemi szellemi tulajdon menedzselésének megszervezése, oktatása és együttmûködése a Pécsi Tudományegyetem, valamint a Dél- Dunántúli Régió innovációs szervezeteivel. 6 Prof. Dr. Szolcsányi János Projektvezetô

6 É VES J ELENTÉS 2007 A központnak a befogadó egyetemen belül betöltött szerepe A tízkarú PTE a szakképzés szinte teljes vertikumát lefedi, ezzel a hazai felsôoktatásban egyedülálló helyzetet teremtve a multidiszciplináris megközelítésû kutatásokra, a kutatás-fejlesztésekre és ezáltal a regionális innovációs folyamatokba történô sokoldalú bekapcsolódásra. A Dél-Dunántúlon a PTE elsôsorban annak angol és német nyelvû képzést folytató több mint 80 éves orvoskara, amely az elmúlt években a gyógyszerész szakkal kibôvülve, valamint a 14 éve megalakult Természettudományi Karral együttmûködve képezi és képezheti azt a kritikus kutatói bázist, amely a Régió legszélesebb körû kutatói hálózatát képezi. A központ a kutatói képzés bôvítésében a fókuszált alkalmazott kutatási irányok terén létesítendô együttmûködések koordinálásában fog hosszú távon is meghatározó szerepet játszani. A Tudásközpont felépítését és mûködését tehát alapvetôen meghatározza a PTE jelenlegi struktúrája, ugyanakkor létrehozása dinamikusan visszahat a PTE egészének mûködésére. Konzorciumi partnerek Pécsi Tudományegyetem a konzorcium vezetô intézménye Biostatin Gyógyszerkutató-Fejlesztô Kft. Csertex Kereskedelmi és Tanácsadó Kft. Diagnosticum ZRt. HC Pointer Kft. Richter Gedeon NyRt. PannonPharma PannonPharma Gyógyszergyártó Kft. Roche Diagnostics Roche (Magyarország) Kft. 7

7 A Pécsi Tudományegyetem mint befogadó intézmény szerepe és bemutatása A Tudásközpont létrehozására irányuló konzorcium vezetôje a Pécsi Tudományegyetem. A Pécsi Tudományegyetem a felsôoktatási integrációs folyamat keretében január 1-jén, a Janus Pannonius Tudományegyetem, a Pécsi Orvostudományi Egyetem és a Szekszárdi Tanárképzô Fôiskola egyesülésével jött létre Oktató/kutató összesen Ebbôl az ÁOK keretében MTA tagja MTA doktora Kandidátus/PhD PhD hallgató A PTE legutóbbi akkreditációs adatai alapján Az egyetemen több mint nappali és több mint levelezô tagozatos hallgató tanul. Az egyetem nemzetközi kapcsolatai nagy hagyományokkal rendelkeznek Közép- és Kelet Európában, Nyugat-Európában, az Amerikai Egyesült Államokban és a Távol Keleten egyaránt. A szakember- és hallgatócsere kiválóan mûködô TEMPUS-, CEEPUS- és ERASMUS programokon keresztül zajlik. Ami a nemzetközi kutatási kapcsolatokat illeti, bilaterális szerzôdések, nemzetközi hálózatok és EU programok egyaránt növelik az egyetem ismertségét és elismertségét. Ipari partnerek Biostatin Gyógyszerkutató-Fejlesztô Kft. Fô tevékenységi köre a gyógyszerkutatás és fejlesztés. Fôleg daganatos betegségek elleni gyógyszerek, fájdalomcsillapítók és gyulladásgátlók fejlesztésével foglalkozik. Csertex Kereskedelmi és Tanácsadó Kft. A cég tevékenysége: az egészségügyi intézetek ellátásával foglalkozó üzletág a kórházi laboratóriumok, illetve gyógyító részlegek ellátásával foglalkozik. Kiemelten a diagnosztikai laboratóriumok, mikrobiológiai egységek gépekkel, mûszerekkel és fogyóanyagokkal való ellátása területén. Diagnosticum Zrt. A cég profilja megalakulásától kezdve orvosi laboratóriumi diagnosztikumok fejlesztése, gyártása, forgalmazása, valamint az ezekhez kapcsolódó eszközök, mûszerek forgalmazása és szervize. HC Pointer Kft. A HC Pointer Kft. három üzletága a Gyógyszerészi & Egészségügyi Üzletág, a Kereskedelmi Üzletág, a Kórházi & Szakmai Fejlesztések Üzletág. A cég fô profilja a készletgazdálkodást segítô alkalmazások fejlesztése, amelyek IBM kompatibilis PC bázison mûködnek. 8

8 É VES J ELENTÉS 2007 Pannonpharma Gyógyszergyártó Kft. A Pannonpharma Kft. tevékenységi köre az alábbi területeket fedi le: mintegy 70 forgalmazott termék; több, mint 40 termék törzskönyvezés alatt. Termékeik forrása ma még elsôsorban a licenc-alapú együttmûködés, de forgalmaznak egyedi készítményeket is és fejlesztenek, értékesítenek generikus gyógyszereket saját márkanéven. A társaság 1997 óta folyamatosan együttmûködik a PTE-vel. Richter Gedeon Nyrt. Humán kiszerelt gyógyszerek, hatóanyagok és intermedierek kutatás-fejlesztésével, gyártásával és forgalmazásával foglalkozik. A cég mintegy száz féle gyógyszert gyárt, több mint 170 kiszerelési formában. Termékeik számos terápiás területet lefednek, ezen belül kiemelt szerepe van a központi idegrendszerre ható, a fekélyellenes, a kardiovaszkuláris és az emésztôrendszeri készítmények, valamint az orális fogamzásgátlók gyártásának-fejlesztésének. Az innováció kiemelt szerepet tölt be a társaság stratégiájában. Originális kutatási tevékenységük kizárólag a központi idegrendszeri szerek kutatására irányul, ezen belül elsôsorban a krónikus fájdalom, a fájdalmas izomspazmus és a skizofrénia, a szorongás és az Alzheimer-kór kezelésére irányuló készítményekre összpontosítanak. Roche (Magyarország) Kft. A bázeli központú svájci Roche csoport a világ egyik vezetô, kutatás-orientált, gyógyszerek kifejlesztésével, gyártásával és diagnosztikus eszközök létrehozásával kiemelkedô helyet kivívó szervezete, és egyben a világ egyik legnagyobb vitamin, aroma és illat-anyagok elôállítója. A géntechnológiában betöltött egyedülálló szerepét igazolja, hogy az egyik legfejlettebb biotechnológiai háttérrel is rendelkezik, ezáltal is tovább erôsítve a Roche elôkelô helyét az egészségügyi piacon. Arculatának kialakulásához nagyban hozzájárul a betegségek korai diagnózisának és kezelésének eszméje. A polimeráz láncreakció (PCR) Nobel-díjas technológiájának felfedezését követôen 1991-ben a Roche megszerezte a jogot a PCR diagnosztikai alkalmazása felett, ezáltal e technológiában a világ vezetôjévé lépett elô. A kutatási eredmények hasznosítása A MEDIPOLISZ altémáinak közvetlen célkitûzése az eredmények hasznosítása. Ez a cél két altémában jelentôs alapkutatási eredményeken alapuló új célmolekulán ható fájdalomcsillapító-gyulladásgátló részben szabadalmaztatott ígéretes gyógyszerjelöltek preklinikai vizsgálatait tartalmazza. A további altémák célkitûzése kifejezetten innovatív termékfejlesztés. A diagnosztikai eljárások fejlesztésének témakörében egyaránt szerepelnek szabadalmaztatható módszerek kidolgozását, a gyógyszeres kezelés költséghatékonyságának fokozását, a költség-takarékos diagnosztikai módszerek bevezetését, valamint gyógyszerkutatáshoz akkreditált laboratórium kialakítását megvalósító egészségügyben hasznosítható célkitûzések. 9

9 A Tudásközpont szervezeti felépítése és tudományos, szakmai és pénzügyi tervezési folyamatai Régió vállalk. Régió vállalk. Spin-off vállalk. Spin-off vállalk. Technológia Transzfer Iroda Konzorciumi tagok Tud.közp. Igazgató Tanácsa Tud.közp. Koordinációs Igazgatósága 1. alprogram 2. alprogram InnovAID Bt. Pénzügyi asszisztens A Tudásközpont tervezési folyamata: Pénzügyi folyamatok: Kutatási információ: Üzleti kommunikáció: Találmányhasznosítási folyamatok: A konzorcium vezetô intézménye a Pécsi Tudományegyetem. Döntéshozó testülete a Tagok Összességének Tanácsa, melynek tagjai: Dr. Szolcsányi János a Tudásközpont igazgatója Pécsi Tudományegyetem Dr. Szüts Tamás ügyvezetô igazgató Biostatin Kft. Dr. Cserta Gábor ügyvezetô igazgató Csertex Kft. Torzsa Tibor ügyvezetô igazgató HC Pointer Kft. Pallos József Péter ügyvezetô igazgató PannonPharma Kft. Dr. Péterfy Ferenc elnök Diagnosticum ZRt. Péter Mária divízióvezetô Roche (Magyarország) Kft. Bogsch Erik vezérigazgató Richter Gedeon NyRt. A Tudásközpont menedzsment feladatait a Projektkoordinációs Igazgatóság, élén Dr. Szekeres Péter menedzser igazgató látja el. Az Igazgatóságon a menedzser igazgató munkáját egy kommunikációs menedzser, egy projekt adminisztrátor, egy pénzügyi menedzser, egy pénzügyi asszisztens és egy szakmai koordinátor segíti. Elkészült a Tudásközpont web-helye, mely a címen található. A Technológia Transzfer Iroda vezetôje Dr. Kiefer Éva jogász. 10

10 É VES J ELENTÉS 2007 Ipari együttmûködés A Richter Gedeon Nyrt. közremûködésével, három kutató és két doktorandusz alkalmazásával Analgetikum Kutatólaboratórium került kialakításra, felszerelése, és bevezetésre került a Richter Gedeon Nyrt. high throughput screening (HTS) módszertana; A Biostatin Kft. mindegy 80 újonnan szintetizált vegyületet bocsátott a PTE Farmakológiai és Farmakoterápiai Intézet számára, ahol az anyagok neurogén gyulladást okozó ágensek felszabadulását gátló hatásának vizsgálata történik. A Biostatin Kft. folyamatosan biztosítja a tesztvegyületek minôségi ellenôrzését és elegendô mennyiségben történô elôállítását; A Pannonpharma Kft. közremûködésével orális, hatóanyagként capsaicint tartalmazó készítmény kidolgozása folyik, továbbá iparjogvédelmi oltalom nyerése a készítmény(ek)re, a készítmények törzskönyvezése és forgalomba hozatala; A Pannonpharma Kft. közremûködésével helyi kezelésre alkalmas gombaellenes készítmény kifejlesztése és szabadalmaztatása történik; A PTE Gyógyszerészi Kémiai Intézetében a laboratórium fejlesztésének célja, hogy a gyógyszerfejlesztés (Pannonpharma Kft.) során keletkezô minták elemzése a gyógyszergyártás, illetve a gyógyszerfejlesztés során elôírt követelményeknek megfelelô minôsítéssel rendelkezô laboratóriumi környezetben elvégezhetô legyen; A Pannonpharma Kft.-vel az ibuprofen hatóanyagot tartalmazó drazsék gyártás-technológiai korszerûsítése történik; A HC Pointer Kft.-vel együttmûködve a gyógyszerek hazai, hivatalos alkalmazási elôiratának elemzése és a gyógyszerkölcsönhatások szûrését lehetôvé tevô genetikai laboratórium és adatbázis kidolgozása történik; A PTE OEKK KK I. sz. Belgyógyászati Klinika Klinikai Farmakológiai Osztálya aktív részt vállal az ipari partner (Pannonpharma Kft.) klinikai fázis I-II vizsgálataiban; A Diagnosticum Zrt. közremûködésével citokinek mérésére alkalmas SPR (Surface Plasmon Resonance) módszer- és mûszerfejlesztés folyik; A Roche (Magyarország) Kft. és a Csertex Kft. közremûködésével a gyógyszeres kezelésekre kialakuló rezisztencia vizsgálatára alkalmas laboratóriumi módszerek kidolgozása történik; A Csertex Kft.-vel közösen került kialakításra szteroidok GC-MS eljárással való elemzésére laboratórium, továbbá új elektroforézis chip-technológia kerül kidolgozásra; A Roche (Magyarország) Kft. és a Csertex Kft. közremûködésével történik a gyógyszerkutatással foglalkozó laboratóriumok egy részének akkreditálása, továbbá a regionális laboratóriumi diagnosztikai betegutak felmérése, a költséghatékony gyógyszerelés szempontjából. A Roche (Magyarország) Kft., Csertex Kft. és Diagnosticum Zrt. közremûködésével három kutatólaboratórium került kialakításra és felszerelésre, melynek átadására május 4-én megtörtént. 11

11 Fenntarthatóság és jövôkép A MEDIPOLISZ Egyetemi Tudásközpont konzorciumi formában való továbbvitele a három éves periódust követôen is kiemelt jelentôségû. A regionális egészségipari klaszter kiépítésében innovációt katalizáló és regionális ipari partnereket vonzó szerepe továbbá K+F tudományos kutatói utánpótlás képzése tervezett inkubátorház létesítmény mûködtetése tekintetében a Dél-Dunántúli Régióban és azon kívül is jelentôs feladat. Ezen a téren a 2007-es évben a következô eredményeket értük el az altémák keretében történô részletes beszámolókon kívül. 1. A Pécs Életminôség Pólus Egészségügyi Klaszter keretében létrejött Pécs Egészségipari Innovációs Központ Zrt.-hez tartozó két ipari partner: a Biotechnológiai Innovációs Bázis mint orvosi biotechnológiai spin-off vállalat társult tagként csatlakozott a MEDIPOLISZ Egyetemi Tudásközponthoz. Közös további K+F kutatási programok kidolgozása elkezdôdött. az OsTendo Szolgáltató Kft. a mozgásszervi betegségek sebészeti terápiáját implantátum fejlesztési programjának vállalatával az együttmûködés megkezdôdött és társult tagként csatlakozott a MEDIPOLISZ Egyetemi Tudásközponthoz. Innocsekk pályázat révén a PTE Sebészetei Oktató és Kutató Intézettel beadott közös pályázata eft támogatást kapott. 2. Innovációs kutatási, pályázati, termékfejlesztési együttmûködések indultak ill. folytatódtak a Tudásközpont márc. 30-án megtartott közgyûlésén hivatalosan is társult tagként csatlakozott alábbi vállalatokkal/szervezetekkel. InnovAID Bt. Mineral-Kies Kft. Pro-Pharma Kft. Supertech Kft. Az InnovAID BT. a Technológiai Transzfer Iroda szabadalmaztatási munkájában, valamint további pályázatok megírásában nyújtott segítséget a pályázat résztvevôjeként vállalt innovációs oktatási feladatokon túl. Három hazai konzorciális pályázat beadásán ill. folyamatban lévô beadásán kívül szeptemberében a Tudásközpont 1.1., 1.3. és 1.4. altémák témakörébôl dr. Szolcsányi János, PTE és InnovAID BT. koordinációjával beadásra került FP7-Health-2007B Targeting TRP channels as gatekeepers: neural links with inflammation in early stages of chronic diseases (Large scale integrating project Health 2007/ ). A pályázatban az 12

12 É VES J ELENTÉS 2007 InnovAID Bt-n és PTE-en kívül a Medipolisz konzorcium Biostatin Kft. ipari partnere továbbá 9 külföldi (német, angol, belga, francia, izraeli, olasz és spanyol) intézet kiemelkedô kutatócsoportja vett részt. Mineral-Kies Kft.-vel az 1.4. altéma keretében megindult gyógyszerfejlesztés megkezdése elôtt beadott kapszaicint tartalmazó ásványvíz nemzetközi szabadalmi bejegyzésére került sor június 29-én. Az új szabadalmaztatott termék Géniusz díjat és több nemzetközi kitüntetést kapott. A csatlakozás keretében további fejlesztési lehetôségek kiaknázása és új termékek forgalmazása a cél. A Pro-Pharma Kft. az 1.3. altémához kapcsolódó gyógyszerfejlesztési feladatokat és további pályázati lehetôségeket kíván a MEDIPOLISZ Tudásközponttal együttmûködve megvalósítani. A Pro-Pharma Kft. mûszerfejlesztô vállalat az 1.2. ill. részben az 1.1. altéma keretében eddig külsô megbízásként végzett munkáját kívánja közös K+F fejlesztések elindításával folytatni. A kutatási eredmények hasznosítási formáinak meghatározása során továbbra is a spin-off vállalkozás alapítást és a licenciaszerzôdések rendszerét alkalmazzuk elsôdlegesen. A spin-off vállalkozások alapításának és mûködésének feltételeit szabályozó jogszabályokkal összhangban elôkészítettük egy, a Tudásközpont technológiájára alapozott spin-off vállalkozás alapítását. A spin-off vállalkozás a Dél-Dunántúli Régió Laboratóriumi Diagnosztikai ellátásának, adatszolgáltatásának és menedzselésének javítására alakult, a régió csúcslaboratóriumi diagnosztikai intézménye a PTE OEKK KK Laboratóriumi Medicina Intézetre alapozva. A Technológia és Transzfer Iroda mint közvetítô szervezet egyre hatékonyabban mûködik a tudásbázist nyújtó felsôoktatási intézmény, kutatóhely és a vállalkozó szféra között, a tartós és minden érintett fél számára elônyös együttmûködés kialakítására az életminôséget javító gyógyszerek és gyógyító eljárások fejlesztése területén. A Tudásközpont regionális beágyazottságát jelenti a Dél-Dunántúli Régió vállalkozási, innovációs és tudományos adottsága. A Pannon Egészségipari Innovációs Központ és Inkubátorház (EIK) a Pécs Életminôség Pólus az egészségipari klaszter részét képezi. A PTE Általános Orvostudományi Kar, a Pécs-Baranyai Kereskedelmi és Iparkamara, a Pécsi Ipari Park Gazdaságfejlesztô ZRt; a Biotechnológiai Innovációs Bázis és az Innovációs és Technológia Fejlesztési Központ Kht. megállapodtak egy közös multifunkcionális egészségipari innovációs központ létrehozásában. A MEDIPOLISZ Dél-Dunántúli Regionális Egyetemi Tudásközpont innovatív kutatási témái az EIK négy szakterülete közül, úgymint a farmakológia és orvosi biológia diagnosztikum fejlesztés szakterületen lát el lényeges feladatot. 13

13 14 Rendezvények

14 É VES J ELENTÉS 2007 A kutatási programok beszámolói Két kutatási programban összesen 15 altémában folyik a kutató-fejlesztô munka: 1. sz. alprogram: Fájdalomcsillapító gyulladásgátló gyógyszerjelöltek kutatása fájdalomérzô nociceptív idegvégzôdések mûködésének gátlásán keresztül (Dr. Szolcsányi János alprogram vezetô) 2. sz. alprogram: Diagnosztikai eljárások fejlesztése a gyógyszeres-terápia és egyéb gyógyító eljárások hatékonyságának javítása érdekében (Dr. Kovács L. Gábor alprogram vezetô) 15

15 1.1. altéma: (Témafelelôs: Dr. Szolcsányi János) Új hatásmódú kapszaicin receptoron ható fájdalomcsillapító gyógyszerek kifejlesztése Résztvevôk Dr. Szolcsányi János akadémikus, egyetemi tanár PTE Dr. Pethô Gábor egyetemi docens PTE Dr. Szôke Éva tudományos munkatárs PTE Dr. Tihanyi Károly fôosztályvezetô Richter Gedeon NyRt Dr. Dézsi László kutatási témavezetô Richter, PTE-RG Analgetikai Kutatólaboratórium Dr. Sándor Zoltán kutató-fejlesztô Richter, PTE-RG Analgetikai Kutatólaboratórium Dr. Bölcskei Kata kutató-fejlesztô Richter, PTE-RG Analgetikai Kutatólaboratórium Tékus Valéria PhD hallgató PTE Tóth Dániel Márton PhD hallgató PTE Célok és rövid áttekintés A fájdalomérzô idegvégzôdéseken található TRPV1 kapszaicin receptor fájdalomkeltô anyagok és forró ingerek közös jelfogó molekulájának bizonyult. Így világszerte intenzív kutatások indultak e receptoron ható új típusú fájdalomcsillapító gyógyszerek kifejlesztésére. A PTE Farmakológiai és Farmakoterápiai Intézetben felhalmozott négy évtizedes kapszaicin kutatási tapasztalat és egy klónozott TRPV1-et kifejezô sejtvonal elôállítása lehetôséget nyitott, hogy a Richter Gedeon gyógyszergyár szintetikus kémiai bázisán és nagy hatékonyságú sorozatvizsgálatra alkalmas in vitro tesztrendszerével meginduljon hazánkban is ilyen irányú gyógyszerfejlesztés. A célok elérése érdekében az altéma keretében a Richter Gedeon Vegyészeti Gyár Nyilvánosan Mûködô Rt. és a Pécsi Tudományegyetemen Analgetikum Kutatólaboratóriumot létesített az Egyetem területén. Elvégzett tevékenység, fontosabb eredmények részfeladat: (A projekt céljaira alkalmas laboratórium felépítése, berendezése, a munkavégzéshez szükséges felszerelések, módszerek beállítása) befejezôdött, a PTE Kórélettani Intézetében kialakított PTE RG Analgetikum kutatólaboratóriumban a mûszerpark kialakítása és a módszerek beállítása, illetve alkalmazása a pályázat jelen szakaszában, a és a részfeladatokhoz kapcsoltan, az ütemtervnek megfelelôen folytatódtak részfeladat: Nagy áteresztôképességû szûrési teszt (HTS) kidolgozása és futtatása A TRPV1 mûködést élô sejteken vizsgáló, 384 cellás platere kidolgozott fluoreszcens kalciummérésen alapuló teszt felhasználásával kialakítottunk egy, sorozatméréseket lehetôvé tevô optimális automatizált protokollt. Az automatizált eljárás megbízhatóságát próbavegyületeket tartalmazó platek segítségével ellenôriztük, majd a Richter Gedeon Nyrt. vegyületbankjának megfelelôen kiválasztott részét szûrtük 5 x 10-6 M koncentrációban. Az egyes anyagok TRPV1 aktivációt gátló hatását 500 nm BCTC, mint referenciaanyag hatásával vetettük össze. Az assay jóságát platenként a HTS gyakorlatban elfogadott Z paraméter alapján ellenôriztük. A mérési eredményeket a sejtes plate alapú módszerekre jellemzô pozicionális hatás minimalizálása érdekében a kiértékelés során korrigáltuk. Ehhez az egyes platek eredményét csak inaktív oldószerrel (DMSO) kezelt platek 16

16 É VES J ELENTÉS 2007 válaszával normáltuk, illetve alternatív úton a medián simítás módszerével is elvégeztük a dekonvolúciót. Találatként a mindkét módon aktívnak mutatkozó anyagokat azonosítottuk. A technikai okokból fals pozitívként azonosított vegyületek kiszûrésére ezeket párhuzamosokban megerôsítô mérésnek vetettük alá. A TRPV1 aktiváció gátlása alapján vegyülettárunkból összesen 400 megerôsített találatot azonosítottunk és részfeladatok: A találatokat in vitro és in vivo módszerekkel validáltuk. Ezekrôl a munkákról részben az (in vitro) és részben az részfeladatok keretében számolunk be. A validálás eredményeképpen 15 találati csoportot azonosítottunk. HTS hitek validálása I. IN VITRO TESZT (Richter Gedeon NyRt) A PTE-n létrehozott TRPV1/VR1 receptort stabilan expresszáló sejteken módszer fejlesztett módszeren (ld évi beszámoló) vizsgáltuk a találatok (400 vegyület) hatását a vanilloid receptoron. II. IN VIVO TESZTEK (MEDIPOLISZ-PTE-Richter Analgetikum Laboratórium) NOCICEPTÍV TESZTEK Az elôzô beszámolási idôszakban az résztéma keretében kialakításra került egy in vivo nociceptív magatartási tesztek végzésére alkalmas laboratórium. Az elmúlt év során az így beállított és validált teszteken TRPV1 agonistákat és antagonistákat vizsgáltunk, módszereinket teszteltük, és elôkészítettük az résztéma mûvelése során megtalált vegyületek vizsgálatára. A hô és mechanikai ingerek által kiváltott fájdalom, valamint a gyulladáshoz társuló fájdalom mérésére alkalmas tesztek összehasonlításra kerültek abból a szempontból, hogy melyek a legalkalmasabbak nagyszámú új vegyület hatásainak gyors és megbízható tesztelésére. Éber Sprague- Dawley patkányokon az alábbi módszerekkel és modellekkel végeztünk vizsgálatokat. TERMONOCICEPCIÓS TESZTEK Háromféle módszert, (1) az emelkedô hômérésékletû forró lapot, (2) az emelkedô hômérsékletû vízfürdôt, és (3) a Hargreaves-féle plantar tesztet alkalmaztunk. A reziniferatoxin (RTX) elôkezeléssel kiváltott termális hiperalgézia modellben az (1),(2); a kapszaicin- és RTX-indukála szenzoros deszenzibilizációs modellben az (1),(2), a karrageninnel kiváltott gyulladásos termális hiperalgézia modellben a (3) módszert alkalmaztuk. MECHANONOCICEPCIÓS TESZTEK Szintén háromféle módszert, (1) a dinamikus plantáris eszteziométert (DPA), (2) a von Frey filamentumokat, és (3) az incapacitance tesztert használtuk. Az L5 spinális idegátmetszéssel kiváltott traumás neuropátia (Chung) modellben a kimenetel tesztelésére az (1), (2); a karrageninnel kiváltott gyulladásos mechanikai hiperalgézia modellben az (1); az intraartikuláris carragenin/kaolin injekcióval kiváltott monoarthritis modellben az (1),(2),(3) módszerek alkalmazására került sor. Beállítottuk a kapszaicin szembe cseppentésével kiváltott nocifenzív reakció modelljét (wiping test) is. A Chung modellben gabapentin 100 és 300 mg/kg p.o., pregabalin és desipramin 30 mg/kg p.o. egyszeri dózisait alkalmaztuk. A fenti anyagok a gabapentin kisebb dózisa kivételével a mechanikai allodínia mértékét részlegesen csökkentet- 17

17 ték, a hatás tartósan (4 óra) fennállt. A Chung modellben a TRPV1 receptor szelektív antagonistáit, az SB és a BCTC 3 és 30 mg/kg p.o. dózisait is vizsgáltuk, azonban szignifikáns hatást egyik esetben sem tapasztaltunk. A TRPV1 receptor antagonista SB hatásait akut nocifenzív és gyulladásos modelleken is tanulmányoztuk. Emelkedô hômérsékletû forró lapon a hiperalgéziát a TRPV1 receptor antagonista SB (3-10 mg/kg p.o.) dózisfüggôen mérsékelte, ill. kivédte. A kapszaicin szembe cseppentésével indukált nocifenzív reakciót SB (10 mg/kg i.p.) adása szignifikánsan csökkentette. Karragenin (i.pl.) indukálta akut gyulladás hatására a fókuszált hôsugárral (Hargreaves teszt) kiváltott elhárítási reakció latenciaideje, és a DPA-val mért mechanonociceptív küszöb egyaránt jelentôsen csökkent. SB (10 mg/kg i.p.) kezelés úgy a termális-, mint a mechanikai hiperalgézia mértékét szignifikánsan csökkentette. ALTATOTT ÁLLATON VÉGZETT KÍSÉRLETEK Két új módszer beállítására kiterjedt metodikai fejlesztést végeztünk. A lábháti bôr vazodilatációs modellben a n. saphenus ingerlésre adott efferens válaszát, az antidromos ingerületvezetés hatására felszabaduló mediátorok (calcitonin gene related peptide-cgrp, substance P-SP) mikrocirkulációra kifejtett hatását Lézer Doppler flowmetriával követjük. Az in vivo elektrofiziológiai modellben a n. saphenusról akciós potenciálokat (AP) vezetünk el. Vizsgáljuk a lokálisan (a. epigastrica superficialis) adott kapszaicin intraarteriális bolus injekció fájdalomérzô rostok összetett AP frekvenciájára kifejtett válaszát. A beállított módszerekkel elôkísérleteket végeztünk. III. MOLEKULÁRIS BIOLÓGIAI MÓDSZEREK (PTE Farmakológiai és Farmakoterápiai Intézet) Az elôzô ciklus során a résztéma keretében sikeresen elôállítottunk emberi és patkány TRPV1 (kapszaicin) receptort kifejezô sejtvonalakat. Az résztéma keretében a sejtvonalakat átadtuk a Richter Gedeon gyógyszergyár részére, ahol az elmúlt ciklus keretében elvégezték a nagy áteresztôképességû szûrôvizsgálat (HTS) beállítását. A gyógyszerjelölt molekulák kiválasztása és optimalizálása céljából vizsgáltuk a TRPV1 receptor aktivációban az alloszterikus lipid rafthoz való kötôdés potenciális szerepét. In vitro a koleszterint kiürítve a membránból metilbéta-ciklodextrin kezeléssel azt találtuk, hogy a kapszaicin által kiváltott receptor aktiváció csökkent, míg a reziniferatoxin és alacsony ph által az aktiváció nem változott. Ezek az adatok arra utalnak, hogy a receptoron ható két vezetô molekula a kapszaicin és a resiniferatoxin nem analóg módon kötôdik. Ezen információ jelentôs a gyógyszer tervezés szempontjából. Patkányon target validálás céljából megkezdtük egy a TRPV1 receptor mrns elleni sirns vizsgálatát. Az sirns-el kezelt TRPV1 knock down patkányok mintául szolgálhatnak új TRPV1 specifikus antagonista szerek hatásainak elôrejelzéséhez. Az sirns alkalmazásával sikerült in vitro sejtkultúrában 10%-ra csökkenteni a TRPV1 receptor kifejezôdését tranziens transzfekciós kísérletekben. Jelenleg a TRPV1 elleni sirns patkányokon kifejtett hatását tanulmányozzuk. További lépések A HTS vizsgálatokban in vitro hatásos kiválasztott vegyületek (hit-ek) in vivo antinociceptív hatásosságának meghatározása, a gyógyszerjelölt molekulacsoport kiválasztása originális gyulladásgátló fájdalomcsillapító gyógyszer fejlesztése céljából. 18

18 É VES J ELENTÉS 2007 Oklevelek 19

19 altéma: (Témafelelôs: Dr. Lénárd László) Központi idegrendszeri gyógyszer-targeteken ható endogén és exogén anyagok kutatása Komplex magatartási-neurokémiai kutatások; integrativ vizsgálati protokoll kidolgozása (Témafelelôs: Dr. Lénárd László) Mikroelektrofiziológiai-neurokémiai-magatartási kutatások; KIR-i hatóanyagok vizsgálatára alkalmas tesztrendszer kidolgozása (Témafelelôs: Dr. Karádi Zoltán) Résztvevôk Dr. Lénárd László akadémikus, egyetemi tanár PTE Dr. Karádi Zoltán egyetemi docens PTE Berta Beáta egyetemi tanársegéd PTE Dr. Gálosi Rita MTA munkatárs PTE Dr. László Kristóf egyetemi tanársegéd PTE Oláhné Várady Katalin egyetemi tanársegéd PTE Petykó Zoltán MTA munkatárs PTE Dr. Szalay Csaba PhD hallgató PTE Takács Gábor egyetemi tanársegéd PTE Tóth Attila MTA munkatárs PTE Dr. Tóth Krisztián egyetemi tanársegéd PTE Célok és rövid áttekintés Az Élettani Intézet és az MTA-PTE Idegélettani Kutatócsoport munkássága régóta a homeosztázis fôbb mûködései központi szabályozásának sokrétû vizsgálatára összpontosul. A jelen kutatási program célja a technikaimódszertani fejlesztésekkel a vonatkozó elméleti ismeretek bôvítése, központilag ható molekulák agyi támadáspontjának azonosítása, lehetséges új gyógyszer-targetek feltárása. Elvégzett tevékenység, fontosabb eredmények Az alprogram megvalósításának második évében az elvégzett munka döntô részét a projekt infrastrukturális és technikai feltételeinek korábbi megteremtése nyomán azok további bôvítése, illetve a célirányos kísérletek elindítása képezte. Ezek révén komplex homeosztatikus élettani mûködési sajátosságok központi idegrendszeri szabályozásának, az abban érintett sejtszintû hatásoknak in vivo körülmények közötti feltárása, integratív szemléletû tanulmányozása vált lehetségessé. Külön kiemelendô a vizsgálatok emberre és rhesus majomra történt kiterjesztése. Laboratóriumi patkányokon magatartási-neurokémiai kísérletekben folytattuk a bombezin peptid-családhoz tartozó neuromedin C homeosztatikus szabályozásokban játszott szerepének vizsgálatát. Megállapítottuk, hogy a békabôrbôl izolált bombezin és az emlôs szervezetben kimutatható neuromedin C mandula-magba történt közvetlen agyi mikroinjekciója egyaránt csökkenti a táplálék felvételét. A bombezin hatása kifejezettebb. Összehasonlító vizsgálatok során kimutattuk, hogy az ugyanezen peptid családba tartozó gastrin releasing peptid és neuromedin B ugyancsak szatiációs hatású, de hatásaik intenzitása eltérô. A táplálékfelvétel részletes elemzésével kimutattuk, hogy a neuromedin C gátolja a táplálékfelvételt, csökkenti az evés hatékonyságát és növeli az egyes evések közötti intervallumok idejét. Mindezek alapján feltételezhetô, hogy a neuromedin C a központi idegrendszerben jóllakottsági szignálként szerepel. Kontroll kísérletekben azt is igazoltuk, hogy míg a bombezin testhômérséklet emelkedést okoz, a neuromedin C nem befolyásolja a testhômérsékletet. Az elsô évben megkezdett vizsgálatokat folytattuk a fájdalomérzés perifériás és központi szabályozásában feltételezetten szerepet játszó szomatosztatin 4 receptor (S-R4) mediálta mechanizmusokkal kapcsolatban. Tanulmányoztuk az S-R4 receptor agonista S-R és S-R vegyületek hatásait. Megállapítottuk, hogy ezen kémiai anyagok szisztémás (i.p.) injekciója nem befolyásolja patkányok motoros aktivitását, helypreferencia tesztben nincs pozitív megerôsítô hatásuk, nem váltanak ki szorongást, és nincs szorongásoldó hatásuk sem. Ezek a negatív 20

20 É VES J ELENTÉS 2007 eredmények fontosak lehetnek a fenti vegyületek esetleges gyógyszerként való alkalmazásakor a mellékhatások kizárása szempontjából. Ugyanakkor igazoltuk, hogy passzív elhárító szituációban (büntetéses tanulás) az S-R javítja a tanulást és a memóriát. Mind rágcsálóban, mind pedig rhesus majomban folytatott komplex mikroelektrofiziológiai kísérletekben a motivációs mûködésekben meghatározó jelentôségû limbikus elôagy egyik központi struktúrájában, a nukleusz akkumbenszben ún. glukóz-monitorozó idegsejteket azonosítottunk. Kimutattuk e neuronok sokrétû, endogen és exogén kémiai tulajdonságait, melyek révén valószínûsíthetôen fontos szerepet játszanak a táplálkozás és anyagcsere ill. egyéb homeosztatikus folyamatok központi szabályozásában. Ugyanebben az elôagyi struktúrában igazoltuk, hogy a gyulladásos-fájdalmi reakciókban is érintett primer citokin interleukin 1beta lokális mikroinjekciója a homeosztázis egyensúlyának megbomlását idézi elô. A táplálékfelvétellel kapcsolatos homeosztatikus szabályozások zavarai emberen elhízáshoz (obezitás) vagy kóros soványsághoz (anorexia), majd másodlagos megbetegedések kialakulásához (magas vérnyomás, érelmeszesedés, 2-es típusú cukorbetegség, depresszió stb) vezetnek, melyek vezetô halálokként szerepelnek Magyarországon is. Pszichológiai tesztek segítségével éves, elhízásban szenvedô fiúgyermekeken és kontrollokon vizsgáltuk a kognitív képességeket (intelligencia, figyelemi képességek, gondolkodásbeli stratégiaváltás képessége). Megállapítottuk, hogy az intelligencia szintben nincs különbség, de az elhízott gyermekek figyelmi képessége és gondolkodásbeli rugalmassága csökkent, perszeverációs tendenciájuk fokozódott a kontrollokhoz viszonyítva. Adataink felhívják arra a figyelmet, hogy az elhízásban szenvedô gyermekek kognitív képességeinek egyes mutatói elmaradnak a normális súlyú gyermekekétôl. Az érzelmek kifejezésének és mások érzelmei megértésének zavara, az alexitímia, gyakran fellelhetô az obezitásban és az anorexiában szenvedô betegeken. Az alexitímia vizsgálatára nem állt rendelkezésre magyar nyelvû tesztcsomag. Ezért a nemzetközi gyakorlatban használt Torontói Alexitímia Skála (TAS-20) magyar nyelvû változatát készítettük el, és közel 300, egészséges magyar egyetemista mintán különbözô statisztikai eljárásokkal igazoltuk a teszt megbízhatóságát, és nemzetközi adatokkal való összehasonlítás alapján faktorvaliditását is. Ezzel lehetôvé válik egy új, alexitímiát vizsgáló eljárás alkalmazása Magyarországon is obezitásban és anorexiában szenvedô betegeken. További lépések Kutatásaink folytatásától a táplálkozás és a metabolizmus, továbbá a gyulladásos-fájdalmi mûködések központi szabályozása élettani folyamatainak jobb megismerését várjuk, melynek révén elhízás elleni, esetleg fájdalomcsillapító gyógyszer-targetek feltárásához is közelebb kerülhetünk. 21

21 altéma: (Témafelelôs: Dr. Pintér Erika) A TT-232 nem-peptid követô molekulák kötôdési és hatástani vizsgálata Résztvevôk Dr. Pintér Erika egyetemi docens PTE Dr. Szolcsányi János akadémikus PTE Dr. Helyes Zsuzsanna egyetemi adjunktus PTE Dr. Bánvölgyi Ágnes tudományos munkatárs PTE Bagoly Teréz vegyész PTE Perkecz Anikó operátor PTE Dr. Szüts Tamás igazgató Biostatin Kft. Dr. Kéri György tud. tanácsadó Biostatin Kft. Dr. Ôrfi László vegyész Biostatin Kft. Hegedûs Zoltán tud. munkatárs Biostatin Kft. Célok és rövid áttekintés 2006-ban a több mint 80 vizsgált vegyületbôl 3 lehetséges jelöltet (Biostatin-1403, Biostatin-1404, Biostatin- 1408) választottunk ki preklinikai fejlesztésre, melyeket szabadalmaztattunk. Megkezdtük az újonnan szintetizált kispeptid TT-232 követô molekulák farmakológiai vizsgálatát esetleges szabadalmi beadvány céljából. A szomatosztatin sst4 receptorra fókuszálva, in vitro és in vivo rendszerekben folytattunk vizsgálatokat target validálás céljából. Elvégzett tevékenység, fontosabb eredmények A Biostatin Kft. három kiválasztott gyógyszerjelölt vegyülettel a következô vizsgálatokat végezte el: Fizikai-kémiai paraméterek részletes kimérése, oldhatósági vizsgálatok, gyógyszerformázás in vitro és in vivo vizsgálatokhoz nanotechnológia igénybevételével, stabilitásvizsgálatok, szintézis méretnövelés, új tisztítási eljárások kidolgozása, laboratóriumi elôirat készítése, toxikológiai vizsgálatok elindítása, akut toxikológia meghatározása. A vizsgálatok során már bizonyos problémák merültek fel a dózis-hatás linearitással, a beadhatósággal, oldhatósággal, analitikai meghatározással kapcsolatban. Bár a gyógyszerkutatás legújabb trendje szerint általában minél vízoldhatatlanabb egy vegyület, annál nagyobb az esély a hatásosságra, ezek a problémák a fejlesztést rendkívül megnehezítik és a költségeket, valamint a szükséges idôt megnövelik. Jelenleg folynak a vérszintmeghatározások patkányon, a szájon át történô beadás után három dózisban. A PTE laboratóriumaiban az alábbi munkákra került sor: Kötôdési vizsgálatok és receptor-aktivációs esszék kidolgozása sst4 receptort expresszáló, általunk elôállított és validált sejtvonalakon, valamint a kiválasztott vezetô molekulák tesztelése ezekben a rendszerekben. Az sst4 receptor, mint célmolekula vizsgálata sst4 receptor hiányos, knockout egerek felhasználásával. Megállapítottuk, hogy különbözô gyulladásos és fájdalom modellek, mint például az akut lábödéma és mechanikai túlérzékenység, a krónikus ízületi gyulladás és az allergiás kontakt bôrgyulladás szignifikánsan súlyosabb képet mutattak a sst4 receptor hiányos egerekben. Hasonlóképpen, az orrba fecskendezett bakteriális endotoxin által indukált tüdôgyulladás funkcionális és morfológiai jelei is kifejezettebbek voltak a knockout egerekben. A kiválasztott nem-peptid molekulákon kívül, stabil, orális adásra is alkalmas hét kispeptid in vitro és in vivo hatástani vizsgálatát is elvégeztük akut gyulladás modellekben, amelyek alapján szabadalmi beadványt nyújtottunk be. A kispeptidek hatása az elektomos téringerlés által kiváltott P anyag felszabadulásra, izolált patkány trachea mintákban (szabadalmi beadvány) További lépések Tekintve, hogy oldhatósági, stabilitási és kinetikai tulajdonságai miatt nem egyértelmû, melyik vegyület lesz gyógyszerfejlesztésre alkalmas, ezért szerkezet-hatás összefüggések alapján további vegyületek kerülnek farmakológiai vizsgálatra. A projekt harmadik évében célunk további in vivo kísérletek elvégzése különféle gyulladásés fájdalommodellekben a hatástani és kinetikai szempontból is legígéretesebbnek bizonyuló vegyületekkel a preklinikai dosszié benyújtása céljából. 22

22 É VES J ELENTÉS 2007 (Témafelelôs: Dr. Mózsik Gyula) 1.4. altéma: COX-1 gátló gyógyszerek gyomorkárosító hatásának kivédése, COX-1 gátló és capsaicin tartalmú készítmények kifejlesztése, valamint további ismert hatóanyagú termék klinikofarmakológiai ipari együttmûködésen alapuló termék fejlesztése Capsaicin tartalmú orális készítmény kifejlesztése cardiológiai és mozgásszervi betegek részére Lokális kezelésre alkalmas Itraconazole készítmények kifejlesztése Résztvevôk Dr. Mózsik Gyula egyetemi tanár PTE Dr. Past Tibor tudományos fômunkatárs PTE Dr. Dömötör András PhD hallgató PTE Dr. Perjési Pál egyetemi tanár PTE Pallos J. Péter igazgató PannonPharma Kft. Dr. Szabó Leventéné vegyésztechnikus PTE Kuzma Mónika tudományos munkatárs PTE Fodor Krisztina egyetemi tanársegéd PTE Vas Viktória human menedzser PTE Capsaicin tartalmú orális készítmény kifejlesztése cardiológiai és mozgásszervi betegek részére Célok és rövid áttekintés A 2007-es évben elvégzendô munka célja az volt, hogy közelebb jussunk a gyógyszerkombinációk végleges kifejlesztéséhez, azaz az emberben való alkalmazásuk hatóság általi engedélyeztetéséhez szükséges vizsgálatokkal valamint a termék fejlesztésével foglalkoztunk. Az acetilszalicilsav és a diclofenac gyomorkárosító hatását kivédô capsaicint tartalmazó kombinált gyógyszerkészítmények szabadalmaztatásához és forgalombahozásuk engedélyeztetéséhez további biztonságtechnikai-toxikológiai vizsgálatok elvégzése. Elvégzett tevékenység, fontosabb eredmények Expert s Opinion hetedik variációjának, végleges szakmai állásfoglalást elkészítettük. Az OGYI képviselôivel folytatott szakmai egyeztetés eredményeképpen elfogadásra került a capsaicin mint gyógyszeralapanyag, azzal a feltétellel, hogy állat-toxicológiai vizsgálatokat kell végeztetni. A LAB International Research Centre Hungary Ltd.-vel (amely a Kanadai Toxicologiai Vizsgáló Intézet része) egyeztetés történt az in vitro és in vivo állatkísérletes toxicológiai vizsgálatok megtervezésérôl és kivitelezésérôl. A LAB International Research Centre Hungary Ltd. 7 db protokolljának szakmai egyeztetését követôen az OGYI a toxicológiai vizsgálatokat az OGYI befogadja és lehetôséget lát a humán fázis I-II vizsgálatok elvégzésének engedélyezésére. Az in vitro toxicológiai vizsgálatok részben befejezôdtek, és az állatkísérletes dózis-keresô vizsgálatok elindultak, a Gyógyszerészi Kémiai Intézetben a capsaicinoidok meghatározása folyamatban van. Elkészült a klinikai fázis I-II vizsgálatához szükséges protokoll, valamint a klinikai minták stabilitási vizsgálati protokollja. Megtörtént a szabadalmi bejelentés. 23

23 A capsaicinoidokkal végzett toxicológiai állatkísérletes vizsgálatok elvégzése alapján az általunk felhasznált kapszaicinoidok (Asian Herbex, India) megfelelnek az USP 27 elôírásainak. Az elvégzett részletes toxicologiai vizsgálatok eredményei lehetôséget adnak arra, hogy az említett capszaicinoidokat human gyógyszeres terápiára (orális) gyógyszeralapanyag-képpen a engedélyeztetésre benyújthassuk. Az elôzôek birtokában eljutottunk a klinikai fázis I-II vizsgálatok protokolljainak elkészítéséhez. A capsaicinoidokat tartalmazó végleges tabletta magösszetételének és bevonó anyagának meghatározása a klinikai protokollok megírása elôtt; az összetétel pontos megadása, a bevonó anyag megjelölésével megtörtént. További lépések A klinikai minták stabilitási vizsgálatok elôkészítése és elvégzése az ipari partner bevonásával. CRO személy felkérése. A protokollok benyújtása és engedélyeztetése az OGYI és az ETT Klinikai Farmakológiai és Etikai Bizottságával. Humán fázis I-II. vizsgálatok elvégzése és értékelése. Összefoglaló jelentés írása. A szalicilát, a diclofenac és a naproxen mennyiségeinek meghatározása a biológiai mintákból (humán kinetika) Lokális kezelésre alkalmas készítmények kifejlesztése Célok és rövid áttekintés A szabadalomképes, lokális kezelésre alkalmas gombaellenes készítmények: ecsetelô és lakk kifejlesztése, forgalomba hozatala. Elvégzett tevékenység, fontosabb eredmények Rögzítésre kerültek a szabadalmi igény pontok és elkészült a szabadalmi leírás végleges formája. Kidolgoztunk három különbözô összetételû, gyártásra javasolható ecsetelô készítményt és három különbözô összetételû, lakk készítményt. A fenti eredmények alapján elkészítettük a szabadalmi alkalmazási példákat. A készítmények stabilitási vizsgálataihoz szükséges analitikai eljárás kidolgozását validálását befejeztük. Elkészítettük a stabilitási vizsgálati tervet. Összegyûjtöttük az itraconazole farmakokinetikájára vonatkozó irodalmat, és átadtuk az ipari partner számára (CTD dokumentáció megszerkesztéséhez). Az ipari partner által felajánlott csomagoló anyagokat és segédanyagokat (ecset, zárókupakos üvegek) megvizsgáltuk és a vizsgálatok alapján kiválasztottuk a végleges csomagoló anyagot. A száraz lakk készítményekbôl a hatóanyag kioldódásának vizsgálatára mikrobiológiai módszert dolgoztunk ki. Bizonyítottuk, hogy a száraz lakkból a hatóanyag kioldódik. Elkészítettük a készítmények klinikai kipróbálásához szükséges protokoll zéró változatát. További lépések Szabadalom benyújtása az OTH -hoz. Klinikai minták legyártása. Klinikai minták stabilitási vizsgálata, a végleges gyártmányok rögzítése a stabilitási vizsgálatok részeredményei alapján. A klinikai vizsgálatok engedélyeztetésének elindítása. A klinikai vizsgálatok szervezésének megkezdése. 24

24 1. 5. É VES J ELENTÉS 2007 (Témafelelôs: Dr. Perjési Pál) 1.5. altéma: Gyógyszer hatóanyagok gyógyszerkészítményekben és biológiai mintákban történô meghatározása Laborfejlesztés, dokumentációs rendszer kialakítása Uregyt tabletta hatóanyaga bomlásának vizsgálata. Bomlástermékek szintézise Kiválasztott hatóanyagok irodalomban ismert bomlási folyamatainak elemzése, Etakrinsav-, kapszaicin- és N-acetil-cisztein tartalmú készítmények stabilitásvizsgálata. Résztvevôk Dr. Perjési Pál egyetemi docens PTE Ódorné Fábián Erika vegyésztechnikus PTE Boros Borbála egyetemi tanársegéd PTE Dr. Mózsik Gyula egyetemi tanár PTE Fodor Krisztina egyetemi tanársegéd PTE Dr. Past Tibor tudományos fômunkatárs PTE Kuzma Mónika tudományos munkatárs PTE Dr. Szabó Leventéné vegyésztechnikus PTE Dancsné Német Nóra vegyésztechnikus PTE Vas Viktória human menedzser PTE Moravecz Zsuzsanna vegyésztechnikus PTE Pallos J. Péter igazgató PannonPharma Laborfejlesztés, dokumentációs rendszer kialakítása Célok és rövid áttekintés A Wil-Zone Tanácsadó Irodával kötött szerzôdés segítéségével a PTE ÁOK Gyógyszerészi Kémiai Intézetén belül egy, a Good Manufacturing Practice (GMP) elôírásoknak megfelelôen mûködô analitikai laboratóriumi környezet kialakítása. Elvégzett tevékenység A GPM bevezetéséért felelôs munkatársak látogatást tettek az Országos Gyógyszerészeti Intézetben, ahol bemutatták a vizsgálólaboratórium OGYI inspekciója érdekében tett eddigi laboratóriumi fejlesztéseket és a laboratórium dokumentációs rendszerét. A megbeszélés alapján a laboratórium OGYI inspekciója év végére, vagy elsô hónapjára tervezhetô. További lépések Az OGYI-ban folytatott megbeszélés alapján a laboratórium felkészítésének befejezése a tervezett OGYI inspekcióra Uregyt tabletta hatóanyaga bomlásának vizsgálata. Bomlástermékek szintézise. Célok és rövid áttekintés A PTE ÁOK Gyógyszerészi Kémiai Intézetben (GYKI) Uregyt tabletta bomlástermékeinek kimutatására alkalmas gradiens elúciós HPLC-UV/VIS módszer kidolgozása, mely a tabletta etakrinsav hatóanyag tartalmának mennyiségi meghatározására is alkalmazható. Az Uregyt tabletta bomlástermékeinek szintézise. Elvégzett tevékenység, fontosabb eredmények Mivel a korábban is alkalmazott VRK módszerrel kapott eredmények nincsenek összhangban a HPLC rendszerben kapott eredményekkel, a Pannonpharma Minôségbiztosítási Osztály munkatársaival történô kooperációs munka keretében összehasonlító vizsgálatok kezdôdtek a tabletta etakrinsav tartalmának meghatározására a Pannonpharma laboratóriumaiban, valamint a PTE ÁOK Gyógyszerészi Kémiai Intézetben alkalamazott VRK 25

25 (Ph. Eur), UV-VIS (Ph. Eur) és HPLC-UV/VIS (Ph. Eur. és PTE ÁOK GYKI) módszerek érzékenységének és szelektivitásának összehasonlító vizsgálata céljából. A évi vizsgálati eredmények, valamint irodalmi ismeretek alapján PTE-Pannonpharma közös technológiai javaslat született a tabletták gyártásának módosítására. A módosított technológia szerint készült Uregyt tabletták stabilitásvizsgálata, illetve a stabilitásvizsgálatok során kapott minták HPLC vizsgálata folyamatban van. Szintézisre került az etakrinsav epoxid (korábban ismert) bomlásterméke, és tisztítás alatt áll két, az etakrinsav dimerizációjával keletkezô termék. Ezek egyike bizonyosan új, a hatóanyag DMF-jében nem szereplô vegyület. Az Uregyt tabletta vizsgálatára kidolgozott módszer alkalmazásával egy eddig ismeretlen, a hatóanyag DMF-ben nem dokumentált szennyezô detektálása is megtörtént. Ezen ismeretlen szennyezô azonosítása LC-MS technika segítségével folyamatban van. A módosított technológiával készült Uregyt tabletták stabilitásvizsgálatai a 40 C-on tárolt minták esetén befejezôdtek (6 hónap), a 25 C-on tárolt minták esetében jelenleg a 12. hónapnál tartanak. A minták VRK módszerrel történô analízise alapján a szennyezések a 40 C-on tárolt minták esetében határértéket meghaladó mértékûek, a 25 C-on tárolt minták esetében, a határérték körül szóródó értéket mutatnak. További lépések Az ismeretlen etakrinsav szennyezõ azonosítása, majd szintetikus standard segítségével mennyiségi meghatározára alkalmas HPLC módszer kidolgozása. Az etakrinsav meghatározására alkalmazott analitikai módszerek összehasonlító vizsgálatának folytatása, illetve befejezése Kiválasztott hatóanyagok irodalomban ismert bomlási folyamatainak elemzése, takrinsav-, kapszaicin- és N-acetil-cisztein tartalmú készítmények stabilitásvizsgálata Célok és rövid áttekintés A kapszaicinoidok mérésére alkalmas módszer kidolgozása, etakrinsav-, kapszaicin- és N-acetil-cisztein tartalmú készítmények stabilitásvizsgálata. Elvégzett tevékenység A PTE ÁOK Gyógyszerészi Kémiai Intézetben kifejlesztésre került egy a kapszaicinoidok mérésére alkalmas HPLC- UV/VIS módszer, melynek kapszaicinre és dihidrokapszaicinre történô validálása USP standardok segítségével megtörtént. A UV/VIS módszer belsô standard alkalmazásával történt módosításával és szilárd fázisú extrakciós módszer kidolgozásával a kapszaicin és a dihidrokapszaicin plazmából történô meghatá-rozására alkalmas HPLC- FLD módszer került kifejlesztésre. A validált módszerrel a capszaicinoidok toxikonetikai mérései folyamatban vannak a Veszprémi Toxikológiai Kutatóintézettel együttmûködve. A klinikai vizsgálati minták elemzésére a Capsain USP minôségû, az ASIAN HERBEX-tôl beszerzett kapszaicin preparátum vizsgálatára a módszer alkalmas. Az N-acetil-cisztein tartalmú készítmény stabilitásvizsgálatára az Intézet nem kapott felkérést. Helyette egy az itrakonazol oldatban, illetve tervezett gyógyszerkészít-ményekben történô mennyiségi meghatározására alkalmas validált HPLC-UV/VIS módszer került kidolgozásra. A módszert sikerrel alkalmaztuk az itrakonazol tartalmú készítmény technológiai fejlesztésének eddigi stádiumában (oldékonyság meghatározás különbözô oldószerelegyekben, elôzetes stabilitásvizsgálatok végzése nem akkreditált (PTE) laboratóriumi környezetben). A Veszprémi Toxikológiai Kutatóintézet GLP akkreditációjának a PTE ÁOK GYKI-re történô kiterjesztése a közeljövôben várható. További lépések A toxokinetikai mérések elvégzése és erdményeinek kiértékelése. Az itrakonazol tartalmú ecsetelô és lakk készítményeknek a PannonPharma által végzendô stabilitásvizsgálata során keletkezô minták analízisének elvégzése. 26

26 1. 6. (Témafelelôs: Dr. Dévay Attila) 1.6. altéma: Az ibuprofen hatóanyagot tartalmazó készítmény gyártástechnológiai korszerûsítése Résztvevôk Dr. Dévay Attila szakgyógyszerész, PhD. habil., intézetvezetô PTE Dr. Mayer Klára szakgyógyszerész, PhD. PTE Dr. Nagy Sándor vegyészmérnök PTE Pál Szilárd gyógyszerész PTE Marosvölgyi-Haskó Diána analitikus PTE Dr. Blazics Gyula minôségbiztosítási igazgató PannonPharma Kft Illés Szabolcs üzemvezetô vegyészmérnök PannonPharma Kft Lahner Mariann szakgyógyszerész PannonPharma Kft Máté Márta termelési vezetô, vegyészmérnök PannonPharma Kft É VES J ELENTÉS 2007 Célok és rövid áttekintés Az alprogramban a PTE ÁOK Gyógyszertechnológiai és Biofarmáciai Intézete a PannonPharma Gyógyszergyártó Kft. közösen vesz részt. A kísérletsorozat célja gyártástechnológiai korszerûsítés, közvetlen célja, a környezetvédelmi szempontból nemkívánatos, az eredeti drazséösszetételben szereplô szerves oldószer használatának kiküszöbölése. A kutatást jelentôsen megnehezítô feladat, hogy a készítmény törzskönyvi összetétele, a gyógyszerforma fizikai minôségi paraméterei ne, vagy csak igen kis mértékben változzanak. A hatóanyag kioldódás profilja, kísérleti adatai, szoros korrelációban feleljenek meg az eredeti készítmény szerinti értékeknek, ezáltal ôrizze meg az eredeti készítmény biológiai felhasználhatóságát és egyéb biofarmáciai paramétereit. Az új technológia reprodukálhatóság biztosítása laboratóriumi és üzemi szinten, a pontos gyártási paraméterek megadása. Mini-Glatt 4 laboratóriumi fluidizációs granuláló készülék Hanson Microette Plus hatóanyag abszorpció in vitro vizsgálatára Elvégzett tevékenység Az eredeti technológia reprodukciója és az ennek alapján gyártott készítmény teljes vizsgálata. Technológiai változtatások és a minôségi paraméterek kölcsönhatását vizsgálva állapítottuk meg a változtatható és változtatandó gyártási paramétereket, különös tekintettel a kioldódási paraméterekre. Az eredeti célkitûzésünk szerint, egyrészt a környezetvédelmi szempontoknak megfelelô granuláló folyadékkal alkalmas készítmény állítható elô, valamint technológiai paraméterek módosításával a megfelelô hatóanyag-leadás elérhetô. Elônyösek e megoldások, mivel az eredeti törzskönyvi elôírásoknak megfelelô készítmény készülhet. A kísérleti eredmények alapján megtörtént a drazsémag üzemesítése, mely az összetétel alkalmasságát bizonyította. Fontosabb eredmények Az eredeti célkitûzésünk szerint, egyrészt a környezetvédelmi szempontoknak megfelelô granuláló folyadékkal alkalmas készítmény állítható elô, valamint technológiai paraméterek módosításával a megfelelô hatóanyag-leadás elérhetô. Elônyösek e megoldások, mivel az eredeti törzskönyvi elôírásoknak megfelelô készítmény készülhet. A kísérleti eredmények alapján megtörtént a drazsémag üzemesítése, mely az összetétel alkalmasságát bizonyította. További lépések További lépésként a évi feladat a próbagyártás, vagyis a sorozatban, nagy tételben levô gyártás megoldása, majd a készítménytulajdonos a PannonPharma Gyógyszergyártó Kft. törzskönyvi dokumentációjának beadása az Országos Gyógyszerészeti Intézethez. 27

27 altéma: (Témafelelôs: Dr. Botz Lajos) Gyógyszeralkalmazás, gyógyszer interakciók informatikai jellemzôi Résztvevôk Dr. Botz Lajos egyetemi docens PTE Dr. Somoskeöy Szabolcs web alkalmazásfejlesztô PTE Fittler András rezidens PTE Szücs Ferenc szakgyógyszerész PTE Dr. Fekete Sándor egyetemi docens PTE Dr. Osváth Péter egyetemi adjunktus PTE Nyaka Bernadett szakgyógyszerész PTE Dr. Molnár Béla szakgyógyszerész PTE Tóvölgyi Zsuzsa rezidens PTE Varga Krisztina ügyvivô szakértô PTE Célok és rövid áttekintés Gyógyszerészeti szakinformatikai fejlesztô munkánk célja, hogy a gyógyszerek együttadása, illetve szedése esetén a beteg számára kedvezôtlen hatású gyógyszerkölcsönhatásokat még a gyógyszerterápia indítását megelôzôen, egy teljeskörû adatbázison alapuló korszerû informatikai szoftver segítségével nagy biztonsággal kiszûrjük. Az alkalmazott gyógyszerhatóanyagok bioinformatikai hálózati kapcsolati mátrixán kialakítandó további új szoftvertermék kifejlesztését is tervezzük. Fejlesztési munkánk másik területe egy kritikus gyógyszer- és betegcsoportra irányul. Az egyre növekvô számú depressziós beteg költséghatékony gyógyszerelésére egy farmakogenetikai vizsgálaton alapuló, klinikai relevanciát is hordozó komplex metodikát fejlesztünk ki. Elvégzett tevékenység, fontosabb eredmények A második munkaszakaszban a gyógyszerhatóanyagok kölcsönhatása tekintetében fontos informatikai adatbázis fejlesztése során tipizáltuk a hatóanyagpárok közötti kapcsolatakat (5 kategóriát alakítottunk ki). Kijelöltük a gyógyszerkölcsönhatások erôsségének kategóriáit. Teljeskörû adatbázis-frissítést végeztünk el. Elkészült egy új fejlesztôi munkafelület ( data-master-file ). Tovább folyt az egyes hatóanyagpárok interakciós kapcsolati erôsségének paraméterezése. A második munkaszakaszban az engedélyezett klinikai vizsgálatba vont betegek számát 171-re emeltük. A minták genetikai meghatározása folyamatosan történik, jelenleg 118 beteg genetikai adataival rendelkezünk. A betegek fenotípus meghatározásához megtörtént az analitikai módszer kiválasztása. Az ehhez szükséges összes anyag és eszköz beszerzése, illetve a mintavételi valamint a vizsgálati protokoll elkészítése megtörtént. Bevezettünk egy depresszióra specifikus életminôség kérdôívet; valamint pszichometriai és más nem betegség-specifikus életminôség meghatározására alkalmas kérdôívet is a klinikai vizsgálatainkba. A labor további bôvítésének keretében új, a minták tárolására alkalmas hômérsékletregisztráló egységgel felszerelt, hûtô és mélyhûtô berendezések beszerzésre történt meg. A gyógyszerkölcsönhatások szûrésére alkalmas adatbázist a három kijelölt szakmai szempontnak megfelelôen feltöltöttük, a szûrési eredmény közlésére alkalmas új kategóriákat kialakítottuk. A gyógyszerhatóanyagok között kölcsönhatások kapcsolati erôsségének paraméterezését megkezdtük, az összes gyógyszerhatóanyagot átfogó kapcsolati mátrix kialakítása is folyamatban van. A klinikai vizsgálati tervnek megfelelôen sikerült 118 további beteget bevonni. Egy újabb allél mérésére (CYP 2D6*5) dolgoztunk ki metodikát. Jóllehet klinikai vizsgálatunk várható következtetései a harmadik munkaszakaszban állnak össze, a közbensô értékeléseink alapján valószínûsíthetô, hogy a kaukázusi populációval összehasonlítva az általunk vizsgált hazai betegpopulációban a gyógyszerelés szempontjából fokozottan veszélyeztetettek száma magas, így a kritérium feltételek szerinti rizikó csoport szûrése is indokoltnak látszik. További lépések A bioinformatikai programkörnyezet létrehozásának további lépéseként a hatóanyag-párok interakciós adatbázisában az interakciók további jellemzésének matematikai modellezéséhez beszerzésre került a Stata SE/10 statisztikai programcsomag. A programcsomaggal feldolgozandó adatok bevitelére és kapcsolati mátrix létrehozására a hatóanyagpár kapcsolati erôsségének elkészült adatbázisából kiindulva kerül sor a következô munkaszakaszban. 28

28 1. 8. (Témafelelôs: Pallos Péter József) 1.8. altéma: Aszeptikus technológiával gyártható készítmények kifejlesztése É VES J ELENTÉS 2007 Résztvevôk Pallos Péter József igazgató PannonPharma Dr. Blazics Gyula min. bizt. ig. PannonPharma Feiszt Péter biológus PannonPharma Kiss Katalin munkatárs PannonPharma Lahner Marianna fejl. vezetô PannonPharma Máté Márta term. irányító Pannonpharma Pénzes Ágota biológus PannonPharma Dr. Sárospataky Ilona orvosigazgató PannonPharma Seffer Dénes gyakornok PannonPharma Selyemné Kövér Tünde munkatárs PannonPharma Szalai Mária biomérnök PannonPharma Kürthy Mária biológus PannonPharma Dr. Pesti Miklós egyetemi tanár PTE Dr. Fekete Csaba egyetemi adjunktus PTE Dr. Juhász Ákos tud. segédmunkatárs PTE Gazdag Zoltán egyetemi tanársegéd PTE Papp Gábor egyetemi tanársegéd PTE Virág Eszter tud. segédmunkatárs PTE Dr. Perjési Pál egyetemi docens PTE Dr. Kovács Bálint egyetemi tanár PTE Dr. Mózsik Gyula egyetemi tanár PTE Dr. Past Tibor tud. fômunkatárs PTE Boros Borbála egyetemi tanársegéd PTE Kuzma Mónika tudományos munkatárs PTE Fodor Krisztina egyetemi tanársegéd PTE Dr. Szabó Leventéné vegyésztechnikus PTE Dancsné Német Nóra vegyésztechnikus PTE Vas Viktória humán menedzser PTE Moravecz Zsuzsanna vegyésztechnikus PTE Ódorné Fábián Erika vegyésztechnikus PTE Célok és rövid áttekintés Glaukóma kezelésére szolgáló etakrinsav tartalmú szemcsepp és primycin-szulfát antibiotikum tartalmú szemészeti készítmény fejlesztése. A primycin-szulfát tartalmú szemészeti készítmény törzskönyvezéséhez szükséges a primycin termelô mikroba pontos fajmeghatározása klasszikus és molekuláris biológiai módszerekkel; valamint a primycin hatásmechanizmusának vizsgálata, a korábbi szakirodalmi ismeretek kiegészítése korszerû módszerek alkalmazásával. Elvégzett tevékenység Etakrinsav Szakirodalmi és szabadalmi adatok áttekintése az etakrinsav hatóanyag szemészeti alkalmazása vonatkozásában. A tervezett etakrinsav tartalmú szemészeti készítmény stabilitásvizsgálata ph, T szempontjából, valamint a lehetséges maszkírozó szerek reaktivitásának vizsgálata folyamatban van. Az etakrinsav oldatbeli stabilitása phfüggô, az alkalmazható maszkírozó szerekkel különbözô mértékû reaktivitást mutat. Primycin-szulfát: Szakirodalmi és szabadalmi adatok áttekintése a primycin, a primycin-termelô törzs, a klinikumban elôforduló szemfertôzést okozó mikrobák és a konkurens készítmények szempontjából. Meghatároztuk a törzs növekedésének szempontjából optimális növekedési paramétereket (T, ph, tápközeg összetétel). A törzs növekedése szempontjából optimális a ph 8, 37 C. Többféle tápközegben is megfelelôen növekszik. Törzsstabilitási vizsgálatok: a primycin termelô mikroba nem homogén, különbözô színû szektorok folyamatosan, nagy gyakorisággal képzôdnek (világos, sötét, sárgás/zöldes és átmeneti formák) Elvégeztük a törzs antibiotikum érzékenység vizsgálatát. Molekuláris biológiai fajazonosítás: elkezdtük a primycin termelô törzs, és a kontrol törzsek ITS szekvencia analízisét. 29

29 Elkészítettük a törzs biztonsági és ipari felhasználásra is alkalmas letétjét, a mintát -80 C-on tároljuk. Vizsgáltuk a primycin antimikrobiális hatását: meghatároztuk számos élesztô- és fonalasgomba, valamint baktérium minimális gátló koncentrációját (a kísérletek folyamatban vannak). Vizsgáltuk a primycin plazmamembránra gyakorolt hatását Candida protoplasztok segítségével, valamint DNSre gyakorolt hatását mutagenitási tesztekkel (AMES és DEL tesztek). Laborméretû formulációs kísérleteket végeztünk primycin-szulfát hatóanyag tartalmú, szemészetileg alkalmazható készítmény létrehozására. További lépések Primycin termelô mikroorganizmus fajazonosításának és a primycin hatásmechanizmus vizsgálatának folytatása: Klasszikus fajazonosítás további lépéseinek elvégzése (pl. cukor asszimilációs vizsgálatok), további molekuláris biológiai vizsgálatok. Az eltérô telepmorfológiával rendelkezô típusok primycin termelôképesség vizsgálata. További mikroorganizmusok minimális gátló koncentráció vizsgálata. A hatásmechanizmus pontosítása érdekében vizsgálni kívánjuk a primycin sejtfalszintézisre és DNS szintézisre gyakorolt hatását. Primycin-szulfát tartamú, szemészetileg alkalmazható készítmény fejlesztési vizsgálatok folytatása. A leghatékonyabb, etakrinsav tartalmú szem-belnyomást csökkentô kombinációs készítmény kiválasztása állatkísérletes vizsgálatok segítségével. Megfelelô összetételû készítmények kialakítása esetén a szükséges preklinikai, majd klinikai vizsgálatok elvégzése, a gyártástechnológia méretnövelése, a dokumentáció összeállítása hatósághoz történô benyújtásra altéma: (Témavezetô: Dr. Tóth Kálmán) Klinikofarmakológiai vizsgálatok Résztvevôk: Dr. Tóth Kálmán egyetemi tanár PTE A PTE OEKK KK I. sz. Belgyógyászati Klinika több mint 20 éve kijelölt klinikai fázis I-II. vizsgálóhely. Emellett felkészült farmakokinetikai, izotópkinetikai és bioekvivalencia vizsgálatokra is. Ezen idôszakban a klinikán hozzávetôlegesen mintegy különbözô hatóanyagot (a készítmények száma természetesen ennél jóval több) vizsgáltunk. A részleget májusában az OGYI a 24/2002.(V.9.) Eü. M. rendelet alapján I. és II. fázisú klinikai vizsgálatok végzésére alkalmas vizsgálóhelynek minôsítette, amelyet én három évre meghosszabbított. A korábbi beszámolási idôszak eredményeinek összefoglalása: A vizsgálóhely fejlesztésével lehetôség nyílik a projektben folyó gyógyszerkutatások hatóanyagainak klinikai fázis vizsgálatainak európai színvonalú, mai minôségi követelményeknek mindenben megfelelô lebonyolítására. A mûszerpark korszerûsítésével az esetleges váratlan mellékhatások, életet veszélyeztetô szövôdmények biztonságosabb megelôzését, illetve kezelését, a vizsgálatok során alkalmazott gyógyszerek pontosabb adagolását, valamint az eddiginél megbízhatóbb adattárolást értük el. 30

30 2.1. Résztvevôk Dr. Kovács L. Gábor akadémikus, egyetemi tanár PTE Dr. Kôszegi Tamás egyetemi docens PTE Orosz Ibolya vegyésztechnikus PTE Györgyi Erzsébet tudományos segédmunkatárs PTE Sántha Gergô PhD hallgató Diagnosticum Zrt (Témafelelôs: Dr. Kovács L. Gábor) É VES J ELENTÉS altéma: Ultraszenzitív laboratóriumi technikák kifejlesztése bioaktív anyagok kimutatása céljából Célok és rövid áttekintés SPR (Surface Plasmon Resonance) módszert alkalmazó új célkészülék prototípusának elkészítése a Diagnosticum ZRt. konzorciumi tag részvételével, és a készülék elhelyezése a pályázat során a PTE OEKK KK Laboratóriumi Medicina Intézetében létrehozott PTE-Diagnosticum Kutató és Fejlesztô Laboratóriumban. Az SPR berendezéssel tumor nekrózis faktor-alfa (TNF-alfa) és interleukin 6 (IL-6) mérések beállítása vizes rendszerekben. A rendszer érzékenységének és stabilitásának növelése új szenzor tervezésével. A PTE OEKK KK Laboratóriumi Medicina Intézetben betegmintákon interleukin 1, enterleukin 6, interleukin 8, TNF-alfa és prokalcitonin mérések az intézet standard, automatizált gépparkjának felhasználásával. Elvégzett tevékenység, fontosabb eredmények Az új SPR mérô szenzort a Diagnosticum ZRt. részérôl Sántha Gergô sikeresen megtervezte és kialakította. Az új mérôcella tesztelése folyamatban van, mind az érzékenység, mind a stabilitás vonatkozásában, illetve folyamatosan újabb citokinek mérési paramétereit alakítjuk ki. Az új szenzor bevezetése jelentôs többletfeladatot követelt, ezért betegek mintáit az SPR módszerrel még nem tudtuk mérni. A humán szérum mintákban jelenlévô magas fehérje koncentráció az SPR méréseknél zavaró tényezô lehet, ezért igen fontos a módszer tesztelése és standardizálása az új mérôcellával. A Laboratóriumi Medicina Intézet (LMI) mûszerparkja a citokin-interleukin méréseket a rutin laboratóriumi diagnosztikában használt és nemzetközileg elfogadott eljárásokkal végzi immunkemilumineszcens és immunfluoreszcens technikákkal. A mérések az SPR berendezéssel kapott adatok összehasonlító értékeléséhez és az új módszer analitikai teljesítôképességének megítéléséhez nélkülözhetetlenek. Az LMI a következô citokininterleukin méréseket végezte el a beszámolási idôszakban: TNF-alfa, interleukin 1, interleukin 6, interleukin 8 és prokalcitonin (PCT). A sejtes modellekben történô méréseknél a sejtek életképességének megítélésére új módszert dolgoztunk ki nemzetközi együttmûködéssel (Zágrábi Egyetem, Horvátország), az eredményeket a Luminescence lektorált folyóiratban közöltük. Humán szérum mintákon nagy számban végeztünk PCT, IL-1, IL-6, IL-8 és TNF-alfa méréseket. A mintákat elsôsorban a PTE Aneszteziológiai és Intenzív Terápiás Intézet (AITI) küldte laboratóriumunkba, részben klinikai kutatási anyagként. A beszámolási idôszakban 2 sikeres PhD védés történt, a PhD hallgatók témavezetôje Dr. Kôszegi Tamás volt (A- 146 alprogram): Dr. Nagy Sándor PTE Gyógyszertechnológiai Intézet és Dr. Márton Sándor PTE AITI. Mindkét PhD munka szervesen kapcsolódott a 2.1. alpontban foglaltakhoz is. További lépések A újonnan bevezetett módszerek érzékenységének tovább növelése, további citokinek mérésének kidolgozása. További változatos beteganyagon végzett mérések. 31

31 altéma: (Témafelelôs: Dr. Miseta Attila) Gyógyszeres kezelésekre kialakuló rezisztencia megítélése a P-glicoproteinen (MDR1) és a citokróm P-450-en alapuló gén-polimorfizmusok azonosításával Résztvevôk Dr. Miseta Attila egyetemi tanár PTE Dr. Kovács L. Gábor akadémikus, egyetemi tanár PTE Dr. Magyarlaki Tamás egyetemi docens PTE Dr. Tôkés-Füzes Margit szakorvos PTE Rideg Orsolya PhD hallgató PTE Pappné Bácskai Sarolta szakasszisztens PTE Lamár Ibolya laboratóriumi analitikus PTE Lukács Melinda laboratóriumi analitikus PTE Célok és rövid áttekintés A projekt alapja az a felismerés, hogy a gyógyszeres terápia hatékonyságát jelentôsen csökkenti, ill. megakadályozza a többszörös gyógyszer-rezisztencia kialakulása, amelynek fô oka két membránfehérje, az MDR1 (P-glicoprotein) és az MRP1 felszaporodása ill. megnövekedett funkciója. Ezek a fehérjék aktív transzporttal eltávolítják a sejtekbôl a gyógyszerekként bevitt citosztatikus anyagokat, megakadályozva azok hatását. Az is ismert, hogy a sejtbe bejutott gyógyszerek metabolizmusa is eltérô lehet. Ennek egyik fontos eleme a citokróm P-450 rendszere mûködése. Ebben az esetben a mért polimorfizmusok a gyógyszerek metabolizmusának a sebességében okoznak eltérést (lassú, gyors és szupergyors metabolizálók). Célkitûzésünk a genetikai prediszpozíció vizsgálata ill. a kezelés során szerzett gyógyszer-rezisztencia mérése, az utóbbi esetben a lehetséges elôrejelzés is. A projekt elôsegíti az egyénre szabott gyógyszeres terápia kialakítását ill. csökkenti a gyógyszeres kezelés költségét. Elvégzett tevékenység, fontosabb eredmények A projekt keretében, az ütemtervnek megfelelôen megkezdôdtek a ROCHE LightCycler készüléken végzett valós idejû kvantitatív MDR1 mrns mérések. Ugyancsak elindultak az MDR1 genotípussal kapcsolatos mérések. Elvégeztük egy új a közelmúltban leírt polimorfizmus azonosítására az olvadáspont analízissel kapcsolt PCR reakciót tervezését beüzemelését (21-es exon G2677T/A). Az irodalmi adatok szerint ez szinergetikusan hat a korábban beállított és vizsgált 26-os exon C3435T polimorfizmussal. Párhuzamosan a gén-expresszió és genetikai polimorfizmus mérésekkel a P-glicoprotein sejtfelszíni mennyiségét is mérjük áramlásos citometriával. A projektelemben a ROCHE (Magyarország) Kft egy Ampliprep (DNS, RNS izoláló) egy TAQMAN (DNS sokszorozó technika, amely a templáthoz asszociált oligonukleotid próbába épített sugárzó fluoreszcens próba és az azt semlegesítô (quencher) próba közötti jelenség alapján detektál) helyezett el. A program keretében sor került a készülékek mûszaki beüzemelésére, elkezdôdött a személyzet kiképzése, megtörtént a próbaüzem. Elkezdtük a mintagyûjtést a hosszú idôtartamon keresztül kezelt pszichiátriai betegek gyógyszer-rezisztencia paramétereinek a vizsgálatára. Több, mint száz mieloid leukémiás beteg esetében közöttük egy Glivec-vel kezelt csoport végeztünk méréseket az MDR1 polimorfizmusok ill. gén-expresszió tekinteteiben. Ugyancsak mértük a P-glicoprotein expressziót. Eredményeink segítették e megfelelô gyógyszeres protokoll beállítását. Azt találtuk, hogy az MDR1 expresszió megemelkedése úgyszólván elôrejelzi a gyógyszeres terápia hatástalanná válását. További lépések A vizsgálatba bevontak körének a bôvítése. Az Amplichip készüléken végzet CYP-450 mérések kiterjesztése. 32

32 2.3. É VES J ELENTÉS 2007 (Témafelelôs: Dr. Kilár Ferenc) 2.3. altéma: Szteroidok elemzése GC-MS eljárással; elektroforézis chip-technológia kidolgozása Résztvevôk Dr. Kilár Ferenc egyetemi tanár PTE Dr. Kocsis Béla egyetemi docens PTE Dr. Poór Viktória PhD hallgató PTE Bufa Anita PhD hallgató PTE Kilár Anikó PhD hallgató PTE Bognár Eszter adminisztrátor PTE Szabó Dávid TDK hallgató PTE Buzási Péter TDK hallgató PTE Célok és rövid áttekintés Akkreditált laboratóriumi diagnosztikai háttér kialakítása PhD képzés továbbfejlesztése (a Kémiai Doktori Iskola keretében) a RET szakmai fókuszába esô doktori iskolák képzéseiben alkalmazás-orientált, kutatás-módszertani kurzusok indítása Új, innovatív laboratóriumi módszerek kifejlesztése Infrastrukturális fejlesztések (laboratórium kialakítása Csertex Kereskedelmi és Tanácsadó Kft.) Summer school tanfolyamok indítása Elvégzett tevékenység, fontosabb eredmények A GC-MS mérések szteroid profil meghatározására Szteroidok profilok endokrin és idegrendszeri kórképekben címû PhD értekezés Poór Viktória, június 20. Szteroid profilok különbözô nôgyógyászati megbetegedésekben (petefészekrák, leiomyoma, adenoarcinoma, meddôség) Bufa Anita, Bíró Ildikó PhD hallgatók részvételével a PTE ÁOK Szülészeti és Nôgyógyászati Klinikával való együttmûködés Diagnosztikai eljárás MS detektálással Szteroid mérések sejtkultúrákból (Uppsalai Egyetem, Francoise Raffali-Mathieu közremûködésével) Endotoxinok analízise fehérje-kölcsönhatások alapján GC-MS szteroid profil Endotoxinok detektálása SDSmicrochip elektroforézissel 33

33 2.4. altéma: Diagnosztikai laboratóriumok akkreditálása 2.4. Résztvevôk PTE Laboratóriumi Medicina Intézet PTE Immunológiai és Biotechnológiai Intézet Célok és rövid áttekintés A PTE OEKK KK Laboratóriumi Medicina Intézet, valamint a PTE Immunológiai és Biotechnológiai Intézet Minôségirányítási rendszerének (=MIR) kiépítése az MSZ EN ISO / IEC 17025:2005 (általános laboratóriumi), és az MSZ EN ISO / IEC 15189:2003 (orvosi laboratóriumok speciális) szabványok szerint, a Nemzeti Akkreditáló Testület általi akkreditálásra való felkészítésük, az akkreditálási dokumentumok elkészítése, jelentkezés a minôsítésre, sikeres minôsítés. Sikeres minôsítés birtokában az átlátható, szabályozott, meghatározott, nevesített felelôsségi szintekkel mûködô, követhetô, ellenôrizhetô számon kérhetô, és nem utolsó sorban összehasonlítható MIR eszköz és lehetôség arra, hogy a két minôsített labor összehasonlíthatatlanul jobb helyzetbôl startoljon a labordiagnosztikát érintô egészségügyi piacon, a szakmai stabilitás és megbízhatóság bizonyítható fokozásával. Az összehasonlíthatóság és ezen keresztül a jobban pozicionált versenyképesség nem csak hazai környezetben érvényesül, tekintettel arra, hogy az európai, laborfolyamatokra kidolgozott szabványok betartásával építették fel a laboratóriumok MIR-üket. Elvégzett tevékenység, fontosabb eredmények ig elkészült mindkét laboratórium teljes minôségirányítási dokumentuma, elvben készen az akkreditálási kérelem beadására. Erre mégsem került sor, egymást követô, az akkreditálási szabályozásban elôírt kritériumokat is érintô, és ezért halasztó hatályú változások miatt, mindkét labor esetében. Ilyenek voltak mindkét laborban (LMI-ben alapvetô, a teljes központi telephelyre kiterjedô, az IBI-ben kisebb) kivitelezett épületszerkezeti átalakítások augusztusában megváltozott az egyetemi struktúra, elnevezés, a teljes dokumentációt át kellett vizsgálni/szerkeszteni év végétôl július végéig egy, a MIR-t ugyancsak alapjaiban érintô változás folyt, az új informatikai rendszer bevezetése az egyetem egészségügyi intézményeiben, így az LMI-ben és az IBI-ben is. Ez utóbbi változás ismét a teljes dokumentáció átvizsgálását, átdolgozását tette szükségessé. A minôségirányítási rendszer kialakítása során brain storming sorozatot tartottunk, tervezett oktatási programokon vettek részt a munkatársak, melyekrôl jegyzôkönyv, oktatási napló készült. Mindkét intézet gondoskodott arról, hogy 2005-ben 1-1 fô elvégezze a Nemzeti Szakképzési Intézet által jegyzett tanfolyamon a minôségirányítási belsô auditori tanfolyamot, melybôl hivatalos képesítést szereztek az intézetek minôségirányítási felelôsei. A rendszer jól mûködik, a dolgozók egyre inkább elfogadják. Az elkészült dokumentumok terjedelme oldal minôségirányítási kézikönyv 18, illetve 20 melléklettel, 8-8 minôségirányítási eljárás, összesen kb munkautasítás, és kb. 150 bizonylati formula. A dokumentumok átlagosan 10 oldalasak. A teljes dokumentáció átvizsgálása, harmonizálása belsô auditban évente. Az akkreditálási dokumentumok beadása a NAT-hoz október 2-án megtörtént. További lépések Az akkreditált státus elnyerése mindkét laboratóriumban. A rendszer folyamatos mûködtetése és fejlesztése évi vezetôi felülvizsgálat és beszámolás az egyetem vezetése felé. A rendszer használatának elônyeit valamennyi dolgozóval elfogadtatni, a partnerek intenzívebb bevonása a minôségcentrikus gondolkodásba. 34